2014年博士考试高级动物生物化学试题
(完整word版)中科院应化所考博真题2014高等物理化学及答案
(完整word版)中科院应化所考博真题2014⾼等物理化学及答案中国科学院长春应⽤化学研究所2014年攻读博⼠学位研究⽣⼊学考试试题⾼等物理化学⼀、填空题(每空1分,共计7分)1、在定温、定压的电池反应中,当反应达到平衡时,电池的电动势= 0(填 >、<、=、≠)。
2、液体在⽑细管中上升的⾼度与⽑细管体积基本⽆关。
与⽑细管半径、接触⾓、两相密度差有关。
3、三组分体系平衡共存的最⼤相数为5。
,最⼤⾃由度为4f=C+2-Q,三组分,所以C=3,Q为相数,f为⾃由度4、范德华⽓体绝热向真空膨胀后,⽓体的温度将下降。
5、对弯曲液⾯所产⽣的附加压⼒⼀定≠ 0(填 >、<、=、≠)。
6、A及B⼆组分组成的凝聚体系能⽣成三种稳定的化合物,则于常压下在液相开始冷却的过程中,最多有2种固相同时析出。
7、NH4HS(s)放⼊真空容器中,并与其分解产物NH3(g)和H2S(g)达到平衡,则该系统中组分数C= 2 ,相数P=2,⾃由度F=2⼆、判断题(每题1分,共计7分, 对的“√”,错的“×”)1、温度⼀定的时候,⽓体的体积与压⼒的乘积等于常数。
(×)2、系统的混乱度增加,则其熵值减⼩。
(×)3、处于标准状态的CO (g),其标准燃烧热为零。
(×)4、四个热⼒学基本⽅程适⽤于所有封闭体系的可逆过程。
(√)5、在纯溶剂中加⼊少量不挥发的溶质后形成的稀溶液沸点将升⾼。
(√)6、惰性组分的加⼊将使反应的平衡转化率降低。
(×)7、只受温度影响的平衡系统⾃由度F=C-P+1。
(√)三、选择题(每题2分,共计30分)1、关于物质临界状态的下列描述中,不正确的是 A(A)在临界状态, 液体和蒸⽓的密度相同, 液体与⽓体⽆区别(B)每种⽓体物质都有⼀组特定的临界参数(C)在以p、V为坐标的等温线上, 临界点对应的压⼒就是临界压⼒(D)临界温度越低的物质, 其⽓体越易液化2、热⼒学第⼀定律ΔU=Q+W 只适⽤于 D(A)单纯状态变化 (B)相变化(C)化学变化 (D)封闭物系的任何变化3. 对任⼀过程,与反应途径⽆关的是A(A) 体系的内能变化 (B) 体系对外作的功(C) 体系得到的功 (D) 体系吸收的热4.将⾮挥发性溶质溶于溶剂中形成稀溶液时,将引起A(A) 沸点升⾼ (B) 熔点升⾼ (C) 蒸⽓压升⾼ (D) 都不对5、在⼀定温度和压⼒下,对于⼀个化学反应,能⽤以判断其反应⽅向的是:C(A) ?r GmΘ (B)Kp(C) ?rGm(D) ?rHm6、关于三相点, 下⾯的说法中正确的是D(A) 纯物质和多组分系统均有三相点(B) 三相点就是三条两相平衡线的交点(C) 三相点的温度可随压⼒改变(D) 三相点是纯物质的三个相平衡共存时的温度和压⼒所决定的相点7、电极电势的改变可以改变电极反应的速率, 其直接的原因是改变了A(A) 反应的活化能 (B) 电极过程的超电势(C) 活性粒⼦的化学势 (D) 电极-溶液界⾯的双电层厚度8、宏观测知的某种物理量实际上是相应微观量的 D(A) 算术平均值;(B) ⼏何平均值;(C) 综合反映; (D) 统计平均值或时间平均值.9、对于物理吸附和化学吸附的关系,以下描述正确的是C(A) 即使改变条件,物理吸附和化学吸附也不能相互转化(B) Langmuir吸附等温式只适⽤于物理吸附(C) 在适当温度下,任何⽓体都可在任何固体表⾯上发⽣物理吸附(D) 升⾼温度对物理吸附和化学吸附都有利10、光化反应与⿊暗反应的相同之处在于A(A) 反应都需要活化能(B) 温度系数⼩(C) 反应都向ΔG(恒温恒压,W'=0时)减⼩的⽅向进⾏(D) 平衡常数可⽤通常的热⼒学函数计算11、电动现象产⽣的基本原因是D(A) 外电场或外压⼒的作⽤(B) 电解质离⼦的作⽤(C) 分散相粒⼦或多孔固体的⽐表⾯能⾼(D) 固体粒⼦或多孔固体表⾯与液相界⾯间存在扩散双电层结构12、下列哪种说法不正确D(A) 催化剂不改变反应热 (B) 催化剂不改变化学平衡(C) 催化剂具有选择性 (D) 催化剂不参与化学反应13、温度升⾼溶胶的稳定性B(A) 增加(B) 下降(C) 不变(D) 先增加后下降14、在HAc电离常数测定实验中,直接测定的物理量是不同浓度的HAc溶液的B(A) 电导率 (B) 电阻 (C) 摩尔电导 (D) 电离度15、某化学反应其反应物消耗8/7所需的时间是它消耗掉4/3所需的时间的1.5倍,则反应的级数为 B(A) 零级反应 (B) ⼀级反应 (C) ⼆级反应 (D) 三级反应四、简答题(每题4分,共32分)1、为什么温度升⾼时⽓体的粘度升⾼⽽液体的粘度下降?根据分⼦运动理论,⽓体的定向运动可以看成是⼀层层的,分⼦本⾝⽆规则的热运动,会使分⼦在两层之间相互碰撞交换能量。
动物生物化学试题及答案
动物生物化学试题一、单项选择题1. 下列氨基酸溶液不能使偏振光发生旋转的是:A.丙氨酸 B.甘氨酸C.亮氨酸 D.丝氨酸2. 下列氨基酸中是碱性氨基酸的有:A.组氨酸 B.色氨酸 C.酪氨酸 D.甘氨酸3. 血红蛋白的氧结合曲线为:A.双曲线 B.抛物线 C.S形曲线 D.直线4. 活性中心的正确叙述是A.至少有一个活性中心B.所有酶的活性中心都是不带电荷的C.酶的必需基团存在于活性中心内D.提供酶活性中心上的必需基团的氨基酸肽链相距很近5. 与酶的高效率无关的是:A.底物与酶的靠近与定向B.酶使底物分子中的敏感键产生电子张力C.共价催化形成反应活性高的底物-酶的共价中间物D.酶具有多肽链6. 下列哪一项不是辅酶的功能A. 转移基团B. 传递氢C. 传递电子D. 决定酶的专一性7. 糖酵解途径中不需要的酶是:A 丙酮酸羧化酶B 醛缩酶C 丙酮酸激酶D 磷酸甘油酸变位酶8. 底物水平磷酸化指A ATP水解为ADP + PiB 使底物分子水解掉一个ATP分子C 底物经分子重排后形成高能磷酸键,经磷酸基团转移使ADP磷酸化为ATPD 使底物分子加上一个磷酸根9. 醛缩酶的底物是:A 1,6-二磷酸果糖B 6-磷酸葡萄糖C 1,6-二磷酸葡萄糖D 6-磷酸果糖10. 关于高能磷酸键的叙述是错误的是A.所有高能键都是高能磷酸键B.高能磷酸键都是以核苷二磷酸或核苷三磷酸形式存在的C.实际上并不存在“键能”特别高的高能键D.高能键只能在电子传递链中偶联产生11. 活细胞不能利用下列那些能源来维持它的代谢A. ATPB.脂肪C.糖D.周围的热能12. 肌肉中的能量的主要储存形式是下列哪一种A.ADPB.磷酸烯醇式丙酮酸C.cAMPD.ATPE.磷酸肌酸13. 下列化合物中哪一个不是β-氧化所需的辅因子?A.NAD+B.肉碱C.CoAD.NADP+14. 下列关于脂肪酸β-氧化作用的叙述,哪个是正确的?A.起始于脂酰CoAB.对细胞来说,没有产生有用的能量C.被肉碱抑制D.主要发生在细胞核中15. 下列关于脂肪酸连续性β-氧化作用的叙述哪个是错误的?A.脂肪酸仅许一次活化,消耗ATP分子的两个高能键B.除硫激酶外,其余所有的酶都属于线粒体酶C.β-氧化包括脱氢、水化、脱氢和硫解等重复步骤D.这过程涉及到NADP+的还原16. 氨的主要代谢去路是:A. 合成尿素B. 合成谷氨酰胺C. 合成丙氨酸D. 合成核苷酸17. 素食:A.不能满足人体所有必需氨酸的需要B.比一般有肉食物蛋白生理价值高C.必须所用蛋白质的必需氨基酸能互补D.为满足各种必需氨基酸需要总蛋白量较少18. 属于非必需氨基酸的是A. 色氨酸、苯丙氨酸B. 赖氨酸、甲硫氨酸C. 亮氨酸、异亮氨酸D. 谷氨酸、天冬氨酸19. G+C)含量愈高Tm值愈高的原因A.G - C间形成了一个共价键B.G - C间形成了两个氢键C.G - C间形成了三个氢键D.G - C间形成了离子键20. 热变性的DNA有哪一种特性:A.磷酸二脂键发生断裂B.形成三股螺旋C.同源DNA有较宽的变性范围D.溶解温度直接随A-T对的含量改变而变化21. 与片断TAGAp互补的片断为:A.TAGApB.AGATpC.ATCTpD.TCTAp22. 下列关于哺乳动物DNA复制特点的描述哪一项是错误的?A.RNA引物较小B.冈崎片段较小C.DNA聚合酶α.β.γ参与D.仅有一个复制起点23. 下列哪项不是反转录酶催化的特点A.以病毒RNA为模板B.在引物参与下C.以四种NTP为底物D.按5’→3’方向催化合成一条与模板RNA互补的RNA-DNA杂交链24. 着色性干皮病是人类的一种遗传性皮肤病,该病的分子基础是A.细胞膜通透性缺陷引起迅速失水B.在阳光下使温度敏感性转移酶类失活C.受紫外线照射诱导了有毒力的前病毒D.患者缺乏内切核酸酶,DNA损伤修复功能差二、判断题1. 氨基酸处于等电点时的溶解度最小。
动物生物化学考试题库
动物生物化学考试题库(总27页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除第一单元生命的化学特征1.构成生物分子的元素有27种,其中约16种是所有生命所共有,下面法正确的是( A )A生物体中含量最丰富的元素是H、O、C、N四种元素,约占细胞重量的99%。
B生物体中含量最丰富的元素是H、O、C、S四种元素,约占细胞重量的99%。
C生物体中含量最丰富的元素是H、O、P、S四种元素,约占细胞重量的99%。
D生物体中含量最丰富的元素是Mn、Fe、P、S四种元素,约占细胞重量的99%。
E生物体中含量最丰富的元素是O、Mn、P、S四种元素,约占细胞重量的99%。
2.生物大分子的高级构象是靠非共价键来稳定,非共价键有( B )A二硫键、氢键、范德华引力、疏水键、离子键。
B氢键、范德华引力、疏水键、离子键。
C氢键、范德华引力、疏水键、离子键、配位键。
D氢键、范德华引力、疏水键、离子键、共价键。
E二硫键、碳碳单键、碳碳双键、碳氮单键。
3.下面关于蛋白质叙述那个是错误的?( D )A蛋白质是生物体内除水分外含量最高的化合物。
B蛋白蛋不仅是生命的结构成份,也是生命功能的体现者。
C生物生长、繁殖、遗传和变异都和蛋白质有关。
D蛋白质是生命的结构成分,在细胞内含量最高,它因此只和细胞支撑和肌肉运动功能有关。
E除了核酶之外的酶的化学本质是蛋白质,它是种类最多的一类蛋白质。
4. 下面关于核酸叙述那个是错误的?A核酸分为脱氧核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类。
B生物的遗传信息贮存于DNA的核苷酸序列中。
C真核细胞中DNA主要存在于细胞核中,并与组蛋白结合成染色体。
D生物体DNA含量和生长环境、年龄、营养状况无关,只和种有关。
E病毒DNA和RNA都具有。
( E )5.生命活动中动物体的能量叙述那个是错误的?A生物体能量来源于生物大分子氧化分解供能。
B三磷酸腺苷酸(ATP)既是生物体能量直接供体,也是能量的贮存方式。
2014年中国海洋大学博士入学考试试题生物化学入学考试,真题解析,复试真题,真题笔记
考博详解与指导
中国海洋大学博士入学考试试题-- 生物化学(水产类) 名词解释: β-氧化 酶原激活 sRNA 生物积累 蛋白质组 简答题: 1 维持蛋白质的结构力。 2 糖蛋白定义?生物功能是什么? 3 抗生素定义?作用机理是什么? 4TCA 循环的意义。 问答题: 1 蛋白质变性的因素有哪些? 2 举例说明核酸、蛋白质的相互作用引起的功能。 3 举例:海洋多糖的成份?功能? 4 举例说明分析一种活性成份提取路线。 5 举例说明酶技术在食品工业中的应用。 2004 年中国海洋大学博士入学考试试题-- 生物化学 名词解释: 抗体酶 乳糜微粒 生糖氨基酸 谷胱甘肽 粘多糖 问答题: 1 什么是核酶?叙述其意义。 2 糖异生是什么?有何意义? 3DNA 变性是怎么回事?DNA 和 RNA 的变性曲线有何不同? 4 影响酶催化效率的因素有哪些? 5 从构型、构象角度论述蛋白质的一级至四级结构,并说明他们之间的关系 2003 年中国海洋大学博士入学考试试题-- 生物化学 名词解释: 凝集素 抗体酶 花生四烯酸 谷胱甘肽 反转录 β-氧化 简答: 1 为什么说葡萄糖具有强还原性? 2 简述三羧酸循环的过程。(同时搞清楚糖酵解、三羧酸循环、C3 途径) 论述: 1 从构形构象角度阐述蛋白质一至四级结构。 2 影响酶活性的因素有哪些? 2002 年中国海洋大学博士入学考试试题-- 生物化学 名词解释: Edman 降解法 蛋白质组 反义 RNA 分子伴侣 糖蛋白和蛋白聚糖 共价催化 信号肽 A、B、Z-DNA 同工酶 问答题: 1 概述可作为纯化蛋白质的性质和据此发展的方法。 2 何为酶的抑制剂?其主要类别及各自特点是什么? 3 简述分子杂交(核酸、蛋白质等)的种类适用范围及特点。
高级生物化学试题及答案
高级生物化学试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 下列哪项不是蛋白质的功能?A. 催化生物化学反应B. 储存能量C. 作为细胞骨架D. 作为信号分子答案:B2. DNA复制过程中,哪一项不是必需的?A. DNA聚合酶B. 解旋酶C. 核糖体D. 引物答案:C3. 以下哪个过程不涉及酶的催化?A. 糖酵解B. 光合作用C. 蛋白质合成D. 细胞凋亡答案:D4. 以下哪种分子不是第二信使?A. cAMPB. Ca2+C. IP3D. ATP答案:D5. 下列哪种氨基酸是必需氨基酸?A. 谷氨酸B. 赖氨酸C. 丝氨酸D. 甘氨酸答案:B6. 细胞呼吸过程中,哪个阶段不产生ATP?A. 糖酵解B. 柠檬酸循环C. 电子传递链D. 所有阶段都产生ATP答案:D7. 以下哪种物质不是脂肪酸的衍生物?A. 甘油三酯B. 胆固醇C. 前列腺素D. 氨基酸答案:D8. 以下哪种酶不参与DNA修复?A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA内切酶D. 核糖体答案:D9. 以下哪种维生素是水溶性的?A. 维生素AB. 维生素DC. 维生素ED. 维生素B12答案:D10. 以下哪种化合物不是核酸?A. RNAB. DNAC. 脂多糖D. tRNA答案:C二、填空题(每空1分,共20分)1. 蛋白质的一级结构是指蛋白质分子中氨基酸的______。
答案:排列顺序2. 细胞膜的流动性主要是由于膜脂分子的______。
答案:流动性3. 糖原是动物细胞中储存______的主要形式。
答案:葡萄糖4. 细胞周期中,DNA复制发生在______期。
答案:S期5. 酶的活性中心通常含有______。
答案:必需氨基酸残基6. 真核生物的mRNA分子具有______结构。
答案:帽子和尾巴7. 脂肪酸的合成发生在______。
答案:细胞质8. 光合作用中,光能被______捕获。
答案:叶绿素9. 细胞凋亡是由______信号触发的程序性细胞死亡。
14年生物学综合 考博真题和答案四川大学
一:必答题1.在你的研究领域或你感兴趣的领域中,请简述你认为的二个重大的科学突破和一个最有希望突破的科学问题,并说明其对生物科学研究的作用和影响。
在此领域中,哪些科学问题你愿意以毕生精力去解决。
2.在你亲自参加的研究课题中,请叙述一组令你特别兴奋或标志性的实验(可简图帮助说明)包括:1.实验目的2.实验设计和手段3.试验中所遇到的具体问题和解决方法4.实验结果对该领域的贡献5.下一步实验设计和想法二:选答三题1.请阐述宏基因组学在微生物领域的研究策略与应用答:宏基因组学(Metagenomics)又叫微生物环境基因组学、元基因组学。
它通过直接从环境样品中提取全部微生物的DNA,构建宏基因组文库,利用基因组学的研究策略研究环境样品所包含的全部微生物的遗传组成及其群落功能。
它是在微生物基因组学的基础上发展起来的一种研究微生物多样性、开发新的生理活性物质(或获得新基因)的新理念和新方法。
其主要含义是:对特定环境中全部微生物的总DNA(也称宏基因组)进行克隆,并通过构建宏基因组文库和筛选等手段获得新的生理活性物质;或者根据rDNA数据库设计引物,通过系统学分析获得该环境中微生物的遗传多样性和分子生态学信息。
策略是从特定环境中直接分离所有微生物DNA , 将大片段的DNA克隆到受体菌中表达 , 然后根据某些生物活性筛选有应用价值的克隆。
包括两个方面: ①宏基因组文库的构建 : 宏基因组文库的构建沿用了分子克隆的基本原理和技术方法 , 并根据具体环境样品的特点和建库目的采用了一些特殊的步骤和对策。
一般包括样品总 D N A 的提取、与载体连接和在宿主细胞建立中克隆②宏基因组文库的筛选: 根据其研究目的,宏基因组文库筛选通常有功能筛选和序列筛选两种方法。
宏基因组学在基础微生物学研究中的应用1.发现新基因由于自然界中大多数微生物物种及其生物量是未知的 , 其中存在大量不可培养的微生物。
通过构建宏基因组文库 , 而且从中鉴定出的大多数基因将都是新的基因。
动物生物化学考试题库
绪论一、名词解释1、生物化学2、生物大分子二、填空题1、生物化学的研究内容主要包括、和。
2、生物化学发展的三个阶段是、和。
3、新陈代谢包括、和三个阶段。
4、“Biochemistry”一词首先由德国的于1877年提出。
5、在前人工作的基础上,英国科学家Krebs曾提出两大著名学说和。
三、单项选择题1、我国生物化学的奠基人是A.李比希B. 吴宪C.谢利D. 拉瓦锡2、1965年我国首先合成的具有生物活性的蛋白质是A.牛胰岛素B.RNA聚合酶C. DNA聚合酶D.DNA连接酶3、1981年我国完成了哪种核酸的人工合成A.清蛋白mRNAB.珠蛋白RNAC. 血红蛋白DNAD.酵母丙氨酸tRNA蛋白质的结构与功能一、名词解释1. 等电点2. 稀有蛋白质氨基酸3. 生物活性肽4.蛋白质的α-螺旋5. 蛋白质一级结构6.蛋白质二级结构7.蛋白质三级结构8.蛋白质四级结构9.蛋白质超二级结构10.蛋白质结构域11.肽单位12.分子病13.蛋白质变性与复性作用14.分子伴侣15.变构作用二、单项选择题1.下列哪种氨基酸为必需氨基酸?A.天冬氨酸B.谷氨酸C.蛋氨酸D.丙氨酸2.侧链含有巯基的氨基酸是:A.甲硫氨酸B.半胱氨酸C.亮氨酸D.组氨酸3.属于酸性氨基酸的是:A.亮氨酸B.蛋氨酸C.谷氨酸D.组氨酸4.不参与生物体内蛋白质合成的氨基酸是:A.苏氨酸B.半胱氨酸C.赖氨酸D.鸟氨酸5.在生理条件下,下列哪种氨基酸带负电荷?A.精氨酸B.组氨酸C.赖氨酸D.天冬氨酸6.蛋白质分子和酶分子的巯基来自:A.二硫键B.谷胱甘肽C.半胱氨酸D.蛋氨酸7.下列哪组氨基酸是人体必需氨基酸:A.缬氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、赖氨酸B.蛋氨酸、苏氨酸、甘氨酸、组氨酸C.亮氨酸、苏氨酸、赖氨鞭、甘氨酸D.谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸8.蛋白质吸收紫外线能力的大小,主要取决于:A.碱性氨基酸的含量B.肽链中的肽键C.芳香族氨基酸的含量D.含硫氨基酸的含量9.蛋白质多肽链的局部主链形成的α-螺旋主要是靠哪种化学键来维持的?A.疏水键B.配位键C.氢键D.二硫键10.下列哪种蛋白质结构是具有生物活性的结构?A.一级结构B.二级结构C.超二级结构D.三级结构11.某混合溶液中的各种蛋白质的等电点分别是4.8、5.4、6.6、7.5,在下列哪种缓冲液中电泳才可以使上述所有蛋白质泳向正极?A.8.0B.7.0C.6.0D.4.012.蛋白质的空间构象主要取决于:具有A.氨基酸残基的序列B.α-螺旋的数量C.肽链中的肽键D.肽链中的二硫键位置13.下列关于蛋白质四级结构的描述正确的是:A.蛋白质都有四级结构B.蛋白质四级结构的稳定性由共价键维系C.蛋白质只有具备四级结构才具有生物学活性D. 具有四级结构的蛋白质各亚基间靠非共价键聚合14.胰岛素分子A链和B链的交联是靠:A.盐键B.二硫键C.氢键D.疏水键15.蛋白质多肽链具有的方向性是:A.从3'端到5'端B.从5'端到3'端C.从C端到N端D.从N端到C端16.在凝胶过滤(分离范围是5 000~400 000)时,下列哪种蛋白质最先被洗脱下来:A.细胞色素C(13 370)B.肌红蛋白(16 900)C.清蛋白(68 500)D.过氧化氢酶(247 500)三、填空题1.元素分析表明,所有蛋白质都含四种主要元素,各种蛋白质的含量比较恒定,平均值约为,因此可通过测定的含量,推算出蛋白质的大致含量,这种方法称,是蛋白质定量的经典方法之一。
2018年宁夏大学考博试题2014高级动物生物化学
宁夏大学
2018年攻读博士学位研究生入学考试初试试题卷
考试科目:高级动物生物化学
适用专业:动物遗传育种与繁殖动物生产系统与工程
(不用抄题,答案写在答题纸上,写明题号,答案写在试题卷上无效)
一、简答题(共8小题,每小题8分,共64分)
1.比较蛋白质的变性与沉淀。
(8分)
2.比较酶的别构调节与共价修饰。
(8分)
3.肌肉内代谢产生的乳酸在肌肉内不能异生为糖,乳酸会产生积累,机体是如何处理的?简述代谢过程。
(8分)
4.氨基酸一般分解代谢有哪些途径?产物是什么?哪条途径是氨基酸分解代谢的主要途径?为什么?(8分)
5.比较脂肪酸β氧化与生物合成的异同。
(8分)
6.何谓基因文库?何谓cDNA文库?两者有何不同?(8分)
7.核酸有无营养价值?如果供给动物缺乏核酸的食物,动物能否生存?为什么?(8分)
8.分析DNA复制、修复和重组之间的关系。
(8分)
二、论述题(共2小题,共36分)
1.以反刍动物为例,当机体处于低血糖生理状态时,三大营养物质的代谢关系如何?阐述代谢过程。
(20分)
2.如何看待RNA功能的多样性?它的核心作用是什么?(16分)
第1页,共1页。
博士考试高级动物生物化学试题
2013年博士考试高级动物生物化学试题一、名词解释(20分)(每题4分,中英文回答均可)1、Telomerase端粒酶:就是一种RNA-蛋白质复合物。
其RNA序列常可与端粒区得重复序列互补;蛋白质部分具有逆转录酶活性,因此能以其自身携带得RNA为模板逆转录合成端粒DNA。
2、Signal peptide信号肽:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质夸膜转移(定位)得N-末端氨基酸序列(有时不一定在N端)。
3、Promoter启动子:在DNA分子中,RNA聚合酶能够结合并导致转录起始得序列。
4、Covalent modification 共价修饰:酶蛋白肽链上得一些基团可与某种化学基团发生可逆得共价结合,从而改变酶得活性,这一过程称为酶得共价修饰或者化学修饰。
5、Real time quantitative PCR实时定量PCR: 就是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,使每一个循环变得“可见”,最后通过标准曲线对样品中得DNA (or cDNA) 得起始浓度进行定量得方法。
二、简答题(40分)(每题8分)1、简述化学渗透假说。
(1)线粒体内膜得电子传递链就是一个质子泵。
传氢体与传电子体在线粒体内膜就是间隔交替排列得。
由于使H+与e交替传递,从而使H+发生定向转移。
(2)传氢体从内膜内侧接受2H后,将2个e传给电子传递体,同时2H+泵出内膜外侧。
(3)泵出得H+不能自由返回膜内侧(膜对H+就是不通透得),因而膜外侧H+浓度高于内侧,形成H+浓度得跨膜梯度,由于原有外正内负得跨膜电位增高,同时也形成了电位梯度。
(4)质子浓度差与电位差构成了质子得动力势,推动质子由外入内,膜外得质子在质子动力势得推动下,通过镶嵌在线粒体内膜得A TP合酶复合体返回膜内,并推动该酶合成ATP。
2、剧烈运动以后,血液流经组织时,血红蛋白对氧得亲与力发生什么变化,为什么?1)酮体就是脂肪酸在肝内正常得中间代谢产物,就是肝输出能源得一种形式;2)酮体就是肌肉尤其就是脑得重要能源。
动物生物化学试题最新完整标准答案
动物生物化学试题 (A)2006.1一、解释名词(20分,每小题4分)1. 氧化磷酸化2. 限制性核酸内切酶3. Km4. 核糖体5. 联合脱氨基作用二、识别符号(每小题1分,共5分)1.SAM2.Tyr3.cDNA4.PRPP5.VLDL三、填空题(15分)1. 蛋白质分子的高级结构指的是(1分),稳定其结构的主要作用力有(2分)。
2. 原核生物的操纵子是由 (1分)基因, (1分)基因及其下游的若干个功能上相关的(1分)基因所构成。
3. NADH呼吸链的组成与排列顺序为(3分)。
4. 酮体是脂肪酸在肝脏中产生的不完全分解产物,包括(1分),(1分)和(1分),在肝外组织中利用。
5. 脂肪酸的氧化分解首先要(1分)转变成脂酰辅酶A,从胞浆转入线粒体需要一个名为(1分)的小分子协助;而乙酰辅酶A须经过(1分)途径从线粒体转入胞浆合成脂肪酸。
四、写出下列酶所催化的反应,包括所需辅因子,并指出它所在的代谢途径(10分)1. 氨甲酰磷酸合成酶I2. 谷丙转氨酶五、问答题(50分)1. 什么是蛋白质的变构作用(4分),请举例说明(4分)。
(8分)2. 以磺胺药物的抗菌作用为例(4分),说明酶的竞争抑制原理(4分)。
(8分)3. 一摩尔的乙酰辅酶A经过三羧酸循环完全氧化分解可以生成多少ATP?(3分)请说明理由(5分)。
(8分)4.比较在原核生物DNA复制过程中DNA聚合酶III和聚合酶I作用的异同。
(8分)5.真核基因有什么特点,简述真核生物mRNA转录后的加工方式。
(8分)6.简述由肾上腺素经PKA途径调控糖原分解代谢的级联放大机制。
(10分)动物生物化学试题标准答案2006.1一、解释名词(20分,每小题4分)1. 氧化磷酸化:机体内营养物质经氧化分解,底物脱下的氢经过呼吸链的依次传递,最终与氧结合生成H2O,这个过程所释放的能量用于ADP的磷酸化反应(ADP+Pi)生成ATP,这样,底物的氧化作用与ADP的磷酸化作用通过能量相偶联。
2014年广东海洋大学考博试题2101生物化学
广东海洋大学2014年攻读博士学位研究生招生考试试题考试科目(代码)名称:2101生物化学满分100(所有答案写在答题纸上,写在试卷上不给分,答完后连同试卷一并交回。
)一、选择题(每题1分,共20分)1、蛋白质变性是由于()A 氢键被破坏;B肽键断裂;C水化层被破坏及电荷被中和;D蛋白质降解; E亚基的解聚。
2、下列哪种氨基酸残基最有可能位于蛋白质分子的表面?()A、亮氨酸;B、苯丙氨酸;C、蛋氨酸;D、天冬氨酸;E、丙氨酸。
3、tRNA在发挥其功能时的两个重要部位是()A、反密码子臂和反密码子环;B、氨基酸臂和D环;C、TψC环和可变环;D、TψC环与反密码子环;E、氨基酸臂和反密码子环4、限制性内切酶识别的序列是()A、粘性末端;B、回文结构;C、TATAAT;D、聚腺苷酸;E、AATAA5、在生理条件下,下列哪种基团既可作为质子的受体,又可作为质子的供体?()A、His的咪唑基;B、Arg的胍基;C、Trp的吲哚基D、Cys的巯基6、下列蛋白质中具有四级结构的是()A 胰岛素;B 细胞色素C;C RNA酶;D 血红蛋白;E 肌红蛋白。
7、变构酶的底物浓度曲线呈S-型,它说明()A、此变构酶为具负协同效应的酶;B、此变构酶中,底物分子与其亚基结合后能促进其它亚基与底物的结合;C、变构酶是米氏酶的一种特例;D、变构酶所催化的反应包括一系列步骤;E、此变构酶的多个底物分子同时与酶快速结合8、合成脂酸所需的氢由下列哪一种递氢体提供?()A、NADPB、FADH2C、FADD、NADPHE、NADH9、在下列PH对酶反应速度的影响作用的叙述中,正确的是()A、所有酶的反应速度对pH的曲线都表现为钟罩型;B、最适pH是酶的特征性常数;C、pH不仅影响酶蛋白的构象,还会影响底物的解离,从而影响ES复合物的形成与解离;D、针对pH对酶反应速度的影响,侧酶活性时只要严格调整PH为最适PH,而不需缓冲体系;E、以上都不是。
2014动物生物化学习题及参考答案-修正版
第二章核酸的化学一、名词解释1、核苷2、核苷酸3、核苷多磷酸4、DNA的一级结构5、DNA的二级结构6、核酸的变性7、增色效应8、T m二、填空题1、研究核酸的鼻祖是_________,但严格地说,他分离得到的只是。
2、等人通过著名的肺炎双球菌转化试验,证明了导致肺炎球菌遗传性状改变的转化因子是,而不是。
3、真核细胞的DNA主要存在于中,并与结合形成染色体;原核生物的DNA主要存在于。
4、在原核细胞中,染色体是一个形状为的双链DNA;在染色体外存在的、能够自主复制的遗传单位是。
5、DNA的中文全称是,RNA的中文全称是;DNA中的戊糖是,RNA中的戊糖是。
6、细胞质中的RNA主要包括三种类型,即、及,其中文全称分别是、及。
7、组成核酸的基本结构单位是,其由、和3种分子组成。
8、核苷分子中,嘧啶碱基与戊糖形成键;而嘌呤碱基与戊糖形成键。
9、构成RNA和DNA的核苷酸不完全相同,RNA含有,DNA中相应的核苷酸是。
10、DNA中相邻的两个核苷酸通过键相连,此键是由一个核苷酸分子的与相邻的核苷酸分子的相连形成。
11、GATCAA这段序列的互补序列为。
12、1953年,和提出了DNA右手双螺旋结构模型。
三、单项选择题1.在天然存在的核苷中,糖苷键都呈构型。
A.α-B.β-C.γ-D. δ-2.Watson-Crick提出的DNA右手双螺旋结构属于哪一型:A. AB. BC. CD. Z3.tRNA3′端的序列为:A. -ACCB.-CACC.-ACAD.-CCA4.下列关于浮力密度的叙述,哪一条是对的:A. RNA的浮力密度大于DNAB. 蛋白质的浮力密度大于DNAC. 蛋白质的浮力密度大于RNAD. DNA的浮力密度大于RNA5.下列关于RNA结构的叙述,错误的是:A.RNA的结构象DNA一样简单、有规则B.绝大多数RNA是单链分子,少数病毒RNA是双链C.RNA的结构象蛋白质那样复杂而独特D.各种RNA分子均存在局部双链区6.含有稀有碱基比例较多的核酸是:A.胞核DNA B.线粒体DNA C.tRNA D.mRNA7.真核细胞mRNA帽子结构最多见的是:A.m7A PPP N mP N mP B.m7G PPP N mP N mP C.m7U PPP N mP N mP D.m7C PPP N mP N mP 8.DNA变性后理化性质有下述改变:A.对260nm紫外吸收减少B.溶液粘度下降C.磷酸二酯键断裂D.形成游离核苷酸9.下列哪组核苷酸含量高可导致双链DNA的T m较高:A.A+G B.C+T C.A+T D.G+C10.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基相连,连接位点是:A.2′,5′B.3′,5′ C.5′,5′ D.3′,3′四、判断并改错1、病毒分子中,只含有一种核酸。
2014武汉大学基础医学院考博真题
2014武汉大学考博英语作文
1. 环境不能变,但是,人的心境可以变,不要试图改变环境,而要改变自己来适应环境。
2014武汉大学基础医学院生物化学考博真题
一、填空题总共15题,每个空1分
1. 和是确定蛋白质三维结构最准确的方法
2. 和维持DNA的空间结构
3. 信号肽是蛋白质识别溶酶体的信号
4. DNA-pol有保真性是因为和
5. 生物转化的两项反应是和
6. 磷酸戊唐旁路的意义是合成和
7. 胆固醇酯化,在血浆中靠酶,在细胞内靠酶
8. 酮体分哪三种
9. 核酸合成分为从头合成与补救合成
二、简答题每题10分,总共70分
1. 大分子印迹的方法和原理
2. B族维生素的种类和作用
3. 原核及真核细胞在转录时的分子识别
4. 重组DNA技术的原理
5. 三种抑制剂对酶促反应中关键参数的影响
6. RNA的结构和功能
7. 四种血浆脂蛋白的代谢过程
2014年武汉大学基础医学院细胞生物学真题
一、名词解释
1. 细胞系
2. 蛋白质的三级结构
3. 脂双分子层
4. 受调分泌
5. 核定位信号
6. 核糖体
7. 细胞骨架8 分子伴侣9. 内质网10. 细胞信号转导
二、简答题
1. 钠泵的转运机制
2. 微管的功能
3. 为什么说线粒体是细胞氧化中心和动力站
4. 分泌蛋白的合成和分泌过程
5. 溶酶体的功能
6. 细胞凋亡时,染色质DNA降解的特点
7. 真核DNA损伤的修复机制。
四川大学华西医学院生物化学2014年考博真题试卷
3、对于几种人工合成底物与同一酶相结合时,酶与底物结合的亲和力大小不同,怎样说明?
四川大学华西医学院
医学考博真题试卷
攻读博士学位研究生入学考试试卷
四川大学华西医院
2014年攻读博士学位研究生入学考试试题
考试科目:生物化学
注意:所有答案一律写在答题纸上,写在试题纸上或其他地方一律不给分。
一、名词解释
1、RNA splicing
2、Apoptosis
3、Instructs enzyme
4、Stemp cell engering
5、Systemic biology
二、简答题
1、例举关于2013年医学或生理学方面诺贝尔并说明其主要内容及自己的见解。
2、DNA复兴的影响因素:(1)阳离子浓度(2)温度Tm(3)A浓度
3、计算题:酶比活性测定。
三、论述题
1、青霉素与磺胺类药物的作用机制?
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上海交通大学考博真题生物化学 2000 一、名词解释限制性内切酶酮体联合脱氢氧化磷酸化增强子蛋白质变性第二信使糖异生二、简答题单核甘酸谷氨酰胺载体蛋白信号肽σ因子辨认转录起始位点加单氧酶三、问答题1. 蛋白质定量测定及原理2. MTX叶酸的作用机理3. 原核真核细胞RNA加工比较4. DNA复制保真机制5. 血红素合成原料,调节过程上海交通大学考博真题生物化学 2002一、名词解释1.糖异生2.呼吸链3.逆转录酶4.酮体5.氨基酸tRNA合成酶6.PCR二、简答1.简述2.6-二磷酸果糖在糖代谢中的调节作用?2.区别甘油三脂脂肪和脂蛋白脂肪酶?3.简述谷氨酰胺的生理作用 ?4.简述加单氧酶系的组成及生理功能?5.维生素K的主要功能?三、问答1.乙酰CoA的来源,去路,并写一个来源代谢过程?2.试述真核生物MRNA转录的加工?3.原核生物,真核生物基因表达调控有何不同?4.肝损伤出现肝肿,凝血障碍,血ALT活性升高,血氨升高,甚至肝昏迷,请解释原因?5.己知目的基因为分隔基因,如何得到该基因指导合成的蛋白质基因工程产物?上海交通大学考博真题生物化学 2003一、名词解释1.蛋白质的变构作用2.多功能酶3.载脂蛋白4.IP35.一碳单位6.切除修复7.反式作用因子8.转座二、简答1.酶原和酶原激活的生理功能?2.谷胱甘肽的生理功能?3.蛋氨酸循环的意义?4.维生素K的功能?5.DNA复制保真性的机制?6.胆固醇可以生物合成哪些物质?7.氨基甲酰磷酸的功能?8.重组DNA的工具酶?9.游离胆红素和结合胆红素的区别?三、问答1.蛋白质的氨基酸序列、核酸的核苷酸序列、以及他们和功能的关系蛋白质氨基酸序列和其高级结构的关系?2.肝脏受到损害以后,可以出现血氨升高引起持昏迷,凝血功能障碍、黄疸,他们的机制?3.为什么细菌在有葡萄糖存在时不能利用乳糖?用乳糖操纵子说明机制?4.基因转录后的加工方式,五种?5.为什么说生命起源于RNA?上海交通大学考博真题生物化学 2004一、名词解释1.亚基2.转氨基作用3.凝血因子4.遗传密码的简并性5.ALA 合成酶6.SH结构域7.Km8.激素敏感脂肪酶二、简答题1. 6-磷酸果糖激酶-1;6-磷酸果糖激酶-22. ApoCⅡ;ApoE3. 游离胆红素;结合胆红素4. ρ因子;σ亚基5. 核酶;限制性内切酶三、简答题1. 试述DNA双螺旋结构模型提出的背景?2. ATP生成有哪几种方式?试述ATP生成的主要过程。
2014年415动物生理学与生物化学(农学)真题及答案
2014年全国硕士研究生入学统一考试农学门类联考动物生理学与生物化学试题解析动物生理学一、单项选择题:1~15小题,每小题1分,共I5分。
下列每题给出的四个选项中,只有一个选项是符合题目要求的。
1.骨骼肌细胞兴奋时细胞膜发生去极化的离子基础是A.K+内流B.Ca2+内流C.Cl-内流D.Na+内流【参考答案】B【考查知识点】考察骨骼肌细胞兴奋时,细胞膜钙离子内流的重要性。
2.下列物质中,能加速新鲜血液凝固的是A.柠檬酸钠溶液B.液体石蜡C.肺组织浸出液D.肝素溶液【参考答案】C【考查知识点】考察血液凝固和抑制的相关物质。
3.正常情况下,心肌不会发生强直收缩的原因是A.心肌是功能合胞体B.心肌肌浆网不发达C.心肌有自动节律性D.心肌有效不应期长【参考答案】D【考查知识点】考察心肌细胞的功能效应。
4.心室等容舒张过程中各部位压力相比较,正确的是A.心房压>心室压>主动脉压B. 心房压>心室压<主动脉压C. 心房压<心室压<主动脉压D. 心房压<心室压>主动脉压【参考答案】【考查知识点】考察血压的流动方向。
5.下列心肌细胞中,兴奋传导速度最慢的是A.新房肌细胞B.结区细胞C.哺肯野细胞D.心室肌细胞【参考答案】【考查知识点】考察兴奋在心肌细胞中传导速度。
6.缺氧可反射性地引起呼吸加强,该反射的感受器是:A.肺牵张感受器B.呼吸肌本体感受器C.外周化学感受器D.中枢化学感受器【参考答案】C【考查知识点】考察呼吸运动在不同的条件下不同的感受器。
7.下列条件中,均可使氧离曲线发生右移的是A.pH升高、CO2分压升高、温度升高B. pH降低、CO2分压升高、温度升高C. pH升高、CO2分压降低、温度降低D.pH降低、CO2分压降低、温度降低【参考答案】B【考查知识点】考察氧离曲线左右移动的因素。
8.对食物中蛋白质消化作用最强的消化液是A.唾液B.胃液C.胆汁D.胰液【参考答案】D【考查知识点】考察影响蛋白质消化作用最强的消化液。
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2014年攻读博士学位研究生入学考试初试试题答案 ,中英文回答均可)一、名词解释(20分)(每题4分序列的序列。
SD1. Shine-Dalharno sequence SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体能与细菌嘌呤的碱基序列,上游7-12个核苷酸处,有一段富含在细菌mRNA起始密码子AUG AUG处开始翻译。
16SrRNA3'端识别,帮助从起始:细胞中的某些蛋白质分子可以识别正在合成的多肽或chaperon分子伴侣2、Molecular
这一类从而帮助这些多肽转运、折叠或组装,部分折叠的多肽并与多肽的某些部位相结合,伴侣”分子本身并不参与最终产物的形成,因此称为分子“3、Cori cycle乳酸循环:肌肉收缩通过糖酵解生成乳酸。
在肌肉内无6-P-葡萄糖酶,所以无法催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖。
所以乳酸通过细胞膜弥散进入血液后,再入肝,在肝脏内在乳酸脱氢酶作用下变成丙酮酸,接着通过糖异生生成为葡萄糖。
葡萄糖进入血液形成血糖,后又被肌肉摄取,这就构成了一个循环(肌肉-肝脏-肌肉),此循环称为乳酸循环。
4.Melting temperature熔解温度:双链DNA熔解彻底变成单链DNA的温度范围的中点温度。
5. Specific activity比活:用于测量酶纯度时,可以是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力,一般用单位/mg蛋白来表示
二、简答题(50分)
1、简要说明RNA功能的多样性。
(8分)
1、RNA在遗传信息翻译中起决定作用。
(mRNA起信使和模板的作用,rRNA起着装配作用,tRNA 起转运和信息转换作用)。
2、RNA还具有重要的催化功能。
也就是核酶(酶除了蛋白质还有RNA)的作用。
3、RAN转录后加工和修饰需要各类小RAN和蛋白质复合物。
RNA转录后的信息加工十分复杂,其中包括切割、修剪、修饰、异构、附加、拼接、编辑和再编码等。
这些过程都需要很多特殊的RNA参与才能完成。
比如snoRNA(核仁小RNA)指导rRNA前体的甲基化、假尿苷酸化和切割。
4、RNA对基因表达和细胞功能具有重要调节作用。
反义RNA可通过与靶部位序列互补而与之结合,或直接阻止其功能,或改变靶部位构象而影响其功能。
PAGE的中英文全称,简述它的作用原理?SDS-、写出2.
用作用:聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gelelectrophoresis,简称PAGE)。
寡核苷酸于分离蛋白质和简称一亚甲基双丙烯酰胺(:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'原理作用下,聚合交联形四甲基乙二胺(TEMED),N,N,N',N' Bis)在催化剂过硫酸铵(APS)立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。
成的具有网状 3、简述酮体是怎么形成的?有何作用?(8分))酮体是肌(2 (1)酮体是脂酸在肝内正常的中间代谢产物,是甘输出能源的一种形式;肉尤其是脑的重要能源。
酮体分子小,易溶于水,容易透过血脑屏障。
体内糖供应不足(血糖降低)时,大脑不能氧化脂肪酸,这时酮体是脑的主要能源物质。
鸡蛋清中有一种对生物素亲和力极强的抗生素蛋白,它是含生物素酶的高度专一的抑制、46分)剂,请考虑它对下列反应有无影响?((1)葡萄糖生成丙酮酸(2)丙酮酸生成葡萄糖(3)核糖-5-磷酸生成葡萄糖(4)丙酮酸生成草酰乙酸生物素是丙酮酸羧化酶的辅基,该酶可以羧化丙酮酸生成草酰乙酸并进而逐步生成葡萄2糖。
因此,鸡蛋清中对生物素亲和力极高的抗生物素蛋白对反应1和3无影响,对方应和4有影响。
5、基因文库与cDNA文库有何不同?(8分)部分酶切后,将酶限制性内切酶DNA,通过基因测序仪用基因文库:指一个生物体的基因组将包DNA片段的载体分子的集合体,载体切片段插入到DNA分子中,所有这些插入了基因组含这个生物体的整个基因组,称为这个生物体的基因文库 mRNA:是以mRNA为模板,在反转录酶作用下合成的互补DNA,它的顺序可代表序列。
cDNA 文库拷贝组成的文库称为cDNA种类的文库
cDNA:由来自细胞或组织mRNADNA6、H5N1禽流感病毒株中的H代表什么?N代表什么?(5分),有如病毒的钥匙,用来打开及入侵人类或牲畜的细胞;(H 代表血细胞凝集素) 神经氨酸酶N 代表,是帮助病毒感染其他细菌的酵素。
7、什么是核酸的变性?核酸的变性与降解有什么不同?(5分)维系核酸二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏,在物理和化学因素的作用下,核酸的变性:由双链解旋为单链的过程DNA.
核酸的降解:核酸由各种水解酶催化逐步水解,生成核苷酸、核苷、戊糖和碱基等。
三、论述题(30分)
1、利用所学生物化学知识论述动物体内CO、HO和ATP是怎样生成的?(12分)221、水:生物体内水生成主要有以下几个生理过程:A、蛋白质合成(脱水缩合);B、DNA复制和RNA合成;C、呼吸作用(有氧呼吸第三阶段);D、糖酵解、三羧酸循环
代谢物上的氢原子被脱氢酶激活脱落后,经过一系列的传递体,最后与激活的氧结合生成水的全部体系,此过程与细胞呼吸有关,所以将此传递链称为呼吸链(respiratory chain)
2、CO2:
呼吸作用(有氧呼吸第二阶段及生成乙醇的无氧呼吸第二阶段)、三羧酸循环
生物氧化中CO2的生成是代谢中有机酸的脱羧反应所致。
有直接脱羧和氧化脱羧两种类型。
按脱羧基的位置又有α-脱羧和β-脱羧之分。
3、ATP
呼吸作用(有氧呼吸第一、二、三阶段);糖酵解、三羧酸循环
氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。
有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。
即ATP生成方式有两种。
一种是代谢物脱氢后,分子内部能量重新分布,使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物,促使ADP变成ATP。
这称为底物水平磷酸化。
另一种是在呼吸链电子传递过程中偶联ATP的生成。
生物体内95%的ATP来自这种方式。
2、从组织中提取和分离蛋白质的基本原则是什么?根据这一原则应当注意什么?蛋白质分离纯化常用的方法有哪些?简要说明这些方法依据蛋白质的何种理化性质?(18分)
蛋白质分离提纯的一般原则
1. 前处理
把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来,保持原来的天然状态,并不丢失生物活性。
常用的方法:匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等。
超声波破碎法:当声波达到一定频率时,使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术。
超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压,这个低气压使液体转化为气体,即形成很多小气泡。
由于局部压力的转换,压力重新升高,气泡崩溃。
崩溃的气泡产生一个振动波并传送到液体中,形成剪切力使细胞破碎。
粗分级.2
分离可用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。
这些方法的特点是简便、处理量大,3.细分级
样品的进一步纯化。
样品经粗分离以后,一般体积较小,杂蛋白大部分已被除去。
进一步纯化,一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。
必要时还可选择电泳、等电聚焦等作为最后的纯化步骤。
结晶是最后的一步
分离纯化的方法:1.分子大小;
2. 溶解度;
3. 电荷;
4. 吸附性质;
5. 对配体分子的生物亲和力等。
(一)根据分子大小不同的纯化方法
1. 透析利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。
2.密度梯度离心蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。
3.凝胶过滤利用蛋白质分子大小,因为凝胶过滤所用的介质是凝胶珠,其内部是多孔的网状结构。
当不同的分子大小的蛋白质分子流过凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子进入珠内的网状结构,而被排阻在凝胶珠之外随溶剂在凝胶珠之间的空隙向下移动并最先流出柱外,比网孔小的分子能不同程度底自由出入凝胶珠的内外,由于不同大小的分子所经路径不同而得到分离。
大分子先被洗脱下来。
小分子后被洗脱
(二)利用溶解度差别的纯化方法
1.等电点沉淀和PH的控制蛋白质处于等电点时,其净电荷为零,由于相邻蛋白质分子之间没有静电斥力而聚集沉淀。
因此在其他条件相同时,它的溶解度达到最底点,利用等电点分离蛋白质是一种常用的方法。
2. 蛋白质的盐溶和盐析中性盐可以增加蛋白质的溶解度,这种现象称为盐溶。
盐溶作用是由于蛋白质分子吸附某种盐类离子后,带电层使蛋白质分子彼此排斥,而蛋白质分子与水相互作用加强了,因而溶解度增加
当溶液的离子强度增加到一定数值时,蛋白质的溶解度开始下降。
当离子强度足够高时,。
盐析很多蛋白质可以从水溶液中沉淀出来,这种现象称为
盐析作用的主要原因是大量中性盐的加入使水的活性降低,原来溶液的大部分甚至全部的自由基水转变成盐离子的水化水。