完整版银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展

银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展又称白果树、公孙树，是我国古老的树种之一，具有“活化石”Ginkgo biloba L.银杏树有关银杏叶的有效成分及抗病能力强而受到国内外的重视。的美称。由于其生长规律特殊，多种，形成国际市场化妆品、药品等多达100疗效的研究日益受到重视，已开发出保健品、多亿美元的新兴产业。银杏叶的化学成分有黄酮类、萜类、内酯类、酚酸类以上销售额20产地、聚异戊二烯等化合物。黄酮类为银杏叶的主要有效成分之一，含量随品种、及生物碱、树龄、不同的采摘时间而不同。黄酮类化合物优异的抗氧化、抗病毒、防治心血管疾病、增强免疫力等作用而受世人瞩目。

药学研究表明，有38种银杏黄酮类化合物从银杏叶中分离出来，其中黄酮类化合物主要有

3类：黄酮(醇)及其昔28种：如槲皮黄酮等；黄烷醇类：如儿茶素等4种；双黄酮：如白果双

黄酮等6种(儿茶素)。

1 银杏叶黄酮的提取分离

1.1 溶剂提取法目前国内外掀起了研究开发银杏叶热。国内银杏叶常用溶剂例如乙醇、丙酮、醋酸乙酯、水以及某些极性较大的混合溶剂浸泡银杏叶进行提取，溶剂提取方法一般有：煎煮、冷浸、回流、渗施等经典方法。

1.1.1 水提取树脂分离法有关水浸提银杏黄酮苷的文献报道不多。肖顺昌等报道了用l6倍量沸水分3次浸提银杏叶，得到的水溶液，经冷藏、分离杂质得溶液，然后用D101型吸附树脂吸附得到浓度达38％的黄酮苷。胡敏等研究水浸提银杏叶黄酮苷并用树脂精制的工艺，探讨了影

响黄酮苷浸出的主要因素以及最适的精制方法，结果表明：水为提取剂，在90℃水溶回流浸提

银杏叶2次，4h／次，经沉淀，过滤，浓缩后，用树脂精制、冷冻干燥后，制得总黄酮苷含量高的提取物、产品得率为银杏叶干重的 1.2％-1.5％。

水提取成本低，没有任何环境污染，产品安全性高，但是水对有效成分的选择性差，提取率低。．

1.1.2 有机溶剂浸提法一般的有机溶剂浸提法。田呈瑞等研究了乙醇浸提银杏叶黄酮的方法。通过单因素试验和正交试验，确定乙醇提取银杏叶总黄酮的最佳条件为：银杏叶粉碎至50-60 目，以70％乙醇按照液固比6：1的比例，于80℃条件下提取2 次，1h／次，银杏叶总黄酮提取率

可达87.6％。

醇(酮)提一铅化物沉淀法。张永恒等研究了乙醇回流提取银杏叶，浓缩液经蒸馏水提取，再经乙醚萃取，饱和醋酸铅沉淀法，制备银杏叶黄酮苷原。

醇提一树脂吸附法。王成章等对黄酮含量较低的银杏叶的提取和纯化进行了研究、研究了不同的浸提溶剂(水、甲醇、乙醇、丙酮)、浸提温度(室温、400-500℃、600-700℃)、浸提时间对黄酮浸出率的影响，在以60％-70％的乙醇为浸提剂，液固比为8：1 -6：1，60-70℃热浸泡、

3-lh两次，可以使黄酮的浸出率高达约85％，选用A-1和A-2混合树脂吸附分离，可以制得高含量的银杏黄酮苷。吉云秀等研究了用35％的乙醇浸提银杏叶，液固比为10：1，50℃浸提10 min，氨水调节PH除杂，浸提液用 D型树脂吸附分离的最佳条101件，确定出最优的吸附一解吸工艺条件：吸附流速为3ml／min。吸附原液pH值为8.3。采用2倍树脂床体积的70％乙醇解吸，解吸流速为1.5ml／min，操作温度为室温。采用此提取纯化工艺所得黄酮类化合物的含量为26.2％、黄酮类化合物提取收率为64.4％。

醇(酮)浸提一酮／铵盐萃取法。梁红等比较了不同溶剂提取银杏叶黄酮类化合物的效率，用70％的乙醇作为提取溶剂，结合用3％的(NH4)2S04进行二次提取，提取液用饱和的(NH4)2SO4 溶

液两次浓缩，黄酮的提纯效果非常明显。

醇(酮)提取一硅藻土过滤法。熊远福等对银杏叶总黄酮提取精制技术进行了研究。试验结果表明，在最佳浸提条件：浸提剂乙醇70％，银杏叶与浸提剂用量比1：5，浸提时间3.5h，60℃下浸提2次，最佳精制条件为：每100g银杏叶用硅藻土2.5g、丙烯酸树脂80g，洗脱剂乙醇浓度70％，应用该工艺条件进行浸提与精制，精品收率＞2.25％，总黄酮％。28.8含量达

以上方法获得的银杏叶提取物精品虽然总黄酮(或黄酮苷) 含量较高，但由于使用了卤代烃、甲苯和铅化物等有毒物质，残留在产品中，影响产品质量，安全性低。

1.2 超临界流体(SFE)萃取法超临界流体是最近几年才发展起来的一种新技术，超临界萃取和传统的溶剂萃取相比，超临界萃取在35-40℃进行操作，以CO2为萃取介质，具有溶质、溶剂易于分离，萃取速度高等优点，特别适用于提取或精致热敏性和易氧化的物质。由于所用的萃取剂是气体，容易除去，所得产品无残留毒性，这种方法适用与医药和食品工业。

张从贵等探讨了乙醇提取，超临界CO2分离银杏叶中的药用成分，结果表明超临界C02分离银杏黄酮的效果不是很好，萃余物得率仅为0.5％。邓启焕等探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，在最佳条件下：萃取压力为20MPa，时间90 min，液体比3.5％，流量15L，粒度5目，温度40℃，银杏黄酮的含量为28％，高于国际公认标准。佳红等采用SFE-HPLC测定银杏叶粗提物中银杏黄酮的含量，确定了超临界流体萃取的最佳条件：压力为41364Pa，温度为60℃，静态萃取时间为4min、动态萃取体积为4ml，改性剂加入O.2m1的乙醇。

因为超临界萃取的设备较大，操作困难等问题，难以用于大规模工业化生产。

1.3 超声波辅助提取法近年来超声技术用于提取植物种的药效成分成为研究的一个方向。研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，都可以加速药物有效成分进入溶剂，从而提高提出率，缩短提取时间、并且免去高温对提出成分的影响。

郭国瑞等研究了单因素温度和时间对超声提取银杏黄酮的影响，确定了超声提取银杏黄酮的最佳条件：时间55min，料液比1/30，温度50℃，此时提取率为82.3％。王廷峰等对连续热回流和超声法提取银杏黄酮做了比较性研究，连续热回流条件： 70％的乙醇，％，通过三因素实验研究了80.9／次，提取率为lh次，2，索氏提取器提取1：6液固比约．

超声提取的最佳条件：50- 60目的银杏叶，70％的乙醇，液固比约6：1，超声频率40KHZ，处理时间为10min，静置时间为l2h，银杏黄酮的提取率为 86.7％，连续热回流和超声法提取银杏黄酮的没有太大差异，但是超声法提取明显缩短了时间、减少了溶剂用量。

该方法提取速度快，提取率高，节省溶剂、能耗是一种理想的提取银杏黄酮的方法。

1.4 微波法微波技术是一种新的、有发展前景的新工艺，微波技术在提取植物有效成份中的应用，近年来得到了很大发展。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波幅射 (MWl)可以大大加快反应速度，反应时间以分、秒计‘微波技术应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率，亦取得了令人可喜的进展。李嵘等将微波法与传统水提法结合，缩短了提取时间，大大提高了银杏叶黄酮的提取率，液固比30：1，时间30min，提取率达到6

2.3％。段蕊等确定了微波提取银杏黄酮的最佳条件：银杏叶用175W微波强度处理5min后，以体积分数80％的乙醇，在70℃下提取1h，得到提取物中黄酮类物质的质量浓度比未经微波处理的高出l8.8％。

2 银杏黄酮类化台物的测定方法

目前、有关银杏叶黄酮类化合物的测定国内外没有公开普遍的控制质量标准，常用络合分光光度法、气相色谱法、HPLC— UV法、薄层扫描法、库仑滴定法、毛细管电泳法等。

2.1 络合分光光度法国内使用较多的是“络合—分光光度法”。黄酮母核在NaNo2的碱性溶液中，与A1(NO2)2络合后产生黄色络合物，以芦丁为标准溶液、在UV510 nm处作紫外分光光度法的比色测定。雷天乾等对分光光度法和高效液相色谱测银杏叶提取物总黄酮含量的测定方法，