实验六 有机磷农药的检测
果蔬中有机磷农药残留检测实训思考
果蔬中有机磷农药残留检测实训思考一、背景介绍有机磷农药是目前世界上使用最广泛的农药之一，其广泛使用导致了果蔬中有机磷农药残留的问题。
这些残留物会对人体健康造成危害，因此果蔬中有机磷农药残留检测显得尤为重要。
二、实训内容本次实训的内容为果蔬中有机磷农药残留检测。
实训过程中，我们需要进行样品制备、提取和测定等步骤。
1. 样品制备首先需要确定样品类型和数量，然后将样品洗净并切成小块。
接着将样品加入适量水中混合均匀，待用。
2. 提取将样品加入提取剂中进行振荡混合，然后离心分离出上清液。
上清液经过过滤后即可用于下一步操作。
3. 测定采用气相色谱法进行测定。
首先将提取液注入气相色谱仪，并设置好相关参数。
然后对结果进行分析和处理，并根据标准值判断样品是否合格。
三、思考与总结通过本次实训，我们深刻认识到了果蔬中有机磷农药残留检测的重要性。
同时，我们也发现了实际操作中存在的一些问题。
1. 样品制备难度大样品制备需要将样品切成小块并加入水中混合，这对于一些硬质水果和蔬菜来说比较困难。
因此，在实际操作中需要采取一些措施来简化样品制备过程。
2. 提取效率低在提取过程中，有机磷农药残留物可能会被其他物质吸附或结合，导致提取效率低下。
因此，在提取过程中需要选择适当的提取剂和优化提取条件，以提高提取效率。
3. 测定结果存在误差在测定过程中，由于仪器精度、实验操作等原因可能会导致结果存在误差。
因此，在实验操作中需要严格按照标准操作流程进行，并进行多次重复实验以减小误差。
综上所述，果蔬中有机磷农药残留检测是一项十分重要的工作。
通过本次实训，我们不仅学习了相关知识和技能，还发现了其中存在的问题，为今后的工作提供了一定的指导和参考。
有机磷农药的检测
班级：南岳应用化学（1）班有机磷农药的检测摘要：阐述有关有机磷OPs）农药的检测方法原理，根据其物理化学和生物特性，主要检测方法包括化学法，色谱法，酶抑制法，并重点的介绍具有研发领域的生物传感器在Ops）检测中的应用。
关键词：有机磷农药检测化学法色谱法酶抑制法一、机磷农药的简介有机磷农药OPs）作为一种高效的、广泛的杀虫剂被广泛用于农业防害和防虫，其在提高农作物的产量同时起毒性对人类健康和环境带来了潜在的危害，OPs是含有C-P键和C-O-P,C-S-P,C-N-P键的的有机化合物,目前正式商品有几十种,如敌敌畏,乐果,敌百虫,甲胺磷,马拉硫磷,杀螟松,甲基对硫磷,乙酰甲胺鳞,三嗪农,乙硫磷等等, OPs大部分不溶于水,溶于有机溶剂,在中性和酸性条件下稳定,不易水解,在碱性易水解而失效. OPs的毒性主要是抑制生物胆碱脂酶Ch-E)酶的活性,导致乙酰胆碱(Ach)这种介质代谢絮乱,产生迟发性神经毒性,引起运动失调,昏迷,呼吸中枢麻痹,瘫痪甚至死亡, OPs可通过消化道,皮肤,黏膜,呼吸到吸入而引发中毒,因此OPs的残留引起了人们的关注.二、磷农药检测的方法和评价有机磷农药检测的方法有化学法、色谱法、酶抑制法。
1化学法用有机磷农药经溴氧化后，与刚果作用产生深蓝色产物，根据颜色的深浅分析磷的含量，其方法快速便捷，易于掌握和推广但灵敏度和精确度都较低。
2色谱法（1）簿层色谱法]1[广泛的运用于微量快速检测，它先用溶剂提取，纯化浓缩，在薄层硅胶板分离展开，显色后于标准的Ops比较Rr值,用薄层扫描仪进行定量检测。
其比传统检测的准确度和灵敏度要高，操作简单，便于掌握，定性检测准确度高，但在定量检测中准确度和灵敏度都较低。
（2）气相色谱法]2[其实运用最广的仪器分析法，其主要分析仪器有①火焰光度检测器②氮磷检测器（其要比火焰光度检测量器灵敏度要高）③电子捕获器]3[④气相色谱—质谱法，其实验成本低，灵敏度高，定量准确，而且得到很好的的回收率,特别在这几年毛细血管气相色谱饿偶到不断的发展和完善,但是遇到组分不明的干扰物与被测物的峰相重迭或两者的保留时间非常接近时，难以判断，且仪器昂贵，维护费高，分析手段复杂，不便推广基层实验室。
有机磷农药残留的测定 能力验证方法
有机磷农药残留的测定能力验证方法
有机磷农药残留测定的能力验证方法可以采取以下步骤：
1. 样品准备：选择代表性农产品样品，完全无残留或含有已知浓度的有机磷农药残留样品。
2. 样品提取：使用适当的提取方法，将样品中有机磷农药残留物提取出来。
可以选择不同的提取方法，例如溶剂提取、液液萃取或固相萃取等。
3. 分离和纯化：根据分析方法的要求，对提取物进行分离和纯化。
可以使用色谱技术（如气相色谱、液相色谱）或电泳技术等进行分离。
4. 分析测定：使用合适的仪器和分析方法对分离纯化后的样品进行测定。
常用的测定方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和质谱法（MS）等。
5. 数据处理和分析：根据所使用的测定方法，对测定结果进行数据处理和分析。
比较测定结果与已知浓度或参考标准的一致性，评估测定的准确性和可靠性。
6. 确定测定能力：根据能力验证样品的浓度和特性，评估实验室对有机磷农药残留测定的准确性、精密度、恢复率、检测限和线性范围等指标，确定测定能力。
7. 报告和认可：将能力验证的结果整理成报告，提交给认可机
构或相关质量评审机构进行审查和认可。
以上步骤只是一种常见的有机磷农药残留测定能力验证方法，具体方法可以根据实际需求和情况进行调整和优化。
实验六 有机磷农药
氯磷定（ PAM—Cl ）
胆碱酯酶复活药(cholinedterase reactivators)是一类能使已 被有机磷酸酯类抑制的胆碱酯酶恢复活性的药物，水溶性高， 溶液稳定，可iv或im给药，价格低廉。 它不但使单用阿托品所不能控制的严重中毒病倒得到解救， 而且显著地缩短了一般中毒的病程。常用的有碘解磷定和氯 磷定，二者均为肟类(oxime) 化合物
结果记录：
药物 给药前 敌百虫 阿托品 PAM
剂量
一般情况 瞳孔直径 大小便唾液 肌震颤
呼吸
思考题：
1、有机磷农药中毒的原理是什么？可用哪些 药物对抗？为什么？ 2、解磷定用于有机磷农药中毒的解救机理如 何？
观察哪些症状可被消除？什么症状不能消除？
5分钟后再于耳缘静脉注射2.5%氯解磷定
0.2ml/kg观察能否有消除或缓解哪些中毒症状，
分析其作用机制。
注意事项：
1、灌胃时注意勿将导尿管插入呼吸道，可将导 尿管外端置于水中，观察有无气泡，如有气泡， 则需重插。 2、观察给药前后的变化，及时抢救。 3、测量瞳孔时，尺不要碰伤家兔角膜。 4、实验结束后要用自来水洗手，切勿用肥皂， 因敌百虫可在碱性环境中转变成毒性更强的敌 敌畏。
[使用原则 ] 及早、足量、反复用药.
【药理作用】
1. 氯磷定与磷酰化胆碱酯酶（中毒酶）的 磷酰基结合，形成磷酰化氯磷定（无毒）， 使AchE游离（复活）。 2. 直接与有机磷酸酯结合，形成磷酰化氯 磷定，由尿排出。
【临床应用】
1. 对内吸磷、马拉硫磷、对硫磷中 毒疗效好；对敌百虫、敌敌畏中毒疗效稍 差；对乐果中毒无效。 2. 迅速制止肌颤，对CNS中毒症状也 有效，对M、N1样症状疗效较差。 3. 不能直接对抗已积聚的ACh。
有机磷农药残留检测
PSA: N-丙基乙二胺,能有效去除样品基 质中的有机酸、色素和糖类杂质。 Florisil：硅胶键合氧化镁的吸附剂， 与硅胶相似，是强极性吸附剂，可以从 非极性溶液中萃取极性化合物。 中性Al2O3：具有电中性表面，偏向于 保留芳香族和脂肪胺类等富电子化合物， 对电负性基团（如含氧、磷、硫等原子 的官能团）的化合物有一定保留能力。
7种农药的保留时问、母离子、子离子和碰撞能量
（二）标准曲线 用二氯甲烷作为溶剂，配制浓度为 0.01、0.05、0.1、0.5、1、3、5、7 和10mg/L的7种农药的混合标准溶液。
7种农药标准曲线、相关系数和检出限
Байду номын сангаас
（三）添加回收率试验 添加浓度：0.05、0.25和0.45mg/L。 前处理： 1、取250mL水样，用50mL二氯甲烷分两 次萃取，合并萃取液用无水NaSO4脱水。 2、将脱水后的萃取液置于40 ℃水浴中减 压浓缩至近干，用二氯甲烷定容至2mL。
7 种有机磷农药各组分的回收率和精密度
（四）样品测定 分别量取5份250mL管网末梢水，按 照上述添加回收方法进行前处理， 进样检测，结果5份水样中均未检出 7种有机磷农药。
3、若提取过程中出现乳化现象， 应置于-20°C冰箱中打破乳化。
二、净化
(一) GB/T 5009.20-2003 加入Nacl使丙酮和水相分层，用二氯 甲烷萃取水相，然后将丙酮和二氯甲 烷混合后经无水NaSO4脱水，旋转蒸发 浓缩后用二氯甲烷定容。 若色素较多则需加入活性炭。
(二) 文献报道 根据情况看是否需要浓缩，然后采用 分散固相萃取，净化剂一般有C18， PSA, Florisil，中性Al2O3，Carb等。 C18：有效去除脂肪酸, 有机酸,和一 些极性色素及糖，广泛用于植物农残 分析样品的处理。
有机磷农药测定
实验二土壤中有机磷农药的测定一、实验目的1.了解气相色谱仪的结构、原理和操作方法。
2.掌握利用气相色谱测定土壤中有机磷农药的方法。
二、原理原理同有机氯农药测定本方法的最低检测浓度为0.0002-0.0029mg/Kg。
三、试剂和材料（一）载气和辅助气体１、载气：氮气，纯度99.99%，经去氧管过滤，氧的含量小于5ppm。
２、燃烧气：氢气。
３、助燃气：空气。
（二）配置标准样品和试样预处理的试剂和材料使用的试剂一般系分析纯，有机溶剂经重蒸，浓缩20倍用气象色谱仪测定无干扰峰。
1、农药标准样品：乐果，含量95%-99%。
2、丙酮(CH3COCH3)。
3、正己烷。
4、无水硫酸钠（Na2SO4）: 300℃烘4h备用。
四、仪器（一）主要仪器：带氮磷检测器的气相色谱仪。
（二）控制氮气、氢气和空气的压力表及流量计。
（三）进样器：全玻璃系统进样器。
（四）记录器：与仪器相匹配的记录仪。
（五）检测器。
１、类型：氮磷检测器。
２、器件的特性：氮磷检测器的铷珠对氮和磷具有很好的选择性和灵活性。
（六）色谱柱。
Varian CP9161（30m×0.32mm×0.15um）（七）试样预处理时使用的仪器：１、样品瓶：适宜的玻璃磨口瓶。
２、蒸发浓缩器。
３、振荡器。
４、万能粉碎机。
５、组织捣碎机。
６、真空泵。
７、玻璃器皿：500ml分液漏斗，300ml具塞锥形瓶，500ml抽滤瓶，直径9cm布氏漏斗，250ml 平底烧瓶。
８、水浴锅。
９、微量注射器：5μL;10μL。
10、玻璃棉。
五、测定（一）试样的预处理1、萃取准确称取20 g 土壤样品放在250 mL 三角烧瓶中，加正己烷-丙酮（1:1）（V/V）30mL，塞紧瓶塞浸泡过夜，置于振荡器中提取90min，提取液用加入2g无水硫酸钠的定量滤纸过滤，用250 mL 三角烧瓶收集过滤液，用正己烷—丙酮（1:1）（V/V）洗涤土壤残渣3～4 次，并将洗涤液并入三角烧瓶中，用旋转蒸发器（温度28℃左右）浓缩至2～3 mL左右。
速测卡法测定有机磷农药实验小结
速测卡法测定有机磷农药实验小结有机磷农药是一类广泛应用于农业生产中的农药，具有高效、低毒、持久性好等特点。
然而，它们对人体和环境的潜在危害不容忽视。
因此，需要建立一套快速、准确的测定方法，以便监测和控制有机磷农药在环境中的浓度。
本次实验旨在使用速测卡法来测定有机磷农药的存在和浓度。
实验使用了速测卡和标准溶液，以及含有有机磷农药的水样。
实验流程如下：1.准备样品：将含有有机磷农药的水样取出一定量，并加入适量的标准溶液作为对照组。
将样品搅拌均匀，使有机磷农药均匀分布在水中。
2.进行速测卡法测试：将速测卡放置在水样中，使其与有机磷农药接触。
等待一定时间后，观察速测卡上的颜色变化。
3.数据处理：根据速测卡的颜色变化，与标准溶液对照组进行比较，得出有机磷农药在水样中的存在和浓度。
实验结果显示，速测卡法能够快速、直观地测定有机磷农药的存在和浓度。
当有机磷农药浓度较高时，速测卡上的颜色变化更为明显，可以直观地判断有机磷农药的浓度。
而当有机磷农药浓度较低时，速测卡上的颜色变化较为微弱，需要使用仪器对颜色变化进行定量测定。
速测卡法的优点是操作简便、结果直观。
不需要专业的仪器和复杂的处理步骤，可以实现快速检测。
此外，速测卡法的成本相对较低，适用于大规模样品检测。
然而，速测卡法也存在一些不足之处。
首先，速测卡法只能对有机磷农药的整体浓度进行监测，无法对不同种类的有机磷农药进行区分。
其次，速测卡法对于测定结果的准确性和精确度要求较高，需要进行一定的校准和标定。
最后，速测卡法只能测定样品中有机磷农药的存在和浓度，无法对其代谢产物和残留物进行检测。
综上所述，速测卡法是一种便捷、直观的测定有机磷农药的方法，适用于大规模样品的快速检测。
然而，仍需要进一步完善和改进该方法，以提高其准确性和适用范围。
有机磷农药的检测方法
有机磷农药的检测方法有机磷农药是一种常见的农药类型，广泛应用于农田和园艺作物的保护中。
然而，由于其毒性较高，容易对环境和人体造成危害，因此，对有机磷农药的检测至关重要。
本文将介绍几种常见的有机磷农药检测方法。
首先，色谱法是一种广泛应用于有机磷农药检测的方法。
色谱法主要包括气相色谱（GC）和液相色谱（LC）两种。
在气相色谱法中，农药样品经过提取和预处理后，将其注入到具有适当固定相的色谱柱中，利用样品中各种农药相互间的挥发性、馏出时间的差异，通过控制注入气体流量、温度等参数，可分离出不同种类和不同数量的农药，并通过检测器测量其峰面积或峰高值来定量分析。
液相色谱法与气相色谱法类似，只是色谱柱中的固定相和移动相是液体。
色谱法检测方法具有分离效果好、准确性高、灵敏度高等优点，在有机磷农药检测中应用广泛。
其次，质谱法也是一种常用的有机磷农药检测方法。
质谱法主要包括质谱检测和质谱联用技术，如气相质谱（GC-MS）和液相质谱（LC-MS）等。
质谱法通过将样品中的农药分子进行电离并分析其质荷比来确定其种类和数量。
在有机磷农药检测中，质谱法通常以色谱法与质谱法相结合的方式进行，以提高分析的准确性和灵敏度。
质谱法检测方法具有灵敏度高、准确性高、分辨度高等优点，可以快速、精确地检测有机磷农药。
此外，比色法是一种常见的有机磷农药快速检测方法。
比色法基于有机磷农药分子与某种试剂反应后形成有色化合物的原理。
通过测量有机磷农药与试剂反应后产生的颜色的吸光度，可以判断样品中有机磷农药的含量。
比色法检测方法具有简单、快速、便携等优点，但相较于色谱法和质谱法，比色法的准确性和灵敏度较低。
此外，免疫分析法也是一种常见的有机磷农药检测技术。
免疫分析法是利用抗体与特定分析物质（农药）结合并发生特异性免疫反应的原理来检测农药的方法。
免疫分析法具有快速、灵敏度高、选择性好等优点，但需要相应的抗体和试剂来进行分析，开发成本较高。
综上所述，有机磷农药的检测方法包括色谱法、质谱法、比色法和免疫分析法等。
液液萃取气相色谱法测定水中6种有机磷农药
分析检测液液萃取气相色谱法测定水中6种有机磷农药陈国清(莆田市环境监测站，福建莆田 351100）摘 要：本文采用液液萃取-气相色谱法检测水中敌敌畏、内吸磷、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷和对硫磷6种有机磷农药的含量。
实验以正己烷为萃取剂，对色谱条件进行优化。
实验结果显示，6种有机磷化合物在0.1～1.0 μg·mL-1线性关系良好，检出限为0.010～0.200 μg·L-1，相对标准偏差为1.54%～4.72%，加标回收率为76%～104%，本方法能满足水中有机磷农药检测的实际需要。
关键词：液液萃取-气相色谱法；有机磷农药；水质Determination of Six Organophosphorus Pesticides in Water by Liquid Liquid Extraction Gas ChromatographyCHEN Guoqing(Putian Environmental Monitoring Station, Putian 351100, China)Abstract: This article uses a liquid liquid extraction gas chromatography method to detect the content of six organophosphorus pesticides in water, including dichlorvos, phosphorus, dimethoate, methyl parathion, malathion, and parathion. The experiment used n-hexane as the extractant to optimize the chromatographic conditions. The experimental results showed that the six organic phosphorus compounds had a good linear relationship between 0.1 and 1.0 μg·mL-1, with a detection limit of 0.010 to 0.200 μg·L-1, a relative standard deviation of 1.54% to 4.72%, and a recovery rate of 76% to 104%. This method can meet the practical needs of detecting organic phosphorus pesticides in water.Keywords: liquid liquid extraction gas chromatography; organophosphorus pesticide; water quality有机磷农药的广泛使用会给人们的身心健康带来严重危害[1]。
蔬菜中有机磷农药的快速测定
蔬菜中有机磷农药的快速测定前言蔬菜与人们的日常生活密切相关，其中农药残留问题也早已成为人们关注的焦点 。
由于有机磷农药对于防治蔬菜等的农作物病虫害具有经济、高效、方便等特点，所以有机磷农药长期在农药中占有重要地位，但不少有机磷农药在杀灭病虫害的同时对人体也具有高毒性。
随着人们对有机磷农药及其残留的认识，对它进行检测的各种方法也就应运而生。
目前常用的农残检测方法有气相色谱法和酶抑制法，其中气相色谱法是国家标准方法，它的准确度和精确度高，但色谱法运行费用高，而且需要专门的技术人员进行操作，分析所需时间长，仅适合于实验分析，很难在社会上普及，不能满足现场快速测定的需要。
实际上，各种有机磷农药对人体的毒性具有累加作用，在蔬菜生产中农民也是经常将几种不同的有机磷农药混合使用，因此判断蔬菜中有机磷农药污染的程度不应该孤立地看每种有机磷农药，而应该看其综合作用。
胆碱酯酶的抑制率检测方法则可以较好的反映有机磷农药的综合作用。
因此采用酶抑制法，它对有机磷农药测定实用性广，同时对样品净化要求不高，检测时间短，无需精密仪器设备，与气相色谱法相比，技术更易于掌握，适合我国现行的农产品产销体系下对蔬菜有机磷农药残留的检测。
但对于用此方法不能具体检测出是哪种有机磷农药的问题，可在用酶抑制法测出超标的基础上再用《GB-T 5009.20-2003 食品中有机磷农药残留量的测定》即气相色谱法方法检测超标样品中具体含有哪种有机磷农药。
一、实验目的1、熟悉FITT-2001农药残留快速测试仪的使用方法。
2、掌握用酶抑制法测定蔬菜中有机磷农药的原理和方法。
二、实验原理胆碱酯酶对底物分解反应的催化能力与其活性成正相关。
而蔬菜中的农药对胆碱酯酶的活性起抑制作用，抑制程度的大小与农药的残留毒性成线性相关。
因此通过测试蔬菜样品与胆碱酯酶作用前后催化反应的速率变化，即可测试胆碱酯酶的活性变化，从而测试出样品中的农药残留，用[I%]表示酶的抑制率。
有机磷检测
酶抑制法
• 酶的选择
酶抑制法中酶最为关键，酶的种类决定着检测的 灵敏度。常用的酶有两种：乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯 酶。
• 底物和显色剂
酶抑制显色反应可以使用的底物和显色剂很多， 大致可分为以下几种类型： 乙酰胆碱-修百里酚蓝显色法 乙酸-ß-萘酯-固蓝B盐显色法 乙酸羟基吲哚显色法 乙酸靛酯显色法
分光光度法
• 实验步骤
样品处理 选取有代表性的蔬菜样品，洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎 片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1~2min， 倒出提取液，静置3~5min，待用。 对照溶液测试 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色 剂，摇匀后与于37°C放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。 加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中， 记录反应3min的吸光度变化△A0 。 样品溶液测试 先于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相 同，记录反应3min的吸光度变化△A0 。
酶抑制法
• 原理
酶抑制法是目前最常见的蔬菜中农药残留快速检测 方法。有机磷和氨基甲酸酯农药能抑制昆虫神经系统中 乙酰胆碱酯酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积 累，影响昆虫正常的神经传导，使其中毒致死。有机磷 和氨基甲酸酯类农药对酯酶的抑制率与其浓度称正相关。 酶样与样品进行反应，如样品中没有农药残留或残 留量极少，酶的活性不被抑制，可以水解底物；反之， 如农药的残留量比较高，酶的活性被抑制，底物就不被 水解或水解速度较慢。 水解产物可以通过光度法或电化学的方法进行检测， 通过抑制率判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯 类农药的存在及其含量的多少。
气相色谱法
• 方法原理
有机磷农药的检测
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新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
教学手段和教学组织
少时红色容易消退，量多时，溶液全部变红，长时间不退。加浓盐酸后，如出现蓝绿色是为阴性，温度过高，时间过长，酸化后会出现阴性，乙醚过多也有干扰，往往一次难以成功，须多做两遍，并应同时作阳性样品对照和空白对照试验。
二、实验要求
本次试验提供检材1、2、3，分别为敌敌畏、乐果、1605中的一种，通过有机磷农药颜色鉴别试验，鉴别三种检材为上述那种有机磷农药。
三、颜色鉴别试验
（一）不含硫代磷酸脂类有机磷的颜色反应
间苯二酚-氢氧化钠反应：
分别取三种检材1滴至滤纸上，加1％间苯二酚酒精液1滴及5％氢氧化钠醇液1滴，置小火加热片刻，观察斑点处的颜色变化。
1059391112404049乐果等有机磷农药被碱水解后所生成的硫醇化合物能与亚硝酸作用生成亚硝基化合物该化合物在汞离子hg存在下水解又能释出亚硝酸与griess试剂作用生成紫红色偶氮化合物
新乡医学院实验课教案首页
实验课程名称：法医毒物分析授课教师姓名及职称：郭娟宁助教
题目
实验六、有机磷农药的检测
介绍实验思路。
指导学生进行实验操作。做试验的过程中，Байду номын сангаас学生强调一下试验中的注意事项。
2006年3月13日
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新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
教学手段和教学组织
分别取检材2、3各1～2毫升于两个烧杯内，加0.4N氢氧化钠5毫升，在35-40℃水浴中放置10分钟进行水解，加亚硝酸溶液（临用前将1N硫酸和0.01N亚硝酸钠溶液按9：1混合）5毫升，加时应由管的中央直接加到溶液中。以免沾到管壁上，影响结果。放置10分钟，加25％尿素溶液1毫升，振摇10分钟，加氨基苯磺酸溶液1毫升，混合后加入饱和二氯化汞溶液0.2毫升混合，再加a-萘胺溶液1毫升，混匀，在37-38℃水浴中放置5分钟。观察结果。
蔬菜中有机磷农药的测定
蔬菜中有机磷农药的测定
蔬菜中有机磷农药的测定可以采用气相色谱法、液相色谱法、超高效液相色谱法、质谱法等多种方法。
以下是其中一种常用的方法：
气相色谱法：
1. 样品制备：取待测蔬菜样品，用乙腈或其他有机溶剂进行提取，加入氯化钠或其他盐类，沉淀出蔬菜中的有机磷农药。
2. 样品处理：将沉淀物用乙腈或其他有机溶剂重新溶解，并加入固相萃取柱进行净化和富集。
3. 色谱分析：采用气相色谱法，使用火焰离子化检测器或电子捕获检测器进行检测。
4. 标准曲线：使用标准有机磷农药溶液制备标准曲线，用于定量分析。
液相色谱法：
1. 样品制备：取待测蔬菜样品，加入酸或碱，使有机磷农药水解成磷酸盐，再加入氯化钠或其他盐类，沉淀出磷酸盐。
2. 样品处理：将沉淀物用酸或碱重新溶解，并加入固相萃取柱进行净化和富集。
3. 色谱分析：采用液相色谱法，使用荧光检测器或紫外
检测器进行检测。
4. 标准曲线：使用标准磷酸盐溶液制备标准曲线，用于定量分析。
实训项目六：有机磷农药中毒病例讨论
O：2月29试脱机，3月4号撤机 ，自主呼吸平稳。
案例讨论--护理问题与措施
P：清理呼吸道低效：与有机磷农药中毒致支气管分泌物过 多及肺部感染有关
I：气管插管，呼吸机辅助呼吸，做好气道管理，翻身扣背吸 痰，保持呼吸道通畅，鼓励病人咳嗽，备好气管切开包。
5.其他一般护理
(1) 更换干净衣物，保持床单及衣服的清
洁干燥，定时翻身，按摩受压部位， 预防褥疮。做好口腔护理，导尿管的
急
护理。
性
(2) 记录出入液量：频繁呕吐及腹泻可
有
引起脱水、水电解质紊乱，应按医嘱 及时补液，严重患者应做好血型检查
机
及输血准备。
磷
(3) 饮食护理：洗胃后一般暂禁食，以
农
便必要时再次洗胃，彻底清除毒物。 根据病情1—3d后开始进流质饮食，
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案例讨论--护理问题与措施
P:营养失调：低于机体需要量 I：评估病人的营养状况，肠外营养剂的应用，
鼻饲能全力，保证营养和水分摄入。 O：营养失调未得到改善
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案例讨论--护理问题与措施
P:恐惧、焦虑：与预后有关。 I:加强对患者的心理护理。 O：患者心理状态可，无焦虑及恐惧
O：2月27日行气管切开术，可有效咳痰。
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案例讨论--护理问题与措施
P：有感染的危险：肺部感染，尿路感染，静脉炎（中 心静脉置管处）
I：1、吸痰时严格无菌操作，加强空气消毒;2、做好尿 道口护理，移动和翻身时尿袋不可高于耻骨联合，避免 逆行感染;3、做好深静脉置管护理;4避免交叉感染。
实训项目六 有机磷农药中毒病例讨论
1
有机磷检测
酶抑制法
• 酶的选择
酶抑制法中酶最为关键，酶的种类决定着检测的 灵敏度。常用的酶有两种：乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯 酶。
• 底物和显色剂
酶抑制显色反应可以使用的底物和显色剂很多， 大致可分为以下几种类型：
• 结果判定
白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果（高于检出 限）。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴 性结果（低于检出限）。
酶抑制法
• 方法分析
该方法抗干扰性强，操作简便，检测速度快，不需 要配制试剂，，携带方便，检测成本低，能够实现在普 通农户中广泛推广使用，是现场检测的最佳方法，但此 方法存在以下一些严重的缺陷：
分光光度法
• 结果判定与检出限
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷农 药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
农药名称 甲胺磷 氧乐果 对硫磷 甲拌磷 久效磷 倍硫磷 杀扑磷
毒性 高毒 高毒 高毒 高毒 高毒 高毒 高毒
先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色 剂，摇匀后与于37°C放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。 加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中， 记录反应3min的吸光度变化△A0 。 样品溶液测试
先于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相 同，记录反应3min的吸光度变化△A0 。
该方法只能定性不能定量。它只能显示样品中是否有农药， 而无法确定其种类和大致含量。
有机磷农药的检测方法
有机磷农药的检测方法
以下是 7 条关于有机磷农药检测方法的内容：
1. 酶抑制法你知道不？就比如说用胆碱酯酶来检测有机磷农药，就像警察抓小偷一样，胆碱酯酶能快速察觉到有机磷这个“坏家伙”呢。
咱平时检测蔬菜水果的时候就可以用这个方法呀，简单又好用，咋就没多少人知道呢？哎呀！
2. 还有气相色谱法呀，这可真是个厉害的手段！就好像给有机磷农药拍个特写，能把它们的样子、成分啥的都搞得清清楚楚。
你想想，这样咱不就能准确知道有没有这些农药残留啦，多靠谱啊！对吧？
3. 免疫分析法也很棒哦！它就像是身体里的免疫系统一样，专门识别有机磷农药。
咱可以用它来检测牛奶、肉类那些食品里有没有有机磷呢，这多神奇呀，难道你不想了解一下？
4. 光谱分析法听过没？它就像一束神奇的光，能照出有机磷农药的踪迹。
你看河水呀、土壤呀，用这个方法去检测，说不定就能发现那些隐藏的有机磷呢，这多有意思啊！
5. 传感器法也很厉害哟！就好像给有机磷农药装了个警报器，一旦有它出现，马上就会发出信号。
在实际检测中，真的超方便呢，你难道不觉得这很牛吗？
6. 生物检测法也不能忽视呀！就像让小动物或者微生物来当侦探，它们对有机磷农药可敏感啦。
咱在一些特殊场合就能用上这种方法呢，是不是很特别呀？
7. 快速检测试纸法可是很便捷的呢！把它一放，像变魔术一样很快就能知道结果了。
你在市场买菜的时候就能随身带着，随时检测一下呀，多实用，为什么不多推广推广呢？
我觉得这些有机磷农药检测方法都各有各的好处和用处，应该让更多人了解和使用，这样才能更好地保障我们的食品安全和环境安全啊！。
GCMS测定水中的6种有机磷残留
GCMS测定水中的6种有机磷残留仪器简介GC-MS 6800是天瑞仪器精心打造的一款高性价比气相色谱质谱联用仪，具有完全的自主知识产权，拥有多项专利技术，可广泛应用于环境保护中农药残留的测定。
实验原理用有机试剂萃取水中可能残留的有机磷农药，用GCMS进行测定，以保留时间和标准质谱图比对进行定性，以各物质定量离子峰面积及外标法进行定量。
在国标GB3838-2002中，对六种有机磷的限量分别为：对硫磷3ug/L，甲基对硫磷2ug/L，马拉硫磷50 ug/L，乐果80 ug/L ，内吸磷30 ug/L，敌敌畏50 ug/L。
一、实验部分1.1 试剂及仪器二氯甲烷：色谱纯；无水硫酸钠：分析纯；6种有机磷标准品：各100 ug/mL；气相色谱质谱联用仪（GCMS6800）；旋转蒸发仪；氮吹仪1.2 6种有机磷检测仪器条件色谱柱：DB-5MS（30m*0.25mm*0.25um），柱流量：1.0mL/min进样口温度：270℃，气质接口温度：260℃，离子源：260℃柱箱温度：50℃（1min） 20℃/min 200℃（7min）30℃/min 280℃（1min）进样量：1.0uL（不分流），不分流时间：1.0min，分流比：10:1溶剂切除时间：4min检测器电压：-1000V，电流：100uA扫描方式：SIM扫描SIM扫描时分段扫描参数设置：扫描起始时间持续时间/min扫描离子/amu/min4 4 109 145 185 2208 4 87 88 93 125 143 170 22912 2 200 233 246 26314 2 93 97 125 173 235图1 6种有机磷（0.5ug/mL）SIM扫描图1.3 实验步骤取水样250mL置于500mL分液漏斗中，加入2g无水硫酸钠溶解后，用20mL二氯甲烷萃取，充分振荡5分钟，静置分层，收集有机相；用20mL二氯甲烷再萃取1次，合并有机相；有机溶剂经盛有2g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水后旋转蒸发至约5mL，氮吹至近干，用正己烷准确定容至2.0mL，过0.22um有机滤膜后测试。
DB-1701柱分离测定水中六种有机磷农药
ｍＬ 的混合 标准 系列 ，各 取 ２ ，在 上述 色谱条 件下 用顶 空法进 样 ，制备 农药 浓度 与色
收 稿 日期 ：２ ０ ０ ７—０ ３— ２ １
作者简介 ：罗丽春 （ ９ ５ ） １７ 一 ，女 ，化学工程师 ，大学本科学历 ，主要研 究方 向： 自来水 、地表水 、地 下水 、污水 、水处
验结果能满足气相色谱分析要求 ，且相关参数 比标准和有关 资料 的数据 有所提高 ，增加 了检测 的
准确性和灵敏度 。
关键词 ：色谱柱 ；萃取剂 ；程序升温气相色谱 法
中图分类号 ：Ｏ６ ７ ７ ５ ． １ 文献标识码 ：Ａ
有 机磷农 药 在 农 药 生 产 和 使 用 中都 有 可 能 污 染 水 体 ，且 残 留 时 问 较 长 ，对 人 身 的危 害较 大 。ｌ 我 国水处理 技术 未趋 完善 ，各 地水平 不 一 的情况 下 ，更 要加 强 监测 。按 《 ＿在 生活 饮用 水卫
Ｄ １０ Ｂ一７ １柱 分 离测 定水 中六 种 有 机磷 农 药
罗 丽春
（ 东省城 市供 水 水质监 测 网南海监 测站 ，广 东 佛 山 ５ ８ ０ ） 广 ２２０
摘 要 ：采用低毒性的正 己烷简便萃取水 中敌敌畏 、敌 百虫 、乐果 、甲基对硫 磷 、马拉硫 磷及对
硫磷 ，使用 Ｄ Ｂ一１０ 石英毛细柱 ，用程序升温气 相色谱法 测定 。能 实现 ６种农 药较 好分离 ，实 ７１
２ 结 果 与讨 论
２ １ 色谱 柱选 择 ． 本 文用 Ｄ Ｂ一１０ ，Ｈ ７ １ Ｐ—ｌ Ｖ一２ ５及 １ ５ Ｏ ，Ｏ ２ ． ％ Ｖ一１ ７＋，１ ９ ％ Ｏ ．５ Ｖ一２ ０柱 进 行 实 验 比 １
较 ，结 果发现 Ｄ Ｂ一１０ ７ １石英 毛 细柱 的分 离效果 较其 它填 充柱 理想 ，６种农 药在 １ ｎ内完 全分 ２ｍｉ
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说明：检材2、3为含硫代磷酸酯类有机磷农药。本反应较为灵敏，灵敏度为0.025毫克，还可用作定量试验。本法的关键在于加尿素பைடு நூலகம்除过剩的亚硝酸，一定要彻底去除干净，否则极易出现假阳性。同时，每次必须作空白试验加以对照。
2.亚硝酰铁氰化钠反应：1059、3911、1240、4049、乐果等有机磷农药被碱水解后所生成的硫醇化合物，与亚硝酰铁氰化钠作用，在酸性溶液中，能产生红色，检出限度约0.1毫克／毫升。
3、实验课小结及书写实验报告（30′）
授课形式
利用板书讲解、实验示教、学生操作
教材与参考文献
教材：《法医毒理学、法医毒物分析实验指导》
参考资料：《法医毒物分析》、《技能实验技术》
教研室审查意见
主任签字
基础医学院法医临床学教研室2006年5月15日
新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
介绍实验思路。
指导学生进行实验操作。做试验的过程中，给学生强调一下试验中的注意事项。
2006年3月13日
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新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
教学手段和教学组织
分别取检材2、3各1～2毫升于两个烧杯内，加0.4N氢氧化钠5毫升，在35-40℃水浴中放置10分钟进行水解，加亚硝酸溶液（临用前将1N硫酸和0.01N亚硝酸钠溶液按9：1混合）5毫升，加时应由管的中央直接加到溶液中。以免沾到管壁上，影响结果。放置10分钟，加25％尿素溶液1毫升，振摇10分钟，加氨基苯磺酸溶液1毫升，混合后加入饱和二氯化汞溶液0.2毫升混合，再加a-萘胺溶液1毫升，混匀，在37-38℃水浴中放置5分钟。观察结果。
3.偶氮染料反应：对硫磷的硝基用锌粉和盐酸还原成胺基后，用亚硝酸盐和盐酸进行重氮化。加氨基磺酸胺除去剩余的亚硝酸，最后与N-1-萘基乙二胺偶合，产生紫色。
取2毫升检材3，加等量蒸馏水，6N盐酸2滴，锌粉0.2克，然后置40℃水浴中加热30分钟，放冷、过滤。滤液中加入0.25％亚硝酸钠2滴，振摇片刻，放置5分钟，加2.5％氨基磺酸胺2滴，振摇片刻，放置5～15分钟，在酸性环境中，0.5％N-1-萘基乙二胺2滴，如有1605存在．呈紫红色。说明检材3为1605。
四、实验结果
检材1 为敌敌畏；检材2为乐果；检材3为1605
五、注意事项
1.本次实验操作要认真仔细，一次不成功可多做几次。
2.注意安全，避免有机磷农药接触皮肤。发生中毒。
3.注意实验室卫生。
六、小结
本次通过几个简单的颜色鉴别反应初步判断检材为何种农药。要求掌握常见的有机磷农药的鉴别试验。
小结本次课内容，要求独立完成实验报告。
稳定性：有机磷杀虫药不具有酸碱性，不能与酸或碱成盐。分子中含有易断裂的酯键，化学性质多不稳定，一般没有累积作用；碱能使之分解。
极性与溶解性：有机磷杀虫药具有一定极性，都能溶于乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿、苯等有机溶剂。有机磷品种很多，有的极性较弱，有的极性较强，在提取中要注意根据有机磷极性的强弱和检材中脂肪、蛋白、色素等杂质含量的高低，选择合适的溶剂。原则上，极性强的有机磷应用极性强的有机溶剂，极性弱的有机磷用极性弱的有机溶剂。敌百虫、敌敌畏、乐果、磷胺、久效磷等属强极性有机磷；3911、1240等属
二、实验要求
本次试验提供检材1、2、3，分别为敌敌畏、乐果、1605中的一种，通过有机磷农药颜色鉴别试验，鉴别三种检材为上述那种有机磷农药。
三、颜色鉴别试验
（一）不含硫代磷酸脂类有机磷的颜色反应
间苯二酚-氢氧化钠反应：
分别取三种检材1滴至滤纸上，加1％间苯二酚酒精液1滴及5％氢氧化钠醇液1滴，置小火加热片刻，观察斑点处的颜色变化。
2006年5月15日
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2006年5月15日
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新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
教学手段和教学组织
少时红色容易消退，量多时，溶液全部变红，长时间不退。加浓盐酸后，如出现蓝绿色是为阴性，温度过高，时间过长，酸化后会出现阴性，乙醚过多也有干扰，往往一次难以成功，须多做两遍，并应同时作阳性样品对照和空白对照试验。
取检材2、3各1-2ml，加少量蒸馏水（约1-2毫升），加2滴5％亚硝酰铁氰化钠（新鲜配制），5滴10％氢氧化钠，充分振荡，置30℃水浴中，加热2分钟，取出置冷水中冷却，沿管壁加入1-2滴浓盐酸。观察结果。检材2为即呈红色，检材3为蓝绿色。（检材2为乐果）
说明：此反应欠灵敏，条件较为严格。水解时加碱不可过浓，时间不可过长，温度不可过高，根据实验证明，30℃，2分钟较为适宜，量
教学手段和教学组织
一、目的
1.了解有机磷农药的理化性质和生物学特性；
2.掌握常见有机磷农药的鉴别试验。
理论知识回顾:
基本结构：有机磷杀虫药是磷酸酯或硫代磷酸酯为基本骨架的一系列有机化合物。可分为磷酸酯类（如敌敌畏）、硫代磷酸酯类（如对硫磷、乐果）。
外观与气味：有机磷纯品大多为无色、黄色或白色结晶，工业用品多数为无色、黄色至棕黄色油状液体。有机磷农药都具有强弱不等的气味，含硫的有蒜臭味，不含硫的有酯的气味或刺激性气味。在实际工作中，有经验的人通过检材的气味，大致能够判断此类农药的类别。
结果：检材1呈红色。检材2、3无颜色变化。
说明：敌敌畏、敌百虫、久效磷、二溴磷有机磷杀虫药现红色斑点，本次试验中提供的检材中含有敌敌畏，由此颜色反应可鉴别出检材1为敌敌畏。
（二）含硫代磷酸脂类有机磷的颜色反应
1.亚硝酸反应
原理：1059、3911、1240、4049、乐果等有机磷农药被碱水解后所生成的硫醇化合物能与亚硝酸作用生成亚硝基化合物，该化合物在汞离子（Hg＋＋）存在下水解，又能释出亚硝酸，与Griess试剂作用，生成紫红色偶氮化合物。
介绍本次实验课的目的和要求。
回顾有机磷杀虫药的基本结构、外观和气味、稳定性、极性与溶解性。
指出在提取检材时的注意事项。
2006年5月15日
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新乡医学院实验课教案
实验课程名称：法医毒物分析
基本内容
教学手段和教学组织
弱极性有机磷；1605、4049、1059等属中极性有机磷。但总的来说，有机磷农药的极性都比较强。中等极性和强极性的有机溶剂，如苯、二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲醇等均能将各种有机磷从检材中提取出来。
新乡医学院实验课教案首页
实验课程名称：法医毒物分析授课教师姓名及职称：郭娟宁助教
题目
实验六、有机磷农药的检测
授课对象
2003级法医学专业本科学生
实验学时
3学时
实验目的
掌握常见有机磷农药的鉴别试验；
了解有机磷农药的理化性质和生物学特性。
实验内容及时间分配
1、讲解实验相关知识（10′）
2、指导学生进行实验操作（80′）