单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
GENMED 真菌 酵母细胞内氧化应激活性氧初级荧光测定试剂盒 产品说明书
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS10016.8 v.A GENMED真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧初级荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED真菌/酵母细胞内氧化应激活性氧初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐，在细胞氧化条件下，产生荧光，来定量检测细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种实验用真菌/酵母菌株细胞内氧化应激活性氧的分析。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老和代谢等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定，荧光清晰。
技术背景真菌/酵母细胞是一种低等单细胞真核生物，具有细胞生长快，易于培养，遗传操作简单明了等原核生物的特点。
作为模式生物，它具有比较完备的基因表达调控机制和表达产物的加工修饰能力，在分子遗传学方面认识最早，最先作为外源基因表达的细胞宿主。
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基（hydroxyl radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐（2',7'-dichlorofluorescein diacetate，DCFH-DA）一种完全自由通过细胞膜的染色剂。
一旦被过氧化氢氧化，便产生荧光。
据此测定细胞内活性氧族的浓度。
产品内容GENMED清理液（Reagent A）毫升GENMED染色液（Reagent B）微升GENMED稀释液（Reagent C）毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED染色液（Reagent B）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于真菌/酵母染色的容器载玻片：用于染色观察微型台式离心机：用于沉淀真菌/酵母细胞培养箱或恒温水槽：用于染色孵育比色皿：用于荧光定量分析（共聚焦）荧光显微镜：用于细胞荧光分析细胞流式仪：用于细胞荧光分析荧光分光光度仪：用于细胞荧光定量分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的GENMED染色液（Reagent B）置入冰槽里融化。
细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书
细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适合于各种细胞裂解悬液样品的PTEN活性及其抑制剂的检测。
广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。
产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
技术背景细胞张力蛋白同源在10号染色体缺失性磷酸酶（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten；PTEN；EC3.1.3.67），又称为多发性晚期肿瘤突变基因1（mutated in multiple advanced cancers1；MMAC1），是一个肿瘤抑制基因，位于染色体10q23.3，转录产物515kb，蛋白产物175氨基酸。
PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能区和约175个氨基酸左右的与骨架蛋白张力蛋白（tenasin）、辅助蛋白（auxilin）同源的区域，是一种双重特异性磷酸酶，能使酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。
PTEN具有调节细胞周期、防止细胞过度生长和分裂、参与细胞凋亡、粘附、迁移、浸润，控制细胞内磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，调控Akt/PKB信号通路等功能。
PTEN基因突变和缺失将导致肿瘤发生、发展和转移，以及多发性错构瘤综合征（Cowden syndrome）等。
基于底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解产生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同时释放出游离磷酸根，进而与孔雀绿染料发生显色反应产生其峰值的变化（660nm波长），以此测算PTEN的活性。
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基-4-亚硝基苯胺，受到单线态氧气-的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），以及叶绿体等细胞器的单线态氧气检测。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HClO）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中单线态氧气（singlet oxygen；1 O2）是分子氧（O2）的抗磁形式或电激发形式。
通过染料分子，例如孟加拉红（Rose Bengal）、亚甲基兰（Methylene Blue）、卟啉类化合物（Porphyrins）染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。
单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。
单线态氧气会导致植物的光动力损伤（photodynamic damage）和动物心血管问题。
纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂是一种旨在通过极谱法检测系统（polarographic system）测定新鲜活体线粒体在ADP存在（III态呼吸）与否（IV态呼吸）的情况下溶解氧（dissolved oxygen）的消耗差异，即呼吸控制率（RCR），以评价线粒体结构和功能完整性以及氧化磷酸化效率的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
可以被用于线粒体生理功能和药物作用机制等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。
技术背景线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心。
电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体。
线粒体结构完整，功能正常，底物充分，电子传递形成的质子梯度不断被消耗，电子得以顺畅传递，氧气快速消耗，其耗氧率大，为III态呼吸。
ADP耗竭，质子梯度不能消耗，阻碍电子传递，氧气消耗减少，为IV态呼吸。
呼吸控制率（respiratory control ratio或respiratory control index；RCR），又称呼吸调节比，是指III态（加入ADP）的呼吸速率与IV态（ADP耗竭）的呼吸速率之比。
正常线粒体的RCR为3至10：RCR降低意味着线粒体ATP 合成功能损伤，呼吸障碍；RCR增高意味着细胞活动旺盛，代谢加快。
产品内容介质液（Reagent A）毫升态底物液（Reagent B）微升态底物液（Reagent C）微升产品说明书 1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保证6月用户自备CLARK氧电极仪：用于测定溶解氧浓度实验步骤实验开始前，制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用；同时将－20℃冰箱里的试剂融化，并预热氧电极仪到25℃。
然后进行下列操作。
1．加入xx毫升介质液（Reagent A）到反应玻璃槽2．使用微型磁力子搅拌，充分混匀3．密封反应槽4．开始记录氧浓度：起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升（25℃）5．持续记录1分钟后，注射加入xx微升待测的线粒体（总量2毫克）（注意：氧浓度可能瞬时增加5％）6．持续记录1分钟后，注射加入xx微升态底物液（Reagent B）――开始IV态呼吸（注意：参见注意事项9）7．持续记录2分钟：出现氧浓度缓慢下降）（8．继续注射加入xx微升态底物液（Reagent C注意：氧浓度在10秒钟内开始下滑）――开始III态呼吸（注意：参见注意事项9）9．持续记录直至出现线性下行斜线出现拐点10．分别测算III态呼吸速率和IV态呼吸速率：氧浓度降低值÷实际时间（分钟）11．计算呼吸控制率：III态呼吸速率÷IV态呼吸速率注意事项1．本产品为20次操作2．操作时，须戴手套3．确保反应玻璃槽洁净，密闭，以免氧气流入4．线粒体样品须新鲜制备，建议不要冻存；制备的线粒体膜须完整，非常重要；建议使用GENMED线粒体分离试剂盒－GMS10006.15．注射加入反应槽时，避免气泡和空气注入6．避免乙醇污染；乙醇增加氧浓度；如果底物或抑制剂须使用乙醇溶解，则加注10微升7．保持反应槽温度恒定，温度降低，氧浓度升高8．反应液充分混匀，和环境氧保持平衡9．加注态底物液（Reagent B）和态底物液（Reagent C）前，须充分冻融和混匀10．严格按照规定加注试剂，切莫增加加注试剂容量11．本公司提供系列线粒体检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。
血清单胺氧化酶试剂盒的使用说明书
血清单胺氧化酶试剂盒的使用说明书一、产品名称血清单胺氧化酶试剂盒二、预期用途本试剂盒用于体外定量测定人血清中单胺氧化酶（MAO）的活性。
三、检验原理本试剂盒采用连续监测法测定血清中单胺氧化酶的活性。
单胺氧化酶能催化苄胺生成苄醛，同时产生过氧化氢。
在过氧化物酶的作用下，过氧化氢与 4-氨基安替比林和酚反应生成红色醌类化合物，在 505nm波长处有最大吸收峰。
通过测定单位时间内吸光度的变化率，计算出单胺氧化酶的活性。
四、试剂盒组成1、试剂 1：R1成分：缓冲液、4-氨基安替比林、酚、稳定剂等。
规格：＿____ml/瓶。
2、试剂 2：R2成分：苄胺、过氧化物酶、稳定剂等。
规格：＿____ml/瓶。
五、适用仪器适用于具有 505nm 波长、能进行比色分析的全自动生化分析仪。
六、储存条件及有效期1、储存条件未开封试剂盒：2 8℃避光保存。
已开封试剂盒：使用后立即盖紧瓶盖，2 8℃可稳定保存 1 个月。
2、有效期：自生产之日起 12 个月。
七、样本要求1、样本类型：血清。
2、采集方法：常规静脉采血，分离血清。
3、样本保存：血清样本在2 8℃可稳定保存3 天；如需长期保存，应置于－20℃以下，避免反复冻融。
八、检验方法1、试剂准备从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温（约 30 分钟）。
分别将试剂 1（R1）和试剂 2（R2）摇匀。
2、设定参数在全自动生化分析仪上设定相关参数，包括波长（505nm）、反应温度（37℃）、样本量、试剂 1 和试剂 2 的加样量、反应时间等。
3、加样将待测血清样本和标准品分别加入相应的反应杯中。
按照设定的参数，依次加入试剂 1 和试剂 2。
4、测定启动仪器，进行测定。
仪器会自动监测反应过程中吸光度的变化，并计算出单胺氧化酶的活性。
九、计算方法以标准品浓度和对应的吸光度变化率绘制标准曲线，根据待测样本的吸光度变化率，在标准曲线上查出对应的单胺氧化酶活性值。
十、参考范围健康成年人血清单胺氧化酶活性：＿____ ＿____ U/L。
食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒
9． 可以使用比色皿检测 10．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低， 建议稀释或增加样品容量或浓度 11．如果测试样品很多，建议使用排枪移液 12．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定 2． 本产品经鉴定检测敏感
4
2、液态食品处理 1． 移取 5 毫升待测液态食品到 15 毫升锥形离心管 2． 放进台式离心机离心 10 分钟，速度为 1500g 3． 移取上清液到新的 15 毫升锥形离心管 4． （选择步骤）可以加入适量的清理液（Reagent A） 5． （选择步骤）过滤纸过滤（如果离心处理，样品仍然不清澈） 6． 置于冰槽里备用或放进-20 冰箱里保存
二、标准液准备
1． 准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管 2． 移取 xx 微升标准液（Reagent D）到 1 号管 3． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 2 号管，混匀 4． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 3 号管，混匀 5． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 4 号管，混匀 6． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 5 号管 7． 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表
实验开始前，将－20 冰箱里的试剂置于室温下融化，实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化， 移取 xx 毫升染色液 B（Reagent C2）到 xx 瓶染色液 A（Reagent C1）里，混匀，置于暗室里，标记为染 色工作液，避免光照。然后进行下列操作。
1． 准备 1 个 96 孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔 2． 分别移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 96 孔板里的每个孔里 3． 分别加入 xx 微升染色工作液 4． 加入 xx 微升缓冲液（Reagent B）到空白对照孔 5． 加入 xx 微升上述配制的标准液（Reagent D）到相应标准对照孔里 6． 加入 20 微升裂解样品（100 微克食品总量）到样品孔里 7． 轻轻摇动 96 孔板，使其混匀 8． 室温下孵育 15 分钟 9． 即刻放进酶标仪里测读：515nm 波长 10． 分析结果：
总胆固醇检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)说明书
主波长/次波长 反应类型 反应方向
500/600nm 终点法
升反应(+)
计算公式：
血清、血浆等液体样本(空白调零)： FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/L)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5 组织样本(空白调零)：
V1=细胞样本取样量（ml）
V2=样本匀浆液总体积（ml）
参考区间： 健康成年人理想范围：<5.2mmol/L(<200mg/dl)
边缘升高：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)
升高：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)
备注：TC 标准(5mmol/L)=442.48mg/dl
产品组成：
名称
规格
保存条件
总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)
100T
4℃
试剂(A):
Good'sBuffer
Good's 溶液
显色剂
2×25ml
4℃
活性剂、稳定剂
试剂(B):
胆固醇氧化酶
COD-POD 溶液 4-氨基安替比林
2×25ml
-20℃避光
CEH、POD
临用前，按 A：B=1：1 混合，即为 COD-PAP 工作液，4℃保存。
FC(mmol/g)=A 测定/A 标准×5×V2/(m×1000) 组织样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/g)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5×V/(m×1000) 细胞样本(空白调零)：
FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5×V2/V1
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书
NADH氧化酶（NOX可见分光光度法货号：BC0630规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体25 mL×1瓶4℃保存试剂二液体5 mL×1瓶4℃保存试剂三液体0.5 mL×1支-20℃保存试剂四液体70 mL×1瓶4℃保存试剂五液体10 mL×1瓶4℃保存试剂六粉剂×2瓶-20℃保存溶液的配制：试剂六：临用前加入9 mL双蒸水，用不完的试剂-20℃分装保存。
产品说明：NOX（EC 1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD+。
该酶不仅参与NAD+的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD+，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1.准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10µL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2.将匀浆600g，4℃离心5min。
将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
3.将上清液转移至另一EP管中，即胞浆提取物，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
4.沉淀即为线粒体，加入200µL试剂二和2µL试剂三，反复吹打充分混匀，用于NOX活性测定，并用于蛋白浓度测定。
细胞半胱氨酸蛋白酶3活性比色法定量检测试剂盒产品说明书
细胞半胱氨酸蛋白酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞半胱氨酸蛋白酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过四肽化合物底物，受到半胱氨酸蛋白酶的水解，释放黄色对硝基苯胺，产生吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体、昆虫等）半胱氨酸蛋白酶（）的活性检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景半胱氨酸蛋白酶（；），或称半胱天冬蛋白酶，是调节细胞凋亡的一类蛋白酶家属。
半胱氨酸蛋白酶（；）是半胱氨酸蛋白酶家属中（；秀丽隐杆线虫细胞死亡基因数）分支的一种，又称（；半胱氨酸蛋白酶蛋白）、（凋亡素）、（印度传说中的死亡之神）等。
半胱氨酸蛋白酶前体为，被切离为和而激活细胞凋亡。
其底物是多聚核糖多聚酶（（）；）、半胱氨酸蛋白酶激活酶抑制剂（）等。
半胱氨酸蛋白酶的活性检测用来评价细胞或组织的凋亡状况。
基于人工合成的四肽化合物底物（；乙酰天冬氨酰谷氨酰颉氨酰天冬氨酰对硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶的水解，释放有色对硝基苯胺，在分光光度仪（波长）下，测定吸光峰值的变化，来定量测定半胱氨酸蛋白酶的活性。
半胱氨酸蛋白酶反应系统为：→（黄色）产品内容清理液（）毫升裂解液（）毫升缓冲液（）毫升阴性液（）毫升底物液（）微升产品说明书份保存方式保存清理液（）在℃冰箱里；其余的保存在℃冰箱里；底物液（）避免光照和反复冻融；有效保证月用户自备毫升锥形离心管：用于样品制备的容器毫升离心管：用于样品制备和储存的容器细胞刮脱棒：用于细胞脱离微型台式离心机：用于样品沉淀培养箱：用于反应物孵育孔板或比色皿：用于样品比色测定的容器酶标仪或分光光度仪：用于样品比色分析实验步骤实验开始前，将－℃冰箱里的试剂盒中的底物液（）置入冰槽里融化，避免光照。
然后进行下列操作。
一、样品制备1．准备好细胞培养瓶或细胞培养皿的待测培养细胞（至细胞）2．小心加入毫升清理液（），覆盖生长表面3．小心抽去清理液4．使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞（注意：可以使用胰酶消化）5．加入毫升清理液（），混匀细胞6．移入到预冷的毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）7．放进℃台式离心机离心分钟，速度为8．小心抽去上清液9．加入微升裂解液（），充分混匀10．转移到预冷的毫升离心管11．强力涡旋震荡秒12．置于冰槽里孵育分钟13．放进℃微型台式离心机离心分钟，速度为（或，例如）14．小心移取微升上清液到新的预冷的毫升离心管15．移取微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用蛋白质浓度定量试剂盒－）16．即刻放进－℃保存或置于冰槽里继续后续操作二、测定准备1．准备好上述制备的（药物处理的）待测样品2．设定好酶标仪（温度为℃）：波长，并置零三、活性测定1．在孔板上做好相应标记：背景对照和样品2．分别移取微升缓冲液（）到相应孔里3．分别加入微升阴性液（）或上述制备的待测样品（微克总蛋白）到相应孔里（注意：样品须清澈）4．分别加入微升底物液（）5．轻轻摇动孔板（注意：避免气泡）6．在℃温度下孵育分钟（注意：可见反应孔里呈现肉眼可见的黄色）7．即刻放进酶标仪检测或转移到微升比色皿，在分光光度仪里检测8．活性计算：（1）酶标仪检测[（样品读数－背景读数）样品稀释倍数（体系容量；毫升）]÷[（样品容量；毫升）（毫摩尔吸光系数）（反应时间；分钟）（光径距离；厘米）]＝单位毫升÷（样品蛋白浓度）毫克毫升＝单位毫克单位＝微摩尔对硝基苯酚分钟（2）比色皿检测[（样品读数－背景读数）样品稀释倍数（体系容量；毫升）]÷[（样品容量；毫升）（毫摩尔吸光系数）（反应时间；分钟）]＝单位毫升÷（样品蛋白浓度）毫克毫升＝单位毫克单位＝微摩尔对硝基苯酚分钟注意事项1．本产品为次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需次4．样品须澄清，且避免反复冻融5．反应分钟后比色测定值通常升高达以上6．测定值由低到高变化；反应可持续分钟7．比色测定后，比色皿须清洗彻底8．样本测定分钟读数高于分钟读数表明具有酶活性9．建议待测样本蛋白浓度为微克微升；如果样本酶活性过低，则可以延长反应孵育时间至小时；其次增加样本量（本公司提供蛋白质浓度定量试剂盒）10．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度11．半胱氨酸蛋白酶单位活性定义为：在℃，条件下，每分钟内能够切离微摩尔四肽化合物底物所需的酶量作为一个活性单位12．本公司提供系列半胱氨酸蛋白酶酶学检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。
单胺氧化酶测定试剂盒(谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求huayu
单胺氧化酶测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清中单胺氧化酶的活性。
1.1 产品型号/规格1×32 ml；2×25 ml；1×45 ml；2×45 ml；4×45 ml ；1×50 ml ；2×50 ml；4×50 ml；8×50 ml；1×60 ml；2×60 ml；2×70 ml；6×70 ml；2×100 ml；4×100 ml；2×16 ml；4×24 ml；8×24 ml；1×25 ml；4×60 ml；8×60 ml。
1.2 主要组成成分Tris缓冲液 150 mmol/Lα-酮戊二酸10 mmol/L 乙二胺四乙酸（ETDA） 2 mmol/L谷氨酸脱氢酶 1 KU/L苄胺20 mmol/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）0.25 mmol/LProclin-300 0.1%2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；中文包装标签应清晰、准确、牢固。
2.1.2 试剂应为无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在光径1 cm、主波长340 nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度应不小于0.800。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在光径1 cm、主波长340 nm下，以纯化水为检测样本时，吸光度变化率(△A/min)应小于0.01。
2.4 分析灵敏度MAO含量为6 U/L时，测定吸光度变化率（△A/min）应不小于0.001。
2.5 线性范围MAO试剂在线性范围[0.5，100] U/L内：（a）相关系数r应不小于0.990；（b）在[0.5，10]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±1 U/L；（c）在（10，100]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10 %。
PH0630 活性氧检测试剂盒实验操作手册 Phygene
PH0630|活性氧检测试剂盒Reactive Oxygen Species Assay KitCatalog No：PH0603Size：☐100~500Tests Store at-20℃活性氧检测试剂盒（Reactive Oxygen Species Assay Kit）是一种基于荧光染料DCFH-DA（2,7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate）的荧光强度变化，定量检测细胞内活性氧水平的最常用方法。
DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜。
进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。
而DCFH不会通透细胞膜，因此探针很容易被积聚在细胞内。
细胞内的活性氧能够氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。
绿色荧光强度与活性氧的水平成正比。
在最大激发波长480nm，最大发射波长525nm处，使用荧光显微镜，流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等检测荧光信号。
Rosup为活性氧阳性诱导药物，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的真正水平。
根据检测体系和检测方法的不同，本试剂盒可测定100~500次。
试剂存储冰袋运输。
-20℃干燥避光保存，有效期一年。
试剂组分编号组分规格保存方法PH0630-A DCFH-DA（10mM）0.1mL-20℃，避光保存PH0630-B活性氧阳性对照（Rosup,100mM） 1.0mL-20℃，避光保存使用说明检测步骤1.装载探针1.1原位装载探针（仅适用于贴壁细胞）①细胞准备：检测前一天进行细胞铺板，确保检测时细胞汇合度达到50~70%。
【注】：必须保证细胞状态健康，且检测时不会过度生长。
②药物诱导：去除细胞培养液，加入适量经合适的缓冲液或无血清培养基稀释到工作浓度的药物，于37℃细胞培养箱内避光孵育，具体诱导时间根据药物本身特性，以及细胞类型来决定。
（可选）阳性对照：先用无血清培养基等稀释阳性对照（Rosup,100mM）到常用工作浓度100μM，加入细胞，一般37℃避光孵育30min-4h 可显著看到活性氧水平提高，但依细胞类型会有比较明显差异。
单氨氧化酶测定试剂盒(比色法)产品技术要求haomai
单氨氧化酶测定试剂盒（比色法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中单氨氧化酶(MAO)含量。
1.1包装规格序号规格序号规格1 试剂1：2×20ml 。
2 试剂1：2×40ml 。
3 试剂1：2×60ml 。
4 试剂1：2×80ml 。
5 试剂1：2×400ml 。
6 试剂1：5×24ml 。
7 试剂1：5L。
1.2主要组成成分本试剂由试剂1（R1）组成试剂1（R1）：缓冲剂150mmol/L苄胺20mmol/Lα-酮戊二酸10mmol/L还原型辅酶0.25mmol/L表面活性剂1%防腐剂2g/L稳定剂2g/L谷氨酸脱氢酶1KU/L2.1 外观试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；R1为无色澄清液体，液体试剂不得有沉淀和絮状物。
2.2 装量试剂瓶内液体装量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在340nm处测定试剂空白吸光度，应＞1.0A。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.01A。
2.4 分析灵敏度浓度为10 U/L的样本，吸光度差值△A＞0.003。
2.5 准确性回收试验，回收率在90%～110%范围内。
2.6 重复性用不同浓度的两个样本进行检测，各重复检测10次，其批内变异系数（CV）应不超过10％。
2.7 线性2.7.1在(2，100)U/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 在(2，10]U/L范围内绝对偏差不超过±1U/L；(10，100)U/L范围内相对偏差不超过±10%。
2.8 批间差用三个批号的试剂盒测定同一份样本，试剂盒批间相对极差应不超过10%。
2.9 稳定性试剂盒在2～8℃避光保存，可稳定14个月。
取到效期后的样品检测试剂空白吸光度、空白吸光度变化率、分析灵敏度、准确度、重复性、线性范围应分别符合2.3.1、2.3.2、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
dpbf检测单线态氧步骤
dpbf检测单线态氧步骤
1. 实验准备
在进行dpbf检测单线态氧之前，首先需要准备实验所需的材料和设备。
材料包括dpbf试剂、溶剂、样品等，设备包括紫外可见光谱仪、比色皿、移液器等。
2. 样品处理
将待检测的样品进行适当的处理，以获得单线态氧。
可以通过光照、化学反应等方法激发样品产生单线态氧。
样品的处理方法根据具体的实验目的和样品性质而定。
3. dpbf试剂的制备
将dpbf试剂溶解在适当的溶剂中，制备成一定浓度的dpbf试剂溶液。
dpbf试剂通常是一种吸收单线态氧的化合物，其吸收峰在400-500nm范围内。
4. 测量吸光度
将样品溶液和dpbf试剂溶液混合，在一定的时间内进行反应。
反应过程中，dpbf试剂与单线态氧发生反应，吸收峰会发生变化。
通过使用紫外可见光谱仪，测量混合溶液的吸光度变化。
5. 分析数据
根据测得的吸光度数据，可以计算出样品中的单线态氧浓度。
一般
来说，单线态氧浓度与吸光度呈线性关系，可以通过标准曲线来计算出样品中的单线态氧浓度。
6. 结果分析
根据实验结果，可以对样品中的单线态氧进行定性和定量分析。
定性分析可以判断样品中是否存在单线态氧，定量分析可以计算出样品中单线态氧的浓度。
7. 结论
根据实验结果，得出关于样品中单线态氧的结论。
结论应该准确、明确，并与实验目的相符。
总结起来，dpbf检测单线态氧的步骤包括实验准备、样品处理、dpbf试剂的制备、测量吸光度、分析数据、结果分析和结论。
通过这些步骤，可以对样品中的单线态氧进行检测和分析，为相关研究提供重要的实验数据。
细胞ROS测定试剂盒说明书1
用户自备
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024）：用于细胞脱离 完全细胞培养液（GMS12052）：用于细胞操作所需的培养基 15 毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器 1.5 毫升离心管：用于细胞染色的容器 血细胞计数仪：用于细胞计数 台式离心机：用于沉淀细胞 细胞流式仪：用于细胞荧光分析 （共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光细胞
5
c) 或使用荧光分光光度仪检测（定量检测）：
1）移取 400 微升上述细胞悬液到 1 毫升比色杯
2）加入
微升 GENMED 保存液（Reagent D）
3）上下倾倒混匀数次
4）放进荧光分光光度仪：激发波长 540nm，散发波长 590nm――
RFU 增高，表明活性氧族（ROS）含量高
2
二、 直接法
活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧（ROS）比色法定量检测试剂盒
细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS10111.1 v.A
GENMED 细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
GENMED 细胞内氧化应激活性氧（ROS）红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氢溴化乙啶， 在细胞氧化条件下，产生红色荧光，来定量检测细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。 该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养 学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。
体外活性氧活性氮检测试剂盒说明书
体外活性氧活性氮检测试剂盒说明书活性氧（ROS）和活性氮（RNS）是公认的分子导致氧化应激的有害影响。
与氧化应激的增加与几种疾病状态的发病机制有关。
这个氧化应激在血管疾病、糖尿病、肾缺血、动脉粥样硬化、肺疾病中的作用病理状态、炎症性疾病、癌症以及衰老都已得到充分证实。
自由的自由基和其他活性物质在体内不断产生，对人体造成氧化损伤生物分子，这一过程受到多种抗氧化剂和修复系统的制约，如以及替换受损的核酸、蛋白质和脂质。
衡量抗氧化疗法和ROS/RNS活性对抑制或治疗氧化应激至关重要诱导剂。
体外活性氧/活性氮检测试剂盒提供了一种灵敏的方法，可以检测多种样品类型中的总活性氧（ROS）和活性氮（RNS）。
该测定采用专有的荧光探针DCFH-DiOxyQ；探针用去猝灭剂灌注成高反应性DCFH形式。
在ROS和RNS的存在下，DCFH被快速氧化为高荧光DCF。
体外活性氧/活性氮检测试剂盒基本参数：中文名称：OxiSelect 体外ROS/RNS检测试剂盒（绿色荧光）英文名字：OxiSelect In Vitro ROS/RNS Assay Kit (Green Fluorescence)建议保存条件：4ºC体外活性氧/活性氮检测试剂盒组分：1.底漆试剂（234701）：一管250µL溶液。
2.稳定溶液（10X）（234702）：一管1.5 mL溶液。
3.催化剂（250X）（234703）：一管20µL溶液。
4.DCF DiOxyQ（234704）：一个50µL琥珀色甲醇溶液管。
5.DCF标准品（234202）：一个100µL琥珀色管，含有1mM DMSO溶液。
6.过氧化氢（234102）：一个100µL琥珀色管，装有8.821M溶液。
脂肪酸β氧化速率比色法检测试剂盒产品说明书(中文版)
脂肪酸β氧化速率比色法检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途脂肪酸β氧化速率（β oxidation rate）比色法检测试剂是一种旨在通过棕榈酰肉碱氧化依赖性铁氰化物还原，即单位时间还原产物的峰值降低，即采用比色法来测定线粒体裂解样品中脂肪酸β氧化速率的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种细胞、组织中线粒体裂解悬液样品（动物、人体等）脂肪酸β氧化速率的检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景脂肪酸β氧化过程（β-oxidation）在动物组织的线粒体发生的脂肪酸代谢通路，可概括为活化、转移、β氧化及最后经三羧酸循环被彻底氧化生成CO2和H2O，并释放能量等四个阶段，是体内，尤其是组织器官，例如肝脏、心脏和骨骼肌等能量内平衡的关键代谢通路。
食物中甘油三酯提供体内三分之一的能量供给，骨骼肌和心脏消耗80%的总能量。
脂肪酸代谢异常，将导致脂质聚集在非脂肪组织内，产生慢性病的病理基础，例如糖尿病、心衰、肥胖症等。
其中β氧化，包括脱氢、水合、二次脱氢和硫解，是将活化的各种长度脂酰辅酶酯（acyl CoA esters）不断缩短为乙酰辅酶A（acetyl CoA）单位，最后经过三羧酸循环和呼吸链氧化成CO2和水。
脂酰基辅酶A脱氢酶（acyl CoA dehydrogenase；AD；EC.1.3.99.3）是脂肪酸代谢进入β-氧化后工作的重要酶之一。
通过底物棕榈酰肉碱（palmitoyl carnitine）的氧化产生的电子，由铁氰化物（ferricyanide）捕获而还原，其还原速率的检测，来评价β氧化的速率，即吸光值（420nm波长）的下降与时间的对应关系。
产品内容缓冲液（Reagent A）毫升反应液（Reagent B）毫升底物液A（Reagent C）毫升底物液B（Reagent D）毫升阴性液（Reagent E）毫升产品说明书1份保存方式保存反应液（Reagent B）、底物液A（Reagent C）和底物液B（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；底物液A（Reagent C）和底物液B（Reagent D）避免光照；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应操作的容器比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤一、测定准备1．准备好待测样品（例如纯化线粒体），至于冰槽里备用2．开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长420nm和470nm，间隔1分钟，读数6次（共5分钟），并置零3．从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；底物液A（Reagent C）和底物液B（Reagent D）避免光照4．缓冲液（Reagent A）室温下均衡温度二、背景对照测定1．移取xx微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（Reagent B）3．加入xx微升底物液A（Reagent C）4．加入xx微升底物液B（Reagent D）5．上下倾倒数次，混匀6．在25℃温度下孵育3分钟7．加入xx微升阴性液（Reagent E）8．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）9．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照【（OD420—OD470）0分钟－（OD420—OD470）5分钟】三、样品测定1．移取xx微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（Reagent B）3．加入xx微升底物液A（Reagent C）4．加入xx微升底物液B（Reagent D）5．上下倾倒数次，混匀6．在25℃温度下孵育3分钟7．加入50微升待测样品（500微克线粒体蛋白）（注意：样品须清澈）8．上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）9．即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数【（OD420—OD470）0分钟－（OD420—OD470）5分钟】四、计算氧化速率注意事项1．本产品为20次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需1次4．样品须澄清，至关重要5．加样后3秒内比色测定6．测定值由高到低变化；测定可持续5分钟7．比色测定后，比色皿须清洗彻底8．样本测定0分钟读数高于5分钟读数表明具有氧化功能9．建议待测样本线粒体蛋白浓度为500微克/50微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－GMS30030.1）10．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度11．本公司提供系列脂肪酸代谢检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。
Elabscience总氧化状态(TOS)比色法测试盒说明书
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®总氧化状态(TOS)比色法测试盒Total Oxidant Status (TOS) Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K802-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪(580-590 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测细胞、组织样本及血清等液体样本中的总氧化状态。
检测原理在酸性条件下，样本中的氧化性物质可将Fe2+氧化为Fe3+，后者与二甲酚橙高度结合产生一种蓝紫色的复合物。
在溶液pH为2-3的范围内时，其最大吸收波长在590 nm附近，且颜色深浅程度在一定浓度、一定时间内与氧化性物质的含量成正比，从而间接测定样本的总氧化状态。
本试剂盒检测组织或细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用本公司BCA试剂盒(货号E-BC-K318-M)进行测定。
提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器：酶标仪(580-590 nm，最佳检测波长590 nm) 试剂准备①检测前，试剂平衡至室温。
②不同浓度标准品的稀释：样本准备①样本处理血清样本：可直接测定。
组织或细胞样本：组织样本处理的匀浆介质为PBS(0.01 mol/L，pH 7.4)或生理盐水(0.9% NaCl)。
②样本的稀释在正式检测前，需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实验，根据预实验的结果，结合本试剂盒的线性范围：2.5-100 μmol H2O2 Equiv./L，可参考下表进行稀释(仅供参考)：注：稀释液为PBS(0.01 mol/L，pH 7.4)或生理盐水(0.9% NaCl)。
过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4546
过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：UPLC-MS-4546规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体100mL×1瓶（自备）4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体12mL×1瓶4℃保存试剂四液体60mL×1瓶4℃保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂一：丙酮自备。
2、试剂二：临用前加入6mL浓盐酸充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。
3、标准品：1mmol/mL H2O2标准液。
产品说明：H2O2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化产生，由CAT和POD等催化降解。
H2O2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。
一方面，H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H2O2也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。
H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm有特征吸收。
技术指标：最低检出限：0.002μmol/mL线性范围：0.0097-1.5μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、丙酮、浓盐酸、研钵/匀浆器和冰。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样本的制备：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取全部上清液（注意吸取干净），置冰上待测。
单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基-4-亚硝基苯胺，受到单线态氧气-的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），以及叶绿体等细胞器的单线态氧气检测。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HClO）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中单线态氧气（singlet oxygen；1 O2）是分子氧（O2）的抗磁形式或电激发形式。
通过染料分子，例如孟加拉红（Rose Bengal）、亚甲基兰（Methylene Blue）、卟啉类化合物（Porphyrins）染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。
单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。
单线态氧气会导致植物的光动力损伤（photodynamic damage）和动物心血管问题。
单线态氧的测量
在约273 K时 ,由于 H2O 的饱和蒸气压为 H2O2 的 16 倍 , 速率常数又大近十倍 ,故H2O2 淬灭可以忽略不计。
其他淬灭剂照此类推也可得出此结论。
因此可以认为在单重态氧发生器产物中对O2 (1Σ)淬灭起 决定作用的是气相 H2O。
2 、O2(1 △ )气相传输动力学的分析
Zagidullin、Bonnet、Endo等认为 ,在化学氧碘激光器中, O2（1 △ ）的气相传输动力学过程近似地由以下两类动力 学过程所控制：
O（2 1） O（2 1）k1O（2 1） O（2 3）（2） k1 2 10-17 cm3mol-1s-1
P 1
（29）
这一近似是在低压时才成立的，这样式（25）可以近
似表示成
1 1 0 P
（30）
上面这个公式就是（4）
单重态氧发生器出口气流中 O2 (1Δ)及水汽绝对浓 度的测量
O2 (1Δ)的浓度是评价单重态氧发生器性能的一个决定性 参量。
在出口气流中会带有水汽 ,而水在氧碘化学激光器腔中 , 对发光介质 I *有严重的淬灭作用 ,直接影响氧碘化学激光 器的出光功率 。
我们提出了用模拟体光源方法对 O2 (1Δ)和水汽的绝对浓 度同时进行测量的实验方案。
该方案依据体光源模拟标定法测光子速率的原理,分别 测试了 O2 (1Δ) 自发辐射的1270 nm光子和 O2 (1Σ)辐射的 762 nm 光子的光子速率 ,从而计算出了 O2 (1Δ)和 H2O 的 绝对浓度。
另外，由关系式
Pa P
（26）
将（25）式代入得到
Pa P0exp -P
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植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
植物氧化应激活性氧单线态氧气比色法定量检测试剂是一种旨在通过二甲基-4-亚硝基苯胺，受到单线态氧气-的作用，出现去色现象，由分光光度仪比色分析，定量检测植物组织细胞内单线态氧气活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），以及叶绿体等细胞器的单线态氧气检测。
可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HClO）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。
其中单线态氧气（singlet oxygen；
1 O2）是分子氧（O2）的抗磁形式或电激发形式。
通过染料分子，例如孟加拉红（Rose Bengal）、亚甲基兰（Methylene Blue）、卟啉类化合物（Porphyrins）染料的光敏过程中能量转移产生，或过氧化氢和次氯酸的化学反应产生。
单线态氧气可以调节紫外线A辐射的生物学作用、激活各种细胞信号通路等。
单线态氧气会导致植物的光动力损伤（photodynamic damage）和动物心血管问题。
基于二甲基-4-亚硝基苯胺（N,N-Dimethyl-p-nitrosoaniline；PNDA或RNO）作为单线态氧气的选择性受体，在单线态氧气的存在下，产生去色作用，在分光光度仪下（440nm波长），呈现吸光峰值的降低。
据此定量检测细胞内单线态氧气活性氧族的浓度。
产品内容
清理液（Reagent A）毫升
裂解液（Reagent B）毫升
缓冲液（Reagent C）毫升
反应液（Reagent D）毫升
阴性液（Reagent E）毫升
产品说明书1份
保存方式
保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在-20℃冰箱里；反应液（Reagent D）避免光照；有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品制备和保存的容器
15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器
DOUNCE匀浆器：用于裂解植物组织
（微型）台式离心机：用于样品操作
培养箱：用于反应孵育
比色皿或酶标板：用于比色分析的容器
分光光度仪或酶标仪：用于比色分析
实验步骤
一、样品准备
1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定500毫克组织重量2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次
4．即刻用刀片切碎组织
5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6．加入预冷的xx毫升裂解液（Reagent B）
7．涡旋震荡5秒，充分混匀
8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
10．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管（选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
12．即刻移入到1.5毫升离心管
移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－MB30030.1）
14．放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用
二、测定准备
1．开启并设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长440nm，并置零
2．从－20℃冰箱里取出试剂，置于冰槽里融化；反应液（Reagent D）避免光照
三、背景对照测定
1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入xx微升阴性液（Reagent E）
3．加入xx微升反应液（Reagent D）
4．上下倾倒数次，混匀
5．在25℃温度下孵育40分钟
6．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照
四、样品测定
1．移取xx微升缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入100微升待测样品（50微克蛋白）（注意：样品须清澈）
3．加入xx微升反应液（Reagent D）
4．上下倾倒数次，混匀
5．在25℃温度下孵育40分钟
6．即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数
五、计算样品浓度
[（样品读数－背景读数）X 1 （体系容量；毫升）X样品稀释倍数]÷[0.1（样品容量；毫升）X 34.4（毫摩尔吸光系数）]＝微摩尔1 O2/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝微摩尔1 O2/毫克
六、酶标板测定
1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照和样品
2．分别移取xx微升缓冲液（Reagent C）到96孔板的所有孔中
分别加入xx微升阴性液（Reagent E）或待测样品（20微克蛋白）到相应孔中（注意：样品须清澈）
4．分别加入xx微升反应液（Reagent D）到96孔板的所有孔中。