猪病诊断试剂一览表

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弓形体和猪瘟、猪链球菌病、猪附红细胞体病鉴别诊断

当发生ｅＲＲＳ时。规的处理程序常是全面隔离消毒和紧急预防注射。此
达９％以上。边传周等于国内首先建８立了检测猪ＰＶｇ抗体胶体金免疫ＲＥ
层析方法。试纸条与美国ＩＥＸ实该ＤＸ
型的Ｃｐ体方法，来自不同猪场的ａ抗对
１５送检疑似血清进行了美国间接６份免疫荧光检测试剂和试纸条两种方法的比较检测，结果显示该试纸条与美
目前。兽医临床上许多病的检测方法仍较多地局限于传统的血清学方
４３在怀疑发生ＰＲ．ＲＳ时使用．可以
择不同日龄的乳猪、小猪、种猪若干头，
分别应用２份、头份、头份、头份头３４５
ｅＲ疫苗进行免疫接种，免疫后１ＲＳ５ｄ
与美国Ｉｅｘ司的猪伪狂犬病Ｅ．ｄｘ公ＬＵＳＡ试剂盒．同时对ｌ份猪血液或血６清进行抗体水平检测，符合率达１００％同时使用金标法对１０猪血０份
５小结
验室酶免试剂比较，合率在９符８％以
上。惠杰等建立了检测猪圆环病毒２王
当了解猪群ＰＲ抗体水平。ＲＳ制定合理
的免疫程序尤为重要。４５可应用于抗原水平检测．目前．在国内的猪病实验室诊断

常见猪病PCR检测操作步骤及试剂配制(精)

常见猪病PCR检测操作步骤及试剂配制一、RNA病毒(蓝耳病、猪瘟、乙脑、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、轮状病毒等包括病料的处理、RNA的提取、反转录、和PCR扩增、凝胶电泳四个步骤。

1、病料的处理取组织病料约2克,加入4-5毫升灭菌的PBS或者生理盐水,置研磨器(灭菌中研磨或者用剪刀细心剪碎,置-20℃中反复冻融三次,即可用于检测。

2、RNA的提取1取上述冻融三次的病料约200微升置1.5毫升的离心管中,加入500-600微升TRIzol剧烈振摇30秒后,静置5分钟后,再次剧烈振摇30秒后,静置5分钟。

2在加入200微升的氯仿,上下颠倒混匀30s,静置5分钟,4℃ 12000g 离心15 min。

离心完毕后,取上清约400-500微升(注意不要吸到中间层白色物质置新的灭菌好的离心管中,加入等体积的异丙醇,颠倒数次后(不可剧烈震动静置10分钟,4℃12000g离心10 min.可见管底部有少量白色沉淀,倒掉异丙醇,加入1毫升75%的乙醇(DEPC水配制,振摇,将白色沉淀悬浮,4℃7500g离心5 min。

弃去上清,干燥沉淀物(将离心管倒置于卫生纸或者其它吸水纸上,室温约5 min即可加入20μLDEPC 水溶解用于RT-PCR,或于-20℃保存备用。

两步法:1、反转录在10μL的反转录体系中加入:上述步骤中提取的RNA7μL、5×Buffer 2μL、0.5μL或者下游引物0.5μL;65℃10分钟, 10 mM dNTP 0.25μL、Oligo (dT18迅速放置-20摄氏度冰箱中2分钟,加入M-MLV 100U/μL 0.25μL(反转录酶37℃水浴1h,即可做为PCR扩增的模板,立即用于PCR扩增或置于- 20 ℃保存备用。

2、PCR扩增设立阳性和阴性对照,阳性对照一般为病毒液,阴性对照用灭菌的双蒸水做为PCR反应模板。

反应总体系为25μLcDNA 2μL,(模板25mmol/L Mg2+ 1.5μL,2.5mmol/L dNTPs 2.0μL,10× Mg2+ free PCR Buffer 2.5μL,20mmol/ L上下游引物各1μL,Taq DNA聚合酶(5U/μL0.2μL无菌双蒸水补至25.0μL。

预购2018动物疫病监测诊断试剂清单

预购2018年度动物疫病监测诊断试剂清单试剂盒内容：试剂微量滴定板，已用 PRRSV 重组蛋白包被酶结合物浓缩液（10X）阳性对照阴性对照稀释缓冲液 14稀释缓冲液 3浓缩洗涤液（20X）底物溶液终止液（H 2 SO 4 0.5M）1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在5℃（±3℃）下贮存。

2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。

3. 洗涤液和样品稀释液可用于ID VET 所有系列产品。

检测步骤：在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。

试剂应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。

1. 微孔板样品预稀释：1:40 倍195μL 样品稀释液14 加入每孔。

5μL 用于检测样品加入对照不需要稀释加样：100μL 阴性对照（不需稀释）加入孔A1 和B1。

100μL 阳性对照（不需稀释）加入孔C1 和D1。

100μL 预稀释样品加入剩下孔内提示：加样后板震荡混匀（2min,200rpm）效果更佳且不会影响结果。

2. 21℃（±5℃）下孵育30min±3min。

3. 用300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔5 次。

在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔变干。

4. 用样品稀释液3 按照1：10 的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1 份浓缩洗涤液加9 份样品稀释液3）。

5. 吸取100μL 的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。

6. 21℃（±5℃）下孵育30min±3min。

7. 重复步骤3。

8. 吸取100μL 的底物溶液加入到每孔中。

9. 21℃（±5℃）下暗室内孵育15min±2min。

10. 在每孔中加入100μL 的终止液终止显色反应。

11. 在酶标仪的450nm 波长读结果。

实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均OD 小于等于0.150. OD NC ≤≤0.150阳性对照与阴性对照平均OD 值差值大于等于0.150 OD PC - OD NC ≥0.150结果判定：对于每个样品，计算其S/P 比值：每个样品得出一个（S/P）值结果值结果S/P≤0.4 阴性S/P≤0.4 阴性S/P＞0.4 阳性S/P＞0.4 阳性5猪瘟ELISA试剂盒实验原理：微量滴定板已经用E2 糖蛋白包被。

常见猪病诊断对照表(归纳整理)

猪皮肤病的鉴别诊断表病毒病性水真猪丹猪坏死杆渗出表皮脓疱性溃疡性角化过度疥癣角化名泡性菌毒痘菌病炎皮炎内芽肿不全症疾病矮小牛痘创伤+ 皮肤擦猪疏螺猪疥环病孢子猪丹病葡萄球螨感锌缺坏死杆伤、S，旋体+ 境、因病毒菌、毒杆毒、菌、莲染+超乏、钙菌+继hy-icus+ 环死杆脂肪学毛鲜菌猪痘球菌敏反过量发细菌其它因子菌酸菌病毒应各种各种发14周为小猪、年龄年龄，出生各种年病各种各种出生至急性，4 哺乳仔但也见尤是哺乳至4 龄尤是种猪年年龄年龄3周龄—12周猪各种年断乳猪不月龄架子猪龄为局发性龄的猪猪架常见子猪小点致大圆形红斑，病隆起丘斑，变，脓疱，肉芽隆起的长方水泡浅表溃皮肤渗黑斑，病褐色红斑瘀肿，耳红斑，皮屑水泡形肿丘疹疡，褐出，油脂红斑，变结点，脓部有结薄痂角过黑块，坏脓疮色硬痂皮，红斑过度痂，肿痂化死，败角化形成血症痂性边缘广泛耳、蹄分分布分布面部、小猪广泛颈、耳、眼、任何部眼、四肢、部冠、布，广，广，颊部、分布，大肩、背、尾位的感颈、四面部、位鼻、常见肩、腹部眼、齿猪呈局限背、部大腿染伤口肢、躯颈部舌于耳背、腹多见龈性臀干后发病高达高达不定高达10% 率/ 低/100%/ 不一定 100% 100%/ /不 100%/ 低/低低/低低/低 — 死无低 /无低不定定低100% 亡率病毒过度病性水真猪丹猪坏死杆渗出表脓疱性溃疡性角化疥癣角化名泡性菌毒痘菌病皮炎皮炎内芽肿不全症疾病证明特征临床症剧烈真菌性皮临床症实验状、细菌骚痒、诊孢肤病齿伤、状、细菌检测日临床室检组织细菌学学、组耳刮断子、变、细细菌学学、组织粮症状查无瘙菌分学、学织学物检血清查痒离学玫瑰疥癣，角喙食猪痘，鉴糠，败血疥癣，癖，脓过度疥动物脓疱化不全，疥癣，别渗出症，脓渗出性痘，渗肿，压角化，癣，诊试验性皮疱性性皮皮炎面部坏死出性皮迫性坏渗出性角化渗出等炎性脓疱性皮炎断炎，皮炎皮炎炎死，血性皮不全疥癣肿炎引起猪腹泻的疾病鉴别表疾发病年龄腹泻特征其他症状病呕吐，脱水，发病传染性各种猪淡黄色水样，褐色，率高，多发见于寒胃肠炎恶臭冷季节，死亡率较高大肠杆菌病（仔猪脱水，无呕吐，猪黄痢，仔猪黄白色水样，有气泡尾坏死，典型全窝仔猪白感染痢）剖检特点诊断胃有不同内容物，肠中有黄色褐色液体，荧光抗体法、病原肠血管充血，胃壁出分离、电镜检查血，小肠壁薄肠充血或不充血，肠壁轻度水肿，肠扩张充盈液体、粘液和气细菌学分离鉴定仅小肠病变，如小肠流行性淡黄色水样，褐色，呕吐，脱水，发病荧光抗体、病源分各种猪扩张，内充满黄色液腹泻恶臭率高，死亡率较高离、电镜检查体仔猪（1—5周）水样，糊状，有黄凝偶见呕吐，消瘦，肠壁变薄，充有液轮状病核酸电泳、间接血发病率高，死亡率体，结肠扩张毒病乳样物低疑、病菌分离仔猪（1—5周）虚弱，不活泼，体典型症状、无病原低血糖水样胃空虚温低，神经症状体消瘦，被毛粗乱，纤维性坏死性肠炎，空肠或回肠粘膜腹泻不止，水样，灰发病率不等，死亡空、回肠出现固模，球虫病 6—15日龄涂片、裂殖子粘膜黄色，恶臭率高，在8、9月大肠无变化涂片、病理组织学份多发空、回肠肠壁充血，细菌培养、病理组仔猪红仔猪、青年猪带血性腹泻虚脱，偶见呕吐肠腔内有血性液体，织学痢粘膜增厚坏死，腹腔淋巴结出血无脱水，成窝散病变限于大肠、肠系猪痢疾 7日龄以上青年猪水样带血和粘模发，死亡率低，晚膜和大肠壁充血水细菌培养、病理组夏和秋季多发肿，轻度腹水，带有织学伪膜引起猪腹泻的疾病鉴别表（ 4-续-1）疾病发病年龄腹泻特征其他症状剖检特点诊断胃肠道卡他、出血到血清学检查、败血症，偶见中枢坏死性炎症，实质器猪副伤寒3周左右粘液带血皮试、病毒分神经症状官和淋巴结出血坏离死呆滞，呕吐，共济肠溃疡，各器官均见小鼠接种、组失调，呼吸困难，白色坏死灶，肺炎，猪伪狂犬病任何年龄不定织学和病原流涎，中枢神经症淋巴结炎体检查状全身症状，死亡率急必败血性变化小鼠接种、组猪丹毒大于1周龄水样中到高织学和病原体检查类圆虫病仔猪4—10日龄不定呼吸困难，中枢神肠粘膜小点出血粪内虫卵检经症状查全身症状，死亡率肠纽扣状溃疡，全身免疫交叉试猪瘟各种猪水样带粘液、血液败血性变化，大理石验、血清学检高，神经症状等状淋巴结查常见的猪全身性疾病鉴别表病因发病年龄发病率/死亡率临床症状剖检特点诊断嗜睡、厌食、沉组织水肿，淋巴结肿郁、41—420C 、胀，有出血点，肾、膀结膜炎、早期便胱、喉头、心有出血点，秘、后期水泻、脾梗死，大肠扣状溃荧光抗体、兔猪瘟任何年龄高/高扎堆、抽搐、虚疡，胃空虚，支气管肺体交互试验弱、发绀、步态炎或肺出血蹒跚、少数发现时已死亡、母猪流产沉郁、不愿起水肿，腹水，心外膜和立、40.5—420C 、肺出血点，淋巴结肿非洲猪瘟任何年龄高/高厌食、皮肤充胀、水肿出血，脾肿大敏感猪接种、血、呼吸困难、梗死，肺水肿、不退缩，血清学检查可能腹泻呕吐、肝肿大，肾出血，不同流产程度肠炎发热，体温40—420C ，躯卧，弥漫性皮肤血停滞，肺不愿站立，沉从心、肺、肝、充血，水肿，胃炎，肝猪丹毒 3月至7岁高/高郁，厌食，皮肤脾等分离细脾肿大，关节积液，心荨麻疹肿块，少菌鉴定外膜出血数猪发现时已死亡，发绀发热，体温40.5皮肤轻度血停滞，胃粘—41.50C ，少数膜梗死，肝、脾肿大，猪发现时已死从肝、脾中分副伤寒断奶至4月 10%/高淋巴结湿润肿大，肝粟亡，扎推，3—4 离细菌粒大白色坏死灶，坏死天后可发生腹性结肠炎泻，沉郁，厌食猪发热，体温41 鼻、喉头、气管充血出—430C ，食欲不血，肺充血肿胀，全身多发于仔猪8周龄振，粪干硬，眼淋巴结肿大、充血出脑、心、肺、猪链球菌结膜潮红，浆性血。

猪病的实验室诊断技术

３术后注意事项（）静脉输液补充营养，用抗生素＿３１
控制感染。（）绝食３，自由饮水，之后可喂食营养２ｄ膏、营养液等能量高、粪便少的食物。伤口愈合拆线后
４８
２１０２年第ｌＯ期（总第１９８期
疾病防治
１．结果判定．３２
如果涂粪棉签呈蓝色，而对照棉签颜
色不变，为阳性反应；假若两支棉签均呈蓝色，为假阳性反应；若两支棉签均不变色，为阴性反应。检验结
可分解过氧化氢放出氧，使联苯胺氧化呈绿色或蓝色。
１１结果判定若供检尿呈绿色或蓝色，为阳性反．．４
炎症病变。直接涂片法：取洁净载玻片１，先滴ｌ片大滴
生理盐水（若用５％甘油水溶液更好）０，弭以竹签挑取被检
应，颜色的深度（、蓝绿、蓝色、深蓝）绿，可表示反应的
强弱。若５ｉ后仍不变色，则为阴性反应。ａｒｎ
粪便少许，与载玻片上的生理盐水混匀，涂成薄层，即可镜检。本法简便易行，常用于检查粪便中有无寄生的
蠕虫卵，由于取粪量很少，检出率较低，所以要求每个
１粪中的潜血检查．２
粪便中潜血阳性，见于胃溃疡、胃穿孔及胃肠道年第３０２３卷
猪病的实验室诊断技术
王新（山东省济南市长清区平安兽医站２００）５３６邢兆苗（山东省济南市长清区归德兽医站）
中图分类号：￥５．８８８２文献标识码：Ｂ文章编号：１０．７３２１）００４．２０７１３（０２１．０８０

猪口蹄疫病毒(FMDV)Elisa试剂盒说明书

猪口蹄疫病毒(FMDV)Elisa试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T15ng/L – 480ng/L使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中口蹄疫病毒(FMDV)含量。

猪口蹄疫病毒(FMDV)Elisa试剂盒说明书实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪口蹄疫病毒(FMDV)水平。

用纯化的猪口蹄疫病毒(FMDV)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入口蹄疫病毒(FMDV)，再与HRP标记的口蹄疫病毒(FMDV)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的口蹄疫病毒(FMDV)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中猪口蹄疫病毒(FMDV)浓度。

试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶 7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶 8 标准品(960ng/L) 0.5ml×1瓶3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A液6ml×1瓶 11 封板膜 2张6 显色剂B液6ml×1/瓶 12 密封袋 1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

480 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

猪病实验室诊断技术

猪病的实验室诊断技术近些年我国养猪业蓬勃发展，整体模式还是以散养户和小规模养殖场结合为主。

养殖技术参差不齐，疾病的流行也是呈现多样化的趋势。

老的传染病死灰复燃、新的疾病层出不穷、多种疾病混合感染的案例不断出现。

过去兽医依靠经验能对疾病做出初步诊断，但现在疾病的临床表现呈现多元化、非典型性病例时有发现，仅凭临床症状和流行病学很难对疾病做出准确的诊断。

并且临床诊断具有滞后性，一旦猪场出现疾病大规模流行、到了临床症状非常明显的阶段，再想控制就比较困难了。

近些年，国内外越来越重视猪病的实验室诊断技术，不但可以快速、准确的诊断疾病以便合理用药，还可以对于潜伏期的疾病做出预警，评估猪群疫苗接种效果、了解母源抗体水平等，为猪场的安全生产保驾护航。

1.实验室检测技术介绍1.1 涂片镜检及病原体培养实验通过提取血液、尿液、痰液及组织等，涂抹在玻片上，在显微镜下观察细菌等病原体。

通过革兰氏染色还可以区别革兰氏阳性或阴性细菌的感染。

涂片镜检实验方法简单、仅需要显微镜就可实验、可用于疾病的初期判断。

病原体培养实验是一种体外人工繁殖病原体的技术，选取病料接种在培养基上、37 ℃生长12~24 h、通过菌落形态及生化反应来判断结果。

分离培养的菌株还可以进一步做药敏实验，通过抑菌试验筛选出敏感性强、疗效好的抗菌药物进行治疗。

仔猪黄白痢等疾病通过细菌培养比较好判断，而副猪嗜血杆菌、传染病胸膜肺炎放线杆菌等较难判断，并且越来越多的猪只混合感染、需要结合其他实验方法进一步诊断。

1.2 聚合酶链式反应(PCR)通过扩增放大特定的DNA片段来检测微量病原体的技术。

伪狂犬、蓝耳病、乙脑、传染性肠胃炎、轮状病毒、猪瘟等都可以应用PCR方法检测。

该方法灵敏度高、适用于疾病的早期诊断。

但该实验方法操作复杂、技术要求高、需要专门的实验室、不适用于基层开展。

1.3 酶联免疫吸附实验(ELISA)将抗原或抗体包被在聚乙烯微孔板上、加入待检标本进行抗原抗体反应、洗脱后加入辣根过氧化物酶或者碱性磷酸酶标记的二抗进行反应、洗脱后加入底物夜进行显色反应、通过颜色变化或者酶标仪来读取结果。

猪病防制参考资料

/caw/index.htm 猪病防制参考资料210014 江苏南京孝陵卫江苏省农业科学院畜牧兽医研究所/cav一九九九年十月目录一、诊断试剂和治疗药物 (2)1、5号病鉴别诊断液 (2)轮状病毒抗原抗体诊断液 (2)猪气喘病微粒凝集反应诊断试验 (2)治喘灵 (3)弓形虫致敏红细胞诊断制剂 (3)二、疫苗 (4)猪气喘病弱毒冻干苗 (4)猪流行性腹泻和传染性胃肠炎二联灭活油乳剂苗 (5)猪水肿病多价灭活苗 (6)三、猪病防制参考资料 (7)种猪场防疫卫生守则 (7)种猪场环境消毒程序 (9)种猪场药物预防程序 (9)种猪场免疫程序 (10)猪常见传染病的免疫程序 (11)江苏省农科院猪病研究室产品目录 (14)本资料及猪病防制相关材料可从——中国畜牧兽医网(CAV)——下载URL: /caw/index.htm/cav一、诊断试剂和治疗药物1、5号病鉴别诊断液本成果技术水平为国内外先进，用反向间接血凝试验作1号、5号病的快速鉴别诊断，并可间接检测商品猪肉中1号、5号病的病毒。

此法临床诊断仅需2小时，而原来的诊断方法，乳鼠保护试验需用3日龄的乳鼠、时间要一周，与补体结合试验相比费用减少1倍，时间缩短1天。

轮状病毒抗原抗体诊断液轮状病毒是婴幼儿及幼龄仔畜腹泻的重要病源之一，给人类健康及畜牧业的发展造成一定损失。

通过近年的研究，已建立了检测抗原的反向间接血凝（RIHA）试验及检测抗体的反向间接血凝抑制（RIHR）试验，能在2小时内检测出粪便中的轮状病毒抗原和血清或奶样中的轮状病毒抗体。

本试验设备简单、便于操作，已在南京市部分医院临床推广应用。

此诊断液国内首创，是独家科研成果，一九九О年获江苏省科技进步三等奖。

猪气喘病微粒凝集反应诊断试验1原理：已知抗原与一定比例的待检血清中抗体结合，会发生凝集反应。

由于霉形体形小、凝集团块肉眼不能观察，须经涂片染色，在显微镜下观察，方可清晰地区别微粒凝集反应与非微粒凝集反应。

第一标段动物疫病病原检测试剂(日常和流行病学监测).

45cm耐酸碱双
30
17
塑料盆
茶花脸盆产地福建３８CM个
5
18
蝴蝶夹
个
5
19
采样箱
个
3
20
3M6800防毒面具
全面防毒面具配3M6001滤盒
2
21
PH试纸
本
5
22
毛巾
金号素螺绣毛巾T1055H条
100
23
玻璃铅笔
支
20
24
拉连带
8#，个
2000
25
脱脂纱布
小包10m
20
26
脱脂棉
小包500g
20
27
第一标段动物疫病病原检测试剂（日常和流行病学监测）
序号
试剂名称
规格
数量
1
口蹄疫PCR仪诊断试剂盒
40头份/盒
1
2
H5亚型禽流感病毒试剂盒
40头份/盒
1
3
新城疫病毒反转录聚合酶链反应试剂盒
40头份/盒
3
4
猪繁殖与呼吸综合症病试剂盒
40头份/盒
3
5
猪瘟病毒反转录聚合酶链反应试剂盒
40头份/盒
3
6
水泡病毒核酸检测试剂盒
ＢＤＳ或ＯＤＳ柱
250mm*4.6mm,5um
1
16
弱阳离子交换柱（ＬＣ-ＷＣＸ）
3ml100个/包
1
17
混合型阳离子交换固相萃取柱
60mg,3ml100个/包
1
18
C8柱
10um—40um
1
19
玻璃层析柱,下端配有G4砂芯滤板
300mm*15mm(i.d.)4mm

预购2019年度动物疫病监测诊断试剂清单

预购2019年度动物疫病监测诊断试剂清单1. 微孔板样品预稀释：1:40 倍195μL 样品稀释液 14 加入每孔。

5μL 用于检测样品加入对照不需要稀释加样：100μL 阴性对照（不需稀释）加入孔 A1 和 B1。

100μL 阳性对照（不需稀释）加入孔 C1 和 D1。

100μL 预稀释样品加入剩下孔内提示：加样后板震荡混匀（2min,200rpm）效果更佳且不会影响结果。

2. 21℃（±5℃）下孵育 30min±3min。

3. 用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 5 次。

在洗涤和加入下一个试剂前，避免孔变干。

4. 用样品稀释液 3 按照 1：10 的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X）制备酶标结合物（1X）（1 份浓缩洗涤液加 9 份样品稀释液 3）。

5. 吸取 100μL 的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。

6. 21℃（±5℃）下孵育 30min±3min。

7. 重复步骤 3。

8. 吸取 100μL 的底物溶液加入到每孔中。

9. 21℃（±5℃）下暗室内孵育 15min±2min。

10. 在每孔中加入 100μL 的终止液终止显色反应。

11. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。

实验有效性：在下列情形下实验有效：阴性对照的平均 OD 小于等于 0.150. OD NC ≤≤ 0.150阳性对照与阴性对照平均 OD 值差值大于等于 0.150 OD PC - OD NC ≥ 0.150结果判定：对于每个样品，计算其 S/P 比值：每个样品得出一个（S/P）：S/P≤0.4，阴性；SN值＞04，阳性试剂盒内容：包被的微量滴定板、酶结合物浓缩液（10X）、阳性对照、阴性对照、稀释缓冲液 8、稀释缓冲液 12、浓缩洗涤液（20X）、底物溶液、终止液1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在 5℃（±3℃）下贮存。

2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。

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猪皮肤病的鉴定诊断表
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引起猪腹泻的疾病鉴别表
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常见的猪全身性疾病鉴别表
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猪呼吸道疾病鉴别表
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猪场常用兽药简介表

猪场常用兽药简介表（一）猪场常用兽药简介表（二）一．驱虫药1、敌百虫:传统上常用它进行猪驱虫,效果好,但易中毒,有一定的健胃作用；2、左旋咪唑:主要驱线虫,较安全；3、丙流苯咪唑:对线虫,绦虫,吸虫均有较好效果,也较安全；4、阿维菌素:新型驱虫药,对线虫,绦虫,吸虫及皮肤寄生虫疥癣也有较好效果,但毒性较大,易造成母猪流产；5、伊维菌素:同上,但毒性小；6、双甲脒:对皮肤疥癣效果较好,价格便宜；7、嗅氢菊酯:对皮肤疥癣效果较好,用量30-100PPM。

二．繁殖用药1、乙烯雌酚:用于母猪催情和分娩时开张子宫颈口；2、三合激素:用于母猪催情；3、黄体酮:用于母猪的保胎,安胎；4、雄激素:包括甲基睾丸酮,丙酸睾酮,苯丙酸若龙,去氢甲基睾丸素等,该类激素除了提高公猪性欲之外,对僵猪的康复也有一定的作用；5、孕马血清:母猪的催情和助情作用,使用时往往与氯前列烯醇配合使用,但要注意,肌注后1-2小时内易过敏；6、促排卵药物:包括绒毛膜促性腺激素,排卵2号,3号等；配种后肌注,会使每胎产仔数增加2-3只；7、子宫收缩药:包括催产素,麦角,氯前列烯醇；8、氯前列腺素:有催情,催产,同期分娩等功效。

三．其它常用化药1、阿托品:具有解毒及缓解胃肠蠕动,特别是严重拉稀时,配合抗生素用有很好效果；2、新斯的明:促进胃肠蠕动,起着健胃,帮助消化作用,作用与阿托品恰恰相反；3、肾上腺素:抗过敏,抗休克作用；对疫苗过敏要立即肌注进行解救,同时对喘气,咳嗽很严重的病猪也可肌注进行解救；4、氨基比林,安乃近,安痛定:这三种药属于同一类药,起着解热镇痛作用,临床上常用安乃近配合青霉素治疗一般性不吃料的猪,但要注意,对怀孕母猪使用的剂量不能过大,否则会导致流产；5、安钠加,樟脑:强心药；6、VB1,VB12针:健胃,补体；对一般无体温变化的猪,配合用药；7、氨茶碱:平喘,舒张支气管,对喘气,咳嗽猪能迅速平喘；8、地塞米松:抗炎,抗毒,配合青霉素和安痛定使用,但会导致母猪流产和泌乳减少；9、止血敏,VK3,安洛血:止血针；10；速尿:对水肿病的治疗配合用药；11；大黄,硫酸钠,硫酸镁:均为泻药。

猪病酶联免疫诊断试剂盒简介

１猪瘟病毒抗体酶联免疫诊断! ＥＬＩＳＡ" 检测试剂盒
猪瘟病毒抗体ＥＬＩＳＡ检测试剂盒是用来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒# 该试剂盒是用猪瘟病毒抗原包被的微量反应板$阻断ＥＬＩＳＡ的原理来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体# 猪瘟ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒用于检测猪血清中猪瘟抗体%评估猪场猪瘟疫苗免疫状况和猪瘟的流行病学调查# 试剂盒由抗原包被的微孔板$酶标羊抗猪ＩｇＧ及其他试剂制成$ 应用间接ＥＬＩＳＡ的原理检测猪血清中抗猪瘟病毒的抗体# 本试剂盒是采用猪瘟弱毒疫苗株经纯化%浓缩制成的抗原包被微孔板# 在试验中$加入稀释的对照血清和待检血清$经温育后$若样品中含有猪瘟特异性抗体$则将与微孔板上抗原结合# 经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后$ 再加入酶标二抗$与微孔板上抗原抗体复合物发生特异性结合# 再经洗涤除去未结合的酶结合物$ 在孔中加ＴＭＢ底物液$与酶反应形成蓝色产物 $加入ＨＦ溶液中止反应后$ 用酶标仪６３０纳米波长测定各反应孔中的ＯＤ值#
酶结合物工作液为辣根过氧化物兽医
酶标记抗猪圆环病毒２型去核定站
位信号肽衣壳蛋白单克隆抗体
２
诊断试剂盒简
１５８３１９
ｍＡｂ２# 阳性对照为重组猪圆环病毒２型去核定位信号肽衣壳蛋白 (
介
溶液# 阴性对照为牛血清白蛋白溶
液# 检测ＥＬＩＳＡ试剂盒操作简单$ 易于大范围推广应
用$具有广阔的市场前景#
３猪伪狂犬病ＥＬＩＳＡ抗体检测诊断试剂盒
猪伪狂犬病ＥＬＩＳＡ抗体检测诊断试剂盒用于检测猪血清中伪狂犬病毒抗体% 评估猪场伪狂犬疫苗免疫状况和猪伪狂犬病的流行病学调查# 试剂盒由抗原包被的微孔板% 酶标羊抗猪ＩｇＧ及其他试剂制成$ 应用间接ＥＬＩＳＡ原理检测猪血清中抗伪狂犬病毒的抗体# 本试剂盒是采用猪伪狂犬病毒经灭活%纯

猪衣原体病的诊断

猪衣原体病的诊断段正赢;郭锐;杨克礼;刘泽文;周丹娜;袁芳艳;梁望旺;田永祥【摘要】对湖北省2个猪场的母猪发生流产和返情的疾病进行诊断,采集母猪血样和组织样,对衣原体病、猪瘟等采用IHA、ELISA、PCR等方法进行实验室检验,衣原体IHA抗体、ELISA抗体分别为84.6％(22/26)、88.5％(23/26),PCR检测阳性率为69.2％(18/26).根据实验室检验结果,结合临床症状分析,诊断为猪衣原体感染,经采取综合防控措施,疫情得到了有效控制.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2012(033)009【总页数】3页(P119-121)【关键词】衣原体;诊断;综合防控【作者】段正赢;郭锐;杨克礼;刘泽文;周丹娜;袁芳艳;梁望旺;田永祥【作者单位】湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室,湖北武汉430064【正文语种】中文【中图分类】S852.67猪衣原体病（Swine chlamydiosis）主要是由猪衣原体（Chlamydia suis）感染猪引起的一种慢性接触性传染病，临床表现妊娠母猪流产、早产和产弱仔；新生仔猪肺炎、肠炎、胸膜炎、心包炎、脑膜脑炎、多关节炎和结膜炎；种公猪睾丸炎等症状。

一例猪瘟和猪伪狂犬病的鉴别诊断

计算被检样本阻断率＝（阴性对照平均 OD450 nm－样本 OD450 nm） / 阴性对照平均 OD450 nm×100%。
如果被检样本的阻断率≤30%，该样本被判为阴性，无猪瘟抗体存在；被检样本阻断率＞40%，该样本被判为阳性，有猪瘟抗体存在；如果被检样品阻断率在 30%
收稿日期：2018-05-01 作者简介：滕金玲（1971-），山东莒南人，本科，高级兽医师，主要从事动物疫病防控、兽医实验室检测的研究，E-mail：sdlytjl@
2.2 猪瘟病毒抗原检测
猪瘟病毒抗原检测试剂盒采用美国（IDEXX）的 ELISA 检测试剂盒。使用前，所有试剂和微量包被反应板在 22℃室温下放置 2 小时，并通过轻轻涡旋、旋转混匀。整个试验过程严格操作程序，且不同的样本和试剂使用不同的吸头。 2.2.1 判定方法
阳性对照 OD 的平均值（1.000）与阴性对照 OD 的平均值（0.085）之差为 0.915，大于 0.150；阴性对照 OD 的平均值为 0.085，小于 0.250，试验成立。计算 S－N 值，即样品 S （OD450 nm）与阴性对照 N （OD450 nm）的平均值之差。被检样本 S－N 值≤0.100 判为阴性；被检样本 S－N 值＞0.300 判为阳性，即为感染猪瘟；被检样本 0.100＜S－N 值＜0.300，判为可疑。 2.2.2 检测结果
中图分类号院 S852.65+1
文献标识码院 B
文章编号院 1673-4645(2018)08-0055-03
1 21 头母猪，产后 20 日龄左右仔猪出现腹泻、高热、偶有呕吐或盲目运动。抗生素药物治疗无效，同窝死亡率达 100%，怀疑患有伪狂犬病。后又出现 3 窝发病，养猪场主电话求诊。通过了解情况得知该猪场未做任何疫苗免疫，之前生产状况稳定。

猪病酶联免疫诊断试剂盒简介

猪病酶联免疫诊断试剂盒简介
孙淑环;刘全梅
【期刊名称】《养殖技术顾问》
【年(卷),期】2008(000)003
【摘要】@@ 1 猪瘟病毒抗体酶联免疫诊断(ELlSA)检测试剂盒rn猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒是用来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒.
【总页数】1页(P119)
【作者】孙淑环;刘全梅
【作者单位】黑龙江省密山市兴凯湖乡畜牧兽医站,158318;黑龙江省密山市承子河乡畜牧兽医站,158319
【正文语种】中文
【中图分类】S8
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