生物安全兽用基因工程生物制品的安全性评价

在抗猪传染性胃肠炎病毒方面
1995 年,Cumm insM 等人在猪传染性胃肠炎
自然爆发时, 将1~ 12日龄仔猪分为4 组, 分别连 续4 d 口服安慰剂量的干扰素( 1, 10, 20 IU 的 HuINF- A)。结果发现:口服干扰素的仔猪存活 率明显高于对照组。
在研究免疫调节活性方面
兽用基因工程生物制品工业化 生产可能的潜在的危险
国内外研究状况
20世纪70年代，寄生虫专家Odile Puijaon在
世界上率先进行了大肠杆菌表达外源基因的实 验。从此解开以基因重组的方法表达和制备蛋 白质的序幕。世界上的第一个蛋白质疫苗乙肝 疫苗表面抗原疫苗。在乙肝的免疫预防方面发 挥了重要的作用。
水给药的方式进行了重组ChIFN - A抗新城疫病 毒( NDV )的研究。研究表明: 干扰素的抗病毒 效果显著, 同时重组的ChIFN- A对马立克病 (MD )、传染性法氏囊炎( IBD )、传染性支气管 炎( IB )、禽流感(A I)等病毒性疾病具有良好效 果。
在抗口蹄疫病毒方面
2002年, Ch insangaramJ等人研究发现, 大肠
已注册的基因重组载体活疫苗
牛病毒性腹泻病毒载体活疫苗, 载体为痘苗病
毒; 狂犬病病毒基因重组活疫苗, 载体为痘苗病 毒哥本哈根株等
批准进行野外试验
牛瘟病毒、牛流行性白血病病源自文库、牛鼻气管
炎病毒、口蹄疫病毒、兔病毒性出血症病毒等 的基因工程活疫苗和鸡痘-新城疫二联基因工程 活疫苗
公众争论的焦点问题
中的表达, 并对纯化的干扰素和病毒诱导产生的 猪白细胞干扰素进行了生物活性比较, 发现重组 猪IFN - A抗病毒活性比病毒诱导产生的猪白细 胞干扰素约高6倍。 2000年, 夏春等采用PCR技术扩增和克隆了 猪IFN - B基因。
基因工程干扰素的临床应用
在家禽方面。1999年, Marcus P I等人采用饮
对人类健康的威胁与影响
可控性及对目标生物的影响 对非目标生物的影响
现行法律法规能否保障生物安全和社会稳定
兽用基因工程活疫苗的安全性问 题
兽用基因工程活疫苗的安全性问题
兽用基因工程活疫苗对人类、动物健康可能造成何种 危害? 其严重程度( 如症状轻重、愈后情况、人群免疫 力、是否引起流行等) 如何?目前的科学水平还难以给 予准确的回答。但是, 根据国内外对常规弱毒活疫苗 长期应用的经验, 结合近年来在转基因微生物安全性 方面已经积累的一些试验研究数据, 可以将兽用基因 工程活疫苗对人类、动物健康的潜在危害性分为以下 三个主要方面。 致病性，抗药性， 食品安全性
安全性评价
选择合适的载体
质粒或制剂的纯化程度
临床反应
主要脏器组织病理学变化检测
对目标动物及子代动物的影响 试点周围水体和受体动物代谢物的采集及测
定 相关法律法规的制定
Sekellick MT 等人于1994 年首次克隆了鸡
IFN - A 基因( ChIFN- A)。在鸭方面, 1995年 Schu ltzU 等人成功克隆了鸭Ñ 型干扰素基因。
在猪方面, 1986年Lefevre F等人首次克隆出
猪A1 基因。
1990年又实现了猪IFN - A基因在大肠埃希菌
疫苗的安全性问题
一、被注射的、可由宿主细胞吸收的DNA 可以 被整合到宿主的染色体中, 并引起插入突变。 二、外源抗原的长期表达可能导致不利的免疫 病理反应 三、使用编码细胞因子或协同刺激分子的基因 可能具有额外的危害 四、可能形成针对注射DNA 的抗体和出现不利 的自身免疫反应 五、 所表达的抗原可能具有生物学活性
杆菌表达的猪IFN - A对口蹄疫病毒( FMDV )有 抑制作用, 对蛋白质翻译水平的发挥也有抑制作 用, 这可能与双股RNA 依赖的蛋白激酶( PKR ) 有关, 并证明了这一结论。
在抗猪繁殖与呼吸综合征病毒方 面
998年, BuddaertW 等人研究了猪繁殖与呼吸
综合征病毒( PRRSV)与重组表达的猪IFN - A的 相互作用。试验用重组表达的猪IFN - A处理猪 肺巨噬细胞( PAM )后, PRRSV 的增殖显著降 低。
1998年, V andenbroeckK 等人研究发现, 重
组猪IFN - C可以加强伪狂犬病毒灭活苗二次免 疫后的IgG、IgA 反应, 减轻伪狂犬病病毒攻毒 后的发热和体重减轻, 并通过试验证实在伪狂犬 病毒灭活苗中添加一定剂量的重组猪IFN - C可 有效提高黏膜免疫和全身免疫水平。
已批准注册的基因或缺失活疫苗
多杀性巴氏杆菌Lox A 基因缺失疫苗、肠炎
沙门氏菌Aro A 、Aro L 和Sefa 基因缺失疫苗、 鼠伤寒沙门氏菌Ar o A 基因缺失疫苗、绵羊流 产沙门氏菌Stm 反转变异疫苗、胸膜肺炎放线 杆菌APX 基因缺失疫苗、气水假单胞菌基因缺 失疫苗、鹦鹉热衣原体NT G 基因突变株疫苗、 伪狂犬病病毒TK 基因缺失疫苗等。