大肠杆菌及菌落总数
菌落总数及大肠菌群
菌落总数及大肠菌群的测定一、菌落总数的测定1.准备工作：1.1先将所有仪器用报纸包好，所需药品配置好，放入121℃灭菌锅灭菌15min分钟1.1微检室提前开好紫外线灯杀菌30分钟以上。
1.2把灭好菌的培养基加热溶解，放置50℃的水浴锅恒温备用2.样品处理：先用酒精对产品外袋消毒，然后打开放入放入研钵中压碎或用剪刀剪碎（注：手部接触的部分要丢弃）3.称取25ɡ样品于225ml生理盐水中，摇匀生理盐水中，摇匀。
各吸1ml至两个培养皿中，倒入培养琼脂，转动平板混匀。
4.待琼脂凝固后放翻转平皿，放入36±1℃无菌培养箱培养48小时。
二、大肠菌群的测定：1.称取25ɡ处理好的样品于225ml生理盐水中，摇匀。
各吸取10ml至3根月桂基硫酸盐胰蛋白（LST）肉汤双料管中，再各吸取1ml至3根月桂基硫酸盐胰蛋白（LST）肉汤单料管和9ml生理盐水中，把试管中样液和生理盐水摇匀，用另一支移液管分别吸取1ml至另外3根单料管中。
2.把试管塞好放入36±1℃无菌培养箱培养24小时，观察导管内是否有气泡产生，如未产气则继续培养至48小时，不产气者为阴性，产气者进行复发酵实验。
3.复发酵实验：用接种环从所有48小时内发酵产气的LST肉汤管中分别取1环，移种于煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48小时，观察是否产气，产气者为大肠菌群阳性。
4.大肠菌群最可能（MPN）的报告根据大肠菌群阳性管数，检索MPN表报告每克（或毫升）样品中大肠杆菌的MPN 值。
（1）营养琼脂的配置：称取23.5g于1L蒸馏水中，加热沸腾至完全溶解，分装于500ml锥形瓶中，1瓶大约装350ml，121℃高压灭菌15分钟。
（2）月桂基硫酸盐胰蛋白（LST）肉汤双料管配置：称取17.8g于300ml蒸馏水中，加热沸腾至完全溶解，分装于有倒立发酵管的试管中，每管10ml，121℃高压灭菌15分钟。
（注：单料其他成分不变，水分加倍）（3）煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤配置：称取40g于1L蒸馏水中，热沸腾至完全溶解，分装于有倒立发酵管的试管中，每管10ml，121℃高压灭菌15分钟。
菌落总数和大肠菌群的区别
关键词：菌落总数；大肠菌群；食品我国的国家标准绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定，菌落总数和大肠菌群是食品中安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，常常受到生产企业和消费者的高度父注，菌落总数的报告单位是cfu／g (ml )，大肠菌群的报告位是mpn／100g ( ml)，那么cfu，mpn是什么含义呢，有的食品微生物检测中菌落总数结果很高但大肠菌群很低，有关企业对此不太理解，现在将做一下解释说明。
L菌落总数(cfu)菌落总数是用来判定食品在被加工过程中被污染的程度及卫生质量的重要指标，食品的生产加工过程叶中，卫生质量的高低首先决定食品原料的来源．原料的卫生与否，是否被污染过，这是根本原因，其次是环境卫生水平的高低，再次就是加工人员和加工工具的卫生状况，要保证食品卫生安全就必须保证所加工的原料来源，环境，加工工具和人员符合卫生标准，但是如何判定食品生产加工过程中是否符合卫生要求，以便对被检产品做出一个科学的评价，菌落总数的多少在一定程度上反映出卫生质量的优劣，也可以用这一方法观察出食品中细菌的繁殖动态，以便于对被捡样品进行卫生评价时提供科学依据。
菌落总数中的菌落英文意思是(colony)，定义为细菌和其他几种做微生物在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼所识别的生长物，它是由数以万计的相同细菌聚集而成的，故又有细菌集落之称。
各种细菌的菌落各自具有一定的特征，按其特征的不同可以在某种程度上鉴别某种细菌，为卫生检验提供依据，菌落总数是指在被检样品的单位重量( g )．体积(m1) 或表面积(clni) 内所含能于某种固体培养基上在一定条件下培养后所生成的细菌集落的总数。
其培养的原理是以检样在被稀释到一定体积后，吸取一定量的检样，检样中的细菌细胞和培养基混合后，每个细菌细胞部形成一个肉眼可见的菌落的假设为基础的．由于检验中采用的是37℃有氧条件下培养。
因而并不能测出每克或每毫升样品内的实际活菌数，其中的微嗜氧菌，厌氧菌，冷营养菌在此条件下都不能生长，有特殊营养要求的一些细菌的生长也受到了限制，因此培养的只是一群能在普通营养琼脂中发育中发育的嗜中温的需氧兼性厌氧的细菌总数，只有具备每种细菌生长要求的特定的环境条件，才能将所有细菌全部培养出来，因此要的到全部的茼落总数应将检样接种到不同的培养基上，但国家的食品卫生标准对食品中菌落总数的规定并不需要接种不同的非选择性培养基，原因就是标准所规定的数值全部是在37℃有氧条件下测定得出的。
大肠杆菌和菌落总数
所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(mL)。
它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
(三)实验器材(1) 菌落总数的测定：1)培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3.0 g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g 水1000mL pH7.4～7.6 将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。
也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。
将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH，直至PH达7.6。
反之，用1mol/LHCL 进行调节。
无菌生理盐水：需用生理盐水浓度是0.9%：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。
2)器材试剂：牛肉膏蛋白胨 NaCl 1moL/LNaOH 1moL/LHCL 灭菌水高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶带玻璃塞瓶天平试管牛角匙pH试纸（pH5.5-9.0）棉花记号笔纱布吸管麻绳牛皮纸量筒玻璃棒电热炉称量杯灭菌三角瓶灭菌的具塞三角瓶灭菌平皿灭菌吸管灭菌试管高压蒸气灭菌：1.将内层锅去处，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。
饮用水微生物学指标
饮用水微生物学指标
饮用水微生物学指标是衡量饮用水质量的重要参数之一。
这些指标包括总大肠菌群、大肠杆菌和菌落总数等方面，它们可以反映饮用水中是否存在病原微生物的污染，以及水体的清洁程度和污染程度。
一、总大肠菌群
总大肠菌群是饮用水中最常见的微生物指标之一。
它是一类常见的肠道细菌，包括大肠杆菌和其他相关菌群。
总大肠菌群的检测可以间接反映饮用水中是否存在病原微生物的污染。
这些细菌通常来自动物的粪便，如果饮用水中出现总大肠菌群超标，往往意味着水源受到了污染。
二、大肠杆菌
大肠杆菌是一类常见的肠道细菌，其存在通常意味着饮用水中存在粪便污染。
大肠杆菌的检测是评估水源是否受到病原微生物的污染的重要手段。
在饮用水中出现大肠杆菌超标时，通常意味着水体中存在其他更危险的病原微生物，如霍乱弧菌、沙门氏菌等。
因此，大肠杆菌的检测也是保障饮用水安全的重要措施之一。
三、菌落总数
水中菌落总数可以作为评价水质清洁程度和考核净化效果的指标。
水中细菌总数与水体受有机物污染的程度成正相关，常作为评价水体污染程度的一个重要指标。
菌落总数反映了水体中细菌的总数量，可以用来判断水体中是否存在污染源，以及污染的程度和类型。
如果菌落总数超标，往往意味着水体中存在大量的有机物污染，需要采取相应的净化措施来保障饮用水安全。
总之，饮用水微生物学指标是保障饮用水安全的重要措施之一。
通过对这些指标的监测和分析，可以及时发现和解决饮用水安全隐患，保障人民群众的健康和生命安全。
食品微生物学检验大肠菌群计数和菌落总数的测定
食品微生物学检验大肠菌群计数和菌落总数的测定食品微生物学检验大肠菌群计数和菌落总数的测定摘要：菌落综述和大肠菌群超标是食品产品卫生指标中常见的质量问题，国家绝大多数食品都制订了菌落总数和大肠菌群的指标，并对其数量做了详细的规定。
菌落总数和大肠菌群是食品中的安全性指标，是影响产品质量问题的常见指标，在对食物进行检测的时候菌落总数以及大肠菌两项指标容易出现相应的检测问题{1】，为了熟悉和掌握大肠菌计数和菌落总数的测定的方法和技术，本次实验以未清洗的生菜为实验对象，用MPN计数法对大肠菌群进行计数，用平板倾注的方法培养微生物后观察获得的单菌落来测定菌落总数。
关键词：生菜；大肠菌MPN计数法；菌落总数；平板倾注一、前言：食品中菌落总数是指食品样检经过处理，在一定条件下（如培养基成分、培养温度和时间、PH值、需氧性质等）培养后，所得1mL （或1g）检样中形成菌落的总数。
菌落总数测定通常是用来判定食品被微生物污染的程度及卫生质量，测定结果反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生评价。
大肠菌群是需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚杆菌。
该菌群主要来自于人和温血动物的肠道，需氧与兼性厌氧，不形成芽孢;在35~37℃条件下，48 小时内能发酵乳糖声酸产气，食品中大肠菌群数以每1mL(g)检样内大肠菌群最可能数（the most probable number,MPN）表示。
[2]二、实验材料与方法（一）实验材料1、实验器材高压灭局锅恒温培养箱电子天平2、实验材料及试剂未经清洗的生菜无菌生理盐水3、菌落总数的测定所用培养基及其配方平板计数琼脂（PCA）培养基胰蛋白胨5.0g 酵母浸膏2.5g 葡萄糖1.0g 琼脂15.0g 蒸馏水1000mL PH1.0±0.24、大肠菌群计数所用培养基及其配方越贵基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤，结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA），磷酸盐缓冲液，无菌生理盐水，无菌1mol/L氢氧化钠溶液，无菌1mol/L盐酸溶液。
菌落总数、大肠菌群测定方法
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载菌落总数、大肠菌群测定方法地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容菌落总数和大肠菌群测定（固体样品）药品：1、平板计数琼脂2、月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）3、煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）4、氯化钠设备材料：烧杯、三角瓶、广口瓶、培养皿、刻度吸管、倒气管、玻璃棒、试管、硅胶塞、洗耳球、棉花、布或报纸等。
准备工作（指导书是按一个样品所需物品准备的，实验室可按样品量增加）1、平板计数琼脂培养基准备----用于菌落总数测定将三角瓶放在电子称上，去皮，按平板计数琼脂使用说明称量，加200ml 蒸馏水搅拌，放电炉上煮沸加热煮沸，充分溶解，盖上硅胶塞，用报纸或布包好，再用橡皮筋扎紧。
2、月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤----用于大肠菌群测定（a）将烧杯放在电子称上，去皮，按使用说明称量，加100ml蒸馏水搅拌，放电炉上煮沸，充分溶解。
（b）用10ml（毫升）的吸管分装到9支(18*180规格)试管中，每支试管加10ml的月桂基溶液LST（合计90毫升）。
（c）9支试管分别放入倒气管（开口向下），排气，盖上硅胶塞。
3、0.85%的生理盐水----用于样品稀释将广口瓶去皮，称取氯化钠1.91g加225ml蒸馏水，摇匀，用报纸或布包好，再用橡皮筋扎紧；同样配制第二瓶。
4、准备2个空试管，盖上硅胶塞----用于样品稀释。
5、准备8个培养皿，用布包扎好。
6、准备至少3支5ml和1支10ml带有刻度的吸管，用布包扎好（顶部可用棉球塞住，防止吸液时，液体不慎吸入洗耳球）。
7、准备操作的工具：剪刀1把、镊子1个、勺子等打开产品包装所需工具，用布包扎好。
二、使用灭菌锅灭菌1、检查灭菌锅底部加热管水位是否正常，水位要高过加热丝。
化妆品大肠杆菌检测标准
化妆品大肠杆菌检测标准一、菌落总数菌落总数是指一定条件下培养后，在样品中生长的微生物菌落的总数。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映化妆品的污染程度和加工过程的卫生情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中菌落总数的限量值不得超过1000 CFU/g。
二、大肠菌群大肠菌群是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中大肠菌群的限量值不得检出。
三、肠杆菌属肠杆菌属是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中肠杆菌属的限量值不得检出。
四、大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中大肠埃希氏菌的限量值不得检出。
五、沙门氏菌沙门氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中沙门氏菌的限量值不得检出。
六、志贺氏菌志贺氏菌是指在一定条件下培养后，能发酵乳糖、产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映肠道细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中志贺氏菌的限量值不得检出。
七、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是指在一定条件下培养后，能产生金黄色色素的革兰氏阳性球菌。
它是评价化妆品卫生质量的重要指标之一，可以反映皮肤细菌污染的情况。
按照国家标准方法规定，化妆品中金黄色葡萄球菌的限量值不得超过100 CFU/g。
八、溶血性链球菌溶血性链球菌是指在一定条件下培养后，能产生溶血作用的革兰氏阳性球菌。
大肠杆菌及菌落总数
所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(mL)。
它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
)实验器材(三 (1) 菌落总数的测定：1)培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3.0 g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g 水1000mL pH7.4～7.6 将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。
也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。
将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH，直至PH达7.6。
反之，用1mol/LHCL 进行调节。
无菌生理盐水：需用生理盐水浓度是0.9%：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。
2)器材试剂：牛肉膏蛋白胨 NaCl 1moL/LNaOH 1moL/LHCL 灭菌水牛角匙试管培养皿三角烧瓶带玻璃塞瓶天平高压蒸气灭菌锅牛皮纸麻绳 pH5.5-9.0试纸（）棉花记号笔纱布吸管pH 灭菌平皿灭菌的具塞三角瓶量筒玻璃棒电热炉称量杯灭菌三角瓶灭菌试管灭菌吸管．高压蒸气灭菌：1.将内层锅去处，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。
大肠杆菌及菌落总数
所谓细菌总数是指1mL或1g检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落(colony-forming unit，cfu)数，故其单位应是cfu/g(mL)。
它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群，是指在37℃24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要由肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
(三)实验器材(1) 菌落总数的测定：1)培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基牛肉膏3.0 g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g 水1000mL pH7.4～7.6 将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。
也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。
将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积。
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH，直至PH达7.6。
反之，用1mol/LHCL 进行调节。
无菌生理盐水：需用生理盐水浓度是0.9%：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。
2)器材试剂：牛肉膏蛋白胨 NaCl 1moL/LNaOH 1moL/LHCL 灭菌水高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶带玻璃塞瓶天平试管牛角匙pH试纸（pH5.5-9.0）棉花记号笔纱布吸管麻绳牛皮纸量筒玻璃棒电热炉称量杯灭菌三角瓶灭菌的具塞三角瓶灭菌平皿灭菌吸管灭菌试管高压蒸气灭菌：1.将内层锅去处，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。
肉类食品微生物检测标准
肉类食品微生物检测标准
1. 菌落总数，菌落总数是指在一定温度和时间下，培养基上生长的微生物总数。
通常以CFU/g（菌落形成单位/克）来表示。
菌落总数的标准值因国家和地区的不同而有所差异，一般来说，肉类制品的菌落总数应控制在一定范围内，以确保食品的新鲜度和卫生安全。
2. 大肠杆菌，大肠杆菌是一种常见的肠道致病菌，其存在可能意味着食品受到了粪便污染。
因此，肉类制品中大肠杆菌的检测标准通常被严格控制，以保证食品的卫生安全。
3. 沙门氏菌，沙门氏菌是一种常见的食品中毒致病菌，其存在可能导致食品中毒事件。
因此，肉类食品中沙门氏菌的检测标准也被严格规定，以确保食品的安全性。
4. 霉菌和酵母菌，霉菌和酵母菌是一类常见的微生物，它们可能导致食品变质和产生毒素。
因此，肉类食品中霉菌和酵母菌的检测标准也被列入食品安全标准中。
除了上述几种常见的微生物检测标准外，不同国家和地区还可
能针对特定的肉类食品制定其他微生物检测标准，以确保食品的安全和质量。
总的来说，肉类食品微生物检测标准的制定是为了保障食品安全，减少食品中毒事件的发生，确保消费者的健康。
大肠杆菌、菌落总数检测步骤
大肠杆菌及菌落总数检测方法为了对鸡精产品的微生物指标进行有效的控制，对微生物的检测就显的十分重要。
下面是鸡精产品的大肠杆菌及菌落总数实验检测方法。
一、大肠杆菌：1）培养基准备（以3.5g乳糖胆盐发酵琼脂为例）双料试管配制A、用量杯量取加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理方法详见注一）。
B、用0.1g称量天平秤取7g乳糖。
C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入三根装有小导管的试管中（此三根为双料试管，即双倍原料）。
单料试管配制A、用量杯量取加热的100ML蒸馏水（实验前需对蒸馏水进行高压灭菌处理，处理方法详见注一）。
B、用0.1g称量天平秤取3.5g乳糖。
C、将A、B混合均匀，并用10ml吸管各取10ml混合液分别注入六根装有小导管的试管中（此六根为单料试管，即单倍原料）。
2）将配制好的试管放入灭菌锅进行115℃进行灭菌10min。
3）将灭菌过后的试管放置在无菌室，常温保存一周。
4）若要对生产的样品检测其大肠杆菌，其步骤如下：A、量取灭菌后的蒸馏水225ml加温后与25g样品混合均匀。
（样品需要在无菌室中，有封盖的塑料杯中进行混合）B、取三个玻璃培养皿，分别标上-1、-2、-3标记。
C、取两根新试管取9ml蒸馏水分别标为a、b。
D、用吸管吸取1ml样品液体，注入-1培养皿中，并盖上盖子。
E、用吸管吸取1ml样品液体，注入a试管中，记为-2培养基液。
F、用吸管吸取1ml a试管中的液体，注入到b试管中，记为-3培养基液。
G、用1ml吸管取样品液体分别注入3根单料试管中，用10ml 吸管取样品液体分别注入双料试管中H、用1ml吸管取-2培养试管液体，分别注入到单料试管中。
I、装好液体的试管，用试管塞封好，放到36℃±1℃的恒温培养箱中24小时培养。
J、24小时培养后，取出并用肉眼观察试管的颜色及冒气泡情况，若有其中的任意状况，说明有大肠杆菌，需要通过美兰做进一步的检测。
菌落的测定和大肠杆菌总数ppt
三、实验步骤
1、检样稀释及培养 （1）以无菌操作，将检样包装打开，称取25g 豆豉， 放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玱璃三 角瓶内（瓶内预先置适当数量的玱璃珠），经充 分振摇做成1：10的均匀稀释液。 （2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁 徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸 管尖端丌要触及管内稀释液，下同），振摇试管 混合均匀，做成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍 递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支 1ml灭菌吸管。
二、实验试剂不仪器
• 试剂：0.85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨 5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g、 蒸馏水1000mL、pH 7.0±0.2 • 仪器：恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三 角瓶、培养皿、普通试管、试管架、酒精灯、灭 菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玱璃蜡笔，灭菌枪 头。
四、实验结果不记录
10-1 10-2 10-3 报告数
1 2
稀释液对 照皿 空白皿
五、分析结果不存在的问题
豆豉中大肠菌群的计数
检测程序
一、实验原理
• 一群在36℃条件下培养48h能发酵乳糖、产酸产 气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。该 菌群主要来源于人畜粪便, 作为粪便污染指标评价 食品的卫生状况, 推断食品中肠道致病菌污染的可 能。食品中大肠菌群数系以没1 mL（g）检验内 大肠杆菌最可能数（the most probable number ，MP ①取10-4、10-5、10-6倍数稀释液，每个稀释度接种三 管单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管 接种1mL；同时每个稀释度接两管双料月桂基硫酸 盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种10mL。 36℃±1℃培养24h±2h，检查倒管内是否有气泡产 生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底 逸出，如未产气则继续培养至48h±2h。记录在24h 和48h内产气的LST肉汤管数。未产气者为大肠菌 群阴性；对产气者，则进行复发酵试验。 注意：以48h±2h为最终观察结果时限。结果也以此 时为最终结果。
菌落总数和大肠菌群
乳糖发酵试验
样品稀释后，选 择三个稀释度， 每个稀释度接种 三管乳糖胆盐发 酵管。36±1℃培 养48±2h，观察 是否产气。
分离培养
将产气发酵管培 养物转种于伊红 美蓝琼脂平板上， 36±1℃培养1824h，观察菌落形 态。
证实试验
挑取平板上的可 疑菌落，进行革 兰氏染色观察。 同时接种乳糖发 酵管36±1℃培养 24±2h，观察产 气情况。
大肠杆菌的检测
大肠杆菌的生物学特性 大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌， 分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属。 大肠杆菌为人和动物肠道中的常 居菌，一般多不致病，在一定条件下可 引起肠道外感染。
大肠杆菌的检验方法
检验程序
根据证实为 大肠杆菌阳 性的管数， 查MPN表， 报告每 100ml（g） 大肠菌群的 MPN值。
37℃ 培养48h 37℃培养24h
取产酸产气的发酵管 中培养液在伊红美兰 平板上进行划线
取有核心和带金 属光泽的深紫色 菌落进行革兰氏 染色
镜检（革兰氏阴性菌）
37℃ 培养24h
证实产气 （阳性） 结果与否
乳糖蛋白胨培养液
乳糖胆盐发酵管
大肠杆菌（右管）产酸产气
伊红美蓝平板 分离 将乳糖发酵阳性的乳糖胆盐发酵管和 增菌液分别划线接种麦康凯或伊红美蓝琼 脂平板；污染严重的检样，可将检样匀液 直接划线接种麦康凯或伊红美蓝平板，于 36±1℃培养18～24h，观察菌落。不但 要注意乳糖发酵的菌落，同时也要注意乳 糖不发酵和迟缓发酵的菌落。
9ml水 1:100
9ml水 1:1000
9ml水 1:10000
倒平板
熔化已灭菌的培养基并冷却至45℃左 右倒平板，每种培养基每个稀释度各 三只平板。
培养及计数 培 养 条 件 ： 倒 置 于 37±1℃ 温 箱 内 培 养 48±2h。 计数时间：到达规定培养时间，应立即计数。 如果不能立即计数，应将平板放置于0-4℃， 但不得超过24h。 计平皿中菌落数：肉眼观察，必要时用放大镜 检查。记下各平板的菌落总数，求出同稀释度 的各平板平均菌落数。
食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测实验报告
实验九食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测[实验目的]1、了解国家规定的食品质量与细菌菌落总数和大肠菌群数量的重要关系。
2、掌握食品细中细菌菌落总数及大肠菌群的检测方法。
[实验原理]菌落总数根据稀释平板技术法检测每mL/g检样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上,经37℃、24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
它所反映的是检样中的活菌数，细菌数越多，说明污染程度越大，这项指标可作为判定待测样品被污染的程度。
大肠菌群数是在100mL(g)食品中（或1000 mL水中）大肠菌群最近似值。
它是指肠杆菌科中的４个属，即埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
这一菌群致病力不强，具有共同特点：好氧和兼性厌氧、革兰氏染色阴性反应、无芽孢杆菌、37℃培养24-48h能发酵乳糖产酸产气。
大肠菌群在人畜肠道内含量最多，可随排泄物进入水源或污染食品。
国际公认以大肠菌群的存在作为粪便污染指标。
这项指标可判定待测样品有无被粪便污染及污染的程度。
[实验材料]1、检样牛乳（饮料、酱油）2、培养基普通营养琼脂平板、单料乳糖胆盐发酵培养基、乳糖发酵培养基、EMB平板3、仪器和其他物品恒温箱、水浴锅、无菌培养皿、无菌吸管、无菌盐水瓶（内装225 mL无菌生理盐水）、无菌试管（内装9 mL无菌生理盐水）、灭菌剪刀、镊子等[实验内容]1、细菌菌落总数的测定(1)制备样品及样品稀释取待测样品（牛乳、酱油）一瓶，用点燃的酒精棉球烧灼瓶口，若是塑料瓶则用75%的酒精棉球擦拭灭菌。
在无菌条件下取样25 mL放入内装225 mL生理盐水的瓶中，充分混匀，制成10-1的稀释液。
用1 mL无菌吸管吸取10-1稀释液1mL，沿管壁徐徐注入装有9mL无菌生理盐水的试管中（注意，吸管尖端不要触及管内稀释液），振荡试管，混合均匀，制成10-2的稀释液。
另取1mL无菌吸管，按上述操作方法做成10-3稀释液。
每次稀释，换用一支无菌吸管，共做10-1、10-2、10-3三个稀释度，分别含样品0.1mL，0.01mL，0.001mL。
菌落总数及大肠菌群测定 - 副本
固体检样以克（g)为单位报告，液体检样以毫升 （ml）为单位报告，表面涂擦则以平方厘米 （cm2）报告。
-----大-大肠肠菌菌群群
粪便污染指示菌之一
一、大肠菌群的定义
二、大肠菌群MPN值（大肠菌群数）所指示的 卫生意义 三、大肠菌群计数方法：
当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明 显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则 每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开 计数。如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不 到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘 2代表全平板的菌落数。
如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘 以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情 况计算出的菌落数按估算值报告。
不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平 板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍 数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（ 有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检 样计数报告的依据。
大肠菌群MPN值
指每1g或1ml食品检样中大肠菌群最可能数。
大肠菌群MPN值（大肠菌群数）所指示 的卫生意义：
1.它可作为粪便污染食品的指示菌。 2.它可作为肠道致病菌污染食品可能性的指示菌。
大肠菌群的检测：旧国家标准 GB/T4789.3-2003三步法
乳糖发酵试验 分离培养 证实试验
大 肠 菌 群 检 测 程 序
GB/T4789.3-2003版食品卫生微生物学检验 大 肠菌群测定
大肠大菌肠群菌的群定义
具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。 指在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需 氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢的杆菌。 包括埃希氏菌属、柠檬酸菌属、肠杆菌属和克雷 伯氏菌属等的一些菌种。
微生物检测注意事项——大肠菌群和菌落总数
分析与检测T logy科技30 食品安全导刊 2018年9月我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌3项，其中致病菌一般指“肠道致病菌和致病性球菌”，主要包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、致病性链球菌4种。
此外，鉴于很多霉菌能够产生毒素，引起消费者食物中毒及其他疾病，故特定产品也应对产毒霉菌进行检验。
大肠菌群检测注意事项方法选择大肠菌群（C o l i f o r m b a c t e r i a）是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。
调查研究表明，大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方。
人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因之一，粪便中多以典型大肠杆菌为主，而外界环境中则大肠菌群的其他菌株较多。
大肠菌群检测的关键在于方法的选用，食品中大肠菌群检测有两种表示方法，其一是以100m L(g)检样内大肠菌群最大可能数（M P N）表示，检测方法需使用G B/T4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》；其二以每g（m L）样品中大肠菌群的MP N值表示，检测方法需使用G B4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》。
G B/T4789.3-2003《食品卫生微生物学检验大肠菌群测定》虽然被后更新的方法代替，但卫生部关于规范食品中大肠菌群指标的检测工作公告（2009年第16号）明确指出，为规范食品中大肠菌群指标的检测工作公告如下：现行食品标准中规定的大肠菌群指标以“M P N/100克或M P N/100毫升”为单位的，适用《食品卫生微生物学检验大微生物检测注意事项——大肠菌群和菌落总数□ 董玲 上海英斯贝克商品检验有限公司大肠菌群（Coliform bacteria）是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
菌落总数和大肠菌群测定方法
菌落总数和大肠菌群测定方法菌落总数和大肠菌群的测定方法如下：一、菌落总数的测定方法菌落总数是指食品样品在一定条件下培养后，得到的1克或1毫升样品中所含的活菌个数。
它反映了食品在生产过程中的卫生状况，是判定食品质量的重要指标之一。
1.样品处理：根据样品是固体或液体，采用不同的处理方法。
对于固体样品，先进行均质化处理，将其粉碎并混匀。
对于液体样品，直接进行摇匀。
2.稀释：根据样品的污染程度，将样品稀释至适当浓度。
通常采用系列稀释的方法，即先将样品稀释10倍，再稀释10倍，直到适合接种。
3.接种：将稀释后的样品接种到培养基上，可以采用倾注法或涂布法。
倾注法是将稀释后的样品倒入培养皿中，摇匀后倾注培养基；涂布法是将稀释后的样品均匀涂布在培养基表面。
4.培养：将接种后的培养皿放在适宜的温度和湿度下培养，一般培养时间为24-48小时。
5.计数：观察培养后的菌落数量，并计算每克或每毫升样品中的菌落总数。
二、大肠菌群的测定方法大肠菌群是指一群能在30℃-37℃的伊红美蓝琼脂平板上生长并产生深紫色素的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
它主要来源于肠道，是人类肠道中的主要菌群之一。
大肠菌群的测定对于食品卫生质量的控制具有重要意义。
1.样品处理：与菌落总数测定类似，将固体或液体样品进行均质化处理和稀释。
2.接种：将稀释后的样品接种到伊红美蓝琼脂平板上，可以采用倾注法或涂布法。
3.培养：将接种后的平板放在适宜的温度和湿度下培养，一般培养时间为24-48小时。
在培养过程中，大肠菌群会在伊红美蓝琼脂平板上形成深紫色的菌落。
4.验证试验：为了确保结果的准确性，需要进行验证试验。
可以采用革兰氏染色法对可疑菌落进行染色，以便确认是否为大肠菌群。
5.计数：观察培养后的菌落数量，并计算每克或每毫升样品中的大肠菌群数。
需要注意的是，上述方法仅供参考，具体操作步骤可能会因不同的检测机构或标准而有所差异。
在实际操作中，应根据具体情况进行调整和修改。
另外，为了保证检测结果的准确性和可靠性，需要注意实验室的卫生条件、仪器的校准、试剂的质量以及操作人员的专业素质等方面的因素。
食品中菌落数及大肠菌群检测
95%可信限
1ml（g） ×3
2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
0.1ml（g） ×3
0 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3 0 0 0 0 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3 3
食品检测
第四小组成员： 邱欢欢、许小雪、吴湃泳、王子维、谭穗芳、钟思杰
相关食品质量标准
理化指标：
微生物标准是 菌落总数≤1000cfu/g
大肠菌群≤40MPN/100g
Page
2
食品微生物常规检验内容与步骤
菌落总数 感官观察
样品
大肠杆菌数目
Page
3
菌落总数的测定
Page
七、分析与讨论
Page 10
大肠菌群测定
大肠菌群概念：
大肠菌群是指一群能在37℃培养24h内发酵乳糖、产酸产气、需氧和 兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语。它不代表某一个或某一属 细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方 面并非完全一致。其中主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等。 分布：分布较广，在温血动物粪便和自然界广泛存在。 大肠菌群是作为粪便污染指标提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有 否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，可以推测该食品中存在着肠道 致病菌污染的可能性，也反映了对人体健康危害性的大小。 大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被国内外广泛应用于食品卫生 检测工作中。
一、大肠菌群检验方法
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
所谓细菌总数是指ImL或lg检样中所含细菌菌落的总数，所用的方法是稀释平板计数法，由于计算的是平板上形成的菌落（colony-forming unit, cfu）数,故其单位应是cfu/g（mL）o它反映的是检样中活菌的数量。
所谓大肠菌群，是指在37°C24h内能发酵乳糖产酸、产气的兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌的总称，主要山肠杆菌科中四个属内的细菌组成，即埃希氏杆菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
水中大肠菌群的检验方法，常用多管发酵法和滤膜法。
多管发酵法可运用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要时间长。
滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
）实验器材（三（1）菌落总数的测定：1）培养基：牛肉膏蛋白腺琼脂培养基牛肉膏 3. 0 g 蛋白腺10. 0g NaCl 5. 0g 水lOOOmL pH7. 4〜7・6将培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白豚、NaCl放入烧杯中，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后到入烧杯。
也可放在称量杯中，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离, 然后立即取岀纸片。
在上述烧杯中先假如少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，加入琼脂，再在石棉上加热使其溶解。
将药品完全洛解后，补充水到所需的总体积。
在未调pH H0,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH,如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入lmol/L NaOH.边加边搅拌，并随时用PH试纸测其PH,直至PH达7. 6。
反之，用1 mol/LHCL进行调节。
无菌生理盐水：需用生理盐水浓度是0.9%：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸憎水中，稀释到100毫升。
2）器材试剂：牛肉膏蛋白腺NaCl ImoL/LNaOH ImoL/LHCL 灭菌水牛角匙试管培养皿三角烧瓶带玻璃塞瓶天平高压蒸气灭菌锅牛皮纸麻绳PH5.5-9.0试纸（）棉花记号笔纱布吸管pH 灭菌平川L灭菌的具塞三角瓶量筒玻璃棒电热炉称量杯灭菌三角瓶灭菌试管灭菌吸管.高压蒸气灭菌：1•将内层锅去处，再向外层锅中加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。
2.放回内层锅，并加入要灭菌的培养皿、试管.烧杯等物品（注意不要装得太挤，以免防碍蒸气流通而影响灭菌效果）。
3•加盖，并将盖上的排气管插入内层的排气槽内，再2两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4•本实验用0. IMPa, 121. 5°C, 20min灭菌。
灭菌所需时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至栏0”时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
（2）大肠菌群的测定；1）培养基：①乳糖胆盐蛋白腺培养基：蛋白腺20g,猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g,乳糖10g,o, pH7・41000mL0・04%漠甲酚紫水溶液25mL,水制法：将蛋白月东、胆盐从乳糖溶于水中，校正pH,加入指示剂，分装，每瓶50mL或每管5mL,并倒置放入一个杜氏小管，115°C灭菌15mino双倍或三倍乳糖胆盐蛋白腺培养基：除水以外，其余成分加倍或取三倍用量。
②伊红美蓝琼脂培养基：蛋白B 10g,乳糖10g, KHPO 2g, 2%伊红水溶液20M1, 0.65%美蓝水匕溶液］0mL,琼脂17g,水lOOOmL, pH7. Io制法：将蛋白陈、磷酸盐和琼脂溶于水中，校正pH后分装.121°C灭菌lomin 备用。
临用时加入乳糖并熔化琼脂，冷至50-55°C,加入伊红和美蓝洛液，摇匀，倾注平板。
③乳糖发酵管：除不加胆盐外.其余同乳糖胆盐蛋白腺培养基。
2）器材：灭菌三角瓶，灭菌的具塞三角瓶，灭菌平皿，灭菌吸管，灭菌试管等。
（四）实验方法（1）水样的采集：1）自来水：先将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌，再开放水龙头使水流5min,以灭菌三角瓶接取水样以备分析。
2）池水、河水、湖水等地面水源水：在距岸边5m处，取距水面10-15cm的深层水样，先将灭菌的具塞三角瓶，瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流入瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出。
如果不能在2h内检测的，需放入冰箱中保存。
细菌总数的测定：（2）1）水样稀释及培养：①按无菌操作法，将水样作10倍系列稀释：⑦根据对水样污染情况的估计，选择2-3个适宜稀释度（饮用水如自来水、深井水等，一般选择1、1:10两种浓度；水源水如河水等，比较清洁的可选择1:10、1:100、1:1000 三种稀释度;污染水一被选择1:100、1:1000、1:10000 三种稀释度），吸取ImL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作3个重复。
③将熔化后保温度45°C的牛肉膏蛋口腺琼脂培养基倒平皿，每皿约lomL, 并趁热转动平川L混合均匀。
④待琼脂凝固后，将平皿倒置于37°C培养箱内培养24±lh后取出，计算平皿内菌落数U,乘以稀释倍数，即得5L水样中所含的细菌菌落总数。
2）计算方法:作平板计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求岀同稀释度的各平板平均菌落数。
3）计数的报告：①平板菌落数的选择：选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个重复时，应选取两个平板的平均数。
如果一个平板有较大片状菌落主长时，若片状菌而应以无片状菌落生长的平板计数作为该稀释度的菌数。
则不宜釆用，落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布乂很均匀，可计算半个平板后乘2 以代表整个平板的菌落数。
②稀释度的选择：a.应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度，乘以该稀释倍数报告之（表1例l）ob.若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30-300之间，则视二者之比如何来决定。
若其比值小于2,应报告其平均数；若比值大于2,则报告其中较小的数字（1例2、例3）。
C.若所有稀释度的平均菌落均大于300,则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（1例4）。
d・若所有稀释度的平均菌落数均小于30、则应按稀释倍数最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（1例5）。
e.若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之（表1例6）of.若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，则以最接近30或300 的平均菌落数乘以该稀释倍数报告之（表1例7）o③细菌总数的报告：细菌的菌落数在100以内时，按其实有数报告；大于100时，用二位有效数字，在二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法修约。
为了缩短数字后面的0的个数，可用10的指数来表示，如表1 “报告方式” 一栏所示。
（3）大肠菌群的测定（多管发酵法）:表1稀释度的选择及细菌数报告方式报告方式（菌落总菌落总数/稀释度及菌落数两稀释度或/（cfu/mL（cfu/g 或数）1010 10 之比cfu/gcfu/mL））..1 1.6或><10 多不可16400164 20 -16000 计.10X3.8 多不可2 或3800037750 1.6 46 295 计..10 或2. 7X 多不可271 60 2.2 27100 270003计§ 103. 1X313多不可- 313000 310000或多不可4计计5 - 270 5 27 270 或11<6-10 <0 0 10.7多不可30500或310003053.112X10-计・1）生活饮用水或食品生产用水的检验：①初步发酵试验：在2个各装有50mL的3倍浓缩乳糖胆盐蛋白）冻培养液（可称为三倍乳糖胆盐）的三角瓶中（内有倒置杜氏小管），以无菌操作各加水样lOOmLo在10支装有5mL的三倍乳糖胆盐的发酵试管中（内有倒置小管）,以无菌操作各加入水样10mL。
如果饮用水的大肠菌群数变异不大，也可以接种3份100mL 水样。
摇匀后，37C培养24h。
②平板分离：经24h培养后，将产酸产气及只产酸的发酵管（瓶），分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板（EMB培养基）上，37C培养18-24ho大肠菌群在EMB平板上，菌落呈紫黑色，具有或略带有或不带有金属光泽，或者呈淡紫红色，仅中心颜色较深；挑取符合上述特征的菌落进行涂片，革兰氏染色，镜检。
③复发酵试验：将革兰氏阴性无芽胞杆菌的菌落的剩余部分接于单倍乳糖发酵管中，为防止遗漏，每管可接种来自同一初发酵管的平板上同类型菌落1-3个，37°C培养24h, 如果产酸乂产气者，即证实有大肠菌群存在。
④报告：根据证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管数，查表107-2（或表107-3）, 报告每升水样中的大肠菌群数（MPN）。
水源水的检验：2）・用于检验的水样量，应根据预计水源水的污染程度选用下列各量。
①严重污染水：b 0. 1, 0. 01. 0. OOlmL各1份。
②中度污染水：10. 1, 0. 1, 0. OlmL各1份。
份。
各1, 0. ImL ③轻度污染水：100, 10, 1份。
④大肠菌群变异不大的水源水：10mL10表2大肠菌群检索表（饮用水）•备注21 .每升水样中大肠菌群数.11 <0 3 418 8 1 327 7 2 1338 11 3 18接种水样总量52 4 14 24100 300mL （70 30 5 18 10 mL2 份，92 22 6 36 mL10 份）120 27 7 43161 31 51 8230 36 9 60230>401069 .3大肠菌群数变异不大的饮用水表.3 2 1接种水样总量阳性管数0 .1003 份300mL （18V每升水样中大肠菌群>1134）mL 数.4表大肠菌群检索表（严重污染水）./mL接种水样量每升水样中备注.大肠菌群数0. 0010.010. 11---------- <900900 ——+ _900 ——+ _950 一 + —一1800 + -- +1900 - + + - 接种水样总2200 - + + - 量为1. 1112300 - - - (1, 0. 1,0. 01, 2800 + + + -0. OOlmL 各9200 ——+ +一份)9400 + + - -18000 + + + -23000 + - + -96000 + + - +238000 - + + +238000+++>+表5大肠菌群检索表（中度污染水）备注每升水样中接种水样量/mL大肠菌群数0.01 0. 1 10 1・90 ------------ <90 ------------ +90 --------- + 接种水样总95 - + - - 11. 11 量为，180 - - 1+ + (10, 0. 01 , 0. 1190 + - - +各一份)mL220 + - + -230 - + - -280++ ______________________________ 920 + ——+940 一 + - +1800 + + + -2300 - + + -9600 + + + -23800 - + + +>+++23800+ 表6大肠菌群检索表（轻度污染水）每升水样中接种水样量/mL备注.大肠菌群数0. 1 1 10 100・9 ------------ <9 一 + ——9 - +——9. 5 _ _ _ +18 - - + +19 + - - + 接种水样总22 + - - + 111. 1 量为23 - + - - , 10 (100, 28 + +- + 各0. ImL, 192 - + - + —份)94 - - + +180 + + - +230 + + --960 一 + + +2380 - + + +2380+>大肠菌群变异不大的水源水7 表・10 89734560阳性管数1 2><5110 699211每升水样120 22160 36230230中大肠菌群数)备注lOOmLdOmLlO份接种水样总量操作步骤同生活用水或食品生产用水的检验。