肠球菌检测
食品中肠球菌检验标准
食品中肠球菌检验标准本标准规定了食品中肠球菌的检验方法及判定,适用于食品中肠球菌的检测。
1.规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 4789.15 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验1.术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
肠球菌 enterococcus一组兼性厌氧的革兰氏阳性球菌,过氧化氢酶阴性,在含高浓度葡萄糖的肠道病原体选择性培养基上生长,在血琼脂平板上形成α溶血或β溶血的菌落。
1.肠球菌检验方法及判定4.1 样品处理将样品按照每份50g(或ml)进行无菌采样,放入含有适量无菌生理盐水的均质袋中,用拍击式均质器拍打2min~3min,制成1:10的样品匀液。
4.2 增菌培养将样品匀液按照1:10的比例接种到胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养基中,于37℃培养18h~24h。
4.3 分离培养将增菌后的培养物转种到绵羊血平板上,于37℃培养24h。
在血平板上长出的可疑菌落进行革兰氏染色、触酶试验和过氧化氢酶试验。
4.4 肠球菌鉴定及药敏试验对革兰氏阳性、触酶试验阴性、过氧化氢酶试验阴性的球菌进行生化试验和药敏试验,以确定是否为肠球菌属。
药敏试验参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准进行。
1.采样方案5.1 采样数量按照食品的类型、品种和生产日期等进行采样,每个样品采集数量不得少于5个。
5.2 采样方法采样时需遵循无菌操作原则,使用经过灭菌的采样工具和容器进行采样。
样品采集后应立即送往实验室进行检测。
1.检验程序6.1 检验前准备在进行肠球菌检验前,应做好实验室的清洁和消毒工作,确保实验室无菌环境符合要求。
同时准备好所需的仪器设备、培养基、试剂等材料。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌是一类常见的细菌,它们存在于人体的消化系统中,尤其在肠道中大量繁殖。
虽然肠球菌在人类消化系统中扮演着非常重要的角色,但它们在临床检验中却并不被人们广泛地了解。
本文将详细介绍关于肠球菌的一些基本知识,以及它们在临床检验中的重要作用。
肠球菌简介肠球菌是一类革兰氏阳性菌,主要属于屎肠球菌属,包括了屎肠球菌科的细菌。
这些细菌除了存在于人类的肠道中之外,在土壤、水体、动物等环境中也有一定分布。
在人体内,肠球菌主要存在于大肠中,它们在人类的健康保持和免疫系统中发挥着非常重要的作用。
肠球菌的作用在人体的消化系统中,肠球菌在多个方面发挥着重要的作用。
肠球菌能够帮助人体消化食物并吸收营养物质,它们分解食物中的一些难以消化的物质,使得人体能够更好地吸收其中的养分。
肠球菌还能够抑制一些有害菌的繁殖,保持肠道内微生物群落的平衡。
肠球菌还能够促进免疫系统的发育,对抗外部病原微生物的侵袭。
肠球菌在临床检验中的意义肠球菌在临床检验中扮演着重要的角色,特别是在一些消化系统疾病的诊断和治疗中。
通过检测肠球菌的种类和数量,可以帮助医生了解患者消化系统内微生物群落的状态。
这对于一些慢性胃肠道疾病的鉴别诊断和治疗方案的选择非常重要。
肠球菌在一些感染性疾病中也有重要作用,比如肠球菌感染可以导致腹泻、腹痛等症状,通过检测肠球菌的情况可以帮助医生进行感染性疾病的诊断。
肠球菌的临床检验方法目前,常用于检测肠球菌的方法包括培养法、PCR法、生化鉴定法等。
培养法是最为传统的肠球菌检测方法,通过将患者的粪便标本等放入适当的培养基中,利用肠球菌的生长特性进行培养和鉴定。
PCR法是一种分子生物学技术,可以通过扩增和检测肠球菌的特定基因序列,快速准确地进行肠球菌的检测。
生化鉴定法则是通过检测肠球菌在代谢过程中产生的一些特定代谢产物来对其进行鉴定。
这些方法各有优劣,医生会根据具体情况选择适合的检测方法。
肠球菌的临床意义在临床检验中,肠球菌的检测不仅仅局限于对其数量和种类的了解,更重要的是分析其与宿主健康状况之间的关系。
肠球菌原本是人体肠道中的正常寄居菌
肠球菌原本是人体肠道中的正常寄居菌,但近年来,随着免疫抑制剂及抗菌药物的广泛使用,肠球菌已成为重要的条件致病菌,可引起人体多种组织脏器的严重感染,感染发生率正在逐年上升。
更值得关注的是,从临床标本分离的肠球菌属细菌中,有许多为多重耐药菌株,特别是氨基糖苷类高水平耐药肠球菌以及耐万古霉素肠球菌的出现,给临床治疗带来了很大的困难。
了解和认识肠球菌检测结果的临床意义、肠球菌感染治疗的抗生素选择与临床应用,对提高临床肠球菌感染治疗效果将非常重要。
解读肠球菌检测结果的临床意义肠球菌可分离于痰、尿、胆汁、血液等多种标本中,主要有粪肠球菌和屎肠球菌两种。
根据美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)颁布的《抗菌药物敏感性试验执行标准》(2009年1月,第19版)规定,药敏试验的结果按敏感、中介、耐药和不敏感分类报告。
对于肠球菌属,药敏试验报告的药物通常分A、B、C和U组。
A组为首选并常规报告的药物,包括氨苄西林和青霉素。
B组为首选但有选择性报告的药物,包括达托霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀及万古霉素。
此类药物通常用于对A组过敏、耐受或无效的病例。
C组为替代性或补充性报告的药物,包括庆大霉素和链霉素,除非对庆大霉素和链霉素高水平耐药。
U组为仅用于泌尿道感染的替代药物,包括环丙沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、呋喃妥因和四环素。
通常情况下,对青霉素敏感非产β内酰胺酶的肠球菌,可预报其对氨苄西林、阿莫西林、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感。
但对氨苄西林敏感肠球菌不能推定其对青霉素敏感,如需要青霉素药敏结果,则必须对青霉素进行试验。
对四环素敏感菌株也被认为对多西环素和米诺环素敏感,但对四环素中介或耐药的某些株可以对多西环素、米诺环素敏感。
磷霉素仅用于尿道分离粪肠球菌,红霉素、氯霉素不是泌尿道分离株常规报告药物。
因产β内酰胺酶导致的对氨苄西林或青霉素耐药的肠球菌,用常规纸片法或稀释法无法可靠地检测出来,所以对血和脑脊液分离株推荐用头孢硝噻酚β内酰胺酶试验。
肠球菌属的检验实训报告
一、实训目的1. 熟悉肠球菌属的生物学特性。
2. 掌握肠球菌属的分离、鉴定和药敏试验方法。
3. 培养微生物检验的基本技能和实验操作规范。
二、实训时间2023年4月15日三、实训地点微生物实验室四、实训材料1. 标本:尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等。
2. 培养基:营养肉汤、血琼脂平板、叠氮胆汁七叶苷琼脂、麦康凯琼脂等。
3. 鉴定试剂:革兰染色液、触酶试剂、胆汁七叶苷试剂、6.5%NaCl耐受试验试剂等。
4. 药敏纸片:青霉素、氨苄西林、万古霉素、庆大霉素等。
5. 仪器设备:显微镜、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器等。
五、实训方法1. 标本采集与处理采集尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等标本,按照无菌操作原则进行采集。
将标本接种于营养肉汤中,37℃恒温培养24小时。
2. 初步分离取培养后的肉汤,采用涂片、染色、镜检等方法进行初步分离。
观察菌落形态,选择可疑菌落进行进一步鉴定。
3. 鉴定(1)挑取可疑菌落,进行革兰染色、镜检,观察菌落形态。
肠球菌属为革兰阳性球菌,呈短链排列,卵圆形。
(2)进行触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl耐受试验。
肠球菌属对触酶、胆汁七叶苷和6.5%NaCl具有耐受性。
(3)将可疑菌落接种于血琼脂平板,37℃恒温培养24小时。
观察菌落形态,判断溶血情况。
肠球菌属在血平板上为溶血或不溶血。
(4)对具有临床意义的肠球菌进行生化试验,如糖发酵试验、吲哚试验等,以鉴定到种。
4. 药敏试验将鉴定后的肠球菌接种于麦康凯琼脂平板,贴上青霉素、氨苄西林、万古霉素、庆大霉素等药敏纸片,37℃恒温培养24小时。
观察抑菌圈大小,判断菌种对药物的敏感性。
六、实训结果1. 标本采集与处理:成功采集到尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等标本,并进行了接种培养。
2. 初步分离:从培养后的肉汤中分离出可疑菌落,进行革兰染色、镜检,形态符合肠球菌属。
3. 鉴定:经触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl耐受试验,确定为肠球菌属。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌是一种常见的细菌,属于肠道菌群的一种。
它们是消化道中的一类益生菌,可以帮助我们吸收养分、防止有害细菌的感染,保护我们的肠道健康。
你可能并不知道,肠球菌在临床检验中也扮演着非常重要的角色。
本文将为大家介绍一下关于肠球菌的一些基础知识以及在临床检验中的应用。
肠球菌是一类革兰氏阳性细菌,通常生活在我们的肠道中。
它们对人体健康有着重要作用,包括促进食物消化吸收、合成维生素和抗生素以及抵抗有害细菌。
当肠道菌群失衡时,肠球菌也可能引发一些健康问题,比如导致腹泻和其他肠道疾病。
在临床检验中,肠球菌的检测主要有以下几个方面的应用:1. 感染性腹泻检测肠球菌是引起腹泻的常见致病菌之一。
在临床上,医生会通过病情分析和实验室检测来确定患者是否是因为肠球菌感染引起的腹泻。
通过检测病原菌的培养和鉴定,可以判断出患者体内肠球菌的情况,从而选择合适的治疗方案。
2. 肠球菌抗生素敏感性测试当患者确诊为肠球菌感染后,医生通常会进行抗生素敏感性测试,以确定对哪种抗生素具有敏感性。
这样可以更准确地选择抗生素治疗方案,避免对病菌产生抗药性,提高治疗效果。
3. 肠球菌相关疾病诊断肠球菌与一些疾病,如小肠细菌过度生长综合征(SIBO)、急性胃肠炎等,有一定的关联。
在临床检验中,医生可以通过对肠球菌的检测来辅助这些疾病的诊断。
4. 肠球菌健康评估肠球菌不仅可以引发疾病,还可以反映肠道菌群的健康状况。
临床检验科也可以通过检测肠道菌群的组成和数量来评估肠球菌的健康状况,从而为肠道健康提供科学依据。
肠球菌在临床检验中的应用涉及感染性疾病的诊断、抗生素治疗、疾病诊断和健康评估等多个方面,对于维护我们的肠道健康和全身健康有着重要的意义。
那么,如何进行肠球菌的临床检验呢?主要包括以下几种方法:1. 培养法培养法是目前最常用的临床检验方法之一。
通过将患者的样本在适宜的培养基上进行培养,利用细菌的生长特性和培养基的选择性作用来筛选和鉴定肠球菌。
肠球菌的鉴定流程
肠球菌的鉴定流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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标准文本-食品安全标准
DBS22DBS22/018-2012──────────────────────────────食品安全地方标准食品中肠球菌的检测方法2012年发布 2012年实施───────────────────────────────吉林省卫生厅发布前言本标准根据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写规则》的要求编写。
本标准分为两种检测方法:第1法:肠球菌检验—常规培养方法第2法:肠球菌检验—固定酶底物法测定食品中肠球菌的方法。
《食品卫生微生物学检验肠球菌的检验》因现无国家标准,FDA、AOAC、USD也无标准方法。
因此参照了SN/T1933.1-2007《食品和水中肠球菌检验方法第一部分:平板计数法和最近似值测定法》和国内杂志公开报道的肠球菌检验方法的文献。
该标准应用了Vitek GNI+全自动微生物免疫分析仪)或API 20strep 试剂条1(法国生物梅里埃公司)。
增加了固定酶底物法测定食品中肠球菌的方法。
本标准的附录A、附录B是规范性附录。
本标准负责起草单位:吉林省疾病预防控制中心、长春市疾病预防控制中心。
本标准负责起草人:刘桂华、龚云伟、赵微、李月婷。
食品安全地方标准食品中肠球菌的检测方法1 范围本标准规定了食品中肠球菌(Enterococcus)的检验方法。
本标准适用于各类食品及食源性肠球菌病的检验。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 4789.1 食品卫生微生物学检验总则GB/T 4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3 设备和材料除微生物实验室常规灭菌与培养设备外,其他设备与材料如下:3.1 冰箱:0℃~4 ℃。
食品中肠球菌的检测原理
食品中肠球菌的检测原理
食品中肠球菌的检测原理主要有两种方法:
1.培养方法:将食品样品加入含有肠球菌特异性培养基的培养皿中,经过一段时间的孵育后,观察培养皿中是否出现典型的肠球菌菌落。
该方法主要基于肠球菌对特定培养基的生长反应,具有选择性和差异性。
2.分子生物学方法:该方法主要是基于肠球菌的DNA分子,通过PCR技术进行检测。
首先从食品样品中提取肠球菌的DNA,然后使用特异性引物扩增肠球菌的16S rRNA基因或其他特定基因片段。
最后通过电泳分离扩增产物并检测扩增产物的大小,从而确定食品中是否存在肠球菌。
这两种方法在实际应用中往往结合使用,培养方法可以提供肠球菌的数量和活性信息,分子生物学方法可以更加准确地确定肠球菌的种类和数量。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌,又称为乳球菌或大肠球菌,是人体肠道中重要的一类细菌,直径约0.5-1.0微米,分为革兰氏阳性菌。
肠球菌种类繁多,其中具有致病性的肠球菌主要有大肠埃希菌、变形杆菌和志贺氏菌等。
肠球菌在人体中的数量非常庞大,占据着人体内肠道微生物的主导地位,对维持肠道微生态平衡和人体健康起着至关重要的作用。
肠球菌在肠道中的作用肠球菌在人体肠道中的数量大约为10^12 - 10^14个,是一种重要的有益菌,它们对人体肠道具有多种益处。
肠球菌可以占据肠道的生态位,对抑制有害菌的生长起到了重要的作用;肠球菌可以保护肠道黏膜,增强肠道黏膜的屏障功能,阻止有害物质通过肠道黏膜进入血液,保护肠道免受细菌和毒素侵害;肠球菌还可以合成和分解一系列对人体有益的物质,如维生素、氨基酸、抗生素等,对促进食物消化和吸收起到了重要作用。
肠球菌还与人体健康状况密切相关。
研究发现,肠球菌的失衡和失调与一些肠道疾病(如肠胃炎、肠炎、肠道感染等)、免疫系统疾病(如类风湿关节炎、自身免疫性疾病等)和新陈代谢性疾病(如肥胖症、糖尿病等)有关。
保持肠道内肠球菌的平衡,是维护人体健康的关键。
肠球菌在临床检验中的意义肠球菌在临床检验中有着重要的意义。
一方面,肠球菌数量和种类的检测能够为临床医生提供关于肠道微生物群的信息,以辅助诊断和治疗相关疾病。
在肠道感染病例中,通过检测肠球菌种类和数量的变化,可以帮助医生判断感染病原菌的类型和数量,从而指导临床治疗;在肠道疾病(如肠胃炎、炎症性肠病等)的诊断和治疗过程中,肠球菌检测也具有一定的指导意义。
肠球菌的相关指标也可以作为评估和监测肠道微生物群状况的指标,用于评价人体健康状况和疾病风险的变化,为临床诊断和干预提供参考。
肠球菌检测的方法主要有两种:一种是通过分离培养法检测肠球菌数量和种类;另一种是通过分子生物学方法检测肠球菌的核酸序列。
后者具有更高的敏感性和特异性,可用于检测肠球菌种类和数量的变化,也可以用于检测肠球菌在肠道疾病和免疫系统疾病中的变化。
肠球菌检测
报告结果
肠球菌种水平的鉴定
生化鉴定
菌种 粪肠球菌 屎肠球菌 鸟肠球菌
生化特性
不分解L-阿拉伯糖,分 解山梨醇;
分解L-阿拉伯糖,不分 解山梨醇;
分解L-阿拉伯糖,分解 山梨醇;
分子鉴定
菌种 粪肠球菌 屎肠球菌
引物序列
5’-ATCAAGTACAGTTAGTCTTTATTAG-3’ 5’-ACGATTCAAAGCTAACTGAATCAGT-3’
杆菌)
产丙酸丙酸杆菌、布氏乳杆菌
青贮饲料、牛
饲料
副干酪乳杆菌
青贮饲料
凝结芽孢杆菌
肉鸡、生长育 肥猪和水产养 殖动物
在欧盟批准的微生物添加剂中近1/3含有屎肠球菌。
肠球菌:我们的朋友OR敌ห้องสมุดไป่ตู้?
朋友
肠球菌是人或动物消化道的正 常菌群之一,乳酸菌的一种。 有实验表明,肠球菌制剂在提 高幼年畜禽体增重、提高动物 免疫力、调节肠道微生态平衡 ,提高营养吸收、减少腹泻率 、降低死亡率等方面均有很好
引物:P1:5’-TACTGACAAACCATTCATGATG-3’ P2: 5’-AATTCGTCACCAACGCGAAC-3’
试剂 PCR Mix
P1 P2 ddH2O DNA 总体积
使用量(μL) 25 2 2 16 5 50
生化鉴定
PCR鉴定
95℃预变性5 min后,按照95 ℃ 30 S , 55 ℃ 30 S, 72 ℃ 30 S进行30个循环;然后72 ℃延伸5 min,4 ℃ 保存。
➢ 产品质量良莠不齐,部分生产企业在菌种纯化、生产工艺及杂菌污染 控制方面较为欠缺。
➢ 加强微生态制剂的安全评价工作,从而使产品质量处于受控状态下。 ➢ 与企业加强合作,开展污染源追溯调查,为实际生产应用提供指导。
生物产品中粪肠球菌活菌数的检验
粪肠球菌活菌数的检测1、设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下。
1.1恒温培养箱和恒温厌氧培养箱:37℃±1℃。
1.2冰箱:2℃~5℃。
1.3天平:感量为0.1g。
1.4均质器及无菌均质袋、均质杯。
1.5振荡器。
1.6无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
1.7无菌锥形瓶:容量250mL、500mL。
1.8无菌培养皿:直径90mm。
1.9显微镜:10倍~100倍。
1.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
2、培养基和试剂2.1 KF链球菌琼脂培养基2.1.1 KF链球菌琼脂培养基成分月示蛋白胨10.0g 麦芽糖20.0g 酵母浸膏10.0g 甘油磷酸钠10.0g 氯化钠5.0g 乳糖1.0g 琼脂13.0g 溴甲酚紫0.015g叠氮化钠0.4g 2,3,5-氯化三苯四氮唑 0.1g 蒸馏水1000mL2.1.2制法将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,补足蒸馏水至1000mL,于25℃时调节pH至7.2±0.2,分装于适宜容器中,煮沸5min,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。
2.2肠球菌肉汤2.2.1肠球菌肉汤成分蛋白胨17.0g 牛肉浸膏3.0g 酵母浸膏5.0g 牛胆粉10.0g氯化钠5.0g 柠檬酸钠1.0g 七叶苷1.0g 柠檬酸铁铵0.5g叠氮化钠0.25g 蒸馏水1000mL2.2.2制法将上述成分加于蒸馏水中,煮沸溶解,补足蒸馏水至1000mL,于25℃时调节pH至7.1±0.2,分装于适宜容器中,121℃灭菌30min。
2.3无菌生理盐水2.3.1成分氯化钠8.5g 蒸馏水1000mL2.3.2制法称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min。
2.4 革兰氏染色2.4.1结晶紫染色液2.4.1.1 成分结晶紫1g 95%乙醇20 mL 1%草酸铵水溶液80 mL2.4.1.2制法将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
想了解肠道菌检测的不同方法优劣点及价格三甲医院可以提供什么样的检测
想了解肠道菌检测的不同方法优劣点及价格三甲医院可以提供什么样的检测正好控叔写过科普什么是肠道菌检测顾名思义,就是采集样本对肠道中微生物(包括细菌,真菌和病毒)进行一次非常深度、系统和全面的检测。
假设我们每天排出一公斤的粑粑,有二两的“干货”都是肠道菌,所以粑粑中包含了肠道细菌全部的资料。
只要收集很少一点粑粑样本,经过分离提取DNA,上机测序和生物信息学分析后,就可以了解你肠子里到底住了哪些菌和他们的“菌口数量”大概是怎样。
与肠镜等体内检查完全不同的是,肠道菌检测没有任何痛感,不需要专程到医院,只需要在家中使用专业的采样管,1分钟内即可轻松完成对粑粑的取样,so easy。
为什么要测肠道菌?认识你的肠道君,为不盲目服用益生菌很多妈妈喜欢给孩子补充益生菌和益生元,认为益生菌就是对人体有益无害的好东西,惭愧的说几年前甚至我和丁妈也是这么认为的。
近一两年,国际上肠道菌研究突飞猛进,在跟进了一系列最前沿的科学文献后,我们认为很有必要提醒大家:不要盲目服用益生菌。
每个人的身体的情况差别很大,可能对大多数人有益处的菌,对少数人来说反而是致病菌。
比如下面两个最常见的菌,你一定不陌生,大家感受一下它的差别。
01乳酸杆菌就是能够发酵糖类并且产生乳酸的细菌,是典型的益生菌,最常见的就是存在于各类酸奶中。
如果体内乳酸杆菌数量大幅减少,就可能导致很多疾病的发生,此时补充一定量的乳酸菌,肠道生态又能很快恢复平衡。
但乳酸杆菌也不是一直扮演“好人”的角色,因为就在这个月发表的重磅研究表明,乳酸杆菌过量很可能是疾病的罪魁祸首【1】。
过量繁殖的乳酸杆菌会分泌大量乳酸,从而激活肠道NADPH氧化酶No某,生成巨量的活性氧(ROS)【2】。
活性氧的富集会加速肠道老化,在一些人体内引发剧烈的肠道黏膜损伤及肠干细胞的发育紊乱,从而导致结肠炎和肠道衰老【3,4】。
所以,即使如乳酸杆菌这样的良好市民,也并不是量越大越好。
02屎肠球菌这个听上去就“味儿很正”的细菌,其实就是“妈某爱”中的活性菌之一、而严格来说,肠球菌尚不能算在益生菌之列,应该是人体的共生菌。
粪肠球菌检验操作规程
粪肠球菌检验操作规程1、质量标准来源:Q/ZOK006-20122、名称:粪肠球菌汉语拼音:Fenchang Qiujun3、检验过程3.1、感官:取本品适量,置于非太阳光直射条件下的明亮处,目视检测,本品色泽为灰白色至淡棕黄色,固体外观为粉状或颗粒状,略带腥味,无发霉变质、结块及异味、异臭。
;液体外观为淡黄色至淡棕黄色,无悬浮物。
3.2、成品粒度:精密称取本品100g,置于1.19mm金属丝编制筛中,手动或机械振摇10分钟,本品应100%通过1.19mm孔径的筛网。
3.3、水分:取本品1g,精密称定,置于经105℃烘干至恒重的扁形称量瓶中,在105℃条件下干燥至恒重,减失重量应不得过9.0%。
3.5、粪肠球菌:3.5.1、试剂和培养基3.5.1.1、稀释液:0.85%生理盐水经121℃高压灭菌20分钟3.5.1.2、MRS培养基:称取蛋白胨10.0g、牛肉粉5.0g、酵母粉4.0g、葡萄糖20.0g、吐温80-1.0ml、七水磷酸氢二钾2.0g、三水醋酸钠5.0g、柠檬酸三铵2.0g、七水硫酸镁0.2g、四水硫酸锰0.05g、琼脂粉15.0g,将上述各组分置于1000ml纯化水中,加热搅拌使溶解,调pH值为7.2,经121℃高压灭菌20分钟,在无菌条件下注入灭菌后的平皿中,每个平皿约注入15ml培养基。
3.5.2、检测方法:在无菌条件取样25g,置于含225ml灭菌稀释液的锥形瓶中,其中置玻璃珠数颗,振摇使样品完全分散于溶液中,即为1:10的稀释液;用移液器或灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,置于含灭菌稀释剂9ml的离心管(或试管)中,密封,摇匀;按上述稀释次序递次稀释至适宜的稀释倍数;取2-3个适宜稀释倍数离心管,用移液器或灭菌吸管吸取0.1ml,接种至MRS培养基平皿上,每个浓度接种两个平皿,使用灭菌后的涂布棒小心涂布接种液于培养基表面,涂布好的平皿盖好后室温静置15分钟,密封并倒置平皿于37±1℃培养箱中培养48±2小时观察。
肠球菌属检验
文件页码:1/21.概述肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等21个种。
2. 标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。
3. 鉴定3.1 形态与染色革兰阳性球菌,单个、成双或短链排列。
3.2 培养特性在血琼脂平板上35℃培养18~24小时,形成较小、灰白色,有α溶血或γ溶血环的菌落。
在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
3.3 生化反应触酶试验阴性,分解甘露醇,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5%NaCl肉汤中生长,多数菌株PYR试验阳性,对杆菌肽耐药。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征革兰阳性球菌,触酶阴性,在含6.5%NaCl肉汤中生长,胆汁七叶苷和耐盐试验阳性,45℃生长。
3.4.2与链球菌属和乳球菌属的鉴别肠球菌属能在pH9.6肉汤和45℃生长,胆汁七叶甘和耐盐试验阳性,而链球菌属和乳球菌属则相反。
3.4.3 粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖,分解山梨醇。
屎肠球菌能分解L-阿拉伯糖,不分解山梨醇。
鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖和山梨醇。
3.5 操作步骤3.5.1 涂片、染色观察菌落特征,挑取可疑菌落,涂片染色镜检。
3.5.2 触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。
3.5.3 鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4. 药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S19最新版本文件。
5. 质量控制参见《质量管理程序》。
6. 检验结果解释与分析在β-内酰胺酶阴性肠球菌中,氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。
青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。
粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。
对于血培养和脑脊液培养分离出的肠球菌需做β-内酰胺酶检测,若β-内酰胺酶阳性,则对氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。
肠球菌 标准
肠球菌标准
肠球菌的标准范围因不同情境而异。
在欧洲食品安全局的规定中,肠球菌E. faecium用于动物饲料时,需要通
过相关的安全评估,包括不得检出三种毒性因子和DNA标记:IS16、Esp、hyl-like,以及氨苄青霉素(ampicillin)的最低抑菌浓度(MIC)不得超过2 mg/L。
如果肠球菌不符合这些检验标准,则认定为不安全,不可用于饲
料添加物中。
在水质标准中,肠球菌的标准也非常严格。
例如,在夏威夷州和美国的大部分地区,其海滩周围的水域是每100毫升水中,五个星期的平均值不得超
过35菌落形成单位(CFU)的肠球菌,否则该地区可能会发布警告,要求
民众远离海滩。
此外,肠球菌在肠道菌群中的正常范围值也有所不同。
具体来说,肠球菌约为105\~8个/克大便,其比例近似1:1;乳杆菌约为108\~10个/克大便,其比例也近似1:1。
以上数据仅供参考,建议咨询专业医生或查阅专业书籍获取更准确的信息。
肠球菌属的鉴定要点
肠球菌属的鉴定要点
肠球菌属的鉴定要点
肠球菌属(Enterococcus)是革兰阳性球菌的一类,是一些重要且广泛存在于人和动物肠道中的细菌。
此类细菌是病原菌和医院感染的主要来源之一,因此对于肠球菌属的鉴定显得尤为重要。
本文将从形态特征、生理生化特性以及分子生物学方法等方面介绍肠球菌属的鉴定要点。
形态特征
从形态特征方面,肠球菌属的细菌在革兰染色结果中通常呈现革兰阳性,球形或椭圆形,直径一般为0.5-1.5 μm,有一定的链状或成对排列现象。
在培养基上进行培养时,其菌落呈灰白色或白色,表面多呈平坦或凹陷状,粘度较高,可形成微嗅气味。
生理生化特性
除了形态特征外,还可通过生理生化实验鉴定肠球菌属。
在营养需求方面,肠球菌属偏爱碱性环境,常常能够生长在高盐分和多种碳源的基础培养基中,低温、低氧和高CO2浓度的环境中也可适应生长。
在酶学反应方面,肠球菌属是鲜奶酪加工过程中极为常见的乳酸菌,表现出强烈的产酸、产气和哑巴菌特性。
分子生物学方法
除了生理生化实验外,分子生物学方法也成为肠球菌鉴定的一种新的手段,比如PCR扩增和16S rRNA基因测序等方法。
这些方法的出现对于鉴定肠球菌属的种类和种群密度起到了很大的帮助,同时也大幅度增加了鉴定的准确性。
在进行PCR扩增时,常常会采用16S rRNA 基因作为检测的目标基因,从而通过对其序列的分析来进行细胞种类的识别。
总之,对于肠球菌属的鉴定来说,在形态特征、生理生化特性以及分子生物学方法方面都有着相应的鉴定要点。
我们需要结合多种方法进行鉴定,从而保证准确性和精度。
同时也需要注意防止肠球菌的传播和感染,保障我们的健康和生命安全。
饮用水中特殊污染物——肠球菌检测方法
饮用水中特殊污染物——肠球菌检测方法季婉菁【摘要】Due to the phenomenon of food poisoning caused by enterococci,enterococci are often used as an indicator of fecal contamination in water environments.Therefore,detection of enterococci in food and water can effectively indicate fecal contamination and evaluate public health.Risk and other aspects are of great significance.Increasingly advanced microbiology,epidemiology and statistical methods have further confirmed that Escherichia coli enterococci are superior to fecal contamination indicators for total coliforms and fecal coliforms.Some receiving countries have abandoned microbial indicators such as total coliforms and fecal coliforms, but at present,China is still limited to fecal coliforms as the only indicator for evaluating surface microbial contamination of surface water environment.Therefore,there is still much work to be done on the detection of Enterococcus in water.%由于肠球菌引起食物中毒的现象时有报道,水环境中肠球菌也常用作指示粪便污染情况,因此,对食品和水环境中肠球菌进行检测能有效指示粪便污染情况,在评价公众健康风险等方面具有重要的意义.日益进步的微生物学、流行病学及统计学方法进一步证实:大肠杆菌不肠球菌是优于总大肠菌群和粪大肠菌群的粪便污染指示物.已有部分发达国家摒弃了总大肠菌群和粪大肠菌群等微生物指标,但目前我国还局限于粪大肠菌群作为评价地表水环境病原微生物污染的唯一指标.因此,对水中肠球菌的检测仍有很多工作要进行.【期刊名称】《化工设计通讯》【年(卷),期】2019(045)009【总页数】2页(P77-77,138)【关键词】肠球菌;酶底物法;滤膜法【作者】季婉菁【作者单位】南京水务集团有限公司水质监测中心,江苏南京 210036【正文语种】中文【中图分类】X521 方法介绍1.1 酶底物法参考美国《水和废水标准检验法》第22版9230D—2006《荧光固定底物肠球菌测定法》,方法的单位为MPN/100mL,适用于水源水和生活饮用水中肠球菌的测定。
临床检验科普之你不知道的肠球菌
临床检验科普之你不知道的肠球菌肠球菌是一类常见的细菌,其包括多种不同的菌株,它们通常生活在人类和动物的肠道内。
肠球菌是肠道菌群中的一员,对维持肠道环境和人体健康都至关重要。
然而,它们也可能会引起感染和疾病。
肠球菌的种类很多,其中最常见的是大肠埃希菌(Escherichia coli)。
大肠埃希菌存在于人和动物的肠道中,是人和动物的健康肠道微生物群落的组成成员。
大肠埃希菌有许多不同的菌株,其中大多数是无害的。
然而,一些菌株可能会引起感染,特别是那些致病性大肠杆菌,例如EHEC(致病性大肠埃希菌)和EPEC(肠毒性大肠埃希菌)。
EHEC是引起一种严重疾病的菌株,叫做出血性大肠杆菌感染(Hemorrhagic Colitis,HC)。
HC主要引起肠胃炎症状,可伴有严重腹泻、腹痛和恶心。
在严重的情况下,HC甚至可能导致血液中丧失血小板的病情和ESRD(终末期肾病),这是一种肾功能衰竭的终末阶段。
EPEC则会导致轻度或中度的腹泻,主要通过污染的食物和水传播。
这种菌株也可能在新生儿中引起肠炎。
除大肠埃希菌外,肠球菌还包括其他的细菌,如克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、沙门氏菌(Salmonella)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和产气杆菌(Clostridium difficile)。
大多数情况下,这些细菌是无害的。
但是,它们在人体内的过度繁殖可能会导致感染和疾病。
这就是为什么在医院和实验室中,对肠球菌的监测和诊断显得尤为重要的原因。
现代医学包括检验科技已经提供了许多检测肠球菌的方法,如培养、抗生素敏感性测试、分子生物学检测等。
这些测试可以帮助医生诊断和治疗感染和疾病。
此外,还有一些新兴的技术,如基于质谱相似性的检测、蛋白质质谱检测和代谢谱检测等,这些方法能够检测和鉴定细菌的类型和种类,并可以大大简化诊断过程。
总的来说,肠球菌对健康和人体的生理功能非常重要,但也可能会引起感染和疾病。
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肠球菌检测
致病性检测耐药性检测肠球菌鉴定
1.07肠球菌为革兰阳性(G+)球菌,广泛分布于自然环境及人和动物消化道内。
20世纪80年代以来,肠球菌严重感染的发生率和病死率明显升高,并且由于肠球菌的固有耐药和获得性耐药,使许多常用抗菌药物在治疗肠球菌感染时失败。
因此,从分子水平对肠球菌致病因子、肠球菌引起的感染机制与治疗的研究显得尤为重要。
细菌分类学上,肠球菌属早期并不存在,现今的一些菌种本归属于链球菌属,1989年,依据Facklam和Collins的分类,肠球菌属内包括十二个种及一个变异株,它们是:粪肠球菌(E.faecalis)屎肠球菌(E.faecium)
鸟肠球菌(E.avium)酪黄肠球菌(E.casseliflavus)
坚忍肠球菌(E.durans)鸡肠球菌E.galinarum)
芒地肠球菌(E.mundii)恶臭肠球菌(E.maladoratum)
希拉肠球菌(E.hirae)孤立肠球菌(E.solitarius)
棉子糖肠球菌(E.raffinosus)假鸟肠球菌(E.pseudoavium)
粪肠球变异株(E.faecalis var)。
肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等21个种。
鉴定
形态与染色革兰阳性球菌,单个、成双或短链排列。
培养特性在血琼脂平板上35℃培养18~24小时,形成较小、灰白色,有溶血或溶血环的菌落。
在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。
生化反应触酶试验阴性,分解甘露醇,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5%NaCl肉汤中生长,多数菌株PYR试验阳性,对杆菌肽耐药。
操作步骤
涂片、染色观察菌落特征,挑取可疑菌落,涂片染色镜检。
触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。
鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
科标生物检测中心从事饲料、土壤肥料、微生物及生物制剂、化妆品及日化用品、木材及木制品、其他生物材料等生物相关产品的性能测试、成分分析以及配方研发等工作。
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