透析用水采样
不同检测方法对透析用水细菌监测的应用效果评价
不同检测方法对透析用水细菌监测的应用效果评价摘要:目的：评价不同检测方法检测透析用水细菌的效果。
方法：遴选2021年11月份我院透析用水样本共计60份，检测方法分别应用①过滤法；②涂布法；③倾注法，分别采用普通琼脂（48h，36℃）及胰化蛋白胨葡萄糖培养基TGEA （168h，20℃）实施细菌培养，互比其细菌菌落数。
结果：无论在细菌检出率，亦是培养培养菌落计数中低温度长时间培养（20℃，168h）要远远优于高温度短时间培养（36℃，48h）（P＜0.05）。
结论：低温度长时间培养（20℃，168h）——TGEA过滤法更加适宜应用在透析用水质量的监测当中，其检测结果准确、便捷等优势，能够保障血液透析患者的治疗安全。
关键词：细菌培养；TGEA培养基；透析用水；血液透析；细菌菌落数血液透析是肾衰竭患者替代肾功能的方法，而血液透析用水的质量是血液透析的重中之重。
通常情况下，血液透析患者每周都会与透析用水（360L）直接或者间接接触，正常人饮水量仅是该数据的1/30，倘若透析用水中含有污染物（化学污染、内毒素、细菌等），都会通过透析膜进入患者体内，而透析中任何一个患者出现问题，都可能对患者的身体健康，甚至是生命带来威胁，并影响血液透析的质量。
此外，伴随着血液透析技术的广泛应用，医生越来越重视透析用水的质量。
基于此，本次研究将不同透析用水检测方法进行一一比较，旨在选择可行性的检验方法，保障血液透析效果及安全性。
方法如下。
1材料与方法1.1样本来源遴选2021年11月份我院透析用水样本共计60份，分别来源于水处理系统进水软管连接部位、透析机断开、回水口及出水口部位。
1.2材料①微生物检测试剂盒；②TGEA由天津施特雷商务科技股份有限公司提供；③无菌过滤膜（0.45µm）；④抛弃型无菌过滤杯（Microsart®@filter）；⑤微生物限度三联不锈钢过滤器（Combisart®）德国赛多利斯公司提供；⑥普通营养琼脂培养基由北京路桥提供；⑦菌落计数仪器由西班牙IUT公司提供；⑧生化培养箱（LRH250A）。
血液透析水处理系统、透析用水、透析液质控要求(2014修订版)
市 4.5. 透析用水输送环路与透析机连接处。
海
上
8
附录四
血液透析用水和透析液细菌培养要求
1. 培养基：应使用胰蛋白胨葡萄糖浸膏琼脂（tryptone glucose extract
agar , TGEA）培养基、Reasoners 2 琼脂（R2A）培养基，或其它
心 等效培养基。不应使用血琼脂培养基和巧克力琼脂培养基。
制 化学物 控 钠 质量 银
最大允许量 70 0.005
游离氯
0.50
析砷
0.005
铜
0.10
透钡
0.10
氟化物
液 0.20
硒
0.09
铅
血0.005
镉
0.001
硝酸盐
市2.00
铬
0.014
海 硫酸盐
100
汞
0.0002
上 锌
0.10
锡
0.1
钙
2
锑
0.006
镁
4
铍
0.0004
钾
8
铊
0.002
4
4. 透析液质量要求
量 毒素含量高达该水平时，应采取纠正措施（如消毒水处理系统），
防止污染进一步加重。
质
析
透 2. 水处理系统质量要求
液 2.1. 水处理系统设备
血 2.1.1. 水处理室应采取适当措施以保证水处理系统有足够的进水供水
市 压力，确保水处理系统正常运行。
海 2.1.2. 血液透析水处理系统应包括下列主要设备：沉淀物过滤器、活 上性碳吸附、软化、单级或多级反渗透机、去离子等。
中 2. 接种方法：采集标本应立即接种；标本若不能立即接种，则 4℃
透析用水的取样点
透析用水的取样点
透析用水的取样点通常包括以下几个方面：
1. 进水点：即供应透析用水的进水处，一般为经过净化系统后的自来水进水口或特定的水处理设备进水口。
在此处进行水质取样，可以了解供水质量的基本情况。
2. 净化设备前：透析用水在进入透析机之前会通过一系列的净化设备，如反渗透装置、离子交换树脂等。
在这些设备前取样，可以检测净化效果，确保水质符合透析要求。
3. 透析机后：透析机使用透析用水进行透析过程，水会流经透析机后排出。
在透析机出水处进行取样，可以确定透析过程中水质是否符合要求。
4. 水质监测点：可以在透析室内设置水质监测点，监测透析用水的质量。
这些监测点一般位于透析机的进水、出水口、循环管道等位置，以及水箱、水泵等设备。
取样时应使用无菌的容器，并按照适当的方法进行取样，以确保样品的准确性和代表性。
取样后，样品应送至相关实验室进行水质分析，以确保透析用水的质量符合相关标准和要求。
透析用水采样流程及注意事项
透析用水采样流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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透析用水及透析液采样监测不合格处置措施操作规程
透析用水及透析液采样监测不合格
干预措施操作规程
一、透析用水（反渗水）采样监测不合格：
（一）透析用水（反渗水）采样监测不合格通常有三方面的主要原因：
1.反渗机故障。
2.输水主管路形成生物膜。
3.血液透析机输水软管形成生物膜。
根据反渗水超标三方面的原因，以及超标反渗水采样点的不同，大致可以做出如下推测。
（二）采取干预措施：
1.不同原因导致的血液透析机透析用水（反渗水）细菌数超标有不同的干预措施。
2.如果是反渗机故障，应该请水机工程师对水处理机进行检修和维护。
3.如果是反渗机反渗膜形成的生物膜污染所致，应该对反渗膜进行消毒处理或更换反渗膜。
4.如果是反渗机输水主管路形成生物膜，则应对输水主管道进行彻底的消毒处理。
5.如果是血液透析机软管形成生物膜，则应对输水软管进行消毒处理或更换输水软管。
6.反渗机反渗膜、反渗水输水主管路和透析机软管形成生物模后的消毒，可以采用复方过氧乙酸制剂来进行，以彻底清除生物膜，杀灭反渗水中的游离细菌。
二、透析液采样监测不合格：
（一）透析液采样监测结果不合格时，应综合透析用水监测的结果、浓缩A液、B液的监测结果、以及配置容器的消毒灭菌效果进行分析。
（二）根据不同的采样监测结果，采取相应的干预措施。
血透中心透析用水采样方法的研究与探讨
血透中心透析用水采样方法的研究与探讨摘要】目的：针对2015年11月—2016年1月透析用水细菌超标原因分析与探讨，提出整改措施。
方法：对原有的采样方法进行改进。
结果：改进后的3个月透析用水细菌超标率明显下降，从干预前的71%到干预后的96%【关键词】透析用水；细菌超标；采样方法【中图分类号】R459.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）10-0244-02近年随着透析水平的逐渐提高，各大透析中心对水质的监测越来越重视，对水处理设备的要求越来越高。
研究显示细菌及内毒素超标与透析病人的急性并发症相关。
另外慢性暴露于低浓度的内毒素可能与血液透析治疗的长期并发症有关[1]。
合格的透析液是高质量透析治疗的保证[2]。
其中水处理系统就显得尤为重要，细菌和内毒素超标，不仅对病人造成极大的伤害，对医务人员同样也造成很大的心理压力。
一旦透析用水细菌超标应引起高度重视，积极查找原因，制定整改措施及应急预案。
我院通过对2015年11月到2016年1月和2016年3月至2016年6月近半年时间对透析用水细菌超标进行研究和干预后发现，工作人员的采样方法不当造成的假阳性很高。
现总结如下。
1.资料和方法1.1 一般资料水处理机器一套。
自来水经过滤、软化、活性碳吸附及反渗透处理形成透析用水。
水处理区面积按SOP要求为水处理机占地面积的1.5倍以上，地面承重符合设备要求。
采样人员为血透室专业人员，工作3年以上。
细菌培养方法：将采样管在混运器上振荡60s，用无菌吸管吸取0.5ml待检反渗谁接种于灭菌平皿，每一个样本接种2个平皿，加入已熔化的45～48度的营养琼脂15ml～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置36±38度温箱培养48h，计算平均菌落数。
细菌总数计算方法：细菌总数（cfu/ml）=2个平皿平均菌落数×2。
（说明：本课题未检测细菌种类）1.2 采样方法1.2.1干预前标本采样方法首先确定采样点，取反渗水初始端、出储水箱，水处理机器进入血液透析机器末端和回水末端、入储水箱5个点采样。
透析液和透析用水质量监测制度
透析液和透析用水质量监测制度
一、定人、定期做好水处理设备的维护与保养，并记录每次维护和保养的内容。
每季度消毒一次，并监测消毒液残余量。
二、做好透析用水水质和透析液的监控。
1、电导率正常值约10us/cm。
2、纯水的pH值应维持在5～7的正常范围。
3、每月对透析液及透析用水进行细菌培养，透析用水中的细菌总数不超过100cfu/ml，干预水平应建立在系统微生物动力学知识之上，干预最大允许水平为50%；每季度检查透析用水中的内毒素1次，内毒素含量应不超过0.25EU/ml，建立干预水平，通常是最大允许水平50%。
每年检测化学污染物1次。
采样部位为反渗水输水管路的末端。
每台透析机每年至少检测1次。
4、化学污染物情况至少每年测定1次。
三、购买的浓缩透析液和透析粉剂要有国家药品监督管理局颁发的注册证。
血液透析室环境卫生学、透析用水、透析液监测制度
血液透析室环境卫生学、透析用水、透析液监测制度
一、每月对血透室透析用水、透析液进行细菌学监测，结果合格，有记录。
透析用水及标准透析液细菌数VIOocfu∕mlo
二、每季度对血透室透析用水、透析液细菌内毒素进行检测，结果合格，有记录。
透析用水内毒素含量VO.25EU∕ml,透析液内毒素VO.5EU/ml o
三、软水硬度及游离氯检测至少每周进行一次，透析用水必须符合中华人民共和国药业标准《血液透析和相关治疗用水》(YYO572—2015)的要求。
软水硬度VI7.Ippm,游离总氯VO.Img/L。
四、每月对血透室进行一次环境卫生学监测，包括空气、物品、物体表面及医护人员手监测，结果合格，有记录。
五、当疑有透析液污染或有严重感染病例时，应增加采样点，如原水口、软化水出口、反渗水出口、透析液配液口等，并及时进行检测。
六、每年对透析用水的化学污染物测定一次，当检查结果超过规定标准值时、必须再复查并进行相应的处理。
血液透析用水及透析液标准
血液透析用水及透析液标准一、透析用水的标准:目前参照美国AAMI的透析用水标准。
二、定期评估透析用水:每月至少测定一次细菌数量和/或内毒素含量;定期测定无机物和有机物的含量。
上述工作应由专人负责,定期记录。
新安装的水处理系统或怀疑水处理系统有问题时应提高检测频度,如确定水处理设备存在问题而不能及时纠正时应停止使用。
三、水处理系统的保养和维护:(一)消毒:活性炭吸附之前的前级处理消毒可采用加氯的方法,溶度以0.3mg/L为宜。
反渗膜及管道的消毒应严格根据生产厂商的要求进行,常用甲醛和过氧乙酸消毒,一般每月1次,夏季15-20天1次。
内置于透析机内的滤器在每次透析结束后与透析机同时消毒。
(二)滤罐和树脂的维护:为防治止细菌繁殖和杂质阻塞,滤器(砂滤,碳滤)和树脂应定期反冲。
砂滤可每日或隔日反冲,每次15-30分钟,依水质优劣和用水量大小而定;活性碳无法通过冲洗再生(冲洗只能清除其中生长的细菌),一般每月冲洗1次即可,但如每毫升菌落计数超过200个则应增加冲洗次数。
检测活性碳吸附效果的主要方法是测定水中的含氯量,如净化水中含氯量超标(氯>0.5mg/l),必须立即更换活性炭;软化罐中的离子交换树脂应每日再生,再生盐罐定期加盐,使盐液始终处于饱和状态,血液透析停止一周后,应充分冲洗,冲洗水应丢弃,停止使用6个月后更换其他的树脂。
(三)生物膜的预防和去除:生物膜的形成常见于储水箱水处理设备和透析机管路的缝隙及拐角处。
由于生物膜一旦形成后极难去除,故重在预防。
应尽量避免在水处理内出现下列情况:水流停滞,管路死腔或盲端,器材表面不平,形成锐角弯曲等。
去垢剂可能对去除生物膜有效,也可试用次氯酸,氢氧化钠,过氧乙酸等。
四、透析液:透析液必须由浓缩液加反渗水配制。
购买的浓缩透析液和透析粉剂必须有国家药品监督管理局颁发的注册证。
浓缩液可以从厂家直接购买、或由具备浓缩液制备资格的医院制剂室配制(必须有制剂许可证和透析液批准文号,只限于医院内部使用)。
透析液及透析用水监测SOP
透析液及透析用水监测SOP文件编号：持有部门：医院感染管理科医务部护理部血透室微生物室修订时间：年月执行日期：年月日具体内容：一、透析用水、透析液等进行细菌学监测和内毒素检测1．受检材料：透析用水:普通自来水经过滤、软化、活性碳吸附及反渗处理形成反渗水（透析用水）;透析液浓缩溶液:A 液含氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁及葡萄糖等成分;B 液主要是碳酸氢钠;透析用水和透析液浓缩液按一定的比例混合即成透析液。
透析用水是用自来水作水源，经过反渗透装置产生反渗水(透析用水)，透析液由(A液+B液)与透析用水按1：3 4比例混合制成，A液主要是含各种电解质的高渗液，B液主要是碳酸氢钠溶液。
2．检测方法1：用无菌吸管分别吸取上述样品各1 m1到90mm无菌平皿中，加入已熔化的察45℃一48℃营养琼脂1 5ml一1 8ml，边倾注边摇匀待琼脂凝固放于3 5℃培养箱内48小时后计数，并鉴定致病菌。
检测方法2：采样用无菌注射器抽取1 ml 样品，加入无菌试管,吸取0. 2 ml 标本加入血琼脂平皿中均匀涂布,置36 ℃孵育箱培养48 h ,鉴定细菌及计算每毫升标本中的细菌菌落数(CFU/ ml) 。
计算公式为CFU/ ml = 平皿上的细菌菌落数×5 。
3．评价标准：透析用水细菌数<2 0 0 c fu／m1，透析液细菌数<2 000 c fu／ml，不得检出致病菌，A液和B液应无菌生长。
4．内毒素检测：使用动态凝胶法内毒素快速检测试剂盒Pyrosate检测。
具体方法根据各个公司产品使用说明。
二、可复用血液透析器使用前检测1.外观检查：标签字迹清楚；血液透析器无结构损坏和堵塞；血液透析器端口封闭良好、充满消毒液（由血液透析器颜色、用试纸或化学试剂确认该血液透析器已经过有效浓度消毒液的消毒和处理）、无泄漏；存储时间在规定期限内；血液透析器外观正常。
2.核对患者资料：确保血液透析器上的姓名和患者记录中身份信息一致，血液透析器上的标签和患者的治疗记录也应确保无误。
透析液和透析用水质量监测制度
透析液和透析用水质量监测制度
一、透析液质量监测
1、离子浓度测定
2、细菌测定
3、内毒素测定
二、透析用水质量监测
1、电导率正常值约为10μs/cm
2、软水硬度检测至少每周一次，要求<17ppm
3、酸碱度（PH值）正常范围应维持在5～7
4、游离氯检测至少每周一次，要求<0.5mg/l
5、残留消毒液检测至少每周进行一次
6、细菌培养应每月一次，要求细菌数<200cfu/ml，采样部
位为反渗水输水管路的末端；透析机每台透析机每年至少检测一次
7、内毒素检测至少每三个月一次，要求内毒素<2eu/ml，
采样部位为反渗水输水管路的末端；透析机每台透析机每年至少检测一次
8、化学污染物情况至少每年测定一次
9、微量元素至少每年测定一次。
血液透析用水要求
2
二.水处理系统 及管路进维护及 消毒 ：
3
三.新标准对化 学污染的最大允 许量要求：
4
四、新标准对微 生物与内毒素含 量的要求： （2）透析用水及透析液中的内 规定至少每三个月检查一次，每年至少一次覆盖血透室所有透析机器，内 毒素含量不超过0.25EU/mL，干预水平是最大允许水平的50%。 毒素含量：
根据《血液透析及相关治疗用水》（YY 0572-2015）（强制性行业标准）修订：
1 一.取样要求： 透析用水的化学污染物检测应在进入透析器再处理设备的入口处进行。 微生物检测应在透析装置和供水回路的连接处收集试样，取样点为供水回路的末端或在混合室的入口处。 试样应在收集后4小时内进行检测。 如果是无储水箱直供式循环系统须采两个点：反渗水出口前端和反渗水回口末端。 如果有储水箱的循环系统在上述2点外再加一个采样点：水箱出口处。 ①每一台水处理设备独立的工作档案，记录水处理设备的运行状态，包括设备使用的工作电压、水质电导 度（电导率正常值约10μ s/cm）和各工作点的压力范围、加盐量等。 ②每半年对水处理系统进行技术参数校对并记录。 ③每45天或根据厂家要求对水处理系统及管路进行消毒并记录。 ④每天对水处理设备进行维护与保养并记录（包括冲洗、还原和消毒）及每次消毒后测定消毒剂残余浓度 并记录。 ⑤如有储水箱则每周至少清洗消毒一次并记录。 ⑥水处理设备的注册证、生产许可证等相关证件。 ◇石英砂过滤器根据用水量每周反洗1～2 次。一般每年更换1 次。 ⑦水处理设备的滤砂、活性炭 ◇活性炭过滤器反洗的周期为1～2次/周，建议每年更换1 次。 、阴阳离子树脂、反渗膜等按 ◇树脂软化器阳离子交换树脂一般每1～2 年更换1 次。 生产厂家要求或根据水质情况 ◇再生装置其再生周期为每2 天再生1 次。 进行更换的记录（更换时间如 ◇精密过滤器过滤精度为5～10μ m，一般2 个月更换1 次。 下： ◇反渗透膜每2～3 年更换1 次）。 铝 0.01 总氯 0.1 铜 0.1 0.2 （1）透析用水中有毒化学物的 氟化物 最大允许量（mg/L)： 铅 0.005 盐酸盐（氮） 2 硫酸盐 100 锌 0.1 钙 2(0.05 ) 4（0.15） （2）透析溶液中的电解质最大 镁 允许量mg/L（mmol/L）： 钾 8（0.2） 钠 70（3.0） 锑 0.006 砷 0.005 钡 0.1 铍 0.0004 0.001 （3）透析用水中微量元素的最 镉 大允许量（mg/L)： 铬 0.001 汞 0.0002 硒 0.09 银 0.005 铊 0.002 （1）透析用水及透析液中的细 规定每月检查一次，细菌总量不超过100CFU/mL，干预水平是最大允许水平 的50%。 菌总量：
血液净化室透析液、透析用水质量监测制度
血液净化室透析液、透析用水质量监测制度Ⅰ 目的严格透析液、透析用水水质监测，加强质控，减少并发症，提高生活质量和延长存活期。
Ⅰ 范围血液净化室工作人员。
Ⅰ 制度一、定人、定期做好水处理设备的维护与保养，并记录好每次维护和保养的内容。
每季度化学消毒一次，并监测消毒液残余量。
二、做好透析用水水质和透析液的监控：（一）电导率正常值约10us/cm；（二）纯水的PH值应维持在5-7的正常范围；（三）透析用水的细菌培养应每月1次，要求细菌数≤100cfu/ml，采样点位于一、二级反渗机采样口；透析液的细菌监测每台透析机每年至少检测一次，要求细菌数≤100cfu/m，采样点位于透析器膜外透析液入口端。
如怀疑有污染或者有感染病例时，应增加采样点，及时监测。
（四）透析用水的内毒素监测至少每3个月1次，要求内毒素＜0.25Eu/ml，采样部位同上；（五）透析液的内毒素监测每台透析机每年至少检测1次，要求内毒素＜0.5Eu/ml，采样点同上。
（六）如怀疑有污染或有感染病例时，应增加采样点，及时监测。
（七）每周对水处理设备进行硬度、余氯、PH值测试，保证透析用水质量。
（八）每年进行一次透析用水化学污染物监测，各项指标必须符合《透析和相关治疗用水》（YY0572-2015）要求。
（九）每周对水处理设备及供水管道进行一次热消毒；每三个月对水处理机设备进行一次化学消毒。
Ⅰ 参考依据1.《血液净化标准操作规程（2020版）（征求意见稿）》2.《医疗机构血液透析室管理规范》（卫医政发〔2010〕35号）3.《医院感染预防与控制评价规范》（WS/T 592-2018）。
2018年透析液、透析用水内毒素采样计划
2018年透析液、透析用水内毒素采样计划
第一季度：1：水处理（输出端、末端）透析用水内毒素
2: 透析液内毒素（机型）：1号、2号、3号、4号、6号、7号、8号机、22号机置换液
第二季度：1：水处理（输出端、末端）透析用水内毒素
2: 内毒素（机型）：9号、10号、11号、12号、
14号、15号、13号机、23号机置换液
第三季度：1：水处理（输出端、末端）透析用水内毒素
2: 内毒素（机型）：16号、17号、18号、19
号、20号、21号机、24号机置换液
第四季度: 1：水处理（输出端、末端）透析用水内毒素
2：透析液内毒素（机型）：22号、23号、24号、
25号、26号、27号、28号、22号机置换液
备注：1、透析用水采样部位在反渗水输水管道末端
2、透析液采样部位在透析液入口端，取2ml透析液。
透析用水采样
透析液及透析用水采样操作规程
检测内容：细菌和内毒素
检测频率：每月一次，若超标，查找原因，增加测定频次，直到达标
一．透析用水采样
1.检测员衣帽整齐，洗手戴口罩。
2.备齐用物:贴标签的内毒素试管和细菌培养试管、酒精灯、酒精、
消毒棉签、一次性注射器等
3.采样口冲洗1分钟，若消毒使用酒精,待干燥后采样，不应使用含
氯消毒剂或其他消毒剂
4.抽吸1ml透析用水按无菌操作原则注入细菌培养试管
5.抽吸5ml透析用水按无菌操作原则注入内毒素试管
6.及时送检，避免放置过久影响检测结果。
二．透析液采样
1.检测员衣帽整齐，洗手戴口罩。
2.备齐用物:贴标签的内毒素试管和细菌培养试管、酒精灯、酒精、消毒棉签、一次性注射器等
3。
透析液在线生成后，酒精消毒采样口，待干燥后采样。
4。
无菌注射器抽吸1ml透析液按无菌操作原则注入细菌培养试管5.无菌注射器抽吸5ml透析液按无菌操作原则注入内毒素试管
6。
及时送检,避免放置过久影响检测结果。
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创作编号：
GB8878185555334563BT9125XW
创作者：凤呜大王*
透析液及透析用水采样操作规程
检测内容：细菌和内毒素
检测频率：每月一次，若超标，查找原因，增加测定频次，直到达标
一．透析用水采样
1.检测员衣帽整齐，洗手戴口罩。
2.备齐用物：贴标签的内毒素试管和细菌培养试管、酒精灯、
酒精、消毒棉签、一次性注射器等
3.采样口冲洗1分钟，若消毒使用酒精，待干燥后采样，不应
使用含氯消毒剂或其他消毒剂
4.抽吸1ml透析用水按无菌操作原则注入细菌培养试管
5.抽吸5ml透析用水按无菌操作原则注入内毒素试管
6.及时送检，避免放置过久影响检测结果。
二．透析液采样
1.检测员衣帽整齐，洗手戴口罩。
2.备齐用物：贴标签的内毒素试管和细菌培养试管、酒精灯、
酒精、消毒棉签、一次性注射器等
3.透析液在线生成后，酒精消毒采样口，待干燥后采样。
4.无菌注射器抽吸1ml透析液按无菌操作原则注入细菌培养试管
5.无菌注射器抽吸5ml透析液按无菌操作原则注入内毒素试管
6.及时送检，避免放置过久影响检测结果。
创作编号：
GB8878185555334563BT9125XW
创作者：凤呜大王*。