非特异性免疫实验
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4
二、溶菌酶试验
溶菌酶是正常体液与分泌液中所含的一种低分子量 的碱性蛋白质，主要来源于巨噬细胞，是天然免疫 中一种重要的体液杀菌成分。
肽聚糖是细菌细胞壁中的重要成分，溶菌酶能够水 解肽聚糖从而使细菌溶解。
细 革兰氏阳性：溶解 菌 革兰氏阴性：肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋 白，一般情况下不受溶菌酶的影响。
15
转化细胞形态特征
细胞体积：增大 细胞核
大小：增大 染色质：疏松 核仁：清晰 有丝分裂：+/-
细胞浆
着色 空泡或伪足
16
17
18
实验结果
凡能结合三个以上绵羊红细胞者为 玫瑰花形成阳性细胞。
正常人的花环形成率50-70%，大致 可以代表周围血中T细胞的百分数。
14
五、T淋巴细胞转化实验
T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂 原刺激时，可发生转化。
特异性抗原 非特异性丝裂原：PHA、ConA等。
正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
0.5
4
0.25
----
----
0.75
10
结果与判断
红细胞溶解，液体变为红色透明（+） 不溶解，液体均匀浑浊或有少量红细胞沉
于管底（-）
11
四、E玫瑰花环形成实验
实验原理
T细胞表面标志CD2，即绵羊红细胞受体 绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合 可用于T细胞的计数与分离
12
‹#›
5
1、实验室准备： （1） 带菌平板的准备：处理好溶壁微 球菌加入琼脂内,到平板,冷凝备用。 （2）每平板打4个小孔，如图。
1 4
2 3
6
2、同学们操作步骤：
清水漱口
将唾液涂于空平板中
用吸管吸出，按下图滴入孔内
37℃过夜
明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
7
PBS
4
1
阴性对照
鸡蛋清
3
阳性对照 2
3，4加入唾液标本
8
三、补体溶血实验
原理：补体经过经典 途径激活后产生溶解 细胞等作用。
RBC（Ag） +
溶血素（Ab） +
补体
RBC溶解
9
方法
管号
1
2%RBC （Ag）
0.25
溶血素 （Ab）
0.25
补体 0.25
生理盐水 结果 0.25
2
0.25
0.25
----
0.5
3
0.25
----
0.25
一、非特异性免疫
1. 吞噬作用
示教
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2. 溶菌酶实验
1个平板/组
3. 补体传统途径激活实验——溶血实验 1份/组
二、机体细胞免疫功能测定
1、E玫瑰花环实验
示教
2、淋巴母细胞转化实验
示教
一、吞噬细胞及吞噬作用
吞噬作用是指白细胞游出到炎症灶，吞噬 病原体以及组织碎片的过程。
完成此功能的吞噬细胞主要有两种，其吞 噬异物的过程基本相同，但其结构和化学 成分则有所不同。
中性粒细胞 巨噬细胞
2
实验方法：中性粒细胞的吞噬作用
金黄色葡萄球菌1-2ml，注入小白鼠腹腔内 5小时后，解剖，腹腔液涂片，染色
观察小吞噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的现象
3
实验方法：巨噬细胞的吞噬作用
10%鸡红细胞悬液注入小白鼠腹腔内
分别于1,6,24小时抽取腹腔液涂片，染色
观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象
二、溶菌酶试验
溶菌酶是正常体液与分泌液中所含的一种低分子量 的碱性蛋白质，主要来源于巨噬细胞，是天然免疫 中一种重要的体液杀菌成分。
肽聚糖是细菌细胞壁中的重要成分，溶菌酶能够水 解肽聚糖从而使细菌溶解。
细 革兰氏阳性：溶解 菌 革兰氏阴性：肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋 白，一般情况下不受溶菌酶的影响。
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转化细胞形态特征
细胞体积：增大 细胞核
大小：增大 染色质：疏松 核仁：清晰 有丝分裂：+/-
细胞浆
着色 空泡或伪足
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实验结果
凡能结合三个以上绵羊红细胞者为 玫瑰花形成阳性细胞。
正常人的花环形成率50-70%，大致 可以代表周围血中T细胞的百分数。
14
五、T淋巴细胞转化实验
T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂 原刺激时，可发生转化。
特异性抗原 非特异性丝裂原：PHA、ConA等。
正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
0.5
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结果与判断
红细胞溶解，液体变为红色透明（+） 不溶解，液体均匀浑浊或有少量红细胞沉
于管底（-）
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四、E玫瑰花环形成实验
实验原理
T细胞表面标志CD2，即绵羊红细胞受体 绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合 可用于T细胞的计数与分离
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1、实验室准备： （1） 带菌平板的准备：处理好溶壁微 球菌加入琼脂内,到平板,冷凝备用。 （2）每平板打4个小孔，如图。
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2、同学们操作步骤：
清水漱口
将唾液涂于空平板中
用吸管吸出，按下图滴入孔内
37℃过夜
明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
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PBS
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阴性对照
鸡蛋清
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阳性对照 2
3，4加入唾液标本
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三、补体溶血实验
原理：补体经过经典 途径激活后产生溶解 细胞等作用。
RBC（Ag） +
溶血素（Ab） +
补体
RBC溶解
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方法
管号
1
2%RBC （Ag）
0.25
溶血素 （Ab）
0.25
补体 0.25
生理盐水 结果 0.25
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0.25
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一、非特异性免疫
1. 吞噬作用
示教
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2. 溶菌酶实验
1个平板/组
3. 补体传统途径激活实验——溶血实验 1份/组
二、机体细胞免疫功能测定
1、E玫瑰花环实验
示教
2、淋巴母细胞转化实验
示教
一、吞噬细胞及吞噬作用
吞噬作用是指白细胞游出到炎症灶，吞噬 病原体以及组织碎片的过程。
完成此功能的吞噬细胞主要有两种，其吞 噬异物的过程基本相同，但其结构和化学 成分则有所不同。
中性粒细胞 巨噬细胞
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实验方法：中性粒细胞的吞噬作用
金黄色葡萄球菌1-2ml，注入小白鼠腹腔内 5小时后，解剖，腹腔液涂片，染色
观察小吞噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的现象
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实验方法：巨噬细胞的吞噬作用
10%鸡红细胞悬液注入小白鼠腹腔内
分别于1,6,24小时抽取腹腔液涂片，染色
观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象