COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书一序言二使用注意

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高效液相色谱仪使用说明书

高效液相色谱仪使用说明书

高效液相色谱仪使用说明书序言高效液相色谱仪(High-performance liquid chromatography, HPLC)是一种常用的分离技术,广泛应用于药物分析、食品安全监测、环境检测等领域。

本说明书旨在提供关于高效液相色谱仪的基本操作原理、使用方法和注意事项等信息,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。

一、仪器概述高效液相色谱仪主要包括进样系统、色谱柱、泵液系统、检测器和数据处理系统等基本组成部分。

1. 进样系统进样系统用于将待测样品引入色谱柱中进行分离。

常见的进样方式包括自动进样器、手动进样器和微量注射器等。

2. 色谱柱色谱柱是分离相和固定相组成的圆柱体,是进行样品分离的关键组件。

用户应根据待测样品的特性选择适当的色谱柱型号和填充物。

3. 泵液系统泵液系统通过输送流动相将样品送入色谱柱中,并提供足够的压力以保持流速和流动相性质的稳定。

泵液系统可根据实际需求配置恒压、梯度或等压梯度等控制方式。

4. 检测器检测器用于监测和记录样品的化学信号,并将其转化为可读的信号输出。

常见的检测器包括紫外可见检测器、荧光检测器、电化学检测器等。

5. 数据处理系统数据处理系统用于采集、处理和分析检测到的信号,通常配备有专业的软件。

用户可根据需要选择合适的数据处理系统,并进行适当的参数设置。

二、操作方法1. 仪器准备(1)保证仪器通电正常并处于稳定工作状态。

(2)检查流动相储液瓶中是否有足够的流动相,并确保其配制符合要求。

(3)检查色谱柱的连接情况,确保柱座和柱连接部位严密无泄漏。

(4)开启数据处理系统,确保与色谱仪的连接正常。

2. 样品准备根据实验要求选择合适的样品,并进行必要的前处理工作,如过滤、稀释等。

3. 进样操作(1)将样品溶液通过合适的进样方式加入进样器中。

(2)设置进样体积和进样方式等参数,并进行进样操作。

4. 流动相系统设置(1)根据实验要求选择合适的流动相,注入流动相储液瓶中。

(2)设置流速、梯度等参数,并进行流动相系统的初始化。

液相色谱柱的正确安装和使用说明

液相色谱柱的正确安装和使用说明

液相色谱柱的正确安装和使用说明液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。

被过滤广告一、液相色谱柱的安装:1、液相色谱柱的结构:a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。

7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压坏用于密封。

3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。

为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。

压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。

在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。

空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。

但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。

b、柱填料:液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱:多以硅胶为柱填料。

根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10µm的范围内。

另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。

反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。

也有无定型和球型之分。

常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10µm之间。

2,色谱柱的安装:a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

液相色谱柱使用说明

液相色谱柱使用说明

液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。

本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明,包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。

1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前,需要考虑以下几个因素:-样品的性质和分离要求:不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。

根据样品的极性、大小和稳定性等因素,选择合适的柱子(例如反相柱、正相柱、离子交换柱等)。

-流动相的选择:根据样品溶解度和分离要求,选择合适的流动相(溶剂、缓冲液等)。

2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净:使用纯溶剂(如甲醇、乙醇等)反复冲洗柱床,直至流出的溶液无色透明。

-将液相色谱柱连接至色谱仪:在连接针嘴前,先用一根塑料贴纸封住柱子的两端,然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。

-将柱子连接到色谱仪:将柱子放入色谱仪的支架上,并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。

3.样品的准备和加载-样品的准备:将样品溶解在适当的溶剂中,使其达到合适的浓度,并在必要时进行过滤或稀释。

-样品的加载:使用自动进样器或手动进样器,将样品加载到液相色谱柱中。

避免过量的样品装载和过高的进样速度。

确保样品溶液完全进入柱子,并记录样品加载的详细信息。

4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸:始终保持柱子中的液相色谱柱湿润,避免出现干涸和损坏的情况。

在使用完毕后,必要时用合适的溶剂进行洗脱,然后用空气或氮气进行保护。

-遵循柱子的使用范围:柱子通常有推荐的温度和压力范围。

超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。

-避免高浓度的盐类溶液:高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响,导致柱子的损坏或压力升高。

5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗:根据使用频率,定期清洗液相色谱柱。

使用纯溶剂进行冲洗,以去除残留的样品和杂质。

-保持柱子湿润:柱子在存储期间应保持湿润。

用合适的溶剂进行洗脱,并用盖子密封柱子的两端,以避免柱床干燥。

液相色谱柱使用注意事项

液相色谱柱使用注意事项

液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时,需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。

1.流动相流动相是液相色谱分离的基础,应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。

在使用前,应进行过滤和脱气处理,以避免对柱子造成损害。

2.柱子选择根据不同的样品和分离要求,应选择合适的液相色谱柱。

选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。

对于复杂的样品,建议使用具有更强分离能力的反相柱。

3.柱子清洁在使用前,应对液相色谱柱进行清洁,以去除柱子内部的杂质和污染物。

清洁时应使用温和的清洁剂,如甲醇、乙醇等,并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。

4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。

过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏,而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。

在使用过程中,应密切关注柱温的变化。

5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。

在使用过程中,应密切关注压力的变化情况。

若出现压力波动或异常升高,应立即采取措施解决问题,以免对柱子造成损害。

6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。

应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。

过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏,而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。

7.样品处理在进样前,应对样品进行处理,以去除杂质和干扰物质。

处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。

处理时应避免对样品造成污染或损失。

8.柱子储存在使用完毕后,应对液相色谱柱进行妥善的储存。

储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。

同时,应定期对柱子进行检查和维护,以保证其性能和使用寿命。

高效色谱仪色谱柱的使用事项 色谱仪操作规程

高效色谱仪色谱柱的使用事项 色谱仪操作规程

高效色谱仪色谱柱的使用事项色谱仪操作规程高效色谱仪色谱柱的使用事项包括色谱柱的平衡、再生和维护等。

一、色谱柱的平衡:高效液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中,新柱应先用10~20倍柱体积的甲醇或高效色谱仪色谱柱的使用事项包括色谱柱的平衡、再生和维护等。

一、色谱柱的平衡:高效液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中,新柱应先用10~20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱,确定确保分析样品所使用的流动相与乙腈-水互溶。

每天用充分的时间以流动相平衡色谱柱,会在处理问题方面获得最大的“补偿”,而且色谱柱的寿命会变得更长。

平衡操作步骤:1、平衡开始时,将流速缓慢提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线。

缓冲盐或离子对试剂流速假如较低,需要较长时间来平衡。

2、假如使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水“过渡”。

即每天分析开始前,必需先用纯水冲洗30min以上,再用缓冲盐流动相平衡。

分析结束后,必需先用纯水冲洗30min以上,除去缓冲盐之后,再用甲醇冲洗30min保护色谱柱。

二、色谱柱的再生:1、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积:(1)Ф4×125mm色谱柱:柱体积为1.6mL,所用溶剂体积为30mL。

(2)Ф4×250mm色谱柱:柱体积为3.2mL,所用溶剂体积为60mL。

(3)Ф10×250mm色谱柱:柱体积为20mL,所用溶剂体积为400mL。

2、再生方法:(1)极性固定相的再生:正庚烷,乙酸乙酯,丙酮,乙醇,水。

(2)非极性固定相的再生:水,异丙醇,乙腈,水。

3、注意事项:(1)在对用NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能以铵根离子形式存在,因此应在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后用水冲洗至碱溶液完全流出。

(2)假如用有机溶剂-水不能完全洗去硅胶表面吸附的杂质,在水洗后加用0.05M的稀硫酸冲洗特别有效。

三、色谱柱的维护:1、使用预柱、保护柱和分析柱。

硅胶在极性流动相和离子性流动相中有确定的溶解度。

高效液相色谱柱的正确使用 液相色谱操作规程

高效液相色谱柱的正确使用 液相色谱操作规程

高效液相色谱柱的正确使用液相色谱操作规程色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。

关于色谱柱的安装、维护、保色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。

关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。

高效液相色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压,注意温度和酸碱度,正确及时的冲洗等。

1.加装保护柱保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。

尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。

保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。

保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(5~1次)后,出现柱压显著升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。

2.过滤流动相和样品流动相通常由水或缓冲溶液与有机溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有机溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能确保水和有机溶剂的质量且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。

当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是必要的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。

所配制的样品试液在注入流路系统前均要经.45μm(.22μm则更好)孔径滤膜过滤。

要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。

装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。

最全的色谱柱使用手册!

最全的色谱柱使用手册!

最全的色谱柱使用手册!色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流淌相之间的作用力(安排、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分别。

01柱色谱为向玻璃管中填入固定相,以流淌相溶剂浸润后在上方倒入待分别的溶液,再滴加流淌相,由于待分别物质对固定相的吸附力不同,吸附力大的固着不动或移动缓慢,吸附力小的被流淌相溶剂洗下来随流淌相向下流淌,从而实现分别。

02纸色谱以滤纸条为固定相,在纸条上点上待分别的混合溶液的样点,将纸条下端浸入流淌相溶剂中悬挂,溶剂由于毛细作用沿滤纸条上升,样点中的溶质从而被分别。

03薄层色谱是在玻璃板上涂以固定相涂层,然后点样,下端浸入溶剂,同样自下而上分别。

常用于探究柱色谱试验条件,溶剂和固定相的选择等。

常用固定相有石膏、氧化铝、蔗糖、淀粉等,常用流淌相为水、苯等各种有机溶剂。

影响色谱柱使用寿命的主要因素流淌相因素1.流淌相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。

常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mgL-1,且在pH1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流淌相pH范围约为1~8。

键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流淌相的适应范围大大增加,如现在广泛使用的反相色谱填料C18(十八烷基硅烷键合硅胶),其pH适用范围可达2~10。

当流淌相pH值超出酸性范围时,键合相易发生水解而流失;当流淌相pH超出碱性范围时,会加速硅胶的溶解而释放出絮状物堵塞柱子,这两种反应均是不行逆反应,特殊是在温度较高(40℃)的环境下,会使柱效快速降低而报废。

2.流淌相变质当前使用最为广泛的是硅基键合相填料,当以水溶液作为流淌相或流淌相中含有肯定浓度的磷酸盐缓冲液时,水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌,从而堵塞固定相颗粒间的空隙。

特殊是对于多元自动比例混合的高效液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相单独存贮,因存放时间较长而简单发生此类问题。

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明

1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。

(2)流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存(1)反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

液相色谱柱安装与使用说明

液相色谱柱安装与使用说明

液相色谱柱安装与使用说明1.准备工作:事先准备好所需的色谱柱和色谱条件,选择适当的流动相和检测方法。

2.检查色谱柱:检查色谱柱的包装是否完好,确认柱头和底部不受损。

查看柱子的规格型号和有效期,确保符合实验要求。

3.柱连接:将色谱柱与液相色谱仪的柱接口相连接。

柱接口通常有螺纹接口和快速连接接口,按照仪器的要求选择合适的接口。

4.柱连接密封:使用适当的柱接口垫片来保证柱与柱接口之间的严密密封,以防止漏液和杂质污染。

5.流动相装填:根据实验需求选择合适的流动相,并根据仪器的要求装填到流动相贮箱中。

6. 流速设置:根据实验要求设置合适的流速,一般应在0.5-2.0mL/min的范围内。

7.初始温度设置:根据样品的性质和分析方法,选择合适的柱温度,并进行预热。

柱温度对于保证分离效果和保护液相色谱柱起到关键作用。

1.不要轻易触摸色谱柱的柱头和底部,以免造成污染或损坏。

2.在使用液相色谱柱之前,应用流动相洗涤柱子,以去除悬浮在柱子内的杂质和残留物。

3.色谱柱在长时间使用后会产生杂质沉积,应定期进行反向冲洗和再生。

4.柱温度的设置应根据样品的性质和方法进行优化,一般来说,越高的温度有助于加快分析速度,但也可能导致分离效果下降。

5.不同的流动相和检测方法可能对色谱柱造成不同程度的腐蚀和损害,需要根据实验要求选择合适的条件。

6.注意保持流动相的纯净度,避免使用未经过滤的溶剂。

7.使用完毕后,及时将色谱柱和流动相贮箱进行清洗和保存,以免柱子受到污染和损坏。

总结:液相色谱柱的正确安装和使用对于保证分析结果的准确性和重现性非常重要。

在安装液相色谱柱之前,必须仔细检查柱子的包装和品质,保证柱子的完好和有效期。

在使用过程中,要注意保持良好的实验操作和仪器维护,定期进行柱子的清洗和再生。

通过正确的安装和使用,可以有效延长柱子的使用寿命,保持分析结果的稳定性和准确性。

高效液相色谱柱的使用与维护

高效液相色谱柱的使用与维护

高效液相色谱柱的使用与维护
液相色谱法是一种研究物质组成的非常有用的分析方法,液相色谱柱是其中重要的组成部分。

高效液相色谱柱具有高分辨率、高灵敏度和快速分析能力等优点,在物质结构分析、比较分析、药物质量真实性检测等方面得到了广泛的应用。

高效液相色谱柱包括筒体、固定相、移动相和柱口等原件,其功能是使溶剂中的被分析物质分离并聚集在移动相中,以获得良好的精确度和灵敏度。

因此,在使用高效液相色谱柱的时候,需要正确的使用和维护。

一、高效液相色谱柱的正确使用
1、正确选择液相色谱柱。

在选择液相色谱柱的时候,必须正确考虑柱型、长度、内径、固定相、移动相等因素,保证实验数据的准确性。

2、正确安装液相色谱柱。

在安装柱子之前,应该先检查它的外观,确保没有任何损伤,然后根据实验要求正确安装柱子、柱体、柱头、柱柄,并紧固螺丝,以确保实验的准确性。

3、正确操作液相色谱柱。

在操作液相色谱柱之前,应该先做好实验准备,检查仪器的各项参数,建立校正曲线,并根据实验要求正确调整移动相的流量和温度,以保证测得准确和可靠的实验数据。

二、高效液相色谱柱的正确维护
1、定期检查液相色谱柱。

定期检查柱子的外观,确保没有任何损伤,检查柱体、柱头、柱柄和螺丝的松紧情况,并且按照实验要求
正确维护柱子。

2、定期清洗液相色谱柱。

定期清洁柱子,以避免污垢滋生,降低仪器的精度和准确度,并减少仪器的维护次数。

3、定期更换柱子。

高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项

高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项

高效液相色谱仪的操作步骤及注意事项一、操作步骤:1.开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。

(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱损害色谱柱,影响柱效能)注:试验过程中由于只有0.45μm的混合滤膜,第一次使用时感觉效果不好,于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。

2.超声结束后,将流动相放置到规定位置(1号泵接水流动相,2号泵接有机流动相),开机逐个排气(先启动泵,排气结束后再打开检测器)。

3.排气结束后,关闭所有排气阀。

先用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟,基线走稳之后,再打开水流动相(注意:水流动相和有机流动相流速之和为1ml/min),继续走基线,直到基线平稳。

注意:实验结束后,再用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟,冲出色谱柱内残留的样品物质,预防长时间不使用仪器样品的残留物质沉积在色谱柱内,导致下次使用难以冲出,色谱柱柱压偏高,基线不稳,出现大量鬼峰。

(不同规格的色谱柱其所允许的最大流速之和不同)4.走基线时,应将进样阀处于Load状态,用注射器进样时应快速进样,进样后将进样阀立即扳回到Inject状态,此时液相系统开始进入采样状态。

采样结束后,可在数据分析里面查看分析结果并可进行编辑,也可以在脱机状态下查看样品的分析结果并编辑。

二、使用中常见的问题及注意事项1.过滤时有时会出现流动相漏液。

可能的原因是滤膜放置不正确(有点偏)和接头有点错位,导致流动相从缝隙中漏出。

注意:操作时,应先向滤瓶内倒入少量流动相,观察是否漏液并开始过滤,若未漏液,再向滤瓶中添加流动相。

2.超声时,瓶外液体的液面应高于瓶内流动相的液面,否则流动相内的气体可能无法排出液体,气体仍然残留在流动相内,以致开机排气时无气泡排出。

3.开机排气结束后,应先将流动相流量调小,再关闭排气阀,否则会导致柱压瞬间升高超过压力上限,致使泵停止工作。

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生

液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明:(1)、色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。

(2)、流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0,BDS C18适合于碱性化合物,PH值适用范围为2.0-10.0。

当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)、样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,所有的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存(1)、反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)、长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度最好是室温。

3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明液相色谱柱是昂贵的色谱耗材,是液相色谱仪的心脏,有着严格的生产标准和测试程序,为了充分发挥色谱柱的性能,最大程度延长色谱柱的使用寿命,请仔细阅读此部分。

色谱柱的身份确认:为了保证每一支色谱柱的质量,月旭公司出品的每一支色谱柱都有唯一的身份编码,根据此编码,我公司可以将质量问题确定到个人,为了保障你的利益,收到色谱柱时,请完成以下程序:1、仔细查看包装盒是否完好,与自己请购的色谱柱是否一致;2、盒内是否有质量检验报告及检验人员签名;3、色谱柱表面有无碰撞伤痕,柱两端保护色谱柱的塑料堵头是否完整;4、色谱柱柱体是否贴有月旭公司色谱柱的身份标牌,并仔细对照包装盒与色谱柱标签上的型号和编号是否一致。

结构和安装:结构:月旭公司出品的高效液相色谱柱柱管材质均为316L不锈钢,两端结构完全一致,其结构如图一:图一 Ultimate○R系列液相色谱柱结构安装:为了保证色谱柱使用时有最高柱效,连接管路尽量使用适合的细径管路,色谱柱进出口的连接必须非常适配,连接管端口部分必须平整,不能有毛刺和切口斜面等现象,各种连接管路请使用专业工具切割修整;1、取出色谱柱,仔细查看柱身洗脱液流向箭头标识,用手旋下柱两端的塑料堵头,放好色谱柱,使洗脱液流向和柱身所示流向一致,如图二所示:图二色谱柱的正确连接2、用手将“连接管路的不锈钢或者其它材质的接头”旋入色谱柱两端,管路接头要和色谱柱接口连接紧密,确保零死体积连接,在色谱仪正常运行时没有漏液。

色谱柱的正确使用:色谱柱是昂贵的色谱耗材,正确的使用和维护对保证色谱柱的正常使用和延长寿命至关重要。

1、色谱柱使用前注意事项:1)、色谱柱内的存储液:月旭公司色谱柱的存储液,如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相,氨基(NH2)、氰基(CN)、硅胶柱(SiO2)均为正相条件–正己烷/异丙醇体系,反相柱(C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl)均为甲醇/水体系,检测前,请用相互溶的试剂将其替换;2)、新色谱柱的平衡:新反相色谱柱:用纯甲醇冲洗色谱柱30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积,最后用流动相稳定系统至基线平稳;新的正相色谱柱:用异丙醇0.5ml/min冲洗30个柱体积,再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳;2、色谱柱的使用方向:月旭公司出品的高效液相色谱柱标签上的箭头方向为流动相流向,使用过程时也按此方向,避免双向混用,导致两端填料同时污染,不利于色谱柱的再生和维护;3、流动相和样品保持洁净:由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板,各种试剂尽量使用色谱纯级的,用量少的试剂纯度至少是分析纯,水最好是超纯水和全玻璃器皿双蒸水,使用前建议用0.45μm的滤膜过滤;样品溶液使用针筒过滤;样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的最主要原因之一,复杂样品可选样品预处理柱(SPE柱)进行样品处理,如果不方便处理,最好使用相匹配的保护柱,样品溶剂与流动相要相匹配,不能出现样品不互溶,极性相差太大等想象,否则会造成色谱峰形变差,鬼峰等现象,使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生;4、色谱柱允许使用的pH范围:每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围,请仔细对照你的色谱柱的使用pH范围(表一),在pH范围以外使用,会使硅胶基质溶解或键合相水解,对色谱柱造成不可恢复的损伤,如果在临界pH处使用,分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。

高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养

高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养

高效液相色谱仪色谱柱的正确操作及维护和修理保养高效液相色谱仪色谱柱的正确操作色谱柱是高效液相色谱仪最紧要的部件,被测物质能否被很好的分别和测定,色谱柱的性能起着决议性的作用。

因此,在日常工作中,应特别注意色谱柱的正确使用和维护和修理保养,以延长色谱柱的使用寿命。

1、使用预柱和保护柱预柱(pre—column)安装于泵和进样器之间,它给色谱柱中的流动相供应了完全的平衡,并防止了对柱填料有破坏作用的组分或污染物进入色谱柱。

保护柱(guardcolumn)可以阻拦能够坚固地吸附于色谱柱上的组分进入色谱柱,保护柱应与色谱柱的填料相同。

预柱和保护柱可以常常更换,而不需要常常更换色谱柱,这就延长了色谱柱的使用寿命。

2、防止气体进入有些色谱柱(如凝胶柱)是不允许气泡进入的,否则将会使柱效降低甚至形成微小的难以驱除的气室。

因此,为了防止气泡进入色谱柱,确定要使用经过脱气的流动相,并且要严格依照下列步骤来安装色谱柱。

a、拆卸下色谱柱入口处的密封螺丝,察看是否有溶剂渗出;b、如有溶剂渗出,即可将色谱柱接到管路上,以避开气泡的进入;c、如无溶剂渗出时,表明色谱柱的此端已经进去空气了,此时,可将色谱柱的出口端接到进样阀上,以流动相来反方向冲洗色谱柱,以便将柱内的空气排出。

建议以0、2ml/min的小流量来冲色谱柱,假如溶剂的流速太快或者是压力蓦地的上升都将会导致柱性能的降低;d、假如流出的溶剂里不含有气泡,说明柱内的气体已经被排出了,再将色谱柱以正确的方向接好,这样气泡就进不到色谱柱里面了。

3、清洗为了不使被测物质和杂质停留在色谱柱中,在每次的样品分析工作完成之后,都应适时地清洗色谱柱。

首先要用对被测样品洗脱本领强的溶剂来洗脱色谱柱,以分析工作中常用的反相色谱分析法为例,因其先流出的物质是极性大的物质,此时应用100%的甲醇或使用异丙纯、四氢呋喃等极性稍弱的溶剂将吸附在柱内的极性小的物质洗脱下来,洗脱液的用量一般为柱体积的20倍即可。

高效液相色谱仪的使用方法及注意事项

高效液相色谱仪的使用方法及注意事项

高效液相色谱仪操作步骤:1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

4).进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

5).有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。

冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。

冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。

6).调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。

点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

7).设计走样方法。

点击file,选取select users and methods,可以选取现有的各种走样方法。

若需建立一个新的方法,点击new method。

选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。

选完后,点击protocol。

一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。

8).进样和进样后操作。

选定走样方法,点击start。

进样,所有的样品均需过滤。

方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。

全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

9).关机时,先关计算机,再关液相色谱。

10).填写登记本,由负责人签字。

高效液相色谱仪使用注意事项:1、泵正常工作时,在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的,当然在换流动相时压力变化是正常的,正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的(只有更换色谱柱),如果正常情况下压力突然降低有可能是(1)接头处有漏液的地方,采取的方法是有滤纸检查,如有漏液的地方用扳手拧紧即可。

kromasil色谱柱使用指南

kromasil色谱柱使用指南

kromasil色谱柱使用指南Kromasil Chromatography Column User Guide.Introduction.Kromasil chromatography columns are high-performance liquid chromatography (HPLC) columns that are used for the separation of a wide range of compounds. They are made of a silica-based material that is coated with a bonded phase. The bonded phase is typically a hydrocarbon, such as C18, or a polar group, such as cyano. The choice of bonded phase will depend on the specific application.Column Selection.The first step in using a Kromasil chromatography column is to select the correct column for the application. The following factors should be considered when selecting a column:The type of sample being analyzed.The desired separation.The flow rate.The pressure drop.Column Preparation.Before using a Kromasil chromatography column, it must be prepared. The column should be washed with a solvent that is compatible with the sample and the bonded phase. The column should then be equilibrated with the mobile phase.Sample Injection.The sample is injected into the column using a syringe or an autosampler. The injection volume should be small enough to avoid overloading the column.Elution.The sample is eluted from the column using a mobile phase. The mobile phase is typically a mixture of water and an organic solvent. The composition of the mobile phasewill depend on the specific application.Detection.The eluent from the column is detected using a detector. The detector can be a UV-Vis detector, a fluorescence detector, or a mass spectrometer.Data Analysis.The data from the detector is analyzed to identify the peaks in the chromatogram. The peaks are identified bytheir retention time. The retention time is the time it takes for a compound to elute from the column.Troubleshooting.If the chromatography column is not performing properly, there are a few things that can be checked:The column may be overloaded. Try reducing theinjection volume.The column may be contaminated. Try washing the column with a solvent that is compatible with the sample and the bonded phase.The mobile phase may not be compatible with the sample or the bonded phase. Try changing the mobile phase composition.中文回答:Kromasil色谱柱用户指南。

高效液相色谱仪 使用说明

高效液相色谱仪 使用说明

高效液相色谱仪使用方法操作步骤1、开机设定参数(检测波长、流速),更换所需流动相,检查色谱柱是否正确。

2、排液置换管路中流动相,冲洗进样阀,洗好进样针。

3、冲洗色谱柱进行平衡,其间可提前进行样品的处理,样品信息的注册。

4、平衡好以后进空白试验,排除系统污染。

5、柱子稳定好以后进样,等待运行结束(其间清洗进样针),积分计算,出具报告。

详细操作步骤如下:1、开机操作:(1)、打开电源,用Harb相连接时,注意Harb电源,打开计算机,打开Bootp Server(一般启动时已打开);(2)、自上而下打开各组件电源,Bootp Server里显示有信号时(有六行字符),打开工作站(先打开On line);(3)、打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关(需用针捅抽),控制流量大小,以能流出的最小流量为准;(4)、注意各流动相所剩溶液的容积设定,若设定的容积低于最低限会自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液;(5)、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。

2、先以所用流动相冲洗系统一定时间(如所用流动相为含盐流动相,必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相),正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯,以延长灯的使用寿命;3、建立色谱操作方法,注意保存为自己命名的Method,勿覆盖或删除他人的方法及实验结果;4、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;6、实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。

冲洗过程中关闭D灯、W灯;7、关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;8、使用者须认真履行仪器使用登记制度,不要擅自拆卸仪器。

COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书一序言二使用注意

COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书一序言二使用注意

COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书一. 序言非常感谢您购买我们的COSMOSIL色谱柱。

为了保证色谱柱能够发挥最高性能和保持更长的寿命,我们建议您在使用前仔细阅读本说明书。

COSMOSIL色谱柱由不锈钢制成,其内部填料以超纯多孔球状硅胶为基质。

我们的COSMOSIL系列覆盖了几乎所有的正反相色谱的一般应用和特殊应用,此外还具有分析目的和制备目的的色谱柱。

请联系我们的经销商或直接联系Nacalai Tesque咨询最适合您的色谱柱。

二. 使用注意1. 避免冲击和震动。

2. 按照标签上标明的方向连接色谱柱。

3. 将色谱柱连接到检测器之前,先使用20~30ml流动相通过色谱柱。

4. 请使用完全脱气的流动相。

气泡会导致检测噪音并且会加速色谱柱的恶化。

5. 请使用HPLC级溶剂。

6. 包装盒内的检验报告书中记载了色谱柱出厂时的内部溶剂成分。

给流动相中添加缓冲液时,请确认检验报告书中的成分表以避免色谱柱内产生沉淀。

7. 请将流动相的pH值范围保持在2~7.5之内。

缓冲液浓度范围通常为0.005~0.02M。

使用流动相前先将流动相通过孔径0.5μm以下的薄膜滤器。

使用三氟乙酸时,请将浓度保持在0.1%以下。

8. 请将压力保持在200kgf/cm2以下。

在使用高粘度流动相时需要特别注意。

9. 使用完反相色谱柱后,请先用不含酸或盐的溶剂清洗色谱柱,再用乙腈或甲醇清洗色谱柱,紧栓保存。

10. 使用完正相色谱柱后,请将色谱柱内部的溶剂置换为无卤素非极性溶剂(如正己烷或正庚烷),紧栓保存。

11. 注入样品前请务必过滤样品。

另外,将样品注入到流动相内时,请注意不要产生沉淀。

12. 拆下色谱柱的端螺帽或端部滤片会造成色谱柱性能的大幅下降。

13. 不要将螺帽拧的太紧。

14. 使用制备柱时,请先使用分析柱确定样品的分离状态。

注意:可能会有保留时间长于目标物质或无紫外吸收的杂质存在。

三. 如何使色谱柱发挥最高性能1. 为了使色谱柱发挥最高性能,请尽量减小死体积,如缩短管路的长度,减小管路的直径等。

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明

色谱柱的使用说明液相色谱柱是昂贵的色谱耗材,是液相色谱仪的心脏,有着严格的生产标准和测试程序,为了充分发挥色谱柱的性能,最大程度延长色谱柱的使用寿命,请仔细阅读此部分。

色谱柱的身份确认:为了保证每一支色谱柱的质量,月旭公司出品的每一支色谱柱都有唯一的身份编码,根据此编码,我公司可以将质量问题确定到个人,为了保障你的利益,收到色谱柱时,请完成以下程序:1、仔细查看包装盒是否完好,与自己请购的色谱柱是否一致;2、盒内是否有质量检验报告及检验人员签名;3、色谱柱表面有无碰撞伤痕,柱两端保护色谱柱的塑料堵头是否完整;4、色谱柱柱体是否贴有月旭公司色谱柱的身份标牌,并仔细对照包装盒与色谱柱标签上的型号和编号是否一致。

结构和安装:结构:月旭公司出品的高效液相色谱柱柱管材质均为316L不锈钢,两端结构完全一致,其结构如图一:图一 Ultimate○R系列液相色谱柱结构安装:为了保证色谱柱使用时有最高柱效,连接管路尽量使用适合的细径管路,色谱柱进出口的连接必须非常适配,连接管端口部分必须平整,不能有毛刺和切口斜面等现象,各种连接管路请使用专业工具切割修整;1、取出色谱柱,仔细查看柱身洗脱液流向箭头标识,用手旋下柱两端的塑料堵头,放好色谱柱,使洗脱液流向和柱身所示流向一致,如图二所示:图二色谱柱的正确连接2、用手将“连接管路的不锈钢或者其它材质的接头”旋入色谱柱两端,管路接头要和色谱柱接口连接紧密,确保零死体积连接,在色谱仪正常运行时没有漏液。

色谱柱的正确使用:色谱柱是昂贵的色谱耗材,正确的使用和维护对保证色谱柱的正常使用和延长寿命至关重要。

1、色谱柱使用前注意事项:1)、色谱柱内的存储液:月旭公司色谱柱的存储液,如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相,氨基(NH2)、氰基(CN)、硅胶柱(SiO2)均为正相条件–正己烷/异丙醇体系,反相柱(C1、C4、C8、C18、苯基Phenyl)均为甲醇/水体系,检测前,请用相互溶的试剂将其替换;2)、新色谱柱的平衡:新反相色谱柱:用纯甲醇冲洗色谱柱30个柱体积,再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积,最后用流动相稳定系统至基线平稳;新的正相色谱柱:用异丙醇0.5ml/min冲洗30个柱体积,再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳;2、色谱柱的使用方向:月旭公司出品的高效液相色谱柱标签上的箭头方向为流动相流向,使用过程时也按此方向,避免双向混用,导致两端填料同时污染,不利于色谱柱的再生和维护;3、流动相和样品保持洁净:由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板,各种试剂尽量使用色谱纯级的,用量少的试剂纯度至少是分析纯,水最好是超纯水和全玻璃器皿双蒸水,使用前建议用0.45μm的滤膜过滤;样品溶液使用针筒过滤;样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的最主要原因之一,复杂样品可选样品预处理柱(SPE柱)进行样品处理,如果不方便处理,最好使用相匹配的保护柱,样品溶剂与流动相要相匹配,不能出现样品不互溶,极性相差太大等想象,否则会造成色谱峰形变差,鬼峰等现象,使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生;4、色谱柱允许使用的pH范围:每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围,请仔细对照你的色谱柱的使用pH范围(表一),在pH范围以外使用,会使硅胶基质溶解或键合相水解,对色谱柱造成不可恢复的损伤,如果在临界pH处使用,分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。

2液相色谱柱的正确安装和使用说明

2液相色谱柱的正确安装和使用说明

2,色谱柱的安装:
• a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、 尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 • b、拧下柱两端接头的密封堵头放回 包装盒供备用。 • c、按柱管上标示的流动相流向,将 色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出 口相连接(如条件允许,建议在柱前使用 保护柱);柱的出口与检测器连接。
• 连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的 不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封 用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。 连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底, 然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止, 再用扳手继续顺时针拧1/4-1/2圈,切记不要用 力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现 象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液 为止。
二、液相色谱柱的使用:
• 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测 试,并将结果保存起来,作为今后评价 柱性能变化的参考。但要注意:柱性能 可能由于所使用的样品、流动相、柱温 等条件的差异而有所不同;另外,在做 柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中 的条件进行(出厂测试所使用的条件是最 佳条件),只有这样,测得的结果才有可 比性。
1、样品的前处理:
• a、最好使用流动相溶解样品。 • b、使用予处理柱除去样品中的强极 性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 • 、使用0.45µ m的过滤膜过滤除去微 粒杂质。Fra bibliotek、流动相的配制:
• 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相 之间质量交换而达到分离的目的,因此 要求流动相具备以下的特点: • a、流动相对样品具有一定的溶解能 力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长 时间保留在柱中)。
• b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学 反应(特殊情况除外)。 • c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用 较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降 低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高 温度的方法降低流动相的黏度)。 • d、流动相的物化性质要与使用的检测器 相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外 吸收较低的溶剂配制。
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COSMOSIL高效液相色谱柱使用说明书
一. 序言
非常感谢您购买我们的COSMOSIL色谱柱。

为了保证色谱柱能够发挥最高性能和保持更长的寿命,我们建议您在使用前仔细阅读本说明书。

COSMOSIL色谱柱由不锈钢制成,其内部填料以超纯多孔球状硅胶为基质。

我们的COSMOSIL系列覆盖了几乎所有的正反相色谱的一般应用和特殊应用,此外还具有分析目的和制备目的的色谱柱。

请联系我们的经销商或直接联系Nacalai Tesque咨询最适合您的色谱柱。

二. 使用注意
1. 避免冲击和震动。

2. 按照标签上标明的方向连接色谱柱。

3. 将色谱柱连接到检测器之前,先使用20~30ml流动相通过色谱柱。

4. 请使用完全脱气的流动相。

气泡会导致检测噪音并且会加速色谱柱的恶化。

5. 请使用HPLC级溶剂。

6. 包装盒内的检验报告书中记载了色谱柱出厂时的内部溶剂成分。

给流动相中添加缓冲液
时,请确认检验报告书中的成分表以避免色谱柱内产生沉淀。

7. 请将流动相的pH值范围保持在2~7.5之内。

缓冲液浓度范围通常为0.005~0.02M。

使用
流动相前先将流动相通过孔径0.5μm以下的薄膜滤器。

使用三氟乙酸时,请将浓度保持在0.1%以下。

8. 请将压力保持在200kgf/cm2以下。

在使用高粘度流动相时需要特别注意。

9. 使用完反相色谱柱后,请先用不含酸或盐的溶剂清洗色谱柱,再用乙腈或甲醇清洗色谱
柱,紧栓保存。

10. 使用完正相色谱柱后,请将色谱柱内部的溶剂置换为无卤素非极性溶剂(如正己烷或正
庚烷),紧栓保存。

11. 注入样品前请务必过滤样品。

另外,将样品注入到流动相内时,请注意不要产生沉淀。

12. 拆下色谱柱的端螺帽或端部滤片会造成色谱柱性能的大幅下降。

13. 不要将螺帽拧的太紧。

14. 使用制备柱时,请先使用分析柱确定样品的分离状态。

注意:可能会有保留时间长于目
标物质或无紫外吸收的杂质存在。

三. 如何使色谱柱发挥最高性能
1. 为了使色谱柱发挥最高性能,请尽量减小死体积,如缩短管路的长度,减小管路的直径
等。

2. 使色谱柱和管路保持恒温。

3. 避免空气的注入,过大的流速变化,高流速下的流动相更换和过大的压力变化。

4. 流动相,样品或泵中的不溶物流入色谱柱内会堵塞色谱柱入口的滤片(2μm)而造成分析
压力的上升。

在进样器和色谱柱之间安置一个预滤器(1μm)可以有效地防止色谱柱堵塞。

5. 建议使用保护柱来保护您的分析柱或制备柱。

填料的不可逆吸附和由压力变化引起的色
谱柱性能低下都发生在色谱柱头部。

使用保护柱可以有效地延长色谱柱的寿命。

6. 使用正相色谱柱时,移动相中的水含量或极性溶剂含量的改变会造成保留时间的改变。

7. 频繁地更换流动相会加快色谱柱的劣化。

限定色谱柱的用途,尽量使用同一种流动相可
以延长色谱柱的寿命。

四. 故障排除
故障原因解决方法
压力上升・色谱柱端部滤片堵塞
・填料堵塞
・色谱柱内有沉淀物(1)(2)(1)(3)
分离度低下・填料污染
・填料受损(3)
无法解决
峰裂・填料受损无法解决
基线不稳(PYE,NPE,Ph,PE)(4)
解决方法:
1. 断开色谱柱与检测器的连接。

使流动相以0.5ml/min的流速按照色谱柱标签指示方向的相
反方向冲洗色谱柱30分钟。

2. 清洗或更换端部滤片。

3. 使用可以溶解杂质的溶剂冲洗色谱柱。

您可以使用以下溶剂:水,乙腈,甲醇,乙醇,
1-丙醇,2-丙醇,四氢呋喃,三氯甲烷,正己烷和正庚烷。

4. 使10ml四氢呋喃通过色谱柱。

五. 品质保证
Nacalai Tesque具有严格的质量控制系统,本着对每一位客户负责的态度,Nacalai Tesque 为每只COSMOSIL色谱柱(保护柱除外)提供一份质量检验报告。

此外,为每只COSMOSIL 5C18-MS-II,5C18-AR-II, 3C18-EB, Cholester及HILIC(4.6mm I.D.×150 mm和4.6 mm I.D.×250 mm)提供分析证明书。

检验报告
检验报告包括理论塔板数(N),峰对称性(s),容量因子(k’),分离因子(α)和柱压数据。

N :理论塔板数
W1/2:半峰宽
h :峰高
s :峰对称性
k’ :容量因子
α:分离因子
分析证明书
分析证明书中记载了原料硅胶的物理性质,碳含有量,极性选择性,疏水性,硅醇基活性,空间选择性,对于碱性物质及螯合物的失活程度等。

六. 质量保证
如遇到以下问题,请在到货两周内联系我们,Nacalai Tesque会为您更换新的色谱柱。

1. 由我方包装不完备造成的运输中的损伤。

2. 到货后,按照检验报告中记载的检测条件测出的理论塔板数远低于保证理论塔板数(注
意:当仪器的死体积很大或进样量过多时,理论塔板数会降低)。

由以下原因造成的故障不在质保范围内:
1. 由拆下端螺帽或端部滤片而产生的任何故障。

2. 色谱柱已被长时间使用。

我方不负担更换色谱柱时产生的运费。

除非您事先接到过来自我们的关于负担运费的承诺。

如有任何问题或建议请联系我们的经销商或直接按以下方式联系我们。

Nacalai Tesque, Inc. International Section
498 Higashitamaya-cho, Nijo Karasuma, Nakagyo-ku,
Kyoto 604-0855 Japan
TEL: +81 (0)75-251-1730 FAX: +81 (0)75-251-1763
E-mail:@
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