病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结
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单纯固定液
甲醛:能固定类脂和脂类,但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法:Verocay法,乙醇配氨水;Schride法。
重铬酸钾Zenker,Helly,Maximov,Regaud。
苦味酸:易燃易爆,强酸,糖类;可以软化皮肤,易于切片。不宜用火棉胶包埋。70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。
三氯醋酸:SUSa液的主要成分,使蛋白沉淀,良好的脱钙剂。
升汞:针状结晶,组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白,固定后需用碘液脱汞
乙醇:固定兼有脱水作用,糖原的固定,纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。
醋酸:固定染色体,清楚的显示细胞核,但组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。
铬酸避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。
饿酸
延长固定时间,脆性增加,对染色不力。1%高锰酸钾脱碘,固定后流水冲洗12-24h。
丙酮:酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇,对糖原无固定作用。
异丙醇:是乙醇良好的替代品,组织收缩小,硬化作用较弱;不能再用于火棉胶的包埋。
叔丁醇:脱水后可不经透明,直接浸蜡。电镜标本中常用作中间脱水剂。
环氧己烷:不引起组织收缩和硬化,常用于植物标本制作,价格贵。
四氢呋喃:既是脱水剂,又可以作为封片溶媒。
环己酮:代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。
混合固定液
B-5固定液:固定淋巴组织,配方无水醋酸钠-升汞-甲醛,染色前脱汞处理;
Muller液:媒染和硬化神经组织,需常更换液体,固定作用缓慢。
Bouin液:结缔组织
比较差。不适宜长期固定(12-24h)。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。
Orth:胚胎,神经,脂肪均可。需在暗处固定24h。
Carnoy液:胞质和胞核,染色体,糖原保存,尼氏体;不能保存脂类。
Helly固定液:含有氧化剂和还原剂,临时配制,久置失效。
PFG:肽类抗原固定,用于免疫电镜研究。
PLP和PLPD(含有过碘酸钠)
Rossman:
Zenker固定液:形态学研究常用固定液。不适宜固定含血量较多的标本,脾肾;对免疫球蛋白效果最好,对病毒包涵体固定也较好。不能用金属容易盛放,也不能用金属镊子夹取组织块。固定后流水冲洗12H,在70%乙醇脱水时加入碘脱汞。PATH染色用该液固定。嗜铬细胞染色;三色染色。
中性缓冲甲醛液:为免疫组化最常用。24h内为宜
中性甲醛液:为最常用的固定液。
4%多聚甲醛:光镜、电镜免疫组织化学,用于电镜时,戊二醛需新配。
乙醇-甲醛:皮下组织中肥大细胞
乙醚-乙醇:用于细胞涂片固定
甲醛-钙液:脂肪组织和免疫组织化学
Mallory三色染色胶原、网状纤维蓝色,软骨、粘液、淀粉样物质淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维、酸性颗粒红色,髓鞘和红细胞呈橘红色。
Masson三色染色胶原纤维呈蓝(甲苯胺蓝)或绿(亮绿)色,肌纤维呈红色,红细胞橘红色。
显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法胶原纤维呈红色,网状纤维黑色,弹性纤维绿色,肌肉和红细胞呈淡黄色。
Van Gieson苦味酸酸性品红法胶原纤维呈鲜红色,肌纤维和细胞胞质、红细胞呈黄色,胞
核呈蓝褐色。特点是易褪色和对比度差。
天狼星红(Sirius)苦味酸染色法:胶原纤维红色,细胞核绿色,其他黄色。
Gordon-sweets银氨液染色法/James染色网状纤维黑色,胞核红色(核固红复染),胶原纤维黄棕色,胞质淡红色。
Gomori银染法:网状纤维黑色,胶原纤维红色,背景黄色。
Gomori醛复红染色法甲醛生理盐水固定,深紫色;
维多利亚蓝染色:蓝色,核红色。
维多利亚蓝和丽春红S 弹性纤维蓝绿色,胶原纤维红色,背景淡黄色。
Mallory磷钨酸苏木精染色法【PTAH】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、肌纤维均呈蓝色,胶原、网状纤维,软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色,粗弹性纤维有时被染成微紫色,有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。
过碘酸-schiff(PAS)染色法糖原呈红色,细胞核呈蓝色。
Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法中性粘液物质红色,酸性粘液物质蓝色,混合性粘液物质紫红色。
爱先蓝(PH2.5)法唾液酸及若硫酸化粘液物质及一般粘液呈蓝色,各种强硫酸化粘液物质不着色,胞核红色。
schiff阿尔辛蓝地衣红慢性胃炎肠上皮化生,酸性黏多糖,棕色。
爱先蓝(PH1.0)法含硫酸粘液物质蓝色,非硫酸化酸性粘液物质不着色,复染后核红色。
Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色素及嗜银细胞颗粒呈黑色,胶原纤维红色,背景浅
黄色。
Lillie亚铁染色法黑色素暗绿色,背景浅绿或不着色,肌纤维和背景呈黄色。
Perls blue普鲁士蓝反应显示三价铁蓝色,其他组织浅红色。
避免使用含铬固定液
三氯醋酸法胆色素呈绿色,其他呈复染的红色或者黄色。
高碘酸无色复红法用于显示脂褐素。
Lendrum等MSB法纤维蛋白呈红色,陈旧纤维蛋白呈紫色,核蓝色,红细胞黄色。Gram甲紫染色法纤维蛋白蓝黑色,背景红色。
刚果红染色法红色,核蓝色,偏光显微镜下呈苹果绿色双折光性。
Jurgens甲紫法淀粉样物质红色或者紫红色,核蓝色。
Grocott六氨银染色法菌丝和孢子黑褐色,核红色,背景淡绿色。
高碘酸复红染色法真菌紫红色,RBC浅黄色。同时用于染色脂褐素。
Gram碱性复红结晶紫染色法革兰阳性菌紫色,阴性菌红色,核呈红色。
Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法抗酸杆菌呈红色,背景灰蓝色。基本染料是碱性复红。Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色黑色或棕黑色,背景淡黄色。
Giemsa染色法8-18h,蓝色到淡紫色,胞质蓝色,红细胞橘黄色。
Ryu碳酸钠碱性复红法红色。