WiRE 4操作说明 中文
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Figure 4 最新的 Renishaw 摄像头 5
Figure 5 摄像头设置
选择 auto exposure 会根据成像对比度和亮度调节曝光，但不一定适用于所有样品，因为这时视场 光阑是关闭状态，自动模式不断搜索（不能产生一个稳定的曝光值）。这种情况下，将自动曝光 关掉。 摄像头窗口可以改变大小来平衡成像的分辨率和成像大小。点击 Video capture pin、选择显示分 辨率。确保摄像头的纵横比保持不变，因为会影响摄像头校准。
TM001-System Start-up
此模块详细介绍的拉曼光谱的操作步骤，从激光器、电脑软件的开启到整个系统运行后能够进行 拉曼光谱、光致发光及成像信息。 前提：与 inVia 拉曼光谱仪使用相关的所有电子组件最初为关闭状态，使用者有一定的 WiRE 4 使 用经验。
系统开启
1. 开机：打开仪器总开关，总开关在仪器的右手边。（CCD 制冷到正常工作温度需要 20 分钟） 2. 开电脑，开软件。 3. 软件开启后，系统所有相关马达开始位置检测。 4. 开激光器：打开需要使用的激光器，确保所有的钥匙或者开关的正确使用。（激光器的使用
激光开关控制 物镜选择（需手动转动物镜实物） 观察过程中的激光功率控制 观察过程中的扩束控制 选择激光器 选择光栅 inVia 型号的仪器，激光偏振的控制、CCD 探测器的选择也是可见的。
Figure 1 inVia 样品观察工具栏
除此之外，inVia Reflex 样品观察工具栏还包括： 目镜和摄像头观察（仅白光成像） 仅用摄像头观察（白光成像和激光） 激光聚焦的内置校准硅片观察 照明光亮度（开/关和强度） 孔径光阑控制 视场光阑控制（科勒照明）
3
Figure 2 inVia Reflex 样品观察对话框
无论是利用手动还是通过样品观察工具栏调节，照明光控制、孔径光阑、视场光阑和摄像头控制 等功能均是用来辅助聚焦和观察样品，以及生成高质量白光成像的。 可以通过调节视场光阑来聚焦样品，白光成像和激光聚焦。 一般来说，先利用低倍物镜（例，5×）来观察样品。如果样品形貌有特征，可以直接用白光成像 来聚焦。关闭视场光阑会减小视场，产生一个八角的环。当环的边缘非常尖锐时，样品处于聚焦 的状态，这对于用来观察样品形貌没有特征的样品很有用。 对于多数可见和近红外激光器，激光斑点和白光成像是同时聚焦的。因此，激光焦点聚焦在样品 上时，白光也聚焦。 可以通过移动样品的位置，观察摄像头视场平衡变化来检查样品聚焦。然后通过较高倍物镜，再 次聚焦，直到应用到用来采集数据的物镜。 得到最好的白光成像需要根据不同的样品（不同颜色和反射率）合理控制照明光和摄像头设置。 关闭孔径光阑使对比度提高，但是损失亮度。对于多数样品来说，应该关闭孔径光阑来提高成像 质量。用户可以通过调节摄像头特点来优化曝光和增益等参数。一般来说，通过自动调节可以得 到好的成像质量（注意这时帧频会降低摄像头响应能力）。 检查摄像头特点，右击摄像头成像，选择 Video properties。
注：标准应用条件下，打开仪器主机门将触动所有的激光联锁，除非激光开关关闭。如果联锁被 锁，关闭并重新锁住主机门，重新应用激光联锁。（Tools….Interlock…..Reset）
7
5. 换‘Grating’。（注：这不会引起透镜组变化，除非多个光栅已经匹配到同一激光器）
当然，如果配置与测量时需要使用的配置是一致的，没必要改变，上面一步可以跳过。
此模块详细介绍了采用 WiRE 4 如何设置不同的测量参数进行光谱测量。
确定测量类型
Measurement 是用来确定数据采集模式的。根据仪器的具体配置可以选择几种不同的模式。新的 测量可以通过菜单中的 Measurement……New……打开，也可以通过工具栏打开。
Figure 1 工具栏中开始测量
选择合适的测量模式后，出现测量设置对话框。此对话框包括所有的标准设置的选项，如 Range, Acquisition, File 和 Advanced。
Range 范围 Range 选项包括基本的设置，包括激光、所用光栅和所用扫描模式。
9
Figure 3 Range 选项
1. Grating scan type 有两种扫描类型 Static 一次取谱可以覆盖 400 cm-1 到 1000 cm-1，取决于使用的激发波长和光栅，只需 输入需要的中心波长。一次静态取谱比扫描取谱快，但一次取谱覆盖的光谱范围有限。 Extended 扫描取谱可以扫描输入的最高与最低波数之间的光谱范围，当静态取谱不能 覆盖需要的波数范围时使用。
要自检）。 3. 待激光器预热稳定后才能开始实验。
系统所有部件打开后，等待系统稳定，即可进行光谱测量。
2
TM002-Sample Viewing and Configuration Change
此模块详细介绍如下操作： 1. 利用雷尼绍摄像头观察不同类型的样品 2. 选择不同的激光器/光栅/CCD 摄像头配置
2. Configuration：使用者可以根据需要选择合适的激光器和光栅。不同的激光器具有不同的能量， 可能引起不等量的荧光干扰。
3. Confocality：给出用户标准共焦和高共焦两种选择。共焦程度决定了信号收集的区域大小。高 共焦收集信号的区域小，可以提高空间分辨率，比如做深度扫描，但会损失信号强度。
更改配置工具栏
1. 确保所有的文件和窗口关闭（检查是否有文件未保存） 2. 决定需要的配置 3. 换‘Laser’.（注：改变激光不仅改变激光器波长，对于相同的波长还要改变滤波片类型和光斑
的形状）。
4. 改变激光器时将会出现一个对话框提示用户改变相应的光谱仪透镜（如果需要改变）。如果这 个对话框出现，打开仪器（仪器激光开关会自动关闭），仔细更换透镜组。确保透镜更换到正 确的位置。关闭仪器主机门，锁好。
前提：使用者有一定的 WiRE 4 使用经验。
观察样品
inVia 和 inVia Reflex 拉曼光谱仪均可以通过目镜或者摄像头直接观察样品。 观察样品的模式可以通过 WiRE 软件中样品观察工具栏控制。 样品观察工具栏可以从 View 菜单中打开也可以直接点击 inVia 的样品观察工具栏 Sample Review 包括以下内容：
参照激光器使用说明书）
选择“Reference un-referenced motors only”，确定“OK”。 5. WiRE 3 软件完全打开后，激光器的 interlock 锁才能正常使用。
1
部分系统开始运行
很多情况下，准备使用仪器时，发现系统的一部分已经开启，这时开机步骤相应发生一定变化。 下面是几个例子，同时给出完全开机的正确步骤。 例1 inVia 光谱仪、电脑、软件全开着，所有激光器均关闭。 1. 清除 Wire 软件中所有的数据和窗口（保证所有的数据都保存）。 2. 打开需要使用的激光器。 3. 待激光器输出稳定后开始使用。
Figure 2 菜单中开始测量
可用的测量的不同模式
光谱采集（标准光谱采集） 直接成像采集 深度序列采集（样品不同深度采集光谱，仅 Z 方向） 扫描成像/StreamLineHR 扫描（水平面内光谱采集） StreamLine 扫描（水平面内高速光谱采集） StreamLineHR 3D 扫描
选择配置
Sample Review 显示当前的仪器配置（激光/光栅），也可以改变配置。
Figure 6 inVia Reflex 样品观察条
更改配置
配置的改变需要用户了解使用的激光器、光栅和探测器。有些配置是不合适的，当用户使用时， 会出现一个对话框提醒用户这种配置没被校准。（因此是不能用的）
6
激光器改变时，根据系统的类型会发生下面的一条或者几条： Beamsteer 自动变化（仅当相应 beamsteer 已被设置时） Rayleigh 滤波片自动变化（仅当 Rayleigh 滤波片已被设置时） 扩束器自动变化（所有，紫外激光光路中有时没有扩束） 激光开关自动变化（所有） 内部校准硅片自动聚焦（仅 Reflex 型号） Renishaw inVia 光谱仪具有很高的灵活性，可升级，因此从前面配置中可得到所需要的自动化程 度。手动，半自动，全自动，全自动有效选择都是可以的。对于没有自动 rayleigh 滤波片的 inVia 仪器，用户必须打开仪器主机门（参考仪器主机门的开启和激光联锁的安全操作说明），手动更 换新波长的 rayleigh 滤波片。一些仪器具有自动转化模块，但是所有位置都被占据，在更换新滤 波片时也需要手动更换。 光栅更换时，相关的软件部分发生变化，但是机械部分没有发生变化。光栅会影响光谱范围和光 谱分辨率。对于所有 inVia 拉曼光谱仪，光栅更换的步骤是相同的。对于配有两块以上光栅的仪 器，用户必须手动更换光栅完成想要的配置。光栅背靠背安装，分开时需小心谨慎。任一光栅只 能被安装在两个位置中的一个上（仪器设计时确定）。手动安装/更换光栅：取下光谱仪外壳，插 上光栅保护罩，取下光栅，分开，安装新的光栅，取下光栅保护罩，重新盖好锁住主机外壳。
4
Figure 3 摄像头特性
在 video viewer properties 窗口，可以应用 use averaging。对于暗的对比度低的样品可以降低噪音， 但是会影响摄像头响应。 Capture filter properties 包括不同的摄像头设置。对于最近的摄像头（Figure 4），将增益设置到 high， 根据需要调节曝光。
配置更改（测量过程中）
配置也可以在编辑当前测量时改变。当用户需要利用不同激发波长分析同一样品同一区域时，是 很有用的。
利用测量设置按钮
，在 Acquisition 选项中编辑激光和光栅（更换激光后，激光功率、曝光
时间和次数需要重新设置）。如果透镜组不匹配，运行编辑好的测量时会提示用户更换透镜。
8
TM003-Measurement Set-up and Data Acquisition
例2 inVia 拉曼光谱仪、电脑和所有激光器都开着，软件 WiRE 关闭。 1. 打开 WiRE（这时不需自检，因为这种状态下，所有的马达均已被软件识别出，没必要自检）。 2. 激光状态不变，所有激光器不需要关闭。 3. 系统可以直接使用。
例3 inVia 光谱仪和电脑开着，软件与所有激光器均处于关闭状态。 1. 打开需要使用的激光器。 2. 运行 WiRE 软件（这时不需要自检，因为这种状态下，所有的马达均已被软件识别出，没必
InVia 拉曼光谱仪操作说明
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
WiRE4
INDEX
TM001-System Start-up……………….………………………….……………..……………………………….1 TM002-Sample Viewing and Configuration Change………………………………………………….3 TM003-Measurement Set-up and Data Acquisition………………………………………………….9 TM004-Depth Profiling……………………………………………………………………………………………16 TM005-White Light Image Capture, Montaging and Surface generation ……………… 19 TM006-Point Imaging……………………………………………………………………………………………..31 TM007-Data Processing and Simple Analysis…………………………………………………………..34 TM008-Multi-file processing……………………………………………………………………………………47 TM009-Multi-file Data Analysis (Univariate)……………………………………………………..…….58 TM010-Database Searching and Creation……………………………………………………….…….61
Figure 5 摄像头设置
选择 auto exposure 会根据成像对比度和亮度调节曝光，但不一定适用于所有样品，因为这时视场 光阑是关闭状态，自动模式不断搜索（不能产生一个稳定的曝光值）。这种情况下，将自动曝光 关掉。 摄像头窗口可以改变大小来平衡成像的分辨率和成像大小。点击 Video capture pin、选择显示分 辨率。确保摄像头的纵横比保持不变，因为会影响摄像头校准。
TM001-System Start-up
此模块详细介绍的拉曼光谱的操作步骤，从激光器、电脑软件的开启到整个系统运行后能够进行 拉曼光谱、光致发光及成像信息。 前提：与 inVia 拉曼光谱仪使用相关的所有电子组件最初为关闭状态，使用者有一定的 WiRE 4 使 用经验。
系统开启
1. 开机：打开仪器总开关，总开关在仪器的右手边。（CCD 制冷到正常工作温度需要 20 分钟） 2. 开电脑，开软件。 3. 软件开启后，系统所有相关马达开始位置检测。 4. 开激光器：打开需要使用的激光器，确保所有的钥匙或者开关的正确使用。（激光器的使用
激光开关控制 物镜选择（需手动转动物镜实物） 观察过程中的激光功率控制 观察过程中的扩束控制 选择激光器 选择光栅 inVia 型号的仪器，激光偏振的控制、CCD 探测器的选择也是可见的。
Figure 1 inVia 样品观察工具栏
除此之外，inVia Reflex 样品观察工具栏还包括： 目镜和摄像头观察（仅白光成像） 仅用摄像头观察（白光成像和激光） 激光聚焦的内置校准硅片观察 照明光亮度（开/关和强度） 孔径光阑控制 视场光阑控制（科勒照明）
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Figure 2 inVia Reflex 样品观察对话框
无论是利用手动还是通过样品观察工具栏调节，照明光控制、孔径光阑、视场光阑和摄像头控制 等功能均是用来辅助聚焦和观察样品，以及生成高质量白光成像的。 可以通过调节视场光阑来聚焦样品，白光成像和激光聚焦。 一般来说，先利用低倍物镜（例，5×）来观察样品。如果样品形貌有特征，可以直接用白光成像 来聚焦。关闭视场光阑会减小视场，产生一个八角的环。当环的边缘非常尖锐时，样品处于聚焦 的状态，这对于用来观察样品形貌没有特征的样品很有用。 对于多数可见和近红外激光器，激光斑点和白光成像是同时聚焦的。因此，激光焦点聚焦在样品 上时，白光也聚焦。 可以通过移动样品的位置，观察摄像头视场平衡变化来检查样品聚焦。然后通过较高倍物镜，再 次聚焦，直到应用到用来采集数据的物镜。 得到最好的白光成像需要根据不同的样品（不同颜色和反射率）合理控制照明光和摄像头设置。 关闭孔径光阑使对比度提高，但是损失亮度。对于多数样品来说，应该关闭孔径光阑来提高成像 质量。用户可以通过调节摄像头特点来优化曝光和增益等参数。一般来说，通过自动调节可以得 到好的成像质量（注意这时帧频会降低摄像头响应能力）。 检查摄像头特点，右击摄像头成像，选择 Video properties。
注：标准应用条件下，打开仪器主机门将触动所有的激光联锁，除非激光开关关闭。如果联锁被 锁，关闭并重新锁住主机门，重新应用激光联锁。（Tools….Interlock…..Reset）
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5. 换‘Grating’。（注：这不会引起透镜组变化，除非多个光栅已经匹配到同一激光器）
当然，如果配置与测量时需要使用的配置是一致的，没必要改变，上面一步可以跳过。
此模块详细介绍了采用 WiRE 4 如何设置不同的测量参数进行光谱测量。
确定测量类型
Measurement 是用来确定数据采集模式的。根据仪器的具体配置可以选择几种不同的模式。新的 测量可以通过菜单中的 Measurement……New……打开，也可以通过工具栏打开。
Figure 1 工具栏中开始测量
选择合适的测量模式后，出现测量设置对话框。此对话框包括所有的标准设置的选项，如 Range, Acquisition, File 和 Advanced。
Range 范围 Range 选项包括基本的设置，包括激光、所用光栅和所用扫描模式。
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Figure 3 Range 选项
1. Grating scan type 有两种扫描类型 Static 一次取谱可以覆盖 400 cm-1 到 1000 cm-1，取决于使用的激发波长和光栅，只需 输入需要的中心波长。一次静态取谱比扫描取谱快，但一次取谱覆盖的光谱范围有限。 Extended 扫描取谱可以扫描输入的最高与最低波数之间的光谱范围，当静态取谱不能 覆盖需要的波数范围时使用。
要自检）。 3. 待激光器预热稳定后才能开始实验。
系统所有部件打开后，等待系统稳定，即可进行光谱测量。
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TM002-Sample Viewing and Configuration Change
此模块详细介绍如下操作： 1. 利用雷尼绍摄像头观察不同类型的样品 2. 选择不同的激光器/光栅/CCD 摄像头配置
2. Configuration：使用者可以根据需要选择合适的激光器和光栅。不同的激光器具有不同的能量， 可能引起不等量的荧光干扰。
3. Confocality：给出用户标准共焦和高共焦两种选择。共焦程度决定了信号收集的区域大小。高 共焦收集信号的区域小，可以提高空间分辨率，比如做深度扫描，但会损失信号强度。
更改配置工具栏
1. 确保所有的文件和窗口关闭（检查是否有文件未保存） 2. 决定需要的配置 3. 换‘Laser’.（注：改变激光不仅改变激光器波长，对于相同的波长还要改变滤波片类型和光斑
的形状）。
4. 改变激光器时将会出现一个对话框提示用户改变相应的光谱仪透镜（如果需要改变）。如果这 个对话框出现，打开仪器（仪器激光开关会自动关闭），仔细更换透镜组。确保透镜更换到正 确的位置。关闭仪器主机门，锁好。
前提：使用者有一定的 WiRE 4 使用经验。
观察样品
inVia 和 inVia Reflex 拉曼光谱仪均可以通过目镜或者摄像头直接观察样品。 观察样品的模式可以通过 WiRE 软件中样品观察工具栏控制。 样品观察工具栏可以从 View 菜单中打开也可以直接点击 inVia 的样品观察工具栏 Sample Review 包括以下内容：
参照激光器使用说明书）
选择“Reference un-referenced motors only”，确定“OK”。 5. WiRE 3 软件完全打开后，激光器的 interlock 锁才能正常使用。
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部分系统开始运行
很多情况下，准备使用仪器时，发现系统的一部分已经开启，这时开机步骤相应发生一定变化。 下面是几个例子，同时给出完全开机的正确步骤。 例1 inVia 光谱仪、电脑、软件全开着，所有激光器均关闭。 1. 清除 Wire 软件中所有的数据和窗口（保证所有的数据都保存）。 2. 打开需要使用的激光器。 3. 待激光器输出稳定后开始使用。
Figure 2 菜单中开始测量
可用的测量的不同模式
光谱采集（标准光谱采集） 直接成像采集 深度序列采集（样品不同深度采集光谱，仅 Z 方向） 扫描成像/StreamLineHR 扫描（水平面内光谱采集） StreamLine 扫描（水平面内高速光谱采集） StreamLineHR 3D 扫描
选择配置
Sample Review 显示当前的仪器配置（激光/光栅），也可以改变配置。
Figure 6 inVia Reflex 样品观察条
更改配置
配置的改变需要用户了解使用的激光器、光栅和探测器。有些配置是不合适的，当用户使用时， 会出现一个对话框提醒用户这种配置没被校准。（因此是不能用的）
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激光器改变时，根据系统的类型会发生下面的一条或者几条： Beamsteer 自动变化（仅当相应 beamsteer 已被设置时） Rayleigh 滤波片自动变化（仅当 Rayleigh 滤波片已被设置时） 扩束器自动变化（所有，紫外激光光路中有时没有扩束） 激光开关自动变化（所有） 内部校准硅片自动聚焦（仅 Reflex 型号） Renishaw inVia 光谱仪具有很高的灵活性，可升级，因此从前面配置中可得到所需要的自动化程 度。手动，半自动，全自动，全自动有效选择都是可以的。对于没有自动 rayleigh 滤波片的 inVia 仪器，用户必须打开仪器主机门（参考仪器主机门的开启和激光联锁的安全操作说明），手动更 换新波长的 rayleigh 滤波片。一些仪器具有自动转化模块，但是所有位置都被占据，在更换新滤 波片时也需要手动更换。 光栅更换时，相关的软件部分发生变化，但是机械部分没有发生变化。光栅会影响光谱范围和光 谱分辨率。对于所有 inVia 拉曼光谱仪，光栅更换的步骤是相同的。对于配有两块以上光栅的仪 器，用户必须手动更换光栅完成想要的配置。光栅背靠背安装，分开时需小心谨慎。任一光栅只 能被安装在两个位置中的一个上（仪器设计时确定）。手动安装/更换光栅：取下光谱仪外壳，插 上光栅保护罩，取下光栅，分开，安装新的光栅，取下光栅保护罩，重新盖好锁住主机外壳。
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Figure 3 摄像头特性
在 video viewer properties 窗口，可以应用 use averaging。对于暗的对比度低的样品可以降低噪音， 但是会影响摄像头响应。 Capture filter properties 包括不同的摄像头设置。对于最近的摄像头（Figure 4），将增益设置到 high， 根据需要调节曝光。
配置更改（测量过程中）
配置也可以在编辑当前测量时改变。当用户需要利用不同激发波长分析同一样品同一区域时，是 很有用的。
利用测量设置按钮
，在 Acquisition 选项中编辑激光和光栅（更换激光后，激光功率、曝光
时间和次数需要重新设置）。如果透镜组不匹配，运行编辑好的测量时会提示用户更换透镜。
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TM003-Measurement Set-up and Data Acquisition
例2 inVia 拉曼光谱仪、电脑和所有激光器都开着，软件 WiRE 关闭。 1. 打开 WiRE（这时不需自检，因为这种状态下，所有的马达均已被软件识别出，没必要自检）。 2. 激光状态不变，所有激光器不需要关闭。 3. 系统可以直接使用。
例3 inVia 光谱仪和电脑开着，软件与所有激光器均处于关闭状态。 1. 打开需要使用的激光器。 2. 运行 WiRE 软件（这时不需要自检，因为这种状态下，所有的马达均已被软件识别出，没必
InVia 拉曼光谱仪操作说明
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
WiRE4
INDEX
TM001-System Start-up……………….………………………….……………..……………………………….1 TM002-Sample Viewing and Configuration Change………………………………………………….3 TM003-Measurement Set-up and Data Acquisition………………………………………………….9 TM004-Depth Profiling……………………………………………………………………………………………16 TM005-White Light Image Capture, Montaging and Surface generation ……………… 19 TM006-Point Imaging……………………………………………………………………………………………..31 TM007-Data Processing and Simple Analysis…………………………………………………………..34 TM008-Multi-file processing……………………………………………………………………………………47 TM009-Multi-file Data Analysis (Univariate)……………………………………………………..…….58 TM010-Database Searching and Creation……………………………………………………….…….61