生物化学之新陈代谢概述
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饥饿状态下:R.Q?
糖尿病人:R.Q?
问题:若测得生物材料的R.Q接 近1,则表明能量主要来自于何 类物质分解?
2、代谢障碍实验(代谢途径阻断实验)
正常生物体的中间代谢过程中,中间产 物不会过多积累,不容易进行分析研究; 若用适当方法造成代谢障碍,阻断代谢 途径,则使中间产物积累,便于进行分 析研究。
(3)酶的专一性抑制剂
例子:碘乙酸是巯基酶的专一性抑 制剂,可抑制酵母的酒精发酵,造 成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮积 累。由此证明了酵解途径中1,6-二 磷酸果糖是三三裂解生成了三碳糖。
(4)利用药物造成异常动物实验 (病变动物法)
用人工方法使动物发生某一过程的 代谢障碍,然后给以一定量受试物 质,研究其中间代谢过程。
2、活体外实验
用从生物体分离出来的组织切片, 组织匀浆或体外培养的细胞、细胞器及 细胞抽提物进行中间代谢实验研究称为 活体外实验,用“in vitro”表示。
典型例子:糖酵解、三羧酸循环、氧化 磷酸化等。
(二)代谢途径的探讨方法
探讨物质代谢途径的常用方法有: 代谢平衡实验、代谢障碍实验、代谢物 质标记追踪实验、特征性酶鉴定实验、 核磁共振波实验等。其中最有效的是代 谢物质标记追踪实验和核磁共振实验。
生物化学
第一章
新陈代谢总论
一、新陈代谢的概念
(一)新陈代谢的概念
新陈代谢是生物体最基本的特征,是 生命存在的前提。
新陈代谢(metabolisim)的概念:
1、狭义概念:是指细胞内所发生的酶
促反应过程,称为中间代谢 (intermediary metabolisim)。
(这是代谢活动的主体,也是代谢研 究的主要内容)。
这是探索代谢途径最有效的方法。
标记方法有:化学标记法、同位素标记 法。
(1)化学标记法
1904年,德国F.Knoop首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径,提出著名的 脂肪酸β-氧化学说。
缺点:化学标记法使天然代谢物分子结
(2)同位素标记法
1941年,Rudolf Schoenheimer首次采用 同位素标记法进行实验。
容易突变;经济;简便等。
wenku.baidu.com
(2)使用抗代谢物
抗代谢物,又叫代谢拮抗物,或代谢 物结构类似物。其分子结构与代谢物 的分子结构类似。
实质:竞争性抑制剂。
例子:丙二酸是琥珀酸的抗代谢物, 能对琥珀酸脱氢酶发生很强的竞争性 抑制作用,造成代谢中间产物“琥珀 酸”积累,从而证明了TCA循环中有 生成琥珀酸这一反应步骤。
(二)新陈代谢的内容
1、包括:物质代谢和能量代谢。
(1)物质代谢:重点讨论各种生理活性 物质(如糖、蛋白质、脂类、核酸等) 在细胞内发生酶促反应的途径及调控机 理,包含旧分子的分解和新分子的合成;
(2)能量代谢:重点讨论光能或化学能 在细胞内向生物能(ATP)转化的原理和 过程,以及生命活动对能量的利用。
1、代谢平衡实验
通过活体内实验研究代谢物摄入和 产出排出的平衡关系,可以了解对代谢 物的利用能力及产物生成情况。
例如测定“呼吸商”(R.Q.)可以判断 体内能量利用情况。
R.Q.=产CO2量(升)/耗O2量(升)
糖类物质R.Q为1,脂肪R.Q为 0.7,蛋白质R.Q为0.8。人体正 常代谢时,R.Q介于0.85-0.95之 间,说明三大营养物质同时发生 了氧化分解。
阻断代谢途径的方法有:造成微生物营 养缺陷性、使用抗代谢物、专一性抑制 剂等。
(1)微生物营养缺陷性(微生物基因突 变型)
采取诱变剂使微生物的基因发生突变, 从而造成某种酶缺损,代谢途径中断, 缺损酶前面的中间产物会大量积累,致
应用实例:乳糖的代谢机理。
利用微生物的遗传突变型研究新 陈代谢机制,比利用其他生物有 以下优越性:
例子1:研究维生素缺乏症,可给以 缺乏某种维生素的饲料,若干天后 观察其病变情况,在加入该种维生 素,观察其症状有否好转,从而确 定该种维生素的功能。
例子2: “人工糖尿病”。
例子3:生糖氨基酸;
生酮氨基酸
3、代谢物标记追踪实验
将代谢底物分子适当“标记”,然后追 踪“标记”在细胞中的去向,就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 产物,生成了什么终产物。
(一)活体内实验和活体外实验
1、活体内实验(整体实验)
用整体生物材料或高等动物离体器官或 微生物细胞群体进行中间代谢实验研究 称为活体内实验,用“in vivo”表示。
活体内实验结果代表生物体在正常 生理条件下,在神经、体液等调节机制 下的整体代谢情况,比较接近生物体的 实际。
典型例子:1904年,德国化学家Knoop提 出的脂肪酸β-氧化学说。
但有许多代谢有共同途径, 称为“两用代谢途径” (amphibolic pathway)。
二、新陈代谢的研究方法
中间代谢的研究内容很多,研究目 的不同,所用的生物材料和实验方法也 不相同。为探讨代谢途径及其调节机理, 动物、植物、微生物材料都可以作为实 验对象。
根据实验材料的水平,常将实验分 为活体内实验和活体外实验。
能量代谢和物质代谢是同一过程的两个 方面,能量转化寓于物质转化过程之中, 物质转化必然伴有能量转化。
2、合成代谢(anabolism)分解 代谢(catabolism)
合成代谢和分解代谢并非简 单可逆反应,发生于细胞不同部 位(尤其是真核生物中最常见)。
例如:脂肪酸分解成乙酰辅酶A 是在线粒体中进行,而乙酰辅酶 A合成脂肪酸则在细胞浆中进行。
2、广义概念:是生物与外界环境进行 物质与能量交换的全过程。即:生物 体内所经历的一切化学变化。包括消 化、吸收、中间代谢及排泄等阶段。
新陈代谢包括生物体内所发生的
一切合成和分解作用。一方面,生物 体不断从周围环境中摄取物质,通过 一系列生化反应,转变为自己的组成 部分;另一方面,将原有的组成成分 经过一系列生化反应,分解成不能在 利用的物质排出体外,不断地进行自 我更新。生物体通过新陈代谢所产生 的生命现象是建立在合成代谢与分解 代谢矛盾对立和统一的基础上的,它 们之间既相互联系、相互依存,又相 互制约。
糖尿病人:R.Q?
问题:若测得生物材料的R.Q接 近1,则表明能量主要来自于何 类物质分解?
2、代谢障碍实验(代谢途径阻断实验)
正常生物体的中间代谢过程中,中间产 物不会过多积累,不容易进行分析研究; 若用适当方法造成代谢障碍,阻断代谢 途径,则使中间产物积累,便于进行分 析研究。
(3)酶的专一性抑制剂
例子:碘乙酸是巯基酶的专一性抑 制剂,可抑制酵母的酒精发酵,造 成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮积 累。由此证明了酵解途径中1,6-二 磷酸果糖是三三裂解生成了三碳糖。
(4)利用药物造成异常动物实验 (病变动物法)
用人工方法使动物发生某一过程的 代谢障碍,然后给以一定量受试物 质,研究其中间代谢过程。
2、活体外实验
用从生物体分离出来的组织切片, 组织匀浆或体外培养的细胞、细胞器及 细胞抽提物进行中间代谢实验研究称为 活体外实验,用“in vitro”表示。
典型例子:糖酵解、三羧酸循环、氧化 磷酸化等。
(二)代谢途径的探讨方法
探讨物质代谢途径的常用方法有: 代谢平衡实验、代谢障碍实验、代谢物 质标记追踪实验、特征性酶鉴定实验、 核磁共振波实验等。其中最有效的是代 谢物质标记追踪实验和核磁共振实验。
生物化学
第一章
新陈代谢总论
一、新陈代谢的概念
(一)新陈代谢的概念
新陈代谢是生物体最基本的特征,是 生命存在的前提。
新陈代谢(metabolisim)的概念:
1、狭义概念:是指细胞内所发生的酶
促反应过程,称为中间代谢 (intermediary metabolisim)。
(这是代谢活动的主体,也是代谢研 究的主要内容)。
这是探索代谢途径最有效的方法。
标记方法有:化学标记法、同位素标记 法。
(1)化学标记法
1904年,德国F.Knoop首次用苯环标记 脂肪酸探讨中间代谢途径,提出著名的 脂肪酸β-氧化学说。
缺点:化学标记法使天然代谢物分子结
(2)同位素标记法
1941年,Rudolf Schoenheimer首次采用 同位素标记法进行实验。
容易突变;经济;简便等。
wenku.baidu.com
(2)使用抗代谢物
抗代谢物,又叫代谢拮抗物,或代谢 物结构类似物。其分子结构与代谢物 的分子结构类似。
实质:竞争性抑制剂。
例子:丙二酸是琥珀酸的抗代谢物, 能对琥珀酸脱氢酶发生很强的竞争性 抑制作用,造成代谢中间产物“琥珀 酸”积累,从而证明了TCA循环中有 生成琥珀酸这一反应步骤。
(二)新陈代谢的内容
1、包括:物质代谢和能量代谢。
(1)物质代谢:重点讨论各种生理活性 物质(如糖、蛋白质、脂类、核酸等) 在细胞内发生酶促反应的途径及调控机 理,包含旧分子的分解和新分子的合成;
(2)能量代谢:重点讨论光能或化学能 在细胞内向生物能(ATP)转化的原理和 过程,以及生命活动对能量的利用。
1、代谢平衡实验
通过活体内实验研究代谢物摄入和 产出排出的平衡关系,可以了解对代谢 物的利用能力及产物生成情况。
例如测定“呼吸商”(R.Q.)可以判断 体内能量利用情况。
R.Q.=产CO2量(升)/耗O2量(升)
糖类物质R.Q为1,脂肪R.Q为 0.7,蛋白质R.Q为0.8。人体正 常代谢时,R.Q介于0.85-0.95之 间,说明三大营养物质同时发生 了氧化分解。
阻断代谢途径的方法有:造成微生物营 养缺陷性、使用抗代谢物、专一性抑制 剂等。
(1)微生物营养缺陷性(微生物基因突 变型)
采取诱变剂使微生物的基因发生突变, 从而造成某种酶缺损,代谢途径中断, 缺损酶前面的中间产物会大量积累,致
应用实例:乳糖的代谢机理。
利用微生物的遗传突变型研究新 陈代谢机制,比利用其他生物有 以下优越性:
例子1:研究维生素缺乏症,可给以 缺乏某种维生素的饲料,若干天后 观察其病变情况,在加入该种维生 素,观察其症状有否好转,从而确 定该种维生素的功能。
例子2: “人工糖尿病”。
例子3:生糖氨基酸;
生酮氨基酸
3、代谢物标记追踪实验
将代谢底物分子适当“标记”,然后追 踪“标记”在细胞中的去向,就可以了 解底物分子在中间代谢中经过什么中间 产物,生成了什么终产物。
(一)活体内实验和活体外实验
1、活体内实验(整体实验)
用整体生物材料或高等动物离体器官或 微生物细胞群体进行中间代谢实验研究 称为活体内实验,用“in vivo”表示。
活体内实验结果代表生物体在正常 生理条件下,在神经、体液等调节机制 下的整体代谢情况,比较接近生物体的 实际。
典型例子:1904年,德国化学家Knoop提 出的脂肪酸β-氧化学说。
但有许多代谢有共同途径, 称为“两用代谢途径” (amphibolic pathway)。
二、新陈代谢的研究方法
中间代谢的研究内容很多,研究目 的不同,所用的生物材料和实验方法也 不相同。为探讨代谢途径及其调节机理, 动物、植物、微生物材料都可以作为实 验对象。
根据实验材料的水平,常将实验分 为活体内实验和活体外实验。
能量代谢和物质代谢是同一过程的两个 方面,能量转化寓于物质转化过程之中, 物质转化必然伴有能量转化。
2、合成代谢(anabolism)分解 代谢(catabolism)
合成代谢和分解代谢并非简 单可逆反应,发生于细胞不同部 位(尤其是真核生物中最常见)。
例如:脂肪酸分解成乙酰辅酶A 是在线粒体中进行,而乙酰辅酶 A合成脂肪酸则在细胞浆中进行。
2、广义概念:是生物与外界环境进行 物质与能量交换的全过程。即:生物 体内所经历的一切化学变化。包括消 化、吸收、中间代谢及排泄等阶段。
新陈代谢包括生物体内所发生的
一切合成和分解作用。一方面,生物 体不断从周围环境中摄取物质,通过 一系列生化反应,转变为自己的组成 部分;另一方面,将原有的组成成分 经过一系列生化反应,分解成不能在 利用的物质排出体外,不断地进行自 我更新。生物体通过新陈代谢所产生 的生命现象是建立在合成代谢与分解 代谢矛盾对立和统一的基础上的,它 们之间既相互联系、相互依存,又相 互制约。