紫外可见分光光度计的原理与使用方法

紫外可见分光光度计的校准（一）
波长准确度的准确检查
同学们根据教师的要求用白纸片遮住光路，改变波长从750nm到 400nm，观察白纸片中颜色的变化。
谱钕滤光片吸收曲线
苯蒸汽的吸收曲线
紫外可见分光光度计的校准（二）
透射比正确度的检验
WK2Cr2O7 0.006000 % 的溶液的透射比
波长 /nm
紫外光源---氘灯(185-375 nm)
可见光源---钨灯(320-1000nm)
单色器
单色器：将光源发射的复合光分解成连续光谱并可从中选出任一波长 单色光的光学系统。 单色器主要由狭缝、色散元件 和透镜系统组成。 ➢ 色散元件是棱镜和反射光栅的组合 ➢ 狭缝和透镜系统控制光的方向
棱镜单色器 ➢ 利用不同波长的光在棱镜内折射 率不同将复合光色散为单色光。
光栅单色器 ➢ 一系列等宽、等距离的平行狭缝 ➢ 以光的衍射现象和干涉现象为基础（平面反射光栅和平面凹面光栅）
吸收池
吸收池：又叫比色皿，用于盛放待测溶液和决定透光液层 厚度的器件。
主要有石英吸收池和玻璃吸 收池两种。 在紫外区须采用石英吸收池， 可见区一般用吸收玻璃池。 主要规格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm
紫外可见分光光度计的特点
• 1 与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少， • 分析书读快。 • 2 灵敏度高 • 3 选择性好 • 4 精密度和准确度较高 • 5 用途广泛
紫外可见分光光度计的组成结构
组成结构
光源
单色器
吸Baidu Nhomakorabea池
检测器
信号显示系统
光源
光源：提供符合要求的入射光。 要求：在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱， 具有足 够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
紫外可见分光光度计的常见故障排除
紫外可见分光光度计的常见故障排除
相对校正法：
K2Cr2O7
用一套比色皿装待测试样的溶剂，以其中一个为参比，测定其他吸收池 的吸光度。
若吸光度为零，或相等，即可配对。
若不相等，可选最小吸光度值的作参比，测定其它的吸光度，求修正值 。
紫外可见分光光度计的日常维护，保养
对仪器工作环境的要求 稳固的工作台 温度、湿度合适
仪器保养和维护方法 仪器工作电源 光源使用注意事项 单色器使用注意事项 正确使用吸收池
235
257
313
温度 /℃
25
18.2
13.7
51.3
350 22.9
以0.001mol.L-1HClO4为参比，以1cm的石英比色皿做吸收 池，分别在235、257、313、350波长处测定相应溶液的透 射比。
紫外可见分光光度计的校准(三)
吸收池成套性检验
JJG178-96规定 ：石英吸收池：220nm、蒸馏水； 350nm、 0.001mol.L-1HClO4溶液； 玻璃吸收池：600nm、蒸馏水；
注意事项：手执两侧的毛面，盛放液体高度四分之三。
检测器
检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。 常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管。
光电池
光电管
光电倍增管
信号显示系统
信号显示器
以检流计或微安表指示仪表 数字显示和自动记录型装置
紫外可见分光光度计的操作步骤
打开电源开关 检验吸收池的成套性 （具体过程在后面内容中操作） 选择工作波长（按设定键，以及增加、减小按钮，进行设定）
选择测量方式（按方式键选择透射比模式与吸光度模式） 润洗比色皿，依次装入参比溶液和测量溶液 参比溶液于光路中，透射比模式下同时调0和100% 在吸光度模式下，测定测量溶液的吸光度
紫外可见分光光度计的原理与使用方法
目录
• 紫外可见分光光度计的原理 • 紫外可见分光光度计的组成结构 • 紫外可见分光光度计的操作步骤 • 紫外可见分光光度计的校准 • 紫外可见分光光度计的日常维护，保养 • 紫外可见分光光度计的常见故障排除
紫外可见分光光度计的原理
• 它是利用物质的分子或离子对某一波长 • 范围的光吸收作用，对物质进行定性分析， • 定量分析及结构分析，所依据的光谱 • 是分子或离子吸收入射光中特定波长的光 • 而产生的吸收光谱。 • 按照所吸收光的波长区域不同，分为 • 紫外分光光度法和可见光光度法，合称 • 为紫外-可见分光光度法