凝胶色谱技术样本
凝胶色谱的实验报告
一、实验目的1. 了解凝胶色谱（GPC）的原理和操作技术。
2. 掌握GPC在测定高分子聚合物分子量及其分布方面的应用。
3. 学会GPC数据的处理和分析方法。
二、实验原理凝胶色谱法（GPC）是一种基于分子大小分离的色谱技术，主要用于高分子聚合物的分子量及其分布的测定。
GPC利用具有不同孔径的凝胶作为固定相，将高分子聚合物按照分子大小进行分离。
分子量较小的高分子聚合物能够进入凝胶颗粒内部，流动路径较长，所需时间也较长；而分子量较大的高分子聚合物则无法进入凝胶颗粒内部，流动路径较短，所需时间也较短。
实验过程中，高分子聚合物在流动相（通常是溶剂）的作用下，通过凝胶色谱柱，分子量不同的高分子聚合物在色谱柱中的保留时间不同，从而实现分离。
通过检测器记录不同分子量高分子聚合物的出峰时间，即可得到高分子聚合物的分子量分布曲线。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 高分子聚合物样品- 标准高分子聚合物样品- 溶剂（如四氢呋喃、苯等）2. 实验仪器：- 凝胶色谱仪- 凝胶色谱柱- 检测器- 计算机及数据采集软件四、实验步骤1. 样品准备：将高分子聚合物样品溶解于溶剂中，制成一定浓度的溶液。
2. 准备凝胶色谱柱：将凝胶色谱柱安装在凝胶色谱仪上，用溶剂冲洗色谱柱，去除杂质。
3. 进样：将高分子聚合物溶液注入凝胶色谱柱。
4. 流动相：设置流动相的流速，使高分子聚合物在色谱柱中流动。
5. 检测：检测器记录高分子聚合物的出峰时间，并将数据传输至计算机。
6. 数据处理：利用数据采集软件，对GPC数据进行处理和分析。
五、实验结果与分析1. 标准高分子聚合物样品的GPC曲线：通过标准高分子聚合物样品的GPC曲线，可以确定凝胶色谱柱的分离范围和适用性。
2. 实验样品的GPC曲线：根据实验样品的GPC曲线，可以分析高分子聚合物的分子量分布情况。
3. 计算分子量及其分布：根据GPC曲线，可以计算出高分子聚合物的数均分子量、重均分子量、多分散指数等参数。
凝胶过滤色谱实验报告
一、实验目的1. 了解凝胶过滤色谱（Gel filtration chromatography，GFC）的基本原理和操作方法。
2. 掌握凝胶过滤色谱在分离、纯化蛋白质等生物大分子中的应用。
3. 通过实验验证凝胶过滤色谱的分离效果。
二、实验原理凝胶过滤色谱是一种根据分子大小进行分离的技术，其基本原理是利用凝胶的分子筛特性。
凝胶是一种具有多孔结构的物质，孔径大小不一，当混合物通过凝胶时，分子大小不同的物质会被不同程度地阻滞在凝胶孔隙中，从而实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蛋白质样品：牛血清白蛋白（BSA）、鸡卵清蛋白（OVA）、酵母提取物（Yeast Extract）- 凝胶色谱柱：Sephadex G-75- 缓冲液：磷酸盐缓冲液（pH 7.4）- 标准分子量蛋白质：分子量分别为6.5×10^4、1.4×10^5、2.0×10^5、4.0×10^5、6.0×10^5的蛋白质混合物2. 实验仪器：- 凝胶色谱仪- 超速离心机- 荧光检测器- 移液器- 离心管- 吸管四、实验步骤1. 准备凝胶色谱柱：将Sephadex G-75凝胶柱安装在凝胶色谱仪上，用磷酸盐缓冲液（pH 7.4）平衡凝胶色谱柱，使其达到稳定状态。
2. 准备样品：将标准分子量蛋白质混合物、牛血清白蛋白、鸡卵清蛋白和酵母提取物分别溶解于磷酸盐缓冲液中，制成蛋白质溶液。
3. 上样：将蛋白质溶液加入凝胶色谱柱，使样品在凝胶色谱柱中均匀分布。
4. 流动：打开凝胶色谱仪，以一定流速（如1 mL/min）进行洗脱，收集洗脱液。
5. 分析：将收集到的洗脱液进行检测，记录蛋白质的洗脱峰，并分析其分子量分布。
6. 离心：将洗脱液中的蛋白质进行离心，分离出蛋白质沉淀。
7. 质量分析：将蛋白质沉淀进行电泳、质谱等分析，验证其纯度和分子量。
五、实验结果与分析1. 凝胶过滤色谱洗脱曲线：通过凝胶色谱仪收集洗脱液，绘制洗脱曲线。
凝胶渗透色谱实验报告
凝胶渗透色谱实验报告《凝胶渗透色谱实验报告》实验目的：通过凝胶渗透色谱技术分析样品中的蛋白质组成，了解其分子量分布和纯度。
实验原理：凝胶渗透色谱是一种分离生物大分子的技术，其原理是利用凝胶的孔隙大小对分子进行分离。
大分子在凝胶中的孔隙内滞留时间长，小分子则穿过凝胶孔隙，因此可以实现对分子的分离。
实验步骤：1. 准备样品：将待测样品溶解在适当的缓冲液中，使其浓度适当。
2. 样品加载：将样品加载到色谱柱上，通过压力或离心力使其进入色谱柱内。
3. 色谱分离：在缓冲液的作用下，样品中的蛋白质分子根据其大小在色谱柱中进行分离。
4. 检测分离结果：通过检测器检测样品在色谱柱中的分离情况，得到蛋白质的分子量分布和纯度信息。
实验结果：通过凝胶渗透色谱实验，我们成功地分离出了样品中的蛋白质组成，并得到了它们的分子量分布和纯度信息。
根据实验结果，我们可以进一步了解样品中蛋白质的组成和结构，为后续的研究提供重要的参考数据。
实验结论：凝胶渗透色谱技术是一种有效的生物大分子分离方法，可以用于分析样品中蛋白质的组成和纯度。
通过本次实验，我们成功地应用了该技术，并得到了有意义的实验结果，为后续的研究工作奠定了基础。
总结：凝胶渗透色谱技术是一种重要的分离技术，对于生物大分子的分析具有重要意义。
通过本次实验，我们对该技术有了更深入的了解，并为今后的实验工作提供了宝贵的经验。
通过凝胶渗透色谱实验报告，我们对该技术的原理、步骤、结果和结论有了更清晰的认识，为今后的科研工作提供了重要的参考。
希望通过不断的实验探索和研究，能够更好地应用这一技术，为科学研究做出更大的贡献。
薄层色谱柱色谱及凝胶色谱法
1.3.6 显色：
普适性显色剂：浓硫酸、碘蒸气、荧光素 用显色剂：茚三酮、三氯化铁溶液等
1.4 操作要点和说明
薄层色谱法的整个过程包括以下步骤：
1.4.1 薄层板的制备
制薄层板的主要原料是吸附剂和粘结剂 吸附剂：最常用于 TLC的吸附剂为硅胶 GF254； 硅胶HF254。 粘结剂：一般用所羧甲基纤维素钠（CMC），也有用淀粉的。CMC为粉状
GSC LLC TCL
LSC
PC
健 合 离子交 相色谱 换色谱 BPLC IC
凝胶 色谱 GPC
1.3 几种分析方法比较
分离能力 定性 定量 分析速度 分析范围
色谱
强 弱 强 快 常量、微量
分析对象 有机（无机）
特效性
一般
光谱
电化学
弱
弱
强
一般
中弱
中
快
较快
微量
常量、微量
发射光谱
原子吸收光谱 吸收光谱、有机M无、e机物 无机物大部分
（4）活性：
吸附剂按其含水量的多少各分为五个等级, I级含水量最少，活性最 高；V级含水量最多，活性最低；但并不是活性越高分离效果越好， 选用哪种活性级别的吸附剂，要用实验的方法来确定。
氧化铝的活化化I~V五级，I级的吸附作用太强，V级的吸附作用太弱。 所以一般常采用II，III级。
表1 吸附剂活性和含水量的关系
图2 薄层板制备
1.4.2 点样 点样用的毛细管为内径＜ lmm的管口平整的毛细管，将样品
溶于低沸点的溶剂（乙醚、丙酮、乙醇、四氢呋喃等）配成1％ 溶液。 点样前，可先用铅笔在小板上距一端5mm处轻轻划一横线，作为 起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重 复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块 板上点几个样，样品点间距离为5mm以上。
gpc凝胶色谱法
GPC凝胶色谱法（Gel Permeation Chromatography）是一种常用的高效分离和纯化大分子化合物的方法。
它利用多孔凝胶填充柱，通过溶剂的流动来实现样品分离。
本文将详细介绍GPC凝胶色谱法的原理、操作步骤和应用领域。
一、原理GPC凝胶色谱法基于溶液中溶剂分子能够穿过凝胶柱，而样品分子由于体积较大而无法穿过凝胶柱的特点。
在柱中填充的多孔凝胶具有不同的孔径大小，通过调整填充凝胶的孔径大小可以实现对不同分子大小的分离。
当样品溶液通过凝胶柱时，大分子会被凝胶阻挡，停留在柱上，而小分子则能够穿过凝胶柱，以较快的速度流出。
二、操作步骤1. 样品准备：将待测样品溶解在适当溶剂中，并去除悬浮物或杂质。
确保样品溶液的浓度适中，不要过于稀释或浓缩。
2. 准备柱：选择合适的凝胶柱，并根据样品大小选择合适的填充凝胶。
将凝胶柱放入色谱系统中，并用适当的溶剂预洗柱体，以去除空隙中的杂质。
3. 样品进样：使用自动进样器或手动进样器将样品溶液注入色谱系统中，确保样品进入凝胶柱。
4. 溶剂流动：打开溶剂泵，使溶剂以一定的流速通过凝胶柱，保持稳定的流速和压力。
5. 检测器测量：在溶剂流动的同时，使用合适的检测器（如紫外检测器）对流出的溶液进行连续监测。
记录下各组分的峰面积或峰高度，以及相对保留时间。
6. 数据处理：根据样品的分子量和峰面积或峰高度，绘制标准曲线，从而得到待测样品的分子量分布。
三、应用领域1. 聚合物研究：GPC凝胶色谱法是聚合物分子量分布分析的重要手段。
通过测定不同聚合物样品的分子量分布，可以评估聚合反应的效果、控制聚合物的质量以及研究聚合物的性质和结构。
2. 生物医药领域：GPC凝胶色谱法在生物医药领域中被广泛应用于蛋白质、多肽和核酸等生物大分子的分离和纯化。
它可以帮助研究人员获取纯度高、分子量分布窄的样品，为后续的生物学研究和制剂开发提供可靠的基础数据。
3. 环境监测：GPC凝胶色谱法也常用于环境监测中，例如对水体中有机物的分析和大气颗粒物的检测。
凝胶色谱法
凝胶色谱法凝胶色谱法添加摘要凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术，是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术，由于设备简单、操作方便，不需凝胶色谱系统要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。
凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。
凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。
目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。
凝胶色谱法-分类根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物，又可分为凝胶过滤色谱（GFC）和凝胶渗透色谱（GPC）。
凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子，如多糖类化合物。
凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱凝胶色谱仪溶剂主要是水。
凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相对分子质量分布分析及分离，常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶，洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。
凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布，同时根据所用凝胶填料不同，可分离油溶性和水溶性物质，分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。
近年来，凝胶色谱也广泛用于分离小分子化合物。
化学结构不同但相对分子质量相近的物质，不可能通过凝胶色谱法达到完全的分离纯化的目的。
凝胶渗透色谱技术原理凝胶色谱法-分子筛效益一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。
小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。
凝胶渗透色谱
合物
超临界
有机组份键合于 超临界流体和
流体
固体表面
键合相间分配
体积排斥色谱 SEC Size Exclusion Chromatography的发展史
1953年 Wheaton和Bauman 用多孔离子交换树脂按 分子量大小分离了苷、多元醇和其它非离子物质, 观察到分子尺寸排除现象. ➢ 1959年 Porath和 Flodin 用葡聚糖胶联制成凝胶 来分离水溶液中不同分子量的样品. ➢ 1962年 J.C.Moore 将高交联度聚苯乙烯-二乙烯基 苯树脂用作柱填料,以连续式高灵敏度的示差折光 仪,并以体积计量方式作图,制成了快速且自动化的 高聚物分子量及分子量分布的测定仪,从而创立了 液相色谱中的凝胶渗透色谱技术.
Chlorinated Polyethylene Polyethylene –
Ethylacrylate Polyethylene –
Vinylacetone Polyethylene – Methacrylic
acid Polyphenyleneoxide Poly-4-methylpentene1 Polyethylene
凝胶色谱的任务
分子量的分布与高分子材料的 所有关键加工特性以及材料性能紧 密相关
Plastics Technology, May 1986
聚合物的各种平均分子量
用SEC测得的不同种平均分子量可对应于其他仪器所 测的值：
– Mn：用渗析计测出Osmometry – Mw：用光散射计测出Light Scattering – Mv：用粘度计测出Viscometry – Mz及Mz+1：用超速离心法测出
溶剂特性
溶剂英文 Hexane Cyclohexane Toluene Ethyl acetate Eetrahydrofuran Chloroform Methyl ethyl ketone Dichloromethane Dichloroethane Acetone Dichlorobenzene Trichlorobenzene m-Cresol o-Chlorophenol Dimethyl acetamide n-Methyl pyrrolidone Dimethyl sulphoxide Dimethyl formamide Hexafluroisopropanol
凝胶渗透色谱样品要求
凝胶渗透色谱样品要求凝胶渗透色谱法（Gel Permeation Chromatography，GPC）是一种常用于测定高分子化合物分子量和分子量分布的分离分析方法。
在进行凝胶渗透色谱分析时，样品的纯度、溶解性、分子量范围、浓度、颜色、稳定性、操作条件以及兼容性等因素都会影响分析结果的准确性和可靠性。
下面将分别阐述对凝胶渗透色谱样品的要求。
1. 样品纯度进行凝胶渗透色谱分析时，样品必须具有较高的纯度，以便准确测定分子量和分子量分布。
样品中不能含有凝胶渗透色谱无法分离或对分析结果产生干扰的杂质。
对于一些含有低分子量杂质的样品，需要先进行分离或提纯，再进行凝胶渗透色谱分析。
2. 样品溶解性凝胶渗透色谱样品必须是可溶的，而且溶解度要足够大，以确保在分析过程中样品能够完全溶解，从而提高分析的准确性和可靠性。
对于溶解度较小的样品，可以采用适当的方法进行增溶，如加入溶剂或加热搅拌等。
3. 分子量范围凝胶渗透色谱法主要用于测定高分子化合物的分子量和分子量分布，因此样品的分子量范围必须适合凝胶渗透色谱的分离范围。
一般情况下，样品的分子量应该在凝胶渗透色谱柱的分离范围内，而且分子量分布也要适中，以便能够进行准确的测定。
4. 样品浓度在进行凝胶渗透色谱分析时，样品浓度是一个重要的参数。
为了准确测定分子量和分子量分布，样品浓度应该适当，而且要换算成一定体积的浓度值。
对于浓度较小的样品，可以采用稀释或浓缩的方法进行调整。
5. 无色或浅色凝胶渗透色谱样品应该是无色或浅色的，以避免对紫外或可见光检测器的干扰，从而提高分析结果的准确性和可靠性。
如果样品有颜色或浑浊度，可能会影响检测器的响应信号，进而影响分析结果。
对于有颜色的样品，可以采用适当的方法进行脱色或稀释，以减小颜色对分析结果的影响。
6. 稳定性凝胶渗透色谱样品应该具有一定的稳定性，以便在分析过程中能够保持相对稳定的状态，从而减小误差。
样品的稳定性应该根据实际情况而定，对于易变质、易分解或易挥发的样品，需要采用适当的储存条件和有效期，以保证分析结果的准确性和可靠性。
凝胶渗透色谱实验报告doc(一)
凝胶渗透色谱实验报告doc（一）引言概述：凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography，简称GPC）是一种广泛应用于分离和分析高分子聚合物的技术。
本实验旨在通过GPC实验，深入研究凝胶渗透色谱的原理、操作流程和关键参数的影响，为进一步理解高分子聚合物的结构与性质提供实验依据。
大点1：凝胶渗透色谱原理1.1 色谱柱选择与填充材料1.2 凝胶基质的选择和特点1.3 分子尺寸排列与渗透分离原理1.4 色谱流动相的选择与影响因素1.5 检测器的选择与原理解析大点2：GPC实验的操作流程2.1 样品的制备与装载2.2 色谱仪的运行参数设置2.3 样品的进样与洗脱条件2.4 数据采集与分析2.5 色谱后处理与结果解读大点3：影响GPC实验结果的关键参数3.1 柱温的选择与调控3.2 流速的选择与优化3.3 色谱分离度与选择性的平衡3.4 校正曲线的构建与验证3.5 样品浓度的合理选择与影响因素分析大点4：凝胶渗透色谱的应用领域4.1 聚合物的分子量与分子量分布分析4.2 凝胶分子胶体粒径分析4.3 表面改性聚合物的表征与分析4.4 高分子聚合物的纯度与杂质分析4.5 聚合物合成与反应动力学分析大点5：凝胶渗透色谱实验的优化与展望5.1 GPC实验中的常见问题与解决方法5.2 GPC技术的改进与创新5.3 GPC与其他分析技术的结合应用5.4 GPC在高分子科学与材料领域的前景5.5 凝胶渗透色谱实验的局限与发展方向总结：通过本文档的撰写，我们详细介绍了凝胶渗透色谱的原理、操作流程和关键参数的影响，以及其在聚合物分析领域的应用。
同时，我们总结了目前凝胶渗透色谱实验中存在的问题及改进方向，展望了该技术的未来发展。
希望本文档能够为读者对凝胶渗透色谱的理解和应用提供参考和帮助。
凝胶色谱柱分离案例
凝胶色谱柱分离案例
案例：分离复杂蛋白质混合物
背景：假设我们有一个复杂的蛋白质混合物，需要对其进行分离和纯化，以便进一步的功能和结构研究。
方法：通过凝胶色谱柱进行分离和纯化。
凝胶色谱是一种常见的蛋白质分离技术，基于蛋白质在凝胶柱中的不同亲和性来实现分离。
凝胶柱具有特定的静态和动态属性，可以选择性地吸附和洗脱特定的蛋白质组分。
步骤：
1. 准备样品：将复杂的蛋白质混合物溶解在适当的缓冲液中，并去除悬浮物。
2. 准备凝胶柱：选择合适的凝胶色谱介质和柱子，根据样品的特性和目标蛋白质进行选择。
常用的凝胶介质包括离子交换柱、分子筛柱和亲和柱等。
3. 样品加载：将样品加载到柱子中，通过重力流动或者使用液相色谱系统进行加载。
4. 柱洗脱：根据凝胶柱的性质和样品的特性，使用适当的缓冲液进行柱洗脱。
洗脱液可以是梯度缓冲液，也可以是特定的洗脱缓冲液，以达到分离目的。
5. 分馏和采集：根据柱洗脱过程中的吸光度或者其他检测方法，将感兴趣的分馏部分进行采集和进一步分析。
6. 纯化：对采集的蛋白质进行纯化，可以使用其他纯化技术，如电泳、冷冻干燥等，以获得高纯度的目标蛋白质。
效果：通过凝胶色谱柱的分离和纯化，我们可以将复杂的蛋白质混合物分离为不同的组分，从而方便进行后续的功能和结构研究。
第5章凝胶渗透色谱
色谱柱：
GPC仪分离的核心部件。是在一根不锈钢空心 细管中加入孔径不同的微粒作为填料。
填料（根据所使用的溶剂选择填料，对填料最基本的 要求是填料不能被溶剂溶解）：交联聚苯乙烯凝胶 （适用于有机溶剂，可耐高温）、交联聚乙酸乙烯酯 凝胶（最高100℃，适用于乙醇、丙酮一类极性溶剂） 多孔硅球（适用于水和有机溶剂）、多孔玻璃、多孔 氧化铝（适用于水和有机溶剂） 柱子：玻璃、不锈钢
柱子为玻璃柱或金属柱，内填装有交联度 很高的球形凝胶。其中的凝胶类型有很多， 都是根据具体的要求而确定（常用的有聚苯 乙烯凝胶）。然而无论哪一种填料，他们都 有一个共同点，就是球形凝胶本身都有很多 按一定分布的大小不同的孔洞。
第5章凝胶渗透色谱
• 尺寸不同的高聚物分子，按其分子大小能自由 地渗透进和渗透出这些凝胶孔洞。
• 凝胶孔洞与分子尺寸是相适应的，超过这个尺 寸的大分子就不能渗透进去，它们只能随溶剂的 流动而在凝胶粒子之间的空间中流动。因此，大 分子比起小分子来说，在柱中的行程就短得多。
• 根据大小分子不同的行程就可以把混在一起的 高聚物分子逐级分离开来，先分离出来的是大分 子，较小的聚合物分子受到溶剂分子的排斥也随 后分离出来，然后再用一定的方法检知每级中溶 质的浓度和分子量。
• 色谱定性分析－－依据保留值
• 与已知组分的保留值相比
• 与其它分析方法连用 如ＩＲ
• 色谱定量分析——峰高或峰面积判断分析
物
的含量
• 色谱优缺点：
• 高效快速分离技术
• 难以鉴别分离组分
第5章凝胶渗透色谱
1.GPC的基本机理
凝胶渗透色谱是一种液相色谱，原理是利 用高分子溶液通过一根装填有凝胶的柱子， 在柱中按分子大小进行分离。
凝胶渗透色谱
一、实验背景简介
1．聚合物分子量及其分子量分布
是聚合物性能的重要参数之一，与聚合物力学性能有密切关系，对高聚物拉伸强度以及成型加工过程，如模塑、成模、纺丝等都有影响。研究聚合物的分子量及其分子量分布，对于控制和改进产品质量具有重要意义。
2．凝胶渗透色谱法（GPC）
1利用高分子溶液通过填充有特种凝胶的柱子，把聚合物分子按尺寸大小进行分离的方法。
五、实验步骤
1.样品配制
选取9个分子量从大到小的标记的标样，按照淋洗峰位不重合的原则，分为三组1、3、5，2、6、8和4、7、9，每组标样分别称取约2mg混在一个配样瓶中，用针筒注入约6ml的THF溶剂，溶解后用装有0.45 孔径的微孔过滤膜过滤。在配样瓶中称取约4mg被测样品，注入约4ml溶剂，溶解够过滤。
标准样品序号
相对分子质量
淋洗体积（mL）
1
141437
14.25
2
10814
16.18
3
1480
18.32
2.数据处理与结果
Sample
MW
MZ
d
1
141437
156220
169084
1.10452
2
10814
11634
12410
1.07583
3
1480
1பைடு நூலகம்25
1571
1.03041
七、实验注意事项
2是目前测定聚合物分子量及其分子量分布最有效的方法。
3它具有测定速度快、用量少、自动化程度高等优点，已获得广泛应用。
二、实验目的
1.了解凝胶渗透色谱仪的原理。
2.了解凝胶渗透色谱仪的构造和凝胶渗透色谱的实验技术。
凝胶色谱实验报告cl参考模板
凝胶色谱实验报告cl 一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填）四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填）七、讨论、心得一、 实验目的和要求1、了解凝胶渗透色谱的测量原理，初步掌握GPC 的进样、淋洗、接收、检测等操作技术。
2、掌握分子量分布曲线的分析方法，得到样品的数均分子量、重均分子量和多分散性指数。
二、实验装置与原理 1、分离机理 GPC 是液相色谱的一个分支，其分离部件是一个以多孔性凝胶作为载体的色谱柱，凝胶的表面与内部含有大量彼此贯穿的大小不等的空洞。
色谱柱总面积Vt 由载体骨架体积Vg 、载体内部孔洞体积Vi 和载体粒间体积V0组成。
GPC 的分离机理通常用“空间排斥效应”解释。
待测聚合物试样以一定速度流经充满溶剂的色谱柱，溶质分子向填料孔洞渗透，渗透几率与分子尺寸有关，分为以下三种情况：（1）高分子尺寸大于填料所有孔洞孔径，高分子只能存在于凝胶颗粒之间的空隙中，淋洗体积Ve=V0为定值；（2）高分子尺寸小于填料所有孔洞孔径，高分子可在所有凝胶孔洞之间填充，淋洗体积Ve=V0+Vi 为定值；（3）高分子尺寸介于前两种之间，较大分子渗入孔洞的几率比较小分子渗入的几率要小，在柱内流经的路程要短，因而在柱中停留的时间也短，从而达到了分离的目的。
当聚合物溶液流经色谱柱时，较大的分子被排除在粒子的小孔之外，只能从粒子间的间隙通过，速率较快；而较小的分子可以进入粒子中的小孔，通过的速率要慢得多。
经过一定长度的色谱柱，分子根据相对分子质量被分开，相对分子质量大的在前面（即淋洗时间短），相对分子质量小的在后面（即淋洗时间长）。
自实验报告专业： 化学工程与工艺 姓名： 田小彤 学号： 3120104271 日期： 地点： 教十3009 课程名称： 高分子物理实验 指导老师： 成绩：实验名称： 汽液平衡数据的测定实验类型： 同组学生姓名：试样进柱到被淋洗出来，所接受到的淋出液总体积称为该试样的淋出体积。
凝胶色谱样品前处理
凝胶的网络结构
溶质分子进入凝胶网络中
凝胶色谱分离机理
� 分离机理：类似于分子 筛效应。大体积分子只能 渗入少量大孔，在固定相 中所经历的路径较短，先 流出。所有孔隙都不能进 入的大体积分子，不被保 留，在死体积流出。 � 洗脱顺序：溶质按分子体积从大到小依次流出。
凝胶色谱法的类型
� �
又称：空间排斥色谱、体积排阻色谱。 凝胶色谱（gel chromatography）分为： 凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography, GPC）： 以有机溶剂为流动相； 凝胶过滤色谱（gel filtration chromatography, GFC）：以 水为流动相。
（式中 A、B 为与聚合物、溶剂、温度、填料及仪器有关的常数）
凝胶色谱的主要用途
� � � � � �
高分子分子量的测定； 高分子分子量分布的测定； 中小分子有机物的定量分析； 生物大分子纯化；（制备凝胶色谱） 指纹图谱；（原油及其重质组分的评价） 样品净化（预处理）。
凝胶色谱样品净化装置
LabTech AutoClean LabTech GPC Cleanup-600
GPC样品净化典型条件
提取溶剂：非（弱）极性溶剂，如石油醚、乙酸乙酯、丙酮 凝胶柱：硬质或半硬质球形凝胶填料 流动相：非极性溶剂，如环己烷、乙酸乙酯 检测器：通用型，如示差折光 离线净化：自动馏分收集 在线净化：阀切换技术 除去物质：大分子有机物，如蛋白质、脂肪、色素 分析对象：小分子有机物，如农残、药残、毒物、代谢产物 最适合样品： 食品、生物、医学、农学
分子量的测定方法
� 凝胶柱的标定： 用一系列已知相对分子 质量M的标准品（最好与 样品属相同化学组 成），测定它们在该凝 胶柱上的保留体积Ve （或保留时间），绘制 lgM-Ve曲线。
凝胶色谱实验报告
凝胶渗透色谱法测定聚合物的平均分子量及其分布一．实验背景简介1.聚合物分子量及其分子量分布聚合物性能的最主要参数之一，与聚合物力学性能有密切关系，对聚合物拉伸强度以及成型加工过程，如模塑，成模，纺丝等都有影响，研究聚合物的分子量及其分子量分布，对于控制改进产品质量具有重要意义。
2.凝胶渗透色谱法利用分子溶液通过填充有某种凝胶的柱子，把聚合物分子按照尺寸大小进行分离的方法。
目前是测定聚合物分子量及其分子量分布最有效的方法。
它具有测定速度快、用量少、自动化程度高等优点，已获得广泛应用。
二．实验目的1. 了解凝胶渗透色谱的原理；2. 了解凝胶渗透色谱的仪器构造和凝胶渗透色谱的实验技术；3. 测定聚苯乙烯样品的分子量分布。
三．实验原理凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography，简称GPC）也称为体积排除色谱（Size Exclusion Chromatography，简称SEC）是一种液体（液相）色谱。
和各种类型的色谱一样，GPC/SEC 的作用也是分离，其分离对象是同一聚合物种不同分子量的高分子组份。
当样品中不同分子量的各组份的分子量和含量被确定后，就可得到聚合物的分子量分布，然后可以很方便地对分子量进行统计，得到各种平均值。
一般认为，GPC/SEC 是根据溶质体积的大小，在色谱中由于体积排除效应即渗透能力的差异进行分离。
高分子在溶液中的体积决定于分子量、高分子链的柔顺性、支化、溶剂和温度，当高分子链的结构、溶剂和温度确定后，高分子的体积主要依赖于分子量。
凝胶渗透色谱的固定相是多孔性微球，可由交联度很高的聚苯乙烯、聚丙烯酸酰胺、葡萄糖和琼脂糖的凝胶以及多孔硅胶、多孔玻璃等来制备。
色谱的淋洗液是聚合物的溶剂。
当聚合物溶液进入色谱后，溶质高分子向固定相的微孔中渗透。
由于微孔尺寸与高分子的体积相当，高分子的渗透几率取决于高分子的体积，体积越小渗透几率越大，随着淋洗液流动，它在色谱中走过的路程就越长，用色谱术语就是淋洗体积或保留体积增大。
色谱分离技术凝胶筛分课件
在柱内溶质只有转移到流动相时才能沿柱的方向向
前移动，所以对于一个在柱内有保留的溶质，其谱带移
动速度(u b )总是小于流动相的移动速度(u m )，而等于流
动相的移动速度与该谱带对应的溶质在流动相停留的时
间分数之积：
ub um(11k')
（三）聚丙烯酰胺凝胶：
是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位， 由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工 成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型 号的凝胶。交联剂越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺 凝胶的商品为生物胶－P （Bio-Gel P），由美 国Bio-Rod厂生产，型号很多，从P-2至P-300共 10种，P 后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的 排阻限度。
无机填料：
表面改性后的硅胶，主要是用有机物或聚合物对硅胶 颗粒进行处理，增加其亲水性并消除或抑制体积排阻以 外的其他效应。
优点：
可耐受较高的压力，最高压力可达上百个大气压。具 有较高的柱效率和分离度。
缺点：
pH的适用范围窄。以硅胶为基质的填料，pH范围在 2.0-7.0，如果超过了这个范围，将会使有机层的溶解速 率加快，减少柱子寿命。
层析分离操作过程
液相色谱的基本原理和参数
保留时间(tR)和保留体积(VR)
从进样开始到后来出现样品的浓度极大值所
需的时间为保留时间，用tR表示。在这段时间
内冲洗剂（流动相）
VR tR•F
流过的体积为保留体积，用VR 表示。
理论塔板数的计算公式为：
N (tR )2
色谱流出曲线及参数
容量因子k 和平衡常数K 某物质的k定义为在分配平衡时该物质在两
凝胶色谱(中国药典)
0514分子排阻色谱法中国药典2015年版件均应使用惰性材料，如聚醚醚酮（P E E K)等。
也可使用一般的高效液相色谱仪，只要其部件能与洗脱液和供试品溶液相适应。
仪器应定期检定并符合有关规定。
(11色谱柱离子交换色谱的色谱柱填充剂有两种，分别是有机聚合物载体填充剂和无机载体填充剂。
有机聚合物载体填充剂最为常用，填充剂的载体一般为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、乙基乙烯基苯-二乙烯基苯共聚物、聚甲基丙烯酸酯或聚乙烯聚合物等有机聚合物。
这类载体的表面通过化学反应键合了大量阴离子交换功能基（如烷基季铵、烷醇季铵等）或阳离子交换功能基（如磺酸、羧酸、羧酸-膦酸和竣酸-膦酸冠醚等），可分别用于阴离子或阳离子的交换分离。
有机聚合物载体填充剂在较宽的酸碱范围(p H0〜14)内具有较髙的稳定性，且有一定的有机溶剂耐受性。
无机载体填充剂一般以硅胶为载体。
在硅胶表面化学键合季铵基等阴离子交换功能基或磺酸基、羧酸基等阳离子交换功能基，可分别用于阴离子或阳离子的交换分离。
硅胶载体填充剂机械稳定性好、在有机溶剂中不会溶胀或收缩。
硅胶载体填充剂在p H2〜8的洗脱液中稳定，一般适用于阳离子样品的分离。
(2)洗脱液离子色谱对复杂样品的分离主要依赖于色谱柱中的填充剂，而洗脱液相对较为简单。
分离阴离子常采用稀碱溶液、碳酸盐缓冲液等作为洗脱液；分离阳离子常采用稀甲烷磺酸溶液等作为洗脱液。
通过调节洗脱液p H值或离子强度可提高或降低洗脱液的洗脱能力；在洗脱液内加入适当比例的有机改性剂，如甲醇、乙腈等可改善色谱峰峰形。
制备洗脱液的水应经过纯化处理，电阻率大于18M n*c m。
使用的洗脱液需经脱气处理，常采用氦气等惰性气体在线脱气的方法，也可采用超声、减压过滤或冷冻的方式进行离线脱气。
(3)检测器电导检测器是离子色谱常用的检测器，其他检测器有安培检测器、紫外检测器、蒸发光散射检测器等。
电导检测器主要用于测定无机阴离子、无机阳离子和部分极性有机物，如竣酸等。
凝胶色谱法PPT课件
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泵系统：
包括一个溶剂储存器、一套脱气装置和 一个高压泵。它的工作是使流动相（溶 剂）以恒定的流速流入色谱柱。泵的工 作状况好坏直接影响着最终数据的准确 性。越是精密的仪器，要求泵的工作状 态越稳定。要求流量的误差应该低于 0.01mL/min。
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色谱柱：
GPC仪分离的核心部件。是在一根不锈钢空心 细管中加入孔径不同的微粒作为填料。
聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开基本原理基本原理分离原理流动分离分离原理体积排除色谱secsizeexclusionchromatography让被测量的高聚物溶液通过一根内装不同孔径的色谱柱柱中可供分子通行的路径有粒子间的间隙较大和粒子内的通孔较小
凝胶渗透色谱法
Gel Permeation Chromatography (GPC)
[η]1M1=[η]2M2 k1M1α1+1=k1M2α2+1 两边取对数：lgk1+(α1+1)lgM1=lgk2+(α2+1)lgM2 即如果已知标准样和被测高聚物的k、α值，就可 以由已知相对分子质量的标准样品M1标定待测样品的 相对分子质量M2。
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实验部分
GPC仪的组成：
泵系统、（自动）进样系统、凝 胶色谱柱、检测系统和数据采集 与处理系统。
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校正原理
用已知相对分子质量的单分散标准聚合物 预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质 量对应关系曲线，该线称为“校正曲线”。聚 合物中几乎找不到单分散的标准样，一般用窄 分布的试样代替。在相同的测试条件下，做一 系列的GPC标准谱图，对应不同相对分子质量 样品的保留时间，以lgM对t作图，所得曲线即 为“校正曲线”。通过校正曲线，就能从GPC 谱图上计算各种所需相对分子质量与相对分子 质量分布的信息。
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凝胶色谱技术凝胶色谱法凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分技术, 由于设备简单、操作方便, 不需要有机溶剂, 对高分子物质有很高的分离效果。
当前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用, 不但应用于科学实验研究, 而且已经大规模地用于工业生产。
一、基本理论( 一) 分子筛效益一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时, 各分子在柱内同时进行着两种不同的运动: 垂直向下的移动和无定向的扩散运动。
大分子物质由于直径较大, 不易进入凝胶颗粒的微孔, 而只能分布颗粒之间, 因此在洗脱时向下移动的速度较快。
小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外, 还能够进入凝胶颗粒的微孔中, 即进入凝胶相内, 在向下移动的过程中, 从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒, 如此不断地进入和扩散, 小分子物质的下移速度落后于大分子物质, 从而使样品中分子大的先流出众谱柱, 中等分子的后流出, 分子最小的最后流出, 这种现象叫分子筛效应。
具有多孔的凝胶就是分子筛。
各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围, 有最大极限和最小极限。
分子直径比凝胶最大孔隙直径大的, 就会全部被排阻在凝胶颗粒之外, 这种情况叫全排阻。
两种全排阻的分子即使大小不同, 也不能有分离效果。
直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。
如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙, 即使它们的大小有差别, 也不会有好的分离效果。
因此, 一定的分子筛有它一定的使用范围。
综上所述, 在凝胶色谱中会有三种情况, 一是分子很小, 能进入分子筛全部的内孔隙; 二是分子很大, 完全不能进入凝胶的任何内孔隙; 三是分子大小适中, 能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。
大、中、小三类分子彼此间较易分开, 但每种凝胶分离范围之外的分子, 在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。
对于分子大小不同, 但同属于凝胶分离范围内各种分子, 在凝胶床中的分布情况是不同的: 分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内, 而分子的可进入较多的凝胶颗粒内, 这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短, 分子较小的移动距离较长。
于是分子较大的先经过凝胶床而分子较小的后经过凝胶床, 这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。
另外, 凝胶本身具有三维网状结构, 大的分子在经过这种网状结构上的孔隙时阻力较大, 小分子经过时阻力较小。
分子量大小不同的多种成份在经过凝胶床时, 按照分子量大小”排队, 凝胶表现分子筛效应。
( 二) 色谱柱的重要参数⑴柱体积: 柱体积是指凝胶装柱后, 从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。
在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床, 因引柱体积又称”床”体积, 常见Vt 表示。
⑵外水体积: 色谱柱内凝胶颗粒间隙, 这部分体积称外水体积, 亦称间隙体积,常见Vo表示。
⑶内水体积: 因为凝胶为三维网状结构, 颗粒内部仍有空间, 液体可进入颗粒内部, 这就分间隙的总和为内水体积, 又称定相体积, 常见Vi表示。
不包括固体支持物的体积( Vg) 。
⑷峰洗脱体积: 是指被分离物质经过凝胶柱所需洗脱液有体积, 常见Ve 表示。
当使用样品的体积很少时, ( 与洗脱体积比较能够忽略不计) , 在洗脱图中, 从加样到峰顶位置所用洗脱液体积为Ve。
当样品体积与洗脱体积比较不能忽略时, 洗脱体积计算能够从样品体积的一半到峰顶位置。
当样品很大时, 洗脱体积计算能够从应用样品开始到洗脱峰升高的弯曲点( 或半高处) 。
二、凝胶的种类及性质( 一) 交联葡聚糖凝胶( Sephadex)⑴Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephndex, 不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示, G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。
例如, G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克, 同样G-200克每克千胶吸水20克。
交联葡聚糖凝胶的种类有G-10, G-15, G-25, G-50, G-75, G-100, G-150, 和G-200。
因此, ”G”反映, 凝胶的交联程度, 膨胀程度及分部范围。
⑵Sephadex LH-20, 是─Sephadex G-25的(--CH2CH3COOH)羧丙基衍生物, 能溶于水及亲脂溶剂, 用于分离不溶于水的物质。
( 二) 琼脂糖凝胶:商品名很多, 常见的有, Sepharose( 瑞典, pharmacia ) , Bio-Gel-A(美国Bio-Rad) 等。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。
一般情况下, 它的结构是稳定的, 能够在许多条件下使用( 如水, pH4-9范围内的盐溶液) 。
琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化, 也不能高压消毒, 可用化学灭菌活处理。
( 三) 聚丙烯酰胺凝胶:是一种人工合成凝胶, 是以丙烯酰胺为单位, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,经干燥粉碎或加工成形制成粒状, 控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。
交联剂越多, 孔隙越小。
聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶－P ( Bio-Gel P) ,由美国Bio-Rod厂生产, 型号很多, 从P-2至P-300共10种, P 后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。
( 四) 聚苯乙烯凝胶商品为Styrogel , 具有大网孔结构, 可用于分离分子量1600到40, 000, 000的生物大分子, 适用于有机多聚物, 分子量测定和脂溶性天然物的分级, 凝胶机械强度好, 洗脱剂可用甲基亚砜。
三、实验技术( 一) 层析柱层析柱是凝胶层析技术中的主体, 一般用玻璃管或有机玻璃管。
层析柱的直径大小不影响分离度, 样品用量大, 可加大柱的直径, 一般制备用凝胶柱, 直径大于2厘米, 但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
另外,直径加大, 洗脱液体体积增大, 样品稀释度大。
分离度取决于柱高, 为分离不同组分, 凝胶柱床必须有适宜的高度, 分离度与柱高的平方根相关, 但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞, 一般不超过1米。
分族分离时用短柱, 一般凝胶柱长20-30厘米, 柱高与直径的比较5:1─10:1, 凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。
分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1, 常见凝胶柱有50×25厘米, 10×25厘米。
层析柱滤板下的死体积应尽可能的小, 如果支掌滤板下的死体积大, 被分离组分之间重新混合的可能性就大, 其结果是影响洗脱峰形, 出现拖尾出象, 降低分辩力。
在精确分离时, 死体积不能超过总床体积的1/1000。
( 二) 凝胶的选择根据所需凝胶体积, 估计所需干胶的量。
一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍, 例如Sephadex G-20的吸水量为20, 1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。
凝胶的粒度也可影响层析分离效果。
粒度细胞分离效果好, 但阻力大, 流速慢。
一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的Sephadex G-200效果好, 脱盐用Sephadex G-25、 G-50, 用粗粒, 短柱, 流速快。
( 三) 凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。
为了加速膨胀, 可用加热法, 即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸, 这样可大大中速膨胀, 一般在1-2小时内即可完成。
特别是在使用软胶时, 自然膨胀需24小时至数天, 而用加热法在几小时内就可完成。
这种方法不但节约时间, 而且还可消毒, 除去凝胶中污染的细菌和排除胶内的空气。
( 四) 样品溶液的处理样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去, 如含脂类可高速离心或经过Sephadex G-15短柱除去。
样品的粘度不可大, 含蛋白为超过4％, 粘度高影响分离效果。
上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。
分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4％( 一般约0.5-2ml) , 进行分族分离时样品液可为凝胶床的10％, 在蛋白质溶液除盐时, 样品可达凝胶床的20-30％。
分级分离样品体积要小, 使样品层尽可能窄, 洗脱出的峰形较好。
( 五) 防止微生物的污染交联葡聚糖和琼脂糖都是多糖类物质, 防止微生物的生长, 在凝胶层析中十分重要, 常见的抑菌剂有:⑴叠氨钠( NaN3) 在凝胶层析中只要用0.02％叠氮钠已足够防止微生物的生长, 叠氮钠易溶一水, 在20℃时约为40％; 它不与蛋白质或碳水化合物相互作用, 因此叠氮钠不影响抗体活力; 不会改变蛋白质和碳水化合物的层析我特性。
叠氮钠可干扰荧光标记蛋白质。
⑵可乐酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]在凝胶层析中使用浓度为0.01-0.02％。
在微酸性溶液中它的杀菌效果最佳, 在强碱性溶液中或温度高于60℃时易引起分解而失效。
⑶乙基汞代巯基水杨酸钠在凝胶层析中作为抑菌剂使用浓度为0.05-0. 01％。
在微酸性溶液中最为有效。
重金属离子可使乙基代巯基的物质结合, 因而包含疏基的蛋白质可在不同程度上降低它的抑菌效果。
⑷苯基汞代盐在凝胶层析中使用浓度为0.001-0.01％。
在微碱性溶液中抑效果最佳, 长时间放置时可与卤素、硝酸根离子作用而产生沉淀; 还原剂可引起此化合物分解; 含疏基的物质亦可降低或抑制它的抑菌作用。
1、 DEAE阴离子交换纤维素( 1) 纤维素的处理取纤维素干品用蒸馏水浸泡, 充分溶涨并搅拌均匀, 过夜。
次日再搅匀, 静止30min留下沉集部分( 重复3次) , 用真空泵抽干。
然后用适量的0.5mol/L的氢氧化钠溶液浸泡30min, 抽干, 蒸馏水洗至中性; 再用适量的0.5mol/L的盐酸溶液浸泡30min, 抽干, 蒸馏水洗至中性; 重复用0.5mol/L的氢氧化钠溶液浸泡30min, 抽干, 蒸馏水洗至中性。
最后用0.005mol/L pH6.0的磷酸缓冲液浸泡待用。
( 2) 纤维素的重生回收的纤维素先用0.5mol/L氯化钠-0.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡, 再按上述( 1) 操作处理, 即可再次投入使用。
( 3) 纤维素的保存回收后, 用0.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡30min后, 蒸馏水洗至中性, 抽干, 于鼓风干燥箱中60℃烘干后, 保存。
2、 SephadexG型葡聚糖凝胶( 1) 凝胶的特性要点葡聚糖G后面的数字代表不同的交联度, 数值越大交联度越小, 吸水量越大。
其数值大致为吸水量X的10倍。
Sephadex对碱和弱酸稳定( 在0.1mol/L盐酸中能够浸泡1～2小时) 。
在中性时能够高压灭菌。
不同型号中又有颗粒粗细之分。
颗粒粗的分离效果差, 流速快。
颗粒越细分离效果越好, 但流速也越慢。
交联葡聚糖工作时的pH稳定在2～11的范围内。