免疫学检测技术

幻灯片1免疫学检测技术

幻灯片2内容掌握抗原抗体反应的原理与特点，了解抗原抗体结合力和比例。掌握免疫组化（IHC）的原理和方法，熟悉一抗、二抗的选择与使用。掌握酶联免疫检测（ELISA）反应的原理方法。掌握免疫印痕（Western blot）的技术原理与方法。了界放射免疫检测技术（RIA）的原理与方法。目标：掌握ELISA、IHC、Western blot的操作方法幻灯片3免疫学检测技术就是利用抗原和抗体高度特异性结合的原理和方法，检测分析各样品中的目标物质，以监控物品质量、检测机体免疫机能和诊断某些疾病的体外检测方法。免疫检测是微量检测方法，灵敏、特异。随着方法和技术的改进，免疫检测方法已渗入工、农、食品、医药等各个领域。幻灯片4从20世纪50年代美国学者Berson和Yallow发明了放射免疫测定技术检测胰岛素起，免疫学检测技术经历了从定性到定量；从常量分析到微量、超微量分析；从手工检测到全自动化；从单个标本检测到高通量检测等一系列长足的进步。本章主要学习血清学检测方法——抗原抗体检测方法。

幻灯片5免疫学技术的发展史

年代学者贡献

1894 J.Bordet 补体与溶菌活性

1896 H.Durham,M.von Gruber 特异凝集反应

1896 G.Widal,A.Sicad 肥达试验

1897 R.Kraus 沉淀试验

1900 J.Bordet,O.Gengou 补体结合反应

1900 ndsteiner 人类ABO血型及其抗体

1906 A.Wassermann 梅毒补体结合反应

纯化抗体,定量沉淀反应1935 M.Heidelberger,F.Kend

all

1941 A.Coons 免疫荧光标记

1946 J.Oudin 凝胶内沉淀反应

1948 O.Ouchterlony,S.Elek 双扩散沉淀反应

1953 P.Grabar,C.Williams 免疫电泳分析,Ig多样性

1960 R.Yallow,S.Berson 放射免疫标记

1966 S.Avrames,J.Uriel,et

酶标免疫技术

al

1975 G.Kohler,stein 杂交瘤技术与单克隆抗

体

幻灯片6第一节免疫学检测的基本原理抗原抗体反应指抗原与相应抗体间的特异性结合反应。曾叫血清学反应。

幻灯片7(一)免疫的早期研究和应用幻灯片8

幻灯片9Edward Jenner 1749-1822，English

爱德华·琴纳

幻灯片10

1979年10月26日，世界卫生组织在肯尼亚首都内罗毕宣布，天花已经在世界上绝迹。幻灯片11鼠疫

公元六世纪公元十四世纪公元十九世纪肆虐欧洲大陆的黑死病（鼠疫）幻灯片12

历史上首次鼠疫大流行发生于公元6世纪，起源于中东，流行中心在近东地中海

沿岸。经埃及南部塞得港沿陆海商路传至北非、欧洲，几乎殃及当时所有著名国家。这次流行持续了五六十年，极流行期每天死亡万人，死亡总数近一亿人。这次大流行导致了东罗马帝国的衰落。第二次大流行发生于公元14世纪，其起源众说不一。此次流行此起彼伏持续近三百年，遍及欧亚大陆和非洲北海岸，尤以欧洲为甚。欧洲死亡两千五百万人，占当时欧洲人口的四分之一；意大利和英国死者达其人口的半数。据记载，当时伦敦的人行道上到处是腐烂发臭的死猫死狗 人们把它们当作传播瘟疫的祸首打死了 然而 没有了猫 鼠疫的真正传染源——老鼠，就越发横行无忌了。到1665年8月，每周死亡达两千人，一个月后竟达八千人。直到几个月后一场大火（史称“伦敦大火灾”），烧毁了伦敦的大部分建筑，老鼠也销声匿迹，鼠疫流行随之平息。这次鼠疫大流行在历史上称为“黑死病”。第三次大流行始于19世纪末（1894年）。它是突然暴发的，至20世纪30年代达最高峰，总共波及亚洲、欧洲、美洲和非洲的六十多个国家，死亡达千万人以上。此次流行传播速度之快、波及地区之广，远远超过前两次大流行。这次流行的特点是疫区多分布在沿海城市及其附近人口稠密的居民区，家养动物中也有流行。幻灯片13

“我的天哪，大街上没有人走动，景象一片凄惨，许多人病倒在街头……我遇到的每一个人都对我说，某某病了，某某死了……”

佩皮斯于1665年10月16日幻灯片14免疫系统的组成、结构、功能及类型（一）免疫的定义（二）免疫系统的组成（三）免疫系统的功能（四）免疫功能的类型幻灯片15（一）免疫的定义

免除税赋，免除差役

immutory免除患疫，免除瘟疫

immunity

定义：指身体对抗病原体引起疾病的能力。

幻灯片16（二）免疫系统(i m m u n e s y s t e m I S)的组成免疫器官

中枢免疫器官

骨髓bone marrow

胸腺thymus

法氏囊bursa ofFabricius(禽类)

外周免疫器官

脾脏spleen

淋巴结lymph node

其它淋巴组织

免疫细胞

免疫分子幻灯片17

幻灯片18中枢免疫器官

中枢免疫器官是免疫细胞发生、分化和成熟的场所骨髓：多能造血干细胞(HSC),分化为髓样干细胞和淋巴干细胞淋巴干细胞分化：Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞（亦称Ｔ、Ｂ细胞）、ＮＫ细胞(nature kill cell)及部分树突状细胞。髓样干细胞分化：单核巨噬细胞、粒细胞、血小板、红细胞等。胸腺：是T细胞分化和成熟的地方，分化成辅助性Ｔ细胞（Ｔｈ）和细胞毒性Ｔ细胞（Ｔｃ）。幻灯片19

外周免疫器官

外周免疫器官包括淋巴结、脾脏、扁桃体、肠系粘膜及皮肤淋巴系统等。T、B 淋巴细胞的定居场所、免疫应答部位。中枢免疫器官产生的T、B淋巴细胞在外