6、光合作用、呼吸、蒸腾和气孔导度(LI-6400)测定方法
LI-6400光合仪的日常检查和测量过程
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
2、预热后检查
2.5 检查匹配阀
检查匹配阀是否工作； 应该在每天开始测量前，进行一次匹配。当全天都在 相同的CO2浓度下做实验，一般每20到30分钟就应当 匹配一次。如果做实验时，每次测量都要改变CO2浓
度，那么每改变一次CO2浓度，就需要进行一次匹配。
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
2、预热后检查
2.2 检查CO2和H2O IRGAs零点
将两个化学管都旋至完全Scrub位置，完全闭合叶室； 如果CO2读数在±5微摩尔以内，H2O在±0.5毫摩尔每摩
等待大约5分钟，参比室和样品室CO2和H2O会降到零附近。
尔以内，说明零点正常，不需要校准。如果它们超过这个
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
1、预热期间检查
1.3 检查大气压传感器
检查g行Prss_kPa值是否合理。 一般在海平面大气压值约100kPa ，海拔300m大气压 为 97 kPa ，海拔1500约83 kPa且随天气变化，大气
压可能会有1到2 kPa的变化。
一、LI-6400/xt光合仪日常检查
LI-6400/XT光合仪日常检查和校准
报告人：贾子毅
北京力高泰科技有限公司 基因有限公司
主要内容
一、日常检查
二、校准（Calib Menu）
三、测量过程
一、LI-6400/XT光合仪日常检查
1、预热期间检查 2、预热后检查
日常检查的必要性——依据计算公式
蒸腾速率(E) 流速(Flow)、参比室和样品室H2O摩尔比、叶面积
2、控制环境条件的测量步骤
手动测量
LI-6400简易使用手册(带功能行和参数行说明)
LI-6400便携式光合仪的使用说明1. 仪器使用功能LI-6400并非单一用于研究植物光合作用，他同时包括光合、呼吸(分为植物呼吸和土壤呼吸)、蒸腾、荧光等多项测量功能，多项功能的完全集成使得LI-6400成为生态学研究领域上重要的、必不可少的基础研究设备。
其测量参数包括：净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Ts)、细胞间隙CO2浓度(Ci)、大气CO2浓度(Ca)、光量子通量密度(PFD)、叶温(TL)、相对空气湿度(RH)。
如果配备6400-40叶绿素荧光叶室，可测试以下参数：最大荧光(Fm)、初始荧光(Fo)、可变荧光(Fv)、光化学猝灭(qP)、非化学猝灭(qN)。
此外，进行自动测量的基础上还可以进一步计算光饱和点、光补偿点、CO2饱和点、CO2补偿点等多项重要生理生态指标。
表1 LI-6400参数表(2. 硬件组成与存放正确的硬件连接与存放对于使用和维护来说是至关重要的。
关于仪器的连接请与培训人员联系学习。
图1 仪器在主机箱内的安放位置与名称(请注意安放的方式)3. 仪器使用流程3.1仪器安装连接：正确连接仪器管线，并连接好进气管缓冲瓶(注意样品室、参照室管路连接，信号线红色Mark 标记要相对，除去外置光量子传感器红色盖帽)。
3.2开机：打开位于主机右侧的电源开关。
3.3仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected?(Y/N)” 选择Y 3.4叶室配置选择：选择目前安装的叶室配置，如果安装的是标准叶室，请选择Factory default ，然后回车。
如果安装了荧光叶室，请选择6400-40 Default Flurometer ，然后回车。
如果安装了土壤叶室，请选择6400-09 soil Chamber ，然后回车。
其他叶室方法相同，只需要选择不同的叶室就可以了。
3.5调零向SCRUB 方向拧紧碱石灰管 和干燥管上端的螺母。
关闭叶室(压下黑色手柄)，并旋紧固定螺丝即可。
利科6400气体交换分析仪中文操作手册
LI-6400 中文操作手册Version 5.0.1本手册内容是依据LICOR LI-6400 V4.0.1版,第一本及第十八章,十九章,二十章编译由于是多人分段编译,错误之处在所难免,敬请指正.我们将会陆续推出相关产品的中文手册及其相关的修订版本.请您留意以下网址:或垂寻:INFO@SUPPORT@SERVICE@我们将竭诚为您服务.本手册仅供参考, 所述未必准确,敬请您以原版英文手册为准.依本手册所导致的任何问题,将不负有任何法律责任.欢迎使用6400历史LI-6400是LI-COR公司生产的第三代气体交换测定系统。
第一代产品LI-6000；他使用CO2分析仪，特点是体积小、重量轻以及低的电脑消耗。
光合作用是依靠测量密封在相对较大的气室内的叶片单位时间内CO2浓度变化的速率来测定的。
LI-6000受限于气体分析仪的信号噪音（1-2μmol mol-1）以及计算方法选择的非适宜性。
这些问题在1986生产的应用一流的CO2分析器和先进软件的LI-6200中得到解决。
它仍是闭路系统，但可进行稳态的蒸腾作用的测量，然而仪器的稳定状态依赖于操作者有意识的不断调节旋钮。
虽然LI－6200在相当程度上适宜于一般层次上的测量，但越来越多的客户（和潜在客户）开始关注更深入的问题。
光合作用的深层研究体现在响应曲线上，就是说仪器应该能控制对光合作用有重要影响的环境因子，如：CO2、光、湿度和温度。
一些创新者试图用LI-6200来做各种反应曲线，并取得了不同程度的成功。
与此同时，LI-COR在这些尝试的基础上努力将这种仪器改进成为下一代产品。
直到1990年，LI-COR开始放弃在LI-6200的基础上进行增强的概念，并提出这样的问题：“理想的气体交换系统应是怎样的？”。
它应能做出响应曲线，因此必须可以控制叶室内的条件。
对我们来说，理想的响应曲线应是无人工操作的，因此排除手动操作而引进电脑控制。
响应曲线应是可见的，而不是想像的，因此我们需要建立图像功能。
6400基本使用方法
查看、保存调零结果
CO2注入系统调零 CO2注入系统调零曲线 人工光源调零
Zero ParIn signal
内置光量子传感器调零
所有测量及光合环境参数都在此菜单控制，总计有 7 层菜单，按 labels 键可以
翻入下层菜单，或者按 1~7 也可以进入相应层菜单。F1~f5 功能键在不同层次
菜单，对应不同命令，功能键上方有具体提示。下面有该菜单详细介绍。
（2）测量原理
6400 通过分析样品室和参比室CO2和H2O和浓度变化，来计算最终的Pn。请注意，理想的状 态只要通过CO2变化就可以算出Pn。但是，叶片的蒸腾作用增加叶室H2O浓度，而H2O浓度增加会 稀释CO2浓度，为了消除这种影响，所以引入了蒸腾速率E进行校正。计算公式如下：
说明：计算Pn的 6 个最终参数，CO2浓度（参比/样品室），H2O浓度（参比/样品室），流速和 叶面积。其中，流速与叶面积为确定数值，其大小对Pn影响微弱，即不是Pn的决定因子。
Computelist menu 计算菜单，利用测得的参数组合计算新的指标。 Reset menu 重新选择配置菜单，当更改了一个设置后，不用重新开机在此选
择。
Flow meter zero 流量计调零
IRGA zero IRGA span
H2O、CO2调零 IRGA 跨度调零
View, sotre zeros & spans CO2 Mixer calibrate CO2 Mixer plot curve Light source calibrate
Access the filer 文件管理 所有文件的浏览、查找、删除
Build a new autoprogram 新建自动测量程序 主要是测量时条件
LI-6400基本测量原理介绍
6400-40 荧光叶室
Gene Company Limited
Agricultural & Environmental Division
荧光仪测量参数
最大荧光（Fm）
光下最大荧光（Fm’）
初始荧光（Fo）
光下最小荧光（Fo’）
LI-6400基本测量原理介绍
基因有限公司 北京力高泰科技有限公司
2006年5月6日 成都
内容介绍
光合作用测量方法 红外线气体分析法(IRGA) LI-6400 气体交换测量系统 LI-6400气体交换测量系统使用功能与
应用
光量子
CO2
H2O
(CH2O)
O2
酶
Gene Company Limited
● 叶温(TL)
● 气温 （Ta）
● 相对空气湿度(RH) ● 饱和蒸气压亏缺（VPD）
Gene Company Limited
Agricultural & Environmental Division
LI-6400的使用功能2
2、计算参数包括：
● 表观量子效率(AQY) ● 羧化效率(CE)
● 气孔限制值(Ls)
genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionco2co2辐射源滤光片检测器信号输出genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionco2co2cogenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision光强度光强度叶片温度叶片温度coco22水蒸气水蒸气不仅要测量这些因子而且要控制这些因子不仅要测量这些因子而且要控制这些因子genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision净coco22流量流量同化作用或呼吸作用同化作用或呼吸作用气孔导度气孔导度g胞间coco22浓度浓度cici电子传递电子传递植物胁迫指示植物胁迫指示genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisionlili64006400genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision红外气体分析的原理红外气体分析的原理是是lilicorcor公司生产的第三代气体交换测量系统公司生产的第三代气体交换测量系统分析器位于传感器头部分析器位于传感器头部具有两组完全独立的具有两组完全独立的非扩散性的非扩散性的开路的红外开路的红外分析器分析器同时测量同时测量coco22和和hh22oo的绝对浓度的绝对浓度可连续测量参比室和样品室的可连续测量参比室和样品室的coco22和和hh22oo绝对浓绝对浓度度达到实时测量叶片的动态指标达到实时测量叶片的动态指标lili64006400genecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivisiongenecompanylimitedagriculturalenvironmentaldivision蒸腾作用蒸腾作用和光合作用和光合作用改变了叶室空气中水改变了叶室空气中水蒸气和蒸气和co
LI-6400系列光合仪使用说明书
CO 2/H 2O 分析器位于传感器的头部， 消除了气体交换测量的时滞； （ 3）可自动或手动控制叶室内部的环境条件 （ CO 2 浓度、光照强度、相对湿度、温度等）； （ 4）具有多个自动测量程序，如光响应曲线、 CO 2 响应曲线、光诱导曲线、 光呼吸曲线、荧光 CO 2 响应曲线、荧光光响应曲线、荧光动力学曲线、荧光循环曲线等。多年的实践表明，即使在 野外恶劣的环境条件下， LI-6400 系列光合仪的分析器和传感器依然能够保持强大的功能和高可靠性。
合用户的使用经验和实验需求，对这些使用手册进行了重新整合和优化，进一步提高了使用手册前后的连贯性和一
致性。该使用手册的主要内容包括光合作用测量的理论基础、
LI-6400 系列光合仪的发展、硬件介绍、使用方法、应
用实例、维护和保养等。对于初学者，该使用手册将缩短其学习时间，达到事半功倍的效果；对于熟练掌握者，该
根据 CO 2 及 O2 体积的变化，主要有微量定积检压法； （ 3）根据 O2 浓度的变化，主要有氧电极法； （ 4）根据 CO 2
浓度的变化：
酸度法、 碱吸收法、
14
C 标记法、
红外气体分析法、
微气象法。 目前， 最常见的方法是红外气体分析法。
三、便携式光合仪的发展历程
简单配置阶段： 20 世纪 50 年代初开始应用，其配置相对简单，只有叶室（或同化箱）及相应气路和气泵等配
6、 连接完成，如图？所示。
5
第四章 测量参数与计算参数
一、测量参数
缩写
参数
单位
行号
CO 2R_μ ml 参比室 CO 2 浓度 μmol CO2 mol -1
CO 2S_μ ml 样本室 CO 2 浓度 μmol CO2 mol -1
LI-6400系列便携式光合作用测量系统
LI-6400系列便携式光合作用测量系统由美国LI-COR公司生产,是国内外研究植物光合生理生态的权威仪器，广泛应用于植物生理学、农学、林学、生态学等领域的研究中。
下面以LI-6400P型便携式光合作用测量系统为例对其功能、构造、使用等内容作一简单介绍。
一、功能LI-6400系列便携式光合作用测量系统最基本的功能是研究植物光合作用，同时还具有呼吸、蒸腾、荧光等多项测量功能。
可以测量的光合与水分生理指标主要有：净光合（呼吸）速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间CO2浓度等。
二、构造LI-6400P型便携式光合作用测量系统主要由IRGA分析器即红外线气体分析器、操作控制台和两者之间的连接电缆三部分组成。
红外线气体分析器包括标准叶室、有效光合辐射传感器、叶片温度热电偶、发光二极管（LED）红/蓝光源、H2O/CO2分析器等构件。
其中标准叶室为长方形，长宽分别为3和2cm，也有其他规格叶室可替换。
叶室上面装有外置光量子传感器，下面可根据需要连接野外用支架。
操作控制台主要由系统控制器组成，系统控制器硬件配置为512K RAM（随机存储器）,6M硬盘，4行/每行40字符的显示屏，66键的键盘；软件为LI-6400的操作系统，操作系统有多个版本,本机为4.03版本。
另外，控制台电池仓内装有两节可充电蓄电池，边上装有一个水分干燥管,内装硅胶用于吸收水分、一个碱石灰管,用于吸收CO2,及一个CO2注入系统，底下有支架。
连接电缆由25针和9针RS-232C线缆组成。
三、使用LI-6400P型便携式光合作用测量系统的使用大致包括仪器连接、程序加载、仪器校正、数据测量、数据传输、关闭仪器等六个步骤，下面分别来做一个介绍。
第一个步骤：仪器连接测量之前首先要看一看仪器是否连接好，要将仪器连接好后再进入后面的步骤。
仪器的连接主要包括连接电缆与操作控制台之间、连接电缆与IRGA之间的连接，但这些步骤最好由对仪器比较熟悉的人员来完成，一般操作人员最好不随意拆卸和连接。
LI-6400便携式光合仪操作使用规程
LI-6400便携式光合仪操作使用规程仪器使用范围：植物单叶或群体光合速度、蒸腾速率、气孔导度、光饱和点和补偿点、二氧化碳饱和点和补偿点等。
1、开机：打开位于主机右侧的电源开关。
仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择Y2、叶室配置选择：选择Factory default（常规）或他叶室（6400-02B红蓝光源），然后回车自动进主菜单。
（非控制环境条件选择Factory default，控制环境条件选择LED红蓝光源）3、手动测量：按F4“New Measurements”菜单进入测量菜单。
①设定文件：按F1“Open Logfile”建立新文件。
回车后输入自己设定的文件名。
当显示屏出现提示“E nter Remark”时，输入需要的标记(英文，用于标记样地、植物种类、样品号等)。
继续回车，文件设置结束。
在夹入叶片之前如果ΔCO2大于0.5或小于-0.5，按F5“Match”进行匹配。
②测量：选取需要测量的植物叶片(3-5次重复)。
测量时间尽量选择在晴朗的上午10：00-11：30间最好。
③向Bypass方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。
夹上叶片(尽量让叶片充满整个叶室空间，面积为6 cm2，小叶片需测量面积，并在测量菜单状态下按数字“3”后按F1来修改叶面积值，关闭叶室，旋紧固定螺丝至适度位置。
④等待C行PHOTO读数稳定（小数点后最后一位数字的波动在2左右）后即可记录 (按F1“LOG”按钮或者按分析仪手柄上的黑色按钮2秒即可记录一组数据。
⑤换叶片进行下一次测量。
重复②--④步骤。
4、自动测量与环境条件控制LI-6400可以控制的环境条件包括温度、CO2浓度、光强等。
一般而言，需要控制环境条件的实验有两种情况。
一种是环境变化剧烈，无法准确进行同等环境条件的测量。
另一种情况是进行光曲线和ACI曲线（快速光响应曲线）测量。
环境控制只需要在手动测量时，按数字来切换菜单。
LI-6400光合仪测量使用及怎么测定光合速率
AB B、fFra bibliotekfG
H
I V
二、计算参数 缩写 △CO2_µml 参数 参比室与样本室 的 CO2 浓度差 参比室与样本室 的 H2O 浓度差 净光合速率 气孔导度 胞间 CO2 浓度 蒸腾速率 胞间 CO2 浓度与 空气 CO2 浓度之比 基于叶温的 VpdL 蒸气压亏缺 基于气温的 VpdA BLC_mol 蒸气压亏缺 叶片边界层总导度 kPa mol m s
**光-光合速率响应曲线测定
开机前安装LED光源。LED光源取代上部叶室的位置， LED的光传感器接头替代原叶室的内置光量子传感器接头， 注意不要忘记安放3个O型圈。 开机操作如上述步骤1-2。注意在步骤2中的配置选择中应 选“2×3 Opaque LED”。
进入“New Msmnts”（按F4）后，进行步骤4.1-4.3的 操作。 按“label”键，选择功能菜单5（显示屏最底行），按 “Auto PROG”(F1)进入。 选择“Light Curve”回车，按提示进行文件命名、输入 备注内容等操作。
6. 叶片面积的确定 如果叶片不规则或整体小于叶室，需要使用叶 面积仪来测量叶片在叶室内的实际测量面积， 并在测量菜单内第三行（按键盘键“3”)功能 菜单中AREA下按F1功能键输入实际的测量面 积后再进行测量。
7. 关机 按“esc”键，退回主界面，按关机键。 以上为测定环节，一下为数据传输及其它注意 之处。调节CO2和H2O为BYPASS和SCRUB 中间状态。将仪器装箱。
在“Desired Lamp setting ”中输入实验者设计的 光量子通量变化值，如2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 500 300 100 50 20等，各值间以 空格键隔开。 顺序出现的提示问题及回答如下： Minimum wait time (secs) 60 Maximum wait time (secs) 180 Match if |ΔCO2| less than (ppm) 5 程序启动后按“Label”进入功能菜单1，会发现在 “Log”键前出现一个“*”，这表明刚刚设定的自动 程序正在运行，每记录一次数据仪器会鸣叫一声，当 整个程序结束后，“*”会消失。
LI-6400基本测量步骤及注意事项
LI-6400基本测量步骤及注意事项LI-6400光合仪的基本测量步骤目的：测量植物叶片的光合速率或呼吸速率1. 测量准备与硬件连接，在进气口接上缓冲可乐瓶，保证进气稳定。
2. 开机，配置界面选择Factory default，连接状态按“Y”，进入主菜单，预热15 ~ 20分钟。
3. 按F4进入测量菜单。
4. 将苏打管和干燥剂管都拧到bypass位置。
5. 调节叶室闭合螺丝，关闭叶室，等待a行参数：CO2_R、CO2_S、H2O_R和H2O_S值稳定后，对叶室吹一口气，检查CO2_S增加是否超过2 ppm ，否则就是漏气。
判断是否漏气，如果漏气，将叶室闭合螺丝拧紧一些，再吹气判断。
6. 检查零点。
把苏打管完全打至Scrub，等待a行参数稳定后，观察CO2_R参数绝对值< 5 μmolmol-1，然后把干燥剂管完全旋至Scrub，等待a行参数稳定后，H2O_R参数绝对值< 0.5 mmol mol-1。
7. 把苏打和干燥剂管完全旋至bypass。
8. 检查温度是否正常。
拔掉热电偶紫色插头，进入H行，检查如果Tblock与Tleaf差值<0.1℃，热电偶零点正常，否则，调节电位调节器螺丝（位于IRGA下部）至正常范围。
9. 将叶室正对太阳光，按g可查看光强PARin和PARout。
同时查看g行的大气压值是否正常。
10. 按F5(match)，进入匹配界面，待CO2_R与CO2_S、H2O_R 与H2O_S值相等时，按F5，然后按F1等待仪器退回测量菜单，检查b行参数：ΔCO2<±0.5，ΔH2O<±0.05即可。
11. 按F1(Open Logfile)，打开一个数据记录文件，命名，需要的话，添加备注(remark)。
12. 按分析器头手柄，打开叶室，夹好测量的植物叶片。
13. 按3，F1(area)输入实际测量的叶片面积。
14. 控制叶片温度。
2,f4，选择Block温度, enter, 输入目标温度, enter，回到测量界面。
LI-6400系列光合仪使用说明书
根据 CO 2 及 O2 体积的变化，主要有微量定积检压法； （ 3）根据 O2 浓度的变化，主要有氧电极法； （ 4）根据 CO 2
浓度的变化：
酸度法、 碱吸收法、
14
C 标记法、
红外气体分析法、
微气象法。 目前， 最常见的方法是红外气体分析法。
三、便携式光合仪的发展历程
简单配置阶段： 20 世纪 50 年代初开始应用，其配置相对简单，只有叶室（或同化箱）及相应气路和气泵等配
二、光合作用的测量方法 光合作用的整个过程可表示为：
CO 2 + H 2O → （CH 2O） + O 2
可见，测定公式中任一反应物的消耗速率或产物的生成速率（包括物质的交换和能量的贮藏）都可以用来计算
净光合速率（ Pn）。
相应净光合速率 （Pn ）的测定大致可分为： （1）根据有机物的积累速率， 主要有半叶法、 植物生长分析法； （ 2）
4.3 连接分析器端的管路和电缆。分析器端的管路接口和电缆的插头形状都不相同，一一对应插入即可。
注意： 将圆形插头上的红色标识和分析器一端的红色标识对准，然后水平推入。插头
一定要推到底，不能留有空隙。
5、连接 CO 2 注入系统 将 CO 2 小钢瓶装入套筒，确认已安装图？中所示的
O 形圈后将套筒旋紧。
也可以作为某些工业的原料（如棉、麻、橡胶、糖等） 。换句话说，今天人类所吃的食物和某些工业原料，都是直接 或间接地来自光合作用。
2、蓄积太阳能 光合作用形成的有机物所贮藏的化学能，除了供植物本身和全部异养生物之用外，更重要的可供人类营养和活 动的能量来源。人类所利用的能源，如煤炭、天然气、木材等等，都是现在或过去的植物通过光合作用形成的。因 此，光合作用是今天能量的主要来源。 3、环境保护 从清除空气中过多的 CO 2 和补充消耗掉 O2 的角度来衡量，绿色植物被认为是一个自动的空气净化器。 光合作用的研究在理论上和实践上都具有重要的意义。光合作用是地球上普遍存在而又特有的一个过程，是其 它生物生存的基础，因此光合作用的研究有助于生物科学中其它课题的阐明。由此可见，光合作用是农业生产中技 术措施的核心，也是植物生理学中的主攻方向之一，又是自然科学中的一个重要研究项目。
LI-6400光合仪测量使用及怎么测定光合速率 ppt课件
软件及操作说明
PPT课件
9
PPT课件
10
软件及操作说明
1. 开机 仪器硬件连接后，调节CO2、H2O调 节旋钮为完全BYPASS状态，在确认电池已连 接好并且电量充足的情况下，打开主机右侧中 部的黑色电源开关。需要选择所需要的叶室， 确定后，会显示“是否连接叶室和红外气体分 析器，选择 “Y”。确认即可进入系统主菜单 （见右图）。
Tblock℃
冷却器温度
℃
Tair℃
叶室空气温度
℃
H
Tleaf℃
叶片温度
℃
HH:MM:SS
时钟
PPT课件
6
I
Battery
电池电压
V
二、计算参数 缩写
参数
单位
行号
参比室与样本室
△CO2_µml
的 CO2 浓度差
µmol CO2 mol-1
B
△H2O_µml
参比室与样本室 的 H2O 浓度差
mmol H2O mol-1
测定过程中尽量保持叶片原位状态，包括位置，角度等
2、测定时间：
最适测量时间为上午9:00 ~ 11:00，即双峰植株第一个光合状 况最佳时间，如果是单峰植株，则可以适当延长测定时间。
3、 取样量：
每个测定需要重复，至少3个，具体重复次数应使用统计学的 方法来确定
PPT课件
8
三、LI-6400光合仪的使用方法
LI-6400光合仪使用讲解
PPT课件
1
一、原理及构造 二、使用前注意事项 三、仪器操作 四、使用过程碰到的问题
PPT课件
2
一、原理及构造
光合作用基本原理
LI-6400简易使用手册
LI-6400便携式光合仪的使用说明1. 仪器使用功能LI-6400并非单一用于研究植物光合作用，他同时包括光合、呼吸(分为植物呼吸和土壤呼吸)、蒸腾、荧光等多项测量功能，多项功能的完全集成使得LI-6400成为生态学研究领域上重要的、必不可少的基础研究设备。
其测量参数包括：净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Ts)、细胞间隙CO2浓度(Ci)、大气CO2浓度(Ca)、光量子通量密度(PFD)、叶温(TL)、相对空气湿度(RH)。
如果配备6400-40叶绿素荧光叶室，可测试以下参数：最大荧光(Fm)、初始荧光(Fo)、可变荧光(Fv)、光化学猝灭(qP)、非化学猝灭(qN)。
此外，进行自动测量的基础上还可以进一步计算光饱和点、光补偿点、CO2饱和点、CO2补偿点等多项重要生理生态指标。
表1 LI-6400参数表(2. 硬件组成与存放正确的硬件连接与存放对于使用和维护来说是至关重要的。
关于仪器的连接请与培训人员联系学习。
图1 仪器在主机箱内的安放位置与名称(请注意安放的方式)3. 仪器使用流程3.1仪器安装连接：正确连接仪器管线，并连接好进气管缓冲瓶(注意样品室、参照室管路连接，信号线红色Mark 标记要相对，除去外置光量子传感器红色盖帽)。
3.2开机：打开位于主机右侧的电源开关。
3.3仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected?(Y/N)” 选择Y 3.4叶室配置选择：选择目前安装的叶室配置，如果安装的是标准叶室，请选择Factory default ，然后回车。
如果安装了荧光叶室，请选择6400-40 Default Flurometer ，然后回车。
如果安装了土壤叶室，请选择6400-09 soil Chamber ，然后回车。
其他叶室方法相同，只需要选择不同的叶室就可以了。
3.5调零向SCRUB 方向拧紧碱石灰管 和干燥管上端的螺母。
关闭叶室(压下黑色手柄)，并旋紧固定螺丝即可。
LI-6400简易使用手册
LI-6400便携式光合仪的使用说明1. 仪器使用功能LI-6400并非单一用于研究植物光合作用，他同时包括光合、呼吸(分为植物呼吸和土壤呼吸)、蒸腾、荧光等多项测量功能，多项功能的完全集成使得LI-6400成为生态学研究领域上重要的、必不可少的基础研究设备。
其测量参数包括：净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Ts)、细胞间隙CO2浓度(Ci)、大气CO2浓度(Ca)、光量子通量密度(PFD)、叶温(TL)、相对空气湿度(RH)。
如果配备6400-40叶绿素荧光叶室，可测试以下参数：最大荧光(Fm)、初始荧光(Fo)、可变荧光(Fv)、光化学猝灭(qP)、非化学猝灭(qN)。
此外，进行自动测量的基础上还可以进一步计算光饱和点、光补偿点、CO2饱和点、CO2补偿点等多项重要生理生态指标。
表1 LI-6400参数表(2. 硬件组成与存放正确的硬件连接与存放对于使用和维护来说是至关重要的。
关于仪器的连接请与培训人员联系学习。
图1 仪器在主机箱内的安放位置与名称(请注意安放的方式)3. 仪器使用流程3.1仪器安装连接：正确连接仪器管线，并连接好进气管缓冲瓶(注意样品室、参照室管路连接，信号线红色Mark 标记要相对，除去外置光量子传感器红色盖帽)。
3.2开机：打开位于主机右侧的电源开关。
3.3仪器在启动后将显示“Is the IRGA connected?(Y/N)” 选择Y 3.4叶室配置选择：选择目前安装的叶室配置，如果安装的是标准叶室，请选择Factory default ，然后回车。
如果安装了荧光叶室，请选择6400-40 Default Flurometer ，然后回车。
如果安装了土壤叶室，请选择6400-09 soil Chamber ，然后回车。
其他叶室方法相同，只需要选择不同的叶室就可以了。
3.5调零向SCRUB 方向拧紧碱石灰管 和干燥管上端的螺母。
关闭叶室(压下黑色手柄)，并旋紧固定螺丝即可。
使用LI-COR 6400测量光合步骤及注意事项
LI-6400 便携式光合仪测量光合作用步骤一、光合测定过程1.正确连接IRGA，缓冲瓶（利用大气二氧化碳，将缓冲瓶放置离人较远并悬挂2-3m处）。
接上电池(电源)，开机。
2.安装红蓝（LED）光源。
选Config Menu（F2），选Light Source Control 项，选取Pick Source，选取人工光Lightsource = 6400 - 02B，按F5“ Done”进入“Config Menu ”第一项“Config Status”, 选择F3“Save As”,给一个文件名e.g:“LED Red Blue Light Source”进入“ Config Menu ”最后一项“ Reset Menu ”，选取“Reset to User Configuration”,确认选择“LED Red Blue Light Source”，这样，光源就安装成功了。
以后，不必再安装光源了。
如果这一步已经安装好可以省去直接开机。
3. 根据叶室（一般选择2×3 LED),按Enter，选择Y。
4. 当显示：“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择“Y”。
预热二十分钟以上。
5. 调零：调零前确保叶室紧闭，（即上下叶室刚刚接触到，再张开叶室，调紧螺丝半圈）。
选“Calib Menu”（校准菜单即F3）项：①选“Flow Meter Zero”项（流量计调零），按Enter，10 秒后读数稳定，视具体情况，用f1、f2 调节，至读数基本稳定，且在±1mv 范围内，F5 退出；②选择红外分析仪调零“IRGA Zero”：此时要求旋紧碱石灰管和干燥管上端的调节螺母指向Full SCRUB方向，即全虑除状态清空并关闭叶室，按Enter，按Y，按press any key，等待数数分钟，看屏幕确定。
待CO2_R 及 CO2_S 波动范围都小于±0.1时可以按Auto_CO2；待H2O_R 及H2O_S 波动范围都小于±0.01时，可以按Auto_H2O。
6、光合作用、呼吸、蒸腾和气孔导度(LI-6400)测定方法
Is the chamber/IRGA connected?
4、已连接，按“Y”，CO2分析仪有 “噗……”声，仪器进入开机状态。没有连 接，按“NO”。关机或在“Sleep”状态下再 连接。
2、连接仪器各部件
电源连线与控制器正确匹配（管道和线路 切不可接错）， 多孔插线和分析器对准 （红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与 分析器相接并使另一端与控制器“sample” 相接。接上带“buffer”的进气管，接上电 源（切记，除“Sleep”状态外，在电源开情 况下，不可接或卸管道和线路，否则会烧 毁仪器）。
Cond——气孔导度（mol H2Om-2s-1） Ci——胞间CO2浓度（μl.L-1） Trmmol——蒸腾速率（mmol.m-2s-1） VpdL——水气压差（mg/L）
Area——叶面积（cm2） StmRat——气孔比率
BLCond——界面层导度 Tair——气温（℃）
Tleaf——叶温（℃） TBlk——参比室（℃）
三、主要仪器设备： LI-6400 portable photosynthesis system
红兰光源叶室和CO2红外分析器
连接光源和控制器的地缆
LI-6400控制系统
四、操作方法与实验步骤：
(一)仪器安装： 1、选择叶室。根据测定对象选择不同叶室进 行安装,本实验选用仪器自备的红兰光源（一 般测定选择红兰光源或自然光源不透明叶室， 荧光测定选择荧光叶室，详见说明书）。
二、实验内容和原理：
使用LI-COR_6400测量光合步骤及注意事项
LI-6400 便携式光合仪测量光合作用步骤一、光合测定过程1.正确连接IRGA，缓冲瓶（利用大气二氧化碳，将缓冲瓶放置离人较远并悬挂2-3m处）。
接上电池(电源)，开机。
2.安装红蓝（LED）光源。
选Config Menu（F2），选Light Source Control项，选取Pick Source，选取人工光Lightsource = 6400 - 02B，按F5“ Done”进入“Config Menu ”第一项“Config Status”, 选择F3“Save As”,给一个文件名e.g:“LED Red Blue Light Source”进入“ Config Menu ”最后一项“ Reset Menu ”，选取“Reset to User Configuration”,确认选择“LED Red Blue Light Source”，这样，光源就安装成功了。
以后，不必再安装光源了。
如果这一步已经安装好可以省去直接开机。
3. 根据叶室（一般选择2×3 LED),按Enter，选择Y。
4. 当显示：“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择“Y”。
预热二十分钟以上。
5. 调零：调零前确保叶室紧闭，（即上下叶室刚刚接触到，再张开叶室，调紧螺丝半圈）。
选“Calib Menu”（校准菜单即F3）项：①选“Flow Meter Zero”项（流量计调零），按Enter，10 秒后读数稳定，视具体情况，用f1、f2 调节，至读数基本稳定，且在±1mv 范围内，F5 退出；②选择红外分析仪调零“IRGA Zero”：此时要求旋紧碱石灰管和干燥管上端的调节螺母指向Full SCRUB方向，即全虑除状态清空并关闭叶室，按Enter，按Y，按press any key，等待数数分钟，看屏幕确定。
待CO2_R 及 CO2_S 波动范围都小于±0.1时可以按Auto_CO2；待H2O_R 及H2O_S 波动范围都小于±0.01时，可以按Auto_H2O。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
LI-6400控制系统接线侧
LI-6400控制系统干燥管和碱石灰管侧
LI-6400控制系统侧电缆连接
LI-6400控制系统侧气管连接
LI-6400分析器电缆连接
LI-6400分析器气管连接
LI-6400分析器分析电缆连接
(二)开机与校正： 3、插上电池，打开电源开关后。 （仪器自动进行状态检测，并进入 Dir:/user/configs/Userprefs菜单）。在该菜 单下，选择一与叶室、光源相匹配的内容 （如“red blue source”表示用红兰光源不 透明底叶室） <enter>，仪器显示：
3 2 1 0 -1 -2 0 20
y = 0.0441x - 1.0003 R2 = 0.978
LCP: Leaf 1=32μmol CO2 m-2 s-1 Leaf 2=23μmol CO2 m-2 s-1 DR:Leaf 1=1.6μmol CO2 m-2 s-1
y = 0.0495x - 1.6031 2 R = 0.9905 40 60 80 100 120
（五）数据存取：
12、数据保存和取出。采样完后按１，Close file,按F5，end进入SLEEP（同一班只需一个 file，不同的组可以用<add mark>区分)。与电 脑连接，解除SLEEP，进入F5(Utility Manu) 选择File exchange mode。打开电脑winPX for 6400,在LI-6400/User下把自己要的测定文件拖 入专设目录。在EXCEL下选择所有文件在文 本导向下，选择“，”打开。
2、连接仪器各部件 电源连线与控制器正确匹配（管道和线路 切不可接错）， 多孔插线和分析器对准 （红点）插入；硬塑料管带黑圈套的端与 分析器相接并使另一端与控制器“sample” 相接。接上带“buffer”的进气管，接上电 源（切记，除“Sleep”状态外，在电源开情 况下，不可接或卸管道和线路，否则会烧 毁仪器）。
• 五、实验数据记录和处理：
• 表1、饱和光下不同植物光合、呼吸和蒸腾速率、气孔导度 及水分利用效率(平均值±标准差)
• Table 1 The rates of photosynthesis(Pn), respiration(R) and transpiration(Tr)， stomatal conductance(SC)，and water utilization efficiency(WUE) of different plants under the saturated PDF（Means ± SE）
三、主要仪器设备： LI-6400 portable photosynthesis system
红兰光源叶室和CO2红外分析器
连接光源和控制器的地缆
LI-6400控制系统
四、操作方法与实验步骤：
(一)仪器安装：
1、选择叶室。根据测定对象选择不同叶室进 行安装,本实验选用仪器自备的红兰光源（一 般测定选择红兰光源或自然光源不透明叶室， 荧光测定选择荧光叶室，详见说明书）。
H2OS——叶室水含量
RH_R——参比室相对湿度（%） RH_S——叶室相对湿度（%） Flow——流量（ml/s） CsMch ——CO2S匹配 PARi——叶室内光强（μmol.m-2s-1） Press——大气压（Mpa）
PARo——叶室外光强（μmol.m-2s-1）
HsMch——H2OS匹配
（六）本次实验测定内容：
1、每组（１－２人）测一叶（5次）光合速率,气孔导 度和蒸腾速率。计算水分利用效率。
光合速率 水分利用效率= （μ mol/mmol)
蒸腾速率
2、每大组（２－４人）测一条光-合曲线。
数据所代表的中文意义。
Ftime——持续时间(s) Photo——光合速率（μmol.m-2s-1） Cond——气孔导度（mol H2Om-2s-1） Ci——胞间CO2浓度（μl.L-1）
Leaf 2=1.0μmol CO2 m-2 s-1
AQY:Leaf 1=0.0495
Photosynthetic photon flux (¦ mol photon m-2 s-1) Ì
Leaf 2=0.0441
实验5-6 植物光合和呼吸作用、 气孔导度和蒸腾速率的测定
• 一、实验目的和要求: • 了解改良半叶法、氧电极法测定光合作 用和呼吸作用的基本原理，掌握红外线 CO2分析仪法测定光合作用和呼吸作用， 蒸腾速率和气孔导度测定的基本原理; • 掌握用LI-6400测定光合作用、呼吸作用、 蒸腾速率和气孔导度的方法，测定光-光 合响应曲线的方法.
二、实验内容和原理： （一）熟悉仪器基本结构，及按装调试。 （二）以玉米和蚕豆为材料，用LI6400portable photosynthesis system测定它 们的光合作用、呼吸作用、蒸腾速率和气 孔导度及光-光合响应曲线，根据所得的曲 线和相关文献分析其属于什么光合类型。
（三）实验原理
七、讨论、心得：
30 25 20Байду номын сангаас
12 10 8
1 2 3
Photosynthetic rate (μmol.m-2s-1)
15 10 5 0 0 -5 500 1000
Tea 01-2
6 4 2 0
7 8 9 10 0 500 1000 1500
5、触点式温度计
6、泵
7、控制器 8、记录仪
1.氧电极
氧电极是由嵌在有 机玻璃上的铂和银所构 成，以0.5mol/L KCl为 电解质，电极头外覆盖 一层聚乙烯或聚四氟乙 烯薄膜，其厚度在15～ 25μm之间，用“〇” 形套膜环固定，使电极 与被测溶液隔离，而溶 解在溶液中的氧仍能透 过薄膜，进入电极内。 较薄的膜易透过氧，因 而对氧浓度变化的响应 时间短。
Principles for measuring photosynthesis and respiration
6CO2+6H2O
6(CH2O)+6O2
1、测干重——改良半叶法：同面积光暗叶片重量差。
三氯乙酸 TCA
暗 中
2、测放O2 ——氧电极法。气相和液相
图2 氧电极装置示意图
1、光源 2、反应杯 3、电极 4、超级恒温水浴
参比室
入口
• Principles for measuring transpiration,stomatal conductance and Ci : • Transpiration→H2O → RH↑in leaf chamber → Humidity sensor → computer → transpiration rate → stomatal conductance. • There is a linear relationship between H2O diffusing in and CO2 diffusing out stomata. Intercellular CO2(Ci) concentration can be calculated in the basis of transpiration rate, stomatal conductance, atmosphere CO2(Ca) concentration.
Plants
Pn (μmol.m-2s-1)
R (μmol.m-2s-1)
Tr (mmol.m-2s-1) SC(molH2Om-2s-1)
WUE
玉米 蚕豆
六、实验结果与分析： • （1）比较不同植物光——光合响应曲线， 确定呼吸率,确定光补偿点、饱和点，计 算量子效率。 • （2）比较分析光对蒸腾速率、气孔导度 和水分利用效率的影响。 • （3）查阅有关资料，分析它们所属的光 合碳同化类型。
Trmmol——蒸腾速率（mmol.m-2s-1） VpdL——水气压差（mg/L）
Area——叶面积（cm2） BLCond——界面层导度 Tleaf——叶温（℃） StmRat——气孔比率 Tair——气温（℃） TBlk——参比室（℃） CO2S——叶室CO2（μl.L-1）
CO2R——参比室CO2（μl.L-1） H2OR——参比室水含量
8、按F1“Open Logfile”，命名（植物，处理， 组号等），及附加标记<enter>。
9、调节叶面积，按3，按F1（Area）,输入面 积。按1返回。 10、采样。Δ CO2 (或photo)稳定时，按采样 键（F1或测定器黑钮）3-5次。一般同一叶片 应测3-5次值。
• 学生简单光合等指标测定指南： • 打开叶室夹好叶片，关紧叶室，按１，F5 （Match) → F5(IAGR Match)，F1(exit)→开 灯，按2,F5（Lamp off）选Quantum flux<enter>, 输入光强值（500-2500 ） <enter> →按1，F1（Open Logfile），命名 文件名ＸＸＸ及附加标记（植物，处理， 组号等） <enter> →观察 Photo稳定时，按 采样键F1（ＬＯＧ）或测定器黑钮5次（一 般同一叶片应测5次值）。
50
100
150
200
500
1000
1500
2000
Photosynthetic photon flux (¦ mol photon m-2 s-1) Ì
4
Photosynthetic rate Ì (¦ mol CO2 m-2 s-1)
Photosynthetic photon flux (¦ mol photon m-2 s-1) Ì
• 第一个实验结果分析
25
Photosynthetic rate Ì (¦ mol CO2 m-2 s-1)
8