疫苗制造基本程序PPT教学课件

（四）浓 缩 为提高某些灭活菌苗的免疫力，在培养过程中采取提高
菌数的基础上，再通过浓缩方法达到目的。
常用的浓缩方法：氧化铝胶吸附沉淀法 离心沉降法 羧甲基纤维沉淀法
以上方法可使菌液浓缩一倍以上。
此外，有些细菌在生长过程中产生分子量小的可溶性抗原（如猪丹 毒杆菌产生的糖蛋白）也可经氢氧化铝吸附浓缩；将破伤风脱毒液按盐 酸—食盐法处理，以作进一步精制成提纯破伤风类毒素。
各种用于制造菌苗的菌种应按规定定期复壮，并进行形态、培养特 性、菌型、抗原性和免疫原性鉴定，合格菌种准许用于制苗。
2.种子培养
将经鉴定符合标准的菌种接种于菌苗生产规程中所规定的培养基进 行增殖培养，经纯粹检查、活菌计数达到标准后即为种子液，用于菌苗 生产。
2020种/12子/12液通常保存于2-8C冷暗处，不得超过规程规定的使用期限。7
菌液于0～4C暗处保存，待抽样经纯粹、活菌数等检查合格 后使用。
2020/12/12
14
二、细菌性活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 浓缩 配苗
（三）浓缩
为提高某些弱毒菌苗的免疫效果，可进行浓缩，以提高单位活菌数，常 用的依缩方法有吸附剂吸附沉降法、离心沉降法等，如于猪丹毒菌液内加入 0.2% ～0.25%羧甲基纤维素(CMC)进行浓缩，也可用离心沉淀浓缩。浓缩 菌液应抽样作纯粹、活菌数等检查。
弱毒菌种
蛋白质、肉浸液等原料 配置、灭菌
培养基
活化 种子
培养
原料 配制 灭菌
佐剂
菌液
灭活
灭活菌液
菌苗原液
配苗、乳化
配苗
原料
配制 灭菌
保护剂
分装
分装、冻干
检验
检验
2020/12/12
灭活疫苗
活疫苗
16
项目三
病毒疫苗制造
病毒性禽胚培养疫苗制造 病毒性细胞培养疫苗制造 病毒性动物组织疫苗制造
2020/12/12
配苗和分装：应充分混匀，及时塞塞、贴签或印字。
2020/12/12
11
项目二 细菌性活疫苗制造
2020/12/12
12
二、细菌性活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 浓缩 配苗
细菌性活疫苗多指弱毒菌苗，尽管种类与苗型甚多，但基本制造程 序相同。
（一）菌种与种子
弱毒菌种多系冻干品，由中国药品生物制品检定所或中国兽药监察所 传代、鉴定、保存与分发，少数由国家指定单位鉴定、保存与供给。
菌种使用前应按规程规定进行复壮、挑选，并作形态、特性、抗原性 和免疫原性鉴定，符合标准后方可用于制苗。
将检定合格的菌种接种子于规定的培养基，按规定的条件增殖培养， 经纯粹检查及有关的检查合格者即可作为种子液。
种子液通常在0～4C可保存2个月，在保存期内可作为菌苗生产的批量 种子使用。
2020/12/12
疫苗制造基本程序
2020/12/12
1
内容
项目一
细菌性灭活疫苗制造
项目二
细菌性活疫苗制造
项目三
病毒疫苗的制造
2020/12/12
2
项目一 细菌性灭活疫苗制造
2020/12/12
3
一、细菌性灭活疫苗制造
灭活细菌疫苗通用制造程序
菌种的选择 菌液培养 灭活
配苗
浓缩
细菌性灭活疫苗简称灭活菌苗，种类、苗型甚多，
但制造的基本程序差别不大。
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
2020/12/12
4
2020/12/12
5
基本流程
菌液
灭 活
灭活菌液 + 佐剂
配置 原料
乳化
分装和保存
2020/12/12
6
一、细菌性灭活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
（一）菌种与种子 1.菌种
制苗用菌种多数为毒力强、免疫原性优良的菌株，通常使用1-3个品 系，均由中国药品生物制品检定所或中国兽药监察所传代、鉴定、冻干 保存和供应。
17
一、病毒性禽胚培养疫苗制造
鸡胚选择 种毒与毒种继代 接毒与收获 配苗
痘病毒、正粘病毒、副粘病毒和疱疹病毒等一类生物制品，目前仍然 利用禽胚特别是鸡胚制备，如鸡新城疫苗、禽流感疫苗、犬瘟热鸡胚弱毒 疫苗等。
禽胚疫苗生产的原材料来源方便、质量比较容易控制，制造程序简单， 不需要过高的设备条件，生产的疫苗质量可靠。
13
二、细菌性活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 浓缩 配苗
（二）菌液培养
按1%～3%量将种子液接种于培养基，然后依不同菌苗要求 进行培养。
如猪丹毒弱毒菌须在在深层通气培养中加入适当植物油作消泡剂，通入过 滤除菌的热空气进行培养制造菌液
如人用炭疽活疫苗、卡介苗经固体表面培养完成后须按规定要求将菌苔洗 下制成菌液
2020/12/12
8
一、细菌性灭活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
（三）灭 活
灭活菌苗通常根据细菌的特性加入最有效的灭活剂，采取 最适当的灭活条件进行，几种灭活菌苗的灭活方法如表所示。
表 几种灭活菌苗的灭活方法
2020/12/12
9
一、细菌性灭活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
（四）配苗与冻干
经检验合格的菌液，按规定比例加入保护剂配苗，充分摇匀后随即 进行分装，分装量必须准确。
分装好的菌苗迅速送入冻干柜进行预冻、真空干燥，冻于完毕后立 即加塞、抽空、封口，移入冷库保存，并由质检部门抽样检验。
2020/12/12
15
流程图1——细菌疫苗制造工艺流程
细菌分离 鉴定
菌种 减毒
一、细菌性灭活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
（二）菌液培养
大量生产的细菌培养方法甚多，既有手工式的，也有机 械化或自动化的培养方式。
机械化或自动化的培养方式通称为反应缸培养法，可供 选择的菌液培养法有：液体静置培养法、液体深层通气培养 法、透析培养法及连续法易获得高浓度的 细菌悬液，易稀释成不同浓度，且含培养基的成分较少，所 以比较适用于制备诊断用的抗原。
2020/12/12
10
一、细菌性灭活疫苗制造
菌种的选择 菌液培养 灭活 浓缩 配苗
（五）配苗与分装
由于灭活菌苗所用的佐剂不同，所以配苗方法也不相同。
氢氧化铝菌苗：可在加入甲醛灭活的同时，按比例加入氢氧化铝胶 配制；也可在菌液经甲醛灭活后再按比例加入氢氧化铝胶配苗。
有的厂油佐剂菌苗的配制程序为：于灭菌的油乳剂135m110号白油、 11.4m1Span-85、3.6ml Tween80混合液中，在边搅拌下加入等量甲 醛灭活菌液配制。
（一）鸡胚选择
受精卵应来自SPF鸡群，至少源于未用抗生素药物的非免疫鸡群，以 免受母源抗体的干扰和残留抗生素的影响。