分子生物学复习题
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1.列举分子生物学的三条基本原理和四方面研究内容。
三条基本原理
A.构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的
B.生物体内一切有机大分子的建成都遵循共同有原则
C.某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性
分子生物学四方面研究内容
A.DNA重组技术(基因工程)
B.基因的表达调控
C.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学)
D.基因组、功能基因组与生物信息学研究
2.有哪些酶和蛋白质参与原核细胞的DNA复制,它们在复制中的生物学功能是什么?
酶类:
引物合成酶:合成DNA的引物
DNA聚合酶
聚合酶Ⅰ:主要是对DNA损伤的修复;以及在DNA复制时切除RNA引物并填补其留下的空隙
聚合酶Ⅱ:修复紫外光引起的DNA损伤
聚合酶Ⅲ:DNA复制的主要聚合酶,还具有3’-5‘外切酶的校对功能,提高DNA复制的保真性
DNA连接酶:若双链DNA中一条链有切口,一端是3’-OH,另一端是5‘-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键,而使切口连接,但是它不能将两条游离的DNA单链连接起来,在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用
DNA拓扑异构酶:
拓扑异构酶Π:该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA,将负超螺旋引入DNA分子DNA解螺旋酶/解链酶:通过水解A TP获得能量来解开双链DNA
蛋白:
单链结合蛋白:稳定已被解开的DNA单链,阻止复性和保护单链不被核酸酶降解
DnaB蛋白:活化引物合成酶,引发RNA引物的合成
Hu蛋白:使DNA压缩、盘绕成念珠状的结构,刺激DNA的复制
DnaA蛋白:与保守序列结合
3.根据DNA复性动力学研究说明DNA序列可以分成哪几种类型。
A:不重复序列/单一序列
B:中度重复序列
C:高度重复序列,卫星DNA
4.简述DNA损伤修复的机制。
A:错配修复:
a Dam甲基化酶使母链位于5’GA TC序列中腺甘酸甲基化
b 甲基化紧随在DNA复制之后进行
c 根据复制叉上DNA甲基化程度,切除尚未甲基化的子链上的错配碱基
B:碱基切除修复:
a 腺嘌呤变为次黄嘌呤与胞嘧啶配对
b 鸟嘌呤变为黄嘌呤与胞嘧啶配对
c 胞嘧啶变为尿嘧啶与腺嘌呤配对
C:核苷酸切除修复:
a 通过特异的核酸内切酶识别损伤部位
b 由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸
c DNA聚合酶以母链为模板复制合成新子链
d DNA连接酶将切口补平
D:DNA的直接修复
a 在DNA光解酶的作用下将环丁烷胸腺嘧啶二体和6-4光化物还原成为单体
b 甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤,防止G-T配对
E:SOS修复
F:重组修复
5.真核生物转录的前体hnRNA(核不均一RNA)如何加工为成熟的mRNA?
5’端加帽:使5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸,促使mRNA和核糖体的结合;m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端,以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解,增强mRNA的稳定
3’端加尾:提高了mRNA在细胞质中的稳定性
RNA的剪接
RNA的编辑
6.试比较真核生物RNA聚合酶II识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么?
7.简述原核生物转录起始与转录终止过程中涉及到的主要蛋白质和核酸结构及其具体的作用。
8.比较原核生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式。
9.简述遗传密码子的基本特点。
10.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的异同?
11.原核生物的蛋白质合成可以分为哪些阶段,简述各阶段的主要事件。
12.简述SangerDNA测序法的原理。
13.在色氨酸高浓度和低浓度下可以观察到,大肠杆菌色氨酸操纵子的表达水平相差约600倍,然而阻遏作用仅使转录降低70倍。请对此现象加以解释。
14.简述大肠杆菌乳糖操纵子的基本结构及其各部分功能。
15.请简要解释一下在大肠杆菌基因表达调控中葡萄糖效应的机理。
16.为什么半乳糖操纵子需要两个转录起始位点。
17.简述真核细胞与原核细胞在DNA结构、基因转录及翻译方面存在的差异、
18.简述真核生物DNA水平上的基因表达调控。
19.简述真核基因转录调控的主要模式。
20.列举三种研究DNA和蛋白质相互作用的方法。
21.何为实时定量PCR
22.蓝白斑筛选的原理?
23.DNA芯片的原理?