LCMS谱图的判断及分析方法的选择

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羧甲基纤维素质谱lcms

羧甲基纤维素（Carboxymethyl Cellulose，简称CMC）是一种重要的纤维素衍生物，其钠盐（羧甲基纤维素钠）被广泛用作食品添加剂、乳化剂、增稠剂等。

质谱（LCMS）是一种分析化学技术，用于分析化合物。

在这里，LCMS被用于分析羧甲基纤维素的结构和性质。

LCMS分析羧甲基纤维素的过程主要包括以下步骤：
1. 样品制备：将羧甲基纤维素样品溶解在适当的溶剂中，通常为水或有机溶剂。

2. 色谱分离：通过液相色谱（LC）对羧甲基纤维素分子进行分离。

色谱柱通常选择合适的凝胶柱，如羟丙基-Sephadex G-75。

3. 质谱分析：通过串联质谱仪（MS）对经过色谱分离后的化合物进行质谱分析。

质谱分析可以帮助确定羧甲基纤维素的分子量、结构以及取代度等性质。

4. 数据处理：将质谱分析得到的数据进行处理，得到羧甲基纤维素的详细结构信息。

《lcms质谱》课件

基础概念
质谱仪的工作原理
质谱仪通过将化合物离子化并进行分离、加速和聚焦，最终将其离子流传递给检测器进行检测。
电离方式
常用的电离方式包括电喷雾电离（ESI）和飞行时间电离（TOF）。
质量分析器的分类及原理
不同结构的质量分析器包括四极杆、离子阱、飞行时间和轨道阱。
样品制备
1
样品的前处理
样品处理过程中除去无关物质，保留有
质谱分析条件的设置
针对不同的样品类型和分析目的，设置质谱分析条件（如离子源温度、碎片电压等）。
数据分析
质谱数据的处理
质谱图的解释
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
结果的评估和验证
对原始数据进行降噪、基线校正、质量准确校正等处理，获得可解释的质谱图。
对质谱图中的峰进行归属和解释，结合库检索等手段进行物质的鉴定和定量分析。
根据质谱分析结果进行评估和验证，确认结果的可靠性。
研究案例
1
生物分子领域的应用
利用LCMS技术对蛋白质、核酸、糖等生物分子进行分析，有助于揭示生物过程及其疾病机制。
2
药物研发领域的应用
在药物代谢、药物筛选等方面发挥了重要作用，有助于加快新药研发进程。
展望
未来LCMS质谱技术的发展方向
主要包括提高分辨率、提高灵敏度、降低成本等方面的努力。
该技术可能的应用扩展领域
《lcms质谱》PPT课件
LCMS质谱技术是一种高灵敏度的分析技术，被广泛用于生物分子和药物研发领域。本PPT课件将介绍其工作原理、样品制备、操作步骤、数据分析以及未来发展方向。
技术简介
什么是LCMS质谱技术？
它是一种将液相色谱和质谱相结合的技术，可用于高灵敏度分析复杂混合物。

lcms操作说明简介

开机步骤1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。

2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。

（具体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。

a. 打开脱气机 (Degasser On)。

b. 湿灌注(Wet Prime)。

c. Purge Injector。

d. 平衡色谱柱。

3. 双击桌面上的 MassLynx4.0图标进入质谱软件。

注：如果进入Masslynx软件时出现提示：“The embedded system is not responding, The system will run in standalone mode”，则说明质谱内置的CPU(EPC)与电脑主机的通讯联系还未建立，此时无法控制质谱，请稍等后再进入软件，如果打开软件仅为处理数据则没有关系（质谱主机电源未开时进入软件也会有同样提示）。

4. 检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过3000小时，请及时更换机械泵油。

5. 点击质谱调谐图标（MS Tune）进入质谱调谐窗口。

6. 选择菜单“Options – Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。

几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。

7. 点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。

8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90 psi。

9. 设置源温度（Source Temp）到目标温度。

质谱调谐窗口各项参数设定电喷雾电离源（ESI）1. 在质谱调谐窗口选定要使用的离子模式。

2. 点击进入下面Source界面，设定Source界面里的各项参数。

Capillary(KV) 加在ESI源内毛细管上的高压，正离子模式一般是在2.5-3.75KV 之间优化，负离子模式一般是在2.0-3.0KV之间优化。

LCMS分析条件的选择和优化接口正负离子模式流动相温度等

第五节LC・MS分析条件的选择和优化一、按□的选择ESI和APCI在实际应用中表现岀它们各自的优势和弱点。

这使得ESI 和APC1成为了两个相互补充的分析手段。

概括地说.ESI适合于中等极性到强极性的化合物分子，待别是那些在溶液中能预先形成离子的化合物和可以获得多个质子的大分子（蛋白质）。

只要有相对强的极性，ESI对小分子的分析常常可以得到满意的结果。

APCI不适合可带有多个电荷的大分子，它的优势在于非极性或中等极性的小分子的分析。

表3・3从不同的方面对二者进行了比较，可以帮助我们针对不同的样品、不同的分析目的选用这两种接口。

»3-3 ES1#QAPC1 的比较二、正、负离子模式的选择~般的商品仪器中，ESI和APCI接口都有正负离子测定模式可供选择。

选择的一般性原则为：（1）正离子模式适合于碱性样品，如含有鞭氨酸、精氨酸和组氨酸的肽类。

可用乙酸（pH=3〜4〉或甲酸（pH = 2〜3）对样品加以酸化。

如果样品的PK值是已知的，则pH要至少低于pK值2个单位。

（2）负离子模式适合于酸性样品，如含有谷氨酸和天冬氨酸的肽类可用氨水或三乙胺对样品进行减化。

pH要至少高于pK值两•个单位。

样品中含有仲氨或叔氨基时可优先考虑使用正离子模式，如果样品中含有较多的强负电性基团，如含氯、含澳和多个径基时可尝试使用负离子模式。

有些酸碱性并不明确的化合物则要进行预试方可决定, 此时也可优先选用APCK + ）进行测定。

・三、潦动相和流■的选择ESI和APCI分折常用的流动相为甲醇、乙騰、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液，如甲酸鞍、乙酸镀等°HPLC分析中常用的磷酸缓冲液以及一些离子对试剂如三氟乙酸等要尽量避免使用，不得已时也要尽量使用低浓度。

流量的大小对LC-MS成功的联机分析十分重要。

要从所用柱子的内径、柱分离效果、流动相的组成等不同角度加以通盘考虑。

即使是有气体辅助设置的ESI和APCI接口也仍是在校小的流量下可获得较髙的离子化效率，所以在条件允许的情况下最好采用内径小的柱子。

lcms图谱积分流程

lcms图谱积分流程English Reply:LCMS Chromatogram Integration Workflow.In liquid chromatography-mass spectrometry (LCMS), chromatogram integration involves the process of determining the area under the curve (AUC) of chromatographic peaks to quantify the abundance of analytes in a sample. Here's a detailed workflow for LCMS chromatogram integration:1. Data Acquisition: The first step involves acquiring LCMS data, which typically includes a mass spectrum (m/z values and intensities) and a chromatogram (retention time and intensity).2. Peak Detection: The next step is to detect peaks in the chromatogram. Various algorithms can be used for peak detection, such as local maxima, slope thresholding, ormatched filtering.3. Peak Integration: Once the peaks are detected, the next step is to integrate them to calculate the AUC. Common integration methods include the trapezoidal rule, triangle method, and baseline subtraction.4. Baseline Correction: Baseline correction is often performed to remove any background noise or drift from the chromatogram before peak integration. This can be done using algorithms such as polynomial regression or moving averages.5. Calibration: If quantification is desired, calibration standards need to be run to correlate the peak area with the analyte concentration. A calibration curve is then generated by plotting the peak areas of known concentrations against their respective concentrations.6. Integration Review: After integration, it'sessential to review the results to ensure accuracy. This involves visually inspecting the chromatogram and adjustingintegration parameters as necessary.7. Reporting: The final step is to report the integrated peak areas or analyte concentrations. The results can be used for various purposes, such as qualitative identification, quantitative analysis, or method development.Chinese Reply:LCMS 色谱图积分流程。

液相色谱-质谱联用(lcms)的原理及应用

width: 740px"><div align=center><font color=#ff0000 size=3><strong> 液相色谱-质谱联用(lc/ms)的原理及应用</strong></div><div align=center> </div><div align=left><br><strong>液相色谱—质谱联用的原理及应用</strong> <br>简介<br>1977年，LC/MS开始投放市场</font></div><p><font color=#ff0000 size=3>1978年，LC/MS首次用于生物样品分析</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1989年，LC/MS/MS取得成功</font></p> <p><font color=#ff0000 size=3>1991年，API LC/MS用于药物开发</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1997年，LC/MS/MS用于药物动力学高通量筛选</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>2002年美国质谱协会统计的药物色谱分析各种不同方法所占的比例。

1990年，HPLC高达85%，而2000年下降到15%，相反，LC/MS所占的份额从3%提高到大约80%。

LCMS知识介绍

1、如何看质谱图(1)确定分子离子，即确定分子量：氮规那么：含偶数个氮原子的分子，其质量数是偶数，含奇数个氮原子的分子，其质量数是奇数。

与高质量碎片离子有合理的质量差，凡质量差在3~8 和 10~13， 21~25 之间均不能能，那么说明是碎片或杂质。

(2) 确定元素组成，即确定分子式或碎片化学式：高分辨质谱能够由分子量直接计算出化合物的元素组成从而推出分子式，低分辨质谱利用元素的同位素丰度。

M-1，M-15，M-18，M-20，M-31......意味着失H，CH3，H2O，HF，OCH3......(3)峰强度与结构的关系，丰度大反响离子结构牢固：在元素周期表中自上而下，从右至左，杂原子外层未成键的电子越易被电离，容纳正电荷能力越强，含支链的地方易断。

2、离子源EI(Electron Impact Ionization):电子轰击电离—硬电离。

CI(Chemical Ionization):化学电离—核心是质子转移。

FD(Field Desorption):场解吸—目前根本被FAB取代。

FAB(Fast Atom Bombardment):快原子轰击—也许铯离子(LSIMS, 液体二次离子质谱 ) 。

ESI(Electrospray Ionization):电喷雾电离是最软的电离方式，采用离子蒸发，平时小分子获得 [M+H]+]+,[M+Na]+或 [M-H]- 单电荷离子；化合物无需拥有挥发性，离子在溶液中已生成；样品流速／ min；适合极性分子的解析，能解析小分子及大分子( 如蛋白质分子多肽等 ) ，生物大分子产生多电荷离子，平时只产生分子离子峰，因此可直接测定混杂物，并可测定热不牢固的极性化合物；经过调治离子源电压控制离子的碎裂〔源内CID〕测定化合物结构。

APCI(Atmospheric Pressure Chemical Ionization):大气压化学电离也是软电离技术，高压放电发生了质子转移而生成[M＋ H]+或 [M-H]- 离子；化合物要拥有挥发性且热牢固，离子在气态条件中生成；样品流速／ min；只产生单电荷峰，适合测定质量数小于2000Da的弱极性的小分子化合物；适应高流量的梯度洗脱/ 上下水溶液变化的流动相；经过调治离子源电压控制离子的碎裂。

LC-MS基本知识

LC-MS基本知识离子化方法选择：根据样品性质确定离子化方式适合ESI(IS)的样品类型：–高极性化合物、蛋白质、肽类、低聚核苷酸等生物分子；–胺类、季铵盐等；–含杂原子化合物如氨基甲酸酯等适合APCI的样品类型：–弱极性/中等极性的小分子，如脂肪酸，邻苯二甲酸等–含杂原子化合物如氨基甲酸酯、脲等ESI不适合的化合物：极端非极性化合物如苯等；APCI不适合的化合物：非挥发性样品；热稳定性差的样品离子化方法选择● 碱性化合物宜用正离子方式● 酸性化合物宜用负离子方式● 如未知,可能正负都要做● 有些化合物正、负模式都出峰，选择灵敏度高的方式，不明确的优先试用正离子方式根据化合物类型选择流动相组成，甲醇-水，乙腈-水或甲醇-乙腈-水一般正离子方式用甲醇，负离子方式用乙腈好些● 流动相中加入甲酸、乙酸铵等可提高正离子化效率● 是否加酸不是绝对的，具体应根据LC的分离情况、样品在酸性条件下的稳定性等决定当本底增大，LC压力增高，应更换水相。

溶解样品的溶剂：用流动相或甲醇、乙腈溶比用含水多的溶剂LC 峰系形好。

如果常用的流动相不能很好溶解样品，可用少量特殊溶剂先将样品溶解后再用流动相稀释。

APPI，适合非极性化合物，同GC/MS有重复，但一般小型台式GC/MS，分子量范围小，APPI比GC/MS可测更高的分子量。

特征离子的质量色谱在复杂混合物分析及痕量分析时是LC／MS 测定中最有用的谱图，当样品浓度很低时LCMS的TIC上往往看不到峰，此时，根据上一步得到的分子量信息，输入M+1或M+23等数值,观察提取离子的质量色谱图，检验直接进样得到的信息是否在LC-MS上都能反映出来，确定LC条件是否合适，以后进行MRM 等其他扫描方式的测定时参考。

质谱分离过程：进样，离子化，离子分离，离子检测，质谱图高效液相色谱(HPLC)是分离化合物范围最广，准确度高，对化合物破坏性小的快速分离方法，特别适用于有机生物分子的分离。

液质联用(LCMS)原理简析

液质联用（LCMS）原理简析1.质谱法质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。

质谱的样品一般要汽化，再离子化。

不纯的样品要用色谱和质谱联用仪，是通过色谱进样。

即色谱分离，质谱是色谱的检测器。

离子在电场和磁场的综合作用下，按照其质量数m和电荷数Z的比值(m/z，质荷比)大小依次排列成谱被记录下来，以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。

2.质谱仪质谱仪由以下几部分组成数据及供电系统┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓进样系统离子源质量分析器检测接收器┗━━━━━╋━━━━━━┛真空系统质谱仪一般由进样系统、离子源、分析器、检测器组成。

还包括真空系统、电气系统和数据处理系统等辅助设备。

（1）离子源：使样品产生离子的装置叫离子源。

液质的离子源有ESI，APCI，APPI，统称大气压电离(API)源，实验室常用液质的离子源为ESI源。

电喷雾（ESI）的特点通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子。

电喷雾电离是最软的电离技术，通常只产生分子离子峰，因此可直接测定混合物，并可测定热不稳定的极性化合物；其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子；通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID）得到化合物的部分结构。

（2）质量分析器：由它将离子源产生的离子按m/z分开。

离子通过分析器后,按不同质荷比(M/Z)分开,将相同的M/Z离子聚焦在一起,组成质谱。

质量分析器有：磁场和电场、四极杆、离子阱、飞行时间质谱、傅立叶变换离子回旋共振等。

实验室目前液质的质量分析器类型：三重四极杆（QqQ）：离子源→第一分析器→碰撞室→第二分析器→接收器MS1 MS2Q1 q2 Q3QqQ仪器可以方便的改变离子的动能，因此扫描速度快，体积小，常作为台式进入常规实验室，缺点是质量范围及分辨率有限，不能进行高分辨测定，只能做到单位质量分辨。

LC-MS解析基础以及常见问题剖析

LC-MS解析基础以及常见问题剖析LCMS是有机合成中重要的分析工具，解析LCMS谱图也是一项基本技能。

LCMS基本原理和特性1）LCMS的特性：是HPLC和MS的结合，有两者的功能，有没有两者精确。

2）流动相方法：常见0-30，0-60，10-80，30-90四种方法，0，10，30都是指乙腈的含量，乙腈含量越大，流动相极性越小，出峰越靠前。

3）正离子源适用于碱性化合物：含氮化合物更容易粘附氢正离子，在正离子源中容易出分子离子峰。

负离子源适合酸性化合物：酸性化合物更容易轰击掉氢正离子，如酸，酚类化合物。

看LCMS步骤1）先看MS部分，看有没有所要离子峰，并且要看清楚该化合物是否有MS信号，是否掩盖周围的峰。

2）再看HPLC部分，看含量有多少，并且要看清楚该化合物是否有强的HPLC信号，是否掩盖周围的峰。

3）两者结合起来看，推测反应进行的程度和反应产生的杂质。

常见加合离子峰1）正离子模式：[M+Na]+ = [M+23]+加钠离子；[M+K]+ = [M+39]+加钾离子；[M+NH4]+ = [M+18]+加铵离子；[M+H+H2O]+ = [M+19]+加水；[M+X]+这里X是指溶剂缓冲液中的阳离子；如加硝酸根：[M+NO2]+ = [M+46]+[M+H+Solvent]+溶剂加合峰，如[M+H+CH3CN]+= [M+42]+是CH3CN加合离子，[M+H+CH3OH]+ = [M+33]+是CH3OH加合离子；2）负离子模式[M-H]- = [M-1]-减氢负离子[M+35Cl]- = [M+35]-加氯负离子[M+37Cl]- = [M+37]-加氯同位素负离子[M+HCOO]- = [M+45]-加甲酸根负离子[M+CH3COO]- = [M+59]-加乙酸根负离子[M+CF3COO]- = [M+113]-加三氟乙酸根负离子减峰M-56(脱叔丁基）和M-100（脱Boc），M-16（脱NH3)和M-17（脱水）以及M+2/2（比较常见），其他少见。

《lcms质谱》ppt课件

Historical Perspective
Atmospheric Pressure Interfaces (API) – Early 1990’s (commercialization) – Now most common interface – Electrospray (ESI) Initial interfaces required lower flows (1-5
Uses a “reagent gas〞 – Mobile phase buffer – Added buffer solution – Similar spectra to GC/MS CI Reagent gas is ionized – Volatilization – EI with high energy electrons Charge transfer to the analyte(s)
Moving Belt Interface
From: Niessen
(4) Particle Beam Interface 〔PB，粒子束接口〕
Column effluent is nebulized – Pneumatic or thermospray nebulization Desolvation chamber is under a moderate vacuum A momentum separator is used for analyte enrichment – High MW compounds favored Analytes into the EI or CI source as small particles – Evaporative collisions with the walls
on the ionization – Limited availability of LC/MS

LCMS谱图判断及分析方法选择

LCMS谱图的判断及解析方法确实定一、LCMS谱图的相关标准及 M S棒图判断：a) LCMS合格谱图的标准：1、UV谱图主峰的保存时间应大于 2T0( 进样峰时间) ，并小于全部运行时间的 4/5；2、UV谱图的吸取波长以客户指定波长为准〔一般为 220nm〕，弱紫外样品〔紫外吸收在 220nm是波谷，MS信号相对较强〕可用 ELSD谱图交货或以客户要求为准；3、UV谱图主峰吸取一般应高于 100ma。

u 对信噪比优异的样品，能够适合降低峰高要求到高于 50mau，当全部可见的 UV峰都积分后仍合格的，能够为合格；4、UV谱图中，主峰理论塔板数在 10000以上〔即峰宽小于 0.5 分钟〕，峰对称因子应在 0.9-1.2 〔即对称性较好〕。

5、MS谱图应保证准分子离子峰可见，其他峰是二聚峰，以及合理的碎片或加合峰。

6、MS范围：平时在 100-1000 之间，对分子量很小或很大的样品，应调整 MS范围，保证最大值高出 2M+2，3 最小值小于 M/2。

7、紫外积分高出 2 %的杂质，若是杂质的 MS和主峰一致，需检查结构可否有异构体。

如客户确认有异构体并赞成能够合并纯度交货，方能判断合格，否那么应重新分别或用其他手段如 NMR确定结构。

8、紫外无积分或积分结果小于 1 %的色谱峰，在 TIC 中峰高不得高出主峰的 1/2。

〔特别情况除外：难电离样品；Agilent LCMSTIC 中杂质绝对吸取小于 50000〕b) M S棒图的判断〔正离子检测〕：1、MS谱图中分子离子峰的值应为：EM+〔1 Exact Mass〕( 即[M+H] +)2、常有的合理的加合离子有：[M+Na] +、[M+K]+、[2M+H]+、[2M+Na]+、[M/2+H]+3、加有缓冲溶液或溶剂的系统还可引进[M+X] +〔X=溶剂或缓冲溶液中的阳离子〕如：用碱性系统方法解析常常有的加合离子有： [M+NH4] +〔我们的碱性系统用的铵盐缓冲溶液〕〔用岛津仪器解析常常可见到的加合离子还有：[M+Na+X] +〕4、假设有小于分子离子峰的碎片离子，要依照化合物结构来判断是否是其合理的碎片，碎片 M1 所出碎片峰的 M S值应为 M1 或 M1+2〔出 M1 还是 M1+2 由断裂机理决定〕5、同位素效应：一般带 Cl 或 Br 的样品，棒图中同位素效应比较明显〔见附图〕；6、假设棒图中有不能够讲解的碎片或加合离子、且丰度较高，那么需要进行 NMR考据c) M S棒图的判断〔负离子检测〕：1、MS谱图中分子离子峰的值应为：EM-1〔Exact Mass〕( 即[M-H] -)2、加有缓冲溶液或溶剂的系统还可引进[M+X] - 〔X=溶剂或缓冲溶液中的阴离子〕3、其他常有合理加合离子及碎片离子同理正离子检测二、LCMS解析方法的分类及其适用范围〔反相色谱〕：a) 从流动相系统划分，可分为：酸性方法和碱性方法〔方法确定的原理：先依照化合物的结构算出其 ClogP 的值来大体确定其适用的分析方法，假设计算出的方法不适合，再依照其谱图的详尽情况进行更正。

LCMS 参考指南

LCMS 参考指南LC/MS分析中使用的缓冲液•磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管等•缓冲盐会导致离子抑制，因此要控制缓冲液的强度，<10mM•钠盐和钾盐会产生钠/钾加合物，这些加合物比较难打碎•去污剂、表面活性剂会有离子抑制现象发生，表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据HPLC离子对试剂•不要使用不挥发试剂•长链试剂将影响质谱图质量•离子对试剂会竞争离子蒸发•TFA（三氟乙酸）/HFBA（七氟丁酸酐）强电子对会抑制电离•建议: 不要使用离子对维护/常见问题解决每天或每周•清洁离子化室•清洗自动进样器•Prime LC泵•检查LC溶剂是否有脏东西或细菌滋生•用水和甲醇冲洗毛细管2-3次•检测自动进样器的洗瓶中的溶剂量•检查机械泵的油量每月•更换LC溶剂•检查LC流速•卸真空清洗API接口•检查API喷雾针是否堵塞每3个月•更换机械泵泵油•系统Autotune•运行electronic diagnostics•更换氮气发生器过滤器每年•更换API喷雾针•更换毛细管•测试系统的灵敏度方法开发步骤 1文献查询-文献检索/获取其他信息-尽量获得目标分析物的纯标样-参考以前使用的方法步骤2优化MS条件-注射泵直接进样，优化目标化合物的响应，确定MS的最佳条件-注射注射进样，优化目标化合物的响应，确定最佳的离子化条件-评估各个目标化合物的离子碎片步骤 3基质干扰-确定可能的基质干扰-开发样品制备、分离方法以减少基质干扰Step 4优化色谱条件液体样品准备•加入内标物•去除颗粒物o过滤o离心o SECo透析o沉淀•浓缩样品o液液萃取o固相萃取o蒸发o冻干o超临界流体萃取•分离目标分析物o液液萃取o固相萃取o超临界流体萃取•分析样品确定未知化合物的 MW酸-碱方法:•大多数可用于 APCI和ESI分析的离子为可质子化或去质子化的分子•酸性条件下，化合物比较容易质子化，形成 (M+H)+•碱性条件下，化合物比较容易去质子化，形成(M-H)-• (M+H)+或 (M-H)-通过丢失合理的中性基团，其质谱可产生重要的离子。

LCMS定性定量方法与技术

高分辨质谱法也提高了目标化合物筛选和定量测定的选择性。
同位素丰度
• 绝大多数元素在自然界以同位素混合物存在，如天然的碳是98.90%的12C和1.10%的13C的混合物。
• 由于元素的同位素的存在，所以质谱峰呈现为同位素峰簇，是各种元素及其同位素组成的表现，他们提供了另一重要性息。
• 在质量测定的准确度有限时，根据同位素丰度数据有可量能均限为1定4元0 u素，组而成其。在例m如/z1，41C处10H的20同和位C8H素12峰O2相的对名于义质 m/z140峰的强度分别为11%和8.8%，这是由13C存在的机率所确定的，因而可区分这两个离子。应该注意低丰度同位素峰的测定误差较大，还可能有其他成分的离子与之重叠，所以实际应用有一定限制。
a “Atomic Weights of the Elements 1987,” Pure Appl. Chem. 1988，60：841 括号内的数值为测不准水平，主要是同位素丰度的自然变化。例如，氢原子量为1.00794±0.00007
同位素 1H 2H 12C 13C 14N 15N 16O 17O 18O 19F 23Na 28Si 29Si 30Si 31P 32S 33S 34S 36S 35Cl 37Cl 39K 40K 41K 79Br 81Br 127I
分子量信息
天然丰度（%）b 99.985 0.015 98.9 1.1 99.63 0.37 99.76 0.04 0.2 100 100 92.23 4.67 3.1 100 95.02 0.75 4.21 0.02 75.77 24.23 93.2581 0.012 6.7302 50.69 49.31 100
122
100
N
NH N

《LCMS定量分析》课件

面临的挑战与解决方案
基质效应
基质对LCMS分析的影响是一个重要挑战。通过开发新型的基质匹配标准品、优化样品处理和稀释方法等手段，可以降低基质效应的影响。
复杂样品分析
对于生物体、环境等复杂样品中的化合物分析，LCMS需要面临样品前处理、背景干扰和低丰度化合物检测等挑战。通过优化样品前处理方法、采用内标校正和背景消除技术等手段，可以提升复杂样品中化合物的定量准确性。
《LCMS定量分析》PPT课件
contents
目录
• LCMS定量分析概述 • LCMS定量分析的原理 • LCMS定量分析的实验技术 • LCMS定量分析的实例 • LCMS定量分析的展望与挑战
01 LCMS定量分析概述
定义与特点
定义
LCMS定量分析是一种基于液相色谱 -质谱联用技术的方法，用于对样品中的化合物进行定性和定量分析。
高效分离技术
随着色谱技术的不断发展，LCMS 将进一步提高分离效率和分辨率，为复杂样品分析提供更好的分离效果。
高灵敏度检测技术
随着检测器技术的进步，LCMS的检测灵敏度将得到进一步提升，能够检测更低浓度的化合物，满足更严格的分析要求。
多维度联用技术
未来LCMS将与多种检测技术联用，如CE、GC、NMR等，实现多维度的分离和检测，提供更全面的化合物信息。
应用拓展
将LCMS定量分析技术拓展到更多领域，如药物代谢、环境监测、食品安全等，为各领域提供可靠的化合物定量分析方法。
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感谢您的观看
液相色谱与质谱通过接口技术联接，实现样品的分离与检测的连续进行。
质谱原理
通过电离源将样品分子转化为带电离子，然后在电场和磁场的作用下，使离子发生空间和能量聚焦，从而实现样品的分离和检测。

LC-MS定性分析思路与方法

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确定离子化方式
● 根据样品性质确定离子化方式: 高极性化合物,大分子,蛋白质、肽类、低聚核苷酸等生物分子；胺类、季铵盐等；含杂原子化合物如氨基甲酸酯等,适合ESI(IS)。弱极性/中等极性的小分子，如脂肪酸，邻苯二甲酸等；含杂原子化合物如氨基甲酸酯、脲等，适合APCI（HN）。ESI不行的：极端非极性化合物如苯等;APCI不行的：非挥发性样品;热稳定性差的样品
● 杂质的影响：溶剂的纯度、水的纯净程度等。当成分复杂，杂质太多时，竞争使被测物离子化不好，同时使LC分离不好
● 样品浓度不够：有时需要浓缩
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LC条件的优化
● LC梯度的设定,目的是快速分离,峰形好,缩短时间,提高效率,可以将所有化合物都冲出，防止影响下一个样品的测定。
采取梯度洗脱，如分析多肽类化合物一般采取梯度洗脱，此时的信号会比等梯度洗脱时强很多，而且可以加大进样量，是提高灵敏度的一种有效措施，但是分析时间较长，且需要有色谱柱平衡的时间。
● 注意要采集一段时间的溶解样品的溶剂本底信息，DP同采样相同，以便扣除本底干扰，可高、低各做一次，例如20V、 80V等，所以低流速FIA方式最适合
● 注意，当样品溶液内含有离子抑制物质时，直接进样可能看不到分子峰，此时需要经色谱柱分离或重新处理样品。

lcms质谱样品处理方法

lcms质谱样品处理方法
LCMS（Liquid chromatography-mass spectrometry）质谱是一种常用于分析化合物结构和组成的技术。

LCMS样品处理方法可以根据分析目标和样品性质来确定，以下是常见的LCMS样
品处理方法：
1. 预处理：样品在进行LCMS分析之前，通常需要进行一系
列的预处理步骤，例如样品的提取、浓缩、纯化等。

这些步骤可以通过各种萃取方法、溶剂挥发、固相萃取等技术实现。

2. 样品稀释：对于高浓度样品，需要进行适当的稀释，以保证样品浓度在分析范围内。

3. 样品净化：对于复杂样品矩阵，如血清、尿液等，可能存在干扰物质，可以使用固相萃取或液液萃取等方法进行样品净化，以去除干扰物质。

4. 补充离子：对于某些化合物，可能需要在LCMS分析中加
入离子对其进行增强或稳定化。

例如，对于碱金属盐或酸性化合物，可以加入氨水或甲酸来增强它们的离子化。

5. 补充内标：对于定量分析，通常会在样品中添加已知浓度的内标物质，以校正分析过程中的漂移和变异。

总的来说，LCMS样品处理方法旨在提高样品的分析灵敏度、准确性和可靠性，同时降低测量误差和干扰物质的影响。

具体的处理方法需要根据分析目标和样品性质选择合适的方法。

LCMS仪器方法优化流程及注意事项

LCMS仪器方法优化流程及注意事项LCMS（Liquid Chromatography Mass Spectrometry，液相色谱质谱联用）是一种常见的分析仪器，其原理是将样品通过液相色谱柱进行分离，再通过质谱仪进行检测。

在进行LCMS分析时，方法优化流程和注意事项对于数据质量和分析结果的准确性起着至关重要的作用。

方法优化流程：1.了解样品特性：在开始优化LCMS方法之前，需要充分了解样品的特性，包括化学性质、溶解度、稳定性等。

这些信息有助于选择适当的色谱柱、流动相和灵敏度等优化参数，以达到最佳的分离和检测效果。

2.选择色谱柱和流动相：选择合适的色谱柱和流动相对于优化LCMS方法至关重要。

必须根据样品的性质选择合适的色谱柱相，例如正相、反相或离子交换柱。

流动相的选择也必须适应样品的特性，以实现有效的分离和质谱信号。

3.优化分离条件：根据样品的复杂性和分离要求，进一步优化分离条件。

这可能包括优化柱温、柱流速、梯度条件等。

通过调整这些参数，可以改善分离度和分析时间，提高分析效率。

4.优化质谱仪参数：在进行LCMS分析时，质谱仪的参数设置对于获得高质量的数据至关重要。

这包括离子源温度、母离子筛选、碎片离子筛选等参数。

可以通过调整这些参数来增强信号强度、降低噪声水平、提高质谱分辨率。

5.确定检测方法：根据分析目的，选择适当的检测方法。

这可能包括选择合适的离子模式（正离子模式或负离子模式）和检测范围。

确保检测方法能够覆盖所有目标分析物，并且不会受到干扰物的影响。

注意事项：1.样品准备：样品准备是LCMS分析的关键步骤。

必须确保样品的稳定性、一致性和适当的浓度。

同时，还需要注意选择合适的提取方法和样品溶剂，以最大程度地提高样品的回收率和准确性。

2.对比实验：在进行方法优化之前，应该进行对比实验。

通过对比不同条件下的数据，评估分析结果和方法的可靠性。

只有通过对比实验的结果，才能找到最佳的分离和检测条件。

3.质量控制：在进行LCMS分析时，应在每个样品中添加质量标准品进行质量控制。

皮质醇lcms的检测标准

皮质醇lcms的检测标准皮质醇（Cortisol）是一种重要的激素，对于维持机体稳态和应对压力具有重要意义。

LC-MS（液相色谱-质谱法）是检测皮质醇的常用方法，具有高灵敏度、高准确性和高分辨率等特点。

关于皮质醇LC-MS的检测标准，以下几点值得关注：1. 样本处理：皮质醇LC-MS检测的样本通常为生物体液（如血清、尿液等）。

在检测前，需要对样本进行适当的处理，如离心、过滤、萃取等，以去除杂质和干扰物质。

2. 色谱条件：为了获得较好的分离效果和检测灵敏度，需要优化液相色谱条件，如色谱柱、流动相、梯度洗脱等。

不同类型的色谱柱和流动相组合可能对皮质醇的检测效果产生较大影响。

3. 质谱条件：质谱条件的优化对于皮质醇的检测灵敏度和准确性至关重要。

常用的质谱检测方式有负离子电喷雾质谱（ESI-MS）和多反应监测（MRM）等。

优化质谱条件包括选择合适的离子源、气体流量、碰撞能量等。

4. 标准品：选择合适的标准品对于建立和验证LC-MS检测方法至关重要。

皮质醇的标准品可以是纯品或已知含量的商业制品。

在使用标准品时，应注意其保质期、储存条件等因素。

5. 方法验证：为确保LC-MS检测方法的准确性和可靠性，需要进行方法验证。

方法验证通常包括线性范围、检测限、精密度、回收率等指标的评估。

6. 数据处理和分析：LC-MS检测产生的数据需要进行处理和分析，以获得准确的皮质醇浓度。

常用的数据处理方法包括基线校正、峰识别、定量分析等。

在我国，皮质醇LC-MS的检测标准主要参照GB（国家标准）和WS（卫生行业标准）等体系。

此外，还可以参考国际标准，如世界卫生组织（WHO）和美国临床实验室标准化协会（CLSI）等制定的相关标准。

在实际检测过程中，应根据具体应用场景和需求，参照相关标准进行方法建立和优化。

同时，关注制造商的技术支持和质量控制，确保皮质醇LC-MS检测的准确性和可靠性。

工艺杂质研究之lcms解析技巧

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