最新分子实验常用试剂、缓冲液配制

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常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂,它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。

下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。

一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中,它的使用范围很广。

常用的磷酸盐缓冲液有PBS(磷酸盐缓冲盐水),配方如下:-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中,pH值调到7.4,即可得到1×PBS缓冲液。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。

常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。

以下是Tris-HCl缓冲液的配方:- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中,然后添加水调至1 L,pH值调节到目标值即可。

Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似,只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。

3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中,用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。

以下是Glycine缓冲液的配方:- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中,pH值调至8.3,即可得到1×Glycine缓冲液。

1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一,用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。

以下是LB培养基的配方:- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中,加热至溶解,然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。

2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基,常被用于重组DNA的传输。

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.常见试剂配制方法:(1)磷酸盐缓冲液(PBS)的配制方法:-配制PBS需要使用NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4等化学品。

-以10倍浓度配制PBS的浓缩溶液,然后稀释为需要的浓度。

-例如,1倍浓度的PBS可以通过将1升的10倍浓度PBS溶液加入9升蒸馏水来制备。

(2) 神经元无血清培养基(Neurobasal Medium)的配制方法:- 配制Neurobasal Medium需要使用神经元培养基基本成分及其他补充物质。

-根据制造商提供的配方,按照相应比例将各种化学品溶解在无菌蒸馏水中。

-配制好的培养基可以用于维持和培养神经元体外培养。

(3) 洗涤缓冲液(Washing Buffer)的配制方法:-配制洗涤缓冲液需要使用磷酸盐缓冲液(PBS)及其他添加剂。

- 将PBS溶液中加入适当浓度的Tween-20或者Tris-HCl来制备洗涤缓冲液。

-根据实验需求,可以调整洗涤缓冲液的成分和浓度。

(4) 乙醇(Ethanol)溶液的配制方法:-配制乙醇溶液常用的浓度有70%和100%。

- 70%的乙醇溶液可以通过将70ml无菌蒸馏水加入30ml无水乙醇中配制得到。

-100%的乙醇溶液可以直接使用无水乙醇。

2.常见缓冲液配制方法:(1) Tris/Tricine缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Tricine缓冲液需要使用Tris(三羟甲基氨基甲烷)和Tricine(三甘胺酸)等化学品。

- 根据实验要求,在一定PH范围内,按照不同比例混合Tris和Tricine,溶解于适量的蒸馏水中。

(2) 氯化钾缓冲液(KCl Buffer)的配制方法:- 配制KCl Buffer需要使用KCl和其他添加剂。

-将适量的KCl和其他缓冲液成分溶解在蒸馏水中。

-根据实验要求,调整KCl的浓度和缓冲液的PH值。

(3) Tris/Acetate缓冲液的配制方法:- 配制Tris/Acetate缓冲液需要使用Tris和乙酸等化学品。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。

将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。

2、二氧化碳水。

将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。

3、磷酸盐缓冲液。

将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。

4、EDTA标准溶液。

将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。

5、肌酐标准溶液。

将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。

二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。

2、弱碱缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。

3、弱盐缓冲液。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。

以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。

1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。

常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。

可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。

3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。

一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。

4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。

常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。

5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。

常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。

常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。

7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液(Buffer)在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用,它可以维持溶液的稳定性,调节pH值,同时还提供所需的离子环境。

这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法:- 配制0.1 M Tris缓冲液(pH 7.4):a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)粉末。

b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器,并将其放在磁力搅拌器上。

c.用盖住容器的锡纸覆盖容器,加热至溶解。

搅拌以加速溶解过程。

d.继续搅拌,使其冷却至室温。

e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4,直到所需的pH值稳定。

f.用去离子水稀释至总体积100mL。

2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法:-配制10×PBS缓冲液:a.在1L去离子水中加入80gNaCl,2gKCl,14.4gNa2HPO4,2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×PBS缓冲液:a.取10×PBS缓冲液100mL,用去离子水稀释至总体积1L。

3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。

以下是TAE缓冲液的配制方法:-配制50×TAE缓冲液:a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base,57.1 mL 0.5 M EDTA,100 mL冰醋酸。

b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。

-配制1×TAE缓冲液:a.取50×TAE缓冲液20mL,用去离子水稀释至总体积1L。

4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制分子生物学实验常用试剂配制(1) 0.01M PBS缓冲液:一袋粉制PBS缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

(2) 0.01M枸橼酸盐缓冲液:一袋粉制枸橼酸盐缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。

(3)1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl 调至pH8.0,加水至1000ml。

(4) 1‰DEPC水:1mlDEPC加入1000ml新鲜三蒸水中,剧烈震荡20分钟使充分混匀,37o C至少放置2h或过夜,HIRAYAMA HV-50高压灭菌器高温高压30分钟降解DEPC,4℃保存。

(5) 1%琼脂糖凝胶:取琼脂糖0.2g置烧杯中,加入20ml的1×TAE缓冲液,封闭锥形瓶口,放入微波炉内加热,不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液,待琼脂糖全部熔化后取出摇匀,冷却至60℃左右,加入10mg/ml溴化乙锭(EB)1μl,EB的终浓度为0.5μg/ ml,充分混匀。

将温热的凝胶倒入已经放好梳子的凝胶槽中,厚度约为3-5mm,注意不要有气泡,将凝胶放置室温待其自然凝固。

凝固后从胶槽中轻轻取出梳子。

(6)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。

(7) 50×TAE缓冲液:Tris碱242g,17.4mol/L冰乙酸57.1ml,0.5mol/L EDTA (PH8.0)100ml加蒸馏水至1000ml。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。

配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。

下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。

配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。

-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xPBS。

配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。

- 加入0.1%(v/v)Tween-20。

-混合均匀。

配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。

-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。

-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xTBS。

2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。

配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。

-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。

-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。

-用去离子水稀释至所需浓度。

配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。

-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。

-加入1mM十二烷基硫酸钠。

-用去离子水稀释至所需浓度。

3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。

BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。

-加入0.1M硫酸(提取液B)。

-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。

Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。

-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。

-将A液倒入B液中混合,待用。

Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂缓冲液的配制方法1.离心管清洗液配制方法:将500mL蒸馏水加入500mL乙醇中配制而成。

2.TE缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

3.LB培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过,装入含有取10g搅拌均匀的琼脂糖的培养皿中。

灭菌后冷却到45°C左右,然后再倒入培养皿中。

4. 蒸馏水(Milli-Q水)配制方法:使用商用蒸馏水设备如 Milli-Q等,生成去离子水,再通过0.22 μm的滤器进行过滤,获得蒸馏水。

5. LB/Agar培养基配制方法:将10g/L氯化钠、5g/L酵母浸粉、10g/L蛋白胨、15g/L 琼脂加入1L蒸馏水中,调整pH至7.0-7.5、将溶液加热,搅拌溶解,然后使用纸滤器滤过。

将过滤后的溶液倒入培养皿中,灭菌后冷却到45°C 左右。

1.TBE缓冲液配制方法:将1 M Tris-Borate 溶液、0.1 M EDTA 溶液、10% (w/v) Boric acid 溶液按5:19:75的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

2.TAE缓冲液配制方法:将40 mM Tris、20 mM 醋酸和1 mM EDTA 按1:0.5:0.1的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

最终pH值约为8.0。

3. Tris-HCl缓冲液配制方法:将1 M Tris-HCl 溶液加入蒸馏水,调整pH值至所需范围。

4.PBS缓冲液配制方法:将0.2g/LKH2PO4、0.2g/LNa2HPO4、8.5g/LNaCl和0.2g/LKCl加入1L蒸馏水中,调整pH值至7.45. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液)配制方法:将1 M Tris-HCl (pH 8.0) 溶液和0.5 M EDTA (pH 8.0) 溶液以1:200的比例混合,加入蒸馏水配制而成。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。

配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液

分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液

附录一分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液一、酸、碱和盐溶液的配制盐酸(HCl,分子量36.5,重量百分比36%),1 mol/L按以下顺序混合:912.5 mL H2O;87.5 mL浓盐酸。

盐酸(HCl,分子量36.5,重量百分比36%),0.25N/L按以下顺序混合:978.4 mL H2O;21.6 mL浓盐酸。

硫酸(H2SO4,分子量98.07,重量百分比96%),1 mol/L按以下顺序混合:944.8 mL H2O;55.6 mL浓硫酸。

硝酸(HNO3,分子量63.02,重量百分比71%),1 mol/L按以下顺序混合:937.5 mL H2O;62.5 mL硝酸冰醋酸(CH3COOH,分子量60.05,重量百分比99.5%),1 mol/L按以下顺序混合:942.5 mL H2O;57.5 mL冰醋酸。

乙酸(CH3COOH,分子量60.5,重量百分比36%),1 mol/L按以下顺序混合:840.5 mL H2O;159.5 mL 乙酸。

甲酸(HCOOH,分子量46.02,重量百分比90%),1 mol/L按以下顺序混合:957.3 mL H2O;42.7 mL甲酸。

高氯酸(HClO4,分子量100.5,重量百分比70%),1 mol/L按以下顺序混合:914.5 mL H2O;85.5 mL 高氯酸。

氢氧化钾(KOH,分子量56.1),1 mol/L56.0 g KOH溶解于1 L H2O中。

氢氧化钠(NaOH,分子量40.0),1 mol/L将40.0 g NaOH溶解于450 mL H2O中,补加H2O至1 L。

氢氧化钠(NaOH,分子量40.0),10 mol/L将400 g NaOH溶于450 mL水中,补加H2O至1 L。

氨水(NH4OH,分子量35.0,重量百分比25%),1 mol/L按以下顺序混合:924.9 mL H2O;75.1 mL氨水。

尿素(CH4N2O,分子量60.06),8 mol/L分批将480.5 g尿素溶解在600 mL蒸馏水中,加H2O定容只至1 L,过滤灭菌。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。

常用试剂包括化学品、酶、抗体等。

缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。

下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。

其配制方法如下:(1) 准备500ml容量瓶,称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取0.25g的碘固体,并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液,常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。

以下是几种常用缓冲液的配制方法:1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

(2)打开pH计,将电极插入去离子水中进行校准。

(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(5) 加入约5ml盐酸,搅拌均匀,并用盐酸调节溶液至所需pH值。

2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。

(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。

3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制1、6*Loading Buffer(DNA电泳用,50ml配方)组分浓度:100mM EDTA, 40%(V/V) 蔗糖, 0.05%(W/V)xylene cyanol FF, 0.05%(W/V)溴酚蓝配制方法:称取25mg溴酚蓝,25mg xylene cyanol FF,5ml 0.5MEDTA,加入约20ml去离子水,加热搅拌,充分溶解,加入20g蔗糖,去离子水定容至50ml。

2、10*PBS(pH7.2~7.4,分子克隆推荐配方)组分浓度:NaCl 137 mmol/L,KCl 27 mmol/L,Na2HPO4 100 mmol/L,KH2PO4 20 mmol/L配置方法:用800ml去离子水溶解80 g NaCl, 2 g KCl,14.4 g Na2HPO4和2.4 g KH2PO4。

用盐酸调节pH 至7.4,加水定容至1 L,高温高压灭菌,室温保存。

3、20*SSC (pH约7.0)组分浓度:300 mmol/L 柠檬酸三钠,3 mol/L 氯化钠配制方法:称取柠檬酸三钠·2H2O 88.23 g,氯化钠175.3 g,加入800 ml去离子水充分溶解,用14 N HCl 调pH为7.0,去离子水定容至1 L,高温高压灭菌后室温保存。

4、10*Tris-甘氨酸转膜液(pH约8.3)1 L组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸配制方法:甘氨酸144.13 g,Tris 30.29 g,去离子水溶解定容至1 L。

使用前,100 ml 10*转膜液,加入200 ml甲醇,700 ml去离子水成为1*转膜液5、10*Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液(SDS-PAGE电泳缓冲液,pH约8.6)组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸,1%(W/V)SDS配制方法:称取30.29 g Tris,,144.13 g甘氨酸,5 g SDS,加入800 ml去离子水搅拌溶解,定容至1 L,常温保存。

分子实验常用溶液配制

分子实验常用溶液配制

分子实验常用溶液配制一. 常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml 水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g 的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH (6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

53种常见缓冲液配制方法(总结)

53种常见缓冲液配制方法(总结)

53种常见缓冲液配制方法(总结)
第一类:氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液:添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中,按需可加入一定量的氢氧化钠,并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L,即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液,其综合离子强度约为 0.150 mol/L。

2、硝酸缓冲液:将一定量的硝酸钾溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L,即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液,其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

3、三甲基磺酰胺缓冲液:将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L,即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液,其综合离子约为 0.10 mol/L。

第二类:基态缓冲液
1、乙醇缓冲液:将一定量的乙醇溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L,即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液,其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

2、氢氟酸缓冲液:将一定量的氢氟酸溶解于水中,并在此基础上添加一定量的氢氧化钠,使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L,即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液,其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。

常用试剂及缓冲液的配制

常用试剂及缓冲液的配制
0.22um 滤膜抽虑除菌 5. 4℃保存
500mM KCl
配 制 量: 配制方法:
配方: 500mM KCl
100ml
1. 称取 3.73g KCl 固体置于烧杯中 2. 加入 70ml ddH2O,充分溶解 3. 定容至 100ml 4. 高温高压灭菌,室温保存
1M KCl
配方: 1M KCl
配 制 量: 配制方法:
2. 加入 700ml ddH2O,充分溶解定容至 1L
3. 高温高压灭菌,室温保存
10M NH4OAc
配 制 量: 配制方法:
配方: 10M NH4OAc
100ml
1. 称取 77.08g NH4OAc 固体于烧杯中 2. 加入 30ml ddH2O 搅拌溶解 3. 加 ddH2O 定容到 100ml 4. 用 0.22um 滤膜过滤除菌 5. 密封,常温保存
1
10×TE 缓冲液 pH=7.4
配 制 量: 配制方法:
配方:
100mM Tris-HCl
10mM EDTA pH=7.4
1L
1. 量取 1M Tris-HCl(pH8.0)100ml 2. 量取 500mM EDTA(pH8.0) 20ml 3. 加入约 700ml 的 ddH2O,混匀 4. 调 pH 至 7.4 5. 高温高压灭菌 6. 室温保存
KPO4 储液 II K2HPO4
配 制 量: 配制方法:
配方: 1M K2 HPO4
1L
1. 称取 174.18g K2HPO4 于烧杯中 2. 加 ddH2O 定容到 1L 3. 室温保存
100mM KPO 4 溶液
配 制 量: 配制方法:
配方:
0.1M KPO4 pH= Y@25℃
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分子实验常用试剂、缓冲液配制分子实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl组份浓度 1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)配制量 1L配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl 组份浓度 1.5 M Tris-HCl(pH8.8)配制量 1L配置方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer 组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA(pH 7.4,7.6,8.0)配制量 1L配置方法 1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL500 mM EDTA(pH8.0) 20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠组份浓度 3 M 醋酸钠(pH5.2)配制量 100mL配置方法 1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBS Buffer组份浓度 137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4配制量 1L配置方法 1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。

NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

6、10 M醋酸铵组份浓度 10 M醋酸铵配制量 100mL配置方法 1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。

2.加去离子水将溶液定容至100mL。

3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.密封瓶口于室温保存。

注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。

7、Tris- HCl平衡苯酚配置方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。

但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。

同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。

因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。

2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。

所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH 值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。

从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。

②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。

该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。

有助于方便识别有机相。

③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

④重复操作步骤③。

⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。

⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。

⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。

8、苯酚/氯仿/异戊醇配置方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。

氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

9、10%(W/V)SDS 组份浓度 10%(W/V)SDS配制量 100mL配置方法 1.称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。

2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。

3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。

10、2 N NaOH组份浓度 2N NaOH配制量 100mL配置方法1.量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。

2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。

3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。

4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。

11、2.5 N HCl组份浓度 2.5 N HCl配制量 100mL配置方法 1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸(11.6N),均匀混合。

2. 室温保存。

12、5 M NaCl 组份浓度 5 M NaCl配制量 1L配置方法 1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL的去离子水后搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

13、20%(W/V)Glucose 组份浓度 20%(W/V)Glucose配制量 100mL配置方法 1. 称取20g Glucose置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水后,搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至100mL。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

14、Solution I 组份浓度 25 mM Tris-HCl(pH8.0),10mM EDTA,50mM Glucose(质粒提取用)配制量 1L配置方法 1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1M Tris-HCl(pH8.0) 25mL0.5 M EDTA(pH8.0) 20mL20%Glucose(1.11M) 45mLdH2O 910mL2. 高温高压灭菌后,4℃保存。

3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A(20mg/mL)。

15、Solution II组份浓度 250mM NaOH,1%(W/V)SDS(质粒提取用)配制量 500mL配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。

10%SDS 50mL2N NaOH 50mL2. 加灭菌水定容至500mL,充分混匀。

3. 室温保存。

此溶液保存时间最好不要超过一个月。

注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。

16、Solution III 组份浓度 3M KOAc,5M CH3COOH(质粒提取用)配制量 500mL配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。

KOAc 147gCH3COOH 57.5mL2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至500mL。

4. 高温高压灭菌后,4℃保存。

17、0.5M EDTA组份浓度 0.5 M EDTA(pH8.0) 配制量 1L配置方法 1. 称取186.1g Na2EDTA•2H2O,置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值值8.0(约20g NaOH)。

注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1L。

5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。

6. 室温保存。

18、1 M DTT组份浓度 1 M DTT配制量 20mL配置方法 1. 称取3.09g DTT,加入到50mL塑料离心管内。

2. 加20mL的0.01 M 的NaOAc(pH5.2),溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌。

3. 适量分成小份后,-20℃保存。

19、10mM ATP组份浓度 10mM ATP配制量 20mL配置方法 1. 称取121mg Na2ATP•3H2O,加入到50mL塑料离心管内。

2. 加20mL的25mM Tris-HCl(pH8.0),搅拌溶解。

3. 适量分成小份,-20℃保存。

分子生物学实验常用培养基的配制方法1、Ampicillin组份浓度 100mg/ml Ampicillin(100mg/ml)配制量 50mL配置方法 1. 称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2. 加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。

4. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

2、IPTG 组份浓度 24mg/mL IPTG(24mg/mL)配制量 50mL配置方法 1. 称量1.2g IPTG置于50mL离心管中。

2. 加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。

4. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

3、X- Gal组份浓度 20mg/mL X- Gal(20mg/mL)配制量 50mL配置方法 1. 称取1g X-Gal置于50mL离心管中。

2. 加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

4、LB培养基组份浓度 1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl配制量 1L配置方法 1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone 10gYeast Extract 5gNaCl 10g2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

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