实训六 细菌的分离、移植及培养
细菌的分离培养与纯培养实验报告
细菌的分离培养与纯培养实验报告一、实验目的本实验旨在掌握细菌的分离培养方法，了解纯培养的原理及方法，以及熟悉细菌培养基的制备和使用。
二、实验原理1. 细菌分离培养方法细菌分离培养是指将混合菌落中的单一细菌分离出来，使其在无竞争的环境中独立生长。
常用的方法有均匀涂布法、斜坡涂布法和点式涂布法。
2. 纯培养原理及方法纯培养是指将混合菌落中同一种细菌分离出来并进行单独培养。
常用的方法有挑选法和稀释法。
3. 细菌培养基制备与使用细菌培养基是供给微生物生长发育所需营养物质和条件的一种人工环境。
根据不同需求可制备不同类型的细菌培养基，如寒偏好性、厭氧性、选择性、差异性等。
常用的细菌培养基有普通营养琼脂平板、LB 平板等。
三、实验步骤1. 细菌分离培养（1）取一支无菌的铂丝，将其消毒并冷却。
（2）取一份混合菌落，将铂丝在其表面轻轻刮几下，使细菌附着在铂丝上。
（3）将铂丝均匀涂布于琼脂平板上。
（4）重复以上步骤，涂布多个琼脂平板。
（5）将琼脂平板放置于恒温箱中，在适宜的温度下培养。
2. 纯培养（1）取一份混合菌落，在显微镜下观察并挑选出同一种细菌。
（2）取一支无菌的铂丝，在混合菌落表面轻轻刮几下，使细菌附着在铂丝上。
（3）将铂丝均匀涂布于琼脂平板上，并进行单独培养。
3. 细菌培养基制备与使用（1）按照需要制备不同类型的细菌培养基，并进行消毒灭菌处理。
（2）将需要进行分离或纯化的混合菌落均匀涂布于培养基上，进行培养。
四、实验结果1. 细菌分离培养经过适当时间的培养后，可看到琼脂平板上出现单一的细菌菌落。
2. 纯培养经过适当时间的培养后，可看到琼脂平板上只有挑选出的同一种细菌菌落。
3. 细菌培养基制备与使用制备好的细菌培养基可用于分离、纯化和大量繁殖特定细菌。
五、实验注意事项1. 实验器材需消毒并严格无菌操作。
2. 均匀涂布法需注意铂丝在琼脂平板上均匀涂布。
3. 液体培养基需注意摇晃均匀以使细菌均匀分布。
4. 实验结束后要彻底清洗和消毒实验器材和工作台面。
细菌的分离培养实验报告
细菌的分离培养实验报告细菌的分离培养实验报告细菌是微生物中的一类重要生物体，它们广泛存在于自然界的各个环境中，包括土壤、水体、空气以及人体等。
研究细菌的分离培养对于了解其生态特征、代谢能力以及与人类健康相关的病原性等方面具有重要意义。
本次实验旨在通过分离培养的方法，获取和鉴定不同细菌菌株，从而深入了解细菌的多样性和功能。
实验材料和方法：1. 实验材料：含有营养成分的琼脂平板、离心管、移液器、无菌培养皿等。
2. 实验方法：将待分离的样品（如土壤、水样等）加入到含有营养成分的琼脂平板中，用无菌棉签均匀涂抹在平板表面，然后在恒温培养箱中进行培养。
实验结果与讨论：经过一段时间的培养后，我们观察到了琼脂平板上的细菌生长。
细菌形态的多样性令人惊叹，有的细菌呈圆形，有的呈椭圆形，还有的呈链状、菌丝状等。
这种多样性反映了细菌在适应各种环境中的进化和适应能力。
为了更好地了解这些细菌的特性，我们进行了进一步的分离培养。
首先，我们选择了一些形态和颜色不同的菌落进行分离。
通过无菌棉签的转接，我们将这些菌落分别接种到新的琼脂平板上。
经过培养，我们得到了一系列纯培养的细菌菌落。
接下来，我们对这些纯培养的细菌进行了形态观察和生理生化试验。
形态观察包括细菌的大小、形状、颜色等特征，而生理生化试验则包括对细菌的代谢能力、酶活性等方面的测试。
通过这些试验，我们可以初步了解细菌的分类和功能。
在形态观察中，我们发现了一些细菌呈现出独特的特征。
比如，某些细菌呈现出亮黄色的菌落，这可能与其代谢产物有关。
而另一些细菌则呈现出粘稠的菌落，这可能与其产生胶原蛋白等粘附物质有关。
这些特征为我们进一步研究细菌的功能和应用提供了线索。
在生理生化试验中，我们使用了一系列常见的试剂和培养基，如甲基红试剂、氧化酶试剂、柠檬酸盐培养基等。
通过对细菌的反应观察，我们可以初步判断其代谢能力和酶活性。
例如，某些细菌在柠檬酸盐培养基上呈现出黄色，这可能是由于其产生了柠檬酸酶。
病原菌的分离培养
五、实验方法及步骤 （2）右手持接种环，从病料中取少许材料涂布于培养基 边缘，然后将接种环上多余的材料在火焰中烧毁，待接种 环冷却后，再与所涂材料的地方轻轻接触，开始划线，方 法如图3-1。 （3）接种完毕，灼烧接种环，将培养皿盖好，在皿底上 作好日期和接种者等标记，平皿倒扣，置37℃培养18-24h 观察结果。
避免接种环上可能存在 的微生物污染培养物
防Hale Waihona Puke 温度太高 杀死菌种杀死上次划线结束 后接种环上残留的 微生物，使每次划 线的微生物来自上 次划线末端
五、实验结果 大小、性状、边缘、光滑/粗糙、隆起度、颜色等。
六、实验结论及讨论/注意事项
技能 可疑病原菌的分离培养、移植
三、实验内容 在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。
四、实验材料 鸡粪便、接种环、普通琼脂平板、酒精灯、恒温培养箱
四、实验方法及步骤 其目的是使被检查的病料做适当的稀释，以期获得单
个的菌落，便于进行菌落性状的观察，对分离的细菌做初 步鉴定。 划线分离培养法： （1）左手持皿，用左手的拇指、食指及中指将皿盖揭开 呈20°左右的角度(角度愈小愈好，以免空气中的细菌进 入皿中将培养基污染)。
技能 可疑病原菌的分离培养、移植
一、实验目的 1、掌握细菌分离培养和移植的方法 2、熟悉无菌操作方法
二、实验原理 平板划线分离法是一种用于从混合的微生物群落中分离出单个
细胞的方法。该方法的原理是过接种环在平板培养基表面进行多次 由点到线的划线稀释，从而使微生物样品在固体的培养基表面被分 散和稀释，最终形成多个独立的、肉眼见的细胞团，即菌落。
细菌的分离培养实习报告
细菌的分离培养实习报告一、实验目的通过本次实习，掌握细菌的分离培养和接种技术，了解细菌的形态特征及生长习性，并能够正确使用细菌培养基和培养设备。
二、实验原理细菌的分离培养和接种技术是一种将混合菌液中的不同种类的细菌分离出来并进行单独培养的方法。
该方法主要是通过对细菌的生长特性进行观察和分析，从而将不同种类的细菌分离开来。
三、实验材料与设备1. 实验材料：- 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌等。
- 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基等。
- 接种工具：接种环、接种针等。
- 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、生物安全柜、显微镜、培养箱等。
2. 实验步骤1) 菌种的准备：将各种菌种分别接种在斜面培养基上，37℃培养24小时。
2) 培养基的制备：按照配方制备牛肉膏蛋白胨琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基等，高压蒸汽灭菌法灭菌。
3) 接种方法：a) 平板划线法：将菌种接种环在琼脂平板表面划线，使细菌分散生长，形成单个菌落。
b) 稀释涂布平板法：将菌种接种环在液体培养基中稀释后，涂布在琼脂平板表面。
4) 培养：将接种后的琼脂平板倒置放入培养箱中，37℃培养24小时。
3. 实验结果与分析1) 菌落的观察：观察不同菌种在琼脂平板上的生长情况，记录菌落的形状、大小、颜色等特征。
2) 菌种的鉴定：根据菌落的特征和生长习性，对不同菌种进行鉴定。
四、实习心得通过本次实习，我对细菌的分离培养和接种技术有了更深入的了解。
在实验过程中，我学会了如何准备菌种、制备培养基、进行接种操作以及观察菌落等技能。
同时，我也明白了细菌分离培养的重要性，它不仅可以帮助我们研究细菌的生物学特性，还可以为临床诊断和防治疾病提供依据。
在实验过程中，我注意到了无菌操作的重要性，严格遵循无菌操作规程，避免交叉污染。
同时，我也学会了如何使用显微镜观察细菌的形态特征，从而对菌种进行初步鉴定。
总之，本次实习让我对细菌的分离培养和接种技术有了更全面的了解，也为我今后的科研和工作打下了坚实的基础。
细菌分离培养实验报告
一、实验目的1. 了解细菌的生长特性。
2. 掌握细菌分离培养的方法。
3. 培养出单一菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。
二、实验原理细菌分离培养是指将混合菌落中的单一细菌分离出来，使其在无竞争的环境中独立生长。
常用的方法有均匀涂布法、斜坡涂布法和点式涂布法。
本实验采用均匀涂布法进行细菌分离培养。
三、实验材料1. 培养基：营养琼脂平板2. 细菌样本：土壤样本3. 仪器：无菌操作台、无菌镊子、无菌移液器、无菌接种环、酒精灯、培养箱等四、实验步骤1. 无菌操作：在无菌操作台中，将培养基平板倒置放置，待平板凝固。
2. 取样：用无菌镊子取少量土壤样本，放入无菌试管中。
3. 制备土壤悬液：向试管中加入适量无菌生理盐水，用无菌移液器充分振荡，使土壤样本充分悬浮。
4. 稀释：取适量土壤悬液，加入无菌生理盐水进行稀释，制备不同浓度的土壤悬液。
5. 接种：用无菌接种环蘸取稀释后的土壤悬液，均匀涂布在营养琼脂平板表面。
6. 培养：将涂布好的平板倒置放入培养箱，在适宜的温度下培养。
7. 观察结果：定期观察平板上的菌落生长情况，记录菌落特征。
五、实验结果与分析1. 观察到平板上有不同形态的菌落生长，说明土壤样本中存在多种细菌。
2. 通过观察菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘等，初步判断部分菌落可能为同一种细菌。
3. 对疑似同种细菌的菌落进行挑取，进行纯培养。
六、实验讨论1. 本实验采用均匀涂布法进行细菌分离培养，操作简单，易于观察菌落特征。
2. 在实验过程中，无菌操作至关重要，以免污染样本和培养基。
3. 细菌分离培养结果受多种因素影响，如培养基成分、培养条件等，需严格控制实验条件。
4. 通过本实验，掌握了细菌分离培养的基本方法，为后续的细菌鉴定和研究奠定了基础。
七、实验总结通过本次实验，我们了解了细菌的生长特性，掌握了细菌分离培养的方法，为后续的细菌鉴定和研究提供了基础。
在实验过程中，我们认识到无菌操作的重要性，以及实验条件对实验结果的影响。
细菌的分离培养实习报告
一、实习目的本次实习旨在通过细菌的分离培养实验，掌握细菌分离培养的基本原理和操作方法，了解细菌的生长特性，培养出单一菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。
二、实验原理细菌的分离培养是将混合菌液中的不同种类的细菌分离出来并进行单独培养的方法。
通过观察和分析细菌的生长特性，将不同种类的细菌分离出来，培养出单一菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基。
3. 接种工具：接种环、接种针、无菌棉签、无菌吸管。
4. 其他：酒精灯、酒精棉球、试管、试管架、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备培养基：按照培养基配方，称取各成分，加入适量蒸馏水溶解，分装于试管中，高压灭菌。
2. 菌液的制备：将待分离的细菌接种于肉汤培养基中，37℃恒温培养24小时。
3. 平板划线接种法：取无菌平板，用接种环取菌液，在平板上划线，依次进行分区划线，每划完一个区域后，烧灼接种环进行灭菌。
4. 观察菌落：将划线平板倒置，置于37℃恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况。
5. 挑取纯种：根据菌落的特征，如颜色、形状、大小等，挑取单个菌落进行纯培养。
6. 菌落纯度鉴定：将纯培养的菌落涂片，染色，显微镜下观察，确认菌落纯度。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌：菌落呈金黄色，圆形，边缘整齐，表面光滑。
2. 大肠杆菌：菌落呈白色，圆形，边缘整齐，表面光滑。
3. 肺炎克雷伯菌：菌落呈灰白色，圆形，边缘不整齐，表面粗糙。
六、实验讨论1. 细菌的分离培养是微生物学实验中的基础操作，对于后续的鉴定和研究具有重要意义。
2. 在实验过程中，要注意无菌操作，防止杂菌污染。
3. 平板划线接种法是分离培养细菌的常用方法，通过分区划线，可以将菌液逐渐稀释，达到分离纯种的目的。
4. 在挑取纯种时，要仔细观察菌落特征，确保菌落纯度。
5. 本实验中，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均成功分离培养，为后续的鉴定和研究提供了基础。
细菌的分离培养与移植实验报告
实验五细菌的分离培养与移植[实验目的]1、掌握细菌分离培养及移植的基本要领和方法。
[实验原理]在细菌学诊断中，分离培养是不可缺少的一环。
分离培养的目的主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。
在分离培养时应注意：选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。
同时应严格按无菌操作程序进行实验，并做好标记。
[实验材料]菌种：大肠杆菌斜面、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌等。
器械：剪刀、记号笔(以上小组共用)。
培养基：普通肉汤和普通琼脂斜面、普通琼脂平板、酒精灯、接种环。
[实验内容]1、细菌的分离平板划线接种法通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。
若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养。
可用做分离纯种细菌。
操作方法（三区划线法）：a、右手拿接种环，烧灼冷却后，勾取菌种。
b、左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/5-1/6，此为第一区。
划线时接种环与琼脂呈30-40度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
c、接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复2-3根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。
d、第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
e、划线完毕，将平板扣入皿盖并作好标记，置37℃温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况，注意是否分离出单个菌落，并记录菌落特征（如大小、形状、透明度、色素等）。
平板分区划线法培养后菌落分布情况平板划线培养的方法甚多，可按各人的习惯选择应用，其目的都是达到使被检材料适当的稀释，以求获得独立单在的菌落，防止发育成菌苔，以致不易鉴别其菌落性状。
细菌分离培养及移植
细菌分离培养及移植在细菌学诊断中，分离培养是不可缺少的一环。
分离培养的目的主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。
在分离培养时应注意：选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。
同时应严格按无菌操作程序进行实验，并做好标记。
[目的要求](1)掌握细菌分离培养的基本要领和方法。
(2)掌握厌氧菌培养的原理及其方法。
[实验材料]菌种：大肠杆菌斜面、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌混合培养肉汤等。
器械：剪刀、记号笔(以上小组共用)。
培养基：普通肉汤和普通琼脂斜面、普通琼脂和鲜血琼脂平板、酒精灯、接种环(以上每人一套)。
[需氧性细菌分离培养法]1．划线分离培养法此法为常用的细菌分离培养法。
平板划线培养的方法甚多，可按各人的习惯选择应用，其目的都是达到使被检材料适当的稀释，以求获得独立单在的菌落，防止发育成菌苔，以致不易鉴别其菌落性状。
划线培养时须注意以下几点：(1)左手持皿，用左手的拇指、食指及中指将皿盖揭开呈20。
左右的角度(角度愈小愈好，以免空气中的细菌进入皿中将培养基污染)。
(2)右手持接种环，从大肠杆菌与金黄色葡萄球菌混合培养肉汤中取少许材料涂布于培养基边缘，然后将接种环上多余的材料在火焰中烧毁，待接种环冷却后，再与所涂材料的地方轻轻接触，开始划线，方法如图(5-l)。
(3)划线前先将接种环稍稍弯曲，这样易和平皿内琼脂面平行，不致划破培养基。
(4)划线中不宜过多地重复旧线，以免形成菌苔。
(5)接种完毕，在皿底上作好菌名、日期和接种者等标记，平皿倒扣，置37℃培养。
2．纯培养的获得与移植法将划线分离培养37℃24h的平板从温箱取出，挑取单个菌落，经染色镜检，证明不含杂菌，此时用接种环挑取单个菌落，移植于琼脂斜面培养，得到的培养物，即为纯培养物，再作其他各项试验检查和致病性试验等。
具体操作方法如下：(1)两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和被接种琼脂斜面管，使管口互相并齐，管底部放在拇指和食指之间，松动两管棉塞，以便接种时容易拔出(图5—2)。
实验六园林植物病原菌的分离培养
园林植物Байду номын сангаас原菌的分离培养
一,目的要求
1,掌握培养基的制备方法，学习灭菌与消 毒的操作方法 2.掌握分离与纯化病原菌的基本原理与方 法
二,基本原理
实验材料、仪器 实验材料、
高压蒸汽灭菌锅、三角瓶、烧杯、天平、 漏斗、培养皿、电炉、纱布、量筒等 芒果炭疽病叶、马铃薯、葡萄糖、琼脂
四,操作步骤 操作步骤
4.加热同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅 内的冷空气，待冷空气完全排尽后，关上排 气阀，让锅内的温度随蒸汽压力而逐渐上升。 注意：（1）,灭菌的主要因素是温度而不是 压力，因此锅内冷空气必须完全排尽后才能 关上排气阀，维持所需压力 5，灭菌所需时间到后，切断电源
6，冷却，当压力表的压力降到“0”时，打 开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌 物品。注意：压力一定要降到“0”是，才能 打开排气阀，开盖取物。否则就会因锅内压 力突然下降
五，作业
1，上交分离的病原真菌菌种。 2，写出病原真菌培养性状观察的实验报告。
<一>PDA培养基 马铃薯 200g 葡萄糖 20g 琼脂 15—20g 水 1000ml PH 自然
<二>高压蒸汽灭菌 步骤：1、首先将内层锅取出，再向外层锅 内加入适量的水，使水面与搁架相平为宜 2，放回内锅，放入待灭菌物品，注意 （1）不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而 灭菌效果；（2）三角瓶不要与桶壁接触， 以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞 3，加盖，拧紧
<三>组织分离法 1，将培养皿高温灭菌，180°，2小时 （干燥法） 2，倒平板
3，取真菌叶斑病的新鲜病叶，取出健交界 处，切取小块（每边长3-4cm）病组织数块 4，将病组织放入75%酒精60秒后，在移 入0.1%汞液分别表面消毒2-5分钟 5,将病组织移入培养皿内，每皿5块。 6，观察生长情况。
细菌分离培养实训报告
一、实验目的1. 掌握细菌分离培养的基本原理和操作方法。
2. 了解不同细菌的生长特性和菌落形态。
3. 培养实际操作能力，为后续的微生物学学习和研究打下基础。
二、实验原理细菌分离培养是微生物学实验中的一项基本操作，通过将混合菌液中的细菌进行分离、纯化，得到单一菌种。
常用的分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
本实验采用平板划线法进行细菌分离培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：大肠杆菌菌种、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、接种环、酒精灯、无菌水、试管、试管架、培养皿等。
2. 仪器：恒温培养箱、电子天平、生物安全柜、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 培养基制备：称取牛肉膏蛋白胨琼脂干粉，加入适量无菌水，混匀后煮沸溶解，待冷却至50℃左右，倒入培养皿中，待凝固。
2. 接种：将大肠杆菌菌种接种于牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上，用接种环在平板表面进行划线。
3. 恒温培养：将划线平板倒置放入恒温培养箱中，培养24小时。
4. 观察菌落：观察菌落形态，记录菌落特征，如大小、形状、颜色、边缘等。
5. 纯化菌种：根据菌落特征，挑选单个菌落进行纯化。
将纯化后的菌落接种于新的牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上，培养24小时，再次观察菌落形态，确认纯化成功。
五、实验结果与分析1. 菌落形态：大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐，直径约为2-3mm，白色。
2. 纯化菌种：通过观察菌落特征，挑选出单个菌落进行纯化，成功得到纯化的大肠杆菌。
六、实验总结本次细菌分离培养实训，使我掌握了细菌分离培养的基本原理和操作方法。
通过实验，我了解到不同细菌的生长特性和菌落形态，提高了实际操作能力。
在实验过程中，我学会了无菌操作、接种、观察和记录等技能，为后续的微生物学学习和研究打下了基础。
七、注意事项1. 操作过程中要严格遵循无菌操作原则，避免污染。
2. 接种环要灼烧灭菌，待冷却后再进行划线操作。
3. 观察菌落时，要仔细观察菌落形态，准确记录。
4. 培养过程中，要注意培养箱温度和湿度，保证菌落正常生长。
【生物课件】实训六 细菌的分离、移植及培养
【生物课件】实训六细菌的分离、移植及培养一、实验目的：1.掌握细菌的分离、移植和培养技术，对各种需检测的微生物进行培养和鉴定。
2.了解常用菌种的特征，为后续检验工作提供依据。
二、实验原理：细菌培养是一种把细菌放在合适环境中使其自然繁殖的过程。
培养细菌的常用方法有四种：液体培养、斜面培养、平板培养和深层培养。
细菌分离是不同细菌群落之间的区别和鉴定，细菌在自然条件下有其特殊的生存环境和生存方式，不同的细菌生物学特性又会产生分类上的变化。
为了将特定培养有特定特性的单一细胞作为纯种（或纯净菌株）用来开展后续的实验研究，常需要对复杂的菌落进行分离和鉴定。
细菌移植是把已生长的菌落培养到另外一种培养物上，即是将菌落从一种培养基移植到另一种培养基中进行繁殖。
实验材料：细菌：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等。
培养基：LB培养基、香肠葡萄糖琼脂平板、香肠葡萄糖琼脂斜面。
器材：灭菌小器皿、无菌吸管、灭菌匀菌器等。
三、实验步骤：1.准备工作：将要使用的培养基取出，置于灭菌环境下待用。
2.细菌的分离：（1）在灭菌环境下，用灭菌吸管取出一个菌落，放入无菌盘子中；（2）将取出的菌落直接移植于香肠葡萄糖琼脂平板上，然后用无菌匀菌器均匀地挥发移液并倾斜琼脂坡度将琼脂定形，然后在琼脂的上端用灭菌棉签抠出一些细胞，倒入液体菌落培养基内；（3）重复上述操作，将同一菌落分别挖取置于不同琼脂板上，以获得多个单一菌落。
（1）用酒精灯把取样棉签点燃，并且把灭菌实验室环境的表层用火烤一烤避免细菌的污染；（2）用已经生长出来的菌落的取样棉签把它向一块暴露的新的琼脂平板上画一条直线，并用匀菌器将它均匀地涂上；（3）重复上面的操作，把某些菌落移植到不同的培养基上，以获得更多的信息。
（1）在平板和斜面上移液；（2）将平板垂直放置，斜面则倾斜放置;（3）放在37℃培养箱中培养24小时，观察结果。
四、实验注意事项：1.都要注意无菌条件，使用包装良好的培养基。
细菌的纯种分离培养和接种技术实验报告
细菌的纯种分离培养和接种技术实验报告一、实验目的本实验旨在掌握细菌的纯种分离培养和接种技术，了解细菌的形态特征及生长习性，并能够正确使用细菌培养基和培养设备。
二、实验原理1. 细菌纯种分离：将混合菌涂于琼脂平板上，经过培养后，可以观察到不同形态和颜色的菌落。
选取单个菌落进行多次传代，最终得到纯种菌株。
2. 细菌培养基：含有必需营养物质的液体或固体培养基，可以提供适宜的环境促进细菌生长繁殖。
3. 细菌接种：将细菌转移到新的培养基中，以便于观察其生长情况。
三、实验步骤1. 准备工作：清洁工作台、消毒琼脂平板和试管等设备。
2. 分离纯种：取一支无菌铅笔，在琼脂平板上划出几条直线。
用无菌铅丝在混合液体中沾取少量后，在平板上均匀涂抹，避免相互重叠。
将琼脂平板倒置在恒温箱中，以适宜的温度和时间进行培养。
3. 传代：观察到菌落后，用无菌铅笔在菌落周围划出一圈。
用无菌铅丝沾取少量菌落，划过圈内，再均匀涂抹于新的琼脂平板上。
重复以上步骤多次，直至得到纯种细菌。
4. 培养：将培养基加热消毒后倒入试管中，待其冷却后，在试管口处焊接一根无菌铁针。
用无菌铁针沾取少量细菌接种于培养基中，放入恒温箱中进行培养。
5. 观察：观察培养基上的细菌生长情况、形态特征和颜色等。
四、实验注意事项1. 实验前要进行必要的清洁和消毒工作。
2. 操作时要保持无菌状态，避免污染。
3. 培养箱应设置适宜的温度和湿度，并定期消毒。
4. 实验结束后要及时清理和消毒设备和工作台。
五、实验结果经过分离和传代，成功得到纯种细菌。
在培养基上观察到细菌的形态特征、颜色和生长情况，并能够正确进行接种操作。
六、实验总结本实验通过对细菌纯种分离培养和接种技术的学习和掌握，使我们更加深入地了解了细菌的形态特征和生长习性，同时也提高了我们的操作技能。
在今后的学习和研究中，这些知识和技能将会发挥重要作用。
细菌的分布实训报告
一、实训目的通过本次实训，了解细菌在自然界和人体内的分布情况，掌握细菌采样、培养、鉴定等基本操作技能，为后续相关课程学习打下基础。
二、实训内容1. 自然界细菌分布（1）土壤：土壤是细菌生长的理想场所，其中含有大量的细菌。
土壤中的细菌种类繁多，包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
（2）水体：水体中的细菌种类丰富，包括水生细菌和浮游细菌。
水体中的细菌对水质净化和物质循环具有重要意义。
（3）空气：空气中的细菌主要来自土壤、水体和生物体表。
空气中的细菌数量相对较少，但种类繁多。
2. 人体细菌分布（1）皮肤：皮肤表面分布着大量的细菌，主要分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
皮肤表面的细菌对皮肤屏障功能具有重要作用。
（2）口腔：口腔是细菌栖息的重要场所，其中主要细菌有链球菌、厌氧菌等。
口腔细菌与口腔疾病密切相关。
（3）呼吸道：呼吸道中的细菌种类繁多，包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
呼吸道细菌与呼吸道疾病密切相关。
（4）消化道：消化道中的细菌种类丰富，包括厌氧菌、需氧菌等。
消化道细菌与人体健康密切相关。
三、实训过程1. 自然界细菌采样（1）采集土壤样品：选取代表性土壤，用无菌铲子取适量土壤，放入无菌试管中。
（2）采集水体样品：用无菌瓶采集水样，注意避免污染。
（3）采集空气样品：用无菌采样器采集空气样品，放入无菌试管中。
2. 细菌培养（1）接种：将采集的样品分别接种于营养琼脂、麦康凯琼脂等培养基上。
（2）培养：将接种后的培养基放入培养箱中，在适宜温度下培养。
3. 细菌鉴定（1）观察菌落特征：观察菌落大小、形状、颜色、边缘等特征。
（2）显微镜观察：将菌落制成涂片，用显微镜观察细菌形态、染色特性等。
（3）生化试验：进行糖发酵、氧化酶试验、吲哚试验等生化试验，鉴定细菌种类。
四、实训结果与分析1. 自然界细菌分布本次实训共分离出20种细菌，包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
其中，土壤样品中分离出10种细菌，水体样品中分离出8种细菌，空气样品中分离出2种细菌。
细菌的分离与培养实验报告
细菌的分离与培养实验报告一、实验目的1、掌握细菌分离与培养的基本原理和方法。
2、学习并熟悉无菌操作技术。
3、观察细菌在不同培养基上的生长特性。
二、实验原理细菌在自然界中广泛存在，通常以混合群体的形式存在。
为了研究某一种细菌的特性，需要将其从混合菌群中分离出来，并在适宜的条件下进行培养。
本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法进行细菌的分离，利用不同的培养基为细菌提供生长所需的营养物质，使其能够生长繁殖形成单个菌落，从而达到分离和纯化的目的。
三、实验材料与设备1、样品：土壤、污水等。
2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马丁氏培养基等。
3、试剂：无菌水、75%酒精、碘酒等。
4、仪器设备：超净工作台、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、移液器、接种环、酒精灯等。
四、实验步骤（一）无菌操作准备1、开启超净工作台的紫外灯，照射 20 30 分钟，关闭紫外灯，打开风机，通风 10 分钟左右。
2、用 75%酒精擦拭超净工作台台面和双手。
（二）样品处理1、称取 10g 土壤样品，放入装有 90ml 无菌水的三角瓶中，充分振荡，制成 10⁻¹浓度的土壤悬液。
2、用移液器吸取 1ml 10⁻¹浓度的土壤悬液，加入装有 9ml 无菌水的试管中，充分混匀，制成 10⁻²浓度的土壤悬液。
依次类推，制成10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵等不同浓度的土壤悬液。
（三）平板划线法分离细菌1、点燃酒精灯，在酒精灯旁将接种环在火焰上灼烧灭菌，冷却后蘸取 10⁻³浓度的土壤悬液，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上进行划线。
2、划线的方式可以采用连续划线法或分区划线法。
连续划线法是从平板的一端开始，连续作紧密的波浪式划线，直至平板的另一端；分区划线法是将平板分成四个区域，每次划线都从上次划线的末端开始，使细菌逐渐被分散和稀释。
3、划线完成后，将平板倒置，放入 37℃恒温培养箱中培养 24 48 小时。
细菌的培养实训报告
一、实验目的1. 掌握细菌分离培养的基本原理和方法。
2. 学习使用固体培养基和液体培养基培养细菌。
3. 熟悉无菌操作技术，培养无菌观念。
4. 了解细菌在不同培养基上的生长特征。
二、实验原理细菌的培养是微生物学实验中的一项基本技能。
通过在适宜的培养基上接种细菌，使其生长繁殖，可以观察其形态、颜色、生长速度等特征，从而进行细菌的鉴定和研究。
实验中常用的培养基有固体培养基和液体培养基，固体培养基主要用于分离纯化细菌，液体培养基则用于细菌的繁殖和扩大培养。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基、牛肉膏蛋白胨液体培养基、营养肉汤培养基。
2. 细菌样品：普通土壤、水样、空气等。
3. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、培养箱、显微镜、接种环、无菌试管、无菌吸管等。
4. 实验试剂：无菌生理盐水、无菌水、无菌琼脂、无菌肉汤等。
四、实验方法1. 细菌的分离与纯化（1）取适量土壤、水样或空气样品，加入无菌生理盐水，充分振荡，制成悬液。
（2）取悬液适量，用无菌吸管移至无菌试管中，进行梯度稀释。
（3）取适量稀释液，用无菌接种环接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基上，涂布均匀。
（4）将培养皿放入培养箱中，37℃培养24小时。
（5）观察培养基上菌落的生长情况，挑选单个菌落进行纯化。
2. 细菌的扩大培养（1）将纯化后的菌落接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中。
（2）将培养瓶放入摇床中，37℃培养24小时。
（3）观察细菌的生长情况，调整菌液浓度。
3. 细菌形态观察（1）取适量培养好的菌液，涂布于载玻片上。
（2）用无菌水冲洗载玻片，使菌体沉淀。
（3）用酒精固定菌体，染色。
（4）在显微镜下观察细菌的形态。
五、实验结果1. 细菌分离与纯化：在牛肉膏蛋白胨固体培养基上，观察到不同形状、颜色和大小的菌落，说明细菌已经分离。
2. 细菌扩大培养：在牛肉膏蛋白胨液体培养基中，观察到细菌生长旺盛，菌液浓度逐渐增加。
3. 细菌形态观察：在显微镜下观察到细菌呈杆状、球状等不同形态。
细菌分离培养实验报告
细菌分离培养实验报告细菌分离培养实验报告一、引言细菌是一类微小的单细胞生物，广泛存在于自然界中，包括土壤、水体、人体等各种环境中。
细菌的分离培养是研究细菌的基础工作，通过分离培养可以得到单一种类的细菌，方便进行后续的鉴定、培养和功能研究。
二、实验目的本实验旨在通过分离培养的方法，从土壤样品中分离出不同种类的细菌，并观察其形态特征、生长情况和代谢能力。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 土壤样品- 琼脂培养基- 离心管- 灭菌棉签- 培养皿- 显微镜2. 实验方法（1）准备土壤样品从自然环境中采集适量的土壤样品，并将其放入离心管中。
（2）制备琼脂培养基按照琼脂培养基的配方，将琼脂粉溶解在适量的水中，并加热煮沸，待冷却后倒入培养皿中。
（3）分离培养细菌将土壤样品加入到离心管中，并加入适量的生理盐水，用灭菌棉签搅拌均匀。
然后，取少量土壤样品溶液，用灭菌棉签在琼脂培养基表面均匀涂抹。
将培养皿倒置放置在恒温培养箱中，培养温度为30℃。
（4）观察细菌生长情况在培养箱中培养一段时间后，观察培养皿上是否有菌落形成。
如果有菌落形成，将其分离至新的琼脂培养基上进行纯化培养。
（5）观察细菌形态特征将纯化培养的细菌涂抹在玻片上，用显微镜进行观察。
观察细菌的形态特征，如形状、大小、颜色等。
（6）代谢能力测试通过对细菌进行生理和生化试验，了解其代谢能力。
如对氧气需求的试验、产气能力的试验等。
四、实验结果与讨论经过一段时间的培养后，我们成功地从土壤样品中分离出了多个菌落。
观察这些菌落的形态特征，我们发现它们形状各异，有的呈圆形，有的呈长条状，还有的呈不规则形状。
颜色方面，有的呈白色，有的呈黄色，还有的呈深褐色。
通过进一步的生理和生化试验，我们发现这些细菌具有不同的代谢能力。
例如，通过对氧气需求的试验，我们发现有些细菌是厌氧菌，只能在无氧条件下生长，而有些细菌是好氧菌，需要氧气才能生长。
此外，我们还进行了产气能力的试验，发现有些细菌能够产生气泡，而有些细菌则不能。
细菌的分离培养与纯培养实验报告
实验报告：细菌的分离培养与纯培养一、背景细菌是一类微生物，是生命中最简单的有细胞结构的生物。
它们广泛存在于自然界的各个环境中，包括水体、土壤、空气和人体等。
为了了解细菌的性质、研究其生物学特性以及开发应用价值，分离培养并得到纯培养的细菌菌株是必不可少的步骤。
本次实验旨在通过分离培养的方法，从样本中分离出单一种类的细菌，然后进行纯培养，最终得到该细菌的纯培养物。
二、实验方法和步骤1. 实验材料准备•细菌样本：采集自自然环境或已知细菌株。
•培养基：根据细菌的特性选择适当的培养基，如营养琼脂平板。
•培养基成分：包括葡萄糖、氯化钠、琼脂等。
•培养基容器：如琼脂平板、试管等。
•实验器材：消毒锅、试管架、涂布棒等。
•实验仪器：恒温培养箱、显微镜等。
2. 分离培养实验步骤步骤1：样品的采集和制备从自然环境中采集待研究的细菌样品，例如土壤、水样等。
将样品收集在无菌容器中，并在实验室内进行处理。
步骤2：样品的稀释取一定量的培养基，根据需要的适宜稀释倍数（一般为10-1~10-5），将样品和培养基按比例混合，制成一系列不同稀释度的样品溶液。
使用无菌滴管，分别取适量的样品溶液接种到对应的琼脂平板上。
步骤3：平板涂布使用消毒好的涂布棒，将样品溶液均匀涂抹在琼脂平板上，然后用标签标记每个平板。
涂布完毕后，将平板倒置放在无菌培养箱中，孵育一段时间。
步骤4：单菌落的分离观察培养箱中的平板，找出生长菌落较少、分散且各不相连的菌落。
使用无菌的细胞刮取棒在菌落边缘轻轻划线，然后用刮取棒将菌落刮移到另一块琼脂平板上。
此时，细菌已被成功分离。
3. 纯培养实验步骤步骤1：选取单菌落进行培养从分离得到的细菌菌落中挑选出一个单菌落，利用无菌的细胞刮取棒将其转移到新的琼脂平板中。
步骤2：液体培养将得到的单菌落转移到含有适宜培养基的液体培养基中，如含有营养成分和抗生素的葡萄糖盐水。
利用无菌的试管，接种适量的菌落，并在恒温培养箱中以适当条件培养。
细菌分离移植实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握无菌操作技术，建立无菌观念。
2. 熟悉细菌分离移植的原理和方法。
3. 学会使用平板划线法和稀释涂布平板法进行细菌分离。
4. 了解细菌纯培养的鉴定和保存方法。
二、实验原理细菌分离移植是微生物学实验中常用的基本技术之一，其主要目的是将混合菌中的特定细菌分离出来，得到单一菌落，以便进行后续的鉴定和研究。
细菌分离移植通常采用平板划线法和稀释涂布平板法进行。
平板划线法：将混合菌涂布在琼脂平板上，用接种环划线，使菌体逐渐稀释，最终在适宜的位置形成单一菌落。
稀释涂布平板法：将混合菌进行系列稀释，然后将稀释液涂布在琼脂平板上，待菌落生长后，计数菌落数，从而估算原始菌液的细菌浓度。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、鲜血琼脂平板、麦康凯琼脂平板等。
3. 试剂：无菌生理盐水、无菌水、无菌酒精、无菌碘酒等。
4. 器材：无菌接种环、无菌涂布器、无菌试管、无菌培养皿、无菌移液器等。
四、实验步骤1. 无菌操作：实验前，穿戴无菌操作服、手套和口罩，对实验台、器材进行消毒。
2. 平板划线法：（1）将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种在鲜血琼脂平板上。
（2）用无菌接种环挑取菌落，在平板上划线。
（3）重复划线，使菌体逐渐稀释，直至出现单一菌落。
3. 稀释涂布平板法：（1）将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种在无菌生理盐水中，制成菌悬液。
（2）将菌悬液进行系列稀释，取适量稀释液涂布在麦康凯琼脂平板上。
（3）将平板倒置，放入恒温培养箱培养。
4. 细菌纯培养的鉴定：（1）观察菌落特征，如大小、形状、颜色、边缘等。
（2）根据菌落特征，对细菌进行初步鉴定。
5. 细菌纯培养的保存：（1）将纯培养菌落接种在牛肉膏蛋白胨培养基上。
（2）将培养皿放入恒温培养箱培养，直至菌落生长稳定。
（3）将菌落转移到无菌试管中，加入少量无菌生理盐水，制成菌悬液。
实训六细菌的分离、移植及培养
实训六细菌的分离、移植及培养性状的观察目的要求能利用不同的被检材料进行细菌的分离培养，观察细菌的培养特性，并会进一步移植培养。
仪器及材料温箱、病料、实验用菌种、营养琼脂培养基、肉渣汤（疱肉）培养基、接种环、酒精灯、烙刀、镊子、剪子等。
方法与步骤（一）细菌的分离培养1 ．平板划线分离法（视频四）平板划线是通过将被检材料连续划线而获得单个菌落，因而划线愈长，获得单个菌落的机会也愈多。
具体操作步骤如下：（1）右手持接种环于酒精灯上烧灼灭菌，待冷。
（2）无菌操作取病料若为液体病料，可直接用灭菌的接种环取病料一环；若为固体病料，首先将烙刀在酒精灯上灭菌，并立即用其将病料表面烧烙灭菌，然后用灭菌接种环从烧烙部位插入组织中缓缓转动接种环，取少量组织或液体。
（3）左手持平皿，用拇指、食指及中指将皿盖打开一侧（角度大小以能顺利划线为宜，但以角度小为佳，以免空气中细菌污染培养基）。
⑷将已取被检材料的接种环伸入平皿，并涂于培养基一侧，然后自涂抹处成30〜40°角，以腕力在平板表面轻轻地分区划线。
在细菌病诊断或药敏试验时，为了提高效率，常可将皿盖放于酒精灯附近，左手持培养基，使划线的平面与右侧台面的角度小于90°且在酒精灯附近，右手持接种环取病料连续划线。
（5）划线完毕，烧灼接种环，将培养皿盖好，用记号笔在培养皿底部注明被检材料及日期，倒置37C温箱中，培养18〜24h观察结果（实图6-1）。
凡是分离菌应在划线上生长，否则为污染菌。
2 •倾注分离法取3支融化后冷至50C左右的琼脂管，用灭菌的接种环取一环培养物（或被检材料）移至第一管中，随即用掌心搓转均匀，再由第一管取一环至第二管，搓转均匀后，再由第二管取一环至第三管经同样处理后，分别倒入三个灭菌培养皿中，待凝固后，倒置于37C 温箱中培养24h观察结果。
（实图6-2）（二）厌氧菌的分离培养厌氧菌的分离培养常用肉渣汤（疱肉培养基）培养法。
先将试管倾斜，使培养基表面露出一点，然后接种被检材料或菌种，接种后将试管直立，即封闭液面。
细菌分离方法实训报告
一、实训目的通过本次实训，使学生掌握细菌分离的基本原理和方法，熟悉实验室无菌操作技术，提高学生的实验操作技能和实验报告撰写能力。
二、实训原理细菌分离是指从混杂的微生物群体中分离出纯种细菌的过程。
常用的细菌分离方法包括平板划线法、稀释涂布平板法等。
平板划线法是利用接种环在固体培养基表面划线，使细菌逐渐稀释，从而达到分离的目的。
稀释涂布平板法是将待分离的细菌样品进行系列稀释，然后将稀释液涂布在固体培养基表面，通过培养观察菌落生长，从而分离纯种细菌。
三、实训材料1. 实验仪器：无菌操作台、酒精灯、接种环、培养皿、玻璃棒、镊子、试管等。
2. 实验试剂：无菌生理盐水、琼脂培养基、无菌水、酚红指示剂等。
3. 实验样品：待分离的细菌样品。
四、实训步骤1. 准备工作：将实验仪器和试剂准备好，进行无菌操作台消毒。
2. 细菌样品的处理：取适量待分离的细菌样品，加入无菌生理盐水，充分振荡均匀。
3. 平板划线法：a. 将接种环在火焰上灼烧，待冷却后，蘸取适量细菌样品。
b. 将培养皿底部倾斜，在火焰旁将培养皿稍微打开，用接种环在培养基表面划线。
c. 重复步骤b，划线次数根据实验需要确定。
4. 稀释涂布平板法：a. 将待分离的细菌样品进行系列稀释，具体稀释倍数根据样品的浓度和实验要求确定。
b. 取适量稀释液，用无菌玻璃棒涂布在琼脂培养基表面。
c. 将涂布好的平板倒置，放入培养箱中培养。
5. 观察与记录：培养一段时间后，观察菌落生长情况，记录菌落特征。
6. 结果分析：根据菌落特征，确定分离出的纯种细菌。
五、实训结果与分析1. 实验结果：a. 平板划线法：在培养基表面观察到不同形状、大小、颜色的菌落。
b. 稀释涂布平板法：在培养基表面观察到均匀分布的菌落。
2. 结果分析：a. 平板划线法：通过划线操作，使细菌逐渐稀释，最终分离出纯种细菌。
b. 稀释涂布平板法：通过稀释涂布，使细菌在培养基表面形成单菌落，从而分离出纯种细菌。
六、实训总结通过本次实训，我们掌握了细菌分离的基本原理和方法，熟悉了实验室无菌操作技术。
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实训六细菌的分离、移植及培养性状的观察
目的要求能利用不同的被检材料进行细菌的分离培养，观察细菌的培养特性，并会进一步移植培养。
仪器及材料温箱、病料、实验用菌种、营养琼脂培养基、肉渣汤(疱肉)培养基、接种环、酒精灯、烙刀、镊子、剪子等。
方法与步骤
(一)细菌的分离培养
1．平板划线分离法（视频四）平板划线是通过将被检材料连续划线而获得单个菌落，因而划线愈长，获得单个菌落的机会也愈多。
具体操作步骤如下：
(1)右手持接种环于酒精灯上烧灼灭菌，待冷。
(2)无菌操作取病料若为液体病料，可直接用灭菌的接种环取病料一环；若为固体病料，首先将烙刀在酒精灯上灭菌，并立即用其将病料表面烧烙灭菌，然后用灭菌接种环从烧烙部位插入组织中缓缓转动接种环，取少量组织或液体。
(3)左手持平皿，用拇指、食指及中指将皿盖打开一侧(角度大小以能顺利划线为宜，但以角度小为佳，以免空气中细菌污染培养基)。
(4)将已取被检材料的接种环伸入平皿，并涂于培养基一侧，然后自涂抹处成30～40°角，以腕力在平板表面轻轻地分区划线。
在细菌病诊断或药敏试验时，为了提高效率，常可将皿盖放于酒精灯附近，左手持培养基，使划线的平面与右侧台面的角度小于90°且在酒精灯附近，右手持接种环取病料连续划线。
(5)划线完毕，烧灼接种环，将培养皿盖好，用记号笔在培养皿底部注明被检材料及日期，倒置37℃温箱中，培养18～24h观察结果(实图6-1)。
凡是分离菌应在划线上生长，否则为污染菌。
2．倾注分离法取3支融化后冷至50℃左右的琼脂管，用灭菌的接种环取一环培养物(或被检材料)移至第一管中，随即用掌心搓转均匀，再由第一管取一环至第二管，搓转均匀后，再由第二管取一环至第三管经同样处理后，分别倒入三个灭菌培养皿中，待凝固后，倒置于37℃温箱中培养24h观察结果。
(实图6-2)
(二)厌氧菌的分离培养厌氧菌的分离培养常用肉渣汤(疱肉培养基)培养法。
先将试管倾斜，使培养基表面露出一点，然后接种被检材料或菌种，接种后将试管直立，即封闭液面。
最后置37℃温箱中培养24～48h。
(三)细菌移植
1．斜面移植(实图6-3)
(1)左手持菌种管及琼脂斜面管，一般菌种管放在外侧，斜面管放在内侧，两管口并齐，管身略倾斜，斜面向上，管口靠近火焰。
(2)右手拇指、食指及中指持接种环在酒精灯上烧灼灭菌。
(3)将斜面管的棉塞夹在右手掌心与小指之间，菌种管棉塞夹在小指与无名指之间，将二棉塞一起拔出。
(4)把灭菌接种环伸入菌种管内，挑取少量菌苔将其立即伸入斜面培养基底部，由下而上在斜面上弯曲划线，然后管口和棉塞通过火焰后塞好，接种环烧灼灭菌。
(5)在斜面管口，写明菌种名，日期，置37℃温箱内，培养18～24h，观察生长情况。
2．肉汤移植方法同上，取少许菌落，迅速伸入肉汤管内，在接近液面的管壁轻轻研磨，并蘸取少许肉汤调和，使菌混和于肉汤中。
3．从平板移植到斜面无菌操作打开平皿盖，挑取少许菌落移于斜面管，方法同上。
4．半固体培养基穿刺接种法方法基本同斜面移植，但用接种针挑取菌落，由培养基表面中心垂直刺入管底，然后由原线退出接种针。
(四)细菌在培养基中生长特性的观察（实图6-4、6-5、6-6、6-7、6-8、6-9、6-10） 1．琼脂平板培养基主要观察细菌在培养基上形成的菌落的特征。
(1)大小以直径(mm)表示，小菌落如针尖大，大菌落为5～6mm，甚至更大。
(2)形状有圆形、不规则形、针尖状、露滴状、同心圆形、根足形等。
(3)边缘有整齐、波浪状、锯齿状、卷发状等。
(4)表面形状光滑、粗糙、同心圆状、放射状、皱状、颗粒状等。
(5)湿润度湿润、干燥。
(6)隆起度表面隆起、轻度隆起、中央隆起、脐状、扣状、扁平状。
(7)色泽和透明度色泽有无色、白、黄、橙、红等；透明度有透明、半透明、不透明等。
(8)质地分坚硬、柔软或黏稠等。
(9)溶血性菌落周围有无溶血环。
有透明的溶血环称β型溶血；呈很小的半透明绿色的溶血环称α型溶血；不溶血的为γ型溶血。
2．肉汤培养基：
(1)浑浊度有高度浑浊、轻微浑浊或仍保持透明者。
(2)沉淀管底有无沉淀，沉淀物是颗粒状或棉絮状等。
(3)表面液面有无菌膜，管壁有无菌环。
(4)色泽液体是否变色，如绿色、红色等。
3．半固体培养基具有鞭毛的细菌，沿穿刺线向周围扩散生长，无鞭毛的细菌沿穿刺线呈线状生长。