107853-药理学实验3盐酸利多卡因半数致死量_LD50的测定
药物的安全性评价及半数致死量的测定
【目的和原理】解药物半数致死量（LD50）测定的原理、方法、计算过程、意义。
LD50属质反应的资料类型，其实验结果只有质的区别，而无具体的测量值。
其数据是通过计数（即数阳性反应的个数）而取得的，通常以百分率（%）或小数来表示。
LD50是药物引起半数实验动物死亡的剂量。
LD50是衡量药物的急性毒性大小与效应力强弱的重要指标，是评价药物优劣的重要参数。
LD50越大表示毒性越小。
与LD50意义相近的还有半数有效量（ED50）。
ED50是引起半数实验动物产生阳性效应的剂量。
它是衡量药物效应力强弱的重要指标，ED50越小，药效越强。
LD50和ED50比值称为药物的治疗指数（TI）。
通常以此指标表示药物的安全性大小，越大越安全，但有些药物仅用TI又不能完全表示出药物安全性之大小。
因此，安全性还参考1%的致死量（LD1）与99%（ED99）有效量之比值或5%致死量（LD5）与95%有效量（ED95）之比值。
LD50的测定方法可分为两大类，即序贯实验法与分组实验法。
其计算方法可有20多种，其中以Bliss 法，在数理上最为严谨，结果很精密，但步骤多，计算繁复，对学生负担重。
点斜计算法（综合法），是一种计算简便，精确性好，又可计算全部参数的一种计算法，优于其他优化法。
序贯法，用动物少是此法最大优点，但它只是应用于作用出现快的药物，本实验重点介绍此种计算法。
【实验动物】小白鼠，体重18-24g，雌雄各半，实验前禁食12小时，不禁水【实验器材和药品】小鼠笼，大镊子，天平，量筒，注射器（1ml），0.01%硝酸士的宁【实验步骤和观察项目】1. 实验步骤（1）预实验：①探索剂量范围：先找出100%与0%的致死量（或阳性反应的剂量）为实验的上下限剂量（Dmax 和Dmin）。
取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax；如降低一剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
盐酸普鲁卡因半数致死量_LD50的测定
启动微机，运行BL-410程序，进入其数据处理选项， 再进入半数有效量选项。
一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关 数据。
单击“计算”按钮，计算LD50等参数。
【注意事项】
给药剂量准确 小鼠腹腔注射 脱臼处死实验用过小鼠
【思考题】
1.测定LD50有何药理意义？
2.为何选择测定LD50作为衡量药物 毒性大小的指标?
C母 D 等容注射量
药液配制的具体步骤：
预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体 重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
C母
D 等容注射量
C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml
每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml
【实验材料】
实验动物：小白鼠，体重18～２２g，♀♂各半，
实验前禁食12h,不禁水。
实验器材：计算机（BL-410机能实验系统）、电 子秤、注射器、小鼠笼。
实验药品：盐酸普鲁卡因 （Procaine hydrochloride）
【实验步骤】
预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小剂
(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料
盐酸普鲁卡因产生毒性作用的原理:
盐酸普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产
生全身性毒性反应，主要表现为枢神经系统先兴奋后抑
制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为
神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭 而死亡。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
实验:普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
【目的】 理解LD50的概念，掌握LD50的测定方法及计算。 【测定LD50的意义】 LD50反映药物的毒性大小。
DJY
1
安全性：治疗指数＝LD50/ED50 比值大安全
性大
安全范围：当药物的治疗效应与致死效应曲
线不平行时，要看ED95和LD5的距
离，距离越大越安全。
DJY
2ห้องสมุดไป่ตู้
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的死亡数。
DJY
7
【结果与统计】
药理学-半数致死量(LD50)测定
半数致死量(LD50)
特点：1、是药物的剂量反应曲线上最敏感的 一点。
死亡率
50%
剂量
LD50
2、 测量简单，准确性高，误差小，易重复。
2020/7/28
实验目的
测定药物的LD50 了解常用的测定和计算方法
2020/7/28
实验方法
改良寇氏法 可直接用实验动物的死亡率进行计算，方法简 单，计算简便。
2 一组小鼠编号1-25，另一组小鼠编号26-50。 标签上排写编号，下排写体重，体重取整数。
3 根据Excell软件取随机数字,排序随机数字。 4 按随机数字取小鼠于另一鼠笼20/7/28
实验结果
解磷定LD50的实验结果
组别
1# 2# 3# 4# 5#
小白鼠 浓度
(只) （mg/ml）
10
1.5％
10
1.2％
10
0.96％
10
0.77％
10
0.61％
剂量 (mg/kg)
300 240 192 154 123
对数剂量
2.48 2.38 2.28 2.18 2.08
动物死亡数 死亡率
(只)
(％)
注：动物死亡数只统计给药后2小时内的死亡数
2020/7/28
3
1.5％
300
3
2#
3
0.75％
150
1
3#
3
0.375％
75
0
4#
3
0.188％ 35.5
0
2020/7/28
实验步骤
小鼠50只，称重，随即分为5组
1＃组10只
腹腔注射 1.5%的解 磷定溶液
设计性试验半数致死量的测定
序贯法最简便，且节省动物，但不能求得误差，无法比较，故通常 较少使用。
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17
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18
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8
直线方程式中b是直线的斜率，表示该直线的斜度。斜率愈大，表示该毒物的剂量 有微小改变时，即能引起死亡率的较大改变，所以可通过斜率比较两种以上LD50 相近的毒物的毒性性质，或比较一种毒物在几种不同染毒途径时，表示一种实验动 物对该毒物敏感性的分布，斜率越大的直线，表示该毒物 (或染毒方式)的毒性越大。 如果直线的斜率相等，则表示毒物的毒性也基本相似。
鱼病学实验
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1
实验八
半数致死量的测定
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2
目的
学习科研试验的设计和实施 学会半数致死量的测定
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3
原理
半数致死量 (LD50) 是指一个毒物在实验生物的群体中可引起半数死亡的剂量。在毒理学中 常用以测试某一化学物的急性毒性。最为原始的急性毒性指标是最小致死量(MLD)和绝对致 死量(LD100)。前者指在一个群体中仅仅足够引起个别生物死亡的剂量，后者指生物群体中 全部出现死亡的剂量。但如果所用的动物数增多，则在一定范围内，还可能发现更为敏感 的或耐受的动物，则最小致死量将随之不断下降，而绝对致死量也可能不断增高。因此， 这种方法所取得的参数是不够正确的，目前已少采用。如用动物实验制得剂量-反应曲线， 再用统计学方法予以处理，所得半数致死量，则较有代表性，因此，它已成为常用的指标。 毒物的毒性是LD50的倒数，即LD50的数值越小，毒性越高。反之亦然。在毒物的毒性分级 中，常根据LD50的大小将毒性分成剧毒、高毒、中毒、低毒，或实际无毒等数级。
药物半数致死量(LD50)的测定分析
药物半数致死量(LD50)的测定 生理科学实验的实验设计
100
氧 80
饱 和 60
度 40 % 20
氧分压(kPa)
2.67 5.33 8.00 10.7 13.3
图1 氧分压与氧饱和度的关系
纵标目 表2
三线表
表号、表题
氨中毒实验结果
动物 实验兔 对照兔
氯化铵 (ml/kg）
中毒发生时间(min) 中毒症状 抢救效果
实验结果的处理、打印、分析
实验设计书
题目（居中） 设计者（居中） 专业、班别（居中） 指导老师（居中）
一、 二、 三、
1. 2. 3. 4. 四、 五、
实验目的 立题依据 (附2～3条参考文献) 实验方案 实验材料 实验分组 观察指标 实验方法与步骤 创新点 实验结果预测
设计性实验的实验
一、基本程序
1. 立题：科学性、先进性、可行性、实用性 2. 建立假说：预期结果 3. 设计：实验研究的计划和方案 4. 实验准备、预实验及正式实验 5. 结果分析处理及撰写论文
二、实验设计的三大要素
1. 实验对象：选择要求 2. 处理因素：主要因素、标准化、非处理因素 3.观察指标：选择原则（特异性、客观性、重
LD50(medianlethal dose)：
药物引起半数实验动物死亡的剂量。
治疗指数(therapeutic index TI)：
LD50和ED50的比值，药物安全性指标。
安全范围(margin of safety)：
LD5 ~ED95之间的距离，其值越大越安全。
可靠安全系数(certain safety factor)：
LD1和ED99的比值，可靠性更高。
LD50实验
实验三普鲁卡因半数致死量（LD50）的测定和计算【目的】通过实验了解测定药物LD50的方法、步骤和计算过程。
【材料】1、器材：鼠笼，天平，1ml注射器。
2、药品：2%盐酸普鲁卡因溶液，苦味酸溶液。
3、动物：小鼠（体重17～25克，雌雄均可，应注明性别）。
【方法和步骤】1、探索剂量范围：取小鼠8-10只，以2只为一组，选择剂量间距较大的一系列剂量，分别给各组腹腔注射盐酸普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围（致死量约在105～150mg/kg范围内）。
本步骤可由教研室预先进行。
2、正式试验：在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般用5个剂量，按等比级数增减，相邻剂量之间比例为1：0.7或1：0.8），各剂量组动物数为10只，分别用苦味酸标记。
动物的体重和性别要分层随机分配，完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整，尽可能使动物的死亡率在50%上下，死亡率为0%或100%时，不能用于计算。
实验以全班为一个单位，可以一个组观察一个剂量组（10只小鼠），或每组各作每一剂量组的2只小鼠，务求用药量准确，注射方法规范，以减少操作误差，避免非药物所致的死亡，得到较理想的结果。
中剂量组：200mg/kg，2%浓度换算成体积为：0.1ml/10g，相邻剂量之间比例为1：0.85常态，故观察30分钟内的死亡率。
4、计算LD50及其95%可信限：LD50计算方法有多种，这里介绍最常用的加权直线回归法（Bliss法）。
此法虽计算步骤稍繁，但结果较精确，实际应用时可借助于计算机。
首先，用较大的剂量间距确定致死剂量的范围，进而在此范围内设定若干剂量组，剂量按等比方式设计，相邻两个剂量间距比例在0.65-0.85之间，给药后观察7-14天内动物一般情况和死亡数，根据死亡率计算LD50。
药物半数致死量(LD50)的测定
对照原则
例二：家兔失血性休克及其抢救
空白对照组 单纯失血组 失血+抢救组 失血+右旋糖酐组 失血+NaHCO3组 失血+山莨菪碱组
两组比较证明休克 是由于失血引起。 两组比较证明休克 恢复是抢救的结果。
组间比较分析何种 抢救措施更好。
实验设计的三大原则
对照
医学科 学研究
随机 重复
随机分配：实验对象分配到各 组的机会均等。
LD50(median lethal dose)：
药物引起半数实验动物死亡的剂量。
治疗指数(therapeutic index TI)：
LD50和ED50的比值，药物安全性指标。
安全范围(margin of safety)：
LD5/ED95的值或 LD5 ~ ED95之间的距离。
LD50 、ED50的意义
药物半数致死量 （LD50）的测定
实验要求
▪掌握测定药物LD50和ED50的药理学 意义和方法（改进寇氏法） ▪熟悉序贯法的特点、实验方法和计 算方法
【相关知识】 ED50(median effective dose)：
在一定的实验条件下,一定数量的动物用药 后，约半数实验动物出现疗效的药物剂量。
3.实验设计
医学科 学研究
实验设计也称为科研构思，是针对 题意为验证假说所形成的基本思路和设 想。要掌握三要素和三原则。
实验对象 处理因素 观察指标
对照原则 随机原则 重复原则
实验设计的三大要素
医学科 学研究
1.实验对象 (相似性、特殊性、标准化、
规格化、 经济性原则)
1)人 2)动物
①合适、经济。
②品种、纯度。
③年龄、性别、体重、健康状况。
常见的药物半数致死量(LD50)的测定
常见的药物半数致死量(LD50)的测定1. 阿司匹林阿司匹林作为一种常见的解热镇痛药，其LD50值为每千克体重250500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服阿司匹林的LD50值约为每千克体重200400毫克。
2. 青霉素青霉素是一种广泛应用的抗生素，但其对某些动物（如小鼠、大鼠）的LD50值较高，约为每千克体重500010000单位。
需要注意的是，青霉素的毒性因物种而异，对人类的毒性较低。
3. 地高辛地高辛是一种用于治疗心脏病的药物，其LD50值为每千克体重13毫克。
在犬体内的实验显示，地高辛的LD50值约为每千克体重0.52毫克。
4. 吗啡吗啡是一种强效镇痛药，其LD50值为每千克体重300500毫克。
在大鼠体内进行的实验表明，口服吗啡的LD50值约为每千克体重400600毫克。
5. 苯巴比妥苯巴比妥是一种镇静催眠药，其LD50值为每千克体重200500毫克。
在小鼠体内进行的实验显示，苯巴比妥的LD50值约为每千克体重300400毫克。
需要注意的是，LD50值并非绝对固定，它受实验条件、给药途径、动物种类等多种因素影响。
因此，在评估药物安全性时，应以实际实验结果为准，并结合其他毒性指标进行综合分析。
同时，我们还需关注药物在人体内的实际毒性，以确保用药安全。
当然，让我们继续探讨药物半数致死量(LD50)的测定，并补充一些额外的信息。
6. 氯霉素氯霉素是一种广谱抗生素，其对小鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
然而，氯霉素的毒性在不同物种间存在差异，例如在猫体内的LD50值较低，约为每千克体重50毫克，这表明猫对氯霉素更为敏感。
7. 哌甲酯（利他林）哌甲酯是一种用于治疗注意力缺陷多动障碍（ADHD）的药物，其LD50值为每千克体重190毫克（大鼠口服）。
需要注意的是，哌甲酯的毒性作用可能与其药理作用相似，因此在用药时需严格控制剂量。
8. 硫酸亚铁硫酸亚铁是一种常用的补铁药物，其对大鼠的LD50值为每千克体重250300毫克。
半数致死量_实验报告
一、实验目的1. 了解药物半数致死量（LD50）的定义及其在药理学中的意义。
2. 掌握LD50的测定方法及计算过程。
3. 通过实验，了解药物剂量与毒性反应之间的关系。
二、实验原理半数致死量（LD50）是指在特定条件下，能够引起实验动物一半死亡的药物剂量。
LD50是衡量药物毒性的重要指标，对于新药筛选、临床安全用药及药物不良反应的监测具有重要意义。
本实验采用寇氏法（Karber法）测定药物LD50。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠100只，体重18-22g，雌雄各半。
2. 实验药品：待测药物（如普鲁卡因）。
3. 实验器材：电子秤、注射器、灌胃针（16号）、注射器（0.25、1、2、5ml）、吸管（0.1、0.2、0.5、1、2、10ml）、容量瓶（10、25、50ml）、烧杯（10、25、50ml）、滴管、外科剪、镊子等。
四、实验方法与步骤1. 实验动物的选择：选用初成年的小白鼠，体重18-22g，雌雄各半。
实验前对动物进行检疫，确保健康。
2. 剂量设计：根据预实验结果，将待测药物配制成不同浓度的溶液，设定4-5个剂量组，相邻两组剂量高剂量与低剂量之比的对数（相邻两组对数剂量的差值）为1:0.6～0.9。
3. 实验分组：将小白鼠随机分为5组，每组10只，雌雄各半。
4. 灌胃给药：按照预定剂量，用灌胃针将药物溶液灌胃给予小鼠，观察7天，记录不同剂量组小鼠的死亡情况。
5. 数据处理：计算每组小鼠的死亡率，根据寇氏法计算LD50。
五、实验结果1. 各剂量组小鼠的死亡率如下：剂量组 | 剂量（mg/kg） | 死亡率（%）-------|--------------|-----------1 | 0.06 | 202 | 0.12 | 403 | 0.24 | 604 | 0.48 | 805 | 0.96 | 1002. 根据寇氏法计算LD50：LD50 = 0.48 × 2 × (1 - 0.2) / (0.8 - 0.2) = 0.32 mg/kg六、实验讨论1. 本实验采用寇氏法测定药物LD50，结果表明待测药物的LD50为0.32 mg/kg，说明该药物具有一定的毒性。
107853-药理学实验3盐酸利多卡因半数致死量_LD50的测定
背景知识
特殊毒性试验（致畸、致癌、 致突变） 毒性试验 长期（慢性）毒性试验
急性毒性试验
❖ 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能
够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂 量的对数值表示。
❖ 测定LD50意义
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数。 (2)评价药物安全性---治疗指数 TI（ Therapeutic Index ）
1．全班按照雌、雄小鼠分别进行均衡随机分组（采用Excel软件， 随机数函数分组法），雌鼠编号从1~24，雄鼠编号从25~48。
2. 各组按照下表的剂量配制等比稀释液，每组配制2mL于离心管中，
母液浓度为20mg/mL，溶剂为生理盐水。
组别
各组给药剂量 等比稀释液浓度 所需母液的体积
（mg/kg)
(mg/mL)
【注意事项】
✓ 每只小鼠的给药剂量要准确； ✓ 注意选择正确的给药部位，进针的深浅要
一致；
【作业】
1.计算置信区间为95%的LD50。 2.还有哪些衡量药物安全性的指标。
（mL）
1
38.40
3.840
2
48.00
4.800
3
60.00
6.000
4
75.00
7.500
5
93.75
9.375
6
117.19
11.719
7
146.48
14.648
8
183.11
18.311
3.根据每只小鼠的实际体重，计算每只小鼠的注 射量，给药途径为腹腔注射。
注：如果体重恰好为20g，则注射量为0.2mL； 若体重>20g，注射量以满足给药剂量 为要； 若体重<20g，以生理盐水补足0.2mL，保证每只
半数致死量测定
利多卡因半数致死量的测定时间：08-11-21 授课教师：叶和杨目的：了解用小鼠测定药物的半数致死量的实验方法，掌握一些药理学实验基本技能，学会一种计算LD50的简单方法。
原理：一、简单复习质反应、量反应、LD50、ED50、治疗指数的概念及意义：量反应：指效应可用连续数量值表示的反应，如血压、脉搏等。
质反应：指效应用是通过计数（即数阳性反应的个数）而取得的，通常以百分率（％）来表示，如死亡。
LD50在质反应是指药物引起半数实验动物死亡的剂量，是衡量药物的急性毒性大小的重要指标。
ED50在质反应则是指引起半数实验动物产生阳性效应的剂量，是衡量药物效应力强弱的重要指标。
药物的治疗指数：LD50与ED50的比值称为药物的治疗指数（therapeutic index,TI）。
通常以此值表示药物安全性大小，但其又不能完全表示出药物安全性的差别。
因此，安全性还应参考1％致死量（LD1）与95％有效量（ED95）之比值。
二、介绍半数致死量：是指引起实验动物总体的半数死亡的药物剂量，是以动物死亡或存活作为质反应指标的。
通常以mg/kg表示。
半数致死量的测定是检定药物毒性的一种常用方法，在药理学和毒理学的研究中应用十分广泛。
半数致死量的计算方法很多，本实验只介绍寇氏法。
药物致死量（Lethal Dose 简称LD）有三种表示方法：最小致死量（MLD），半数致死量（LD50）和全致死量（LD100）。
一般来说，一个药物的剂量与反应率之间有着一定的关系。
作图，就可以得到一个以50%反应率处的点为对称的S形曲线。
这是因为在一大群生物对象中，特别敏感或特别不敏感的总是占少数，而大多数的敏感情况总是比较接近的，形象地说它符合“两头小，中间大”的规律。
由这种曲线可以看出，曲线两端比较平坦，灵敏度差，剂量不易确定，也就是说，MLD和LD100的误差是比较大的，而只有在LD50处曲线的斜率最大，灵敏度最高，当剂量稍有变动时，反映率就发生明显的变化。
盐酸普鲁卡因半数致死量的测定
药物急性半数致死量（LD50）的测定【目的】了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定方法和计算过程。
【原理】LD50是指在一群动物中能使半数动物死亡的剂量。
由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值大多在50％质反应的上下呈正态分布。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，而在50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地反映药物毒性的大小。
LD50的测定方法很多，例如目测机率单位法、加权机率单位法（Bliss氏法）、寇氏法（Karber 氏法）及序贯法等，其中Bliss氏法最常用。
此法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相等（不应太少，一般10-20只），剂量范围接近或等于0%-100%死亡率之间，一般分5-8个剂量组。
【实验材料】1、动物：小白鼠，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁食12小时，不禁水。
2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。
3、器械：小鼠笼，天平，注射器（1mL），电子计算器。
【方法和步骤】（一）预备实验1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（Dm及Dn）。
方法是先取出小鼠9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药，如3只小鼠全死则降低剂量一半，如全不死则增加剂量一倍，如部分死亡，则按2：1的比例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，一般分5-8个剂量组。
计算各组剂量：要求各组剂量按等比级数排列，在找出Dm及Dn和确定组数后，可按下列公式求出公比r：r =（G-1）√D m/D n再按公比计算各组剂量D1,D2,D3,D4,D5……Dm，其中D1=Dn=最小剂量，D2=D1r;D3=D2r; D4=D3r; D5=D4r; ……DG=DG-1r。
盐酸利多卡因检验标准
盐酸利多卡因检验标准盐酸利多卡因检验标准【通用名称】盐酸利多卡因【其他名称】盐酸利多卡因盐酸利多卡因拼音名：Yansuan Liduokayin 英文名：Lidocaine Hydrochloride 书页号：2000年版二部－610 C14H22N2O.HCl.H2O 288.82 本品为N-（2,6-二甲苯基）－2－（二乙氨基）乙酰胺盐酸盐一水合物。
按无水物计算。
含C14H22N2O.HCl 不得少于99.0％。
【性状】本品为白色结晶性粉末；无臭，味苦，继有麻木感。
本品在水或乙醇中易溶，在氯仿中溶解，在乙醚中不溶。
熔点本品的熔点（附录Ⅵ C）为75～79℃。
【鉴别】取本品0.2g，加水20ml溶解后，照下述方法试验。
(1) 取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录Ⅵ C），熔点为228 ～232 ℃，熔融时同时分解。
(2) 取溶液2ml ，加硫酸铜试液0.2ml 与碳酸钠试液1ml,即显蓝紫色；加氯仿2ml, 振摇后放置，氯仿层显黄色。
(3) 溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。
(4) 本品的约外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集357图）一致。
【检查】酸度取本品0.20g ，加水40ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH值应为4.0 ～5.5 。
溶液的澄清度取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液应澄清；如显浑浊，与1 号浊度标准液（附录Ⅸ B）比较，不得更浓。
水分取本品，照水分测定法（附录Ⅷ M第一法A）测定，含水分为5.0％～7.5 ％。
炽灼残渣不得过0.1 ％（附录Ⅷ N）。
重金属取本品2.0g，加冰醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使溶解成25ml，依法检查（附录Ⅷ H第一法），含重金属不得过百万分之十。
【含量测定】取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酸汞试液 5 ml与结晶紫指示液1 滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。
盐酸普鲁卡因半数致死量的测定
药物急性半数致死量（LD50）的测定【目的】了解药物半数致死量(LD50)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定方法和计算过程。
【原理】LD50是指在一群动物中能使半数动物死亡的剂量。
由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数值大多在50％质反应的上下呈正态分布。
在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，而在50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地反映药物毒性的大小。
LD50的测定方法很多，例如目测机率单位法、加权机率单位法（Bliss氏法）、寇氏法（Karber氏法）及序贯法等，其中Bliss氏法最常用。
此法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相等（不应太少，一般10-20只），剂量范围接近或等于0%-100%死亡率之间，一般分5-8个剂量组。
【实验材料】1、动物：小白鼠，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁食12小时，不禁水。
2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。
3、器械：小鼠笼，天平，注射器（1mL），电子计算器。
【方法和步骤】（一）预备实验1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（Dm及Dn）。
方法是先取出小鼠9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药，如3只小鼠全死则降低剂量一半，如全不死则增加剂量一倍，如部分死亡，则按2：1的比例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，一般分5-8个剂量组。
计算各组剂量：要求各组剂量按等比级数排列，在找出Dm及Dn和确定组数后，可按下列公式求出公比r：r =（G-1）√D m/D n再按公比计算各组剂量D1,D2,D3,D4,D5……Dm，其中D1=Dn=最小剂量，D2=D1r; D3=D2r; D4=D3r; D5=D4r; ……DG=DG-1r。
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小鼠的腹腔注射方法
抓好后将小鼠保持头低位，臀部在高位
给药位置：下腹部，腹中线的左右两侧； 给药方法：先刺入皮下，再将针头以45度角 刺入腹腔内约1cm，切不可过深，注入药液。
4. 观察30min，统计各组小鼠的死亡数（停止呼吸），计
算各组的死亡率。
5.计算LD50
LD50＝lg-1 [Xm－i(Σp－0.5)] ❖ Xm：最大剂量组剂量的对数值。 ❖ i：相邻两组给药剂量（D）对数值之差。 ❖ P：各组动物的死亡率，用小数表示。 ❖ ΣP：为各组动物死亡率的总和。
静脉给药，对中枢神经系统有兴奋和抑制双相作用。 ✓ 血药浓度较低时，出现镇痛和思睡、痛阈提高； ✓ 随着剂量加大，作用或毒性增强，出现肌肉震颤、惊厥昏
迷及呼吸抑制等中毒反应。
❖ LD50的测定方法有很多。如：加权机率单位法 (Bliss 氏法)、寇氏法（Karber氏法）等。
❖ Bliss 法要求剂量按等比级数排列，每组小鼠数相 等，剂量范围接近或等于0~100%死亡率之间，一 般分为5~8个剂量组。
❖ 我国卫生部规定，Bliss法是作为新药LD50测定评 定必须采用的方法。
【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定方法和计算方法。 2.了解盐酸利多卡因给药后动物所产生的效应。
【实验材料】
❖ 实验动物：小白鼠（昆明种），体重18～22g， ♀♂各半。
❖ 实验器材：电子秤、注射器、小鼠笼。 ❖ 实验药品：盐酸利多卡因（20mg/mL）
C母
D 等容注射量
✓Cm=183.11mg/kg / 10ml/kg=18.311mg/ml
✓每组等比稀释液量=每组动物总重×用药量 =200g×0.1ml/10g=2ml
✓计算所需的盐酸利多卡因母液（20mg/mL）的体积，用生理盐 水做溶剂。
【实验步骤】
❖ 正式实验（全班8组，每组6只小鼠，雌雄各半）
【实验步骤】
❖ 预备实验
1．探索剂量范围：根据经验或文献，通过实验找出100%死亡的最小 剂量及0%死亡的最大剂量。此即上下限剂量（Dm，Dn）。
2．确定组数、计算各组剂量：
❖ 例如：组数（n）：8组
❖ 按公式求公比r:
r n1 D m Dn
R=1.25
❖ 按公比求各组剂量：D1，D2，…,Dn，其中D1= Dn=最小剂量、
（mL）
1
38.40
3.840
2
48.00
4.800
3
60.00
6.000
4
75.00
7.500
5
117.19
11.719
7
146.48
14.648
8
183.11
18.311
3.根据每只小鼠的实际体重，计算每只小鼠的注 射量，给药途径为腹腔注射。
注：如果体重恰好为20g，则注射量为0.2mL； 若体重>20g，注射量以满足给药剂量 为要； 若体重<20g，以生理盐水补足0.2mL，保证每只
【注意事项】
✓ 每只小鼠的给药剂量要准确； ✓ 注意选择正确的给药部位，进针的深浅要
一致；
【作业】
1.计算置信区间为95%的LD50。 2.还有哪些衡量药物安全性的指标。
=LD50/ED50
作用 强度
100%
长尾S型曲线
作用 强度 Dmax
对称S型曲线
50%
（A） C
（B）
图1 药物作用的量效关系曲线
Log C
100 80 60
阳性反应百分率
40
20
0
ED50
LD50
剂量
图2 质反应对称S型量效曲线
盐酸利多卡因产生毒性作用的原理: ❖ 盐酸利多卡因是一种酰胺类局部麻醉药，血液吸收后或
盐酸利多卡因半数致死量(LD50) 的测定
背景知识
特殊毒性试验（致畸、致癌、 致突变） 毒性试验 长期（慢性）毒性试验
急性毒性试验
❖ 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能
够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂 量的对数值表示。
❖ 测定LD50意义
(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数。 (2)评价药物安全性---治疗指数 TI（ Therapeutic Index ）
D2= D1·r ,…，Dn= Dn-1·r, Dm
3．配制等比稀释溶液：要求各小鼠给药容积一样，一般0.1ml/10g，
按下列公式计算浓度：
C母
D 等容注射量
等比稀释液配制的具体步骤：
✓预试中Dm=183.11mg/kg， Dn=38.40mg/kg，算出r=1.25，假设 小鼠的平均体重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg
1．全班按照雌、雄小鼠分别进行均衡随机分组（采用Excel软件， 随机数函数分组法），雌鼠编号从1~24，雄鼠编号从25~48。
2. 各组按照下表的剂量配制等比稀释液，每组配制2mL于离心管中，
母液浓度为20mg/mL，溶剂为生理盐水。
组别
各组给药剂量 等比稀释液浓度 所需母液的体积
（mg/kg)
(mg/mL)