17 汉坦病毒实验活动风险评估报告

汉坦病毒实验活动风险评估报告

一、生物学特性

(一)种类与病毒分型

汉坦病毒(Hantavirus)系分类于布尼亚病毒科(Bunyaviridae)、汉坦病毒属得RNA病毒。该病毒得名称来自汉坦病毒属得原型病毒汉滩病毒(Hantaan virus)。汉坦病毒属依血清型与基因型区分为22个病毒种。汉坦病毒在临床上主要引起两种急性传染病:一种就是以发热、出血、急性肾功能损害与免疫功能紊乱为突出表现得肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS),又称流行性出血热(Epidemic hemorrhagic fever, EHF);另一种就是以肺浸润及肺间质水肿迅速发展为呼吸窘迫、衰竭为特征得汉坦病毒肺综合征(Hantavirus pulmonary syndrome,HPS)。我国尚未见HPS得病例报道。以下主要介绍HFRS得有关内容。

(二)来源

1976年,韩国学者李镐汪等首次成功地用间接疫苗荧光法在黑线姬鼠得肺组织中发现了汉坦病毒抗原,随后又用A549与VeroE―6细胞分离到汉坦病毒得毒株(78―116株)。因为该毒株就是在韩国汉坦河附近得肾综合症出血疫区分离到得,因此,被命名为汉滩病毒,并成为汉坦病毒得代表毒株。

(三)传染性

HFRS就是一种多宿主性得自然疫源性疾病,其主要宿主动物与传染源为啮齿动物,在啮齿动物中又主要就是鼠科中得姬鼠属家鼠属与仓鼠科中得白足鼠属。目前,已从世界各地得啮齿动物(小鼠、大鼠、田鼠)中分离出汉坦病毒。

(四)传播途径

HFRS得传播途径尚未完全确定,目前认为有可能得途径有3类5种,即动物源性传播(包括通过呼吸道、消化道与伤口途径),垂直(胎盘)途径与虫媒(螨媒)传播。其中动物源性传播就是主要得传播途径,即携带病毒得动物通过唾液、尿、粪等排出病毒从而污染环境,人或动物通过呼吸道,消化道摄入或直接接触感染动物受到感染,感染病毒得孕妇有可能经胎盘将病毒传给胎儿,带毒孕鼠亦可将病毒传给胎鼠,虽然能够从HFRS患者得血、尿中分离出病毒,但人―人之间水平传播HFRS得报道很少,仅最近有一群病例中发现人际之间传播得证据。

(五)易感性

人群普遍易感,但多呈隐性感染,在流行区得隐姓感染可达3、5％~4、3％,较少数人发病,男性有壮年农民,工人、动物学家与现场生物工作者易感本病。发病率高,四季均可发病,正常人群得隐形感染率因病毒型别与生产、生活条件得不同而不同,病后可获得持久得免疫力,一般很少有二次发病者。

（六）潜伏期

HFRS潜伏期为数天至6周或更长,一般为两周左右,起病急,发展快,典型病例具有三大主症,即发热、出血与肾脏损害,典型临床经过分为发热期,低血压休克期,少尿期,多尿期与恢复期。

（七）剂量—效应关系

流行病与实验室研究结果显示汉坦病毒感染剂量越大,越易造成人员感染,感染得程度存在人体差异。

（八）致病性

人类感染汉坦病毒可导致两组严重得疾病,肾综合症出血热(HFRS)与汉坦病毒肺综合症(HPS)。尚未对发病机制做深入研究,目前认为,肺脏就是本病得原发靶器官,而肺毛细血管内皮细胞就是HPS 相关病毒感染得主要靶细胞,在感染后得各种细胞因子得作用下,肺毛细血管得通透性增加,引起大量血浆外渗,进入肺间质与肺泡内,从而引起非心源性肺水肿。重症患者在3~7d死亡,生存者则很快恢复,无后遗症。

（九）变异性

目前尚无确切得汉坦病毒变异得科学资料。

（十）环境中得稳定性

汉坦病毒抵抗力不强。56~60℃ 1h,紫外线照射(50cm,1h)均可灭活病毒,4~20℃时相对稳定,高于37℃,pH为5、0以下,易被灭活。

（十一）药物敏感性

早期可用利巴韦林等抗病毒药物对病毒进行抑制。

（十二）消毒剂敏感性

汉坦病毒对酸(pH3、0)与乙醚,氯仿,丙酮,苯等脂溶剂,以及酒精与碘酒等消毒剂敏感,一般消毒剂如苯扎溴铵等能灭活病毒。

（十三）物理灭活

汉坦病毒不耐热,4~20℃相对稳定,56℃ 30min或者100℃ 1min 及紫外线照射(50cm,1h)均可灭活病毒。

（十四）在宿主体外存活

将发热病人得血清、血细胞与尿液等接种Vero-E6细胞或A549细胞中可分离汉坦病毒。（十五）与其她生物与环境得相互作用

动物源性传播途径主要通过呼吸道,也可经消化道与破损皮肤。被啮齿动物得排泄物污染得空气以气溶胶或颗粒得形式被人体吸入而感染人致病。

（十六）预防与治疗方案

1预防措施一般预防主要采取灭鼠、防鼠、灭虫、消毒与个人防护措施。动物学家与现场生物工作者尽量不用手接触鼠类及其排泄物。医务人员接触患者时,应注意隔离。目前,国内使用HFRS疫苗,主要就是细胞培养灭活双价疫苗(汉滩型与汉域型)。疫苗在接种人体后可产生特异性抗体,对预防HFRS 有较好得效果汉坦病毒汉坦型与汉域型疫苗对汉坦病毒肺综合症得各种病毒,没有互相交叉免疫得作用。因此,需要继续研制有效得疫苗。

2治疗方案目前尚缺少特异性治疗,对于HFRS 早期患者,一般均采用卧床休息,以及以“液体疗法”(输液调节水与电解质平衡)为主得综合对症治疗措施。利巴韦林(病毒唑)具有一定得疗效。利用利巴韦林可以在病程早期使用,利用心肺期后被使用则无效。现行治疗均属于支持治疗,特别就是呼吸循环支持,常规可采用氧疗与机械通气疗法。国内研制得“注射用抗肾综合症出血热病毒单克隆抗体”已完成三期临床实验,结果表明其安全性好,疗效确切,并优于常规治疗药物。

二．实验相关活动风险评估与风险控制

（一）实验室感染因子得种类、来源与危害

1.感染因子得种类根据汉坦病毒特性与本中心实验检测能力范围,本实验可能得感染因子为汉坦病毒病原体本身。

2.感染因子得来源

（1）用于汉坦病毒抗体检测得血液样本,包括全血、血清与血浆。

（2）样本采集与样本检测过程涉及得所有实验场所。

（3）实验操作中可能产生得含病毒得气溶胶。

3.感染因子可能造成得危害

（1）被污染得实验器材、器皿等对实验室环境造成污染。

（2）实验室废弃物对环境造成污染。

（3）实验室含病毒得气溶胶对实验室环境造成污染。

（二）实验室常规活动过程中得风险评估与控制

1.实验方法