石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明

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染色程序

染色程序

【检验目的】检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。

【原理】结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。

利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。

【试剂】试剂名称:结核菌染色液试剂生产厂家:珠海贝索生物技术有限公司包装规格:250ml*4试剂组成:1、石碳酸复红溶液2、酸性酒精溶液3、亚甲基蓝溶液储存条件及有效期:原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。

【标本要求】(1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等。

(2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。

)(3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。

病人标本须密封运送以避免污染环境。

【检验方法】1、痰液标本取干酪样、脓样或可疑部分约0.05毫升,其他体液标本取离心后沉淀0.05毫升,于玻片正面均匀涂抹成10*20毫米卵圆形菌膜,自然干燥。

染色前加热固定。

2、放置在染色架上,玻片间距保持10毫米以上距离;火焰固定。

3、滴加石碳酸复红溶液盖满玻片,染色10分钟或更久。

4、流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水。

5、自菌膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片,脱色1-2分钟;如有必要,需流水洗去酸性酒精溶液后,再次脱色至菌膜无可视红色为止。

6、流水自玻片一端轻缓冲洗10-20秒,冲去酸性酒精溶液,沥去玻片上剩余的水。

7、滴加亚甲基蓝溶液,染色30秒钟。

8、流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去亚甲基蓝溶液,然后沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检。

9、一张染色合格的玻片,菌膜肉眼观察为亮蓝色,无红色斑块。

【检验结果的解释】在淡蓝色背景下,抗酸性菌呈红色,其他细菌及细胞呈蓝色。

改良苯酚品红液配方

改良苯酚品红液配方

改良苯酚(石碳酸)品红液配方
改良苯酚品红液配置方法(改良苯酚(石碳酸)品红液北京雷根生物技术有限公司可能有售):
甲液:
原液A: 将3克碱性品红溶于100毫升70%的酒精中(此液可长期保存)。

原液B:取10毫升原液A加入90毫升5%的苯酚水溶液中(2周内使用)
染色液(甲液):取55毫升原液B 加入6毫升冰醋酸和6毫升37%甲醛(2周内使用)
乙液(改良苯酚品红液):
取甲液10毫升加入90毫升45%醋酸和1.8克山梨醇,此即改良的苯酚品红液(即石碳酸—品红染色液)。

置于棕色瓶中保存备用(放置2周后使用,染色能力显著增强)
改进的改良苯酚品红液配置方法:
配方:
原液A: 将3克碱性品红溶于100毫升70%的酒精中(此液可长期保存)。

原液A 0.8毫升,5%苯酚水溶液7.4毫升,37%甲醛0.9毫升,冰醋酸0.9毫升,45%醋酸90毫升,山梨醇1.8克
配置方法:将原液A加入5%苯酚水溶液,然后加入冰醋酸、37%
甲醛和45%醋酸、最后加入山梨醇。

抗酸染色——标准操作

抗酸染色——标准操作

抗酸染色一、原理本试剂盒采用WHO推荐的Ziehl-Neelsen法分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。

但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色。

齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。

当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

二、试剂石碳酸复红染液、酸性酒精溶液、亚甲蓝溶液三、方法1.涂片:参见各标本操作程序涂片,涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥,但勿靠近火焰2.固定:常用高温进行固定。

即手持载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次,共约3~4秒。

要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜,放置待冷后染色3.染色3.1 滴加石碳酸复红染液盖满玻片,染色10分钟或更久,无需加温3.2 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水3.3 滴加酸性酒精溶液盖满玻片,脱色1-2分钟,如有必要,需流水冲去溶液后,再次脱色至痰膜无可视红色为止3.4 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水3.5 滴加亚甲蓝溶液,染色30秒钟3.6 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检3.7 一张染色合格的玻片,痰膜肉眼观察为亮蓝色,无红色斑块四、结果判定1.干燥后油镜观察300个视野(观察时间不少于4min),抗酸性细菌呈红色,其它细菌或细胞呈蓝色2. 报告方式2.1 未找到抗酸杆菌2.2 找到抗酸杆菌±:可疑,发现抗酸杆菌1-2条/300视野2.3 找到抗酸杆菌1+:发现抗酸杆菌3-9条/100视野2.4 找到抗酸杆菌2+:发现抗酸杆菌1-9条/10视野2.5 找到抗酸杆菌3+:发现抗酸杆菌1-9条/1视野2.6 找到抗酸杆菌4+:发现抗酸杆菌≥10条/1视野五、注意事项1.每一玻片只能涂一份标本,以防脱落混淆2. 脱色时间需根据涂片厚薄而定,厚片可适当延长,以无红色脱出为止3. 冬季室温过低时,染色时间要适当延长4. 有时同一个抗菌体上红色深浅也有不同,观察时应注意5. 每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发,储存时应避免高、低温及阳光照射6. 在涂抹痰标本时,严禁对玻片加热7. 染色时勿使玻片上的染液干燥六、临床意义分支杆菌属(结核分支杆菌、麻风分枝杆菌、非典型分支杆菌)、放线菌抗酸染色阳性,可初步鉴定细菌。

结晶紫染色液配制及使用说明

结晶紫染色液配制及使用说明
结晶紫染色液(1%)
编码
品名
规格
单位
北京华越洋生物
结晶紫染色液(1%)
10ml

GT79031-10ml
北京华越洋生物
结晶紫染色液(1%)
100ml

GT79032-100ml
北京华越洋生物
结晶紫染色液(1%)
500ml

GT79033-500ml
产品说明:
结晶紫染色液(CrystalVioletStainingSolution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把
500ml
100ml 苏木素伊红混合染色液(一 100ml
步法)
50ml 苏木素伊红混合染色液(一 500ml
步法)
3×50ml 改良 Harris 苏木素染色液 100ml
50ml 改良 Harris 苏木素染色液 500ml
100ml Mayer 苏木素染色液
100ml
100ml Mayer 苏木素染色液
500ml
(GillNo.3)
改良型石炭酸复红染液(苯酚品红 100ml Heidenhain 铁苏木素染色 3×
染液)

100ml
抗酸染色液(试剂盒)
50ml×3 天青石蓝苏木素染色液
2×50ml
吕氏碱性美蓝染色液(0.1%)
100ml 改良 MacConaill 铅苏木素 140ml
染色液
卢戈碘液(革兰氏染色)
7×50ml 茜素红 S 染色液(1%,pH4.2) 100mL
2*50ml 0.2%核固红染色液
100ml
2*100ml 改良 Lillie-Mayer 苏木素 100ml
染色液

苯酚碱性品红溶液(5% 0.5%)

苯酚碱性品红溶液(5% 0.5%)

北京索莱宝科技有限公司
苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)
货号:G0032
规格:100mL
保存:室温避光保存,有效期12个月。

产品说明:
碱性品红(Fuchsin basic),分子量为337.85,分子式为C20H20ClN3,CAS号为632-99-5。

碱性品红是非常强的细胞核染料,易使弹性组织、嗜品红颗粒染色,亦可以用于神经细胞核的染色和细菌的鉴别染色,常与其他染色剂合用对细胞核染色。

苯酚碱性品红溶液(5%/0.5%)主要由5%苯酚、碱性品红、乙醇等组成,反复多次溶解而得,可以与苯酚一起做抗酸染色(主要为结核杆菌),较少单独使用。

操作步骤(仅供参考):
1、根据实验具体要求操作,较少单独使用。

2、亦可参考碱性品红水溶液(1%)操作。

注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

第1页,共1页。

实验三、压片和涂片的制作,油镜的使用

实验三、压片和涂片的制作,油镜的使用

压片和涂片的制作,油镜的使用一、实验目的1.掌握植物根尖压片的制作方法2.掌握涂片的制作方法3.了解油镜的使用二、实验材料和方法(一)根尖压片1、器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、烧杯等。

2、试剂:Carnoy固定液(3份95%乙醇∶1份冰乙酸);1mol/L HCL;改良苯酚品红3、实验材料:洋葱根尖4、步骤(1)准备将洋葱剥去外层老皮,置于盛清水的小烧杯口上,使根茎部与水接触,在25℃左右培养使其生根。

每天换水1到2次,一般3天左右即可获得实验所需材料。

(2)解离剪下根尖约1cm备用。

放入1mol/L的盐酸解离10~15min。

(3)染色解离后吸出HCl,蒸馏水洗2次,每次3~5min。

将根尖置于载玻片中间,切去根冠,从乳白色分生组织切取尽可能薄的一片,滴加20μl改良苯酚品红染液,染色10~15min。

(4)压片在经染色的材料上加一滴染液,盖上盖玻片,覆一层吸水纸,用左手一个手指压住盖玻片的一角,右手用带橡皮头的铅笔/镊子垂直敲打,或以拇指垂直紧压盖片(压片必须用力适当,注意勿使盖片移动),使材料分散压平,便于观察。

(5)镜检通常染色清晰而又分散得很好的分裂相只是少数,因此压片后要认真仔细地进行镜检。

(二)根尖涂片1.取材:细胞分裂旺盛时期取样,一般植物在上午9-12时,下午2-5时,一般取根尖、茎尖。

2.预处理(观察细胞分裂时需该步骤):目的是防止纺锤体的形成,使细胞分裂停止在中期阶段,从而获得较多的中期分裂相,同时预处理还可以使染色体收缩变短,便于观察统计。

3.前低渗:将处理后的材料放在0.075M KCl低渗液中,在20-25℃条件下处理30分钟左右。

4去壁:倒去KCl溶液,加入2.5%混合酶液(纤维素酶与果胶酶各占2.5%),在温度25-30℃下处理2-5小时左右,其间将材料轻轻摇动数次,促使酶反应充分。

酶液与材料的比例适当,酶液不能过少。

5 后低渗:倒去酶液,用蒸馏水冲洗2-3次,然后在蒸馏水中停留5-10分钟左右后进行后低渗。

常用染色液的配制

常用染色液的配制

常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。

2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。

B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。

一般可将此溶液稀释5-10倍使用。

但稀释液易变质失效,一次不宜多配。

3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。

(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。

(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。

取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。

4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。

(2)0.5%蕃红溶液。

(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。

再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。

(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。

6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。

常用染色液的配制

常用染色液的配制

常用染色液的配制常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。

2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。

B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。

一般可将此溶液稀释5-10倍使用。

但稀释液易变质失效,一次不宜多配。

3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。

(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。

(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。

取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。

4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。

(2)0.5%蕃红溶液。

(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。

再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。

(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。

(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。

6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。

果蝇的培养——精选推荐

果蝇的培养——精选推荐

果蝇的培养1.把50或100ml的三⾓瓶(数⽬根据⾃⼰试验确定)洗⼲净,⼲燥。

(能够⾼温灭菌也好,似乎没那必要)2.配培养基。

培养基⽐例:蔗糖13g,琼脂1.5g,⽟⽶粉17g,⽔(单蒸⽔就可以)180 ml。

⼄酸2 ml(可少⼀点),酵母粉⾄少1.4g培养基配制步骤:(1)称取⽟⽶粉17g装⼊烧杯1(要⼤⼀些的烧杯,如500 ml),量取⽔90 ml。

先加少量⽔于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加⼊其余的⽔,搅拌均匀。

然后⼀边在电炉上加热,⼀边搅拌。

直到完全煮熟。

冒泡泡以后,⽕⼩点,免得溢出来。

冒泡泡以后还是要再煮好⼀会。

要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。

煮好了放在⼀边。

(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装⼊烧杯2,量取⽔90 ml。

加⼊⼤半⽔于烧杯中,⼀边加热⼀边搅拌。

完全煮溶。

(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒⼊烧杯1中,⽤步骤2剩余的⽔冲⼀冲烧杯,也倒⼊烧杯1中。

(如果烧杯1⼩,就装不到了。

)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。

(4) 待烧杯1稍凉。

这个时候把⼲燥好的三⾓瓶摆放旁边。

将⾄少1.4g酵母粉加⼊烧杯1搅匀,将培养基倒⼊三⾓瓶中(要⽤卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。

(按照敬⽼师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。

因为加⼊酵母粉后还搅拌,就更凉了。

倒⼊三⾓瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。

)(5)把倒好的培养基放到超净⼯作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的⽔分挥发。

有⽔残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。

(我⾃⼰的做法是配培养基的时候少加10ml的⽔,等待⼀天,没有完全⼲,但也可以⽤)由于果蝇是吃⾥⾯⽣长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母⽣长了就可以接种果蝇了。

(6)我⾃⼰收集果蝇的⽅法:放⼀点⽔果在矿泉⽔瓶⼦中,⾄少要四五天才会有很多果蝇。

这⼏天的时间就赶快去准备其他的东西。

抗酸染色(冷染法)标准操作规程

抗酸染色(冷染法)标准操作规程

抗酸染色(冷染法)标准操作规程01原理本试剂盒采用 WHO 推荐的 Ziehl-Neelsen 法分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。

但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色。

齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。

当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

02试剂石碳酸复红染液、酸性酒精溶液、亚甲蓝溶液03方法1. 涂片:参见各标本操作程序涂片,涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥,但勿靠近火焰2. 固定:常用高温进行固定。

即手持载玻片一端,标本面朝上,在灯的火焰外侧快速来回移动 3 ~ 4 次,共约 3 ~ 4 秒。

要求玻片温度不超过 60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜,放置待冷后染色3. 染色3.1 滴加石碳酸复红染液盖满玻片,染色 10 分钟或更久,无需加温3.2 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水3.3 滴加酸性酒精溶液盖满玻片,脱色 1 ~ 2 分钟,如有必要,需流水冲去溶液后,再次脱色至痰膜无可视红色为止3.4 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水3.5 滴加亚甲蓝溶液,染色 30 秒钟3.6 流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检3.7 一张染色合格的玻片,痰膜肉眼观察为亮蓝色,无红色斑04结果判定1. 干燥后油镜观察 300 个视野(观察时间不少于 4 min),抗酸性细菌呈红色,其它细菌或细胞呈蓝色2. 报告方式2.1 未找到抗酸杆菌2.2 找到抗酸杆菌±:可疑,发现抗酸杆菌 1 ~ 2 条 / 300 视野2.3 找到抗酸杆菌 1+:发现抗酸杆菌 3 ~ 9 条 / 100 视野2.4 找到抗酸杆菌 2+:发现抗酸杆菌 1 ~ 9 条 / 10 视野2.5 找到抗酸杆菌 3+: 发现抗酸杆菌 1 ~ 9 条 / 1 视野2.6 找到抗酸杆菌 4+:发现抗酸杆菌≥ 10 条 / 1 视野05质量控制每次用卡介苗做阳性对照大肠埃希菌 ATCC25922 做阴性对照06注意事项1. 每一玻片只能涂一份标本,以防脱落混淆;2. 脱色时间需根据涂片厚薄而定,厚片可适当延长,以无红色脱出为止;3. 冬季室温过低时,染色时间要适当延长;4. 有时同一个抗菌体上红色深浅也有不同,观察时应注意;5. 每次试剂用完后,请迅速盖好,以免挥发,储存时应避免高、低温及阳光照射;6. 在涂抹痰标本时,严禁对玻片加热;7. 染色时勿使玻片上的染液干燥。

抗酸染色操作

抗酸染色操作

抗酸染色操作程序【检验原理】抗酸染色可将细菌分为两大类,即抗酸性细菌和非抗酸性细菌,因日常大多数病原菌为非抗酸性细菌,所以抗酸染色不作为临床上常规的细菌检测项目,只针对结核病等具有抗酸性细菌标本的染色。

【主要组成成分】1.石碳酸复红溶液2.脱色剂(3%盐酸酒精溶液)3.复染液(吕氏美兰溶液)【样本要求】1.直接用于痰标本时,可以适当增加标本涂片的厚度,以提高检出率;2.直接用细菌染色,要注意防护,以防生物感染。

【检验方法】1.涂片经火焰固定,加1液徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾。

染5分钟(若染色奴卡氏菌需要更长时间),水洗。

2.加第2液不时摇动玻片至无红色脱落为止,水洗;3.加3液,染0.5-1分钟,水洗。

4.干后油镜镜检。

【结果判断】分支杆菌在暗背景中呈红色,背景为蓝色。

镜检结果分级报告抗酸杆菌阴性(-):连续观察300个不同视野,未发现抗酸杆菌抗酸杆菌阳性(报告抗酸杆菌菌数):1~8条/300视野抗酸杆菌阳性(1+):3~9条/100视野,连续观察300个视野抗酸杆菌阳性(2+):1~9条/10视野,连续观察100个视野抗酸杆菌阳性(3+):1~9条/每视野抗酸杆菌阳性(4+):≥10条/每视野【注意事项】1、严格掌握脱色时间,要脱色充分,脱色时间过短易使红色的石炭酸复红染料残留显红色而造成假阳性。

2、在染片过程中,加1液后一定要酒精灯徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾,这样才能使细菌充分着色。

3、石碳酸对皮肤、粘膜有强烈的刺激性和腐蚀性,使用时要注意安全,如果不慎沾到皮肤上,立即用水或酒精冲洗。

4、涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌的存在,不能区分是结核菌还是非结核分支杆菌。

改良苯酚品红染色液

改良苯酚品红染色液

北京雷根生物技术有限公司
改良苯酚品红染色液
简介:
改良苯酚品红染色液又称卡宝品红(Carbol fuchsin)染色液,该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。

生物学上常用卡宝品红作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

改良苯酚品红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定,采用改良配方,加入衬染剂,使染色效果更佳。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量改良石炭酸品红染色液,充分混合,立即盖片染色后,吸去多余液体,显微镜下观察。

2、动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴加醋酸洋红染色液染色,自来水冲洗,封片,显微镜下观察。

3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于醋酸洋红染色液, 自来水冲洗,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。

注意事项:
1、 染完色后,应立即显微镜下观察。

2、 由于本试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。

编号 名称 DZ0040 Storage 改良苯酚品红染色液 100ml 室温 避光 使用说明书 1份。

中性红染色液配制及使用方法

中性红染色液配制及使用方法

北京华越洋生物QQ:1733351176中性红染色液(0.33% 过滤除菌,活细胞染色)名称:中性红染色液(0.33%)英文名称:Neutral Red Staining Solution介绍: 中性红染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。

本染色液是用中性pH的等渗缓冲液配制,可直接用于活体细胞或组织的染色。

本染色液经过滤除菌,可以直接用于培养细胞的染色。

细胞核中的核酸呈酸性,因此细胞核会被染成红色。

由于溶酶体中也是酸性环境,因此溶酶体也可以被中性红染色液染成红色。

操作步骤:1. 样品处理去除细胞培养液,用PBS 、DPBS或Hanks 等适当缓冲洗涤一次。

2. 中性红染色去除洗涤液,加入适量的染色液,确保充分覆盖细胞,染色2-10 分钟( 可以根据染色结果和要求调整时间) 。

用PBS 、DPBS或Hanks等适当溶液洗涤1-2 次后即可进行观察和拍照。

注意事项:第一次使用本试剂时建议先取1-2 个样品做预实验。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

中性红染色液长期存放会产生沉淀。

可以直接吸取染色液的上清液使用,也可以使用过滤或离心的方法去除沉淀后继续使用,不会影响使用效果。

中性红的分子式为C15H17IN4,分子量为288.8,CAS Number为553-24-2。

保存条件:4℃避光保存,一年有效。

-20℃避光保存可以存放更长时间。

北京华越洋生物QQ:1733351176产地:国产提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。

关键词:中性红染色液(0.33%), 中性红中性红染色液(0.33%)相关染色产品:。

醋酸洋红染色液配制及使用方法

醋酸洋红染色液配制及使用方法

醋酸洋红染色液
英文名称:Acetocarmine
产品说明:醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。

在观察植物细胞有丝分裂时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

花粉检测中,可以采用醋酸洋红检测花粉是否处于单核期。

华越洋醋酸洋红染色液含高浓度乙酸和洋红,pH呈酸性,是很好的细胞核、线粒体染色剂。

操作说明:(仅供参考)
1、花粉类颗粒:取少量花粉物质置于载玻片,滴加适量醋酸洋红染色液,充分混合,立即盖片染色10~30min后,吸去多余液体,显微镜下观察。

2、动植物切片:常规处理(如脱蜡至水),滴加醋酸洋红染色液染色 5~
20min,自来水冲洗,封片,显微镜下观察。

3、部分新鲜植物组织(如洋葱表皮),直接浸染于醋酸洋红染色液 5~
20min,自来水冲洗 2~3min,置于载玻片并盖上盖玻片,显微镜观察。

注意事项:
1、染完色后,应立即显微镜下观察。

2、由于本试剂含有高浓度弱酸,有刺激性气味,请注意自我保护。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地:国产提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。

储存条件:避光常温保存,复检期为1年。

关键词:醋酸洋红染色液
醋酸洋红染色液相关染色产品:。

抗酸染色0.1之欧阳学创编

抗酸染色0.1之欧阳学创编
抗酸染色一般步骤
时间:2021.03.03
创作:欧阳学
1)初染
用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。
2)脱色
3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。
3)复染
用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
抗酸染色的染液配制
1、石炭酸复红
碱性复红酒精饱和溶液 10mL
5%石炭酸 90mL
2、3%盐酸酒精
浓盐 3mL
95%酒精 97mL
3、吕氏美兰液
美兰酒精饱和液 30mL
氢氧化钾(1:10000) 100mL抗酸染色的原理
分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
时间:2021.03.03
创作:欧阳学

病理学特殊染色-----细菌、霉菌和病毒

病理学特殊染色-----细菌、霉菌和病毒

细菌、霉菌和病毒细菌Gram碱性复红结晶紫法试剂配制:(1) 苯胺油石炭酸复红液:碱性品红0.5g,苯胺油1ml,石炭酸1g,30%酒精70ml。

碱性品红溶于70ml酒精中,隔水加热至90℃,冷却后加入石炭酸和苯胺油。

(2)碘液:碘片1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml(3)结晶紫染液:结晶紫 2g,95%酒精20ml,草酸胺1g,蒸馏水80ml。

结晶紫溶于酒精,,草酸胺溶于蒸馏水。

二液混合,此液置冰箱可保存数月。

操作方法:1、组织固定于10%甲醛液,按常规脱水包埋。

2、切片脱蜡至水。

3、苯胺油石炭酸复红液5分钟。

4、自来水冲洗,蒸馏水洗。

5、 4%甲醛1分钟,蒸馏水洗2次。

6、苦味酸饱和水溶液处理2分钟。

7、经过95%酒精速洗后,放入自来水中立即变红色。

8、自来水冲洗,蒸馏水洗。

9、碘液作用2分钟,自来水洗,用滤纸直接吸干。

10、二甲苯苯胺油等份混合,进行分化苯。

11、二甲苯透明、中性树胶封固。

结果:革兰氏阳性细菌呈蓝色,阴性细菌呈红色,细胞核呈红色。

抗酸杆菌苯酚碱性品红法:碱性品红酒精液:碱性品红 5克无水酒精 100毫升5%苯酚水溶液: 苯酚 5毫升(略加温,使其溶解) 蒸馏水 95毫升苯酚碱性品红液: 碱性品红酒精液 1毫升5%苯酚水溶液 9毫升染色步骤:1. 切片二甲苯脱蜡,95%酒精速洗2. 蒸馏水洗3. 苯酚碱性品红液染15~30分钟4. 蒸馏水洗5. 2 %硫酸水溶液分化至适当为止6. 水洗7. 烘干,透明,封固结果:抗酸杆菌(结核杆菌和麻风杆菌)呈红色。

真菌(一)高碘酸法复红法亮绿液:亮绿 0.2g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml Schiff试剂配制:碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g1. 碱性品红1g,放入200毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。

2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20毫升。

3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。

石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明

石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明

石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明
石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明
货号:G1160
规格:100ml/500ml
保存:室温密封保存,有效期12个月。

产品说明:
石炭酸复红染色液又称苯酚品红染色液。

该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。

生物学上也常用石炭酸复红染色液作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

染色体染色时用醋酸洋红染色液染色,虽然染色效果较好,但却存在着染色需时较长的问题。

石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定,主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。

使用步骤(仅供参考):
1.固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液(3份甲醇:1份冰乙酸)中固定2~24h,再分别在95%和85%乙醇中各30min,再转入70%酒精中,可4℃保存备用。

2.解离取固定好的植物组织,用蒸馏水漂洗2~3次,放入1N HCl 溶液中60℃水解8~12min,再用蒸馏水洗净。

3.染色将组织放在载玻片中央,用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。

滴加苯酚品红染液,染色8~15min后,盖上盖玻片。

4.压片在盖玻片上面铺上滤纸,固定好盖玻片,用拇指垂直压片,然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片,至肉眼见材料呈雾状即可,使细胞核染色体分散。

5.镜检观察显微镜下观察染色形态和计数,对典型分裂相细胞进行摄影记录。

注意事项:
1.组织4℃保存时间最好不超过二个月。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴手套操作。

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石炭酸复红染液(苯酚品红染液)使用说明
货号:G1160
规格:100ml/500ml
保存:室温密封保存,有效期12个月。

产品说明:
石炭酸复红染色液又称苯酚品红染色液。

该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比较常用的碱性染料,常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。

生物学上也常用石炭酸复红染色液作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

染色体染色时用醋酸洋红染色液染色,虽然染色效果较好,但却存在着染色需时较长的问题。

石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定,主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。

使用步骤(仅供参考):
1.固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液(3份甲醇:1份冰乙酸)中固定2~24h,再分别在95%和85%乙醇中各30min,再转入70%酒精中,可4℃保存备用。

2.解离取固定好的植物组织,用蒸馏水漂洗2~3次,放入1N HCl溶液中60℃水解8~12min,再用蒸馏水洗净。

3.染色将组织放在载玻片中央,用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。

滴加苯酚品红染液,染色8~15min后,盖上盖玻片。

4.压片在盖玻片上面铺上滤纸,固定好盖玻片,用拇指垂直压片,然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片,至肉眼见材料呈雾状即可,使细胞核染色体分散。

5.镜检观察显微镜下观察染色形态和计数,对典型分裂相细胞进行摄影记录。

注意事项:
1.组织4℃保存时间最好不超过二个月。

2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴手套操作。

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