多糖制备工艺介绍

当溶液的pH低于等电点时，蛋白质分子以阳 离子形式存在，易于生物碱试剂作用，生成
不溶性盐沉淀，并伴随蛋白质变性
除蛋白效果较好，节省时间 和试剂，多糖损失相对较小， 得率较高，还能除去大量色 素
结合了有机溶剂的变性作用和三氯乙酸 简单有效，多糖损失率很低 的沉淀作用起来
同Sevage法
蛋白清除率高，但多糖损失 较大。
多糖制备工艺
• 介绍
-多糖定义、分类、临床应用
• 多糖制备流程
多糖的分类
• 多糖: • （polysaccharide）是由糖苷键结合的糖
链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚 合糖高分子碳水化合物
多糖的广义分类
均一性多糖
不均一性多糖
由不同的单糖分子缩合而 由一种单糖分子缩合而成 成,有的由含糖胺的重复
微波萃取（微波辅助提取法） 当归多糖、茯苓多糖的制备
超声萃取 发酵醇沉法 稀碱浸提法
当归多糖的制备 茯苓多糖的制备 茯苓多糖
备注
操作较繁琐、杂质较多
操作较繁琐、杂质较多
省时，高效、节能在很多方面 优于传统的直接加热萃取法和 超声波萃取法 提取多糖含量不如水提法，但较 经济
酶解法 酶解结合水浸提法
超临界流体萃取法
室温下振摇
膜结构
但费时费力
利用膜的筛分性质,以压差为传质推动 力,将高分子溶质与小分子溶质依据其 相对分子质量的差别进行分离
价格较贵，有时对待测组分 有吸收，需要仔细选择；但 整体上节约了处理成本，设 备操作简便，极具工业应用 前景
蛋白质在氯仿等有机溶剂中容易变性
操作复杂，需进行多次操作， 费时，且多糖损失大
• 国内外学者对绿茶、人参、枸杞、黄芪、 麦冬、红景天、桑叶、木耳、冬虫夏草、 香菇、灵芝等近20种中药或天然药物多糖 进行了研究。
多糖制备流程
• 提取 • 纯化 • —除蛋白质 • —除小分子 • —脱色
提取方法如下：
方法
举例
水提法（直接加热浸提）
茶多糖的制备 当归多糖的制备
醇提法
茶多糖的制备
• 三、根据色素与有效成分吸附性差别进行分离
• 1．物理吸附：（吸附力是分子间力）
•
（1）极性吸附剂：如硅胶、氧化铝。可去除亲水性
色素。
•
（2）非极性吸附剂：如活性炭，纸浆、滑石粉、硅
藻土。可去除亲脂性色素。
•
活性炭是一种优良的吸附剂，它对色素、细菌、热原
等杂质有很强的吸附能力，并且其还有助滤作用。
• 一、根据色素在不同溶剂中的溶解度差别进行除 去
• 二、根据色素在两相溶剂中的分配比不同进行除 去
• 三、根据色素与有效成分吸附性差别进行分离 • 四、沉淀法除去色素 • 五、絮凝剂法除去色素 • 六、膜分离去除色素
一、根据色素在不同溶剂中的溶解度差别进 行除去
• 属于最常用、最简单、也是效果比较 差的方法。
华菇多糖的制备 鲨鱼软骨粘多糖
具有条件温和、杂质易除、 得率高的优点。
选择性强，无溶剂残留，萃 取剂易回收，但对设备要求 高，基建投资高。
方法
半透膜法
超滤法
Sevage法
三氯乙酸法 （TCA法 ） 三氯乙酸-正丁醇 法 冻融－Sevage联 合法
除蛋白质
原理
优缺点
是一种只允许离子和小分子自由通过的 最保险，不引入其他物质，
除小分子
方法
原理或应用
备注
超滤膜过滤
以压力差为推动力的膜过 采用有机微滤膜和超滤膜
滤方法
连续过滤效果好
反渗透(RO)过滤 纳滤(NF)
渗透汽化（pv）
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分离水中醇、胺、酚、有 机酸、酯等小分子有机物
分离难解离型小分子有机 物和解离型小分子有机物
利用料液膜上下游某组分 化学势差为驱动力实现传 质，利用膜对料液中不同 组分亲和性和传质阻力的
• 1．水提醇沉：可去除小部分水溶性色 素。
• 醇提水沉：可除去大部分脂溶性色素。 （也可以两种方法交替使用）
• 2．酸碱沉淀法：例如当杂质色素是一 些黄酮、蒽醌等酚酸性成分时，可调节PH3 以下，令其析出。
• 二、根据色素在两相溶剂中的分配比不同 进行除去
• 例如当杂质色素是一些黄酮、蒽醌等 酚酸性成分时，可采取调节PH到12以上， 用有机溶剂萃取的方法。这时由于色素都 以解离形式存在，不宜被萃出。
双糖系列组成，称为糖胺 聚糖 ，也叫粘多糖。
淀粉、糖原、纤维素 透明质酸、硫酸软骨素等
临床作用
• 免疫调节 • 抗病毒及抗癌 • 降血糖 • 治疗肝肾疾病及消炎镇痛 • 美容 • 乳化
-在水中溶解性好，有良好的稳定性，可作为研 磨剂、乳化剂的稳定剂和增稠剂 ，应用很广。
• 植物的多糖具有不同程度的降血糖、降血 脂、抗凝血和免疫增强等作用
• 3．半化学吸附：聚酰胺与大孔树脂。
• 吸附原理为氢键作用，大孔树脂还有 部分范德华力作用。
• 聚酰胺可通过分子中的酰胺羰基与酚 类、黄酮类的酚羟基形成氢键。也可以通 过酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸 上的羰基形成氢键。
方法
操作
优缺点
活性炭
把活性炭加入到制备的浸提液中， 可大量吸附色素，又能吸附多
• 除蛋白质的方法很多 ，但要注意加入的试剂会不会对分
• 析造成影响。如：加热、加入乙腈、加入三氯乙酸、加入
• 氯仿-辛醇。一般第一步可以盐析然后加热（如果对样品
• 没有破坏，但除蛋白效果较差），离心（如果样品和蛋白 没有结合），超滤（样品的分子量和蛋白质的分子量有差
• 异），甚至还可以过凝胶柱(根据蛋白质分子的大小和形 状进行分离) ，也可以用氯仿法、 等电点沉淀法、电泳、 絮凝剂絮凝、固相萃取、蛋白酶水解，然后膜分离或者透 析等。
差异实现选择性。
节能、截留效果好
节能、截留效果好
膜材料是PV过程能否节 能，高效等特点的关键 。 应用于有机物水，水中回 收贵重有机物、有机-有 机体系分离三方面
膜蒸馏（MD）
以疏水微孔膜作介面的液 能耗大、 效率低、 费用
体蒸馏过程
高。用于水的蒸馏淡化，
对水溶液去除挥发性物质
脱色
• 目前用于脱色的方法及工艺很多，但大致可通过 以下方法进行分类：
•
其内部有大量的微孔和空隙，表面积可达200-
500m2/g。
•
吸附原理：由于大多数色素具有共扼双键结构，易吸
附。
•
使用方法：冷吸附法，热吸附法，炭层助滤法，柱层
析吸附法
• 2．化学吸附：
• （1）例如可用碱性氧化铝去除一些黄 酮、蒽醌等酚酸性色素。
• （2）离子交换树脂法：例如黄酮、蒽 醌等酚酸性色素可以用阴离子交换树脂除 去。