血液成分制备及保存
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各种晶体盐红细胞保存液:
枸橼酸 保存液 钠 2H2O
枸橼酸 H2O
葡萄糖 磷酸二 无水 (g/L) — — — — 0.275 0.550
比率
氢钠 H2O 腺嘌呤 保养液 ml:血 ml
(g/L) (g/L) (g/L) (g/L) ACD-A ACD-B CPD CP2D CPDA-1 CPDA-2 22.0 13.2 26.3 26.3 26.3 26.3 8.0 4.8 3.27 3.27 3.27 3.27 24.5 14.7 25.5 51.1 31.8 44.6 — — 2.22 2.22 2.22 2.22
(五)冰冻解冻去甘油红细胞 1.概述:红细胞代谢速度取决于保存温度,把保存温度降至 红细胞代谢率几乎停止,以达到延长红细胞保存期的目的。 在冰冻过程中,为防止血液结冰,破坏细胞内结构,可加 入防冻剂。 细胞内防冻剂:甘油、二甲基亚砜 细胞外防冻剂:羟乙基淀粉
红细胞低温甘油保护剂 甘油(g/v)79.2%、葡萄糖(g/v) 8.0%、果糖(g/v)1.0%、EDTA·2Na(g/v)0.3%,用注 射用生理盐水配成40%甘油应用液。
(二)浓缩红细胞
1.制备:用离心方法将采集到二联袋内的全血分离出部分血浆制备而成的红 细胞成分血。 2、质量标准 (1).含有全血中全部的红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆。 (2).红细胞比容为0.65~0.80。 (3).1U红细胞容量为120ml±10%。 (4).血红蛋白不低于45g/单位。 (5).200ml全血分离出的红细胞为1U的浓缩红细 胞。 3.保存和运输 浓缩红细胞保存在2-6℃。含ACD-B、CPD保养液的浓缩红细胞保 存期为21天,含CPDA-1保养液的保存期为35天。运输温度2-10℃。
保养液的种 类 红细胞保存 期限(d)
ACD-A/B 21
CPD 21
CPDA-1 35
MAP 35
SAGM 35
AS-1、 AS-2、 AS-3 42
保养液、添加液都是为保存红细胞而设计的, 保存温度2-6℃也是根据红细胞而定,而血小板、 白细胞、凝血因子的最佳保存条件都与红细胞不 同
2.制备方法:多联袋制备血液成分为国内外推荐使用方法。
3.特点
①手工洗涤去除80%一90%的白细胞和98%以上的血浆蛋白; 机器洗涤白细胞减至5×108/L以下,几乎不含任何血浆蛋白。 ②该制品不仅可低白细胞引起的NHFTR反应,也可以减少或避免 血浆蛋白所致的过敏反应。 ③适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输 血的患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者。 ④洗涤后的红细胞均应在24小时内输用。
二、成分输血的优点
1.一血多用,节省血源,一人献血,多人受益 2.制品的浓度和纯度高,疗效好 3.最大限度地降低输血不良反应及疾病的传播 4.便于保存和运输,使用方便
三、血液成分制备方法
利用离心、过滤等物理的方法来分离血液成分,最常用的 是利用各种血液成分相对密度、体积等因素的不同,通过密度梯 度离心法,离心分层而得到浓度、纯度较高的单一成分。
(四)洗涤红细胞 1.概述:洗涤红细胞是采用物理方式在无菌条件下将保存期内全血、 浓缩红细胞、悬浮红细胞等制品用大量静脉注射用生理盐水洗涤, 去除血浆和大部分白细胞,并将红细胞悬浮在生理盐水中制成的 红细胞成分。
2.制备方法
(1).从冰箱中取出浓缩红细胞或悬浮红细胞,在室温放置30~60分钟。 (2).将四联盐水袋主袋上的针头插入红细胞袋的进针座内,把主袋内200ml盐 水徐徐流入红细胞袋内,边加盐水边混合,混匀后再倒流回主袋内,将中间塑 料管用小夹子夹住。 (3).5个袋装于两个离心桶中,平衡好后,离心桶对称放入离心机内,以 4500r/min离心3分钟。 (4).离心后将主袋轻轻取出,悬挂于支架上,把上清及白膜层分入曾经盛有红 细胞的袋内,然后热合并切断相连的管路,弃掉废液袋。 (5).重复2~4步骤,依次洗涤红细胞3次,用最后一袋盐水定量加入洗涤后的 红细胞内,调节体积。 (6).在调节好体积的第三袋中相连的塑料管内充满红细胞,分段热合留样本, 以供临床鉴定血型和交叉配型用。
血液采集注意事项
(1)无菌操作,有效消毒,避免污染和感染 (2)无凝块、无溶血、无乳糜,采血量符合标准 (3)采血速度:200ml采集时间小于3min,400ml采集时间小 于6min (4)采集过程中出现血流不畅,则不应用于制备浓缩血小板。
血液细胞成分的制备
一、制备原理 利用各种血液细胞比重、体积等因素的不同,通过 离 心分层而得到浓度较高的单一成分。 血液中各成分比重(g/ml) 血浆 血小板 淋巴细胞 粒细胞 红细胞 (1.025-1.030) (1.030-1.060) (1.050-1.078) (1.080-1.095) (1.090-1.111)
3.添加液
1.血浆
2.白膜层
②
滤器过滤法:由于医用高分子工业的发展,促进了输血器 材的改革。各种不同功能的滤器相继问世。目前常用的为第三代 滤器,具有较高的减除白细胞效果,一般可使白细胞降低至 1.0×106/L~1.0×105/L。避免NHFTR及HLA同种免疫的发 生,是最为有效的方法。
3、质量标准
1.5:10 2.5:10 1.4:10 1.4:10 1.4:10 1.4:10
红细胞添加液(additive solution) (mg/100ml)
AS-1(Adsol®) AS-3(Nutriel®) AS-5 (Optisol®) 葡萄糖 腺嘌呤 磷酸二氢钠 甘露醇 氯化钠 枸橼酸钠 枸橼酸 2200 27 0 750 900 0 0 1100 30 276 0 410 588 42 900 30 0 525 877 0 0
血液成分制备及其保存
国际输血协会曾经指出:“20世纪70年代是输血史 上发生重大变革的10年,其中最大成就是成分输血代 替全血输血。” 成分输血是输血技术发展的总趋势,也是输血现代 化的重要标志之一。
成分输血概述
一、成分输血的概念(blood component therapy) 是用物理的或化学的方法把全血分离 制备成各种较浓和较纯的制品,根据不同 病液)
全血 添加液
空转移袋
添加液
保存液
3、注意事项 (1).制备前应检查全血采血时间及血袋热合部位是否 漏血,各种标签是否齐全等。 (2).用分离支架或分浆夹将血浆分入空的转移袋时, 不能有红细胞混入。 (3).悬浮红细胞肉眼观察应无黄疸、气泡、重度乳糜。 (4).悬浮红细胞所贴标签的条码、血型、献血者、采 血者、采血时间应与原采血袋一致。
3、质量标准 (1).红细胞回收率≥80%。 (2).红细胞存活率≥70%。 (3).上清液中血红蛋白量≤1g/L。 (4).白细胞、血小板残留量≤1%。 (5).甘油残余量≤10g/L。 (6).体外溶血试验≤50%。 (7).冰冻红细胞容量200ml±10%或400ml±10%。
4.特点:冰冻解冻去甘油红细胞可以长期保存,一般 保存期为10年。常用于自身输血和稀有血型红细 胞的保存。 5.保存和运输:①40%甘油的冰冻红细胞贮存在- 65 ℃以下,20%甘油的冰冻红细胞贮存在-120 ℃以下。②解冻后红细胞贮存在2-6 ℃,保存期 24h。③在冰冻状态下运输。
二、红细胞制品
红细胞制品的种类: 悬浮红细胞 浓缩红细胞 悬浮少白细胞的红细胞 浓缩少白细胞的红细胞 洗涤红细胞 冷冻解冻去甘油红细胞 辐照红细胞
(一)悬浮红细胞
1.概述: 悬浮红细胞是目前国内外应用最广泛的一种红细胞 制品。悬浮红细胞是用离心的方法分出全血中大部分 (90%)血浆后,加入各种晶体盐红细胞保存液。
手工制备
血细胞分离机制备
四、血液成分保存的原则
使各种血液成分在体外储存过程中看,保持 其最佳生理状态。在保存期内,输入受者体内后, 可在循环中存活并维持其正常的生理功能,以达 到有效的治疗目的。
血液成分是在全血采集后6-8h内制备的,全血 暂时存放的最好条件是2h内被冷却到20-24℃,如 果无此条件,可存放在2-6℃,不应在过冷或过热的 外环境久放,如需从中分离血小板,则应保证采血 后2h内冷却到20-24℃,并在此条件下运输.
2.制备方法 ①离心法(去白膜法):是一种依据红细胞与白细胞比重 不同,简单、经济易于操作的制备少白细胞的方法。能 减除原全血中85%的白细胞,降低发热反应率。 将采集的全血进行强离心,将血浆分入第2袋,将含有 一定量血浆及白膜层分入第3袋;再将第4袋的红细胞 添加液加入首袋与红细胞混合即为少白细胞的红细胞。
①.用三联袋(含有保存液的主袋、添加液的末袋和次空的转移袋)的主 袋采集200ml或400ml全血。 ② .将8小时以内的全血,用(4±2)℃低温离心机离心,离心力为 5000×g,离心7分钟,沉淀红细胞。 ③.轻轻取出离心后的血袋悬挂于分离支架上或分离夹内,将上层不含 血细胞的血浆分入空的转移袋内。 ④.把三联袋末袋中的添加液加入主袋浓缩红细胞内,使红细胞与添加 液充分混匀。 ⑤.用高频热合机切断塑料袋间的连接管,制成悬浮红细胞。 ⑥.贴上标签,放入血库专用冰箱保存。
手工法:(1)白细胞计数<1.2×109 /U。 (2)血细胞比容为0.65~0.75。 (3)1U容量应为200ml±10%。 (4)血红蛋白不低于43g/U。 (5)200ml全血分离出的红细胞为1U的少白细胞红细胞。 过滤法:(1)白细胞去除率高,达到99%以上,即白细胞残留量 小于5×106/U。 (2)减少有效细胞的损失,其回收率红细胞>90%,血 小板≥85%。 (3)去除白细胞过程中,有效细胞不受到损伤和不丧失其生 理活性。
(三)少白细胞的红细胞 1.概述:大多数患者因受血或受孕,体内产生白细胞抗 体,这些抗体大部分属于人类白细胞抗原系统的同种 抗体,当再度输入含有白细胞的全血或其他血液成分 时,有可能产生免疫性发热输血反应。减除血液制品 中的白细胞是安全输血的一种措施。少白细胞的红细 胞有少白细胞浓缩红细胞和少白细胞悬浮红细胞。
4、质量标准 (1).红细胞回收率≥70%。 (2).白细胞清除率≥80%。 (3).血浆蛋白清除率≥90%。 (4).1U容量125ml±10%。 (5).最后上清液血红蛋白<0.5g/U。 (6).血细胞比容为0.65~0.70。
5.保存和运输
国内规定在2~6℃保存,自制备时起,在24小 时内输注为好,运输时温度应在 2 ~ 10℃。总之, 从安全和疗效的角度,洗涤红细胞在洗涤后应尽 快输注。
4、 质量标准
(1).含有全血中全部的红细胞、一定量白细 胞、血小板和少量血浆。 (2).血细胞比容为0.50~0.65。 (3).容量应为200ml±10%或400ml±10%。 (4).血红蛋白不低于45g/单位。 (5).200ml全血分离出的红细胞为1单位 (unit,U)悬浮红细胞。
5、保存和运输 悬浮红细胞应保存在2℃~6℃。红细胞添加液为MAP、 SAGM、CPDA-1的保存期为35天;AS-1、AS-3、AS-5的保 存期为42天;红细胞添加液为生理盐水的保存期为24小时。运 输的温度为2~10℃,最长运输时间不得超过24小时。
2.制备 【操作步骤】 (1).冻存 将红细胞转移至医用聚乙烯血袋内,然后在30分钟内缓慢 加入40%甘油保护剂,振荡混匀,室温30分钟后,直接置-80℃冰 箱冷冻保存。 (2).解冻 冰冻红细胞取出立即放入37℃恒温水浴箱,在10分钟内 融化,离心去上清甘油。 (3).洗涤 分别用9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液洗涤第1次, 再用0.9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液分别洗涤第2次,最后 用0.9%氯化钠溶液洗涤第3次。洗涤完成后2U红细胞灌注100ml 生理盐水。由于冰冻红细胞在融化后,红细胞处于高渗状态,所以 必须先加入9%氯化钠溶液,使红细胞膜内外的渗透压达到平衡, 再分两次加入0.9%氯化钠溶液,使红细胞膜内的渗透压由高渗呈 梯度逐渐过渡到等渗。