四血型鉴定和交叉配血中常见问题分析和处理
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17
分析和处理
ABO正反定不符的分类
一、 抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定不符
三、 意外的血清学反应所致的ABO正反定不符
18
分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
☆血型抗原表达减弱的常见原因
↑ABO亚型红细胞 ↑白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗
血型鉴定和交叉配血 中常见问题分析和处理
1
血型相容性检测 Click to add Title ABO血型正反定不一致的原因分析及处理 交叉配血中常见问题分析及处理
意外抗体筛选的意义和检测方法 弱D检测的意义和检测方法 Click to add Title
2
第一部分
血型相容性检测
• 受血者和供血者AB0血型是否相容
↑ 获得性B红细胞
↑ 获得性类A抗原 ↑ 混合视野凝集
↑抗体包被红细胞
22
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(特征) ↗常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生 在正常人 ↗通常只有A 型人能出现获得性B抗原 ↗常伴有T和T n多凝集红细胞出现(细菌感染时) ↗自身抗－B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)
分析和处理
1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史
3.彻底洗涤标本或试剂红细胞
4.应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞
5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗
体干扰 6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原 抗体反应 7.用自身红细胞对照，以确定自身抗体的干扰
原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预
期的凝集反应
↑新生儿
19
分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
☆ 抗原表达减弱所致 ABO 正反定不符的处理
↑将抗－A、抗－B和抗－A，B试剂与洗涤过的红细胞在 室温或4℃孵育30min，以增强抗原、抗体的结合 ↑用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增 强抗原、抗体的结合 ↑应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞
▼混合视野凝集
↗非O型人近期输用O型血 ↗骨髓移植后 ↗A3细胞与抗－A呈典型的混合视野凝集现象 ↗单合子的镶嵌红细胞、双合子的交移体红细胞
26
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符 ▼抗体包被红细胞
↗ 患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成 人，其红细胞严重包被IgG抗体分子 ↗与含一定蛋白质浓度的试剂（抗－D、抗－A、抗 －B）产生凝集 ↗45 ℃放散后，抗体解离，即可准确定型
血清中含针对抗－A、抗－B试剂中染色剂或其他 成分的抗体，出现假阳性反应
11
原因
二、红细胞标本问题
患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包
被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是试剂 的特异性免疫反应所致
红细胞表面包被IgG类抗体
12
原因
三、血清标本的问题
小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，
Fra Baidu bibliotek
原因
血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞抗体，如
抗－M、抗－I等。
患者接受了ABO血型不同的骨髓移植
15
三、血清标本的问题
患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗－A、
抗－B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原 位点，不发生凝集
原因
16
基本程序
1.假阴性结果
6
原因
离心速度过大、时间过长 使用了受到细菌污染的试剂
2.假阳性结果
试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误
7
原因
二、红细胞标本问题
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细
胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞
8
原因
二、红细胞标本问题
◆某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一
如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。
13
原因
三、血清标本的问题
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老
年人ABO抗体减弱
4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体未产生或很弱，一
般只做正定型
14
三、血清标本的问题
血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋
白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特 异凝集。
些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原减 弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集 反应
9
原因
二、红细胞标本问题
红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红
细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗－A、抗－B 试剂可能与这些异常的红细胞反应
10
原因
二、红细胞标本问题
使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或
20
分析和处理
↑用人血清抗－A、抗－B进行吸收放散试验，检测弱
A、B抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸
收放散试验，单克隆抗－A、抗－B必须经过系统验
证，且同时要做O型血吸收放散试验作对照
↑检测唾液中A、B和H血型抗原物质
21
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反
应所致的ABO正反定不符
☆ 引起抗-A、抗-B血清意外反应的因素
23
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(鉴定) ↗调整人血清抗－B试剂pH至6.0时，即不与获得性B 细胞反应 ↗分泌型者唾液中无B血型物质 ↗乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B细胞不受 影响
24
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符 ▼获得性类A抗原
↗ 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性Tn
抗原激活，类同A抗原
↗ Tn和T一样属隐蔽性抗原,激活暴露后与所有血型的血
清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝)
↗蛋白酶能降解Tn分子，消除与抗A凝集反应性，而正常
A抗原不受影响,也可通过AB血清证实
25
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
• 受血者和供血者RhD血型是否相容
• 主次侧交叉配血是否相容
• 受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体
3
第二部分
ABO 正 反 定 型 不 符 的原因分析和处理
4
原因
一、实验者操作技术的错误 二、红细胞标本问题 三、血清标本的问题
5
原因
一、实验者操作技术错误
未加入抗体或血清 未识别溶血 血清与红细胞比例不当 离心速度、时间不够 使用失效或错误试剂 实验结果记录、解释错误
分析和处理
ABO正反定不符的分类
一、 抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所致的ABO正反定不符
三、 意外的血清学反应所致的ABO正反定不符
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分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
☆血型抗原表达减弱的常见原因
↑ABO亚型红细胞 ↑白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗
血型鉴定和交叉配血 中常见问题分析和处理
1
血型相容性检测 Click to add Title ABO血型正反定不一致的原因分析及处理 交叉配血中常见问题分析及处理
意外抗体筛选的意义和检测方法 弱D检测的意义和检测方法 Click to add Title
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第一部分
血型相容性检测
• 受血者和供血者AB0血型是否相容
↑ 获得性B红细胞
↑ 获得性类A抗原 ↑ 混合视野凝集
↑抗体包被红细胞
22
分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(特征) ↗常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生 在正常人 ↗通常只有A 型人能出现获得性B抗原 ↗常伴有T和T n多凝集红细胞出现(细菌感染时) ↗自身抗－B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)
分析和处理
1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误 2.查询患者既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史
3.彻底洗涤标本或试剂红细胞
4.应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞
5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗
体干扰 6.室温孵育30min后，离心观察结果，以检测弱的抗原 抗体反应 7.用自身红细胞对照，以确定自身抗体的干扰
原太弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预
期的凝集反应
↑新生儿
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分析和处理
一、抗原表达减弱所致的ABO正反定不符
☆ 抗原表达减弱所致 ABO 正反定不符的处理
↑将抗－A、抗－B和抗－A，B试剂与洗涤过的红细胞在 室温或4℃孵育30min，以增强抗原、抗体的结合 ↑用木瓜酶、无花果酶和菠萝蛋白酶处理红细胞，以增 强抗原、抗体的结合 ↑应用抗－AB、抗－A1、或抗－H检测红细胞
▼混合视野凝集
↗非O型人近期输用O型血 ↗骨髓移植后 ↗A3细胞与抗－A呈典型的混合视野凝集现象 ↗单合子的镶嵌红细胞、双合子的交移体红细胞
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分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符 ▼抗体包被红细胞
↗ 患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成 人，其红细胞严重包被IgG抗体分子 ↗与含一定蛋白质浓度的试剂（抗－D、抗－A、抗 －B）产生凝集 ↗45 ℃放散后，抗体解离，即可准确定型
血清中含针对抗－A、抗－B试剂中染色剂或其他 成分的抗体，出现假阳性反应
11
原因
二、红细胞标本问题
患者血清中高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏（包
被）自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是试剂 的特异性免疫反应所致
红细胞表面包被IgG类抗体
12
原因
三、血清标本的问题
小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，
Fra Baidu bibliotek
原因
血清中含抗－A、抗－B以外的其他红细胞抗体，如
抗－M、抗－I等。
患者接受了ABO血型不同的骨髓移植
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三、血清标本的问题
患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体 大量C 1分子由于异常高效价的补体结合抗体抗－A、
抗－B作用，结合到红细胞膜上，遮蔽了A、B抗原 位点，不发生凝集
原因
16
基本程序
1.假阴性结果
6
原因
离心速度过大、时间过长 使用了受到细菌污染的试剂
2.假阳性结果
试验器皿不干净 实验结果记录、解释错误
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原因
二、红细胞标本问题
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细
胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞
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原因
二、红细胞标本问题
◆某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一
如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时。
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原因
三、血清标本的问题
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老
年人ABO抗体减弱
4-6月龄内婴儿血清中ABO抗体未产生或很弱，一
般只做正定型
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三、血清标本的问题
血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋
白增多可引起非特异凝集，如缗钱状红细胞的非特 异凝集。
些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原减 弱，应用抗－A、抗－B试剂未能出现预期的凝集 反应
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原因
二、红细胞标本问题
红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红
细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗－A、抗－B 试剂可能与这些异常的红细胞反应
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原因
二、红细胞标本问题
使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或
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分析和处理
↑用人血清抗－A、抗－B进行吸收放散试验，检测弱
A、B抗原，但不是所有单克隆抗体试剂都适宜做吸
收放散试验，单克隆抗－A、抗－B必须经过系统验
证，且同时要做O型血吸收放散试验作对照
↑检测唾液中A、B和H血型抗原物质
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分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反
应所致的ABO正反定不符
☆ 引起抗-A、抗-B血清意外反应的因素
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分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
▼获得性B红细胞(鉴定) ↗调整人血清抗－B试剂pH至6.0时，即不与获得性B 细胞反应 ↗分泌型者唾液中无B血型物质 ↗乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B细胞不受 影响
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分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符 ▼获得性类A抗原
↗ 造血干细胞的体细胞突变可造成部分红细胞持续性Tn
抗原激活，类同A抗原
↗ Tn和T一样属隐蔽性抗原,激活暴露后与所有血型的血
清和人血清血型抗体出现凝集反应(全凝后多凝)
↗蛋白酶能降解Tn分子，消除与抗A凝集反应性，而正常
A抗原不受影响,也可通过AB血清证实
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分析和处理
二、抗-A、抗-B血清的意外反应所 致的ABO正反定不符
• 受血者和供血者RhD血型是否相容
• 主次侧交叉配血是否相容
• 受血者血清中是否有临床有意义的意外抗体
3
第二部分
ABO 正 反 定 型 不 符 的原因分析和处理
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原因
一、实验者操作技术的错误 二、红细胞标本问题 三、血清标本的问题
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原因
一、实验者操作技术错误
未加入抗体或血清 未识别溶血 血清与红细胞比例不当 离心速度、时间不够 使用失效或错误试剂 实验结果记录、解释错误