还原糖检测方法
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实验二
总糖和还原糖的测定
一、目的要求
掌握碱性铜试剂法测定还原糖的原理和操作方法。
二、原理
单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性， 属于还原糖；而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖 能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量 对总糖进行测定。 还原糖的测定方法多种，本实验采用间接滴定法。其 原理是：在碱性溶液中，二价铜离子被还原糖还原成一价 的氧化亚铜，氧化亚铜在酸性环境中与一定量的过量碘起 反应， 再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘，即可算出还 原糖的含量。反应方程式是：
2NaOH + CuSO4=Cu(OH)2↓+ Na2SO4
COOK COOK Cu + 2 H2O
Cu(OH)2 + H―C―OH ＝ H―C―O H―C―OH COONa 酒石酸甲钠 COOK 2 H― C ―O CHO H―C―O COONa
可溶性的氧化铜络合物 COOK COOH
Cu +（CHOH）4+ 2 H2O = 2 H― C ―OH （ CHOH）4 ） ） + H―C ―O H―C―OH CH2OH CH2OH COONa COONa 葡萄糖酸 葡萄糖 酒石酸甲钠 + Cu2O↓ ↓
1. 试剂 铜试剂、0.005 mol/L硫代硫酸钠溶液、2%碘化 钾溶液、
0.5 mg/mL标准葡萄糖溶液、1％淀粉指示剂
2. 器材 碱式滴定管、恒温水浴锅
四、操作步骤
1. 取6只试管，按照下表的次序加入试剂。另取6
个小三角烧瓶，按相应的试管顺序编号。
试剂 管号 空白 试验 标准 试验 总糖 试验 1 2 1 2 1 2 H2O (mL) 2 2 1 1 1 1 2 2 标准葡萄糖 （mL） 还原糖提取液 （mL） 总糖水解液 （mL） 铜试剂 （mL） 4 4 4 4 4 4
பைடு நூலகம்
沸 水 浴 中 煮 沸 15 分 钟
2. 各试管冷却后，摇动试管，使试管底部的红色沉淀分 散后倾入相应的三角瓶中； 3. 分别在每个试管中加入2mL 2％碘化钾溶液和2mL 2 mol/L H2SO4，以洗涤管中的残留物，并转入相应的 试管中，最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次； 4. 用0.005 mol/L NaS2O3滴定至碘颜色接近消失时加入 淀粉指示剂5滴，继续滴定至蓝色消失为止。
IO3 + 5 I + 6 H Cu2O + I2 + H + I2 + 2 S2O3 2-
+
3 I 2 + 3 H 2O Cu
2+
+ I + H2 O
S4O6 2-+ 2 I
因此，用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，在有已知浓度的 标准还原糖浓度时，可以间接地计算出未知样品的还原 糖的含量。
三、试剂与器材
五、计算
0.5 X= V空 － V标 X（V空－V未知） （
六、注意事项
1.
各试管的处理应一致，测定溶液应同时放入沸 水中，再同时从沸水浴中取出。 在用碘化钾和硫酸洗涤试管时要洗净，否则会 影响滴定结果的准确性。 滴定终点时溶液呈现二价铜离子的浅蓝色，切 勿将它与终点混淆。
2.
3.
七、 思考题
1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间 接滴定？两种滴定方法各有何优点？
总糖和还原糖的测定
一、目的要求
掌握碱性铜试剂法测定还原糖的原理和操作方法。
二、原理
单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性， 属于还原糖；而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖 能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量 对总糖进行测定。 还原糖的测定方法多种，本实验采用间接滴定法。其 原理是：在碱性溶液中，二价铜离子被还原糖还原成一价 的氧化亚铜，氧化亚铜在酸性环境中与一定量的过量碘起 反应， 再用标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘，即可算出还 原糖的含量。反应方程式是：
2NaOH + CuSO4=Cu(OH)2↓+ Na2SO4
COOK COOK Cu + 2 H2O
Cu(OH)2 + H―C―OH ＝ H―C―O H―C―OH COONa 酒石酸甲钠 COOK 2 H― C ―O CHO H―C―O COONa
可溶性的氧化铜络合物 COOK COOH
Cu +（CHOH）4+ 2 H2O = 2 H― C ―OH （ CHOH）4 ） ） + H―C ―O H―C―OH CH2OH CH2OH COONa COONa 葡萄糖酸 葡萄糖 酒石酸甲钠 + Cu2O↓ ↓
1. 试剂 铜试剂、0.005 mol/L硫代硫酸钠溶液、2%碘化 钾溶液、
0.5 mg/mL标准葡萄糖溶液、1％淀粉指示剂
2. 器材 碱式滴定管、恒温水浴锅
四、操作步骤
1. 取6只试管，按照下表的次序加入试剂。另取6
个小三角烧瓶，按相应的试管顺序编号。
试剂 管号 空白 试验 标准 试验 总糖 试验 1 2 1 2 1 2 H2O (mL) 2 2 1 1 1 1 2 2 标准葡萄糖 （mL） 还原糖提取液 （mL） 总糖水解液 （mL） 铜试剂 （mL） 4 4 4 4 4 4
பைடு நூலகம்
沸 水 浴 中 煮 沸 15 分 钟
2. 各试管冷却后，摇动试管，使试管底部的红色沉淀分 散后倾入相应的三角瓶中； 3. 分别在每个试管中加入2mL 2％碘化钾溶液和2mL 2 mol/L H2SO4，以洗涤管中的残留物，并转入相应的 试管中，最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次； 4. 用0.005 mol/L NaS2O3滴定至碘颜色接近消失时加入 淀粉指示剂5滴，继续滴定至蓝色消失为止。
IO3 + 5 I + 6 H Cu2O + I2 + H + I2 + 2 S2O3 2-
+
3 I 2 + 3 H 2O Cu
2+
+ I + H2 O
S4O6 2-+ 2 I
因此，用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，在有已知浓度的 标准还原糖浓度时，可以间接地计算出未知样品的还原 糖的含量。
三、试剂与器材
五、计算
0.5 X= V空 － V标 X（V空－V未知） （
六、注意事项
1.
各试管的处理应一致，测定溶液应同时放入沸 水中，再同时从沸水浴中取出。 在用碘化钾和硫酸洗涤试管时要洗净，否则会 影响滴定结果的准确性。 滴定终点时溶液呈现二价铜离子的浅蓝色，切 勿将它与终点混淆。
2.
3.
七、 思考题
1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间 接滴定？两种滴定方法各有何优点？