亲子鉴定DNA提取标准操作规程
做亲子鉴定怎样收罗合格样本
做亲子鉴定如何采集合格样本DNA亲子鉴定所有人体有细胞核的细胞都可以用来进行鉴定。
其中最常用的样本是血痕,带毛囊的毛发,口腔粘膜细胞(口腔拭子)等,其它检材如精斑,混合斑,肌肉,牙齿,骨骼,甚至胎儿羊水等都可以采用。
采集口腔拭子注意事项:避免用手触及棉签,采集前可先用清水轻轻漱口。
您可在药店购买医用消毒棉签,每人至少需要提取4根棉签。
具体步骤:1、准备一张干净的白纸;2、取第一根棉签(手不要碰触脱脂棉部位),伸进口腔,紧靠左侧脸颊内侧来回刮拭30次(不时旋转棉棒),需充分接触口腔粘膜。
取出棉签,放在白纸上自然晾干2小时;3、取第二根棉签,在右侧口腔内侧来回刮拭30次,放在同一张白纸上,自然晾干2小时;4、将第三根棉签在左、右两侧各刮拭15次,放在同一张白纸上,同上自然晾干;5、做好标记,用白纸包好,放入信封中;6、重复上述步骤,提取另一人的口腔粘膜上皮细胞,用白纸包好后标记清楚,放入另一信封中。
注意:请不要将两人的棉签混淆!采集血痕注意事项:滴在医用纱布上的血痕需要阴干,不能加热或阳光照射!样本做好标记后,分别存放在纸制信封中。
准备事项:清洁双手,医用纱布,采血针(或大头针),纸制信封。
具体步骤:1. 在药店购买医用消毒纱布和医用酒精,准备纸制信封和纸笔;2. 消毒采血部位后,用采血针刺指尖或耳垂等身体部位,(如果孩子较小可采脚后跟)挤压取5滴血,每滴血在纱布上散开后约小手指盖大小,如果5滴血斑滴在一起,要有1元硬币大小,血斑渗透2-3层纱布;如果使用干净的面巾纸采血痕,取5滴,每个血痕渗透三层纸面比黄豆略大亦可。
3. 将血纱布阴干,作好标记,如标记样本身份(父亲血、孩子血),记录样本采集日期。
4. 注意将不同的样本单独放置,不能相互接触,可以放入不同的纸信封中,信封上标记清楚。
采集带毛囊的毛发注意:不要触及毛发的毛囊部位,就是您看到的毛发根部的白色物质!采集毛发时注意清洗双手。
保证样本与信封上标记的身份一致。
DNA提取实验耗材质检的标准操作程序
DNA提取实验耗材质检的标准操作程序
一、目的和范围
本标准操作程序适用于DNA提取实验耗材质检过程,旨在确保实验耗材的质量和稳定性,保证实验结果的准确性和可靠性。
二、主要步骤
1. 准备工作:
- 所需耗材:DNA提取试剂盒、离心管、显微离心管等。
- 检查实验耗材的包装是否完好,无污染和损坏。
2. 样品制备:
- 根据实验要求,选择适当的样品进行DNA提取。
- 样品应严格按照规定的操作程序进行采集和处理,避免污染和损害。
3. 耗材准备:
- 请先仔细阅读并按照实验耗材的使用说明书操作。
- 检查实验耗材的标签和标识是否与需要使用的样品和试剂相
匹配。
4. 实验操作:
- 按照实验耗材的使用说明书进行实验操作,严格按照操作步
骤和时间控制进行操作。
- 操作过程中应注意实验室的清洁和卫生,并避免交叉污染。
5. 结果记录:
- 按照实验要求和操作规范记录实验结果,并确保结果的准确
性和完整性。
三、注意事项
1. 在操作过程中应佩戴适当的个人防护装备,包括实验手套、
口罩等。
2. 严格遵守实验室的安全操作规范,确保个人和实验室的安全。
3. 实验耗材使用后,应按照实验室废弃物处理规定进行处理。
以上为DNA提取实验耗材质检的标准操作程序,希望能够对您的实验工作有所帮助。
如有任何疑问,请随时咨询。
DNA抽提的操作步骤
DNA抽提的操作步骤试剂准备:蛋白酶K、白细胞裂解液、苯酚、氯仿、无水乙醇、70%乙醇1.从冰箱取出冰冻的白细胞,将编号和姓名写在登记本上。
待白细胞融化后,向管内加入5ml白细胞裂解液和50ul蛋白酶K(20mg/ml)。
将管内液体摇匀,或者借助移液枪反复吹打混匀。
然后将管子放入60℃水浴锅内,过夜(可以根据孵育的时间长短适当调整温度)。
在水浴的过程中,每隔2-3小时将试管震荡摇匀一次。
2.把水浴锅内的试管取出,将其中的液体转移到15ml试管内(15ml的试管事先做好标记),并依次向试管内加入等体积(即5ml)的酚-氯仿,然后将盖子拧紧。
轻轻上下颠倒混匀(20次左右),然后离心3000rpm,15min。
离心时将离心机的温度调至室温,温度过低会导致有机溶剂凝固。
离心结束后,可以看到试管内的液体分为三层,上层为水相,中间为变性的蛋白质,下层为有机溶剂(酚氯仿)。
3.然后用钝口Tip吸出上层水相转移到干净的试管中(注意:将1ml的Tip尖端减去2-3mm即可得到钝口的Tip,在吸取上层水相的过程中要尽量避免混入蛋白相,动作要缓慢)多分几次转移),然后再加入等体积的酚氯仿,拧紧盖子,颠倒混匀,离心3000rpm,10min。
4.再次用钝口Tip把上层水相转移到干净的试管中,然后向试管内加入2倍体×2),拧紧盖子,缓慢颠倒,积的无水乙醇(无水乙醇的体积=V所吸出的上清的体积即可看到絮状的DNA沉淀析出。
(如果抽提的数量较少,可以将管子放到Cold Room,等数量多了再一起进行下面的操作)5.用黄色Tip把白色絮状的DNA沉淀挑出来,放到70%乙醇(预先准备0.5ml的小管子,加入400ul70%的无水乙醇,洗涤用)中洗涤,重复两次。
6.最后用黄色Tip将DNA沉淀挑出,将DNA连同枪头一同打到1.5mlEP管中。
敞开盖子,室温放置直到乙醇完全挥发,向EP管内加入400ulTE,用Tip头反复吹打,使DNA完全溶于TE,得到DNA溶液。
亲子鉴定DNA提取标准操作规程
DNA提取标准操作规程1. 目的:规范不同检材的DNA提取操作程序,确保DNA质量,保证STR分型结果准确性。
2. 原理:Chelex-100 是一种由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成的化学螯合树脂,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,可螯合多价离子,特别是对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。
在低离子强度、碱性及煮沸的条件下,可以使细胞膜破裂,并使蛋白质变性,通过离心除去Chelex颗粒,使其结合的物质与DNA 分离。
磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。
反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
3. 操作者:具有法医物证检验资格的广西区妇幼司法鉴定所技术人员。
4. 标本:5%EDTA抗凝全血、8-10ml胎儿羊水、5%EDTA抗凝脐血、FTA纸血斑、口腔拭子、5-10根带毛囊的毛发、绒毛细胞。
5 试剂:5.1 试剂的厂家及规格:5.1.1 DNA抽提试剂 Chelex-100 伯乐公司(Bio-Rad Laboratories, Inc. CA U.S.A)。
5.1.2 DNA抽提试剂 Promega PP18或PP21 DNA System抽提试剂盒。
5.1.3 DNA抽提试剂口腔棉签制备基因组DNA试剂盒(G&T,U.S.A)5.1.4 无水乙醇分析纯5.1.5 异丙醇分析纯5.1.6 无菌的超纯水由实验室技术人员制备。
5.2 试剂的配制:5.2.1 5%Chelex-100的配制:称取5克粉状Chelex-100于试剂瓶中,加入灭过菌的超纯水至100ml。
5.2.2 灭菌超纯水的制备:用干净的试剂瓶装超纯水1升左右,经121℃灭菌30分。
6 仪器及设备:6.1 生物安全柜。
6.2 高速离心机。
6.3 超速冷冻离心机。
DNA提取步骤中文版
一DNA的抽提QIAGEN试剂盒。
1 标记1.5mlEP管吸取20ul蛋白酶K加入1.5mlEP管底部。
2 加入200ul血清至1.5mlEP管。
若血清不足200ul可加适量PBS补充。
余血清-20℃保存3 加200ul缓冲液AL至样品管震荡混匀15s。
4 56℃孵育10min。
5 稍微离心将EP管壁上的液体离心下去。
6 加200ul无水乙醇至样品管中震荡混匀15s稍微离心。
7 混合液转移至QIAamp螺旋住置于2ml收集管上小心勿沾湿边缘。
加样器垂直于螺旋住将混合液慢慢加至滤膜中间。
关盖标记8000rpm离心1min。
再将QIAamp螺旋住转移至一个清洁的2ml收集管内弃含滤液的收集管。
8 打开QIAamp 螺旋柱加入500ul缓冲液AW1勿沾湿边缘。
关盖8000rmp离心1min。
再将QIAamp柱转移至一个清洁的2ml收集管内弃含滤液的收集管。
9 打开QIAamp柱加入500ul缓冲液AW2勿沾湿边缘。
关盖全速12000rpm离心3min。
10 标记1.5ml离心管将QIAamp柱置于一个清洁的1.5mlEP管弃含滤液的收集管。
打开QIAamp柱加入50ul缓冲液AE。
室温孵育3min。
12000rpm离心1min。
继续下一步实验操作或-20℃保存。
二目的片段的扩增第一轮PCR 反应体系30ul要有一个阳性对照和一个阴性对照n个标本10×Buffer 3n ul dNTP200ul/ml 3n ul primer 上游引物0.3n ul 下游引物0.3n ul Taq酶0.5n ul H2O 20n ul 模板DNA 3 ul 反应条件94℃1min 94℃20sec 55℃20sec 72℃1min20sec 反应35个循环注意配体系时先配总反应体系混匀分装后再加标本一管一枪头。
防止污染。
配置体系要在超净台内操作。
4.第二轮PCR 反应体系50ul取第一轮PCR产物另加一空白管做阴性对照即有二个阴性对照若出现污染可以据此判断是那一轮PCR污染。
DNA亲子鉴定采样取样的方法步骤
DNA亲子鉴定采样取样的方法步骤DNA亲子鉴定检测的样本包括:血痕、口腔粘膜、带毛囊的毛发。
采样前60分钟不要进食,以免混入食物的DNA,也不要刷牙或大量饮水。
采样时应尽量按要求充分采集、风干(自然风干,非电吹风吹干或高温烘干),防止样体采量不足或污染。
血痕采集用针轻刺皮肤表面(手指尖、耳垂、脚后跟以及身体表面任何部位),待血流出时,用准备好的纱布或则餐巾纸轻轻擦拭,在其表面留下3-4个如同黄豆大小的血印即可。
口腔粘膜采集从药店购买单头消毒棉签,每人三根。
拿起一根棉签伸进口腔在脸颊内侧的肌肉壁上来回刮,让棉头充分湿润,刮拭20下。
第二根在另一侧刮拭20下。
第三根左右各刮拭10下后拿出。
毛发采集准备好一张白纸。
从、睫毛、腋毛等处,拔下至少5根毛发(毛发末端用肉眼可见清晰的毛囊、动作要迅速,最好两根一起拔),用肉眼观察毛发根部是否带有一个半透明的胶囊状物体。
此般毛发至少需要五根。
其他样本采集其他样本比如羊水、骨骼、唾液、肌肉等。
羊水样本提取羊水样本必须去正规的医院,并在有丰富经验的注册妇产科医生的建议和帮助下提取。
以保正孕妇和胎儿的安全。
请医生抽取6毫升羊水样本,用塑料试管封装。
采集父亲、母亲双方的血痕、或则口腔棉签样本。
DNA亲子鉴定采样前的注意事项:采样前60分钟不要进食,以免混入食物的DNA,也不要刷牙或大量饮水。
哺乳期幼婴儿采样前应适量饮水,以防母乳混合污染,饮水后60分钟采样。
同时最好采集母亲样体,以便鉴定时参照,排除母体污染。
采样时请注意手不要触及棉签头,也勿大张嘴医院的化验单检验结果该如何分析?医学知识网()医学检验栏目告诉你/inspection/index.html说话,以免采样人的DNA通过表皮或唾液混入被采集人的DNA中。
最好戴干净的塑料手套和口罩。
并记住在为下一位样品提供者取样时更换手套。
采样时应尽量按要求充分采集、风干(自然风干,非电吹风吹干或高温烘干),防止样体采量不足或污染。
DNA提取流程及注意事项
DNA提取流程及注意事项一、引言DNA提取是从生物样品中分离纯化DNA的过程,是进行许多分子生物学和遗传学研究的基础。
本文档将介绍一种常见的DNA 提取流程,并提供一些注意事项,以帮助您顺利完成实验并获得高质量的DNA。
二、DNA提取流程以下是DNA提取的一般流程:1. 样品准备:- 样品可以是血液、组织、细胞等,根据不同的样品选择合适的提取方法。
- 样品需要储存在合适的条件下,避免DNA降解。
2. 细胞破碎:- 细胞破碎是提取过程中的重要步骤,可通过机械破碎、化学裂解等方法使细胞膜破裂释放DNA。
- 注意避免DNA受到酶、RNase等的污染,使用无DNase的试剂和消毒工具。
3. DNA纯化:- 使用DNA纯化试剂盒等工具将提取的细胞溶解物中的杂质去除,得到纯净的DNA。
- 注意按照试剂盒说明书进行操作,避免DNA污染和丢失。
4. 测定DNA浓度和纯度:- 使用分光光度计或荧光染料测定DNA的浓度和纯度。
- 确保所提取的DNA浓度足够以满足后续实验需求,同时要保证DNA的纯度高,避免污染影响后续实验结果。
5. 存储DNA:- 将提取得到的纯化DNA储存于冰箱或液氮中,避免降解。
- 根据实验需求将DNA分装储存,并在标签上注明样品信息和储存日期。
三、注意事项在进行DNA提取的过程中,还需要注意以下问题:1. 实验室操作规范:- 实验室内应严格按照相关操作规程进行操作,保证实验环境的洁净和安全。
- 使用一次性手套、口罩等个人防护用品,并定期对实验室进行清洁消毒。
2. 样品处理:- 样品应尽早处理,避免长时间储存导致DNA降解。
- 正确储存样品,在提取前避免样品受到污染。
3. 避免污染:- 实验操作过程中需要保持实验台面、仪器器皿的清洁,避免污染样品。
- 避免与其他DNA样品、霉菌、细菌等可能带来DNA污染的物质接触。
4. 操作技巧:- 注意操作的细节,遵循实验步骤并记录相关数据和观察。
- 在操作过程中要耐心细致,并及时调整实验方案,以保证最终结果的准确性。
DNA测序实验室实验操作标准
DNA测序实验室实验操作标准一、实验前的准备工作1. 实验室环境- 确保实验室干净、整洁,无尘土和杂质。
- 保持实验室温度在18-22℃之间,湿度在40%-60%之间。
- 确保实验室通风良好,必要时开启排风系统。
2. 实验材料与试剂- 提前准备好所需的DNA样本、试剂、仪器设备等。
- 检查试剂的有效期,确保试剂未过期。
- 试剂应储存在适当的条件下,如冷藏或冷冻。
3. 实验仪器与设备- 检查仪器设备是否正常工作,如PCR仪、测序仪、离心机等。
- 确保仪器设备清洁,避免影响实验结果。
二、DNA提取与纯化1. DNA样本处理- 根据样本类型,选择合适的DNA提取方法,如酚-氯仿法、柱式提取法等。
- 严格按照提取试剂盒的说明书操作,确保提取效果。
2. DNA纯化- 采用乙醇沉淀或柱式纯化方法,去除杂质和残留的试剂。
- 注意操作过程中避免DNA降解,确保DNA的完整性。
三、PCR扩增1. 配置PCR反应体系- 根据实验需求,计算并配置PCR反应所需的试剂和模板DNA。
- 确保PCR反应体系中无DNA降解酶和其他杂质。
2. PCR扩增- 设置合理的PCR扩增程序,包括预变性、变性和延伸等阶段。
- 进行PCR扩增时,注意控制循环次数,避免非特异性扩增。
3. 电泳分析- 扩增结束后,取适量PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。
- 观察并记录电泳结果,判断扩增产物是否符合预期。
四、DNA测序1. 测序反应- 根据测序试剂盒的说明书,配置测序反应体系。
- 将PCR产物与测序试剂混合,进行测序反应。
2. 测序仪器操作- 按照测序仪器的操作手册,进行测序数据的收集。
- 注意测序过程中避免样本污染和仪器故障。
3. 测序数据分析- 使用适当的生物信息学工具,对测序数据进行分析。
- 注意识别和纠正测序错误,如插入、缺失和替换等。
五、实验记录与结果报告1. 记录实验数据- 详细记录实验过程中的各项参数,如试剂浓度、仪器型号等。
- 记录实验结果,包括PCR产物大小、测序峰图等。
dna提取实验步骤
dna提取实验步骤DNA提取是分子生物学中的一项重要实验技术,它可以从细胞中提取出DNA,并用于后续的分子生物学研究。
本文将介绍DNA提取的实验步骤。
一、实验前准备1.1 材料准备为了进行DNA提取实验,我们需要准备以下材料:- 细胞样本:可以是动物组织、细菌、植物组织等。
- 细胞裂解缓冲液:含有离子洗涤剂、蛋白酶K等。
- 高盐溶液:用于沉淀DNA。
- 各种浓度的酒精:用于沉淀DNA。
- 离心管、试管等实验器材。
1.2 实验环境准备- 实验室应保持清洁整洁,避免污染DNA样本。
- 使用无菌技术进行操作,避免外源DNA的污染。
二、细胞裂解2.1 细胞破碎将细胞样本放入离心管中,加入适量的细胞裂解缓冲液,用振荡器或超声波进行细胞破碎,使细胞膜破裂,释放出细胞内的DNA。
2.2 蛋白酶处理加入适量的蛋白酶K,使其降解细胞中的蛋白质,释放出DNA。
同时,离子洗涤剂可以使DNA保持在溶液中,避免沉淀。
三、DNA纯化3.1 加入高盐溶液为了沉淀DNA,需要加入高盐溶液。
高盐溶液中的离子浓度较高,可以与DNA中的离子结合,使DNA形成沉淀。
3.2 离心沉淀将样品离心,沉淀下的DNA会在离心管底部形成一个白色沉淀。
去除上层液体后,可以看到这个沉淀。
四、DNA沉淀4.1 加入酒精为了进一步沉淀DNA,可以加入适量的酒精。
酒精会使DNA分子凝聚在一起,形成可见的白色沉淀。
4.2 离心沉淀再次进行离心操作,将上层的液体去除后,可以看到沉淀。
注意,沉淀的DNA非常脆弱,操作时要轻柔避免破坏。
五、洗涤和溶解5.1 洗涤为了去除沉淀中的杂质,可以使用70%的乙醇洗涤DNA沉淀。
将乙醇加入离心管中,轻轻摇晃,使DNA充分溶解。
5.2 溶解将洗涤后的DNA沉淀用适量的缓冲液溶解,使其完全溶解。
六、质量检测为了确保提取到的DNA质量良好,可以使用紫外可见光谱仪或凝胶电泳进行质量检测。
通过测量DNA的吸光度或检测DNA在凝胶上的迁移情况,可以评估提取到的DNA的纯度和完整性。
DNA采血操作流程
DNA采血操作流程
简介
DNA采血是提取人体DNA样本的常用方法之一,其操作流程
需要仔细、规范地进行,以确保样本的质量和准确性。
操作步骤
1. 仪器准备:准备好采血器、采血针、采血管、无菌盐水和消
毒用品等。
2. 环境准备:选择一个干净、光线明亮的地方进行操作,并进
行必要的消毒。
3. 采血器消毒:用无菌酒精棉球擦拭采血器的外部以及采血针
的接口处,保证其无菌。
4. 采血管准备:选择适当规格的采血管,打开管盖并将管装入
采血器中。
5. 采血部位消毒:选择好采血部位,用无菌酒精棉球进行消毒。
6. 采血:穿刺采血部位,找到静脉后,推入采血针采血,并确
定血流畅通。
7. 采完血:将采血针从采血部位拔出后,立即用消毒棉球按压
采血部位,避免出血。
8. 马上封管:将采血管里面的血单向进样至试剂盒中,如果无
菌样本,还要使用PVC粘封帽,将采血管封口。
9. 活性炭处理废液:处理采取后的血液和采血后产生的垃圾和
污染过渡物,用活性炭处理废液,以防有害物质造成污染。
注意事项
1. 操作前先了解患者的病史和采血的一些特殊要求。
2. 在任何情况下都要使用一次性无菌的采血器和采血管,避免
交叉感染。
3. 采血后要立即对采血器和患者进行处理。
4. 采取表面及根状茎样品时要避免皮肤接触,避免污染。
5. 操作完成后,把所有消耗材料放在标准垃圾袋中。
以上为DNA采血操作流程及注意事项,希望能对您有所帮助。
(1)外周全血或组织液DNA提取标准操作规程
外周全血或组织液DNA提取标准操作规程文件编号:版次:编制:审核:批准:实施日期:文件更改记录版次号修改页码修改后页数更改内容提要日期1.目的制定DNA提取标准操作规程,使尽可能多的提取到外周全血或组织液的DNA。
2.适用范围实验过程中需要提取DNA的全血或组织液样本。
3.责任分子技术员应严格按照此规程操作。
4. 操作规程41 准备工作4.1.1 紫外杀菌:打开超净工作台内的紫外灯,杀菌30 min,关闭紫外灯,打开风机,通风10 min。
4.1.2实验前准备:通风结束后,根据《实验室安全防护规程》中的相关规定,换好洁净服、洁净帽、防护镜等进入实验室;将水浴或金属浴打开至56℃;4.1.3准备物品:准备1.5 ml的低吸附EP管,96孔双面板,1000μl、200μl、1盒10 μl枪头,磁力架,DNeasy Blood & Tissue Kit试剂盒。
4.1.4 试剂准备:准备无水乙醇;从-20°C冰箱中取出适量预先分装好的Proteinase K于室温溶解;若AL buffer有沉淀,加热至56℃溶解;若试剂不足按以下进行配制:AW1 Buffer配制:Buffer AW1 中加入130 ml无水乙醇,充分混匀,即可使用。
AW2 Buffer配制:Buffer AW2中加入160ml无水乙醇,充分混匀,即可使用。
Proteinase K处理:Proteinase K预先在超净台中分装成小管备用。
分装后的于-20°C保存,避免反复冻融。
4.1.5 准备样品:样品平衡至室温,15-25℃。
4.2 DNA提取流程4.2.1将水浴或金属浴打开至56℃。
4.2.2取出与样品数同样数量的1.5ml EP管,编好1、2、3….标号。
4.2.3加入蛋白酶K:加入20μL QIAGEN Protease(或proteinase K)至管底。
4.2.4加入全血样品:加入200μL全血样本到上述离心管中。
DNA亲子鉴定样本怎么提取
1. 血液
血液采集
先用酒精在手指上消毒,然 后用一次性采血针,扎破手指头 处,挤出血液约3-4滴黄豆大小的 量于纱布上或滤纸上。分别用干 净的纸质信封包装,并在其表面 标明血液的所属人。
2. 唾液
口腔采样
采集DNA非常简单,无痛、 安全、卫生,一分钟即可完成。
注意:避免用手触及口腔棉 签。所有测试人员请先用清水漱 口,孩子在喝奶的情况下,请隔1 个小时后再进行口腔取样;
收集样本的基本卫生条件: 清洁的双手,新的口腔棉签(药 店出售的单头棉签)、干净的信 封。
1、先在干净的纸质信封上做 好标记,标记样本采集日期、样 本身份如:父亲、母亲、孩子等 及姓名或代号。
2、用棉签伸到孩子口腔内, 棉签头轻刮取口腔内两侧(内颊、 腮帮子处)及舌下处,可轻轻的 旋转或刮动10次左右后再取出, 重复取3-5根即可。
注意:在采集过程中请不要 用手触及口腔棉签的棉球部分, 请稍用力旋转并刷动以保证获得 足够的DNA。
采集完成后,可直接用透气 纸质信封包装(透气信封会自然 阴干)。(不能用塑料袋因为不 透气会引起样本发霉或发臭,降 解DNA,影响实验,除非一些特殊 样本需要冰箱保存,日常样本用 透气信封包装即可)
注意:采集过程中不要用手 触及毛发的毛囊部,确认能在毛 发末端用肉眼可看见清晰的毛囊。
将刚拔下的毛发立刻放入已 做好标记的信封内。需检查毛发 是否有清晰可见的毛囊。
入落在地 上的样本,和拔下已经很久的样 本。请不要弄错样本,请保证样 本与塑料袋上所标记的人身份一 致。
4. 精液
第一种安全套内的精液,用两根 干净棉签沾取精液后,在室温下 自然晾干即可。
第二种易携带物品上的精斑,应 整体提取。如内衣、内裤、被单、 毛毯、车座、睡衣等。
提取dna的方法及步骤
提取dna的方法及步骤提取DNA的方法及步骤DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物遗传信息的基本单位,因此,准确提取DNA样本是进行遗传研究、基因工程和犯罪侦查等领域的重要步骤。
以下将介绍几种常见的DNA提取方法及其步骤。
方法一:酚氯仿法酚氯仿法是一种常用的DNA提取方法,其步骤如下:1. 收集样本:可以是人体组织、血液、细胞培养物等。
确保样本新鲜,并避免受到污染。
2. 细胞破碎:将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中,通过离心将细胞沉淀。
3. 酚氯仿提取:将沉淀加入酚氯仿混合液中,轻轻混匀,并离心以分离DNA。
4. 沉淀DNA:将上清液转移到新的离心管中,加入冷乙醇沉淀DNA。
5. 洗涤:用70%乙醇洗涤沉淀的DNA,以去除杂质。
6. 干燥:将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法二:盐析法盐析法是一种简单易行的DNA提取方法,其步骤如下:1. 细胞破碎:将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中,通过离心将细胞沉淀。
2. 盐析提取:加入高盐缓冲液使DNA与其他核酸和蛋白质分离。
3. 沉淀DNA:将上清液转移到新的离心管中,加入冷乙醇沉淀DNA。
4. 洗涤:用70%乙醇洗涤沉淀的DNA,以去除杂质。
5. 干燥:将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法三:硅胶柱法硅胶柱法是一种高纯度DNA提取方法,其步骤如下:1. 细胞破碎:将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中,通过离心将细胞沉淀。
2. 硅胶柱处理:将细胞沉淀加入硅胶柱中,经过洗涤和离心,将DNA吸附在硅胶柱上。
3. 洗涤:用洗涤缓冲液洗涤硅胶柱,以去除杂质。
4. DNA洗脱:加入低盐缓冲液,使DNA从硅胶柱上洗脱出来。
5. 洗涤:用70%乙醇洗涤洗脱后的DNA,以去除杂质。
6. 干燥:将洗涤后的DNA在室温下晾干或用低温真空干燥器加速干燥。
方法四:酶解法酶解法是一种特异性较高的DNA提取方法,其步骤如下:1. 细胞破碎:将样本加入含有细胞破碎缓冲液的离心管中,通过离心将细胞沉淀。
dna提取与鉴定实验步骤
dna提取与鉴定实验步骤嘿,咱今天就来讲讲这 DNA 提取与鉴定实验步骤,这可是个超有趣的事儿呢!先说说提取 DNA 吧。
就好像是在一个大宝藏里找宝贝一样,你得小心翼翼地把DNA 这个“小宝贝”给找出来。
第一步呢,得准备好材料,这就好比是战士上战场前要准备好武器一样。
然后,把含有 DNA 的样本放进去,比如细胞啦之类的。
接下来,就开始一系列神奇的操作啦,要让细胞破开,把里面的东西都释放出来。
这就好像是打开一个神秘的盒子,让里面的秘密都跑出来。
然后呢,就是要把其他乱七八糟的东西都去掉,只留下 DNA。
这可不容易哦,就像在一堆沙子里找金子一样,得有耐心。
你得用各种试剂和方法,把那些杂质都给赶走,让 DNA 能安安静静地待在那里。
提取完了 DNA,接下来就是鉴定啦!这就像是给 DNA 这个“小宝贝”贴上一个标签,让我们能清楚地知道这就是我们要找的那个。
可以用一些特别的试剂,让 DNA 显现出独特的颜色或者特征。
这感觉就像是变魔术一样,一下子就把 DNA 给认出来了。
想象一下,你通过自己的努力,成功地从样本里提取出了 DNA,还能准确地鉴定出来,那得多有成就感啊!就好像你找到了一个隐藏在世界背后的秘密一样。
在做这个实验的时候,可千万不能马虎哦!每一个步骤都要认真对待,就像对待一件珍贵的宝贝一样。
要是不小心弄错了,那可就前功尽弃啦。
做实验嘛,就像是一场冒险,有时候会遇到一些小困难,但只要我们不放弃,总能找到解决的办法。
就像爬山一样,虽然过程中会很累,但是当你爬到山顶,看到那美丽的风景时,一切都值得了。
所以啊,大家要是有机会,一定要去试试这个 DNA 提取与鉴定实验。
感受一下科学的魅力,体验一下探索的乐趣。
相信我,你一定会爱上这种感觉的!别犹豫啦,赶紧去试试吧!。
亲子鉴定的鉴定步骤,,亲子鉴定具体步骤
亲子鉴定的鉴定步骤,,亲子鉴定具体步骤
DNA亲子鉴定实验操作步骤如下:
第一步:DNA提取
把样本细胞核中所含有DNA提取出来,然后进行一定的纯化,化除样本中的杂质。
第二步:PCR扩增
PCR的中文名为聚合酶链式反应,简单的说,PCR扩增这一步就是把我们所需要的片段通过酶促反应,在PCR仪上进行大量复制,放大到通过某些专用仪器可以看到的程度。
第三步:后PCR反应
这一步主要是上ABI测序仪检测的准备阶段,将双链的DNA打开,加一些检测用的的内标,主要是用来标记检测的片段长度。
第四步:毛细管测序仪检测
由于DNA带有电荷,通过毛细管电泳的方法,不同片段DNA长度
的电泳速度不同,在同样的电压,同样的电泳时间下,泳动的距离不同,这些长短不同距离可以通过前期加入的内标测量分辨出来,同时可通过一定的软件显示在电脑上,方便检测人员处理和分析数据。
第五步:分析数据,出具报告
主要是检测人员将所得结果进行分析汇总、计算,然后出鉴定结论和报告。
基因组DNA抽提操作流程
基因组DNA抽提操作流程
1.收集样本:首先需要从待测样本中收集细胞。
这可以是任何包含细胞核的生物组织,如血液、组织样本或细菌培养物。
选择合适的样本类型根据具体的研究目的和实验要求。
2.细胞裂解:将收集到的样本进行细胞裂解,使细胞内部的DNA释放出来。
这可以通过一系列方法实现,如物理破碎、化学裂解或酶的作用。
具体使用哪种方法取决于待测细胞的特点和实验室的设备条件。
3.蛋白质去除:在细胞裂解的过程中,细胞核中的DNA会与蛋白质连接在一起形成复合物,需要进一步去除蛋白质。
可以使用蛋白酶对DNA溶液进行处理,将蛋白质降解分解,并使用盐溶液或酒精进行去除。
4.DNA沉淀:将去除蛋白质的DNA溶液中加入盐溶液或酒精,使DNA 沉淀下来。
这可以通过离心的方法加快DNA的沉淀速度。
离心操作常常需要根据DNA溶液的体积和设备的转速进行优化。
5. 溶解DNA:将沉淀下来的DNA溶于适当的缓冲液中,使其稳定并易于后续的分析和实验。
常用的溶解液包括TE缓冲液(含有Tris-HCl和EDTA)或纯化水。
6.检测DNA浓度和纯度:使用光谱分析仪或比色法等方法检测DNA的浓度和纯度。
这可以帮助确定DNA样本的适用性和是否需要进一步纯化。
需要注意的是,基因组DNA抽提的操作步骤可能会因实验目的和样本类型的不同而有所差异。
在具体操作过程中,应该根据实验室的设备和实验条件进行优化和调整。
同时,实施基因组DNA抽提操作的人员还需要注意安全规范,避免对人体和环境造成潜在的危害。
dna提取的基本步骤及注意事项
dna提取的基本步骤及注意事项DNA提取是分子生物学和遗传学研究中的重要步骤,它可以从生物样本中分离出DNA,为后续的实验和研究提供基础。
以下是DNA 提取的基本步骤及注意事项:一、样本采集1.选择合适的样本:DNA提取可以从多种生物样本中进行,如血液、口腔拭子、组织等。
根据研究目的选择合适的样本。
2.样本采集:采集样本时要注意避免污染和损坏,使用无菌工具和容器进行采集,并储存在低温条件下,以保持DNA的完整性。
二、细胞破碎1.细胞破碎方法:细胞膜是DNA提取的主要障碍,需要使用适当的方法破碎细胞膜,如机械破碎、化学破碎或酶解等。
不同的样本和研究目的可能需要不同的破碎方法。
2.破碎条件控制:在破碎细胞时要注意温度、时间和破碎缓冲液的选择,以保证DNA的完整性和纯度。
三、DNA纯化1.蛋白质去除:DNA提取后可能存在蛋白质、RNA等杂质,需要使用蛋白酶、盐析等方法去除。
注意选择适当的去除方法,避免对DNA的损伤。
2. DNA沉淀:通过添加盐和醇类物质,使DNA从溶液中沉淀下来。
沉淀条件的控制对于提高DNA纯度至关重要。
3. DNA溶解:将DNA沉淀物溶解在适当的缓冲液中,以便后续的实验和储存。
四、DNA质量检测1.比色法:通过比色反应,可以初步判断DNA的浓度和质量。
常用的比色法有吸光度测定法和荧光染料染色法。
2.凝胶电泳:通过凝胶电泳可以进一步检测DNA的大小、纯度和完整性。
根据研究目的选择适当的凝胶,如琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶。
注意事项:1.实验环境要保持清洁和无菌,避免污染样本和提取的DNA。
2.使用无菌工具和试剂,避免外源性DNA的污染。
3.严格控制实验条件,如温度、时间和pH值等,以保证DNA的完整性和纯度。
4.注意样本的储存条件,如低温和避光,以避免DNA的降解和损伤。
5.根据实验目的选择合适的提取试剂盒,以提高提取效率和纯度。
总结:DNA提取是分子生物学和遗传学研究的基础步骤,它从样本中分离出DNA,为后续的实验和研究提供基础。
DNA提取实验
DNA提取实验DNA提取是现代生物学研究的基础实验之一,它可以从生物体内分离和纯化DNA分子,为各种分子生物学技术和研究提供重要的基础。
本实验旨在介绍DNA提取的基本步骤和操作技巧。
材料和仪器:1. 新鲜的生物样本(如水果、蔬菜、口腔拭子等)2. DNA提取试剂盒3. 离心管4. 加热器5. 离心机6. 显微镜实验步骤:1. 样本处理:a) 将生物样本取出,如水果则切成小块,口腔拭子可直接使用。
b) 将样本放入离心管中。
c) 使用试剂盒提供的试剂,在样本中加入适量的细胞裂解缓冲液。
d) 轻轻摇动离心管,使样本与缓冲液均匀混合。
e) 将离心管放入加热器中,在60摄氏度恒温加热20-30分钟,以促进细胞的破裂和DNA的释放。
2. 细胞裂解:a) 将加热后的样本离心管取出,稍微晃动离心管使样本充分混合。
b) 加入适量的蛋白酶,用离心管盖密封离心管,并再次摇动离心管混合。
c) 将离心管放入加热器中,以高温(通常为60-65摄氏度)恒温孵育10分钟,以使蛋白酶发挥作用,降解细胞蛋白。
3. DNA沉淀:a) 将加热后的样本离心管取出,加入等体积的冷异丙醇,并摇动离心管使两者充分混合。
b) 将混合溶液离心10-20分钟,以最大速度离心沉淀DNA。
c) 抽掉上层溶液,离心沉淀的DNA。
d) 加入适量的70%乙醇洗涤一次,以去除残留的盐和其他杂质。
e) 将离心管倒置于纸巾上,待乙醇挥发后,加入适量的去离子水重新溶解DNA。
4. DNA纯化:a) 使用显微镜观察提取的DNA溶液中是否有明显的纹理和颜色,以确保DNA提取的成功。
b) 使用测量纯度和浓度的仪器对提取的DNA进行定量分析,并记录结果。
c) 将DNA溶液保存在低温冷冻条件下,以防止DNA的降解和损伤。
实验注意事项:1. 实验前需佩戴实验手套和口罩,防止污染和细菌感染。
2. 操作过程中需注意无菌操作,避免污染。
3. 实验前要确保所有仪器和材料已经正确消毒和清洗。
提取dna的实验操作方法
提取dna的实验操作方法
提取DNA的实验操作方法主要包括以下步骤:
1. 样本收集:收集所要提取DNA的生物样本。
常见的样本来源包括血液、唾液、细胞培养物、植物组织等。
2. 细胞破碎:将收集到的样本进行细胞破碎,使DNA释放出来。
常用的方法有物理破碎(如超声波破碎、酶解)和化学破碎(如细胞裂解液、洗涤液)等。
3. DNA溶解:将破碎后的细胞样本转移至含有盐和缓冲液的试管中,使DNA 溶解。
4. 蛋白质沉淀:加入蛋白酶K等蛋白质沉淀剂,将样品中的蛋白质去除。
5. DNA沉淀:加入过冷酒精或异丙醇等沉淀剂,使DNA凝结成白色絮状物,然后通过离心将DNA沉淀下来。
6. 洗涤:将沉淀下来的DNA进行洗涤,以去除杂质和残留的沉淀剂。
常用的洗涤缓冲液包括70%乙醇等。
7. 干燥和溶解:将清洗后的DNA样本用空气或真空干燥,然后用缓冲液或去离子水使其溶解。
8. 测定DNA浓度和纯度:使用分光光度计或其他的测定方法,测定提取到的DNA的浓度和纯度。
以上是提取DNA的基本实验操作方法,实际操作中可能会根据具体的实验目的和样本类型进行适当的调整和改进。
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DNA提取标准操作规程1. 目的:规范不同检材的DNA提取操作程序,确保DNA质量,保证STR分型结果准确性。
2. 原理:Chelex-100 是一种由苯乙烯、二乙烯苯共聚体组成的化学螯合树脂,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,可螯合多价离子,特别是对高价金属离子有很高的亲和力和螯合作用。
在低离子强度、碱性及煮沸的条件下,可以使细胞膜破裂,并使蛋白质变性,通过离心除去Chelex颗粒,使其结合的物质与DNA 分离。
磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。
反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
3. 操作者:具有法医物证检验资格的广西区妇幼司法鉴定所技术人员。
4. 标本:5%EDTA抗凝全血、8-10ml胎儿羊水、5%EDTA抗凝脐血、FTA纸血斑、口腔拭子、5-10根带毛囊的毛发、绒毛细胞。
5 试剂:5.1 试剂的厂家及规格:5.1.1 DNA抽提试剂 Chelex-100 伯乐公司(Bio-Rad Laboratories, Inc. CA U.S.A)。
5.1.2 DNA抽提试剂 Promega PP18或PP21 DNA System抽提试剂盒。
5.1.3 DNA抽提试剂口腔棉签制备基因组DNA试剂盒(G&T,U.S.A)5.1.4 无水乙醇分析纯5.1.5 异丙醇分析纯5.1.6 无菌的超纯水由实验室技术人员制备。
5.2 试剂的配制:5.2.1 5%Chelex-100的配制:称取5克粉状Chelex-100于试剂瓶中,加入灭过菌的超纯水至100ml。
5.2.2 灭菌超纯水的制备:用干净的试剂瓶装超纯水1升左右,经121℃灭菌30分。
6 仪器及设备:6.1 生物安全柜。
6.2 高速离心机。
6.3 超速冷冻离心机。
6.4 移液器,单道微量移液器(0.5-10 ul单道)、单道微量移液器(10-100 ul单道)、单道微量移液器(100-1000 ul单道)、八道移液器(0.5-10 ul八道)和八道移液器(10-100 ul八道)。
6.5涡旋混匀器。
6.6半导体温控混匀器。
6.7超纯水制造系统。
7 操作程序:7.1 全血或脐血的DNA抽提(Chelex-100法)7.1.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.1.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管,加无菌超纯水980ul。
7.1.3核对血样,用移液器混匀,吸取 1.5ul标本于EP 管中(-80℃存放超过一个月的血样取2-3.5ul)。
7.1.4颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.1.5 加无菌超纯水980ul,颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.1.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5% Chelex-100),盖紧EP 管,振荡约15~20sec后, 56℃孵浴0.5~2h。
7.1.7 孵浴结束后振荡约15~20sec, 99℃孵浴8 min。
7.2羊水或绒毛A抽提(Chelex-100法)7.2.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.2.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管,加无菌超纯水700l。
7.2.3核对标本,用移液器混匀,吸取300l于EP 管中。
7.2.4颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.2.5 加无菌超纯水1000ul,颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.2.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5% Chelex-100),盖紧EP 管,振荡约15~20sec后, 56℃孵浴0.5~2h。
7.2.7 孵浴结束后振荡约15~20sec, 99℃孵浴8 min。
7.2.8 孵浴结束后趁热振荡约15~20sec,12600rpm离心3.5min,上清即为DNA溶液。
7.3 毛发的DNA抽提(Chelex-100法)7.3.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.3.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管,加无菌超纯水980ul。
7.3.3核对血样,用移液器混匀,吸取 1.5ul全血于EP 管中(-80℃存放超过一个月的血样取2-3.5ul)。
7.3.4颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.3.5 加无菌超纯水980ul,颠倒混匀,12600rpm离心3.5min,弃上清,剩余沉淀约20ul。
7.3.6取混匀的5% Chelex-100溶液200 ul于EP管中(吸取时注意先摇匀5% Chelex-100),盖紧EP 管,振荡约15~20sec后, 56℃孵浴0.5~2h。
7.3.7 孵浴结束后振荡约15~20sec, 99℃孵浴8 min。
7.3.8 孵浴结束后趁热振荡约15~20sec,12600rpm离心3.5min,上清即为DNA溶液。
7.4 血斑的DNA抽提(磁珠法)7.4.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.4.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管,核对样本,7.4.3剪取合适大小的样品(2-3mm2)放置EP管中。
7.4.4加入Lysis Buffer 150ul盖紧盖子70℃孵育30min。
7.4.5室温下,12000rpm离心2min,吸取上清至一新1.5ml离心管中。
7.4.6将漩涡震荡10s,将resin混匀,取7ul resin加入到样品中。
7.4.7高速漩涡震荡样品/Lysis Buffer/resin混合液3秒钟,室温孵育5min,并且每孵育1min 震荡3秒。
7.4.8高速漩涡震荡2秒,将离心管放置磁力架,resin与溶液分开(注1)。
7.4.9小心吸弃溶液不要碰到聚集成块的resin(注2)7.4.10加100ul 准备好的Lysis Buffer洗涤,将离心管移出磁力架,高速漩涡震荡2秒。
7.4.11将磁力架再次置于磁力架,将Lysis Buffer吸弃干净。
7.4.12加入100ul准备好的1X Wash Buffer,移出磁力架,高速漩涡震荡2秒立即放回磁力架,吸弃Wash Buffer,连续洗涤3次,最后1次洗涤将Wash Buffer移除干净。
7.4.13将离心管盖子打开,室温下干燥5-20min。
7.4.14加100ul Elution Buffer,盖上盖子漩涡震荡2秒,65℃孵育5min。
7.4.15孵育后,漩涡震荡2秒后再次放入磁力架。
小心吸取DNA溶解液至一新离心管中,保存(注3)。
注1:如果resin不能形成明显的一团与溶液分开,则重新震荡迅速放置磁力架上。
注2:如枪头不小心吸到resin,则轻轻打回再次分离。
注3:DNA可以4℃短期保存或-20、-70℃长期保存。
7.5 口腔拭子的DNA抽提(试剂盒)7.5.1填写“PCR-STR基因扩增实验记录表”。
7.5.2 按照PCR-STR基因扩增实验记录表顺序标记1.5ml EP管。
7.5.3核对标本,将棉签头部(约1.5厘米长)剪短,置于标记好的EP管中。
加入600微升SWA 溶液,使棉签浸泡在溶液中。
7.5.4盖紧EP管盖子置振荡器剧烈震荡20秒,使黏附在棉签上的口腔细胞脱落到液体中。
震荡后会出现很多气泡。
7.5.5 60℃温浴10分钟,充分裂解。
7.5.6温浴结束,待冷却到室温后用镊子夹住棉签头,在试管壁上挤压出所吸附的液体后废弃棉签头。
镊子用酒精纸巾擦干净后可直接用于其他样品。
根据不同种类棉签,这时试管中液体体积大约在400到450微升之间。
7.5.7 加入150微升试剂SWB,颠倒混匀数次,透明溶液变成白色浑浊液。
7.5.8 以每分钟13000转离心10分钟,用加样器吸取透明上清液置于另外一干净的EP管。
溶液体积大约在540到600微升之间,会观察到溶液出现浑浊现象。
吸样时注意必须保留管底30到40微升沉淀物,内含细胞残渣和蛋白质沉淀。
7.5.9 在以上取得的溶液中加入400微升异丙醇,颠倒混匀30次使DNA充分沉淀。
这时肉眼看不见丝状DNA沉淀。
7.5.10 以每分钟13000转离心15分钟,小心吸弃上清液,不要接触试管底DNA沉淀。
7.5.11 加入500微升75%乙醇,以每分钟13000离心5分钟。
尽量吸弃上清液。
然后打开EP管盖置室温5分钟,使残留乙醇挥发干净。
7.5.12 加入100微升TE缓冲液。
置室温过夜或65℃小时,使DNA充分溶解。
4℃保存备用,-20℃或-80℃长期保存。
8. 防护8.1 实验过程中须穿上专用的实验服,带帽子和口罩,带一次性的PE手套或无粉橡胶手套。
如果手套破损、刺破、或失去其屏障功能,则应尽快更换。
8.2 实验操作必须在生物安全柜中进行。
8.3 如果不小心被血样溅到皮肤,立即用75%的乙醇擦拭消毒,然后用自来水冲干净。
溅到眼睛,立即用洗眼器清洗。
8.4每天工作前和工作后对实验室进行常规消毒并做好记录:每天工作前生物安全柜和空气用紫外线照射30分钟以上,工作结束后空气用紫外线照射60分钟以上。
8.5衣物污染时,尽快脱掉污染的衣物,进行消毒处理。
发生小范围污染物泼溅事故时,应立即进行消毒处理。
发生大范围污染物泼溅事故时,应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况,确定消毒的程序。
9. 注意事项9.1在实验完毕后实验台面及桌面,实验垃圾放到指定位置,由清洁人员拿走处理。
9.2 在实验完毕后,按实验室清洁消毒程序进行清洁、消毒工作,并填写实验消毒登记表。
9.3在实验工作结束后或取下手套后应立即洗手。
在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。
9.4 在离开实验室之前应关掉所有仪器的电源并拔下插头(生物安全柜除外)。
10. 参考文献:1)杨本海,刘永忠. Chelex-100一步法快速提取外周血DNA.皖南医学院学报,1999 ,18 (1): 9-10.2). 陈辉,刘永波,等.有机酚法和Chelex - 100 法提取不同组织微量DNA 效果比较.郑州大学学报(医学版).2004,6(39):988-991.3). 步嵘,王耀平,等.以Chelex 100 为介质抽提DNA. 中华病理学杂志.1999 , 5 (28) :379-380.4). Walsh PS , Metzger DA , Higuchi R. Chelex-100 as a Mediumfor simple extraction of DNA for PCR-Based typing fromforensic material . Biotechniques 1991 ,10 :5062513.5). Sepp R , Szabo I , Uda H , et al . Rapid techniques for DNA extraction from routinely processed archival tissue for use in PCR. J Clin Pathol , 1994 ,47 :3182323.11. 本SOP的变动程序:本标准操作程序如须修改或项目增删,须经论证合理并实验验证后,由研究所所长审核签署同意后颁布执行。