兔膝骨关节炎动物模型的构建
骨关节炎动物模型_江捍平
文章编号:1005-8982(2004)06-0153-02#论坛#骨关节炎动物模型江捍平,王大平(深圳市急救医疗中心,广东深圳518035)关键词:骨关节炎;动物模型中图分类号:R-332文献标识码:C骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)动物模型的建立是研究OA发病机制、治疗及预防的必要手段。
从其产生的原因来看,OA动物模型可分为两大类:诱发性或实验性模型,即通过各种操作如制动、手术、关节内注药、关节内植入异物等诱导OA产生;自发性模型,即实验动物未经过任何有意识的人工处置,在自然情况下所发生的,或者由于基因突变的异常表现通过遗传育种保留下来的OA动物模型,如C57黑鼠等。
1诱发模型1.1手术方法1.1.1前交叉韧带或(和)半月板切除由于临床观察到,关节的不稳定会造成关节的退行性改变,从而导制骨关节炎的发生。
Pond[1]等将犬膝关节前交叉韧带切断,观察到实验肢体的发展过程和自然发生(前交叉韧带破裂所致)关节不稳定是一样的,并且其最后的肉眼病理表现与骨关节炎是一样的。
出现滑膜增厚,软骨色泽改变,软骨表面糜烂,细胞成簇排列,骨赘形成等。
Moskowitz[2]等则采取将兔膝关节半月板部分切除来造成关节的不稳定,从而得到骨关节炎模型。
这两种方法均造成关节特别是软骨和滑液的炎症及修复,随着病程的进展,软骨及软骨下骨破坏、增生等表现与自然发生的骨关节炎是一样的。
也有人采用切断动物肢体支配神经的方法以期得到OA模型,实验证明[3,4],去神经支配本身并不引起关节退变,但能加速交叉韧带或半月板部分切除动物模型的关节退变。
1.1.2白希壮模型关节生物力学的紊乱是骨关收稿日期:2003-11-13节炎主要病因之一,但有证据表明,在以上关节内手术途径所得到的OA模型早期,手术本身所造成的创伤和关节积血等对关节软骨的破坏及范围有促进作用[5]。
因此,白希壮等[6]认为上述方法为关节内手术途径,不能排除手术所致创伤性滑膜炎对实验的干扰,采取完全切断豚鼠附着在髂嵴上的臀大肌及深部的臀中、小肌,切除远侧断端1cm,获得满意的髋OA模型。
膝关节骨性关节炎动物模型研究进展
膝关节骨性关节炎动物模型研究进展张君涛;吴超超【摘要】随着社会人口老龄化的加剧,膝关节骨性关节炎(KOA)成为提高老年人生活质量的一大障碍,但其病因及发病机制尚不明确,因此建立KOA动物模型来探讨其病理机制成为研究KOA的重要方法,亦对探寻安全有效的KOA治疗手段具有十分重要的意义.目前研究者多采用3类方式造模,即手术方式:用手术方式改变动物解剖结构造成关节不稳、骨内高压或雌激素缺乏诱导动物膝关节发生退变;非手术方式:通过关节制动,寒冷及撞击刺激,关节腔药物注射等方式获得KOA动物模型;自发模型:通过人工选育或者基因工程的方式获得KOA动物模型,本文就近年这3类KOA动物模型的研究进展进行综述.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2018(047)015【总页数】4页(P2061-2063,2067)【关键词】骨性关节炎;动物模型;造模方法【作者】张君涛;吴超超【作者单位】天津中医药大学第一附属医院骨伤科,天津300380;天津中医药大学研究生院,天津300193【正文语种】中文【中图分类】R684.3膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)又被称为膝关节退行性骨关节病，临床表现为关节软骨变性、破坏及骨质增生，关节变形及关节周围组织功能减退等，是临床常见危害老年人健康的骨关节疾病，给社会增加沉重的负担。
但其发病机制仍不明确，临床上也没有特异性的治疗措施，只能缓解症状，所以建立骨性关节炎动物模型来探索其发病机制和防治手段成为科研热点。
KOA动物模型从造模方式上可分为手术方式、非手术方式、自发模型3类，本文就这3类KOA动物模型的研究近况做一综述。
1 手术方法1.1 关节内手术1.1.1 Hulth法Hulth法是KOA手术造模的经典方法。
苏达明等[1]采用Hulth法，切断膝关节内侧副韧带和前后交叉韧带，并整体切除内侧半月板，造模后6 周行X线检查证明成功建立兔KOA模型。
兔类风湿性关节炎模型的建立及成纤维样滑膜细胞的培养
兔类风湿性关节炎模型的建立及成纤维样滑膜细胞的培养文永兵;郭艳幸;张玉可【摘要】目的:建立卵蛋白诱导的兔类风湿性关节炎模型,明确兔类风湿性滑膜细胞培养的条件,储备后期用于实验研究的滑膜细胞,为后期体外细胞实验提供最佳实验条件.方法:健康大耳白兔8只,随机分为正常组4只,模型组4只,模型组建立卵蛋白诱导的类风湿性关节炎动物模型,动物模型建成后第2周取模型组兔膝关节滑膜细胞培养、传代、收集冻存细胞,1月后复苏细胞.结果:模型组兔膝关节病理切片见炎性细胞浸润,滑膜细胞增生明显,血管翳形成,并侵蚀和破坏软骨;培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征,呈长梭形极向生长,成功储备及复苏滑膜细胞.结论:成功建立兔类风湿性关节炎模型,成功地培养出了兔膝关节类风湿性滑膜细胞.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2014(023)004【总页数】3页(P21-22,24)【关键词】类风湿性关节炎;滑膜细胞;细胞培养【作者】文永兵;郭艳幸;张玉可【作者单位】安徽中医药大学,安徽合肥 23003;洛阳正骨医院,河南洛阳 471000;河南中医学院,河南郑州 450000【正文语种】中文【中图分类】R593.22类风湿性关节炎 (Rheumatoid arthritis，RA)是一种以关节滑膜为主要靶组织的慢性系统性炎症性自身免疫功能障碍性疾病，主要表现为对称性、慢性、进行性多关节炎，基本病理特征为关节滑膜炎。
关节滑膜炎症细胞浸润，滑膜细胞增殖，血管翳形成并侵袭关节软骨和骨组织，造成关节结构的破坏［1］。
其确切病因及发病机制尚未完全明确，目前尚无有效的治疗方法。
近年来研究表明，类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞 (fibroblast-like synovio—cytes，FLS)增生活跃，具有转化细胞的特征，能够形成肿瘤样病灶，可能是类风湿关节炎疾病发生的早期特征［2］。
制备兔类风湿性关节炎模型，为研究RA的发病机制提供了一个良好的平台;体外培养FLS为临床药物的开发与评估提供了一个理想的实验条件，对进一步揭示RA的发病机制及开发防治RA的药物具有深远的意义。
兔骨关节炎模型早期关节软骨及软骨下骨生化改变及二磷酸盐干预效应
兔骨关节炎模型早期关节软骨及软骨下骨生化改变及二磷酸盐的干预效应【摘要】目的观察兔膝关节不稳早期关节软骨基质金属蛋白酶13（mmp13）、软骨下骨基质金属蛋白酶9（mmp9）和组织蛋白酶k （ck）的表达变化及二磷酸盐的抑制作用。
方法健康雄性新西兰大白兔60只，随机分成三组，模型组、二磷酸盐组及对照组。
右膝造模。
二磷酸盐组每天皮下注射二磷酸盐（利塞磷酸钠，risedronate sodium）001 mg/kg体重。
术后分别于4w、8w、12 w 处死兔子各取8个右膝关节，对照组取4个右膝关节的股骨内侧髁，检测关节软骨mmp13、软骨下骨mmp9和ck表达变化，并进行统计学比较分析。
结果造模4w时各组都有mmp13、mmp9和ck阳性表达细胞。
对照组和二磷酸盐组阳性细胞较少，模型组阳性细胞较多。
与对照组比较，模型组差异有统计学意义（p75%为强阳性（+++）。
1.5 统计学方法采用spss 13.0统计学软件对资料进行分析，实验数据以均数±标准差（x±s）表示，组间均数比较采用单因素方差分析，率的比较用卡方检验。
以p2.2 造模后不同时期软骨下骨mmp9表达各组软骨下骨都有阳性细胞表达。
细胞结构清晰，胞浆内有深浅不同的浅棕黄色到深棕褐色的颗粒，且着色明显高于背景，模型组显色深、有的聚集成簇，正常对照组和二磷酸盐组阳性细胞表达少，散在，显色浅。
四周时对照组，模型组和二磷酸盐组阳性细胞平均数目为分别为（1.34±01668），（17.35±1.5430），（3.34±01961），细胞阳性表达率为4%、90%和16%。
和对照组相比，模型组阳性细胞表达数目明显增多（p005），显示其有明显的抑制破骨细胞ck表达的作用，减少ck产生，减少软骨下骨吸收，改善软骨下骨力学性能。
从而保护关节软骨。
参考文献[1] pelletier jp， martelpelletier j， howell ds etiopathogenesis of osteoarthritis a textbook of rheumatology，2001， p：2195245 （chapter 110）.[2] feuerherm aj， borset m， seidel c， et al elevated levels of osteoprotegerin （opg） and hepatocyte growth factor （hgf）in rheumatoid arthritis scand j rheumatol， 2001， 30：229234.[3] hayami t， pickarski m， zhuo y， et al characterization of articular cartilage and subchondral bone changes in the rat anterior cruclate ligament transection and meniscectomized models of osteoarthfitis. bone，2006，38（2）：234243.[4] 王玉彬，陈安民，郭风劲，等基质金属蛋白酶家族在骨关节炎软骨组织中表达的研究中国矫形外科杂志， 2007， 15（11）：853855.[5] 周辉，董刚，夏志敏，等 mmp1、mmp9 mrna在创伤性骨关节炎软骨中的表达中国骨质疏松杂志，2009，15（2）：9698.[6] selingerc i， day cj， morrision na， et al optimizedtransfection of diced sirna into mature primary human osteoclasts： inhibition of cathepsin k mediated bone resorption by sirna j cell biochem，2005（96）：9961002. [7] wittrant y， couillaud s， theoleyrd s， et al osteoprotegerin differentially regulates protease expression in osteoclast cultures j biochem biophys res commun，2002，293：3844.[8] 史晓林，刘康，吴连国骨碎补总黄酮对骨质疏松靶标一组织蛋白酶k干预价值的探讨.中国创伤骨科杂志，2008，16（5）：7072.[9] 王运林，刘晓睛，杨菲，等金雀异黄素抑制il1α刺激破骨样细胞的组织蛋白酶k表达.中国细胞生物学报， 2006，28：473476.。
膝关节骨性关节炎动物模型建立的研究现状
膝关节骨性关节炎动物模型建立的研究现状本文基于对膝关节骨性关节炎病因和治疗机制的基础研究的不断探索，深入分析发现当前建立骨关节炎动物模型所选动物以鼠、兔为主，其他动物如狗、猪、鸡等应用较少。
常用造模方法主要有自发性模型、手术造模以及其他方法等，不同动物及不同方法有着较为严格的区别，因此在选择模型时应根据研究需要综合考虑。
[Abstract] Based on the continuous exploration on the fundamental researches of etiology and treatment mechanism of knee osteoarthritis，this paper takes in-depth analysis and finds that the animals used for establishing animal models with osteoarthritis at present are mainly rats and rabbits，the application of other animals，such as dogs，pigs，chickens and others，is less. The commonly model replicating methods are spontaneous models，operation models，and other methods，different animals and different methods have relatively strict distinction，so the choice of models should be based on the need of study.[Key words] Knee joint；Osteoarthritis；Animal model膝关节骨性关节炎是在骨科临床中常见的一种以关节退行性改变为主的疾病，中老年人群多发，主要症状为膝关节增生样肿胀、关节内翻畸形、屈伸活动受限，负重行走尤其上下楼梯时疼痛明显加重，关节磨糙音、弹响，部分患者会出现关节腔积液[1]。
舒筋健腰丸对新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织的影响
舒筋健腰丸对新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织的影响舒筋健腰丸是一种传统中药方剂，被广泛用于治疗腰腿痛、膝骨关节炎等骨骼肌肉系统疾病。
关于舒筋健腰丸对新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织的影响的研究还比较有限。
本文旨在通过对舒筋健腰丸在新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织中的影响进行探究，以期为该药物的临床应用提供科学的依据。
方法1. 实验动物的筛选与建模选用成年健康的新西兰兔作为实验动物，按照前人研究的方法建立膝骨关节炎模型。
通过X射线摄影和组织病理学观察确认模型的成功建立。
2. 实验组与对照组的设定将实验动物随机分为实验组和对照组，每组均设立10只。
实验组给予舒筋健腰丸治疗，对照组给予生理盐水治疗。
3. 药物给药方案根据舒筋健腰丸的用药剂量，将舒筋健腰丸研磨成细粉末，溶解在生理盐水中，每日按照体重比例给予实验动物灌胃。
4. 治疗观察指标观察实验组和对照组的动物在给药后4周和8周时的关节功能、关节软骨形态、关节病理学变化等指标。
结果1. 舒筋健腰丸对于新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织有保护作用。
经过4周和8周的治疗，实验组的关节软骨形态和关节组织病理学变化明显改善，表现为软骨光滑度增加、软骨损伤减轻。
3. 舒筋健腰丸对于新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织的保护作用可能与其抗炎和抗氧化作用有关。
舒筋健腰丸中的药物成分具有一定的抗炎和抗氧化活性，可以减轻关节炎所引起的炎症和氧化损伤。
讨论舒筋健腰丸对于新西兰兔膝骨关节炎模型软骨组织具有一定的保护作用，可能与其抗炎和抗氧化作用有关。
本研究存在一些局限性，如动物模型的选择和观察时间的限制，需要进一步的研究来验证和完善结果。
结论。
一种改良膝关节痛风性关节炎兔模型
Ｌ ｊ Ｑｉ 。 Ｍ． Ｄ． ， Ａｔ ｔ ｅ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇБайду номын сангаас
ｐｈ ｙｓ ｉ ｃｉ ａｎ， Ｏｒ ｔ ｈ ｏｐｅ ｄｉ ｃ Ｓｐ ｏｒ ｔｓ
药 物 的研 究 。
摘要 背景 ： 良好 的动物 模 型是 研 究痛 风 性关 节 炎重 要 的实验 方 法和 手段 。然 而 ， 目前 尚无十 分 理想 的痛 风性 关 节 炎动 物 模 型 ，这给 寻 找新 的药 物 、方法 治疗 痛 风性 关节 炎带 来 阻碍 。
目的 ：评价 改 良后 的兔 膝关 节痛 风模 型 的有 效 性。 方法 ：选 取 新 西兰 大 白兔 随机 分成 ４ 组 。空 白对照 组 不做任 何 处理 ，右 膝作 为观 察侧 ；假 手 术组取 大 网膜 ， 处理 后 不包 裹 单钠 尿 酸盐 结 晶 ，单纯 将 大 网膜植 入 兔右 侧膝 关 节髌 上囊 腔 ；经 典模 型组 将 单钠 尿酸 盐结 晶混 悬液（ ０ ． １ ｇ ／ Ｌ ） 注 射 入兔 右侧 膝 关节 髌上 囊腔 ；改 良模型 组取 大 网膜 ，处 理后 包裹 单钠 尿酸 盐 结 晶（ １ Ｏ ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ） ， 植入兔右侧膝关节髌上囊腔。观察造模后 １ ，２ ，３ ｄ及造模后 １ ，２ ，３ ，４周关节肿胀程度、活动情况及关节 炎症 反应 等来 评 估 改 良模 型 的优 缺 点 。 结 果 与结 论 ：① 造模 后 ４周 内各 个 时间 点改 良模 型组 的兔 关节 功 能均显 著 降低 （ Ｐ＜０ ． ｏ ５ ） ；②经 典模 型组 和 改 良模 型组 造模 后 关节 肿胀 指数 分 别在 造模 后第 １或 ２天 达到 高 峰，其 后均 开始 下 降 ，而改 良模 型组 较经 典模 型 组 下降 缓慢 ，造 模 后第 ４ 周 时与 空 白对照 组相 比存 在 显著 性差 异 ；⑧大 体观 察 ：改 良模 型组和 经 典模 型组 均 呈 现 出 明显 的关节 炎 症 改变 ：滑 膜广 泛 增生 ，伴 充 血水 肿 ；关节 腔 内有 较 多关 节液 形成 ；周 围组织 充血 水
骨性关节炎动物模型的建立概况
・综 述・骨性关节炎动物模型的建立概况刘伯龄,刘献祥(福建中医学院,福建福州350003)收稿日期:2003206209 骨性关节炎(OA )是一种严重危害老年人健康的慢性进行性骨关节疾病,随着社会人口的老龄化,该病发病率呈显著上升趋势[1]。
其发病机制目前仍不十分清楚,因此,探索该模型的建立对研究OA 病理机制及防治OA 具有十分重要的意义。
目前,国内外学者根据OA 的不同发病机制主要从以下几方面进行OA 动物模型的建立。
1 机械制动 当动物的下肢关节机械制动一段时间后,局部不论是否施以外加压力,关节软骨均可出现与临床相似的退行性改变,且不论采用伸直位、屈曲位或中间位。
研究发现家兔膝关节制动60d 后,由制动所造成的大部分关节软骨的变化无法逆转。
若制动不超过30d ,电镜下其表面的圆形突起未完全破坏,切线层纤维束未暴露,病变则有恢复的可能[2]。
若制动时间超过30d ,则可导致关节的进行性破坏。
若以屈曲位制动,则因减少了横跨膝关节的肌肉的收缩,可导致关节软骨的萎缩性变化;若以伸直位制动,限制了关节的运动,肌肉、关节囊收缩,对关节面产生了过度压力,可导致OA 的发生。
实验研究进一步表明,短于4d 的关节制动,即具有一定的病理积累作用,无论是短期的反复制动或是持续制动。
O kazak i 等[3]实验研究也表明,家兔膝关节伸直位制动7～14d 后,关节软骨即出现早期退变,28d 后出现关节软骨中度退变,42d 后则出现严重的退变,并发现P 53mRNA 在此过程中发挥了重要作用。
故有人认为将兔膝关节于伸直位制动5～6周,即可得到OA 动物模型[3]。
2 药物注射2.1 木瓜蛋白酶(Papain ):Papain 是一种蛋白水解酶,将其分别注入家兔膝、髋关节中,并加以局部制动,观察到关节软骨退行性变的发生。
杨氏等[4]用1.6%Papain 0.3m l 注入日本大耳兔颞颌关节腔内,2、4、6周后,分别进行病理学观察,发现关节软骨变薄,表面糜烂、腐蚀,软骨细胞坏死,软骨基质破坏等一系列的病理性改变,这种模型与人类OA 病理变化极为相似,且易于复制。
关节内注射富含血小板血浆在兔膝骨关节炎动物模型中的作用
关节内注射富含血小板血浆在兔膝骨关节炎动物模型中的作用徐建军;金掌【摘要】目的：评估关节内注射富含血小板血浆（PRP）对胶原酶诱导的兔膝骨关节炎（OA）动物模型的影响。
方法20只新西兰大白兔在超声引导下行右侧膝关节内胶原酶注射，建立兔OA动物模型。
实验的第4周随机分为PRP组和生理盐水组，每组10只，每周给药1次，共4次。
实验第9周取关节软骨观察软骨总体形态及软骨微形态的变化。
结果 PRP组软骨总体形态评分为（1.7±0.3）分，明显低于生理盐水组的（3.5±0.6），分，差异有统计学意义（P＜0.05），提示PRP 组软骨总体形态损伤较小；PRP 组软骨微形态评分为（3.2±1.0）分，明显低于生理盐水组的（7.4±1.2）分，差异有统计学意义（P＜0.05），提示PRP组软骨微形态损伤较小。
结论关节内注射PRP有保护软骨作用。
%Objective To evaluate the intra-articular injection of platelet rich plasma (PRP)for collagenase-induced rabbit knee osteoarthritis (OA)of animalmodels.Methods 20 rabbits got ultrasound guided injection of collage-nase in the right knee to set up rabbit animal model of OA.After four weeks,rabbits were randomly divided into the PRP group and saline group,n=10,and all administered once a week for a total of four times.In 9th week,all specimens were observed the overall pattern of articular cartilage chondrocytes and cartilage micro-morphological changes.Results The gross morphologica l scores in the PRP group (1.7 ±0.3)was significantly lower than in the saline group(3.5 ±0.6)(P<0.05).The micro morphological scores in the PRP group (3.2 ±1.0)was significant-ly lowerthan in the saline group(7.4 ±1.2)(P<0.05).Conclusions Intra-articular injection of PRP has a pro-tective role in cartilage.【期刊名称】《临床骨科杂志》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P340-342)【关键词】富含血小板血浆;骨关节炎;关节内注射;动物模型【作者】徐建军;金掌【作者单位】丽水市人民医院骨科，浙江丽水 323000;丽水市人民医院骨科，浙江丽水 323000【正文语种】中文【中图分类】R684.3;R457.14;R459.2骨关节炎(osteoarthritis,OA)是关节软骨退变和继发性骨质增生为特征的慢性关节疾病，由机械性和生物性因素综合所致。
不同膝骨关节炎模型兔的构建方法：合理选择及特点
《中国组织工程研究》Chinese Journal of Tissue Engineering Research文章编号:2095-4344(2018)28-04550-074550·综述·www.CRTER .org彭旭，男，1985年生，四川省遂宁人，汉族，遵义医学院在读硕士，主要从事关节退变和运动医学的研究。
通讯作者：刘毅，教授，硕士生导师，遵义医学院附属医院骨一科，贵州省遵义市563000中图分类号:R318文献标识码:A稿件接受：2018-04-28Peng Xu,Master candidate,First Department of Orthopedics,Affiliated Hospital of Zunyi Medical University,Zunyi 563000,Guizhou Province,China Corresponding author:Liu Yi,Professor,Master’s supervisor,First Department of Orthopedics,Affiliated Hospital of Zunyi Medical University,Zunyi 563000,Guizhou Province,China不同膝骨关节炎模型兔的构建方法：合理选择及特点彭旭，熊华章，杨继滨，尤奇，金瑛，张骏，葛振，刘毅(遵义医学院附属医院骨一科，贵州省遵义市563000)DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.0330ORCID:0000-0002-6664-8008(彭旭)文章快速阅读：文题释义：Hulth 法：为经典骨关节炎造模方式，手术需切除前、后交叉韧带、内侧副韧带及内侧半月板，造成关节的极度不稳定，从而诱发骨关节炎改变，该方法诱导率高，稳定性好，但创伤大，感染风险较高，产生的炎症因子对早期骨关节炎软骨及滑膜的生化变化影响较大。
比较2种造模方法对家兔膝骨关节炎模型的血清及关节液中炎性因子的影响
比较2种造模方法对家兔膝骨关节炎模型的血清及关节液中炎性因子的影响杨帆;袁芳;朱跃兰【摘要】目的检测2种造模方法制备的家兔膝骨关节炎(KOA)模型的血清及关节液中炎性因子含量,分析2种造模方法对家兔KOA模型的血清及关节液中炎性因子的影响.方法将10只新西兰大白兔随机分为模型1组、模型2组,每组5只.模型1组采用改良后伸直位固定法制备KOA模型;模型2组采用双侧膝关节腔内注射药物法制备KOA模型.观察2组家兔的一般状态并记录体质量、患侧膝关节宽度及Lequesne指数.比较2组家兔造模后血清及关节液中炎性因子[前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-0)]含量水平.结果模型2组首次注射木瓜蛋白酶溶液后及模型1组膝关节制动后的1周内,家兔出现精神萎靡,进食量减少,活动灵活性减低,患侧肢体跛行,甚至蹬地无力伴疼痛、回头舔吮等状态.2组家兔造模前后体质量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).2组家兔造模后患侧膝关节宽度均较本组造模前增加(P＜0.05),模型2组造模后患侧膝关节宽度较模型1组增加(P＜0.05).2组家兔造模前后Lequesne指数比较差异均有统计学意义(P＜0.05).2组家兔造模后Lequesne指数比较差异无统计学意义(P＞0.05).2组家兔造模后血清中PGE2、IL-1β及TNF-α含量比较差异均有统计学意义(P＜0.05),模型2组高于模型1组.2组家兔关节液中IL-1β及TNF-α含量比较差异均有统计学意义(P＜0.05),模型2组高于模型1组;PGE2含量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 2种造模方法对家兔的一般生活状态影响不大,而对其血清及关节液中炎性因子影响较为明显.%Objective To detect the content of inflammatory factors in serum and synovial fluid of rabbit knee osteoarthritis (KOA) model by two modeling methods,and analyze the effects of two modelingmethods on inflammatory factors in serum and synovial fluid of rabbit KOA model.Methods 10 New Zealand white rabbits were randomly divided into model group 1,model group2,5 rabbits in each group.The KOA model in model group 1 was prepared by the modified methods of immobilization in extension position.The KOA model in model group 2 was prepared by intracavitary injection drug of bilateral knee.The general state of rabbits were observed,and the body mass,the width of affected side knee joint and Lequesne index were recorded in two groups.The levels of inflammatory factors including prostaglandin E2 (PGE2),interleukin-1 beta (IL-1 [),tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in serum and synovial fluid after model establishment were compared in the two groups.Results After injection of papain solution for the first time in model group 2 and after braking knee in model 1,rabbits appeared apathetic,reduced food intake,reduced activity flexibility,affected side limb limping,and even pedal unable with suffer pain,turn back for lick and suck and other states within 1 week.There was no statistical difference on the body mass between before and after modeling in two groups (P ＞ 0.05).The width of affected side knee joint after modeling increased in the two groups (P ＜ 0.05),and the width of affected side knee joint after modeling in model group 2 was higher than that in model group 1 (P ＜ 0.05).There were statistical differences on the Lequesne index between before and after modeling in two groups (P ＜ 0.05).There was no statistical difference on the Lequesne index after modeling between the two groups (P ＞ 0.05).The contents of PGE2,IL-1 β and TNF-α in serum in model group 2 were higher than thosein model group 1 with statistical differences (P ＜ 0.05).The contents of IL-1β and TNF-α in synovial fluid in model group 2 were higher than those in model group 1 with statistical differences (P ＜ 0.05),and with no statistical difference on PGE2 (P ＞ 0.05).Conclusion The two modeling methods has no statistical difference on the general life status of rabbits,but has obvious influences on inflammatory factors in serum and synovial fluid.【期刊名称】《河北中医》【年(卷),期】2017(039)009【总页数】5页(P1368-1372)【关键词】骨关节炎,膝;动物,实验【作者】杨帆;袁芳;朱跃兰【作者单位】北京中医药大学,北京100029;首都医科大学附属北京中医医院针灸中心,北京100010;北京中医药大学东方医院风湿科,北京100078【正文语种】中文【中图分类】R684.3;R684.305;R-331骨关节炎(osteoarthritis，OA)是临床常见的一种严重影响人类健康生活的疾病，主要表现为关节疼痛、僵硬及功能活动障碍等症状[1]。
家兔膝骨性关节炎的动物模型的建立
家兔膝骨性关节炎的动物模型的建立摘要目的：探索建立家兔膝关节骨性关节炎的模型，并探讨软骨细胞的病理生理改变。
方法：取新西兰大白兔8只，随机分成两组，每组4只，实验组建立Hulth骨性关节炎模型，对照组仅行双侧膝关节切开术。
8周后，处死动物，选用兔膝关节骨性关节炎软骨为试验标本，两组分别进行软骨细胞细胞生长曲线的测定。
结果：骨性关节炎软骨细胞细胞周期较正常软骨细胞细胞周期短，可以推断骨性关节炎软骨细胞细胞周期及细胞功能均发生改变。
结论：骨性关节炎软骨细胞在骨性关节炎发病过程中，软骨细胞正常分化及增殖发生改变，可能为骨性关节炎软骨代谢紊乱假说提供理论依据。
关键词骨性关节炎动物模型软骨细胞材料与方法试剂：①化学试剂：碳酸氢钠、磷酸氢二钠、硫酸镁、考马斯亮兰。
②细胞培养试剂与培养板：F12培养液、胎牛血清、胰蛋白酶(宝泰克)、胶原酶Ⅰ、Ⅱ型、L-谷氨酰胺、二巯基乙醇、青霉素、链霉素、6孔、24孔、96孔培养板。
仪器：凝胶成像仪、数码照相系统、二氧化碳培养箱、酶标仪、PCR扩增仪、超声波清洗器、倒置显微镜、恒温震荡培养箱、CLP-800电泳仪、超高速冷冻离心机、梅特勒-托利多AB204-N单量程万分之一电子天平、超小型电泳仪Mupid-2。
实验材料：新西兰大白兔。
动物模型及分组：雄性新西兰白兔8只，3～5个月龄，体重2.5～3.5kg，平均2.85kg。
随机分两组，每组4只。
手术方法：①实验组：用20%乌拉坦(5ml/kg)静脉麻醉，取髌内侧切口长约2cm，逐层切开软组织，打开关节腔，将髌骨外翻，将双膝关节内侧副韧带、前后交叉韧带切断并切除内侧半月板，注意勿损伤关节软骨；冲洗关节腔后，逐层缝合切口，术后应用肌注青霉素40万U/日，持续7天，术后不固定伤肢，每天驱赶兔奔跑2次，每次强迫其活动1小时，模型建立需8周。
②对照组：实验动物采用同样的麻醉方法，只打开关节腔后，同样将髌骨脱位，保持关节腔暴露时间大致同实验组，其余处理同上。
兔膝关节骨性关节炎动物模型的复制与评价
兔膝关节骨性关节炎动物模型的复制与评价汤晓晨;俞峰;姜宏;孙书龙;龚正丰;许建安【摘要】目的制作家兔膝关节骨性关节炎的模型,并通过观察软骨组织及软骨细胞退变情况进行检测.方法取健康雄性家兔12只,体质量2.0～3.0 kg,随机分为2组,假手术组、模型组,每组6只,取右膝关节内侧纵切口切断前后交叉韧带和内侧副韧带并切除内侧半月板,逐层缝合伤口.术后每日肌肉注射青霉素2×105 U,连续7d,预防感染.每日强迫家兔活动60 min.12周后,处死全部动物,取完整膝关节作为实验标本.进行形态学分析,对2组分别进行细胞培养,观察兔软骨细胞的形态学特性.结果组织形态学分析显示:假手术组藏红固绿染色显示正常组关节软骨表层光滑、平整,软骨细胞分布均匀,排序整齐,各层次清晰.模型组显示关节面软骨表层裂隙,有些出现局部缺损,软骨细胞数量明显减少,软骨层面染色不均匀,局部甚至出现失染.假手术组培养的软骨细胞大多呈梭形或短梭形,少部分呈多角形,细胞核为圆形或椭圆形,Ⅱ型胶原的表达明显;模型组培养的软骨细胞大多呈出现许多指状突起,呈多角形变化,核仁多染,细胞增殖速度明显减慢,Ⅱ型胶原的表达明显降低.结论成功制作了兔膝关节骨性关节炎动物模型,并首次运用现代技术手段进行了分析,此模型操作简单,可重复性强,为进一步研究中医药防治膝关节骨性关节炎奠定了基础.【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2014(030)005【总页数】3页(P458-460)【关键词】膝关节骨性关节炎;动物模型;实验研究;软骨细胞;细胞培养【作者】汤晓晨;俞峰;姜宏;孙书龙;龚正丰;许建安【作者单位】南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京210023;南京中医药大学附属苏州市中医医院,江苏苏州 215009;南京中医药大学附属苏州市中医医院,江苏苏州 215009;南京中医药大学附属苏州市中医医院,江苏苏州 215009;南京中医药大学附属苏州市中医医院,江苏苏州 215009;南京中医药大学第一临床医学院,江苏南京210023【正文语种】中文【中图分类】R285.5膝关节骨性关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)是一种最常见的老年性关节疾病，以关节软骨退行性改变为核心，累及骨质、滑膜、关节及其他结构的改变。
骨关节炎动物模型的建立及选择
骨关节炎动物模型的建立及选择[ 08-06-30 14:21:00 ] 编辑：studa20作者：翟吉良，翁习生，邱贵兴【关键词】骨关节炎动物模型的建立及选择骨关节炎（osteoarthritis，OA）是以关节软骨退变、关节缘骨质增生为主要改变的疾病，临床尚缺乏根治措施，建立动物模型是研究OA发病机制、治疗及预防的必要手段。
OA分继发性和原发性，故OA动物模型可从制作方法上分为两大类：一类为诱发模型，即通过各种操作方法如关节制动、手术、关节内注射物质等诱导OA产生；另一类为自发模型，即不用任何外界干预，动物自发产生OA，如C57黑鼠、STR／ort小鼠等；除以上两类模型外，还有一种模拟骨关节炎模型的方法，即关节软骨细胞体外培养。
1 诱发模型1.1 关节制动根据其制动位置可分为屈曲位、中间位、伸直位，伸直位时尚可施加外力挤压；将动物的关节长期固定于某一位置后，由于关节应力的改变可产生关节软骨退变进而形成OA。
屈曲位时因减少了横跨膝关节的肌肉的收缩而导致关节软骨的萎缩性变化；若以伸直位制动，限制了关节的运动，肌肉、关节囊收缩，对关节面产生了过度压力，导致了OA的发生〔1〕；伸直位并施加压力时因增大关节面压力而进一步促进OA的形成。
Evans等〔2〕观察发现家兔膝关节制动60 d后，大部分关节软骨的变化无法逆转；若制动不超过30 d，病变则有恢复的可能〔3、4〕。
对人膝关节制动后，其关节软骨的病变与动物实验中所见到的改变相似。
动物实验表明，无论是短期的反复制动或是持续性制动，若制动时间超过30 d，则可导致进行性OA的发生。
在研究临床OA的发病机制及治疗反应时，将兔膝关节于伸直位制动5～6周是较好的OA动物模型制作方法之一〔6〕。
尚平等〔5〕比较过屈位和过伸位固定制作OA模型的优劣，结论是两者均能成功制作OA模型，但前者简便、固定牢靠、耗材少、家兔适用性好、成功率高。
1.2 手术方法1.2.1 关节内手术1.2.1.1 前交叉韧带或（和）半月板切除关节不稳定时由于关节应力发生变化（局部增大或减小）会造成关节的退行性改变，从而导致骨关节炎的发生。
兔膝骨关节炎动物模型的构建
比较用 ｔ 验 。 Ｐ≤００ 检 ．５为差异 有统 计学 意义 。 ２ １ Ｘ线 片 观 察 结 果 ．
山东 医药 ２０ ０８年第 ４ ８卷第 ３ 期 ９
兔 膝 骨关 节 炎 动 物 模 型 的构 建
朱 长谋 ， 吴 剑 ， 同柱 鲍
（ 昌市 中心人 民 医院 ， 北 宜 昌 ４ ３０ ） 宜 湖 ４ ０ ２
［ 摘要］ 将 １ ５只实验兔 随机分为对照组（ ７只） 与实验组 （ ８只） 。对照组打开兔左膝关节腔后 ， 不作任何 处理 ， 缝合切 口； 实验组切 断兔 左膝 前交叉 韧带、 摘除 内侧半 月板 ， 合切 口。术后第 ８ ， 照组膝关 节未 出现 ｘ线 改 缝 周 对
２４ 实验 组 血 清 中 Ｉ－、 骨 Ｂｌ 、Ｎ ＿ 疫 组 ． Ｌ１软 ｃ２ ， Ｆａ免 一 Ｉ 化 检测 结果
见表 ２ 。
３ 讨 论
见 表 １ 。
２５ 两 组 血 清 中 Ｉ－、Ｎ —、 ＭＰ１ 测 结果 ． Ｌ１Ｔ Ｆａ Ｍ －３检
１３ 统计学方法 ．
２ 。结果
采用 Ｓ Ｓ １０ ＰＳ 、 Ｌ ｒ 包埋 、 片 ， Ｈ 切 行 Ｅ染色 ， 观察 关节 软骨 的层 次 、 骨 细 胞 及 软 骨 下 骨 的变 化 。取 股 骨 软 内侧髁 中央软 骨 １ｍ ｍ×１ｎｎ ｎ， ｑ ×３ｌ ａ超微 切 片 ， ｒ ｎ 透
多增 大 ， 围出现 空 隙 ， 核 固缩 ， 质 内有 大 量脂 周 胞 胞 滴及 空泡 出现 ， 膜 破 损 ， 见 软 骨 细胞 裂解 成 碎 包 甚
叉韧带 ， 除 内侧 半 月 板 。术 后 各 组 动 物 连 续 ５ｄ 摘
肌 肉注射 青霉 素 ２ 万 ｕ只 。术 后第 ８周 拍摄 兔 双 ０ ／ 膝 正 位 ｘ线 片 。两 组 动 物 于 胭 静 脉 取 血 ， 集 血 收 清 ， ＬＳ 法 检 测 Ｉ－、 Ｎ ． 基 质 金 属 蛋 白 酶 Ｅ ＩＡ Ｌ１ Ｔ Ｆａ和 （ Ｐ １ 水 平 。取股 骨 内侧 髁 关 节 软 骨 ５ｎｎ×５ ＭＭ ）３ Ⅱ
兔膝关节开放性海水浸泡损伤模型的构建
兔膝关节开放性海水浸泡损伤模型的构建李文;曾国庆;陈爱宝;杨学洪;穆继宏【摘要】目的：探索并构建理想的兔膝关节开放性海水浸泡损伤的动物模型。
方法取新西兰白兔60只，建立兔膝关节开放性损伤模型，按照不同的海水浸泡时间分为对照组、0.5 h组、1 h组、3 h组和6 h组，每组各12只。
对照组不予处理，各实验组制备膝关节开放性伤口，分别给予相应的海水浸泡时间。
术后观察实验动物伤口及存活情况，于术后7 d抽取各组白兔膝关节液，采用酶联免疫吸附法检测关节液中炎性因子白细胞介素1-β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。
结果3 h组和6 h组的7 d存活率分别为91.7%、75.0%，其余各组均为100.0%；1 h组、3 h组和6 h组的14 d存活率分别为91.7%、83.3%和58.3%，其余各组均为100.0%。
术后7 d，3 h组和6 h组中关节液IL-1β水平分别为(37.50±6.1) pg/mL和(38.40±5.1) pg/mL，明显高于其他各组，差异均有统计学意义(P>0.05)，而3 h组和6 h组中关节液IL-1β水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；术后7 d，1 h组和3 h组关节液中的TNF-α水平分别为(297.48±35.7) pg/mL和(312.84±34.0) pg/mL，高于0.5 h组和对照组，低于6 h组，差异均有统计学意义(P<0.05)，而1 h组和3 h组关节液中的TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。
结论海水浸泡3 h构建兔膝关节海水浸泡损伤的动物模型具有动物存活率高、炎性反应活跃等特点，是一种理想的关节开放性海水浸泡损伤的动物模型。
%Objective To explore and construct a rabbit model of seawater immersion after knee injury. Methods Sixty rabbits of knee injury were randomly divided into five groups:control group, 0.5 h group, 1 h group, 3 h group and 6 h group. The control group was subjected to simple knee injury, and other groups received seawater im-mersion ofdifferent duration respectively. The wound and survival was observed. After 7 days, the content of interleu-kin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in the synov ial fluid in each group was measured by en-zyme-linked immunosorbent assay. Results The 7-d survival rate was 91.7% in 3 h group, 75.0% in 6 h group, and 100.0%in other groups. The 14-d survival rate was 91.7%in 1 h group, 83.3%in 3 h group, 58.3%in 6 h group, and 100.0% in other groups. Seven days after treatment, the IL-1β levels of synovial fluid in 3 h group and 6 h group showed no statistically significant difference, which were (37.50±6.1) pg/mL and (38.40±5.1) pg/mL, but they were sig-nificantly higher than those in other groups. Seven days after treatment, the TNF-αcontent of synovial fluid in 1 h group and 3 h group, (297.48±35.7) pg/mLand (312.84± 34.0) pg/mL respectively, were significantly higher than that in 0.5 h group and control group but lower than that in 6 h group (P<0.05). Conclusion The models of seawater immersion for 3 hours after knee injury have higher survival rate and more inflammatory reactions, which are recommended.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2017(028)002【总页数】3页(P183-184,185)【关键词】膝关节;海水浸泡;动物模型;兔【作者】李文;曾国庆;陈爱宝;杨学洪;穆继宏【作者单位】中国人民解放军第425医院骨科，海南三亚 572008;中国人民解放军第425医院骨科，海南三亚 572008;中国人民解放军第425医院骨科，海南三亚 572008;中国人民解放军第425医院骨科，海南三亚 572008;中国人民解放军第425医院骨科，海南三亚 572008【正文语种】中文【中图分类】R-332随着人们对海洋的不断认识和探索，海水浸泡损伤在战创伤中所占的比例不断增大。
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茂 ；无 水 乙醇 ，天 津大 茂 ；硝 酸 ，天津 大茂 ，其他 试剂 均为 分 析
纯 。倒 置相 差显 微镜 ，德 国Ｏ ｌ ｙ ｍ ｐ ｕ ｓ 公司。
本 研究 中在 经典 模型 的基 础上 加 以改进 ，切 断前交 叉韧 带 、 切 除 内侧半 月板 ，其 优 点主要 表 现在 ，创 伤不 大 ，且方 便取 关节 液 ，１ ０ 周模 型可 见股 骨 内骸 和胫 骨 内侧 平 台软 骨缺 失骨 质暴 露及 周 围明显 增 生 的骨赘 ，关 节 的缓 冲作用 减少 ，胫 股 关节 面应 力局
退变 的起 始 环节 ，加 之长 期被 迫 活动进 一 步加重 了软骨 损伤 而形 成ＯＡ。 １ ０ 周 内可 成 功复 制 出 膝不 骨关 节 炎 ，其 在 外观 观 察 和病
理学均和临床观察一致，与病理进展有一定相关性。本研究证实
了此 种改 良方 法 的可 行性 ，且 为利 用此 动物 模 型进 行骨 关节 炎 的 深入 研究 打下 了基 础 。
吉林医学２ ０ １ ３ 年１ １ 月第３ ４ 卷第３ ３ 期
・ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
６ ８ ８ ３
实验 研 究
・
兔膝 骨关 节炎 动物模 型 的构 建
王栋栋 ，熊健斌 （ 广西柳州市人 民医院骨科 ，广西 柳州 ５ ４ ５ ０ ０ １ ）
【 摘 要】 目的 ：建 立一 种符 合临 床症 状 的兔 膝 骨关 节炎 动物 模型 。方 法 ：家兔 随机 分为 对照组 与 实验组 ，实 验组 麻醉 剪断 前后交 叉 韧 带 ，同时 去 除 内侧半 月板 建立 兔 膝骨关 节 炎动 物模 型 ，对 照组 不做 处理 ，取 造模 部位 股 骨端 进行 Ｈ Ｅ 染 色 ，统计 分析 。结 果 ：实验 组
学 杂 志， ２ ０ ０ ４ ， １ ４ （ １ ） ： ４ １ ．
２ 结 果
对 照 组 家兔 滑膜 、软 骨 外 观基 本 正 常 ，呈 蓝 白色 ，色 泽 明 亮 ，无 裂 纹及 软化 ，滑液 量少 透 明 。实验 组家 兔 滑膜 部分 呈结 节 样 增生 ，滑液 量少 但 混浊 ，软骨 缺损 形成 ，深 达 骨质 ，软 骨下 骨 暴 露 ，骨赘 形 成 。Ｈ Ｅ 染 色 ：对 照组 关 节 软 骨表 面 光 滑 ，软骨 细
后 ，处死家兔 ，观察膝关节积液 、滑囊肿胀及软骨的改变 。取造
模 部 位 股骨 端 ，１ ０ ％甲醛 固定 、 １ ０ ％硝 酸脱 钙 、石 蜡包 埋 切 片 ，
进行ＨＥ 染色。
４ 参 考 文 献 ［ １ ］ 欧云 生， 安 洪． 鼠骨关 节炎 动物 模 型建 立 的现状 ［ Ｊ ］ ． 中 国 比较 医
兔膝 关 节滑 膜 细胞 轻度 增 生 ，下层 疏 松纤 维姐 织 增生 ，胶 原 化 ，可见 少 量散 在 淋 巴浆 细胞 浸润 ，部 分 区域 软骨 细胞 核 固缩 、裂解 、坏
死 ，偏 于一 侧 ，钙 化层 软骨 细胞 呈 簇状 堆 积 ，排 列紊 乱 ，潮 线多 不规 整 或完 全 消失 ，甚 至软 骨下 骨 质外 露 、软 骨下 骨囊 性变 。结 论 ： 剪断 前后 交叉 韧带 合并 去除 内侧半 月板 可 成功 建立 符合 临床 变化 的兔 膝骨 关节 炎动 物模 型 。 【 关 键 词】 兔 膝 骨 ；关 节炎 ；动 物模 型
后 ，消毒处理 ，取 内侧髌旁人路 ，切断 内侧副韧带 ，打开关节
腔 ，剪 断前 后交 叉 韧带 ，同时 去除 内侧 半月 板 ，手术 结束 后 ，止 血 并缝 合 伤 口。家 兔 正 常 饲养 于标 准 家 兔 饲 养 笼 中 ，不 限制 饮 食 ，不 固定 患 肢 ，可 自由活 动 【 ２ １ 。② 实验 指 标 的测 定 ：造 模 １ ０ 周
骨性 关节 炎 （ Ｏ Ａ）是一个 多病 因 、发 病机制 复杂 的常见 病 ， 外 露 、软骨 下骨 囊性 变 。 ３ 讨 论
目前 各 种 Ｏ Ａ动 物模 型制 作 方 法周 期 长 、操 作复 杂 、损 伤 大 】 。 寻找 一 种理 想 的 造模 方 法 是研 究 膝 Ｏ Ａ的关 键 所在 。本 实验 拟 在 Ｈｕ ｌ ｔ ｈ 模 型 的基 础 上 ，克 服其 原 来缺 点 ，建立 更 符 合 临床 症 状 的 兔 关节 炎模 型为探 讨关 节 炎 的发病 机制 及 骨关 节炎 软 骨修 复研 究 提 供 了科学 的研究 平 台。 １ 资 料 与 方 法 １ ． １ 一般 资 料 ：新 西 兰 家 兔 ，雌 雄 各半 ，体 重 １ ． ８ ～２ ． ２ ｋ ｇ ，１ ８ 只 ，普 通级 ，由广西 医科 大学 大学 实验 动 物 中心提供 。
部增 大 ，分 布不 均 ；切 断前交 叉 韧带 造成 膝关 节失 稳 ，形成 软骨
１ ． ３ 实 验 方 法 ：① 实 验 分 组 ：家 兔 按体 重 性 别 随机 分 为 实 验组 与对 照 组 ，实 验组 实验 方法 制 备关 节炎 模型 ，而对 照组 家兔 不做 处 理 。 模 型 制备 ：家 兔 麻 醉 后 ，使 用 剃 须 刀 将 关 节 处 处 理 干净
１ ． ２ 药 品 和试 剂 与 仪 器 ：ＨＥ 染 液 ，南 京 建成 ；甲 醛 ，天 津 大
几十年 来 国内外相 继报道 了多个动 物模 型对应 于临床 ， ０ Ａ 有 原发 『 生和继发性 ，故从制 作方 法上可将 Ｏ Ａ 动 物模 型分为 两大类 ， 其 一 为诱发 模 型 ，即通 过各 种操 作方 法 如制 动 、手术 、关 节 内注 药 、关 节 内植 入软 骨碎 片或微 粒等诱 导０ Ａ 产 生 ；另一类 为 自发模 型 ，即不用 任何外 界 干预 ，动物 自发Ｏ Ａ，￣ ｎ Ｃ ５ ７ 黑 鼠等 ］ 。最经 典 的是 传 统 Ｈ ｕ ｌ ｔ ｈ 造 模 法 ，但 该 方 法仍 具 有其 局 限 性 ，主要 表现 在切 除 了膝 关节 维持 静 态稳定 的主要 韧带 ，造 成关 节极 其不 稳 ，