电生理实验室电极植入手术基本流程

动物头部电极植入手术操作流程

一、大鼠麻醉选择与使用：

1、麻醉剂选择：戊巴比妥钠 40～60mg/kg,体重小于300g时，可考虑55mg/kg或酌

情减少用量（2-3%浓度）；或乌拉坦1～1.5g/kg（20-25%浓度）

2、根据体重换算出麻药用量，注意所配药品浓度，根据需要的mg数，决定注射的ml.

3、给药途径：腹腔注射

4、操作流程：右手轻轻捉住大鼠尾巴，将大鼠放置在鼠笼上方或操作台上，待其安静后，可用左手的姆指和食指捏住耳后枕颈部皮肤即可提起，掌心向上将鼠体置于掌心中，用无名指和小指将鼠尾压住。腹腔注射位置：两大腿根部水平线，中线旁1-2cm.腹腔平面向上倾斜45°，插入时有落空感，回抽无血，匀速注入。

5、电极植入中麻醉维持：如手术时间过长，动物麻醉效果减轻时，可用乙醚适当吸入麻醉。

二、电极制作

实验中所用电极应预先准备，根据实验目的和要求，选择不同电极。

1、皮层电极，可选用小不锈钢螺钉（眼镜/手表用螺钉）

2、深部电极，采用绝缘金属丝制作

三、手术流程

1、术前准备：

（1）手术器件准备：

大、小手术剪各1把，弯头止血钳4-6把（用于暴露手术视野），手术刀柄及刀片，直止血钳1-2把（用于手术中夹持止血），持针器1把（用于皮肤缝合），手术针（弯针），缝线若干，小螺丝刀1把（用于固定螺钉电极），有齿镊1把，小手术镊1-2把，钻头1-2个（大小根据实验需要确定），手术盘（手术中放置手术器件）1个，器件盒1个（用于手术器件消毒保存）

上述手术器件需要进行消毒灭菌处理（高温高压消毒或75%酒精浸泡30分钟。（2）其它实验所需物品

玻璃器皿（盛水,用于丢弃毛发），消毒棉棒，明胶海绵（止血用，需要事先剪成小

块），小号培养皿1个（用于调制牙托粉），颅钻，手术台灯，加热垫（用于动物麻醉后保温），消毒手术巾若（用于保护手术视野），电极及接插件（事先制作好），废报纸若干（垫在大鼠下面，便于实验后清洁），动物台秤，普通剪刀，

2、实验药品准备

（1）麻药：事先按要求浓度配好，冰箱冷藏，手术前提前取出，温度低是适当加温（2）牙科水泥及牙科水（用于电极固定）

（3） 75%酒精，碘酒，用于手术部位皮肤消毒

（4）庆大霉素针剂或粉剂，电极植入完成后，皮肤缝合前的消炎处理

3、手术过程

（1）大鼠称重：

打开电子天平开关后，将称容器放在天平上，去皮清零。将大鼠放入容器中，待其静止后，读数。当读数稳定时，电子天平右下角显示出“g”，此时读数最为精确。

（2）麻醉

按公斤体重计算麻药剂量，腹腔注射给药（具体过程见第一条），约5分钟后，麻醉后观察颊捏反应，观察大鼠进入麻醉状态后，可以开始手术。

（3）除去手术部位的毛发

将麻醉后的大鼠俯卧在手术操作台上，用清水将头部毛发弄湿，用普通剪刀（或大手术剪）减去头部毛发，将剪下的毛发置入盛有清水的容器中），再用剃胡刀片去除毛发，尽量暴露手术视野（根据需要，暴露大鼠头部眼眶后，两耳内缘，至头骨根部的皮肤）（4）电极定位

用小镊子将大鼠口腔撑开，使其门齿固定在齿托上。调整大鼠头部位置，将左右两个耳棒分别对称插入大鼠左右耳道深部。将其头部固定住。

（5）皮肤消毒

取棉棒沾取适量碘酒，均匀的涂抹在剪毛的部位。再用棉棒沾取适量75%酒精在刚才擦拭过碘酒的部位进行消毒。用棉棒沾取适量75%酒精对手术刀进行擦拭，消毒待用。（6）切开皮肤、暴露手术视野

根据电极植入位置确定切口长度。右手拇指和食指持手术刀，左手食指和右手中指将皮肤固定。呈30°角由前向后快速均匀切开皮肤（用力适当，尽量一次性把皮肤切开，减少组织损伤）。如有出血应及时止血（棉球压迫或止血钳）。用4-6把弯止血钳于左右侧皮肤夹住以尽量暴露颅骨。相同的持刀方式，从前向后将筋膜切开。用刀背左右钝性

分离筋膜，减少出血。颅骨与皮肤切口之间用棉球充填，可适当使用止血海绵。

（7）电极坐标定位

以颅骨前囟为原点（眼眶后两耳内缘，冠狀缝与矢状缝交合区域的中点），根据事先确定的坐标位置，移动三维定位尺，观察定位针是否和矢状缝平行。

输入到预先设计的坐标定位表内，按照计算出的坐标进行标记定位，随后用颅骨钻进行钻孔。钻孔时，注意掌握速度。并用气囊吹一下颅骨表面，清除钻下的骨骨粉末。始终掌握好对电钻的速度。若有出血，及时用明胶止血棉止血（颅骨打穿时会有落空感，应及时停止钻孔）。

（8）电极植入

皮层电极安放：用小螺丝刀将不锈钢螺钉电极缓慢拧入，约一半的深度即可！（大概等于颅骨的厚度）

深部电极安放：将深部电极固定在定位仪上，确保电极丝是垂直的。调整定位仪，将电极引回前囟处定位深度。

（图谱上以此处硬脑膜为坐标0，前囟处颅骨厚度约为1.5mm）电极插入后即可用少量牙科水泥固定，注意不要堵塞邻近的孔。等牙科水泥干了后，依次固定剩余电极。

电极固定好后，用万用表检查电极的导通性，接入通道采集器检查信号的有无。（9）电极国定

检查并处理有无出血。将各电极按预先设定好的顺序插入到插件中。将电极丝围绕插件旋转，缠绕在一起。调制适量的牙科水泥，涂抹在电极丝上，将其固定在颅骨上。最后，用牙科水泥将插件固定在颅骨上。

（10）消毒处理与皮肤缝合

在缝合皮肤前，检查是否有出血或渗血，并加以处理。用庆大霉素均匀洒在创口部位，再用持针钳将插件前后两侧的皮肤缝合好。

（11）将大鼠放回笼子中观察，并注意保温，术后注意抗感染处理。手术后根据需要恢复10-14天后进行实验。

（12）清理手术台，对手术器械消毒待用。

注意事项：1、手术中注意动物保温

2、根据需要适当增加麻醉强度

3、术后护理，应待动物手术清醒后再将其放回动物房饲养，并加强护理次数，尽量减少动物因手术护理造成不当的死亡。