高中生物选修一 植物组织培养技术复习进程
高中生物选修1《专题3、4》复习课件
单一
各种物质(大分子、 小分子) 不利于催化一系列 的酶促反应 (1)既能与反应物接 触，又能与产物分 离(2)可以反复利用
一系列
小分子物质 反应物不易与酶接近， 尤其是大分子物质， 反应效率下降 成本低，操作容易
缺点
优点
3. 下列关于固定化酶技术的说法正确的是(
)
A. 固定化酶技术就是固定反应物将酶依附着载 体围绕反应旋转的技术 B. 固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反 应 C. 固定化酶中的酶无法重复利用
• 【答案】 ACD
• (2009年高考江苏卷)下列关于植物组织 培养的叙述中，错误的是 ( ) • A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养 和调节渗透压 • B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响 愈伤组织的生长和分化 • C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱 分化才能形成愈伤组织 • D．同一株绿色开花植物不同部分的细胞 经培养获得的愈伤组织基因相同 • 【答案】 D
A组花芽 B组花芽 C组花芽 D组花芽 E组花芽
A组花芽 B组花芽 C组花芽 D组花芽 E组花芽 •
吲哚乙酸 0 3 ppm 3 ppm 0.03 ppm 0
细胞分裂素 0 0.2 ppm 0.002 ppm 1.0 ppm 0.2 ppm
花芽生长状况 组织切块 形成愈伤组织 愈伤组织分化出根 愈伤组织分化出嫩枝 稍生长
固定化酶的应用实例
1. 固定化酶的反应柱示意图：将酶固定在一种颗粒状 的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底 端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的 小孔，而反应溶液却可以自由出入。 2. 利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例：高果糖浆 的生产需要使用葡萄糖异构酶，它能将葡萄糖转化成果 糖。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入， 使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触， 转化成果糖，从反应柱的下端流出。
浙科版高二生物选修1_《植物的组织培养》复习课件
(2)营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的 大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、 Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、I、Co，有机物则有甘氨 酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。 (3)激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂 素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的 比例等都影响结果。
【解析】 脱分化是指已分化组织在人为离体培 养下分裂形成比较原始的具再分化能力的薄壁细 胞的过程。
【答案】C
3．下面关于植物组织培养的叙述，正确的是( ) A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．通过植物组织培养，可培育出性状更优良的品种 D．植物体的任何一个体细胞经离体培养都表现出全 能养
知识点二
实验操作
知识点一 植物的组织培养 自主预习，自我领悟 难重聚焦，质疑解惑
自主预习，自我领悟
1．原理：植物细胞的全能性。
2．基本过程
菊花组织
发芽培养基
生根培养基 丛状苗
生根
转移至草炭 苗健壮后
移栽
土中(定植)
土或蛭石中
3．影响植物组织培养的条件 (1)材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的 长短等都会影响实验结果。 ①菊花组织培养一般选择已无菌培养过的菊花幼 苗作材料。 ②一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行 组织培养。 ③选取生长旺盛的嫩枝进行组织培养的原因是嫩 枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。
【解析】 再分化后形成的是丛状苗或胚状体。 组培是无性繁殖技术，不能获得与亲本性状不同 的新品种。植物细胞的全能性也是有差异的，有 的细胞不能表现出其全能性。
【答案】A
知识点二 实验操作 自主预习，自我领悟 难重聚焦，质疑解惑
高中生物：技术实践的复 习--重点知识归纳(部分)新人教版选修1
人教版选修一：生物技术实践的复习--重点知识归纳1.植物组织培养的基本过程⑴理论基础：细胞具有全能性。
生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。
⑵细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。
⑶植物组织培养过程：离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，通过细胞分裂形成愈伤组织，其特点是细胞排列疏松而无规则，是一种高度液汽化呈无定形状态的薄壁细胞。
这种由高度分化的植物组织细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。
愈伤组织重新分化成根芽等器官，这个过程叫再分化。
⑷植物组织培养的条件：植物的组织或细胞离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件（温度、湿度、pH、光照等）的作用下就可能表现出全能性，发育成完整植株。
离体的植物组织或细胞叫做外质体。
2.影响植物组织培养的因素⑴不同植物组织或同一植物组织的不同部分，培养的难易程度不同，菊花的组织培养，一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝。
⑵植物组织培养需要适宜的培养基，常用的是MS培养基，在配制好的培养基中，常常添加生长素和细胞分裂素两种激素，菊花茎段的培养比较容易，一般不用添加植物激素。
⑶植物激素：生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，使用的先后顺序以及比例等都会影响植物细胞发展方向。
⑷其他因素：pH、温度、光照等条件也影响植物组织的培养。
3.植物组织培养实验操作⑴制备MS固体培养基可分为配制各种母液和配制培养基及灭菌，灭菌的方法是高压蒸汽灭菌。
⑵外植体要先用70％酒精消毒，再用0.1％氯化汞消毒，最后用无菌水清洗。
⑶接种时要始终在点燃的酒精灯旁进行，对接种工具要火焰灼烧灭菌。
⑷一般地讲，容易进行组织培养的植物，往往是容易进行无性繁殖的植物。
⑸植物组织培养技术有广泛的应用，和普通繁殖方式相比具有很多的优点。
【名师金典】高考生物一轮复习(基础知识整理+重难点聚集)专题3 植物的组织培养技术课件 新人教选修1
（2）脱分化：是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈
（3）再分化：是指脱分化产生的愈伤组织继续进行培养， 又可以重新分化成根或芽等器官的过程。
一、菊花的组织培养 1.植物组织培养技术的原理：细胞全能性。
3.实验操作步骤： 制备 MS固体培养基→外植体→ 消毒→ 接种→培养 →移栽 →栽培。
4.影响因素 （1）材料选择：一般选择未开花植物的茎上部新萌生 的侧枝，容易诱导脱分化和再分化 （2）营养供应：常用的培养基是MS培养基，一般需要 添加生长素和细胞分裂素两种植物激素。
4.脱分化和再分化的比较
5.植物组织培养的培养基 (1)植物组织培养常用的一种培养基是MS培养基，除了大量元 素、微量元素、有机物等，另外还要添加植物激素。MS培养基中 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提 供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主 要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产 生的特殊营养需求。 (2)灭菌方式：高压蒸汽灭菌。 (3)MS培养基与微生物培养基的比较: 微生物培养基以有机营养为主，而MS培养基则需提供大量无机营
（1）植物细胞具有全能性 （2）［①］脱分化 ［②］再分化 植物激素 （3）植物的茎尖或根尖很少被病毒感染，甚至无病毒 （4）细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度 适当调控好不 同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比
5.实验成功的关键因素 （1） 材料的选择：确定花粉发育时期最常用的方法 是 醋酸洋红法 （2）无菌技术：如果出现了污染现象，说明某些操作 步骤，如 培养基灭菌 、花蕾消毒或 接种 （3）接种：接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状 体 （4）培养：温度、水分等条件适宜。要适时 转换培 养基
人教高中生物选修1 课件 专题3 植物的组织培养技术 专题复习方案3
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章末·考法整合
考法一 植物组织培养的一般过程分析)
过程名称 过程
形成体特点
条件
脱分化 再分化
由外植体形 排列疏松、高度液 ①离体
成愈伤组织 泡化的薄壁细胞团 ②提供营养物
质(有机物、
由愈伤组织 形成幼苗或 胚状体结构
有根、芽或有生根 发芽的能力
无机物) ③提供激素
④提供其他适
宜条件
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③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间： 当某3个样品(重复样)的____________________时，其对 应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养 时间。
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解析 本题主要考查植物组织培养相关知识，并以 植物组织培养实验为背景考查实验探究能力。(1)植物组 织培养中外植体常选用茎尖、芽尖，原因是茎尖和芽尖 分裂能力强，易诱导其脱分化，而且一般不含病毒。(2) 从图中比较光照和黑暗条件下PLBs重量曲线可知，光 照条件下PLBs生长优势主要体现在开始生长时间，快 速生长的持续时间及达到生长稳定时重量的大小等方 面。
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答案 (1)新生营养芽细胞分裂能力强，几乎不含病 毒 脱分 化 (2) 生长 起 始较 快 快 速 生长 时 间较 长 PLBs增重的量更多 (3)①灭菌冷却 ②75 ③PLBs重 量和生物碱含量乘积的平均值最大
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考法二 菊花组织培养和月季花药培养的比较
组成植物茎的细胞为体细胞，花药中的花粉粒为生 殖细胞，分别将二者作为外植体进行组织培养时，应注 意区分。下表是对菊花组织与月季花药培养的比较。
制备MS固体培养 选材→材料消毒 基→外植体消毒 →接种和培养→
→接种→培养→ 筛选和诱导→移
【名师金典】新课标高考生物总复习课件：选修1-第3讲植物的组织培养技术和酶的研究与应用
(1)选用新生营养芽为外植体的原因是________，诱导 外植体形成PLBs的过程称________。
(2)与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势 体现在________，________，________。
(3)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的 生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱 产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案 时探讨了以下问题：
二、果胶酶在果汁生产中的应用
1．果胶酶
(1)组成：包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和 果胶酯酶 等，是分解果胶的 一类酶 的总称。
(2)作用： ①分解果胶为可溶性的 半乳糖醛酸 植物细胞壁和胞间层 。
，瓦解
②使浑浊的果汁变得 澄清 ，增加出汁量。
2．酶的活性与影响酶活性的因素 (1)酶的活性：指酶催化一定化学反应的能力，可用 反应速度 来表示。 (2)影响酶活性的因素：温度、pH和 酶的抑制剂 等。
【答案】 (1)木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶的活力不随pH
的变化而变化 单位时间内、单位体积中底物减少(或产物
增加) (2)课题：探究酶保护剂的浓度和提取液的pH的最佳
组合
提取液的Ph
底物的减少量(或产物的产生量)
6.0 6.5 7.0 7.5 8.0
酶保护剂浓度(mol/L)
0.02
0.03
0.04
0.05
3．探究温度和pH对酶活性的影响 (1)实验原理： ①果胶酶活性受温度和pH的影响，处于最适温度和最 适pH时，活性 最高 。 ②果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶活性大小呈 正相关 。 (2)实验结果：温度和pH在很大程度上对酶的 空间结构 会产生影响，过高或过低都会影响酶活性。
苏教版高中生物选修1 1.3《植物组织培养技术》学习要点
第三节植物组织培养技术【学习目标】1.尝试植物的组织培养。
2.用组织培养法培养花卉等幼苗，并进行露地栽培。
3.搜集相关植物组织培养的材料，了解植物组织培养的意义和作用。
【重点提醒】1.植物组织培养的基本原理和基本过程及无菌技术。
2.植物激素在植物组织培养中的作用。
3.组织培养在生产、生活中的应用。
【学习要点总结】一、植物组织培养技术1.概念：指在无菌和人工控制的条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。
2.过程：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成愈伤组织——再经过再分化形成组织或器官——经过培养发育成一颗完整的植株。
愈伤组织的细胞是一种具有分生能力的薄壁细胞。
脱分化：已经分化的植物细胞或组织产生愈伤组织的过程。
再分化：在一定条件下继续培养脱分化的愈伤组织，又可以重新诱导根、芽等器官的分化，这个过程称为再分化。
3.原理：植物细胞具有全能性。
植物细胞的全能性：指植物体的每个体细胞都携带来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
4.分裂素/生长素的比例是控制芽和根形成的一个重要条件比例高时——产生芽,比例低时——产生根分裂素/生长素的顺序是控制分裂和分化的一个重要条件先生长素时——分裂不分化，先分裂素——分裂且分化二、天竺葵的组织培养实验过程：（一）组织培养器具和试剂准备→配置MS培养基→灭菌→取材与接种→观察与记录→转接培养（二）露地栽培培育壮苗→洗净琼脂培养基→选用合适的移植基质→移栽后条件控制三、植物组织培养的应用1.快速繁殖优良植物株系2.培育农作物新品种3.保存和运输种质。
选修1高三总复习课题3 植物的组织培养
课题3 植物的组织培养复习 第 1 页 共 6 页 课题3 植物组织培养专题复习（菊花的组织培养 月季的花药培养）一、基础知识课 标 解 读重 点 难 点1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
植物组织培养过程中使用的无菌技术。
(重难点) 课 标 解 读重 点 难 点1.说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。
2.说出影响花药培养的因素。
3.学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。
选取适宜的培养材料和培养基。
(重难点)菊花的组织培养 1、基本概念细胞分化、全能性、脱分化、愈伤组织 再分化 2、过程※3、影响因素（1）内因：主要是材料的选择。
要选幼嫩一些的。
选未开花植株上新萌生的侧枝 （2）外因营养：无机物（大量元素，微量元素） 有机物（蔗糖 氨基酸 维生素） 微量元素记忆：铁（Fe)门（Mn ）碰（B) 新(Zn)木（Mo ）桶（Cu ）是个典（I ）故（Co ） 有机物注意要加蔗糖月季的花药培养 1、被子植物花粉发育过程被子植物的花粉的发育要经历 时期， 期和 期等阶段。
提问：哪个过程相当于动物精子形成过程？ 2、产生花粉植株的两种途径(与什么相关?) 3、影响因素（1）内因：主要是材料的选择。
要选幼嫩一些的。
初花期，单核期，完全未开发。
不是未完全开放。
用镜检法确定所选的花药是否符合要求。
有两种染色方法 （2）外因课本中没提，但应和菊花组织培养相似环境因素记忆:PH 值和前面相同（5.8），温度因为是花药培养，比较娇贵（25℃），不需要二、实验操作1、菊花的组织培养(流程图）2、月季的花药培养（流程图）（1）制备MS培养基（1）制备MS培养基①配置母液（几种类型？）与左面相同与前面营养相联系：大量元素、微量元素植物激素、小分子有机物②配置培养基(除母液，还加入什么?) （2）材料的消毒配置培养基的过程两洗两消毒：消毒用到的酒精和蔗糖、琼脂、水氯化汞浓度相同，但处理时间稍③灭菌长（2）外植体消毒（过程）三洗两消毒（3）接种（注意事项）（3）接种（注意事项）无菌条件下除去萼片和花瓣，注意菊花茎段切成小段（0.5—1cm），不要损伤花药（原因）同时彻底去不要倒插，每瓶6-8块除花丝（原因）。
生物选修一植物组织培养知识点总结
生物选修一植物组织培养知识点总结植物组织培养是生物选修一专题三的知识点，为了方便同学们复习，接下来店铺为你整理了生物选修一植物组织培养知识点总结，一起来看看吧。
生物选修一植物组织培养知识点：菊花的组织培养植物组织培养的基本过程：细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
植物细胞工程：具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
细胞分化是一种持久性的变化，它的生理意义是：使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。
比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：影响条件材料：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。
植物材料的选择直接关系到试验的成败。
植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。
营养：离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基。
常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
高考生物一轮复习课件：选修一1.4植物的组织培养技术
(4) 人参皂苷易溶于水溶性 ( 亲水性 ) 有机溶
剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用
________ 方 法 ， 操 作 时 应 采 用 ________ 加
热。
【解析】 灭菌是对物体或生物表面及内 部的微生物进行彻底消除，而消毒只是消灭表 面的微生物；霉菌与细菌的菌落特点不同，要 对此进行区分；果胶是植物细胞壁以及胞间层 的主要组成成分之一，所以应用果胶酶可以专 一性地分解果胶，达到分离植物组织的目的； 水浴加热可以适当增加其溶解度。
先使用生长素，后使用细胞 分裂素 先使用细胞分裂素，后使用 生长素 同时使用 有利于细胞分裂，但细 胞不分化
细胞既分裂又分化
分化频率提高
①高：利于根的分化、抑制 (3)用量比例不同，结果也不同： 芽的形成 ②低：利于芽的分化、抑制 生长素用量 的比值 细胞分裂素用量 根的形成 ③适中：促进愈伤组织的生 长
对应学生用书202页
【典例1】 人参是一种名贵中药材，其有 效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生 产人参皂苷的大致流程如下： 愈
单细胞 人参根 伤 细胞培 悬浮培养 诱导 细胞分离 或小细 ――→ ――→ ――→ 切块 组 养物 胞团 织
收集
人参皂苷 提取 培养物干粉
请回答： (1) 配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装 后要进行________。接种前，要对人参根进行 ________。 (2) 用 于 离 体 培 养 的 根 切 块 ， 叫 做 ________ 。培养几天后发现少数培养基被污 染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于________ 污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 ________污染。
不 同 点
生殖 方式
重要考点提示 1. 植物组织培养所利用的植物材料体积 小、抗逆性差，对培养条件要求较高。 2. 培养材料一旦被微生物污染，就会导致 实验失败。原因是微生物增殖快，生长迅速， 消耗养分多，并产生代谢废物毒害培养材料。 无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实 验材料以及操作者的灭菌或消毒。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
(考纲全景透析)高考生物 专题3 植物的组织培养技术基础复习 新人教版选修1
专题3 植物的组织培养技术【高考新动向】植物的组织培养【考纲全景透析】一、植物组织培养的原理与基本过程1、原理：植物细胞全能性。
2、3、基本过程：离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体新植物体二、菊花的组织培养1、影响植物组织培养的因素（1）材料的选取：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
（2）营养供应：常用的培养基是MS培养基，一般需要添加生长素和细胞分裂素两种植物激素。
2、实验操作过程（1）制备MS固体培养基：配制各种母液，配制培养基，灭菌（2）外植体消毒：先用70%的酒精消毒，然后无菌水清洗，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，再用无菌水清洗（3）接种：始终在酒精灯火焰旁进行，对接种工具要用火焰灼烧灭菌。
将菊花茎段插入培养基中时不要倒插。
（4）培养与移栽：在18℃~22℃的无菌箱中培养，得到试管苗后进行移栽。
三、月季的花药培养（1）被子植物花粉的发育过程：花粉母细胞（小孢子母细胞）→四分体时期→单核期→双核期→花粉粒。
（2）产生花粉植株的两种途径（3）影响花药培养的因素：主要因素是材料的选择和培养基的组成。
一般月季的花药培养选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。
（4）培养过程及成功的关键材料的选取：挑选完全未开放的花蕾，确定花粉发育时期最常用发放是醋酸洋红法接种：灭菌后的花蕾，在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。
剥离花药时尽量不要损伤花药。
培养：温度控制在25℃左右，幼小植株形成后才需要光照。
如果花药开裂释放出胚状体，就要在花药开裂后尽快将幼小植株分开【热点难点全析】一、植物组织培养技术1、植物组织培养过程比较2、菊花茎与月季花药组织培养的比较[。
高三生物一轮复习选修专题 植物的组织培养PPT课件
• 【解析】 影响花药培养成功率的因素有很多，如材料和培养条件等； 确定花粉发育时期的常用方法是醋酸洋红法，并且要对所选的材料进行 消毒处理；在组织培养过程中，应根据外植体分化的程度及时更换培养 基。
• 【答案】 D
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• 二、酶的研究与应用 • 1．影响果汁产量的物质及处理方法 • (1)影响果汁产量的物质 • ①种类：纤维素、果胶。 • ②造成的问题：果肉的出汁率低，耗时长；果汁浑浊、黏度高，易发生沉淀。 • (2)处理方法——酶解法 • 常用的酶及其作用特点如下：
• 【答案】 D
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• 正确的是
(2009年高考江苏卷)下列关于固定化酶与固定化细胞的叙述 ()
• A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
• B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧
• C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件
• D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物
最新考纲
高频考点
1.细胞分化与细胞全能性的生产应
1.植物的组织培 用
养
2．植物组织培养的基本原理及其
2．酶在食品制作 培养条件
和洗涤等方面的 3．影响植物组织培养的因素
应用
4．酶在食品制造和洗涤剂生产等
3．制备和应用固 方面的应用
定化酶
5．固定化酶、固定化细胞制备的
优缺点和在生产中的应用
第1页/共40页
第12页/共40页
组成
本质
作用
果胶 酶
多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 果胶酯酶
蛋白 质
催化果胶分解成为 可溶性的半乳糖醛
酸
纤维 C1酶、Cx酶葡萄糖 蛋白
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二、植物组织培养类型：
根据不同分类的依据可以分为不同类型。
根据培养材料不同分为：
（1）完整植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。 （2）胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。 （3）器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花的培养。 （4）组织培养：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。 （5）细胞培养：对单细胞或较小的细胞团进行培养。 （6）原生质体培养：对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养
物理或化学处理； 火烤后的物体； 健康的动植物不与内外部表面接触的组织 内部可能是无菌的（有时也有内生菌，但 不会影响培养，也不会污染）
（二）、灭菌的方法
1、物理方法：干热、湿热、过滤（0.25微 米）、紫外灯、超声波等。 2、化学方法：使用灭菌剂或抗菌素，如酒 精、次氯酸钠、升汞、漂白粉、高锰酸钾、 双氧水、福尔马林等
（2）湿热灭菌
适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、 棉塞、纸等。121℃ 维持20～30min 注意点：加足水、排尽的灭菌一般用高压高温处理，但如果培 养基中某些成分遇到高温分解（如某些生长调节剂 GA3、玉米素等），就需要过滤灭菌。另外酶、 血清等也需要过滤灭菌
（5）火焰灼烧灭菌
用火焰灼烧达到灭菌目的，适用于 接种器皿的灭菌。
（6）消毒剂
适用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。 几种常用消毒剂的效果比较
消毒剂
使用浓度(%)
消毒时间 (min)
乙醇
70-75
0.1-3
新洁尔灭
10～20
5～30
氯化汞 过氧化氢
抗菌素
0.1～1 10～12 4～50mgl-
§1 实验室设置及仪器设备 §2 实验基本操作 §3 培养基的成分及其配制 §4 培养条件的选择
§1 实验室设置及仪器设备
实验室是进行组培研究的主要场所，应 能满足清洗、培养基制备、储藏、无菌 操作、培养、鉴定等多方面的工作。
1．基本实验室
1.1 洗涤 根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制
？ 操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。 室内应配有超净工作台，紫外灯、解剖镜、各种 接种器械等。
1.5 培养室
为了控制培养室的温度和光照时间及其强度，培养 室的房间不要窗户，但应当留一个通气窗，并安上排气 扇。室内温度由空调控制，光照由日光灯控制。一般要 分两间，一为光照培养室，一为暗培养室。培养室外应 有一预备间或走廊。
各种灭菌方法及其使用范围
干热灭菌 湿热灭菌 熏蒸灭菌 过滤灭菌 药剂灭菌 烧灼灭菌 辐射灭菌
玻璃器皿、器械 培养基、蒸馏水、器械、棉塞等 接种室、培养室 液体培养基、蒸馏水 培养材料 器械、瓶口、棉塞、包头纸 接种室、培养间
（1）干热灭菌
适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方 法：150℃ 、40min或120℃ 、120min， 如果发现芽孢杆菌，160℃ 、90～120min
脱分化也称去分化，是指离体条件下生长的细胞、组织 或器官逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生能力，形成 无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程。再分化是由脱分 化形成的愈伤组织重新分化出特定细胞、组织和器官的过 程。
细胞全能性的表达：尽管理论上每个细胞都具 有全能性，但实际表达难易程度却随植物种类、 组织和细胞的不同而异。
1.4 无菌操作室
无菌操作室主要用于实验材料的接种操作，所以又叫 接种室。通常由里外两间组成，外间是缓冲间，用于 准备工作，还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与 接种室的门错开，两个门也不要同时开启，以保证无 菌室不因开门和人的进出带进杂菌。缓冲间内应该设 有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操 作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修，工作人员进入
在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水 槽，用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2 个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大， 可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸，专门 用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还 应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。 地面应耐湿并排水良好。
1.2配制培养基
培养室应配有培养架、摇床、光照培养箱、生化培 养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W，固定在培养 架的侧面或搁板的下面，每层有两支日光灯，距离在 20cm，光照强度为2000-3000lx。
2.2、温室
为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
§2 实验基本操作
灭菌
（一）、灭菌工作是极其重要的。
首先应建立有菌和无菌的概念有菌的范畴： 有菌：凡是暴露在空气中的物体，至少其表面都是有菌的。 如植物的表面、超净工作台的台面，未处理的工具和手等。 无菌：高压高温处理（工具、器皿、培养基等）
配备的主要仪器设备有 ：天平、微波炉、pH计、 药品柜、器械柜、电炉、各种规格的培养瓶、培 养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶、 冰箱等。
? 冰箱用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药
品、彩色胶卷、及保存植物材料。天平应有不同 感量。
1.3 消毒
配备高压灭菌锅、排风灭火设备等。 如果没有条件的话，可以将上述工作合并成一 个准备间，要求是设备的安装和排列要合理、房间 要明亮、透风，地面要便于清洁、防滑。
灭菌方法：将生长调节剂或酶配成一定浓度， 用注射器注入微孔滤膜虑，滤膜孔径0.22～0.45 微米。制培养基时，现将培养基高压灭菌，待降至 50℃左右时，加入适量的激素，然后分装。
（4）射线灭菌
主要是利用紫外灯进行照射，适合实验室 空气、操作台等，灭菌时间20～30min。 注意：关灯后5min后再进入。超净工作台 关灯后要打开风机。
矮牵牛茎尖离体培养培养
人参细胞 悬浮培养
三、植物组织培养技术的理论基础
植物细胞的全能性(Plant cellular totipotency） 从理论上讲，植物体的每个生活细胞都具有该
植物体的全部遗传信息，在特定的离体培养条件 下，具有发育成完整植株的潜在能力。
分化、脱分化与再分化：分化是指个体发育过 程中，不同部位的细胞形态结构和生理功能发生 改变，形成不同组织或器官。