血红蛋白含量的测定

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• 测定血红蛋白含量的方法很多,实验常用比色法。其原理是在一定量 的血液中,血红蛋白经少量盐酸的作用,使亚铁血红素变成高铁血红 素,呈现较稳定的棕色。用水稀释后与标准色比较,求出每100ml血 液中所含的血红蛋白克数。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g ,女子为13.1g。
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测定血红蛋白的意义
• 人血红蛋白参考值 成年男性:13--15克/dl ;成年女性:11--14克/dl ;儿童:(依年龄而异)12--14克/dl。
• 临床意义:大致与红细胞增减相似。高原地区居民的血红蛋白浓度一般
比平原居民为高,这是机体对低气压环境的一种适应现象。一般来说,
在疾病状况下,血红蛋白的增减是与红细胞的改变相平行的,即引起红
细胞增多的疾病,也会使血红蛋白含量增加。使红细胞减少的疾病,也
使血红蛋白含量减少。在贫血时,血液中的红细胞数量和血红蛋白浓度
都有不同程度的下降,但不一定按相同的比例变化。有时红细胞数量可
以减少很多,而血红蛋白的浓度的降低却相对地不那么显著,见于大细
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血红蛋白含量的测定
动物学教研室
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实验目的要求
• 掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。
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胞性贫血,由于单个红细胞所含的血红蛋白量较正常者为多。相反,也
有的红细胞减少得不很多,而血红蛋白浓度却显著降低,例如缺铁性贫
血,这是由于每个红细胞的血红蛋白含量比正常明显减少,故血红蛋白
减低的程度较红细胞减少更为显著。 依据检验结果,分析病因,做到准
确的诊断和治疗都是很必要的。
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实验器材
• 血红蛋白计、0.1mol/LHCl、刺血针、滤纸 片、酒精棉球、乙醚、95%酒精、蒸馏水 。
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方法与步骤
• 血红蛋白计包括 ①标准比色架,架的两侧镶有 两个棕色标准玻璃色柱。 ②血红蛋白稀释管,有方形也 有圆形的。两侧有刻度,一侧 以g为计数单位,对侧以百分 率计,按我国情况,是以每 100ml血液内含血红蛋白 14.5g为100%。③20mm3血 红蛋白吸管,还有玻璃棒、滴 管。
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注意事项
• 吹血液入稀释管及洗净吸管时,不宜用力 过猛。
• 蒸馏水需逐滴加入,多做几次比色,以免 稀释过量。每次比色时,应将搅拌用的玻 璃棒取出,以免影响比色。
• 由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固 ,堵塞管孔时,则要按下列溶液的顺序重 复冲洗吸管,即用水→95%酒精→乙醚或 丙酮。
• 用滴管加0.1mol/LHCl于血红 蛋白稀释管内,到刻度10处。
• 用刺血针刺破指尖采血,血滴 宜大些。用血红蛋白吸管的尖 端接触血滴,吸血至刻度 20mm3处(0.02ml)。
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方法与步骤
• 用滤纸片或棉球擦净吸管口周围的血液,将吸管插入血红 蛋白稀释管的盐酸内,轻轻吹出血液至管底部,反复吸入 并吹出稀释管内上层的盐酸,洗涤吸管多次,使吸管内的 血液完全洗入稀释管内。摇匀或用小玻璃棒搅匀后,放置 10min,使盐酸与血红蛋白充分作用。
• 把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中,使无刻度 的两侧面位于空格的前后方,便于透光和比色。
• 用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水(每加一滴要搅拌), 边滴边观察颜色,直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。稀 释管上液面的刻度读数即为每100ml血液血红蛋白的克数 。
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基本原理
• 血红蛋白是红细胞的主要成分,在正常情况下,每个红细胞均含有一 定量的血红蛋白。血红蛋白是由珠蛋白和亚铁血红素组成的结合蛋白 质。血红蛋白除能与氧结合形成氧合血红蛋白外,尚能与某些物质作 用形成多种血红蛋白衍生物。它们具有特定的色泽和吸光谱,在临床 上,可用以诊断某些变性血红蛋白血症和血红蛋白的定量测定。
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