分子生物学常用溶液的配制

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分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法(1)0.5M EDTA,PH=8.0往175ml超纯水中加入46.525克Na2EDTA 2H2O,然后加入10克的NaOH,在磁力搅拌器上溶解,用酸度计测量PH值,根据PH值决定再次加入NaOH的量,直至调节PH值至8.0,然后定容至500ml,灭菌后贮存备用。

(2)1M Tris-Hcl, PH=8.0在160ml超纯水中加入24.2克的Tris碱,然后用浓盐酸调PH值至8.0(约需8.4ml的浓盐酸),最后用超纯水定容至200ml。

(用酸度计测PH值)。

灭菌后贮存备用。

(3)TE缓冲液(10mM Tris-Hcl, PH=8.0;1 mM EDTA,PH=8.0)配置100 ml溶液需加入:①1M Tris-Hcl, PH=8.0 1.0ml②0.5 M EDTA,PH=8.0 0.2 ml③超纯水98.8 ml灭菌后贮存备用。

(4) 5M Nacl称146克Nacl 溶于400 ml 超纯水中,然后用超纯水定容至500 ml。

(5) 3.0 NaAc,PH=5.2称24.6克乙酸钠,溶于70 ml超纯水中,然后用冰乙酸调PH值至5.2,最后定容至100 ml。

(6)5M KAc在50 ml 超纯水中溶49.1克的KAc,然后定溶至100 ml。

(7) 2%CTAB提缓冲液(用于DNA提取)①1M Tris-Hcl, PH=8.0 20 ml 100 mM②0.5 EDTA,PH=8.0 8 ml 20 mM③5M Nacl 56 ml 1400 mM加入CTAB 4克,水浴(65℃)或用磁力搅拌器加热溶解,冷却至室温后定容至200 ml。

灭菌后备用。

(8)氯仿/异戊醇(24:1)氯仿96 ml异戊醇4 ml(9)SDS法提取DNA缓冲液(现用现配)配40 ml (最后定容至40 ml)母液量终浓度①1M Tris-Hcl, PH=8.0 4ml 100 mM②0.5 EDTA,PH=8.0 4ml 50 mM③5M Nacl 1.2 ml 150 mM④10%SDS 8 ml 2%(V/W)⑤巯基乙醇30~800μl 0.07~2%(v/v)(10) 10%SDS 溶于80 ml 无菌超纯水中,然后定溶至100 ml。

分子生物学常见溶液配置方法

分子生物学常见溶液配置方法

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

北京雷根生物技术有限公司
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介:
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制,调pH 至8.0,只有其pH 接近8.0,才能完全溶解。

Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理,用于螯合金属离子等,是常用分子生物学试剂。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、按实验具体要求操作。

注意事项:
1、 实验要求无菌时,应注意无菌操作。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:
编号 名称 R00016 Storage EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0) 500ml RT 使用说明书 1份
编号 名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) PS0013 RIPA 裂解液(强) R00195 Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0) R00300
X-gal(20mg/ml) TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。

生化实验常用溶液配制

生化实验常用溶液配制

生化实验常用溶液的配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

《精编分子生物学实验指南》(第五版)溶液配方目录

《精编分子生物学实验指南》(第五版)溶液配方目录

《精编分子生物学实验指南》(第五版)附录1溶液配方目录附录1试剂和溶液 (20)表A.1.1浓酸和浓碱的摩尔浓度和比重 (20)具缓冲能力的苯酚 (20)完全培养基 (1098)去离子甲酰胺 (1098)经DEPC (焦碳酸二乙酯)处理的溶液 (1098)EDTA (乙二胺四乙酸),0.5mol/L,pH8.0 (1098)溴化乙锭,10 mg/ml (1099)溴化乙锭检测液(见附录3D) (1099)Hanks平衡盐溶液(HBSS) (1099)磷酸缓冲盐溶液(PBS),10× (适用于除第7章和第14章外所有章节).1099乙酸钾缓冲液,0.1 mol/L (1099)磷酸钾缓冲液,0.1 mol/L (1100)乙酸钠,3 mol/L, pH 4.8, 5.0,5.2, 6.0, 7.0 (1100)乙酸钠缓冲液,0.1 mm«l/L (1100)磷酸钠缓冲液,0.1 mol/L (1101)SSC, 20× (1101)悬浮培养基(SM) (1101)TAE电泳缓冲液,50× (1101)TBE电泳缓冲液,10× (1101)TE 缓冲液(Tris/EDTA) (1101)Tris • Cl 【Tris (三羟甲基)氨基甲烷】,1 mol/L (1102)酸性沉淀溶液 (1102)丙烯酰胺/亚甲双丙烯酰胺29:1 (1102)BBS (BES 缓冲液),2× (1102)小牛胸腺DNA标准溶液(见附录3D) (1103)完全DMEM (见附录3F) (1103)完全RPMI (见附录3F) (1103)Denhardt 溶液,100× (1103)FBS (胎牛血清)(见附录3F) (1103)固定液 (1104)L-谷氨酸,0.2mol/L (100×)(见附录 3F) (1104)HBSS (Hank平衡盐溶液) (1104)HeBS (HFJPES缓冲盐水),溶液2× (1104)Hoechst 33258检测溶液(见附录3D) (1105)MOPS缓冲液 (1105)PEG溶液 (1105)抑肽素A (1105)酚/氯仿/异戊醇 (1105)SDS电泳缓冲液,5× (1105)SED (标准酶稀释液) (1106)乙酸钠,3mol/L (1106)乙酸钠缓冲液,O. 1 mol/L (1106)SSC, 20× (1106)STE缓冲液 (1106)TEA (三乙醇胺)溶液 (1106)TEN (Tris/EDTA/NaCl)溶液 (1106)TM缓冲液,10× (1107)TNE缓冲液,10× (见附录3D) (1107)Tris缓冲盐溶液(TBS) (1107)胰蛋白酶/EDTA溶液(见附录3F) (1107)TTRS (Tween 20/TBS) (1107)甘油溶液(见1.3) (1107)STET溶液(见1.6) (1108)乙酸钾溶液,pH 4. 8, 5 mol/L (见1.6) (1108)葡萄糖/Tris/EDTA(GTE)溶液(见1.6、1.7和7.3) (1108)NaOH/SDS 溶液(见 1.6、1.7) (1108)Dowex AG50W-X8阳离子交换树脂(见1.7) (1108)乙酸钾溶液,pH约5.5, 3 mol/L (见1.7) (1109)转化储存液《TSS), 2× (见1.8) (1109)CaCl溶液(见 1.8) (1109)2SOC培养基(见1.8) (1109)稀释缓冲液{见1.12) (1109)低盐缓冲液(见1.13) (1109)CsCl 溶液(见 1.13) (1109)PEG 溶液,5× (见 1.13) (1110)碘化钠(NaI)溶液,6mol/L (见2.1) (1110)柱洗涤液(见2.1、2.8) (1110)QBT缓冲液(见2.2) (1110)QC缓冲液(见2. 2) (1110)QF缓冲液(见2. 2) (1110)消化缓冲液(见2.3) (1111)高盐TE缓冲液(见2. 4) (1111)CTAB抽提液(见2_4) (1111)CTAB沉淀液(见2.4) (1111)抽提缓冲液(见2. 4) (1111)CTAB/NaCl溶液(见2.4、2.5) (1112)加样缓冲液,10× (见2_6、3.1、12.2) (1112)裂解缓冲液(见2. 7) (1112)GTBE电泳缓冲液(见2.7) (1112)储存缓冲液(见2.7) (1112)NA-45洗脱缓冲液(见2.8) (1112)碘化钠(Nal)溶液,6.6 mol/L (见 2.8) (1112)Elutip低盐和离盐溶液(见2.8) (1113)-琼脂糖酶缓冲液,10× (见2.8) (1113)柱洗涤液(见2.1、2.8) (1113)结合缓冲液(见2. 8) (1113)洗脱缓冲液,pH 7.5 (见2. 9) (1113)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,29:1 (见2.9) (1113)加样缓冲液,5×(见2.9) (1113)温和脱除液(见2.13) (1114)中度脱除液(见2.13) (1114)核苷酸混合物(见2.13) (1114)标记缓冲液(见2.13) (1114)甲酰胺预杂交/杂交(FPH)溶液(见2.13、4.8) (1114)变性鲑精DNA(见2.13) (1114)Denhardt 溶液,100× (见 2. 13、6.3) (1115)尿素加样缓冲液(见2. 15) (1115)水性预杂交/杂交(APH)溶液(见2. 13) (1115)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,40%/2%(见2.15) (1115)加样缓冲液,10× (见2.6、3.1、12.2) (1115)限制性内切核酸酶缓冲液(见3.1) (1115)酸沉淀溶液(见3. 2) (1116)超声处理的鲱精DNA,2mg/mL(见3•2、6•3) (1116)标准酶稀释液(SED)(见3. 2) (1116)超声处理鲑精DNA,1mg/ml(见3.2) (1117)T4DNA连接酶缓冲液,2×(见3•13) (1117)dNTP/生物素混合物(见3.15) (1117)DNA稀释液(见3.15) (1117)碱性磷酸酶缓冲液,pH 9.5 (见3.15) (1117)地高辛-1111-dUTP-dTTP,10×储存液(见:3.15) (1117)生物素-11-dUTP, 0.5 mmol/L (见 3. 15) (1117)SDS柱缓冲液(见3.15) (1118)碱性磷酸酶缓冲液,pH7.5(见3.15) (1118)生物素酰化随机八聚体(见3.15) (1118)链霉亲和素,1mg/ml(见3.16) (1118)封闭液(见3. 16) (1118)洗涤缓冲液(见3.16) (1118)生物素酰化碱性磷酸酶,0.38mg/ml(见3.16) (1119)乙酸钠,2mol/L,pH4 (见 4.1) (1119)水饱和酚(见4.1) (1119)CsCl, 5. 7 mol/L,经 DEPC 处理(见 4. 1) (1119)组织胍溶液,1 L (见4.1) (1119)组织重悬溶液(见4.1) (1119)胍溶液(见4.1) (1119)TES溶液(见4.1) (1120)变性溶液(见4.1) (1120)TLE溶液(见4.2) (1120)TLE平衡酚(见4.2) (1120)原生质体缓冲液(见4.3) (1120)DNase消化缓冲液{见4.3) (1121)裂解缓冲液(见4.3) (1121)革兰氏阴性菌裂解缓冲液(见4.3) (1121)STET裂解液(见4.3) (1121)终止缓冲液(见4.3) (1121)poly (A)加样缓冲液(见4.4) (1121)中度洗脱缓冲液(见4.4) (1122)T4多核苷酸激酶缓冲液,10× (见4.5) (1122)水相杂交溶液,3× (见4.5) (1122)碱性加样缓冲液(见4.5) (1122)碱性制胶缓冲液,50× (见4.S) (1122)S1核酸酶缓冲液,2× (见4.S) (1122)S1终止缓冲液(见4. 5) (1122)TM缓冲液,10×(见4.5) (1123)碱性电泳缓冲液,50×(见4.5) (1123)S1杂交液(见4. 5) (1123)tRNA, 10mg/ml (JS.4.5, 4.6) (1123)杂交缓冲液(见4.6) (1123)3NTP 混合物,4 mmol/L (见 4. 6) (1123)洗脱缓冲液(见4. 6) (1123)转录缓冲液,5× (见4. 6) (1124)核糖核酸酶消化缓冲液(见4.6) (1124)RNA加样缓冲液(见4.6) (1124)杂交缓冲液,1〇><(见4.7) (1124)终止/加样染料液(见4_ 7、7.4、12.3) (1124)RNA酶反应混合物(见4. 7) (1125)MOPS电泳缓冲液,10× (见4. 8) (1125)剥除溶液(见4. 8) (1125)乙二醛,6 mol/L,,去离子(见4.8) (1125)乙二醛加样缓冲液(见4. 8) (1125)磷酸钠,100 mmol/L,pH 7. 0 (见 4. 8) (1125)甲醛加样缓冲液(见4.8) (1126)甲酰胺预杂交/杂交(FPH)溶液(见2.13、4.8) (1126)变性溶液(见4.8) (1126)RNA酶A,热灭活(见4.9、7.3) (1126)蔗糖缓冲液I (见4.9) (1126)蔗糖缓冲液II (见4.9) (1126)HSB缓冲液(见4.9) (1127)SDS/ Tris缓冲液(见4.9) (1127)甘油储藏缓冲液(见4. 9) (1127)含核苷酸的反应缓冲液,2× (见4.9) (1127)DNase I缓冲液(见4.9) (1127)裂解缓冲液(见4. 9) (1128)诺乃洗涤剂P-40 (NP-40)裂解缓冲液A(见4.9) (1128)诺乃洗涤剂P-40 (NP-40)裂解缓冲液B (见4.9) (1128)洗脱缓冲液(见4. 9) (1128)Denhardt溶液,100×(见2.13、6.3) (1128)高严紧性洗液(见6. 3) (1129)杂交液l(见6.3) (1129)杂交液II (见6. 3) (1129)低严紧性洗涤缓冲液II (见6.3) (1129)SSC杂交溶液(见6.4) (1129)TMAC (氯化四甲基胺)储存液,6 mol/L (见6.4) (1129)TMAC杂交液(见6.4) (1130)TMAC洗液(见6. 4) (1130)SSC预杂交液(见6.4) (1130)免疫筛选缓冲液(见6. 7) (1130)TES缓冲液(见6.8) (1130)杂交液(见6. 8) (1130)免疫沉淀缓冲液(见6. 8) (1131)Tris • Cl/SDS,4×,pH 6. 8 (见 6. 8) (1131)Sepharose 蛋白质A悬液(见6. 8) (1131)高盐免疫沉淀缓冲液(见6. 8) (1131)中和液(见6.8) (1131)SDS 样品缓冲液,2× (见 6.8、10.3、10.14、10.15) (1131)LB培养基(见6. 10) (1132)平板(见6. 10) (1132)上层平板(见6.10) (1132)Exo III连接缓冲液(见7. 2) (1132)S1核酸酶缓冲液(见7. 2) (1133)S1核酸酶终止缓冲液(见7. 2) (1133)噬菌体加样缓冲液(见7. 2) (1133)Bal31核酸酶缓冲液,10× (见7.2) (1133)RNA酶A,热灭活(见4. 3、7.3) (1133)dNTP追加液(见7.4) (1133)标记混合物(见7. 4) (1133)核苷酸储存液(见7. 4) (1134)测序酶缓冲液,10×(见7.4) (1134)测序酶稀释液(见7. 4) (1134)测序酶/焦磷酸酶混合物(见7. 4) (1134)测序酶末端终止混合物(见7. 4) (1135)Taq Sanger 混合物(见 7. 4) (1135)Taq末端终止混合物(见7.4) (1135)甲酰胺加样缓冲液(见7. 4、12.4) (1135)终止/加样染料液(见4. 7、7.4、12.3) (1136)TCS终止/加样染料液(见7.4) (1136)(EXO-), 10×,测序缓冲液(见 7.4) (1136)V entRV entR (exo-)测序混合物(见7.4) (1136)终止核苷酸混合物(见7. 4) (1137)试验缓冲液(见7. 5) (1137)磷酸缓冲盐溶液(PBS),10×(见7.5) (1137)引物终止混合物(见7. 5) (1137)两步法封闭液,pH 7.2 (见7. 5) (1137)两步法洗液II (见7. 5) (1137)终止液(见7.5) (1138)洗涤液I (见7.5) (1138)洗涤液II (见7.5) (1138)生物素酰化碱性磷酸酶溶液(见7.5) (1138)封闭缓冲液I(见7. 5) (1138)封闭缓冲液II (见7. 5) (1138)链霉亲和素溶液,pH 7.2 (见7. 5> (1139)DMS反应缓冲液(见7.6) (1139)DMS终止缓冲液(见7.6) (1139)联氨终止缓冲液(见7. 6) (1139)Klenow片段标记混合物(见7.6) (1139)甲酰胺加样缓冲液(见7. 6) (1139)缓冲液梯度凝胶溶液(见7. 7) (1140)变性丙烯酰胺凝胶溶液(见7. 7) (1140)甲酰胺凝胶溶液(见7. 7) (1140)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,38%、2% (见7. 7) (1141)洗脱缓冲液(见8.1) (1141)扩增缓冲液,10×(见8.5) (1141)BES 缓冲液(BBS), 2× (见 9.1) (1141)HEPES 缓冲盐水(HeBS), 2× (见 9.1) (1141)CaCl, 2.5 mol/L (见 9.1) (1142)2DEAE-葡聚糖,10 mg/ml (见 9. 2) (1142)原生质体溶液(见9. 3> (1142)植物电穿孔缓冲液(见9.3) (1142)电穿孔缓冲液(见9. 3) (1142)[3H]氯霉素溶液,0.01μCi/μl(见9.7) (1143)低渗缓冲液(见9. 7) (1143)Triton裂解缓冲液(见9. 7) (1143)TEN(Tris/EDTA/NACl)溶液(见9.7) (1143)Triton/甘氨酰甘氨酸裂解缓冲液(见9. 8) (1143)萤光素酶分析缓冲液(见9. 8) (1143)萤光素储存液(见9. 8) (1144)光发射加速液(见9. 8) (1144)Triton裂解液(见9. 8) (1144)-半乳糖苷酶反应缓冲液(见9. 8) (1144)抽提缓冲液(见9. 8) (1144)戊二醛,0.05% (见 9.11) (1145)HEPES缓冲盐水(HEBS),1×(见9.11) (1145)多聚甲醛溶液,2% (见9. 11) (1145)X-Gal溶液(见9.11) (1145)293细胞培养基(见9. 12) (1146)HEPES缓冲盐水(HEBS),2×(见9.12) (1146)NET缓冲液(见9. 13) (1146)逆转录酶(RT)反应混合物(见9. 14) (1146)考马斯亮蓝溶液(见10.1) (1147)比色用标准蛋白溶液,0.5mg/mlBSA (见10.1) (1147)分光光度测定用标准蛋白溶液,3 mg/ml (见10.1) (1147)SDS样品缓冲液,2× (见 6.8、10.3、10.14、10.15) (1147)磷酸盐/SDS,4× (见 10.3) (1147)磷酸盐/SDS电泳缓冲液,I× (见10.3) (1147)磷酸盐/SDS样品缓冲液,2× (见10.3) (1147)考马斯亮蓝G-250染色液(见10.3) (1148)SDS电泳缓冲液,5×(见10.3) (1148)SDS样品缓冲液,6× (见10.3) (1148)Tris•Cl,4×, pH6.8 (见 10.3) (1148)Tris•Cl,8×, pH 8. 8 (见10.3) (1148)Tris • Cl/SDS, 4×,pH 8. 8 (见 10.3) (1148)Tris • Cl/SDS,pH 8. 45 (见 10.3) (1149)阳极缓冲液(见10.3) (1149)阴极缓冲液(见10.3) (1149)Tricine样品缓冲液2× (见10.3) (1149)封阻液(见10.3) (1149)SDS,重结晶(见10.3) (1149)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,30%/0.8% (见10.3、10.4) (1150)凝胶缓冲液(见10.4) (1150)热琼脂糖溶液,0.5%和1.0% (见10.4) (1150)电泳槽缓冲液(见10.41 (1150)积层胶缓冲液(见10.4) (1150)铬酸洗液(见10.4) (1150)平衡缓冲液(见10.4) (1150)尿素增溶缓冲液(见10.4) (1151)SDS增溶缓冲液(见10.4) (1151)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,30%/1.8% (见10.4) (1151)异丙醇固定液(见10.S) (1151)快速考马斯亮蓝染色液(见10.S) (1151)硝酸银溶液(含氨)(见10.S) (1152)硫代硫酸盐显影液(见10.5) (1152)考马斯亮蓝染色液(见10.5) (1152)碳酸盐显影液(见10.5) (1152)脱色液(见10.5) (1152)显影液(见10.5) (1152)干胶液(见10.S) (1153)固定液(见10.5> (1153)甲醛固定液(见10.5) (1153)荧光染色液(见10.5) (1153)4CN显影液(见10.6) (1153)碱性磷酸盐底物缓冲液(见10.6) (1153)Tris盐缓冲液(TBS,见10.6) (1153)鲁米诺显迹液(见10.6) (1154)转移缓冲液(见10.6) (1154)丽春红S溶液(见10.6) (1154)TTBS (见 10.6) (1154)BCIP/NBT 显迹液(见 10.6) (1154)DAB/NiCl显迹液(见10.6) (1155)2二氧杂环己烷(dioxetane)磷酸盐底物缓冲液(见10.6) (1155)二氧杂环己烷(dioxetane)磷酸盐显影液(见10.6) (1155)GF缓冲液(见10.7) (1155)总液相体积标记物(见10.7) (1156)死体积标记物(见10.7) (1156)校正标准(见10.7 ) (1157)甘氨酸缓冲液(见10.9) (1157)裂解缓冲液(见10.9) (1157)Tris/triton/NaCl 缓冲液,pH 8. 0 和 pH 9. 0 (见 10.9) (1157)磷酸钠缓冲液,pH 6.3 (见10.9) (1157)三乙醇胺溶液(见10.9) (1157)Tris盐/叠氮化合物(TSA)溶液(见10.9、10.15) (1158)去垢剂储备液(见10.9) (1158)层析柱保存缓冲液(见10.9) (1158)洗脱缓冲液(见10.9) (1158)DNase I 溶液(见 10.10) (1158)蛋白酶抑制剂混合液,150× (见10.10) (1158)M9ZB培养基(见10.10) (1158)MCAC缓冲液(见10.10) (1159)MCAC-EDTA缓冲液(见10.10) (1159)GuMCAC缓冲液(见10.10) (1159)GuMCAC-EDTA缓冲液(见10.10) (1159)流式细胞检测仪(见10.13) (1159)裂解缓冲液(见10.14) (1160)溴化氰(CNBr/乙腈(见10.15) (1160)Triton X-100裂解缓冲液(见10.15) (1160)Tris /盐/叠氮化合物(TSA)溶液{见10.9、10.15) (1161)洗脱缓冲液(见10.15) (1161)变性裂解缓冲液(见10.1S) (1161)无去垢剂的裂解液(见10.15) (1161)洗涤缓冲液{见10.15) (1161)稀释缓冲液(见10.15) (1162)核糖核苷三磷酸混合物,5× (见10.16) (1162)TCA(三氯乙酸)溶液,10%(m/v)(见10.17) (1162)追踪培养基(见10.17) (1162)脉冲标记培养基(见10.17) (1162)长期标记培养基(见10.17) (1162)样品缓冲液(见10.18) (1163)凝胶缓冲液4× (见10.18) (1163)下槽缓冲液,10×(见10.18) (1163)转移缓冲液(见10.18) (1163)上槽缓冲液,10×(见10.18) (1163)消化缓冲液(见10.18) (1164)碳酸盐缓冲液,O. 1 mol/L; pH 9.2 (见11.1) (1164)Tris/卵清蛋白缓冲液(见11.1) (1164)TEN 缓冲液,pH 7.2 (见 11.1) (1164)饱和硫酸铵溶液(见11.1) (1164)封阻液(见11. 2) (1164)洗涤缓冲液(见11. 2) (1165)NPP底物溶液(见11.2) (1165)溶菌酶溶液(见11. 2) (1165)MUP底物溶液(见11.2) (1165)甘氨酸• Cl缓冲液,pH 2.3 (见11. S) (1165)偶联缓冲液(见11.5) (1165)柠檬酸盐缓冲液,pH 5.5 (见11.5) (1166)甘氨酸• OH缓冲液(见11. 5) (1166)洗涤缓冲液(见11.5) (1166)Tris缓冲液,pH8.6 (见 11.5) (1166)乙酸缓冲液,pH 4.3 (见11.5) (1166)柠檬酸钠缓冲液,0.04 mol/L/NaCl,0.02 mol/L (见11.S) (1166)中和液,pH 7.7 (见11.5) (1166)洗脱缓冲液(见11.7) (1167)加样缓冲液(见11.7) (1167)饱和硫酸氨(SAS)溶液(见11.7) (1167)MBS/DMF溶液(见 11_9) (1167)硼酸盐缓冲液,pH 8. 5或者pH 10 (见11. 9) (1167)戊二醛溶液,0.3% (见11.9) (1167)磷酸钠缓冲液,0.1 mol/L,pH 6.8 (见11. 9) (1167)细胞质提取缓冲液,10× (见12.1) (1168)低渗缓冲液(见12.1) (1168)透析缓冲液(见12.1) (1168)高盐缓冲液(见12.1) (1168)低盐缓冲液(见12.1) (1168)非变性凝胶混合物(见12.2) (1168)Tris/甘氨酸电泳缓冲液,10× (见12.2) (1169)DMS反应缓冲液(见12.3) (1169)DMS终止缓冲液(见12.3) (1169)分析缓冲液A (见12.4) (1169)分析缓冲液B (见12.4) (1169)DNA酶I终止缓冲液(见12.4) (1170)DNA酶I储备缓冲液(见12.4) (1170)dNTP/TTP 溶液,50 × (见 12. 5) (1170)dNTP/BrdU 溶液,50× (见 12. 5) (1170)SDS凝胶溶液(见12.5) (1170)生物素-纤维素结合缓冲液(见12. 6) (1170)生物素-纤维素洗脱缓冲液(见12. 6) (1171)结合缓冲液(见12.7) (1171)洗脱缓冲液(见12.7) (1171)抽提缓冲液(见12.7) (1171)BLOTTO (见 12.7) (1172)HEPES结合缓冲液(见12.7) (1172)加样缓冲液{见12.8) (1172)结合缓冲液,5× (见12.81 (1172)柱再生缓冲液(见12. 9) (1172)柱储备缓冲液(见12.9) (1173)盐酸乙醇胺,1 mol/L,pH 8.0 (见12. 9) (1173)甲酰胺加样缓冲液(见4. 5、12.9) (1173)缓冲液TM (见12.9) (1173)T4多核苷酸激酶缓冲液,10× (见12.9) (1173)缓冲液Z (见12.9) (1174)缓冲液Z e (见12. 9) (1174)洗脱缓冲液(见12.10) (1174)回收缓冲液(见12. 10) (1174)洗涤缓冲液(见12. 10) (1175)一步法缓冲液(〇ne>step)(见13.3) (1175)Z缓冲液(见13. 4) (1175)水,高质量且无菌(见13.5) (1175)山梨醇选择平板(见13.5) (1175)TES溶液(见13.10) (1175)酸性酚(见13. 10) (1176)RNA缓冲液(见13.10) (1176)酸洗玻璃珠,冷却,0.45〜0.55 mm (见13.11) (1176)抽提缓冲液(见13. 11) (1176)Ficoll缓冲液(见13.11) (1176)裂解缓冲液(见13.11) (1176)玻璃珠破菌缓冲液(见13.11) (1177)蛋白酶抑制剂混合物,100×(见13.11) (1177)储存缓冲液(见13.11) (1177)酶解酶缓冲液(见13.11) (1177)多聚甲醛(PFA)固定液,4% (见14章) (1178)明胶浸泡溶液,1×和0.2× (见14.1) (1178)10 mmol/L, DTT/1×PBS (见 14.3) (1178)加湿盒溶液A (见14.3) (1178)加湿盒溶液B (见14.3) (1178)洗液A (见14.3) (1178)洗液B (见14.3) (1179)洗液C (见14.3) (1179)DNA洗液(见14.3) (1179)杂交混合液A (见14.3) (1179)杂交混合液B (见14.3) (1179)三乙胺(TEA)缓冲液(0.1 mol/L TEA)(见 14.3) (1180)封阻液(见14.3) (1180)去离子甲酰胺(见14.3) (1180)转录缓冲液,5× (见14.3) (1180)RNA 洗液 I (见 14.3) (1180)RNA 洗液 II (见 14.3) (1180)RNA酶消化液(见14.3) (1180)预消化链霉蛋白酶(见14.3) (1181)限制性内切核酸酶消化的质粒,(见14.3) (1181)TBE电泳缓冲液,10× (见14.3) (1181)加拿大香脂,0.5 g/ml (见14.5) (1181)磷酸钠缓冲液,500 mmol/L, pH 6.8 (储存液)(见14.5) (1181)甲苯胺蓝染色液(见14.5) (1181)Gelvatol(现称 Airvol)(见 14. 5) (1182)伊红染色剂(见14.5) (1182)二氨基联苯胺(DAB)底物液(见14.6) (1182)生物素/地高辛检测液(见14. 7) (1182)碳酸盐/碳酸氢盐缓冲液,0.5 mol/L, pH 9.0 (见14. 7) (1182)DAPI染色液(见14.7) (1182)生物素检测液(见14.7) (1183)生物素酰化碱性磷酸酶溶液(见14.7) (1183)生物素酰化辣根过氧化物酶溶液(见14.7) (1183)NBT/BClP底物溶液(见14.7) (1183)链霉亲和素溶液(见14.7) (1183)碘化丙锭染色液(见14.7) (1183)碱性磷酸酶缓冲液(见l4.7、19.6) (1184)抗衰减固定介质(antifade mounting media)(见 14. 7) (1184)主杂交混合液(见14.7) (1184)超声处理鲑精DNA,10mg/ml(见14.7) (1184)封阻液(见14.8) (1184)偶联物稀释缓冲液(见14.8) (1185)整合缓冲液,10× (见14.8) (1185)链霉亲和素-碱性磷酸酶偶联液(见14. 8) (1185)链霉亲和素-过氧化物酶偶联液(见14_ 8) (1185)AEC溶液(见14.8) (1185)乙酸盐缓冲液,50mmol/L (pH5.0)(见 14.8) (1186)AMV/MoMuLV 反应缓冲液,10× (见 14.8) (1186)碱性磷酸酶底物缓冲液(见14.8) (1186)无RNA 酶的DNA 酶溶液(见14.8、14.9) (1186)RNaseT1 (见.14.9) (1186)碱性磷酸酶缓冲液(NTMT), pH9.5 (见14.9) (1186)封阻剂,2% (m/V)(见 14.9) (1187)封阻液(见14.9) (1187)顺丁烯二酸(MAB)缓冲液(见14.9) (1187)MEMPFA缓冲液(见14. 9) (1187)圆酵母RNA,10 mg/ml(见14.9) (1187)预杂交溶液A (见14.9) (1187)预杂交溶液B (见14.9) (1188)RNase A (见 14. 9) (1188)羊血清(见14.9) (1188)血纤蛋白胶水(见14. 12) (1188)无缓冲液或盐的甲醛溶液,1.3 mol/L (见14. 12) (1188)标准物质的样品(见14.12) (1189)凝血酶,USP (见14. 12) (1189)FACS缓冲液(见14. 13) (1189)AEC底物溶液(见14. 13) (1189)HRP-偶联的抗羊二抗溶液(见14.13) (1189)羊抗-地高辛一级抗体(见14. 13) (1189)多聚甲醛溶液(见14.13l (1190)TdT/生物素-dUTP混合物(见14.13) (1190)TdT/地高辛-dUTP混合物(见14. 13) (1190)TdT反应缓冲液(见14. 13) (1190)-半乳糖苷酶定色剂(见14.14) (1190)-半乳糖苷酶染色液(见14. 14) (1191)-半乳糖苷酶洗涤缓冲液(见14. 14) (1191)琼脂糖,3%或4%(m/V)(见14.14) (1191)增效剂(见15.1) (1191)4dNTP 混合物(见 15.1、15.2、15.4、15.5) (1192)复性缓冲液,5× (见15.2) (1192)PEG / NaCl溶液(见15.2) (1192)扩增混合物,每个反应(30μl)(见15.3) (1192)DMS终止缓冲液(见15.3) (1193)末端标记混合物,每个反应(5 μl)(见15.3) (1193)第一链缓冲液,5× (见1S.3) (1193)第一链合成混合物,每个反应(25μl)(见15.3) (1193)G+A终止液(见15.3) (1194)连接酶稀释液,每个反应(20μl)(见15. 3) (1194)连接酶混合物(每个反应25.0 μl)(见15.3) (1194)加样缓冲液(见15. 3) (1194)裂解液(见15.3) (1195)沉淀用盐混合液,每个反应(9.4μl)(见15.3) (1195)扩增缓冲液,5× (见15.3) (1195)4dNTP 混合物,pH 7.0, 25 mmol/L (见 15.3、16. 15) (1195)Vent DNA聚合酶混合物,每个反应(3μl)(见15.3) (1195)V ent DNA聚合酶终止液,每个反应(295μl)(见15.3) (1195)单向连接头混合物,20μmol /L (见15.3) (1196)逆转录酶缓冲液(见15.5) (1196)裂解缓冲液(见15. 5) (1196)DEPC 溶液(见 15.5) (1196)C+T/C终止液(见15.5) (1196)扩增缓冲液,10× (见15.6) (1197)末端转移酶(TdT)缓冲液,5× (见15.6) (1197)MoMLV逆转录酶缓冲液,5× (见15.6) (1197)蛋白酶消化缓冲液(见15.7) (1197)扩增用的寡核苷酸引物(见1S.7) (1197)杂交用的寡核苷酸引物(见15.7) (1197)反应混合物(每个扩增反应)(见15.7) (1197)裂解缓冲液(见16.2) (1198)18种氨基酸混合物(见16. 2) (1198)羟胺裂解液,2× (见16.4) (1198)凝血酶裂解缓冲液(见16.4) (1198)SDS样品缓冲液,1× (见 16.4、17.7、17.9、19.2、19.S) (1198)谷胱甘肽-琼脂糖珠悬液(见16. 5) (1198)IMC培养基(见16.6) (1199)IMC平板(见16.6) (1199)SDS-PAGE样品缓冲液(见16.6) (1199)M9 盐,10× (见 16.6) (1200)色氨酸,10mg/ml(见16.6) (1200)CAA/甘油/氨苄青霉素100培养基(见16.6) (1200)酪蛋白氨基酸(CAA)l2% (m/V)(见16.6) (1200)TNM-FH培养基(见16_8) (1200)抽提缓冲液(见16.8) (1201)琼脂糖储备液,1% (m/V)(见16.8) (1201)蔗糖垫层缓冲溶液(见16. 8) (1201)转染缓冲液A (见16.8) (1201)转染缓冲液B (见16. 8) (1201)台盼蓝覆盖层(见16.8) (1201)琼脂糖顶层覆盖物(见16.8) (1202)Klenow片段反应缓冲液(见16.8) (1202)蛋白酶抑制剂混合物,50× (见16.9) (1202)昆虫细胞裂解液,1× (见16.9) (1202)GST洗脱缓冲液(见16.9) (1203)His洗脱缓冲液,6× (见16.9) (1203)His洗涤缓冲液,6× (见16.9) (1203)旋转瓶完全培养基-5 (见16.13) (1203)完全DMEM -10或-20(见16.13) (1203)完全 MEM-10/BrdU 或-20/BrdU (见 16.13) (1204)完全 MEM-2. 5、-10 或-20 (见 16.13) (1204)完全2×噬斑培养基-5 (见16. 14) (1204)转染缓冲液(见16.14) (1204)细胞裂解缓冲液(见16.1S) (1204)低盐缓冲液(见16. 15) (1205)PBS/Tween(见16.15) (1205)DNA提取缓冲液(见16.15) (1205)完全DMEM-10(见16.17) (1205)HEPES缓冲盐溶液(HeBS)(见16.17) (1205)选择培养基(见16. 17) (1206)BC100 (见 16.18) (1206)BC300,BC500,BC850和BC1200(见16.18) (1206)BES缓冲液,1111〇l/1^117.2(见16.18) (1206)缓冲液B (见16.18) (1206)缓冲液D (见16. 18) (1207)FLAG多肽洗脱缓冲液(见16.18) (1207)温和裂解缓冲液(见17. 2) (1207)Tris•缓冲盐(TBS)(见 17.2> (1207)用于至沸样品RIPA (放射免疫保护试验)的校正缓冲液(见17.2) (1207)RIPA裂解缓冲液(见17.2) (1208)用于至沸样品的免疫沉淀洗涤缓冲液(见17. 2) (1208)SDS裂解缓冲液(见17_2) (1208)标准磷酸氨基酸混合物(见17.3) (1208)电泳缓冲液,pH 1.9 (见17.3) (1208)电泳缓冲液,pH 3.5 (见17.3) (1209)封阻缓冲液(见17.4) (1209)环核苷酸-依赖性蛋白激酶反应缓冲液5 × (见17.7) (1209)HT (次黄嘌昤/胸腺嘧啶)培养基(见17.6) (1209)蛋白酶抑制剂储备液(见17.7) (1209)SDS-PAGE样品缓冲液2× (见17.8) (1210)合成肽底物溶液(见17.7) (1210)酷蛋白激酶反应缓冲液,5× (见17.7) (1210)PKC反应缓冲液,5× (见17.7) (1210)裂解缓冲液(见17.7) (1211)Mg/ATP 溶液,10 mmol/L (见 17.7) (1211)酪氨酸激酶缓冲液,5× (见17.7) (1211)冷ATP储存液,10 mmol/L (见17. 8) (1212)渗透化缓冲液(见17.8) (1212)链球菌溶血素O溶液(见17.8) (1212)细胞外缓冲液(见17.8) (1212)免疫沉淀用裂解缓冲液,2× (见17.8) (1212)电泳缓冲液(见17.9) (1213)RNase A (无 DNase),20 mg/ml (见 18. 9、20.3) (1213)甘油溶液(见19.1) (1213)Laemmli样品缓冲液,2× (见19.1) (1214)裂解溶液(见19.1) (1214)TBS-T (见 19.3) (1214)PKA 缓冲液,10× (见 19.3) (1214)Z’-KCl (见 19.3) (1214)碱性磷酸酶缓冲液(见14.7、19.6) (1215)TNESK, 2× (见 20.1) (1215)中和酚(见20.1) (1215)核缓冲液A (见20.1) (1215)核缓冲液B (见20.1) (1215)核缓冲液C (见20.1) (1215)渗透溶液1 (见20.1) (1216)渗透溶液2 (见20.1) (1216)渗透终止液(见20.1) (1216)净化剂溶液(见20.2) (1216)尿素溶液(见20.2) (1216)洗涤缓冲液I (见20.2) (1217)洗涤缓冲液II (见20.2) (1217)CAPS 转移缓冲液,500 mmol/L, pH 10 (见 20.2) (1217)脱色液(见20.2) (1217)50%(v/v)甘油/0.6%(m/V)甲基绿(见20.2) (1217)转移缓冲液(见20.2) (1217)RNase A (无 DNase),20 mg/ml (见 18. 9、20.3) (1217)TBS溶液(见20.3) (1218)洗脱缓冲液(见20.3) (1218)裂解缓冲液(见20.3) (1218)裂解缓冲液500 (见20.3) (1218)LiCl去垢剂洗液(见20.3) (1218)蛋白酶K溶液(见20.3) (1218)蛋白酶K储备液,20mg/ml (见20.3) (1219)苯甲基硫酰氟(PMSF)(见20.4) (1219)裂解缓冲液(见20.4) (1219)甘油梯度缓冲液,10%和30% (V/V)(见20.4) (1219)透析缓冲液(见20.4) (1219)缓冲液B (见20.4) (1220)高盐缓冲液(HSB)(见20.4) (1220)羟基磷灰石(HAP)缓冲液(见20.4) (1220)中盐缓冲液(MSB)(见20.4) (1220)微球菌核酸酶,50 U/ L(见20.4) (1221)亮抑蛋白酶肽(见20.4) (1221)低盐缓冲液(LSB)(见20.4) (1221)零盐缓冲液(见20.5) (1221)Tris/硼酸盐/EDTA (RBE)缓冲液,5× (用于辅助方案5和6)(见20.5)1221 Tris/硼酸盐/EDTA (TBE)缓冲液,补加EDTA的,5× (见20.5) (1222)低盐缓冲液(见20.S) (1222)DNA加样染料(见20.5) (1222)变性液(见20.S) (1222)高盐缓冲液(见20.S) (1222)缓冲液B (见20.6) (1222)缓冲液R (见20.6) (1223)核组蛋白储备液(见20.6) (1223)肌氨酸激酶溶液(见20.6) (1223)磷酸肌氨酸,0.5 m«l/L (见20.6) (1223)透析缓冲液T (见20.6) (1223)稀释缓冲液F (见20.6) (1224)洗脱缓冲液F (见20.6) (1224)糖原终止缓冲液(见20.6) (1224)HA层析缓冲液(见20.6) (1224)HEG缓冲液(见20.6) (1224)含 0.1 mol/L NaCl 的 HEGD 缓冲液(见 20.6) (1225)裂解缓冲液F (见20.6) (1225)裂解缓冲液H (见20.6) (1225)裂解缓冲液T (见20_6) (1225)微球菌核酸酶储备液,200 U/ml(见20.6) (1226)MNase储备液(见20.6) (1226)NAP-1纯化缓冲液(见20.6) (1226)PvOH/PEG溶液(见20.6) (1226)储存缓冲液T (见20.6) (1226)蔗糖梯度,5%〜30% (见20.6) (1227)superflow色谱缓冲液(见20.6) (1227)拓扑异构酶1缓冲液,10×(见20.6) (1227)洗涤缓冲液F (见20.6) (1227)洗涤缓冲液H (见20.6) (1228)ATP混合物(见20.6) (1228)缓冲液A (见20.6) (1228)Bio948,500 pmol/L(见21.2) (1229)溶液的DEPC处理(见21.2) (1229)rNTP混合物,10×(见21.2) (1229)羧苄育霉素储备液,100 mg/ml (见21.3) (1229)清洁液(见21. 3) (1229)dsDNA参考标准(见21.3) (1229)乙醇/乙酸盐溶液(见21. 3) (1230)氟缓冲液(见21. 3) (1230)破碎缓冲液,5× (见21.2) (1230)人 C0t-lDNA,10mg/ml(见 21.3) (1230)加样缓冲液(见21.3) (1231)磷酸缓冲盐溶液(PBS)(见21.3) (1231)聚L-赖氨酸溶液(见21. 3) (1231)分子质量标准物,100 bp (见21.3) (1231)乙酸钠,3 mol/L (pH 6.0)(见 21.3) (1231)硼酸钠,1 mol/L (pH 8.0)(见 21.3) (1231)T低E(Tlow E)缓冲液(见21.3) (1232)洗涤缓冲液:0.5×SSC /0.01%(m/V)SDS (见21.3) (1232)洗涤缓冲液:0.06×SSC (见21.3) (1232)酵母tRNA,4 g/ml(见21.3) (1232)尿素加样缓冲液(见22.1) (1232)甲酰胺加样缓冲液,2× (见22.1) (1233)PCR扩增缓冲液,10× (见22.1) (1233)DNA洗脱缓冲液(见22. 2) (1233)非变性加样缓冲液(见22. 2) (1233)ATP-配体选择结合缓冲液(见22.3) (1233)ATP-配体选择结合缓冲液(见22.3) (1234)FLAG结合缓冲液(见22. 3) (1234)FLAG清洁缓冲液(见22.3) (1234)甲酰胺加样缓冲液(见22.3) (1234)Ni-NTA结合缓冲液(见22.3) (1235)Ni-NTA洗脱缓冲液(见22.3) (1235)Ni-NTA洗涤缓冲液1(见22.3) (1235)Ni-NTA洗涤缓冲液2 (见22. 3) (1235)寡(dT)结合缓冲液(见22. 3) (1236)寡(dT)洗涤缓冲液(见22.3) (1236)转录缓冲液,10× (见22.3) (1236)琼脂糖凝胶(见23.1) (1236)T4DNA连接酶(见23.1) (1236)磷酸钠缓冲液,lmol/L, pH7.0 {见23.1) (1237)SI核酸酶缓冲液(见23.1) (1237)蔗糖溶液,10% (m/V)(见23.1) (1237)链霉亲和素溶液(见23. 2) (1237)T4 DNA连接酶缓冲液,10×(见23.2) (1237)T4多核苷酸激酶缓冲液,10× (见23.2) (1237)Taq DNA聚合酶缓冲液,10×(见23.2) (1238)Alu I缓冲液,10×(见23.2) (1238)dNTP混合物(见23.2) (1238)Driver dNTP 混合物(见 23. 2) (1238)EcoR I缓冲液,10×(见23.2) (1238)EcoR V缓冲液,10×(见23.2) (1238)HEPES缓冲液(见23.2) (1239)探针dNTP混合物(见23.2) (1239)差减杂交缓冲液(见23. 2) (1239)封阻试剂,1.5% (m/V)(见 23. 4) (1239)顺丁烯二酸缓冲液,pH 7.5 (见23. 4) (1239)MBol接头M L2025(见23.4) (1239)PEG 8000, 50% (见 23. 4) (1240)PEG 8000, 28% MgCl,3. 6 mmol/L (见 23. 4) (1240)2反应缓冲液(见23.4) (1240)PCR缓冲液,10×(见23.4) (1240)第二链缓冲液II,5×(见23.4) (1240)第二链缓冲液,5× (见23. 5) (1240)PCR缓冲液,10×(见23.5) (1241)结合缓冲液,2×,1×(见23.5) (1241)变性聚丙烯酰胺凝胶,4.5% (见23. 5) (1241)加样染料(见23. 5) (1241)第一链缓冲液,5×(见23.5) (1241)STE×, 2×, 1× (见 23.S) (1242)T4多核苷酸激酶缓冲液,10× (见23.S) (1242)TBE缓冲液,1× (见23.S) (1242)RL缓冲液(见23. 5) (1242)洗涤缓冲液(见23. 5) (1242)寡核苷酸和双链连接物(见23-5) (1243)PC8(见23.6) (1243)P C R引物(见23.6) (1244)SAGE PCR缓冲液,10×(见23.6) (1244)SOC培养基(见23.6) (1244)含zeocin的低盐LB平板{见23. 6) (1244)BW缓冲液,2×(见23.6) (1244)接头(见23.6) (1245)LoTE缓冲液(见23.6) (1245)悬浮介质(SM),每升(见23. 6) (1246)附录1试剂和溶液表A.1.1浓酸和浓碱的摩尔浓度和比重具缓冲能力的苯酚附录1试剂和溶液• 1098 •完全培养基去离子甲酰胺经DEPC (焦碳酸二乙酯)处理的溶液EDTA (乙二胺四乙酸),0.5mol/L,pH8.0附录1试剂和溶液•1099 溴化乙锭,10 mg/ml溴化乙锭检测液(见附录3D)Hanks平衡盐溶液(HBSS)磷酸缓冲盐溶液(PBS),10× (适用于除第7章和第14章外所有章节)乙酸钾缓冲液,0.1 mol/L• 1100 •附录1试剂和溶液磷酸钾缓冲液,0.1 mol/L乙酸钠,3 mol/L, pH 4.8, 5.0,5.2, 6.0, 7.0乙酸钠缓冲液,0.1 mm«l/L附录1试剂和溶液•1101 磷酸钠缓冲液,0.1 mol/LSSC, 20×悬浮培养基(SM)TAE电泳缓冲液,50×TBE电泳缓冲液,10×TE 缓冲液(Tris/EDTA)• 1102 •附录1试剂和溶液Tris • Cl 【Tris (三羟甲基)氨基甲烷】,1 mol/L酸性沉淀溶液丙烯酰胺/亚甲双丙烯酰胺29:1BBS (BES 缓冲液),2×附录1试剂和溶液•1103 小牛胸腺DNA标准溶液(见附录3D)完全DMEM (见附录3F)完全RPMI (见附录3F)Denhardt 溶液,100×FBS (胎牛血清)(见附录3F)• 1104 •附录1试剂和溶液固定液L-谷氨酸,0.2mol/L (100×)(见附录 3F)HBSS (Hank平衡盐溶液)HeBS (HFJPES缓冲盐水),溶液2×附录1试剂和溶液•1105 Hoechst 33258检测溶液(见附录3D)MOPS缓冲液PEG溶液抑肽素A酚/氯仿/异戊醇SDS电泳缓冲液,5ו 1106 •附录1试剂和溶液SED (标准酶稀释液)乙酸钠,3mol/L乙酸钠缓冲液,O. 1 mol/LSSC, 20×STE缓冲液TEA (三乙醇胺)溶液TEN (Tris/EDTA/NaCl)溶液附录1试剂和溶液•1107 TM缓冲液,10×TNE缓冲液,10× (见附录3D)Tris缓冲盐溶液(TBS)胰蛋白酶/EDTA溶液(见附录3F)TTRS (Tween 20/TBS)甘油溶液(见1.3)• 1108 •附录1试剂和溶液STET溶液(见1.6)乙酸钾溶液,pH 4. 8, 5 mol/L (见1.6)葡萄糖/Tris/EDTA(GTE)溶液(见1.6、1.7和7.3) NaOH/SDS 溶液(见 1.6、1.7)Dowex AG50W-X8阳离子交换树脂(见1.7)附录1试剂和溶液•1109 乙酸钾溶液,pH约5.5, 3 mol/L (见1.7)转化储存液《TSS), 2× (见1.8)CaCl2溶液(见 1.8)SOC培养基(见1.8)稀释缓冲液{见1.12)低盐缓冲液(见1.13)CsCl 溶液(见 1.13)• 1110 •附录1试剂和溶液PEG 溶液,5× (见 1.13)碘化钠(NaI)溶液,6mol/L (见2.1)柱洗涤液(见2.1、2.8)QBT缓冲液(见2.2)QC缓冲液(见2. 2)QF缓冲液(见2. 2)附录1试剂和溶液•1111 消化缓冲液(见2.3)高盐TE缓冲液(见2. 4)CTAB抽提液(见2_4)CTAB沉淀液(见2.4)抽提缓冲液(见2. 4)• 1112 •附录1试剂和溶液CTAB/NaCl溶液(见2.4、2.5)加样缓冲液,10× (见2_6、3.1、12.2)裂解缓冲液(见2. 7)GTBE电泳缓冲液(见2.7)储存缓冲液(见2.7)NA-45洗脱缓冲液(见2.8)碘化钠(Nal)溶液,6.6 mol/L (见 2.8)• 1113 •附录1试剂和溶液Elutip低盐和离盐溶液(见2.8)-琼脂糖酶缓冲液,10× (见2.8)柱洗涤液(见2.1、2.8)结合缓冲液(见2. 8)洗脱缓冲液,pH 7.5 (见2. 9)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,29:1 (见2.9)加样缓冲液,5×(见2.9)1114•附录1试剂和溶液温和脱除液(见2.13)中度脱除液(见2.13)核苷酸混合物(见2.13)标记缓冲液(见2.13)甲酰胺预杂交/杂交(FPH)溶液(见2.13、4.8)变性鲑精DNA(见2.13)附录1试剂和溶液•1115 •Denhardt 溶液,100× (见 2. 13、6.3)尿素加样缓冲液(见2. 15)水性预杂交/杂交(APH)溶液(见2. 13)丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液,40%/2%(见2.15)加样缓冲液,10× (见2.6、3.1、12.2)限制性内切核酸酶缓冲液(见3.1)1116•附录1试剂和溶液酸沉淀溶液(见3. 2)超声处理的鲱精DNA,2mg/mL(见3•2、6•3)标准酶稀释液(SED)(见3. 2)超声处理鲑精DNA,1mg/ml(见3.2)T4DNA连接酶缓冲液,2×(见3•13)dNTP/生物素混合物(见3.15)DNA稀释液(见3.15)碱性磷酸酶缓冲液,pH 9.5 (见3.15)地高辛-1111-dUTP-dTTP,10×储存液(见:3.15)生物素-11-dUTP, 0.5 mmol/L (见 3. 15)SDS柱缓冲液(见3.15)碱性磷酸酶缓冲液,pH7.5(见3.15)生物素酰化随机八聚体(见3.15)链霉亲和素,1mg/ml(见3.16)封闭液(见3. 16)洗涤缓冲液(见3.16)生物素酰化碱性磷酸酶,0.38mg/ml(见3.16)乙酸钠,2mol/L,pH4 (见 4.1)水饱和酚(见4.1)CsCl, 5. 7 mol/L,经 DEPC 处理(见 4. 1)组织胍溶液,1 L (见4.1)组织重悬溶液(见4.1)胍溶液(见4.1)TES溶液(见4.1)变性溶液(见4.1)TLE溶液(见4.2)TLE平衡酚(见4.2)原生质体缓冲液(见4.3)DNase消化缓冲液{见4.3)裂解缓冲液(见4.3)革兰氏阴性菌裂解缓冲液(见4.3) STET裂解液(见4.3)终止缓冲液(见4.3)poly (A)加样缓冲液(见4.4)中度洗脱缓冲液(见4.4)T4多核苷酸激酶缓冲液,10× (见4.5)水相杂交溶液,3× (见4.5)碱性加样缓冲液(见4.5)碱性制胶缓冲液,50× (见4.S)S1核酸酶缓冲液,2× (见4.S)S1终止缓冲液(见4. 5)TM缓冲液,10×(见4.5)碱性电泳缓冲液,50×(见4.5) S1杂交液(见4. 5)tRNA, 10mg/ml (JS.4.5, 4.6)杂交缓冲液(见4.6)3NTP 混合物,4 mmol/L (见 4. 6)洗脱缓冲液(见4. 6)转录缓冲液,5× (见4. 6)核糖核酸酶消化缓冲液(见4.6)RNA加样缓冲液(见4.6)杂交缓冲液,1〇><(见4.7)终止/加样染料液(见4_ 7、7.4、12.3)RNA酶反应混合物(见4. 7)MOPS电泳缓冲液,10× (见4. 8)剥除溶液(见4. 8)乙二醛,6 mol/L,,去离子(见4.8)乙二醛加样缓冲液(见4. 8)磷酸钠,100 mmol/L,pH 7. 0 (见 4. 8)甲醛加样缓冲液(见4.8)甲酰胺预杂交/杂交(FPH)溶液(见2.13、4.8)变性溶液(见4.8)RNA酶A,热灭活(见4.9、7.3)蔗糖缓冲液I (见4.9)蔗糖缓冲液II (见4.9)。

常用溶液配置方法

常用溶液配置方法

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制

分子生物学实验常用试剂配制分子生物学实验常用试剂配制(1) 0.01M PBS缓冲液:一袋粉制PBS缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

(2) 0.01M枸橼酸盐缓冲液:一袋粉制枸橼酸盐缓冲液(中杉有售)加1000ml蒸馏水。

0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬酸0.4g。

(3)1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl 调至pH8.0,加水至1000ml。

(4) 1‰DEPC水:1mlDEPC加入1000ml新鲜三蒸水中,剧烈震荡20分钟使充分混匀,37o C至少放置2h或过夜,HIRAYAMA HV-50高压灭菌器高温高压30分钟降解DEPC,4℃保存。

(5) 1%琼脂糖凝胶:取琼脂糖0.2g置烧杯中,加入20ml的1×TAE缓冲液,封闭锥形瓶口,放入微波炉内加热,不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液,待琼脂糖全部熔化后取出摇匀,冷却至60℃左右,加入10mg/ml溴化乙锭(EB)1μl,EB的终浓度为0.5μg/ ml,充分混匀。

将温热的凝胶倒入已经放好梳子的凝胶槽中,厚度约为3-5mm,注意不要有气泡,将凝胶放置室温待其自然凝固。

凝固后从胶槽中轻轻取出梳子。

(6)0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。

(7) 50×TAE缓冲液:Tris碱242g,17.4mol/L冰乙酸57.1ml,0.5mol/L EDTA (PH8.0)100ml加蒸馏水至1000ml。

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法简介缓冲溶液是一种能够稳定溶液中pH值的溶液,它通常由弱酸和其共轭碱(或弱碱和其共轭酸)组成。

在科学实验和生物学研究中,常常需要精确控制溶液的pH值,这就需要使用缓冲溶液。

本文将介绍几种常用的缓冲溶液及其配制方法,希望对实验科研工作者提供参考。

磷酸盐缓冲溶液磷酸盐缓冲溶液是一种常用的缓冲溶液,常被用于分子生物学和细胞生物学实验中。

它由磷酸盐酸(或碱)和其共轭碱(或酸)组成,可以在特定的pH范围内有效地稳定溶液的pH值。

配制方法磷酸盐缓冲溶液的配制方法如下:1.准备1M的磷酸盐酸(或碱)溶液,可以通过向蒸馏水中加入适量的磷酸(或磷酸盐)并搅拌溶解得到。

2.准备1M的磷酸盐共轭碱(或共轭酸)溶液,可以通过向蒸馏水中加入适量的磷酸(或磷酸盐)对应的碱(或酸)并搅拌溶解得到。

3.根据需要的缓冲溶液pH值,通过适当比例混合磷酸盐酸和磷酸盐共轭碱溶液,可以使用酸碱滴定法或pH计来完成溶液的调节。

需要注意的是,磷酸盐缓冲溶液在不同pH值下的配比不同,建议根据需要的pH值在事先制定好缓冲溶液的配比表。

Tris缓冲溶液Tris缓冲溶液是一种广泛应用于生化和分子生物学实验中的缓冲溶液。

它由Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)酸和其共轭碱(或酸)组成。

配制方法Tris缓冲溶液的配制方法如下:1.准备1M的Tris酸溶液,将适量的Tris酸加入蒸馏水中,并搅拌溶解得到。

2.准备1M的Tris共轭碱(或共轭酸)溶液,将适量的Tris共轭碱(或共轭酸)加入蒸馏水中,并搅拌溶解得到。

3.根据需要的缓冲溶液pH值,通过适当比例混合Tris酸和Tris共轭碱溶液,可以使用酸碱滴定法或pH计来完成溶液的调节。

需要注意的是,Tris缓冲溶液的pH值在不同温度下可能会有所偏差,因此在制备过程中可以参考相应的pH温度校正表。

PBS缓冲溶液PBS缓冲溶液是一种常用的生物学实验缓冲溶液,它是一种含磷酸盐的缓冲溶液。

生物实验室常用培养基和溶液配制

生物实验室常用培养基和溶液配制

#1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)#组份浓度:1MTris-HCl 配制量:1L配制方法:1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

在800ml水中溶解121.91g Tris碱,加入浓HCl 调节pH值至所需值。

pH 7.4 HCl 70ml; pH 7.6 HCl 60ml; pH 8.0 HCl 42ml4.加水将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

#10&timeTEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L 配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

#1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度:1.5MTris-HCl 配制量:1L配制方法:1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

#3M醋酸钠(pH5.2)#组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。

#Tris-HCl平衡苯酚#配制方法:1.使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。

分子生物学实验常用缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用缓冲液的配制方法

分⼦⽣物学实验常⽤缓冲液的配制⽅法各种缓冲液的配制⽅法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。

2柠檬酸. H2O,分⼦量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠.2H2O,分⼦量=294.12;0.1mol/L溶液含29.4g/L2(1)醋酸盐溶液的配制:醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加⽔稀释⾄250ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)取⽆⽔醋酸钠20g,加⽔300ml溶解后,加溴酚蓝指⽰液1ml及冰醋酸60~80ml,⾄溶液从蓝⾊转变为纯绿⾊,再加⽔稀释⾄1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加⽔稀释⾄1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加⽔稀释⾄1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加⽔50ml使溶解,⽤冰醋酸调节pH值⾄4.6,再加⽔稀释⾄100ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加⽔稀释⾄500ml,即得。

⽤醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka 是醋酸的解离常数=1.8*10-5(1.8乘10的-5次⽅),PKa=-lgKa=4.75,将PH=5.5代⼊,可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L,或是C(HAc)=0.2mol/L等。

若是配制C(HAc)=0.1mol/L,则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。

分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度

分子生物学实验中常用的抗生素配置及工作浓度

经常使用抗生素:宇文皓月备注:(摘自《分子克隆》第三版附录2 )①以水为溶剂的抗生素贮存液应使用0.22 μm滤器过滤除菌;②用乙醇溶解的抗生素溶液无须过滤除菌;③所有抗生素贮液都应放于不透光的容器中保管。

氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水(最好是高压后的灭菌水)中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

常见实验用溶液的配制方法

常见实验用溶液的配制方法

常见实验用溶液的配制方法[日期:2005-1-9] 来源:作者:[字体:大中小]一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液

分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液

附录一分子生物学实验中常用的溶液和缓冲液一、酸、碱和盐溶液的配制盐酸(HCl,分子量36.5,重量百分比36%),1 mol/L按以下顺序混合:912.5 mL H2O;87.5 mL浓盐酸。

盐酸(HCl,分子量36.5,重量百分比36%),0.25N/L按以下顺序混合:978.4 mL H2O;21.6 mL浓盐酸。

硫酸(H2SO4,分子量98.07,重量百分比96%),1 mol/L按以下顺序混合:944.8 mL H2O;55.6 mL浓硫酸。

硝酸(HNO3,分子量63.02,重量百分比71%),1 mol/L按以下顺序混合:937.5 mL H2O;62.5 mL硝酸冰醋酸(CH3COOH,分子量60.05,重量百分比99.5%),1 mol/L按以下顺序混合:942.5 mL H2O;57.5 mL冰醋酸。

乙酸(CH3COOH,分子量60.5,重量百分比36%),1 mol/L按以下顺序混合:840.5 mL H2O;159.5 mL 乙酸。

甲酸(HCOOH,分子量46.02,重量百分比90%),1 mol/L按以下顺序混合:957.3 mL H2O;42.7 mL甲酸。

高氯酸(HClO4,分子量100.5,重量百分比70%),1 mol/L按以下顺序混合:914.5 mL H2O;85.5 mL 高氯酸。

氢氧化钾(KOH,分子量56.1),1 mol/L56.0 g KOH溶解于1 L H2O中。

氢氧化钠(NaOH,分子量40.0),1 mol/L将40.0 g NaOH溶解于450 mL H2O中,补加H2O至1 L。

氢氧化钠(NaOH,分子量40.0),10 mol/L将400 g NaOH溶于450 mL水中,补加H2O至1 L。

氨水(NH4OH,分子量35.0,重量百分比25%),1 mol/L按以下顺序混合:924.9 mL H2O;75.1 mL氨水。

尿素(CH4N2O,分子量60.06),8 mol/L分批将480.5 g尿素溶解在600 mL蒸馏水中,加H2O定容只至1 L,过滤灭菌。

分子生物学实验报告参考格式

分子生物学实验报告参考格式

实验质粒DNA的提取(一)实验材料含质粒的大肠杆菌DH5a(二)试剂1.LB液体培养基:胰蛋白月东10g,酵母提取物5g, NaCl 10g,溶解于lOOOmL蒸馅水中,用NaOH调pH至7.0。

高压灭菌20分钟。

2.LB平板培养基:在每lOOOmLLB液体培养基中中加入15g琼脂,高压灭菌20分钟。

3.溶液I : 50mmol/L 葡萄糖」Ommol/L EDTA,25mmoI/LTris-HCl(pH 8.0)。

4.溶液II: 0.2mol/LNaOH,l%SDSo (必须新鲜配制)5.溶液III: pH4.8的醋酸钾溶液(5mol / L乙酸钾60 ml,冰乙酸11.5 ml,水28.5ml)。

6.TE 缓冲液(pH 8.0): 10 mmol/LTris-HCl,lmmol/ L EDTAo7.无水乙醇和70%乙醇。

(三)仪器1.Eppendorf管、离心管架2.10, 100, 1000 |11 微量加样器3.台式高速离心机4.摇床、高压灭菌锅四、操作步骤(一)培养细菌将带有质粒的大肠杆菌接种于LB平板培养基上,37°C培养24小时,然后从平板上挑取单菌落,接种于5ml液体培养基中,37°C培养12小时。

(二)提取步骤1.将两种菌液l.4ml移入1.5ml离心管,离心60秒(12000rpm),倒去上清液,如收集2.8ml菌液,重复一次,倒转于滤纸除净残液。

2.GEP、P38各加入100|J预冷的溶液I (悬浮液体),用涡旋震荡器充分悬浮。

再P38 加入10gg/|il RNAaseo3.加入150四1溶液II,快速颠倒温和混匀,室温放置2-3分钟。

此时溶液应非常粘稠。

4.加入150讯预冷的溶液III,温和混匀(此时应有可见沉淀),在冰浴中5分钟。

5.12000rpm离心3分钟。

转移上清液400|11至另一1.5ml离心管中。

6.加800 |11乙醇到上清液中,混匀,水浴5min, 12000rpm离心5分钟,除去上清(尽可能除去残液)。

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制

分子生物学常用缓冲液、试剂和贮存液的配制1、6*Loading Buffer(DNA电泳用,50ml配方)组分浓度:100mM EDTA, 40%(V/V) 蔗糖, 0.05%(W/V)xylene cyanol FF, 0.05%(W/V)溴酚蓝配制方法:称取25mg溴酚蓝,25mg xylene cyanol FF,5ml 0.5MEDTA,加入约20ml去离子水,加热搅拌,充分溶解,加入20g蔗糖,去离子水定容至50ml。

2、10*PBS(pH7.2~7.4,分子克隆推荐配方)组分浓度:NaCl 137 mmol/L,KCl 27 mmol/L,Na2HPO4 100 mmol/L,KH2PO4 20 mmol/L配置方法:用800ml去离子水溶解80 g NaCl, 2 g KCl,14.4 g Na2HPO4和2.4 g KH2PO4。

用盐酸调节pH 至7.4,加水定容至1 L,高温高压灭菌,室温保存。

3、20*SSC (pH约7.0)组分浓度:300 mmol/L 柠檬酸三钠,3 mol/L 氯化钠配制方法:称取柠檬酸三钠·2H2O 88.23 g,氯化钠175.3 g,加入800 ml去离子水充分溶解,用14 N HCl 调pH为7.0,去离子水定容至1 L,高温高压灭菌后室温保存。

4、10*Tris-甘氨酸转膜液(pH约8.3)1 L组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸配制方法:甘氨酸144.13 g,Tris 30.29 g,去离子水溶解定容至1 L。

使用前,100 ml 10*转膜液,加入200 ml甲醇,700 ml去离子水成为1*转膜液5、10*Tris-甘氨酸-SDS 电泳缓冲液(SDS-PAGE电泳缓冲液,pH约8.6)组分浓度:0.25 M Tris,1.92 M 甘氨酸,1%(W/V)SDS配制方法:称取30.29 g Tris,,144.13 g甘氨酸,5 g SDS,加入800 ml去离子水搅拌溶解,定容至1 L,常温保存。

常见生物化学溶液配方

常见生物化学溶液配方
6月
007
样品稀释液(终缓)
1000ml
称取NaH2PO40.822g、Na2HPO4.7H20 0.844g、 NaCl 29.22g
6月
008
试剂A
500ml
PIERCE
6月
009
试剂B
25ml
PIERCE
6月
010
蛋白参比品
50ul/管, 500ug/ml
取标准品BSA 200ul, 加600ul 1×PBS
6月
015
30%丙烯酰胺溶液
500ml
BIO-RAD Laboratorios
016
1.5MTris-HCl(pH8.8)
500ml
Tris-Base 90.855g 浓盐酸调PH至8.8
6月
017
1.0M Tris-HCl(pH6.8)
500ml
Tris-Base 60.57g 浓盐酸调PH至6.8
6月
102
20*PBS
500ml
Na2HPO4.7H2O 27.081g KH2PO4 2.5g NaCl 81.815g KCl 2.01g
6月
103
0.05M NH4SCN
100ml
硫氰酸铵 0.38g
6月
104
磷酸盐缓冲液(pH7.8)
100ml
磷酸氢二钾 0.559g 磷酸二氢钾 0.041g
取原液P18-B121300用最终缓冲液稀释
2年
031
PD1酶标板
30ng/孔
PD1 20060425 (2.520mg/ml) 0.3ug/ml, 20mM PB7.4 100ul/孔
6月
032

常用溶液的配制

常用溶液的配制

常用溶液的配制本文为您带来分子生物学实验中常用溶液的配制方法(详细配方请参阅对应编号的具体配制方法):1. 1 mol/LTris-HCl 溶液(pH 8.0)2. 50 mmol/LTris-HCl 溶液(pH 8.0)3. 0.5 mol/LEDTA 溶液(pH 8.0)4. TE 缓冲液(10 mmol/L Tris,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)5. 20 mg/mL 蛋白酶 K6. 5 mol/LNaCl 溶液7. CTAB/NaCl溶液(0.7 mol/LNaCl,10%CTAB)8. 3 mol/L 乙酸钠溶液(pH 5.2)9. 苯酚/氯仿/异戊醇(PCI,25∶24∶1)10. 氯仿/异戊醇11. 0.1 mol/L CaCl2 溶液12. 0.5 mol/L CaCl2 溶液13. 氨苄青霉素(Amp)储存液(100 mg/mL)14. 羧苄青霉素(Car)储存液(100 mg/mL)15. IPTG 储存液(100 mmol/L)16. X-gal 贮备液17. 10% SDS 溶液18. 10% 过硫酸胺(APS)19. 50 × TAE电泳缓冲液20. SDS-PAGE 蛋白电泳试剂1). 30% 聚丙烯酰胺溶液2). 2 ×加样缓冲液3). 蛋白电泳缓冲液(4 ×)4). 4 ×分离胶缓冲液5). 4 ×浓缩胶缓冲液6). 染色液21. ELISA 分析试剂1). 包被缓冲液(0.1 mol/L Na2CO3,0.1 mol/L NaHCO3,pH 9.6)2). 磷酸盐缓冲液(10 × PBS)(1.37 mol/L NaCl,0.027 mol/L KCl,0.1 mol/L Na2HPO4,0.02 mol/L KH2PO4,pH 7.4)3). 洗涤液 PBST(PBS,0.1% Tween-20)4). 封闭液(PBST,5% BSA)5). 稀释液(PBST,1% BSA)6). 反应终止液22. Western blot 试剂1). 转印缓冲液(10 ×)(1.92 mol/L 甘氨酸,0.25 mol/L Tris,pH 8.3)2). 磷酸盐缓冲液(10 × PBS)(1.37 mol/L NaCl,0.027 mol/L KCl,0.1 mol/L Na2HPO4,0.02 mol/L KH2PO4,pH 7.4)具体配制方法如下:1. 1 mol/LTris-HCl 溶液(pH 8.0):称取 12.191 g Tris,溶于 80 mL 双蒸水中,用浓盐酸调pH 8.0,定容至 100 mL,高压灭菌 15 min,室温保存。

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制

1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配制方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA(pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配制方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配制方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL 的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

ssc溶液的配方

ssc溶液的配方

ssc溶液的配方SSC溶液的配方及其应用SSC溶液是一种常用的缓冲液,其全称为Saline-Sodium Citrate Buffer,中文名为盐酸钠柠檬酸缓冲液。

它由盐酸钠和柠檬酸二钠组成,可以用于DNA杂交、Southern blotting、Northern blotting等分子生物学实验中。

下面我们来详细了解一下SSC溶液的配方及其应用。

SSC溶液的配方SSC溶液的配方有两种,一种是2倍浓缩的SSC溶液,另一种是10倍浓缩的SSC溶液。

它们的配方如下:2倍浓缩的SSC溶液:盐酸钠(NaCl):17.53克柠檬酸二钠(Na3C6H5O7·2H2O):8.82克加入去离子水,调节pH至7.010倍浓缩的SSC溶液:盐酸钠(NaCl):87.65克柠檬酸二钠(Na3C6H5O7·2H2O):44.1克加入去离子水,调节pH至7.0SSC溶液的应用SSC溶液主要用于DNA杂交、Southern blotting、Northern blotting等分子生物学实验中。

其中,DNA杂交是指将两条DNA链通过互补配对结合在一起的过程。

在DNA杂交实验中,SSC溶液可以用来控制杂交反应的温度和盐度,从而提高杂交效率。

在Southern blotting和Northern blotting实验中,SSC溶液则用于洗涤膜和探针,以去除非特异性结合的杂质,提高检测的特异性和灵敏度。

SSC溶液还可以用于细胞培养中的细胞冻存和解冻。

在细胞冻存和解冻过程中,SSC溶液可以用来调节细胞的渗透压,防止细胞因渗透压不平衡而受到损伤。

SSC溶液是一种常用的缓冲液,其配方简单,应用广泛。

在分子生物学实验和细胞培养中,它都发挥着重要的作用。

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(2)LB(Luria-Bertani)液体培养基的配制:清洗250mL三角瓶,称取适量的yeast extract(酵母提取物)、tryptone(胰蛋白胨)、NaCl,加入200mL蒸馏水,铝箔纸包扎封口后,待高压蒸汽灭菌。

注意:①LB液体培养基常用于大肠杆菌增殖培养;②在LB培养基中,酵母提取物提供维生素和矿物质,蛋白胨提供碳源、氮源及能量,NaCl提供适当的渗透压;③不必定容,可直接加
入200mL蒸馏水;④氨苄青霉素等抗生素受热易分解,必须在培养基经高压蒸汽灭菌、且温度降至50℃以下时加入。

(3)溶液I、II、III的配制:清洗适当容积的试剂瓶,称取适量粉末状的葡萄糖,选择适当量程的微量移液器,移取所需体积的母液。

溶液I、III需要在最后用100mL量筒定容,待高压蒸汽灭菌。

溶液II现用现配,室温下放置。

注意:①溶液I、II、III用于质粒的制备;②正确使用微量移液器。

(4)配制TE(pH8.0)溶液,待高压蒸汽灭菌。

注意:①TE溶液用于溶解各类DNA;②由于Tris-HCl和EDTA溶液为常用试剂,故常常先配制高浓度的储存液,4℃冰箱中保存备用;③由于0.5M Tris-HCl(pH8.0)和0.5M EDTA(p H8.0)均已调好pH值,配制pH8.0的TE溶液时不必再调节pH值;④正确使用微量移液器。

(5)配制10×TAE电泳缓冲液,待高压蒸汽灭菌。

注意:10×TAE电泳缓冲液为高浓度的储存液,使用时稀释10倍作为1×TAE工作液,电泳槽中添加电泳缓冲液和配制琼脂糖凝胶所用的电泳缓冲液浓度应一致,都使用1×TAE工作液。

(6)配制6×上样缓冲液,待高压蒸汽灭菌。

注意:电泳上样前,取适量6×上样缓冲液与DNA样品(如质粒溶液、PCR产物、酶切产物等)混合,使上样缓冲液在混合物中的终浓度约为1×。

(7)配制EB储存液(10mg/mL),室温下保存。

注意:①在自来水中加入数滴EB储存液即可用于琼脂糖凝胶的染色;②由于EB有致癌嫌疑,操作时必须戴一次性塑料手套,禁止戴着塑料手套接触非EB区,操作完毕手套扔在指定的纸篓。

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