湿热灭菌验证与干热灭菌验证的比较

湿热灭菌验证与干热灭菌验证的对比

1、概念：

（1）湿热灭菌验证:主要是对产品、灭菌设备和装载方式的验证。验证活动包括：对照灭菌设备设计的灭菌参数来校核灭菌器的性能、建立某产品灭菌程序及装载方式的有效性和重现性、估计灭菌过程中产品可能发生的变化。（湿热灭菌（118-134℃）——蒸汽、过热水）（2）干热灭菌验证：主要用于内包装用的玻璃容器或金属制品的灭菌和去热源，所使用的灭菌程序应通过验证试验。(干热灭菌（160-320 ℃）——热空气)

2、验证目的：

（1）湿热：通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到产品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备过程和灭菌效果具有可靠性和重现性。主要适用于能耐受高温、高压饱和蒸汽的产品。

（2）干热：间歇式或隧道式热空气灭菌常用来处理可耐受较高温度而不适宜用湿热灭菌法的物品，如玻璃瓶、粉末、油类、玻璃器皿、不锈钢设备等。

3、灭菌原理：

（1）湿热灭菌—导致细胞内关键性蛋白质和酶发生热变性或凝固，湿度对该破坏性过程起促进作用。

（2）干热灭菌—使微生物氧化而不是蛋白质变性。

4、灭菌工艺：

（1）湿热：采用附加排气系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加真空系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加空气加压系统的饱和蒸汽灭菌工艺。

（2）干热：

1）残存几率法：该法以灭菌为目的。通常适用于热不稳定性物质。灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物残存几率为10 -6，即在一百万个已灭菌单元中，染菌单元的数目不得超过 1 个。

2）过度杀灭法：该法也以灭菌为目的。通常适用于耐热性能较好的物质。灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物的残存几率小于10 -6，“ 过度杀灭” 的灭菌程序所获得干热灭菌值F H 可使耐干热灭菌生物指示剂的总量下降 12 个对数单位。

3）无菌无热原法：该法的目的是达到无菌和无热原。鉴于要达到去热原的目的，通常采用较高的温度和较长的灭菌时间，因此灭菌程序完成后，物品的微生物残存几率将远远小于10 -6。热原下降 3 个对数单位。

5、常用的灭菌设备：

（1）湿热：蒸汽灭菌器、快冷式灭菌器、脉动真空灭菌器、水浴式灭菌器等。

（2）干热：对流间歇式，即干热灭菌烘箱、对流连续式，即隧道式干热灭菌器。

6、性能验证：

安装确认及运行确认一般由设备供货商与使用单位共同完成，供货商通过运行确认，将灭菌设备调至适当的工作状态，同时培训企业的人员。湿热和干热灭菌设备的性能确认则由使用单位完成。验证试验应根据设定的灭菌程序，证实待灭菌品灭菌运行的可靠性及灭菌程序的重现性。

（1）湿热：灭菌柜的热分布试验、各种待灭菌品在满载方式下的热穿透试验、确认蒸汽灭菌的效果试验等。

◆热分布试验：

热电偶校正：修正热分布试验的结果

空载热分布试验：至少采用10支标准热电偶做温度探头，

温差应≦±1℃

装载热分布试验：温差应≦±1.5℃

（空载指灭菌柜内不放置灭菌产品。空载热分布试验的目的是检查并确认灭菌器在预定的灭菌条件下，空载运行时灭菌柜内的温度均匀性符合产品工艺要求，确认灭菌器控制用传感器位于灭菌柜内的冷点位置。）

◆热穿透试验：

目的是确定灭菌柜装载中的最冷点，并确认该点在预定的灭菌条件中获得足够的无菌保证值。

（2）干热：空载热分布试验、装载热分布试验、热穿透试验和灭菌、去热源验证等。（干热灭菌烘箱的验证方法与湿热灭菌柜验证相似，

在不低于250℃空载运行时，腔室内各点的温差范围应不超过±15℃。）

空载热分布试验：温差应<±1℃

装载热分布试验：测定空气热分布状态和“冷点”、“热点”位置热穿透试验

灭菌、去热源验证

7、确认灭菌效果的试验：一般使用生物指示剂（又称微生物挑战性试验）来进行确认。

（1）所采用用的微生物

湿热：脂肪嗜热芽孢杆菌、生孢梭菌的耐热孢子、凝结芽

孢杆菌或枯草芽孢杆菌

干热：枯草杆菌黑色变种芽孢和大肠杆菌内毒素（2）验证灭菌效果的常用物理量

湿热：采用F0值进行验证（F0=△t*∑10(T-121)/10）

干热：采用F H值进行验证（F H=△t*∑10(T-T0)/Z，干热灭菌

时，Z值取20；去热源时，Z值取54），灭菌效果必

须保证F H值大于60min，去热源效果必须保证F H

值大于120min。

8、湿热与干热灭菌验证的效果分析：

湿热与干热各有特点，但总的说来，湿热的灭菌效果较干热好，所以使用也普遍。湿热较干热灭菌效果好的原因有：①蛋白质在含水多时易变性，含水量多，愈易凝固。②湿热穿透力强，传导快。

③蒸汽具有潜热，当蒸汽与被灭菌的物品接触时，可凝结成水而放出潜热，使湿度迅速升高，加强灭菌效果。同时，由于干热空气对微生物杀灭的效果远低于湿热蒸汽。所以，干热灭菌需要更高的温度或较长的时间。

9、湿热与干热灭菌验证的灭菌条件差异：

湿热: 121℃、15min或115℃、35min。

干热：160~170℃、2h以上；170~180℃、1h以上；250℃、45min以上。

10、无菌保证值

灭菌效果验证应能证明无菌保证值由于10-6，去热源效果验证应能证明无菌保证值由于10-12.