梅毒的实验室检测与技术规范
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生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性。
梅毒假阳性反应的处理
技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的 假阳性反应，经过重复试验即可除外。
对生物学假阳性反应，应做TPHA（TPPA） 等试验进行排除。
前带现象
指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度 的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临 床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现 了阳性的结果，该现象称为前带现象。
3. 定量试验
稀释夜准备：在圈内加入50uL生理盐水 （根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐
水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断 RPR
TRUST
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并转阴性，故可作为疗
试验特点
原理和成分与试验相同
血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒携带方便 操作简单 价格便宜
操作要点
1. 仪器：水平旋转仪。 2. 定性实验
加样：吸取50ul血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内 加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，立即在亮光下观察结果
应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至 转为阴性。
临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
所有非梅毒螺旋体抗原血清试验的抗原基本成分都是一样 方法包括：
（1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
– 由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质 量差或过期、或实验室操作错误所造成。
②生物学假阳性
– 是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒 血清试验出现阳性
某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风 湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发 展过程中释放心磷脂到血液中呈假阳性。老年人。
处理：将血清稀释后再进行试验。
耐血清性（血清固定）
指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时 期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治 疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。
梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗 粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可 见的凝集反应，具有较高的敏感性和特异性。
TPPA是目前WHO认可的梅毒抗原血清学试验的 “金标准”，常用于新方法、新试剂评价的参照 标准。
TPPA(TPHA)试验原理示意图
梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义
一般情况下，一旦梅毒患者梅毒螺旋体抗原血清试验呈阳 性，即使经过正规有效治疗治，仍将终身阳性。所以 TPPA等试验不能作为疗效观察的指标。
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本的确证试验 。
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅 毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
TPPA结果解释示意图
为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
原理
人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一 种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体 在3周-4周产生类脂质抗体（反应素）。主要是IgM和IgG 混合抗体。
抗体的作用 无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反
梅毒的实验室检查与技术规范Fra Baidu bibliotek
• 朱穗兰
• 2013年3月2日
主要内容
梅毒概述 梅毒血清学检测方法 梅毒检测技术规范
梅毒概述（一）
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后2年，通过性接触一般无传染性 母 婴 传 播
在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 ,病期越长，传染性越小;
梅毒概述（二）
一期梅毒 硬下疳和(或)腹股沟淋巴结肿大
二期梅毒
可有一期梅毒史，病期在2年以内有多形性皮疹、扁平湿疣等 三期（晚期）梅毒
可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上 皮肤黏膜损害等，包括神经梅毒、心血管梅毒 隐性（潜伏）梅毒 早期：病期在2年以内；晚期：病期在2年以上。无任何梅毒性的症状和体征 胎传（先天）梅毒 早期：在2岁前发生；晚期：在2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现
效观察、判愈、复发或再感染的指征。 • 为什么要做定量检测？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年
后约50%病人血清反应仍为阳性。
TRUST结果解释示意图
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
梅毒概述（三）
疑似病例、确证病例诊断依据： 病史 症状 实验室检查
梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义
梅毒实验室检测技术
• 病原学检测 • 血清学检测
梅毒血清学检测方法
梅毒血清学检测分类
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
梅毒血清学试验结果解释
梅毒检测技术规范简介
全国梅毒检测技术规范
第一章 梅毒检测样品的采集和处理 第二章 梅毒血清学检测 第三章 梅毒病原体显微镜检测 第四章 梅毒病原体核酸检测 第五章 实验室生物安全 第六章 梅毒检测实验室质量管理
梅毒假阳性反应的处理
技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的 假阳性反应，经过重复试验即可除外。
对生物学假阳性反应，应做TPHA（TPPA） 等试验进行排除。
前带现象
指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度 的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临 床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现 了阳性的结果，该现象称为前带现象。
3. 定量试验
稀释夜准备：在圈内加入50uL生理盐水 （根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。 加样：吸取50uL血清（浆）与各圈中盐
水作系列稀释，并涂布整个圈内。 下同定性试验。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果判断 RPR
TRUST
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并转阴性，故可作为疗
试验特点
原理和成分与试验相同
血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒携带方便 操作简单 价格便宜
操作要点
1. 仪器：水平旋转仪。 2. 定性实验
加样：吸取50ul血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内 加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原 反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，立即在亮光下观察结果
应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至 转为阴性。
临床上非梅毒螺旋体抗原血清学试验为什么有定性和定量两种检测法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
所有非梅毒螺旋体抗原血清试验的抗原基本成分都是一样 方法包括：
（1）快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) （2）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） （3）性病研究实验室试验 (VDRL)等。 基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物，凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见 上述方法的敏感性和特异性都基本相似
– 由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质 量差或过期、或实验室操作错误所造成。
②生物学假阳性
– 是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒 血清试验出现阳性
某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风 湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发 展过程中释放心磷脂到血液中呈假阳性。老年人。
处理：将血清稀释后再进行试验。
耐血清性（血清固定）
指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时 期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治 疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。
梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗 粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可 见的凝集反应，具有较高的敏感性和特异性。
TPPA是目前WHO认可的梅毒抗原血清学试验的 “金标准”，常用于新方法、新试剂评价的参照 标准。
TPPA(TPHA)试验原理示意图
梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义
一般情况下，一旦梅毒患者梅毒螺旋体抗原血清试验呈阳 性，即使经过正规有效治疗治，仍将终身阳性。所以 TPPA等试验不能作为疗效观察的指标。
作为非梅毒螺旋体抗原血清试验初筛阳性标本的确证试验 。
TPPA等阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅 毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。
TPPA结果解释示意图
为什么梅毒实验室诊断需要两类血清学检测方法？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验
原理
人体感染了梅毒螺旋体后，组织受到破坏，释放出来的一 种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体 在3周-4周产生类脂质抗体（反应素）。主要是IgM和IgG 混合抗体。
抗体的作用 无保护作用，治疗监测。未经治疗的病人，其血清内的反
梅毒的实验室检查与技术规范Fra Baidu bibliotek
• 朱穗兰
• 2013年3月2日
主要内容
梅毒概述 梅毒血清学检测方法 梅毒检测技术规范
梅毒概述（一）
性接触是主要的传染途径 未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性 随着病期的延长，传染性越来越小 到感染后2年，通过性接触一般无传染性 母 婴 传 播
在妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传染未经治疗者 ，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染给胎儿 ,病期越长，传染性越小;
梅毒概述（二）
一期梅毒 硬下疳和(或)腹股沟淋巴结肿大
二期梅毒
可有一期梅毒史，病期在2年以内有多形性皮疹、扁平湿疣等 三期（晚期）梅毒
可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上 皮肤黏膜损害等，包括神经梅毒、心血管梅毒 隐性（潜伏）梅毒 早期：病期在2年以内；晚期：病期在2年以上。无任何梅毒性的症状和体征 胎传（先天）梅毒 早期：在2岁前发生；晚期：在2岁以后发病。胎传隐性梅毒：无临床表现
效观察、判愈、复发或再感染的指征。 • 为什么要做定量检测？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年
后约50%病人血清反应仍为阳性。
TRUST结果解释示意图
假阳性问题
假阳性：非梅毒患者的血清反应呈阳性 ①技术性假阳性
梅毒概述（三）
疑似病例、确证病例诊断依据： 病史 症状 实验室检查
梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义
梅毒实验室检测技术
• 病原学检测 • 血清学检测
梅毒血清学检测方法
梅毒血清学检测分类
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
梅毒血清学试验结果解释
梅毒检测技术规范简介
全国梅毒检测技术规范
第一章 梅毒检测样品的采集和处理 第二章 梅毒血清学检测 第三章 梅毒病原体显微镜检测 第四章 梅毒病原体核酸检测 第五章 实验室生物安全 第六章 梅毒检测实验室质量管理