安农大《基因工程原理》试卷
2020-2021某大学《基因工程》期末课程考试试卷A(含答案)
2020-2021《基因工程》课程考试试卷A一、名词解释 (共5题,每题4分,共20分)1、克隆(clone)2、质粒3、基因工程4、基因（gene）5、回文结构二、简答题(共4题,每题10分,共40分)1、基因工程研究的基本步骤2、载体的功能3、重组DNA技术4、T4-DNA酶的基本特性三、论述题（每题20分，共40分）1、论述PCR原理及引物设计的基本原则2、大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化操作过程2020-2021《基因工程》课程考试试卷A答案一.名词解释(共5题,每题4分,共20分)1、克隆(clone): 作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系，作动词时是指基因的分离与重组过程。
2、质粒——质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。
现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。
在基因工程中质粒常被用做基因的载体。
3、基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA 技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
4.基因（gene）—产生一条多肽链或功能RNA所必须的全部核苷酸序列。
5、回文结构限制性内切酶识别双链DNA分子中4 - 8对碱基的特定序列大部分酶的切割位点在识别序列内部或两侧识别切割序列呈典型的旋转对称型二.简答题(共4题,每题10分,共40分)1、基因工程研究的基本步骤1、从生物体中分离得到目的基因（或DNA片段）2、在体外，将目的基因插入能自我复制的载体中得到重组DNA分子。
3、将重组DNA分子导入受体细胞中，并进行繁殖。
4、选择得到含有重组DNA分子的细胞克隆，并进行大量繁殖，从而使得目的基因得到扩增。
5、进一步对获得的目的基因进行研究和利用。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’5’DNA聚合酶B 5’3’DNA聚合酶C 5’3’DNA内切酶D 5’3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
基因工程原理试题1(1)
基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是：(1)分子水平上的操作，(2)细胞水平上的表达3．基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的限制性酶切图谱。
5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自属名的第一个字母，第二、三两个字母取自_种名的前两个字母，第四个字母则用株名表示。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_ EcoRl。
8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是GGCC，它们属于异源同工酶。
9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1) 5'-3'合成酶的活性；(2) 3'-5'外切核酸酶的活性。
10．为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶去双链DNA_5’端的磷酸基团。
11．EGTA是_Ca2+_离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_ 5'-3'合成酶的活性，而没有3'-5'外切酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I 的__5'一3'外切核酸酶和5'一3'合成酶的作用。
14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用____ S1核酸酶切割或DNA聚合酶补平。
15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有__核酸水解酶H的作用，可以将DNA-RNA杂种双链中的_RNA_水解掉。
基因工程原理练习题及其答案
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安徽农业大学农学类专业期末考试试卷
安徽农业大学生命科学导论期末考试试卷（一）一、名词解释（共5小题，每小题3分，共15分）1.载体蛋白：细胞膜中的一类具有转运功能的跨膜蛋白。
膜转运蛋白可分为载体蛋白和通道蛋白两类，载体蛋白既介导被动运输又介导主动运输，通道蛋白仅介导被动运输。
2.信号识别颗粒（singnal recognition particle,SRP）： SPR是一种核糖核蛋白复合体，它是由6个多肽亚单位和一个小的7s RNA分子组成。
它可先识别信号肽并与之结合，然后将信号肽-核糖体复合体带到另一个与其识别的粗面内质网膜上的停靠蛋白上，从而使外输蛋白的合成达到定位的目的。
3. House-keeping Gene：管家基因，是指所有细胞中均要表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。
4.分子伴侣：细胞中的某些蛋白质分子可以识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽并与多肽的某些部位相结合，从而帮助这些多肽转运、折叠或装配，这一类分子本身并不参与最终产物的形成，因此称为分子伴侣。
例如：信号识别颗粒，Hsp70等。
5.细胞分化：在个体发育中，由一种相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异，产生各不相同的细胞类群的过程。
二、填空题（每空 1 分，共 20 分）［生物膜的基本特征是流动性、不对称性。
2.硝酸甘油能用于治疗心绞痛是因为硝酸甘油在体内转化为 NO ,可舒张血管，从而减轻心脏负荷和心肌的需氧量。
3.在N -连接糖基化的糖蛋白中，与多肽链结合的第一个糖残基是N -乙酰葡糖胺，在O -连接糖基化中与之结合的第一个糖残基是 N-乙酰半乳糖胺。
1.1.酶体是一种异质_________________________ 性细胞器，它可以分为_初级溶酶体、次级溶酶体和残，质体（残余小体）。
5. Na+/K+-ATPase对Na+/K+的运输可分为六个过程，在该过程中，每分解一 ATP,运出3个屿+,输入2 个K+。
基因工程试题库
基因工程试题库《基因工程》试题库（一）一、选择题（单选或多选）（每题2分，共计20分）1.下面哪一种特性不是密码所具有的? ( )(a)偏爱性(b)简并性(c)重叠性(d)连续性2. 黏性末端连接法，不仅操作方便，而且( )(a)产生新切点(b)易于回收外源片段(c)载体不易环化(d)影响外源基因的表达3. 用菌落杂交法筛选重组体时，( )(a)需要外源基因的表达(b)不需要外源基因的表达(c)要根据克隆基因同探针的同源性(d)上述说法都正确4. DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?( )(a)6倍(b)10倍(c)40倍(d)240倍(c)1000倍10000倍5. 对于一个特定的起点，引发体的组成包括：( )(a)在起始位点与DnaG引发酶相互作用的一个寡聚酶(b)一个防止DNA降解的单链结合蛋白(c)DnaB解旋酶和附加的DnaC，DnaT，PriA等蛋白(d)DnaB，单链结合蛋白，DnaC，DnaT，PriA蛋白和DnaG引发酶(e)DnaB解旋酶，DnaG引发酶和DNA聚合酶Ⅲ6. 下面哪些是在反转录病毒中发现的基因?( )(a)gag(b)pol(c)env(d)OnC7. 下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物基因组?( )(a)球蛋白基因(b)组蛋白基因(c)rRNA基因(d)肌动蛋白基因8. 以下关于抗体类型转变的叙述哪些是正确的?( )(a)每种重链具有不同的功能(b)类型转变的次序按染色体上重链排列顺序进行(c)一旦一种类型转换发生，其他的转换将不再进行(d)也可通过可变剪接改变重链9. 下列哪些转录因子含有TBP?( )(a)TFⅡB (b)TFⅢA (c)SLl (d)TFⅡD (e)TFⅢB (f)UBFl 10．剪接小体的组装( )(a)按有序的途径一步步完成(b)涉及snRNP与水溶性蛋白(即不是任何snRNP组分的蛋白)(c)不需要ATP(d)伴随着多次snRNP的重组合(e)以上都正确二、判断题（每题1分，共计10分）1．一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
基因工程原理考试题库(精简版)
基因工程原理考试题库（精简版）一基因工程的基本概念1、基因工程的定义与特征。
定义：在体外把核酸分子（DNA的分离、合成）插入载体分子，构成遗传物质的新组合（重组DNA），引入原先没有这类分子的受体细胞内，稳定地复制表达繁殖，培育符合人们需要的新品种（品系），生产人类急需的药品、食品、工业品等。
特征：1、具跨越天然物种屏障的能力。
2、强调了确定的DNA片段在新寄主细胞中的扩增。
2、试述基因工程的主要研究内容。
（1）目的基因的分离（2）DNA的体外重组（载体、受体系统等）（3）重组DNA分子转移到受体细胞（4）重组DNA分子的筛选（5）基因在受体细胞内的扩增、表达、检测及其分析。
3、基因工程在食品工业上有何应用发展？主要是通过基因重组，使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率；或者改良这些有机物组成成分，提高利用价值。
4、转基因是一把双刃剑，请客观谈谈对转基因及转基因食品安全性的认识。
转基因技术所带来的好处是显而易见的，在人类历史进步和发展中起到了积极作用。
首先，通过该项技术可以提供人们所需要的特性，改良培育新品种；第二，延长食品保存时间或增加营养成分；第三，将抗虫防菌基因转入到作物中，使作物本身产生抵抗病虫害侵袭的能力，减少了农药的使用量，有利于环境保护；第四，转基因技术及基因食物在医学方面得到广泛研究和应用。
人们对转基因技术的主要担忧在于环境方面。
外源基因的导入可能会造就某种强势生物，产生新物种或超级杂草、损害非目标生物、破坏原有生物种群的动态平衡和生物多样性，也即转基因生物存在潜在的环境安全问题。
转基因作物的大面积种植已有数年，食用转基因食品的人群至少有10亿之多，但至今仍未有转基因食品对生命造成危害的实例；更何况目前每一种基因工程食品在上市前，都要经过国家法律认可，食品卫生部门和环境部门的严格检测。
只有测试合格了，才能投放市场。
因此公众完全可以安全地消费、大胆地食用转基因食品。
基因工程
安徽农业大学2008―2009学年第一学期《 基因工程原理 》试卷（B 卷） 考试形式: 闭卷，2小时，总分100分 适用专业： 06生物技术 考试时间： 2008.11.一大题：填空题（共7小题，每空1分，共20分） 1. 基因工程的两个基本特点是：① ，② 。
2. 部分酶切时通常可采取的措施有：① ，② ，③ 。
3. DNA 聚合酶Ⅰ具有三种活性：① ，② ，③ 。
4. ColE1是一种 型天然质粒载体，能产生 ，但没有 基因，不能通过 筛选。
5. 在DNA 分离纯化过程中，造成DNA 分子断裂的因素很多，主要有：① ，② ，③ 。
6. 7.在原核生物mRNA 的转录过程中，有三个序列是必不可少的，它们是① ，② ，③ 。
7. 碱法分离质粒DNA 时，溶液Ⅰ的作用是 ，溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的作用分别是使DNA 。
…… ：专业班级：姓名： 学号：装订线15分）1. 第一个用于构建重组体的限制性内切酶是（）（a）Eco RⅠ（b）Eco B （c）Eco C （d）Eco R 2. 下列限制性内切核酸酶中，选用（）时要考虑连接后外源DNA的插入方向。
（a）Eco RⅠ（b）Eco RⅡ（c）Bam HⅠ（d）PstⅠ3. 在下列表型中，（）是基因工程上理想的受体菌表型。
（a）r+m+rec+（b） r-m-rec-（c）r+m+rec-（d）r-m-rec+ 4. 因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是（）（a）A.Kormberg （b）W.Gilbert（c）P.Berg （d）B.McClintock5. 在原核生物复制子中，除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸的是（）（a）DNA聚合酶Ⅲ（b）DNA聚合酶Ⅱ（c）DNA聚合酶Ⅰ（d）DNA连接酶6. 变色氧化的酚不能用于DNA的分离，主要原因是（）（a）使DNA的磷酸二脂键断裂（b）会改变pH值（c）同DNA形成复合物（d）在DNA分离后不易除去7. 在利用lacZ失活的显色反应筛选中，IPTG的作用是（）。
《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准.
《基因⼯程原理与技术》标准答案及评分标准.《基因⼯程原理与技术》标准答案及评分标准⼀、名词解释（本⼤题共5⼩题，每题2分，总计10分）限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性⼀般在⼀定的温度、离⼦强度、pH等条件下才表现最佳切割能⼒和位点的专⼀性。
如果改变反应条件就会影响酶的专⼀性和切割效率，称为星号（*）活性。
受体细胞：⼜称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验⽬的讲是有应⽤价值和理论研究价值的细胞T-DNA：是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的⼀段DNA。
该DNA⽚段上的基因与肿瘤的形成有关。
克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过⼀系列步骤表现出其⽣物功能的整个过程。
典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产⽣有⽣物活性的蛋⽩质的过程。
α-互补：β-半乳糖苷酶（β-gal)是⼤肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的⼀种⾊素元（X-gal）被β-gal切割后，即产⽣兰⾊。
⼤肠杆菌的β⼀半乳糖苷酶由 1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。
⼤肠杆菌lacZ基因由于α区域缺失，只能编码⼀种在氨基端截短的多肽，形成⽆活性的不完全酶，称为α受体；如果载体的lacZ 基因在相反⽅向缺失，产⽣在羧基端截短的多肽，这种部分β-半乳乳糖苷酶也⽆活性。
但是这种蛋⽩质可作为α供体。
受体⼀旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复β-半乳糖苷酶的活性，这种现象称为α互补．由载体产⽣的α供体能够与寄主细胞产⽣的⽆活性的α受体互作形成⼀种⼋聚体，从⽽恢复β-半乳糖苷酶的活性。
如果培养基中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有β-半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝⾊，反之不含有这种酶活性的细胞将保持⽩⾊。
⼆、填空题（本⼤题共7⼩题，每空1分，总计20分）1、质粒按⾃我转移的能⼒可分为＿接合型＿质粒和＿⾮接合型＿质粒；按复制类型可分为＿＿松弛性＿质粒和＿严紧型＿质粒。
基因工程考试试题
基因工程考试试题基因工程作为现代生物技术的核心领域，对于推动生命科学的发展和解决人类面临的诸多问题具有重要意义。
以下是一套涵盖基因工程多个方面的考试试题，旨在检验您对这一重要学科的理解和掌握程度。
一、选择题（每题 3 分，共 30 分）1、基因工程中常用的限制性内切酶作用于（）A 氢键B 肽键C 磷酸二酯键D 高能磷酸键2、下列哪项不是基因工程中常用的载体（）A 质粒B 噬菌体C 动植物病毒D 细菌核区的 DNA3、有关 PCR 技术的说法，不正确的是（）A PCR 是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术B 延伸过程中需要 DNA 聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸C 利用 PCR 技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D PCR 技术中以解开的双链作为模板，在热稳定 DNA 聚合酶的作用下合成新链4、基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求；④提取目的基因。
正确的操作顺序是（）A ③②④①B ②④①③C ④①②③D ③④①②5、下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是（）A 需要限制酶和 DNA 连接酶B 启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段 DNAC 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因D 基因表达载体的构建是基因工程的核心6、为了培育抗虫棉，科研人员将苏云金芽孢杆菌的 Bt 毒蛋白基因导入棉花细胞中，该过程采用的生物技术是（）A 杂交育种B 诱变育种C 基因工程D 单倍体育种7、下列不属于目的基因获取方法的是（）A 从基因文库中获取B 利用 PCR 技术扩增C 人工合成目的基因D 直接从生物体细胞内获取8、基因工程中，将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是（）A 农杆菌转化法B 花粉管通道法C 基因枪法D 显微注射法9、蛋白质工程的基本流程正确的是（）①设计预期的蛋白质结构②推测应有的氨基酸序列③找到相对应的脱氧核苷酸序列A ①②③B ③②①C ②①③D ③①②10、下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）A 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B 利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因来自于乙肝病毒C 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体，该技术将导致定向变异D 基因诊断的基本原理是 DNA 分子杂交二、填空题（每题 4 分，共 20 分）1、基因工程的工具酶包括____________和____________。
安农大《基因工程原理》试卷
2003-2004学年第二学期01级生物技术《基因工程原理》试卷（A卷）一、填空题（20分）1. 基因工程的四大要素是、、和。
2. 可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记，因为这种酶具有和的活性。
3. 乙醇沉淀DNA的原理是。
4. 受体细胞的感受态是。
5. 在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素主要有、和。
6. 通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以最好。
7. Ⅱ类限制性内切核酸酶既具有的专一性，又具有的专一性。
切割后产生末端的DNA片段和末端的DNA片段，作用时需要作辅助因子。
8. Klenow大片段是用切割DNA聚合酶Ⅰ得到的，它具有和两种活性。
二、单项选择题（20分）1. 1953年Watson和Crick提出：（）（a）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（b）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（c）遗传物质通常是DNA而非RNA（d）分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变2. 在原核生物DNA复制中，以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸（）（a） DNA聚合酶Ⅲ（b） DNA聚合酶Ⅱ（c） DNA聚合酶Ⅰ（d） DNA连接酶3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（）不太恰当。
（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统4. Ⅱ型限制性内切核酸酶（）（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列（b）仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供（c）有外切核酸酶和甲基化酶活性（d）仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供5. T4 DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的，这种连接酶（）（a）催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源（b）既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接（c）是一种单肽酶，分子量为74kDa（d）既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接6. 从E.coli中分离的连接酶：（）（a）需要ATP作辅助因子（b）需要NAD作辅助因子（c）用于进行平末端的连接（d）作用时不需要模板7. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（）（a）将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键（b）作用时不消耗能量（c）需要Mn2+等二价辅助离子（d）也可以连接RNA分子8. 松弛型质粒pUC载体系列不必进行氯霉素扩增，因为它们的拷贝数很高达到（）（a） 30-50 （b） 100-200 （c） 300-400 （d） 500-7009. 第一个作为重组DNA载体的质粒是（）（a） pBR322 （b） ColE1 （c） pSC101 （d） EcoB10.关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（）（a）溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体（b）溶液Ⅱ的作用是使DNA变性（c）溶液Ⅲ的作用是使DNA复性（d）质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性11.Southern印迹的DNA探针（）杂交（a）只与完全相同的片段（b）可与任何含有相同序列的DNA片段（c）可与任何含有互补序列的DNA片段（d）可与用某些限制酶切成的DNA片段12.下列关于建立cDNA文库的叙述中，哪一项是错误的？（）（a）特定组织或细胞中提取DNA或RNA（b）用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA（c）以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA（d）用S1核酸酶去除双链的发夹结构13.黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）（a）产生新切点（b）易于回收外源片段（c）载体不易环化（d）影响外源基因的表达14.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（）（a）噬菌斑颜色的变化（b） cI基因失活造成的噬菌斑的变化（c）对IPTG的分解能力（d）对Xgal的分解与否15.下列哪一种酶作用时需要引物？（）（a）限制酶（b）碱性磷酸酶（c）反转录酶（d） DNA连接酶16.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（）（a）在不同的宿主中具有不同的复制机制（b）在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点（c）在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶（d）在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度17.下面关于多克隆位点（MCS）的描述，不正确的一句是（）（a）仅位于质粒载体中（b）具有多种酶的识别序列（c）不同酶的识别序列可以有重叠（d）一般是人工合成后添加到载体中18.cDNA文库包括该种生物的（）（a）某些蛋白质的结构基因（b）所有蛋白质的结构基因（c）所有结构基因（d）内含子和调控区19.同一种质粒DNA，电泳时，三种不同形式的迁移速度是（）（a） SC DNA＞L DNA＞OC DNA （b） SC DNA＞OC DNA＞L DNA（c） OC DNA＞SC DNA＞L DNA （d） L DNA＞SC DNA＞OC DNA20.ColE1是用作基因工程载体的自然质粒，它不具有下列哪个性质（）（a）是松弛复制型（b）具有四环素抗性（c）能被氯霉素扩增（d）产生大肠杆菌素三、判断题（15分）1. 同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。
基因工程考试试题题库
基因工程考试试题题库一、选择题1. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 噬菌体C. 人工染色体D. 所有以上选项2. 基因枪法是一种：A. 基因克隆技术B. 基因测序技术C. 基因转移技术D. 基因表达技术3. 以下哪个不是基因工程中常用的限制性内切酶？A. EcoRIB. BamHIC. Taq酶D. HindIII4. 基因工程中，目标基因的克隆通常需要以下哪个步骤？A. 基因测序B. 基因表达C. 基因扩增D. 基因编辑5. 转基因生物的安全性问题不包括：A. 环境安全B. 食品安全C. 经济安全D. 社会安全二、填空题1. 基因工程的核心技术是_________，它允许科学家将一个生物体的基因转移到另一个生物体中。
2. 基因工程中，常用的基因表达载体包括_________、_________等。
3. 基因工程在医学领域的应用包括_________、_________等。
4. 基因工程在农业领域的应用包括_________、_________等。
5. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
三、简答题1. 简述基因工程的基本操作步骤。
2. 解释什么是转基因生物，并举例说明其在日常生活中的应用。
3. 讨论基因工程在环境保护方面的潜在应用。
四、论述题1. 论述基因工程在提高作物产量和改良作物品质方面的应用及其可能带来的问题。
2. 分析基因工程对生物多样性的影响，并提出相应的管理策略。
五、案例分析题阅读以下关于基因编辑技术CRISPR-Cas9的案例，并回答问题：- 描述CRISPR-Cas9技术的工作原理。
- 讨论CRISPR-Cas9技术在医学研究和治疗中的应用前景。
- 分析CRISPR-Cas9技术可能引发的伦理和社会问题。
请注意，以上内容仅为示例，实际考试试题应根据具体的教学大纲和课程内容进行设计。
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2003-2004学年第二学期01级生物技术《基因工程原理》试卷（A卷）一、填空题（20分）1. 基因工程的四大要素是、、和。
2. 可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记，因为这种酶具有和的活性。
3. 乙醇沉淀DNA的原理是。
4. 受体细胞的感受态是。
5. 在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素主要有、和。
6. 通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以最好。
7. Ⅱ类限制性内切核酸酶既具有的专一性，又具有的专一性。
切割后产生末端的DNA片段和末端的DNA片段，作用时需要作辅助因子。
8. Klenow大片段是用切割DNA聚合酶Ⅰ得到的，它具有和两种活性。
二、单项选择题（20分）1. 1953年Watson和Crick提出：（）（a）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（b）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（c）遗传物质通常是DNA而非RNA（d）分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变2. 在原核生物DNA复制中，以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸（）（a） DNA聚合酶Ⅲ（b） DNA聚合酶Ⅱ（c） DNA聚合酶Ⅰ（d） DNA连接酶3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（）不太恰当。
（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统4. Ⅱ型限制性内切核酸酶（）（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列（b）仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供（c）有外切核酸酶和甲基化酶活性（d）仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供5. T4 DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的，这种连接酶（）（a）催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源（b）既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接（c）是一种单肽酶，分子量为74kDa（d）既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接6. 从E.coli中分离的连接酶：（）（a）需要ATP作辅助因子（b）需要NAD作辅助因子（c）用于进行平末端的连接（d）作用时不需要模板7. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（）（a）将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键（b）作用时不消耗能量（c）需要Mn2+等二价辅助离子（d）也可以连接RNA分子8. 松弛型质粒pUC载体系列不必进行氯霉素扩增，因为它们的拷贝数很高达到（）（a） 30-50 （b） 100-200 （c） 300-400 （d） 500-7009. 第一个作为重组DNA载体的质粒是（）（a） pBR322 （b） ColE1 （c） pSC101 （d） EcoB10.关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确？（）（a）溶液Ⅰ的作用是悬浮菌体（b）溶液Ⅱ的作用是使DNA变性（c）溶液Ⅲ的作用是使DNA复性（d）质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性11.Southern印迹的DNA探针（）杂交（a）只与完全相同的片段（b）可与任何含有相同序列的DNA片段（c）可与任何含有互补序列的DNA片段（d）可与用某些限制酶切成的DNA片段12.下列关于建立cDNA文库的叙述中，哪一项是错误的？（）（a）特定组织或细胞中提取DNA或RNA（b）用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA（c）以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA（d）用S1核酸酶去除双链的发夹结构13.黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）（a）产生新切点（b）易于回收外源片段（c）载体不易环化（d）影响外源基因的表达14.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（）（a）噬菌斑颜色的变化（b） cI基因失活造成的噬菌斑的变化（c）对IPTG的分解能力（d）对Xgal的分解与否15.下列哪一种酶作用时需要引物？（）（a）限制酶（b）碱性磷酸酶（c）反转录酶（d） DNA连接酶16.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（）（a）在不同的宿主中具有不同的复制机制（b）在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点（c）在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶（d）在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度17.下面关于多克隆位点（MCS）的描述，不正确的一句是（）（a）仅位于质粒载体中（b）具有多种酶的识别序列（c）不同酶的识别序列可以有重叠（d）一般是人工合成后添加到载体中18.cDNA文库包括该种生物的（）（a）某些蛋白质的结构基因（b）所有蛋白质的结构基因（c）所有结构基因（d）内含子和调控区19.同一种质粒DNA，电泳时，三种不同形式的迁移速度是（）（a） SC DNA＞L DNA＞OC DNA （b） SC DNA＞OC DNA＞L DNA（c） OC DNA＞SC DNA＞L DNA （d） L DNA＞SC DNA＞OC DNA20.ColE1是用作基因工程载体的自然质粒，它不具有下列哪个性质（）（a）是松弛复制型（b）具有四环素抗性（c）能被氯霉素扩增（d）产生大肠杆菌素三、判断题（15分）1. 同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。
2. 迄今发现的质粒DNA都是环状的。
3. 外源基因（或DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。
4. 核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。
5. 通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。
6. 基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。
7. 用不同的产生粘性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA片段，得到的粘性末端是不能通过末端互补而连接的。
8. 用免疫化学方法筛选的重组体不需要外源基因的表达。
9. 甘油会使许多限制性内切酶的特异性发生改变，是导致一些酶星活性的主要原因之一，防止的办法是酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5%以下。
10.不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。
11.DNA聚合酶Ⅰ有三种酶活性，其中3’→5’外切核酸酶的活性在较多的dNTP s存在下，常被5’→3’合成酶的活性所掩盖。
12.基因组DNA文库是含有某一生物中全部DNA序列随机克隆的克隆群，而cDNA文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。
13.同聚物接尾法构建重组体，不仅连接效率高，而且也很容易回收插入的片段。
14.简并引物是根据已知DNA的序列设计的引物群。
15.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。
四、简答题（第1题3分，2～4题各4分）1. 连接酶将Sau3AI（ GATC）切割的DNA与经BamHI（G GATCC）切割的DNA连接起来后，能够被BamHI切割的机率有多大（百分比表示）？2. 下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是Ⅱ类酶的识别序列，为什么？GAATTC， AAGCTT， GAATCG， ACGGCA， CTGCAG。
3. 你打算扩增下图所示的两段序列之间的DNA，请从所列出的的引物中选出合适的一对。
5’-GACCTGTGGAAGC-------CATACGGGATTG-3’3’-CTGGACACCTTCG-------GTATGCCCTAAC-5’引物1：（1）5’-GACCTGTGGAAGC （2）5’-CTGGACACCTTCG（3）5’-CGAAGGTGTCCAG （4）5’-GCTTCCACAGGTC引物2：（1）5’-CATACGGGATTG （2）5’-GTATGCCCTAAC（3）5’-GTTAGGGCATAC （4）5’-CAATCCCGTATG4. 原核生物中有哪两种不同的转录终止机制？五、问答题（30分）1. PCR扩增的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样信息？2. 黏性末端连接法是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足，请指出这些不足处。
3. 在DNA分离过程中，为何常常酚∶氯仿联用？4.2003-2004学年第二学期01级生物技术《基因工程原理》试卷（B卷）一、填空题（20分）1. 基因工程的四大要素是、、和。
2. 可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记，因为这种酶具有和的活性。
3. 乙醇沉淀DNA的原理是。
4. 受体细胞的感受态是。
5. 在DNA分离过程中造成DNA分子断裂的因素主要有、和。
6. 通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以最好。
7. 为了防止DNA的自身环化，可用脱去双链DNA 。
8. Klenow大片段是用切割DNA聚合酶Ⅰ得到的，它具有和两种活性。
9. 放射免疫筛选的原理基于以下三点：、和。
二、单项选择题（20分）1. 1953年Watson和Crick提出：（）（a）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（b）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（c）遗传物质通常是DNA而非RNA（d）分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变2. 在原核生物DNA复制中，以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸（）（a） DNA聚合酶Ⅲ（b） DNA聚合酶Ⅱ（c） DNA聚合酶Ⅰ（d） DNA连接酶3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（）不太恰当。
（a）由作用于同一DNA序列的两种酶构成（b）这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶（c）这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰（d）不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统4. Ⅱ型限制性内切核酸酶（）（a）有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列（b）仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供（c）有外切核酸酶和甲基化酶活性（d）仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供5. T4 DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的，这种连接酶（）（a）催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源（b）既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接（c）是一种单肽酶，分子量为74kDa（d）既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接6. 从E.coli中分离的连接酶：（）（a）需要ATP作辅助因子（b）需要NAD作辅助因子（c）用于进行平末端的连接（d）作用时不需要模板7. DNA连接酶的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，（）（a）将双链DNA中的5′-P同3′-OH末端重新形成磷酸二脂键（b）作用时不消耗能量（c）需要Mn2+等二价辅助离子（d）也可以连接RNA分子8. 松弛型质粒pUC载体系列不必进行氯霉素扩增，因为它们的拷贝数很高达到（）（a） 30-50 （b） 100-200 （c） 300-400 （d） 500-7009. 第一个作为重组DNA载体的质粒是（）（a） pBR322 （b） ColE1 （c） pSC101 （d） EcoB10.Southern印迹的DNA探针（）杂交（a）只与完全相同的片段（b）可与任何含有相同序列的DNA片段（c）可与任何含有互补序列的DNA片段（d）可与用某些限制酶切成的DNA片段11.用碱法分离质粒DNA时，因为（）所以可以被除去（a）染色体DNA断成了碎片（b）染色体DNA分子量大，而不能释放（c）染色体DNA变性后来不及复性（d）染色体末同蛋白质分开而沉淀12.黏性末端连接法，不仅操作方便，而且（）（a）产生新切点（b）易于回收外源片段（c）载体不易环化（d）影响外源基因的表达13.关于cDNA的最正确的提法是：（）（a）同mRNA互补的单链DN （b）同mRNA互补的双链DNA（c）以mRNA为模板合成的双链DNA （d）以上都正确14.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（）（a）噬菌斑颜色的变化（b） cI基因失活造成的噬菌斑的变化（c）对IPTG的分解能力（d）对Xgal的分解与否15.下列哪一种酶作用时需要引物？（）（a）限制酶（b）碱性磷酸酶（c）反转录酶（d） DNA连接酶16.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确？（）（a）在不同的宿主中具有不同的复制机制（b）在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点（c）在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶（d）在不同的宿主细胞中具有不同的复制速度17.下面关于多克隆位点（MCS）的描述，不正确的一句是（）（a）仅位于质粒载体中（b）具有多种酶的识别序列（c）不同酶的识别序列可以有重叠（d）一般是人工合成后添加到载体中18.cDNA文库包括该种生物的（）（a）某些蛋白质的结构基因（b）所有蛋白质的结构基因（c）所有结构基因（d）内含子和调控区19.同一种质粒DNA，电泳时，三种不同形式的迁移速度是（）（a） SC DNA＞L DNA＞OC DNA （b） SC DNA＞OC DNA＞L DNA（c） OC DNA＞SC DNA＞L DNA （d） L DNA＞SC DNA＞OC DNA20.ColE1是用作基因工程载体的自然质粒，它不具有下列哪个性质（）（a）是松弛复制型（b）具有四环素抗性（c）能被氯霉素扩增（d）产生大肠杆菌素三、判断题（15分）1. 同一种限制性内切核酸酶切割靶DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。