胚胎冷冻及复苏移植120个周期临床效果分析

1983年澳大 利亚 T rounson 等通 过 冻融 胚胎 移植 ( frozen- thawed em bryo transfer, FET )获 得首 例临 床 妊娠, 此 后 该项技术被逐 步地 应用 于世 界各 地。 1994年 我国 北京 大 学第三医院获得临 床妊娠 成功。本 中心 自 2003 年 1月 至 2007年 5月共有 88例患者 进行了 120 个周期 的冻融 胚胎 移植, 获临床妊娠 39例, 2003 年 9月诞 生了黑 龙江省 首例 冻融胚胎移植的试管 婴儿, 现将结果分析报道如下。
11211 冷冻过程 将胚胎在 DPBS 溶液洗 涤 2次, 再移 入 115mo l/L 丙二醇 ( PROH ) 15m in, 在 115m ol/L 的 PROH 和 011 mo l/L 的蔗糖溶液中不超过 15m in, 迅 速将胚 胎吸入 麦 管, 每支麦 管吸入 1个胚胎, 封 口。执行 冷冻程 序, 起始 温 度 20e , 以 2e /m in的速 度从 20e 降 至 - 7e , 在 - 7e 进 行植冰, 以 - 013e /m in 降 至 - 30e , 再 以 - 50e /m in 降 至 - 140e , 投入 - 196e 液氮中保存。
1 资料与方法 11 1 病例资 料 本 中心采 用 GnRH-a /FSH /HM G /HCG 方 案进行超排 卵, 采 用常 规体外 受精 ( IVF ) 或胞 浆内 单精 子 显微注射 ( ICSI)受精, 取 卵后 48h 进行 胚胎移 植。移植 胚
作者单位: 哈尔滨医科大学第一临床医学院 生殖医学中心, 黑 龙江 哈尔滨 150001
Analysis of th e clin ical ou tcom es of hum an embryo tran sp lan tation after frozen -thaw in g pro toco:l 120 cycles. X IA L ei, WAN G Zhuo-ran, ZHANG H ong-x iu, ZH AN G Ya-juan, L IU B in, LU&H u i-m ing, HAN X iang-yang. R ep ro-
表 1 妊娠组与非妊娠组子宫内膜厚度及 E2水平
妊娠组
周期 (个 ) 子宫内膜厚度 (mm )
39
91 7 ? 11 1
E2 ( pmo l/L ) 11601 5 ? 3001 9
非妊娠组
81
91 9 ? 11 9
10141 8 ? 3261 7
212 妊娠组与非妊娠组冷冻胚胎复苏存活情况 见表 2。
ductive M ed ical C enter, T he F ir stA ff ilia ted H o sp ital of H arb in M edical Univers ity, H arbin 150001, China Abstrac t: O bjective T o investigate the outcom es o f embryon ic transplantation afte r cryopreservation and thaw ing. M ethods A slow- freezing and rap id-thaw ing protoco lw as used in hum an embryos a t 2~ 4ce lls stage. T he clin ica l ou-t com es after transfer of the frozen / thawed em bryos in 120 cyc les w ere analysed. E ighty- eight patients accepted 120 cyc les o f fro zen / thaw ed em bryo transfer in the F irstA ffiliatedH o spita l o fH arbin M edical U niversity from Janua ry 2003 to M ay 20071 R esu lts A to tal o f 370 embryos we re thaw ed, o fw hich 316 em bryos su rv ived and 232 em bryos surv ived in tactly. T hree hundred and six teen embryosw ere transferred. The c lin ica l pregnancy ra te w as 3215% ( 39 /120) and the im plantation rate was 1615% ( 52 /316). T here was no sign ificant d ifference in ag e, serum estrogen leve ls, endom etrium th ickness, surv iva l ra tes o f frozen / thawed emb ryos and intact su rv iva l rates betw een pregnancy g roup and non-pregnancy one ( P > 01 05). H owever, the good-qua lity embryos ra tio was significantly higher in the pregnancy g roup than that in nonpregnancy one( P < 01 01). Conc lu sion T he quality of embryo has a sign ificant effect on the clin ica l pregnancy rate a-f ter transfer of fro zen / thaw ed em bryos. A ccumu lative pregnancy rate in IVF protoco lm ay increase utilizing transplan tation o f fro zen / thaw ed em bryos. k eywords: fro zen- thawed emb ryo transfer; good qua lity em bryo; pregnancy
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胎数目不超过 3个, 剩余胚胎 进行冷冻保存。此外, 当患 者 可能出现 重度 卵 巢过 度刺 激 综合 征 ( ovar ian hype rstimu lation syndrom e, OH SS)时, 不 进行 新鲜 胚胎 周 期移 植, 全 部 施行胚胎冷冻。 2003年 1月开始行冻融胚 胎移植, 至 2007 年 5月共 120个周期, 患者年龄 23~ 49( 311 9 ? 41 7)岁。 112 胚胎冻融方法 胚胎冷冻标准为 2细胞以上, 细胞 碎 片 < 50% 。采用慢 速冷 冻及 快速 复苏 法, 使用 英国 P laner 程序降温仪进行程序冷冻。
妊娠组 非妊娠组 P值
Βιβλιοθήκη Baidu周期 (个 )
39 81
表 2 妊娠组与非妊娠组冷冻胚胎复苏存活情况
年龄 (岁 ) 311 0 ? 41 2
321 6 ? 41 8
> 01 05
解冻胚胎数 (个 ) 121
249
存活胚胎数 [个 (% ) ] 106( 871 6 )
210( 841 3 )
> 0105
完整存活胚胎数 [个 (% ) ] 82( 671 8)
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中国实用妇科与产科杂志 2008年 1月 第 24卷 第 1 期
论著
文章编号: 1005 - 2216( 2008) 01 - 0050- 03
胚胎冷冻及复苏移植 120个周期临床效果分析
夏 蕾, 王卓然, 张洪秀, 张雅娟, 刘 彬, 吕荟明, 韩向阳
摘要: 目的 探讨冷冻胚胎复苏移植后的妊娠结局。方法 2003年 1月至 2007年 5月, 对 2~ 4细胞期 胚胎进行 慢速冷冻保存, 快速复苏及移植, 共有 88例患者在哈尔滨医科 大学第一 临床医学院 进行了 120 个周期 的冷冻胚 胎复苏移植, 观察冷冻复苏移植的效果。结果 复苏胚胎 370个, 存活 316个, 完整存活胚胎 232个, 移 植 316个 胚胎, 临床妊娠 39例, 妊娠率为 3215% ( 39 /120)。 胚胎种 植率 1615% ( 52 /316 )。比较 妊娠 组与非 妊娠 组在年 龄、雌二醇水平、子宫内膜 厚度、胚胎复苏存活率及完整存活率上差异均无显著 性意义 ( P > 0105), 优质胚胎率差 异有极显著性意 义 (P < 01 01)。结论 优质胚胎是移 植后获 得妊娠 的关键, 采用 冻融胚 胎移植 技术可 以提高辅 助生殖技术的累 计妊娠率。 关键词: 冻融胚胎移植; 优 质胚胎; 妊娠 中图分类号: R 71 文献标志码: A
中国实用妇科与产科杂志 2008年 1 月 第 24 卷 第 1期
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11 212 复苏过程 从液氮储存罐中取出冷 冻胚胎, 室 温停 留 40 s, 置 30e 水浴停留 40s, 剪断麦管, 逐步脱掉丙二 醇和 蔗糖。将复苏后的胚 胎移至 培养液 中, 倒 置镜下 检查复 苏 后胚胎的存活 情况。细 胞成 活 50% 以上 的判 断为 存活 胚 胎; 所有卵裂球均完整无 损伤为 完整存 活胚胎; 细胞 数 > 2 细胞, 碎片 < 20% 为 优 质胚 胎。放 入 5% CO2培 养箱 中 培 养。培养 2h后, 可以进行胚胎移植。 11 3 冻融胚胎移植 120个周期 中 7个 自然周期, 其 余为 激素替代周期。替代 周期患 者均于 月经第 3 天, 每次口 服 戊酸雌二醇 (补佳 乐 ) 2m g, 1日 2次, 月经第 8天开始 超声 监测子宫内膜, 根据子宫内膜厚度 及雌二醇 ( E2 ) 水平 调整 药量。当子宫内膜 > 8mm, E2 > 734pm o l/L 时, 肌 注甲羟 孕 酮 40m g, 1日 2次, 2d后在超声引导下行胚胎移 植。 11 4 妊娠判定 胚胎移植后第 14天始测血 B-人绒毛膜促 性腺激素 ( B-HCG )。如 果阳性, 继续 黄体支 持至孕 12周。 移植后 4~ 5周 , 腹部超声检查, 查有无胚囊及胎心搏动, 以 确认是否为临床妊娠 。
11 5 统 计学处 理 结 果采用 SPSS 1010 for W indow s统计 软件, 以均数 ? 标 准 差 ( x ? s ) 表 示, 采用 t 检验 和 卡方 检 验。
2 结果 120个 周期 胚 胎复 苏移 植, 共 复苏 胚 胎 370 个, 存 活
316 个, 复 苏 存 活 率 为 8514% , 完 整 存 活 胚 胎 232 个 ( 6217% )。 120个周 期均 有胚 胎可 移植, 共 移植 316 个 胚 胎, 平均每 周期移植 2163个胚胎。临床妊娠 39例, 妊娠 率 为 321 5% 。其 中, 年 龄 [ 30 岁 的 患 者 妊 娠 率 为 401 4% ( 19 / 47) , 31 ~ 34 岁 患 者 281 6% ( 12 /42), \ 35 岁 患 者 251 8% ( 8 /31)。双胎 13例, 单胎 26例, 流产 6例, 胚 胎种 植率 161 5% ( 52 /316) 。自然周期 7个, 妊娠 2例 ( 2 /7), 均 为单胎; 激 素替代周期 113个, 妊娠 37例 ( 3217% )。 211 子宫内膜厚度、E2水平与妊娠的关系 分别统计妊 娠 与非妊娠组在肌 注甲羟孕酮前的子 宫内膜厚度与 E2水平, 两组间差异无显著性意义 ( P > 0105)。见表 1。