非特异性免疫实验
黑灵芝对小鼠非特异性免疫功能调节作用的实验研究
３结 果
灵芝属担子菌纲多孔菌科植物 ， 《 神农本 草经》就将其列 为上品 ， 并对其补益强壮作用进行 了论述 。《 本草纲 目》 对灵芝 的种类 、 产地、 药性 、 功用等进行了详细的记 载。将灵芝 分为青 芝、 赤芝 、 黄芝 、 白芝 、 黑芝 、 紫芝 等六种 ， 年来 ， 近 许多学者对 灵芝子实体 、 菌丝体 、 孢子粉和发酵液及不 同方法提取 的有效
２试 验 方 法
下注 射 环磷 酰胺 ４ｍ ／ ／，连 续 ３ 。末次 给 药 １ ， ０ ｇｇ ｋｄ ｄ ｈ后 按 ０１ Ｆ Ｏ 体 积于小 鼠尾静 脉注人 ５ ％中华 墨 汁生理盐 水溶 ．ｍ ｌｇ ０ 液， 在注入 墨汁后 ３ ｓ ６ ｎ从小 鼠眼 眶取血 ， ０ 及 ｍｉ 用微 量取样
公司产品）Ｊ１０Ｎ型电子天平 （ ； ２３ Ａ 上海精密仪器有限公司产 品） ；环磷 酰胺 （ 江苏 恒瑞 医药股 份有 限公 司生产 ，批号 ：
０ ０ ０ ２ ）氯化钠 （ ８ １５ １ ； 天津市 富宇精 细化工试 剂厂生产 ， 号 ： 批 ０ １０ ） 中华墨汁 （ ８２８ ； 北京一 得 阁墨业有 限公 司生 产 ）碳酸钠 ； （ 天津市福晨化学试剂厂 ， 批号 ：０ ０６ ７ 。 ２ １０ ２ ） 注 ：▲▲示与正常组相比Ｐ Ｏ １ ＜． ， Ｏ 示与模型组 比较 Ｐ Ｏ ５ ＜． ， ０ 料 示 与模型 组相 比 Ｐ Ｏ １ ＜． 。 ｏ ２１ ． 黑灵芝提取液对小 鼠免疫器官重量 的影响刚 ． ２黑灵 芝提取液对小 鼠单核一 巨噬细胞吞噬功能 的影响 取 Ｓ Ｆ级 Ｋ 小 鼠 ， Ｐ Ｍ 雌雄 各半 ， 体重 １— ２ ， ８ ２ ｇ 随机分为正 ３ 实验结果显示 ， 与正常对照组相 比， 模型对照组小 鼠的吞 常对照组 ， 模型对照组 ， 黑灵 芝低剂量 、 中剂量 、 高剂量组 ， 阳 ＰＯ５， ０ 性对照组 ， 胃给药 ， 灌 每天 １ 连续 １ ， 次， ０天 对照组给予等容积 噬指数 和吞噬系数显著低 于正常对照组 （ ＜ ． ）说明小 鼠免 疫抑制模 型成功建立 。与模型对照组相 比， 黑灵芝提取液高剂 蒸馏水。除正常对照组外 ， 其余各 组从 给药第 ５天开始同时皮 下注射环磷酰胺 ４ ｍｇ ｇ ， ０ ／ ／ 连续 ３ 。于末次给药后 １ ， ｋｄ ｄ ｈ 脱颈 量组可 显著 提高免 疫抑制 小 鼠的吞 噬指 数和吞 噬系数 （ ＜ 尸 ００ ，＜ ．１ ； ． Ｐ ００ ）绞股蓝总苷片可显著增加免疫抑制小 鼠的吞噬 ５ 椎处死小鼠， 取胸腺和脾脏精密称重 ， 计算脏器系数。 指数和吞噬系数（ ＜ ． ，＜ ． ） Ｐ ０ ５ Ｐ ０ 。提示黑灵芝提取液对免疫 ０ 叭 脏器系数＝ 抑制小 鼠巨噬细胞吞噬功能有增强 的作用 。 ２２黑灵芝提取液对小 鼠单核～ ． 巨噬细胞吞噬功能的影响Ｂ１ 表 ２ 黑灵芝提取 液对单核一 巨噬细胞 功能的影响（￣ ） ｘ ｓ 取 Ｓ Ｆ级 Ｋ Ｐ Ｍ小 鼠 ， 雌雄 各半 ， 体重 １ ～ ２ ， ８ ２ ｇ随机分 为正 常对 照组 ， 型对照组 ， 模 黑灵芝低 剂量 、 中剂量 、 剂量组 ， 高 阳 性对照组 ， 胃给药 ， 灌 每天 １ 连续 １ ， 次， Ｏ天 对照组给予等容积 蒸馏水 。除正常对照组外 ， 其余各组从给药第 ５天开始 同时皮
连翘苷对小鼠非特异性免疫及应激作用的实验研究
１０ ： ０ 注入墨汁 １ｒｉ ｇ ０ ｎ的吸光度值 ａ
＝３ Ｋ×体重 ÷（ 肝重 ＋脾 重） １３ ２ 对 Ｄ Ｃ （ ．． Ｎ Ｂ 对二硝基氯苯） 所致迟发 型皮肤过敏反应 的影响 【 ６ Ｊ ５ Ｎ Ｂ乙醇液 ２ ｌ ％Ｄ Ｃ ｍ 于小 鼠腹部皮肤致敏 ， 致敏前 ３ ｄ开始给药 ， ｌｄ 致敏 ７ 共 ｌ， ｄ后用 １ Ｎ Ｂ涂右耳 ２ ｈ处死小鼠 ， ％Ｄ Ｃ ４ 以 左 右两耳重量之差 为迟发 型超敏反应值 。
重， 注入后 １ ｉ ， Ｏ ｉ 从 小 鼠眶后静脉丛取血 ０ ０ ｍｌ ａ ｒ ｎ ｌｍｎ ．５ 立刻 吹入 ４ ． ％ＮａＣ ３ ｍｌ １ ０ ２ Ｏ 溶液中 ， 吸数次后测定 ６ ０ ｍ 处的吸光 吹 ８ｎ
度（ 以正常小 鼠血溶于 ４ ｌ ． ％ Ｎ ２ 溶液为对照 ） ｍ １ ０ ａ￣ （ 。按下式 计算廓清指数 Ｋ和校正廓清指数 ａ 。
取１ 月龄 的 ＩＲ小 鼠 １０只 ， Ｃ ２ 体重 ２ ±２ ， ０ ｇ 分为正常对照组 、 剂量组 、 小 中剂 量组 、 大剂量组 ， 每组 ３ ０只雌雄 各半 ， 按下表 剂量灌 胃， 给药 ７ ， ｄ后 分别从各组 中取出 １ ０只（ 雌雄各半 ）进行应激反应 实验 。继 续给药 ， ， 剩余小 鼠进行免疫 功能实验。
—Байду номын сангаас
《非特异性免疫特异性免疫》教学设计
《非特异性免疫特异性免疫》教学设计教学设计：非特异性免疫与特异性免疫（120分钟）一、教学目标：1.了解非特异性免疫和特异性免疫的基本概念；2.了解非特异性免疫和特异性免疫的机制和作用；3.掌握非特异性免疫和特异性免疫的相互关系；4.培养学生批判性思维和科学研究能力。
二、教学内容和方法：1.非特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.非特异性免疫的定义和分类；b.非特异性免疫的主要机制：天然免疫和炎症反应；c.天然免疫的特点和机制；d.炎症反应的特点和机制；e.在非特异性免疫中的重要细胞：巨噬细胞和树突状细胞；f.实验：巨噬细胞对细菌的吞噬实验。
2.特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.特异性免疫的定义和分类；b.特异性免疫的主要机制：细胞免疫和体液免疫；c.细胞免疫的特点和机制；d.体液免疫的特点和机制；e.在特异性免疫中的重要细胞：T细胞和B细胞。
3.非特异性免疫与特异性免疫的相互关系（40分钟）b.非特异性免疫与特异性免疫的协同作用；c.实验：非特异性免疫对特异性免疫的调节作用。
4.实验设计和结果分析（40分钟）a.实验目的和方法设计；b.实验结果分析和讨论；c.实验结论和意义；d.学生讨论和提问。
三、教学流程：1.引入（5分钟）教师简单介绍非特异性免疫和特异性免疫的基本概念，并引发学生对此话题的思考。
2.非特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.教师讲解非特异性免疫的定义和分类；b.教师详细讲解天然免疫和炎症反应的特点和机制；c.教师介绍巨噬细胞和树突状细胞在非特异性免疫中的作用；d.学生观察巨噬细胞对细菌的吞噬实验。
3.特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.教师讲解特异性免疫的定义和分类；b.教师详细讲解细胞免疫和体液免疫的特点和机制；c.教师介绍T细胞和B细胞在特异性免疫中的作用。
4.非特异性免疫与特异性免疫的相互关系（40分钟）b.教师介绍非特异性免疫与特异性免疫的协同作用；c.学生参与实验，探究非特异性免疫对特异性免疫的调节作用。
非特异性免疫应答
定义与特点
定义
非特异性免疫应答是机体在长期 进化过程中形成的天然防御功能 ，针对多种病原体的入侵具有普 适性。
特点
非特异性免疫应答具有快速、非 特异性的特点，能够在病原体入 侵初期迅速启动防御机制，防止 感染扩散。
非特异性免疫应答的重要性
01
02
03
防止感染扩散
非特异性免疫应答能够在 病原体入侵初期快速反应 ，有效遏制感染扩散，降 低疾病严重程度。
负向调节
负向调节机制能够抑制过度激活的非特异性免疫应答，防止对正 常组织造成损伤。
信号转导
炎症信号转导
炎症信号转导通路能够将病原体的刺激转化为细胞内的信号，触发 非特异性免疫应答的激活。
细胞因子信号转导
细胞因子信号转导通路能够调控固有免疫细胞的活化、增殖和分化 ，影响非特异性免疫应答的强度和方向。
自身免疫性疾病治疗
深入探讨非特异性免疫应答在自身免疫性疾病中的作用，为开发新型治疗方法和药物提供 理论支持。
THANKS
感谢观看
基因敲除与转基因技术
基因敲除
通过基因敲除技术，可以构建特定基因敲除的动物模型，用于研究特定基因在非 特异性免疫应答中的作用。基因敲除技术包括同源重组、胚胎干细胞技术等。
转基因技术
通过转基因技术，可以将特定基因转入动物体内，以研究其在非特异性免疫应答 中的功能。转基因技术包括显微注射、病毒载体转染等。
细胞培养与分离技术
细胞培养
通过将免疫细胞在体外培养，可以模拟体内环境，研究非特异性免疫细胞的生 长、分化、功能等。细胞培养技术可用于分离和鉴定不同类型的非特异性免疫 细胞，并研究其在不同刺激条件下的反应。
细胞分离
通过特定的分离技术，如密度梯度离心、流式细胞术等，可以从组织或血液中 分离出非特异性免疫细胞，如巨噬细胞、树突状细胞等，用于后续的实验研究 。
11-非特异免疫
免疫-11
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
免疫学实验研究阶段
免疫-11
（19世纪末—20世纪中）
实验室发明人工培育疫苗 Pasteur（法） 微生物学、免疫学创始人 1880年 鸡霍乱（巴氏杆菌）弱毒菌苗 1882年 狂犬病病毒弱毒疫苗
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
Louis Pasteur 巴 斯 德 (1822-1895年)是一位法国化学家、 微生物学家和免疫学家。1880年 他发现鸡霍乱杆菌的陈旧培养物 能预防鸡霍乱的感染，首先创造 了减毒疫苗。为了纪念一个世纪 前Jenner的功勋，他将这种方法 称之为预防接种（vaccination）， 并将这种制剂称之为疫苗 （ vaccine）, 相 继 他 又 创 造 了 炭 疽杆菌减毒疫苗，狂犬病的减毒 疫苗，兴起了主动免疫的方法 （ active immunization）。
免疫-11
第三篇 免疫学基础
非特异性免疫 特异性免疫 变态反应 免疫学的实际应用
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
免疫-11
免疫学发展简史
（一）免疫学的诞生
免疫学是在人类与传染病斗争的过程中 发展起来的。人们在长期实践中看到有很多 流行性疾病，如麻疹、天花等，患病康复后 很少第二次感染。
免疫学于18世纪末开始，至今经历了三 个发展阶段：
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
2 吞噬过程
免疫-11
当病原微生物或异物进入体内时，吞噬细胞受趋化
因子作用，向抗原处聚集，并通过吞噬或吞饮方式将 病原微生物或异物摄入细胞内（对细菌等较大异物， 直接伸出伪足将其吞入细胞内，形成吞噬体。对病毒
等较小的异物，则胞膜内陷，闭合形成吞饮小体）。 然后吞噬体或吞饮小体向胞浆内的溶酶体靠近，形成 吞噬溶酶体。溶酶体内的溶菌酶、过氧化氢酶等能直
韭子增强非特异性免疫和体液免疫作用的实验研究
的 免 疫 低 下 模 型 小 鼠， Ｐ Ｃ 数 较 正 常 组 显 著 减 少 其 Ｆ （ Ｐ＜ ０ ０ ）。韭 子 和 黄 芪 的 Ｐ Ｃ数 比 低 下 组 明 显 升 高 ．１ Ｆ
（ ＜ ０ ０ ）， 达 了 到 正 常 组 水 平 ， 者 无 显 著 差 异 Ｐ ．１ 已 两
火煎煮 ２ ， ｈ 去渣浓缩 为 ５ｍｉ ０ 备用 ， 体外实验时需将制剂经 浓
缩 灭 菌 处 理 。环 磷 酰 胺 （ Ｙ） 上 海 华 联 制 药 公 司 产 品 ； Ｃ 为 Ｐ ＭＩ １４ Ｒ 一 ０为 Ｇｉｃ ６ ｂ ｏ公 司 产 品 ； 代 乙醇 酸 钠 肉汤 为 Ｓｇ 硫 ｉｍａ 公 司产 品 。 置 显 微 镜 （ ｙ ｕ 倒 Ｏｌｍｐ ｓ日本 ） 二 氧化 碳 培 养 箱 （ ； 美 国Ｓ ｅａ ｈ ｌ ｂ公 司） 酶 标 仪 （ ＡＳ美 国 ）超 净 工 作 台 （ 州 净化 ｌ ； Ｄ ； 苏
摘 要 ：目的 ： 究 中 药韭 子 对 机 体 非 特 异 性 免 疫作 用 和 体 液 免 疫 作 用 的 影 响 。 法 ： 立 环磷 酰 胺所 致 免 疫低 下 动 物 模 研 方 建 型 ， 用 中性 红 法 检 测 小 鼠腹 腔 巨噬 细胞 的 吞 噬 功 能 。 而研 究 对 非 特 异 性 免 疫 功 能 的 影 响 ； 溶 血 空 斑 形 成 细 胞 测 定 法 研 采 从 用 究对 体 液 免 疫 功 能 的 影 响 。 结 果 ：韭子 可有 效 地 纠 正 免 疫 功 能 低 下 。 著提 高 巨噬 细 胞 的 吞 噬 功 能 以 厦 使 抗 体 生成 细 胞 数 增 显 多， 两者 恢 复至 正 常 水平 。 结论 ：韭 子 可 有效 地 恢 复 和 增 强免 疫 功 能低 下 小 鼠 的 非 特 异 性 免 疫 和 体 液 免 疫 功 能 。 使 关键词 ： 子 ； 疫功能低下 ； 韭 免 非特 异性 免 疫 ； 液 免 疫 体 中图 分 类 号 ： ９ ． 文 献 标 识 码 ： 文 章 编 号 ：ｏ ８ ０ ０ （０ ６ ０ — ０ Ｉ —０ Ｒ３ ２ １ Ａ １ｏ — １４ ２ ０ ） １ ０ ９ １ 韭子 为百 合科植物 韭（ ｌ ｍ ｔｂ ｒｓｍ Ｒｏｔ ｒ） Ａｌｕ ｕ ｅｏ ｕ ｔ ｅ 的种 ｉ ｌ 内充分混 匀 ， ７ 注入用两 张载 玻片制成 的小室 中， 取 Ｏ１ 熔化 子， 含有 生物 碱、 发油 、 甙、 挥 皂 硫化 物 、 白质 、 蛋 氨基 酸 、 油 石蜡将小室 封闭 ， 置于 ３ ７ Ｃ温箱培养 １ ， 显微镜 下观察并 ｈ在 脂、 维生索ｃ 等成分 ｍ。 国医学认为 ： 祖 韭子 味辛 、 性温 。 甘、 具 记数每个小 室的空斑数 。 汁算 出每百万 个脾 细胞内所古空斑
金灵口服液保肝作用及非特异性免疫功能的药效学实验研究
提 供 。西 洋 参 蜂 王 浆 ｌ ／ ． 国 医学 科 学 院 药 用 植 物 资 Ｏｍｌ支 中
源 开 发 研 究 所 实 验 药 厂 生 产 。联 苯 双 酯 滴 丸 ．． ／ ． １５ｍｇ 丸 北
表 ２ 金 灵 口服 液 对 小 鼠 网 状 内皮 系 统 吞 噬 功 能 的 影 响
腹 腔 注 射 １ Ｃ Ｉ花 生 油 ０ １ｍｌ１ Ｏ Ｃ ． ／ ０ｇ造 模 ． 继 续 给 药 ５ 并
Ｉ —
注 ： 生 理 盐 水 组 比较 ，）Ｐ＜ Ｏ Ｏ 与 １ ．１
ＯＤ，
廓 指 Ｋ 清 数－
一ｌ ｛ｇ ｏ
２ ２ ２ 金 灵 口服 液 对 环 磷 酰 胺 性 小 鼠外 周 白细 胞 减 少 和 脾 、 ．．
维普资讯
福 建 中 医 药 ２０ 年 １ ０２ ０月 第 ３ 卷 第 ５ ３ 期
Ｆ ｊ ｎ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｔ Ｍ ｃｏ ｅ ０ ２ ３ ５ ｕ ｉ ｏ ｒ ａ ｏ Ｃ ａ Ｏ ｔ ｂ ｒ ２ ０ ・３ （ ） ４ ３
・
实验 研 究 ・
金 灵 口服液 保 肝 作 用及 非 特异 性 免 疫 功能 的 药效 学 实 验 研 究
林 玉 贞 ， 符 火 吴
（ 建 中 医学 院 ． 建 福 州 ３０ ０ ） 福 福 ５ ０ ３ 金 灵 口服 液 由金 菇 、 菇 、 苓 、 瓜 、 杞 子 等 中药 经 提 香 茯 南 枸 取 加 工 ． 合 现 代 微 生 物 工 程 技 术 精 制 而 成 。临 床 对 急 、 性 结 慢 肝 炎 患 者 能 明 显 改 善症 状 ， 进 康 复 和 提 高 机 体抗 病 能 力 。 促 为 验 证 其 保 肝 作 用 和 非 特 异 性 免 疫 功 能 ． 们 进 行 了 动 物 药 效 我 学 实 验 研 究 。现 将 实验 结 果 报 道 如 下 。 １ 实 验 材 料
级 免疫学 实验 固有 细胞免疫
三、T淋巴细胞转化实验
• T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂 原刺激时，可发生转化。
–特异性抗原 –非特异性丝裂原：PHA、ConA等。
• 正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
大小：增大 –染色质：疏松 –核仁：清晰 –有丝分裂：+/-
[实验步骤] 4. 剪开皮肤，暴露腹腔，找到脾脏
[实验步骤]
5. 分离，摘除脾脏
[实验步骤 ]
6-1. 冲洗脾脏
[实验步骤]
6-2. 冲洗脾脏
[实验步骤 7-1. 用注射器芯研磨脾脏，获得细胞悬液
]
[实验步骤] 7-2. 用注射器芯研磨脾脏，获得细胞悬 液
[实验步骤 8. 低速离心（2000转/分钟，10min）
清水漱口 将唾液涂于空平板中 用吸管吸出，按下图滴入孔内
37℃过夜 明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
PBS
1
2
阴性对照
4
3
鸡蛋清 阳性对照
1，4加入唾液标本
二、E玫瑰花环形成实验
实验原理
• T细胞表面标志CD2，即绵羊红细胞受体 • 绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合 • 可用于T细胞的计数与分离
10-2 将沉淀细胞重悬于2ml培养液中，进行 细胞形态观察和计数。
级 免疫学 实验 固有 细 胞免疫
2020年4月30日星期四
一、非特异性免疫功能的测定 （一）、天然免疫的组成
• 屏障结构 （1）体表屏障:
物理屏障 化学屏障 生物学屏障 （2）体内屏障结构 全身淋巴结屏障 血-脑屏障 血-胎屏障
• 参与天然免疫的效应分子
–防御素 –补体系统 –细胞因子 –溶菌酶 –其他效应分子
人体的“非特异性”免疫和“特异性”的区别
人体的“非特异性”免疫和“特异性”免疫的区别免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应，有助于人体抵抗感染和预防疾病。
免疫力是人体自身的防御机制，它由免疫系统进行运作。
一、病原体特异性
非特异性免疫也被称为固有免疫，这种免疫在个体出生时就具备，可以遗传，因此也被称为天然免疫。
非特异性免疫的特点是可以识别一类病原体的共有组分，但无法精细区分不同的病原体，所以其作用范围广泛。
相比之下，特异性免疫则是由个体在生活过程中接触抗原物质后产生的，也被称为适应性免疫或后天免疫。
它主要包括由T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫。
特异性免疫会对抗原进行精细识别，仅针对特定的抗原发挥作用。
二、发挥效应的速度
非特异性免疫在接触病原体后能够立刻发挥作用，发挥效应快，是机体抵抗病原体的第一道防线。
而特异性免疫系统在接触病原体后，需经历淋巴细胞活化、增殖和分化产生效应分子，才能发挥免疫作用，所以发挥效应较迟。
三、有无免疫记忆
病原体的反复感染并不改变非特异性免疫应答的强度，因此非特异性免疫没有免疫应答和记忆。
当特异性免疫系统再次接触相同病原体时，能产生比初次更快速、更强烈的免疫应答，因此
特异性免疫具有记忆功能。
综上所述，非特异性免疫和特异性免疫的区别主要表现在对病原体的特异性、发挥效应的速度以及有无免疫记忆等方面。
在人体免疫系统中，非特异性免疫和特异性免疫共同作用，形成了人体对外部病原体的防御机制。
非特异性免疫应答详细讲解
非特异性免疫应答详细讲解非特异性免疫应答是机体在遭受外界致病因子侵袭时，通过非特异性免疫机制，以对抗和清除病原体，维持身体的健康和稳态。
非特异性免疫应答不需要提前获得特定的抗原识别能力，它是一种对抗不同致病因子的广谱防御机制。
本文将详细讲解非特异性免疫应答的主要特点和机制。
非特异性免疫应答的特点之一是广谱性。
非特异性免疫应答的机制涉及多种免疫细胞和效应分子，对抗各种病原体，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。
例如，中性粒细胞是非特异性免疫应答中的重要细胞，它能够通过吞噬病原体和释放抗菌物质来消除外来致病因子。
其他细胞如巨噬细胞、自然杀伤细胞等也能够发挥类似的作用。
非特异性免疫应答的机制还具有快速性和灵活性。
在感染开始后，非特异性免疫应答可以迅速启动，几乎立即开始对抗病原体。
免疫细胞根据感染的类型和程度，可以通过调节抗原呈递和清除技术选择对抗病原体的最佳策略。
此外，非特异性免疫应答还可以产生各种效应分子，如溶菌酶、抗菌肽和细胞因子等，这些分子对抗菌、抑制病原体生长以及招募和活化免疫细胞起着重要作用。
非特异性免疫应答的机制分为两个主要方面：自然免疫和炎症反应。
自然免疫主要由先天免疫细胞参与。
先天免疫细胞是机体一种免疫记忆力非常低的细胞，但是它们的数量庞大，可以迅速识别和消除病原体。
先天免疫细胞包括巨噬细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞等。
巨噬细胞是最重要的免疫细胞之一，它可以通过吞噬、分泌溶酶体和产生氧自由基等方式对抗病原体。
炎症反应是非特异性免疫应答的另一个重要方面。
当机体受到损伤或感染时，炎症反应被启动，以清除病原体并促进修复。
炎症反应包括血管扩张、血管通透性增加、白细胞渗出和局部温度升高等病理过程。
这些反应有助于将炎症细胞和炎症介质输送到感染或损伤部位，帮助清除病原体和废物，促进伤口愈合。
非特异性免疫应答还可以参与调节和激发特异性免疫应答。
特异性免疫应答需要几天或几周的时间才能达到最大效果，因为它需要细胞免疫和体液免疫共同作用。
非特异性反应
概念 (complement)
存在于正常人或动物血清及组织液中 一组与免疫相具有酶活性和自我调解作 用的球蛋白质。因它们能协助和补充特 异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用， 故称为补体。它是由30种成分组成的复 杂系统，部分成分遇热不稳定（56℃加 热30分钟即可灭活）。
三条激活途径的比较：(page 55)
整理ppt
11
豚鼠图
整理ppt
12
实验步骤
（如下图）加样
管号 2%SRBC
1
0.5
2
0.5
3
0.5
SRBC溶血素 0.5 0.5 -
补体 0.5
0.5
盐水 结果 0.5 1.0 1.0 -
37℃水浴15-30分钟,观察结果 1号管中SRBC溶解,液体由混浊变为澄清\透明 **实验结束后吸管置废液缸,试管置铁蓝框
b. 胞浆内见吞噬的鸡红细胞呈椭 淡红色的中性颗粒
圆形、淡紫红色且有核
b. 胞浆内见被吞噬的细菌
团呈紫色
功能
参与非特异及特异性免疫
整理ppt
参与非特异性免疫
14
单核细胞
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巨噬细胞
15
巨噬细胞伪整足理p包pt 裹异物示意图
16
中性粒细胞
嗜酸性粒细胞
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嗜碱性粒细胞
17
整理ppt
中 性 粒 细 胞 形 态
整理ppt
13
大小吞噬细胞 的比较
大吞噬细胞 (macrophage,monocyte)
小吞噬细胞
(neutrophile granulocyte)
细胞类型
形态及 血液中中性粒细胞
a. 胞体大、不规则，有伪足，边 a. 胞体较小，边缘较整齐，
实验一非特异性反应
总结词：离子强度是影响非特异性反 应的重要因素，需要在适宜的离子强 度范围内进行实验，以获得最佳的反 应效果。
反应时间
反应时间对非特异性反应的影响主要体现在反应的进行程度和产物的稳定性上。在适宜的反应时间内，随着反应时间的延长 ，非特异性反应可能趋于完全，产物也更稳定。但当反应时间过长时，可能会引起产物的降解或聚合，导致非特异性反应的 速率常数减小，反应速度降低。
非特异性反应是指生物体在面 对某些刺激时，产生的非针对 特定抗原的反应。
非特异性反应通常是由免疫系 统的固有部分触发，不需要事 先接触抗原即可快速反应。
非特异性反应有助于生物体抵 御多种病原体和外来物质的入 侵。
实验步骤
细胞培养
将细胞培养在适当的培养基中， 保持适宜的温度和湿度。
观察结果
观察细胞形态、生长情况等变 化，记录实验结果。
准备实验材料
包括待检测样本、抗体、细胞 培养基等。
抗原处理
将抗原加入细胞培养基中，使 细胞与抗原接触。
结果分析
对实验结果进行分析，得出结 论。
02
非特异性反应的种 类
抗体非特异性结合
总结词
抗体非特异性结合是指抗体与抗原之间不依赖于抗原决定簇 的结合。
详细描述
在某些情况下，抗体可能会与抗原的某些非特异性区域结合 ，这种结合不依赖于抗原的特异性结构，而是基于抗体与抗 原之间的电荷、疏水性等相互作用。这种结合通常较弱，但 有时也能引起一定的生物学效应。
生物科学研究
蛋白质相互作用研究
非特异性反应可用于研究蛋白质之间的相互作用，有助于深入了 解生命活动的调控机制。
基因表达分析
通过非特异性反应检测基因表达水平的变化，有助于研究基因功能 和疾病发生机制。
动物免疫学教案第九章非特异性免疫应答
一、补体
5
2
15
35
20
教
学
过
程
教学内容与步骤
教学
方法
时间
分配
（min）
补体系统由多种血清蛋白组成。包括20多种血清蛋白所组成。
二、乙型溶素
三、溶菌素
四、干扰素
第四节炎症反应
10
本节课
小结
本章讲授了非特异性免疫应答的因素。
3
讨论、
思考题、
作业
1.参与机体非特异免疫应答的细胞包括哪些？在抗感染中各具什么特点。
正常组织和体液中的抗菌物质
教
学
过
程
教学内容与步骤
教学
方法
时间
分配
（min）
复习上节课内容。
新课导入。
非特异性免疫：是动物生来就具有并通过遗传而获得的一种免疫功能。
第一节机体的屏障
动物机体的表面是抵抗病原体和异物侵入的第一道防线。
一、皮肤和粘膜
（一）皮肤和粘膜的物理屏障作用
（二）皮肤和粘膜分泌物的化学屏障作用
2.吞噬细胞吞噬异物的过程和机理。
3.炎症反应的过程和机体的影响。
2
参考
书目
《兽医免疫学》，崔治中崔保安主编 中国农业出版社
《动物免疫学》（第二版）杨汉春主编中国农业出版社2003年
《兽医免疫学》(第二版)，杜念兴主编，中国农业出版社，1997年。
《医学免疫学》(第三版)，陈慰峰主编，人民卫生出版社，2001年
预防兽医教研室
课程名称：兽医免疫学使用教材：兽医免疫学
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细胞免疫功能测定
项目14：细胞免疫功能测定【目的要求】1、熟悉非特异性免疫细胞功能的测定方法2、了解特异性免疫细胞的测定方法和应用【实验内容】一、吞噬细胞吞噬功能测定【原理】具有吞噬功能的细胞称为吞噬细胞，包括小吞噬细胞和大吞噬细胞二类。
小吞噬细胞一般指血液中的中性粒细胞，大吞噬细胞则是存在于组织中的巨噬细胞和血液中的大单核细胞。
病原微生物、红细胞等异物侵入机体或在体外与吞噬细胞接触，吞噬细胞即进行吞噬。
取细胞作涂片，镜检计算吞噬百分率和吞噬指数，可估计吞噬细胞的吞噬功能。
吞噬细胞（巨噬细胞）在体液免疫和细胞免疫中均起着重要作用，吞噬细胞（巨噬细胞）与抗肿瘤免疫也有重要的关系。
因此，测定吞噬细胞的吞噬和消化功能，可在一定程度上反映机体的免疫状态，也可作为判断疗效的指标之一。
【实验动物与试剂】1、实验动物：小白鼠2、实验试剂：无菌生理盐水、5%无菌可溶性淀粉溶液、瑞氏染液、白色葡萄球菌培养物3、实验器材：无菌注射器、吸管、载玻片、解剖器械、显微镜等。
【方法】1、试验前3天，小鼠腹腔注射5%无菌可溶性淀粉溶液1ml。
2、试验当天，小鼠腹腔注射1mL白色葡萄球菌悬液。
3、注射后30min，断颈处死小鼠，仰位固定小鼠，正中剪开腹部皮肤，吸出腹腔液制定涂片，自然干燥后瑞氏染液染色。
4、瑞氏染液染色：在涂片上滴3~5滴瑞氏甲液，30~60sec后,滴加瑞氏乙液,并用洗耳球吹数下,将乙液与甲液充分混均,5~10min后,水洗,干燥,镜检.5、镜检：低倍对光，用油镜下观察巨噬细胞吞噬细菌的情况。
【结果观察】1、吞噬细胞吞噬现象镜下观：如染色结果正确，可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色，而白细胞浆则为淡红色。
2、吞噬细胞吞噬功能的测定（1）吞噬百分率：观察100个吞噬细胞，计数被吞噬百分率以表示吞噬细胞的吞噬功能。
（2）吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计数被吞噬的细菌总数，平均每个中性粒细咆吞噬的细菌数即为吞噬指数。
三、特异免疫细胞功能测定（一）T淋巴细胞数量测定——E花环试验【原理】人成熟T淋巴细胞表面的CD2分子，即为绵羊红细胞受体（ER）。
免疫组化实验步骤及配方
免疫组化实验步骤及配方免疫组化实验是一种用于检测和定位特定蛋白质在细胞、组织或器官中表达的技术。
免疫组化实验包括一系列步骤，如抗原修复、非特异性结合抑制、免疫原和次级抗体处理、显色/荧光染色等。
下面将详细介绍免疫组化实验的步骤及配方。
1.抗原修复：抗原修复是为了恢复因组织固定而引起的抗原性损失。
一般使用高温或酶解方法进行抗原修复。
-高温方法：将组织切片置于高温缓冲液中加热，一般在95°C下加热15-20分钟。
-酶解方法：如胰酶消化、蛋白酶消化等。
例如，可以使用0.1%胰酶在37°C下进行酶解。
2.非特异性结合抑制：非特异性结合抑制是为了防止免疫试剂（如次级抗体）与非特异性蛋白结合，从而降低假阳性结果。
一般使用正常动物血清或胶体等进行非特异性结合抑制。
-正常动物血清：根据动物源种类（如小鼠、兔子等）选择相应的正常动物血清。
-胶体：如牛血清蛋白、牛血清白蛋白等。
可以在最终稀释液中加入1-2%的胶体。
3.免疫原处理：免疫原处理是为了增强目标抗原与抗体的结合效率，一般通过与次级抗体或酵素结合。
根据具体实验需求，可以选择荧光标记、酶标记或金标记等不同的方式进行免疫原处理。
-荧光标记：如荧光素等。
-酶标记：如辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。
-金标记：如胶体金、纳米金等。
4.次级抗体处理：次级抗体处理是为了增强免疫原与目标抗原之间的结合效应。
一般使用来自其他物种的抗体作为次级抗体。
根据不同实验需求，可以选择与荧光标记、酶标记或金标记结合的次级抗体。
-荧光标记：如青蒿素标记的抗兔荧光标记抗体等。
-酶标记：如HRP标记抗体、AP标记抗体等。
-金标记：如碳标记抗体、金标记抗体等。
5.显色/荧光染色：显色/荧光染色是为了可视化目标抗原的分布和定位。
根据不同的免疫标记试剂，可以选择适当的染色方法。
-显色：如DAB（3,3'-二氨基联苯）染色。
-荧光染色：根据使用的荧光标记试剂选择相应的染色方法，如DAPI 染色、FITC染色等。
沙白肺炎合剂对小鼠非特异性免疫和体液免疫功能调节作用实验研究
７ ０ ｍｉ ｃ ｅ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｉｒ ｆ ｓ ｔ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｌ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ７ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ：ｎ ｏ ｒ ｍａ ｌ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ｔ ｈｅ ＨＣ （ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｏ ｒ ｔ ｉ ｓ ｏ ｎ ｅ） ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，
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・论
著・
沙白 肺炎合剂对小鼠非特异性免疫和体液免疫功能调节作用实验研究
彭 波 ，王 雷 ，龙 飞’ ，李松桃 ，蒲 蓉 ，杨仁旭
（ １ ． 成都 中医药 大学 附属 医院／ ｌ 】 盏 床 医学 院 ，四川 成 都 ６ １ ０ ０ ７ ２ ；
２ ． 成都 中医药大 学临床 医学院２ ０ １ ６ 级硕 士研 究 生 ，四川 成 都 ６ １ ０ ０ ７ ５ ；
实 用中 医药杂志 ２ ０ １ ８ 年１ 月 第３ ４ 卷１ 期 （ 总第３ ０ ０ 期）
沪科版高中第二册《非特异性免疫、特异性免疫》说课稿
沪科版高中第二册《非特异性免疫、特异性免疫》说课稿一、教材分析1.1 教材背景介绍《非特异性免疫、特异性免疫》是沪科版高中生物教材第二册中的一篇重要章节，主要介绍了人体免疫系统中的非特异性免疫和特异性免疫的原理和机制。
1.2 教学目标•理解非特异性免疫和特异性免疫的概念和区别；•掌握非特异性免疫的过程和机制；•理解特异性免疫的过程和机制；•了解免疫系统的重要性和免疫疾病的发生。
1.3 教学重点和难点•非特异性免疫和特异性免疫的概念和区别；•非特异性免疫的过程和机制；•特异性免疫的过程和机制。
二、教学内容2.1 非特异性免疫非特异性免疫是指人体免疫系统对抗各种病原微生物的一种广泛的防御机制。
它主要包括机体屏障防御和炎症反应两个方面。
2.1.1 机体屏障防御机体屏障防御是人体最早出现的一种免疫反应。
它包括皮肤、黏膜和分泌物等屏障的作用。
皮肤作为最外层的屏障，可以通过密实的细胞层和角质层阻止多数病原微生物的侵入。
而黏膜则通过粘液和纤毛等方式清除病原微生物。
2.1.2 炎症反应炎症反应是一种非特异性的免疫反应，它是机体对感染和损伤的一种非特异性防御反应。
主要表现为红、肿、热、痛等症状。
炎症反应的主要作用是吸引和活化炎症细胞，清除病原微生物和修复受损组织。
2.2 特异性免疫特异性免疫是指机体通过特定的免疫细胞和分子针对特定的病原微生物进行防御的一种免疫反应。
它主要由淋巴细胞参与，包括T细胞和B细胞。
2.2.1 T细胞免疫T细胞免疫是特异性免疫的一种重要方式。
它主要通过T细胞受体的识别和配体的结合来实现。
T细胞免疫可以分为细胞免疫和调节性免疫两种类型。
•细胞免疫：通过T细胞的直接杀伤作用来清除病原微生物和感染细胞。
•调节性免疫：调节和控制免疫反应的强度和方向，保持免疫系统的平衡。
2.2.2 B细胞免疫B细胞免疫是特异性免疫的另一种重要方式。
B细胞通过表面抗体的结合来识别和结合病原微生物的抗原。
B细胞免疫主要通过产生抗体来清除病原微生物和抗原。
番茄红素对非特异性免疫功能的体外实验研究
番茄红素对非特异性免疫功能的体外实验研究
袁暾;魏大鹏;廖林川;王霞;蔡美英
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2003(024)004
【摘要】在细胞培养条件下,观察了番茄红素对机体非特异性免疫的影响.结果发现适宜浓度番茄红素乙醇溶液对T淋巴细胞转化有促进作用(p<001).适当浓度的番茄红素对NK细胞杀伤功能也有一定的促进作用(p<005).说明番茄红素对非特异性细胞免疫的主要指标有明确的促进.其原因可能是保护了T淋巴细胞的DNA,避免了增殖过程中DNA复制时可能发生的损伤.番茄红素可以促进细胞胞间通信最终也表现为T淋巴细胞功能的促进.
【总页数】4页(P133-136)
【作者】袁暾;魏大鹏;廖林川;王霞;蔡美英
【作者单位】四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成
都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041
【正文语种】中文
【中图分类】R151
【相关文献】
1.浒苔多糖对非特异性免疫功能的体外实验研究 [J], 徐大伦;黄晓春;欧昌荣;薛长湖;杨文鸽;王海洪
2.金灵口服液保肝作用及非特异性免疫功能的药效学实验研究 [J], 林玉贞;吴符火
3.黑灵芝对小鼠非特异性免疫功能调节作用的实验研究 [J], 柳璐
4.番茄红素体外抗肿瘤作用实验研究 [J], 张亚楼;陈晓;张月明;温浩;王颢;于亚鹭
5.蒙药清肺汤的抗菌作用及对小鼠非特异性免疫功能影响的实验研究 [J], 巴图德力根;布图雅;闫春景
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1. 吞噬作用
示教
2. 溶菌酶实验
1个平板/组
3. 补体传统途径激活实验——溶血实验 1份/组
二、机体细胞免疫功能测定
1、E玫瑰花环实验
示教
2、淋巴母细胞转化实验
示教
一、吞噬细胞及吞噬作用
吞噬作用是指白细胞游出到炎症灶，吞噬 病原体以及组织碎片的过程。
完成此功能的吞噬细胞主要有两种，其吞 噬异物的过程基本相同，但其结构和化学 成分则有所不同。
15
转化细胞形态特征
细胞体积：增大 细胞核
大小：增大 染色质：疏松 核仁：清晰 有丝分裂：+/-
细胞浆
着色 空泡或伪足
16
17
18
5
1、实验室准备： （1） 带菌平板的准备：处理好溶壁微 球菌加入琼脂内,到平板,冷凝备用。 （2）每平板打4个小孔，如图。
1 4
2 3
6
2、同学们操作步骤：
清水漱口
将唾液涂于空平板中
用吸管吸出，按下图滴入孔内
37℃过夜
明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
7
PBS
4
1
阴性对照
鸡蛋清ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
3
阳性对照 2
4
二、溶菌酶试验
溶菌酶是正常体液与分泌液中所含的一种低分子量 的碱性蛋白质，主要来源于巨噬细胞，是天然免疫 中一种重要的体液杀菌成分。
肽聚糖是细菌细胞壁中的重要成分，溶菌酶能够水 解肽聚糖从而使细菌溶解。
细 革兰氏阳性：溶解 菌 革兰氏阴性：肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋 白，一般情况下不受溶菌酶的影响。
中性粒细胞 巨噬细胞
2
实验方法：中性粒细胞的吞噬作用
金黄色葡萄球菌1-2ml，注入小白鼠腹腔内 5小时后，解剖，腹腔液涂片，染色
观察小吞噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的现象
3
实验方法：巨噬细胞的吞噬作用
10%鸡红细胞悬液注入小白鼠腹腔内
分别于1,6,24小时抽取腹腔液涂片，染色
观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象
实验结果
凡能结合三个以上绵羊红细胞者为 玫瑰花形成阳性细胞。
正常人的花环形成率50-70%，大致 可以代表周围血中T细胞的百分数。
14
五、T淋巴细胞转化实验
T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂 原刺激时，可发生转化。
特异性抗原 非特异性丝裂原：PHA、ConA等。
正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
3，4加入唾液标本
8
三、补体溶血实验
原理：补体经过经典 途径激活后产生溶解 细胞等作用。
RBC（Ag） +
溶血素（Ab） +
补体
RBC溶解
9
方法
管号
1
2%RBC （Ag）
0.25
溶血素 （Ab）
0.25
补体 0.25
生理盐水 结果 0.25
2
0.25
0.25
----
0.5
3
0.25
----
0.25
0.5
4
0.25
----
----
0.75
10
结果与判断
红细胞溶解，液体变为红色透明（+） 不溶解，液体均匀浑浊或有少量红细胞沉
于管底（-）
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四、E玫瑰花环形成实验
实验原理
T细胞表面标志CD2，即绵羊红细胞受体 绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合 可用于T细胞的计数与分离
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