2014年博士考试高级动物生物化学试题

2014年攻读博士学位研究生入学考试初试试题答案 ,中英文回答均可）一、名词解释（20分）（每题4分序列的序列。SD1. Shine-Dalharno sequence SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体能与细菌嘌呤的碱基序列，上游7-12个核苷酸处，有一段富含在细菌mRNA起始密码子AUG AUG处开始翻译。16SrRNA3'端识别，帮助从起始：细胞中的某些蛋白质分子可以识别正在合成的多肽或chaperon分子伴侣2、Molecular

这一类从而帮助这些多肽转运、折叠或组装，部分折叠的多肽并与多肽的某些部位相结合，伴侣”分子本身并不参与最终产物的形成，因此称为分子“3、Cori cycle乳酸循环：肌肉收缩通过糖酵解生成乳酸。在肌肉内无6-P-葡萄糖酶，所以无法催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖。所以乳酸通过细胞膜弥散进入血液后，再入肝，在肝脏内在乳酸脱氢酶作用下变成丙酮酸，接着通过糖异生生成为葡萄糖。葡萄糖进入血液形成血糖，后又被肌肉摄取，这就构成了一个循环(肌肉-肝脏-肌肉)，此循环称为乳酸循环。

4.Melting temperature熔解温度：双链DNA熔解彻底变成单链DNA的温度范围的中点温度。

5. Specific activity比活:用于测量酶纯度时，可以是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力，一般用单位/mg蛋白来表示

二、简答题（50分）

1、简要说明RNA功能的多样性。（8分）

1、RNA在遗传信息翻译中起决定作用。(mRNA起信使和模板的作用，rRNA起着装配作用，tRNA 起转运和信息转换作用)。

2、RNA还具有重要的催化功能。也就是核酶(酶除了蛋白质还有RNA)的作用。

3、RAN转录后加工和修饰需要各类小RAN和蛋白质复合物。RNA转录后的信息加工十分复杂，其中包括切割、修剪、修饰、异构、附加、拼接、编辑和再编码等。这些过程都需要很多特殊的RNA参与才能完成。比如snoRNA(核仁小RNA)指导rRNA前体的甲基化、假尿苷酸化和切割。

4、RNA对基因表达和细胞功能具有重要调节作用。反义RNA可通过与靶部位序列互补而与之结合，或直接阻止其功能，或改变靶部位构象而影响其功能。

ＰＡＧＥ的中英文全称，简述它的作用原理？SDS-、写出2．

用作用:聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语: polyacrylamide gelelectrophoresis，简称PAGE)

。寡核苷酸于分离蛋白质和简称一亚甲基双丙烯酰胺(:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N'原理作用下，聚合交联形四甲基乙二胺(TEMED)，N，N，N'，N' Bis)在催化剂过硫酸铵(APS)立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。成的具有网状 3、简述酮体是怎么形成的？有何作用？（８分））酮体是肌（2 (1)酮体是脂酸在肝内正常的中间代谢产物，是甘输出能源的一种形式；肉尤其是脑的重要能源。酮体分子小，易溶于水，容易透过血脑屏障。体内糖供应不足（血糖降低）时，大脑不能氧化脂肪酸，这时酮体是脑的主要能源物质。鸡蛋清中有一种对生物素亲和力极强的抗生素蛋白，它是含生物素酶的高度专一的抑制、4６分）剂，请考虑它对下列反应有无影响？（（１）葡萄糖生成丙酮酸（２）丙酮酸生成葡萄糖（３）核糖－５－磷酸生成葡萄糖（４）丙酮酸生成草酰乙酸生物素是丙酮酸羧化酶的辅基，该酶可以羧化丙酮酸生成草酰乙酸并进而逐步生成葡萄2糖。因此，鸡蛋清中对生物素亲和力极高的抗生物素蛋白对反应1和3无影响，对方应和4有影响。 5、基因文库与ｃＤＮＡ文库有何不同？（８分）部分酶切后，将酶限制性内切酶DNA，通过基因测序仪用基因文库:指一个生物体的基因组将包DNA片段的载体分子的集合体，载体切片段插入到DNA分子中，所有这些插入了基因组含这个生物体的整个基因组，称为这个生物体的基因文库 mRNA：是以mRNA为模板，在反转录酶作用下合成的互补DNA，它的顺序可代表序列。cDNA 文库拷贝组成的文库称为cDNA种类的文库

cDNA:由来自细胞或组织mRNADNA６、Ｈ５Ｎ１禽流感病毒株中的Ｈ代表什么？Ｎ代表什么？（５分），有如病毒的钥匙，用来打开及入侵人类或牲畜的细胞；(H 代表血细胞凝集素) 神经氨酸酶N 代表，是帮助病毒感染其他细菌的酵素。７、什么是核酸的变性？核酸的变性与降解有什么不同？（５分）维系核酸二级结构的氢键和碱基堆积力受到破坏，在物理和化学因素的作用下，核酸的变性：由双链解旋为单链的过程DNA．

核酸的降解：核酸由各种水解酶催化逐步水解，生成核苷酸、核苷、戊糖和碱基等。

三、论述题（３０分）

1、利用所学生物化学知识论述动物体内ＣＯ、ＨＯ和ATP是怎样生成的？（12分）２２1、水：生物体内水生成主要有以下几个生理过程：A、蛋白质合成（脱水缩合）；B、DNA复制和RNA合成；C、呼吸作用（有氧呼吸第三阶段）；D、糖酵解、三羧酸循环

代谢物上的氢原子被脱氢酶激活脱落后，经过一系列的传递体，最后与激活的氧结合生成水的全部体系，此过程与细胞呼吸有关，所以将此传递链称为呼吸链（respiratory chain）

2、CO2：

呼吸作用（有氧呼吸第二阶段及生成乙醇的无氧呼吸第二阶段）、三羧酸循环

生物氧化中CO2的生成是代谢中有机酸的脱羧反应所致。有直接脱羧和氧化脱羧两种类型。按脱羧基的位置又有α-脱羧和β-脱羧之分。

3、ATP

呼吸作用（有氧呼吸第一、二、三阶段）；糖酵解、三羧酸循环

氧化磷酸化（oxidative phosphorylation）是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即ATP生成方式有两种。一种是代谢物脱氢后，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物，促使ADP变成ATP。这称为底物水平磷酸化。

另一种是在呼吸链电子传递过程中偶联ATP的生成。生物体内95%的ATP来自这种方式。

2、从组织中提取和分离蛋白质的基本原则是什么？根据这一原则应当注意什么？蛋白质分离纯化常用的方法有哪些？简要说明这些方法依据蛋白质的何种理化性质？（18分）

蛋白质分离提纯的一般原则

1. 前处理

把蛋白质从原来的组织或溶解状态释放出来，保持原来的天然状态，并不丢失生物活性。常用的方法：匀浆器破碎、超生波破碎、纤维素酶处理以及溶菌酶等。

超声波破碎法：当声波达到一定频率时，使液体产生空穴效应使细胞破碎的技术。超声波引起的快速振动使液体局部产生低气压，这个低气压使液体转化为气体，即形成很多小气泡。由于局部压力的转换，压力重新升高，气泡崩溃。崩溃的气泡产生一个振动波并传送到液体中，形成剪切力使细胞破碎。

粗分级．2

分离可用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大，3．细分级

样品的进一步纯化。样品经粗分离以后，一般体积较小，杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化，一般使用层析法包括凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳、等电聚焦等作为最后的纯化步骤。

结晶是最后的一步

分离纯化的方法：1．分子大小；

2. 溶解度；

3. 电荷；

4. 吸附性质；