动物细胞融合.1ppt课件
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动物细胞融合和单克隆抗体公开课ppt课件
8
二：动物细胞融合的成功应用
思 考
——单克隆抗体的制备
• 人们获得抗体的传统方法是?
– 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体
• 这种方法的缺点是什么?
– 效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能 产生严重的过敏反应。
• 运用已学知识，设想怎样获得单一类型的抗体？
• 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来
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7
Hale Waihona Puke 结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理 融合前处理 诱 导方法
细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、 果胶酶去壁
用胰蛋白酶 使细胞分散
物理、化学方法
物理、化学、 生物方法
用
途
获得部分 或完整植株
主要用于制备 单克隆抗体
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2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质， 不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的 本领，因而可以获得大量单克隆抗体
3）、为何要进行两次筛选？
第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得 到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。
4）、如何进行第2次筛选？ 培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。
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病毒颗粒黏 附细胞表面 细胞膜被 病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合、形成杂种细胞 5
3、动物细胞融合技术的应用
• 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使
远缘杂交成为可能。
• 利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。
ppt课件.
《动物细胞融合》课件
动物细胞融合的原理
1
化学法
2
在细胞膜中加入一些化学物质，可以
使细胞产生缺陷并相互融合。
3
电击法
通过电击细胞，使细胞膜破裂，进而 使细胞壁相互融合。
病毒法
利用病毒感染细胞，和另一种病毒感 染的细胞相互融合。
动物细胞融合的应用领域
动物杂交
将两种动物细胞融合，从而产 生杂交动物。
细胞治疗
将融合细胞注入患者身体的某 些器官或组织，以实现治疗效 果。
2
应用前景
动物细胞融合技术在医学、农业和生态学领域都有广泛的应用前景。
3
技术改进
随着技术的不断发展，动物细胞融合的技术也会不断改进。
结论和要点
定义
动物细胞融合是将动物细胞融合成一个具有 合成细胞能力的细胞的过程。
实验步骤
动物细胞融合的实验步骤包括选择合适的细 胞、使细胞膜受损以及将细胞融合。
应用
动物细胞融合技术已被广泛应用，包括医学、 农业和科学研究等领域。
未来发展
动物细胞融合技术未来会有更广泛的应用和 更进一步的发展。
伦理问题
由于动物细胞融合技术的不 断发展，可能会导致一些伦 理问题的出现。
安全问题
由于这种技术仍处于发展过 程中，因此存在一些安全风 险。
长期影响
长期使用这种技术可能会产 生负面影响，这仍需要进一 步的研究。
动物细胞融合的未来发展
1
研究潜力
动物细胞融合技术具有许多潜在的研究价值，可以用于研究生命科学、医学等领 域。
基因编辑
利用动物细胞融合的技术，将 新的基因编辑到细胞中，从而 产生具有特定基因的生物。
动物细胞融合的实验步骤
1 选择合适的细胞
《动物细胞融合》幻灯片
单抗导向，药物为
弹头
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗 体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺 序是？
2.3单克隆抗体的应用
单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏 度高，并能大量制备。
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
（二选）：选 能产生所需专 一抗体的杂交 瘤细胞
体外培养
小鼠腹腔内培养
获得产生相应 抗体的B细胞
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基： 只有杂交瘤 细胞才能存 活
治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是〔 A〕
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细 胞
B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋 巴细胞
【例5】单克隆抗体是由以下哪种细胞产生的
〔 D〕
B淋巴细胞 B．T淋巴细胞
C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞
【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，以
下实验步骤中错误的选项是B〔 〕
（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内 诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及 原因是大量生产选①，小规模生产。选②
（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因 为它是用小鼠的__效__应__B_细胞制备的，其化学本质是 ____蛋__白__质___，应用于人体，会作为 异物 产 生 免疫反应 ，解决这个问题的方法是 ___采__用___人__的__效__应___B_细__胞___制__备____。
弹头
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗 体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺 序是？
2.3单克隆抗体的应用
单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏 度高，并能大量制备。
诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融 合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
（二选）：选 能产生所需专 一抗体的杂交 瘤细胞
体外培养
小鼠腹腔内培养
获得产生相应 抗体的B细胞
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基： 只有杂交瘤 细胞才能存 活
治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗 癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是〔 A〕
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细 胞
B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋 巴细胞
【例5】单克隆抗体是由以下哪种细胞产生的
〔 D〕
B淋巴细胞 B．T淋巴细胞
C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞
【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，以
下实验步骤中错误的选项是B〔 〕
（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内 诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及 原因是大量生产选①，小规模生产。选②
（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因 为它是用小鼠的__效__应__B_细胞制备的，其化学本质是 ____蛋__白__质___，应用于人体，会作为 异物 产 生 免疫反应 ，解决这个问题的方法是 ___采__用___人__的__效__应___B_细__胞___制__备____。
人教版生物选修三专题--动物细胞工程-课件-共张ppt
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
受精作用
正在融合的细胞
动物细胞融合技术的发展简史：
1、20世纪30年代，在肺结核、天花等病理组织中观 察到多核细胞；
2、20世纪70年代，在蛙的红细胞中观察到多核细胞； 3、1962年，发现日本血凝性病毒能引起艾氏腹水瘤
细胞融合成多核细胞； 4、1965年，证实了灭活的病毒在适当条件下可以诱
疫作用。 3、每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。
不能无限增殖 单克隆抗体
由单个B淋巴细胞经无性繁殖（克隆），形成 基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化 学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 细
胞
小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 融
合
杂交瘤细胞 技 （动物细胞培养技术大量培养）术
此外，体细胞核移植后的重组细胞直接发育成新个体 属于无性繁殖，产生的后代无更大变异性，而环境是
多变的，易造成该个体适应能力降低，易被淘汰。
P50 思考与探究
2.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？
动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化 的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个 体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组 织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的 动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细
绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量 的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习 性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克 隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不 可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是
动物细胞融合 PPT课件
体外培养 小鼠腹腔内培养
获得产生相应 抗体的B细胞
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基： 只有杂交瘤 细胞才能存 活
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗 体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺 序是？
2.3单克隆抗体的应用
单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏 度高，并能大量制备。
“太空婚礼”
2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太 空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞 “新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原 生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和 骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合 仪内孕育新生命。 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
动物细胞培养过程 两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒
三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的
（ D）
A. B淋巴细胞
B．T淋巴细胞
C．骨髓瘤细胞
D．杂交瘤细胞
【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术
植物体细胞杂交过程示意图
获得产生相应 抗体的B细胞
√ BB 、B瘤 、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选 择性培养基： 只有杂交瘤 细胞才能存 活
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗 体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺 序是？
2.3单克隆抗体的应用
单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏 度高，并能大量制备。
“太空婚礼”
2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太 空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞 “新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原 生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和 骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合 仪内孕育新生命。 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋 巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的 细胞群，培养后提取单克隆抗体
动物细胞培养过程 两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法 －－灭活病毒
三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的
（ D）
A. B淋巴细胞
B．T淋巴细胞
C．骨髓瘤细胞
D．杂交瘤细胞
【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋 巴细胞
植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术
植物体细胞杂交过程示意图
新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程：动物细胞融合技术与单克鹿体pptx课件新人教版选择性必修3
正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
1965年，研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合。
一、动物细胞工程
2.动物细胞融合
病毒的灭活 ：灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能 力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
仙台病毒
紫外线 灭活
丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合）
讨论： 1.但如何才能让两个不同的细胞融合? 2.细胞融合技术在生产实践中有哪些应用?
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
动物细胞融合技术的发展历史
时间
19世纪30年代 1858年 1875年 1876年 1962年 1965年 1974年
1975年
20世纪80年代
成果
观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞 观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。 第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。 在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。 日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。 英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合 华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分 泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。 发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)
思考：诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？
不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未 融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需 要进行筛选。
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
(5)意义： ①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 ②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要 手段。 ③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体 开辟了新途径。
《动物细胞融合》课件
01
02
03
04
准备细胞
选择适当的动物细胞，进行培 养和传代。
诱导融合
根据所选择的诱导方法，将细 胞进行融合处理。
筛选融合细胞
通过特定的筛选方法，如克隆 形成或荧光激活细胞分选（ FACS），筛选出融合的细胞
。
培养与扩增
对筛选出的融合细胞进行培养 和扩增，以获得足够的细胞数
量。
动物细胞融合的注意事项
细胞兼容性
确保所选择的两种或多 种细胞具有相容性，以
便能够成功融合。
融合效率
了解并优化不同诱导方 法的融合效率，以提高
实验效果。
安全性
确保实验过程的安全性 ，避免对操作者和环境
造成危害。
法规遵循
遵守相关法律法规和伦 理规范，确保实验的合
法性和道德性。
03
CHAPTER
动物细胞融合的实验结果
融合细胞的形态学观察
融合方式
主要通过物理、化学或生物技术 手段实现，如电融合、聚乙二醇 （PEG）诱导融合、病毒诱导融 合等。
动物细胞融合的意义
生物医学研究
动物细胞融合可用于研究细胞生 长、分化、肿瘤形成等生物学过 程，有助于深入了解生命活动的
本质。
疾病治疗
动物细胞融合技术可用于制备单克 隆抗体、治疗某些遗传性疾病和免 疫缺陷疾病等，为疾病治疗提供新 的手段。
遗传性疾病治疗
动物细胞融合技术可用于治疗某些遗 传性疾病，如血红蛋白病、囊性纤维 化等。
02
CHAPTER
动物细胞融合技术
诱导动物细胞融合的方法
01
02
03
化学法
利用化学物质如聚乙二醇 （PEG）诱导细胞融合。
2022-2023学年 苏教版 选择性 必修三 动物细胞融合技术和干细胞技术(77张)课件
或椭圆球
圆球形
小
大
胚胎干细胞和成体干细胞
全能 干细胞、多能干细胞和单能干细胞
毒理特性
定向分化 排斥 药效
(1)细胞融合体现了细胞质膜的流动性。( √ ) (2)通过诱导只能使同物种细胞发生融合，而不能使不同物种的细胞之间发生融 合。( × ) (3)二倍体动物细胞融合后的杂种细胞仍然是二倍体细胞。( × ) (4)浆细胞与骨髓瘤细胞融合后需要进行筛选。( √ ) (5)不同类型的干细胞，它们的分化潜能完全相同。( × ) (6)干细胞技术可应用于疾病治疗、新药研制和开发。( √ )
第2课时 动物细胞融合技术和干细胞技术
课程内容标准
核心素养对接
(1)阐明动物细胞融合是指通过物理、 (1)科学思维——列表比较动物细胞融
化学或生物学等手段，使两个或多个 合与植物体细胞杂交。
动物细胞结合形成一个细胞的过程。 (2)科学思维——构建单克隆抗体制备
(2)概述单克隆抗体的制备过程。 的流程图。
(2)诱导融合的具体方法有__病__毒___诱__导__融__合__法__、__聚__乙__二__醇__诱__导__融__合__法__、__电__场__诱_ _导__融__合__法___ 。 在 各 种 方 法 的 促 融 合 作 用 下 ， 细 胞 质 膜 出 现 __粘__连__、__破__裂__和__融__合__，进而发生__细__胞__质__融__合__和__细__胞__核__融__合__，最终形成杂种 细胞。
1.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞质膜的流动性、细胞的全
原理
细胞质膜的流动性
能性
酶解法去掉细胞壁后，诱导原
动物细胞融合过程示意图ppt课件
B
）
C．电刺激
骨髓瘤细胞
B
杂交瘤细胞
C
足够数量的细胞群 体外培养 注射到 小鼠腹腔
原代 (5).C过程指细胞培养，该过程包括________ 培养和 传代 50 代以内的的细胞属于 __________ 培养两个阶段，其中_____ 细胞株。
1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？
不能
二、单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的？
效应B细胞（浆细胞）
提 问
2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？
每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
动物细胞融合过 程示意图
思考题
1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？
酶融合时需要进行去壁处理吗？为什么？
无需，因为动物细胞无细胞壁
3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、电激等物理方法；PEG等化学方法
4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
4.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破 伤风杆菌的实验方案
A
制备单克隆抗体 (1).该实验方案的目的是： ________________ (2).该方案能达到预期效果吗？为什么？ 不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产 生单一抗体的B淋巴细胞。 (3).A是从小鼠的脾脏中取得__________ B淋巴细胞 该细胞能 抗体 。 够产生______ 细胞融合 (4).图中B为________________ 过程，常用 灭活的病毒 _________________ 作为诱导剂，该细胞继承 ___________ 双亲细胞 的遗传特性，既能__________, 分泌抗体 又能 无限增殖 。 ___________
高二生物动物细胞融合与单克隆抗体1PPT课件
体AB
再 生 细
导
胞
壁
杂
种
细 胞
脱 分
AB 化
愈
杂
伤
种
组 织
再 分
植 株
化
3
动物细胞融合
概念： 也称细胞杂交。
是指两个或多个动物细 胞结合形成一个细胞的 过程。
杂交细胞：融合后形成
的具有两个或多个细胞
遗传信息的单核细胞。
4
动物细胞融合
原理： 细胞膜的流动性 诱导融合方法：
物理法: 离心、振动、电刺激 化学法: 聚乙二醇（PEG） 生物法：灭活的病毒
课程或者工作有什么建议和意见，也请写在上边
23
感谢您的观看与聆听
本课件下载后可根据实际情况进行调整
24
5
• 为什么灭活的病毒能作为诱导剂？ • 不灭活的病毒能作为诱导剂吗？
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 6
融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细 胞桥的变化过程图解
7
• 为什么灭活的病毒能作为诱导剂？ • 不灭活的病毒能作为诱导剂吗？
生物法：灭活的病毒
仙台病毒 紫外线
丧失感染性 （不感染细胞）
保留融合活性8
动物细胞融合
动物细胞融合技术的意义
➢打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ➢广泛应用多个学科领域； ➢重要用途：制备单克隆抗体。
9
单克隆抗体
1.抗体是由何种细胞产生的？ ２.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体 吗？ ３.简述获得抗体的传统途径？ ４.这种方法获得的抗体有制备过程：
1.注射抗原的目的是什么？ 2.诱导其融合的方法有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞？ 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有 何优点？ 5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测， 多次筛选？ 6.大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法?
动物细胞融合1ppt课件
形成杂种细胞， 生产细胞产品
培育新品种
制备单克隆抗体、病 毒疫苗、干扰素等
意义 突破有性杂交方法的精品局课件限，使远缘杂交成为可1能3
1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确
的是 D
A．诱导融合的方法完全相同
B．所用的技术手段完全相同
C．所采用的原理完全相同
D．都能形成杂种细胞
精品课件
14
A
1、该实验方案的目的是___制___备__单__克隆抗体
骨髓瘤细胞 B
2、该方案能达到预期效果吗？为什么？
杂交瘤细胞
因为没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生此种抗体的效应B细胞
3、A是从小鼠的脾脏中取得___B_淋___巴, 细胞 该细胞能够产生__抗__体__
C
4、图中B为细_胞___融__合__过程，常用 灭___活__病__毒__作为诱导剂，该细胞继承 __双___亲__细__胞__的遗传特性，既能
无需，因为动物细胞无细胞壁 可用胰蛋白酶将细胞分散
3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？
离心、振动、电激等物理方法；聚乙二醇等化学方法
4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？
能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形
成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体
精品课件
9
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
灭活的病毒颗粒黏附于 细胞表面
病毒颗粒 细胞核
细胞核
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合，形成单核杂交细胞
原理：细胞膜具有一定的精流品课动件 性
有丝分裂
10
动物细胞融合.1ppt课件
7. 应用：
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗 体
ppt课件完整
12
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
细胞融合原理
细胞融合的方法
动物细胞融合
诱导方法
用途
ppt课件完整
13
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱
原生质体融合
导细胞融合
诱导方法 物理（离心、振荡、 物理、化学方法
电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
获得杂种植株 制备单克隆抗体
ppt课件完整
21
5、怎样才能获得单克隆抗体？
设计方案：
一个B淋巴细胞
——只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞
——能无限增殖
既能产生一种特异性 抗体，又能无限增殖ppt课件完整
杂交细胞
22
二、单克隆抗体
1、单克隆抗体的概念
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克 隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞 群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体 称为单克隆抗体。
15
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱
原生质体融合
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比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱
原生质体融合
导细胞融合
诱导方法 物理（离心、振荡、 物理、化学方法
电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
精品课件
16
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
免疫原理，细胞融合原理和动物细 胞培养原理
2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双
亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞
分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增
殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体
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25
三、单克隆抗体的应用
单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高
1、作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与 抗原特异性结合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法
诱导方法
用途
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14
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱
原生质体融合
导细胞融合
诱导方法
用途
精品课件
15
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
优点：准确、高效、简易、快速
2、用于
治疗疾病：主要用于癌症治疗 运载药物：制成“生物导弹”
优点：疗效高、毒副作用小
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26
小结
两个过程
动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法
－－灭活病毒 三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势
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设计方案：
一个B淋巴细胞
——只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞
——能无限增殖
既能产生一种特异性 抗体，又能无限增殖精品课件
杂交细胞
22
二、单克隆抗体
1、单克隆抗体的概念
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克 隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞 群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体 称为单克隆抗体。
/
专题二细胞工程
乌苏高二生物
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1
动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞培养 核移植技术 动物细胞融合
单克隆抗体技术 胚胎移植技术
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2
细胞贴壁过程
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3
克隆步骤上
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4
克隆步骤下
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5
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6
动物细胞能否融合呢？
细细胞胞AA
细胞B
杂种 细胞
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7
资料 太空中的“婚礼”
27
1、动物细胞工程技术的基础是：（ Ｃ ） A．动物细胞融合 B．胚胎移植 C．动物细胞培养 D．核移植
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２．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 确的是（ Ｂ ） A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同
C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同
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29
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杂种细胞
新城鸡瘟病毒
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种
细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛
选杂交细胞
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10
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
病毒颗粒 黏附在细 胞表面
病毒颗粒 细胞核
细胞核
病毒颗 粒穿通 细胞膜
结束的标志
细胞膜连接
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11
6.意义：
突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。
7. 应用：
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段
特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗 体
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12
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交
细胞融合原理
细胞融合的方法
动物细胞融合
诱导方法
用途
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13
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
抗原 刺激
抗原不纯
动物体 浆细胞 抗体
抗体不纯
筛选单一浆细胞
不能增殖产生大量抗体
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20
5、怎样才能获得单克隆抗体？
提示1：仅用细胞培养技术可行吗？
提示2：我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？
提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体 的能力和肿瘤细胞无限增殖能 力同时具备呢？
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21
5、怎样才能获得单克隆抗体？
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8
一、动物细胞融合
1.概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个
细胞的过程。
2.结果： 形成单核的杂交细胞
3.原理： 细胞膜的流动性
物理法：离心、振动、电激
4.诱导方式 化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法精品课：件 灭活的病毒
9
5.过程：
细胞A 物理法、化学法
细胞B 灭活的病毒
仙台病毒 疱疹病毒
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 使细胞分散后诱
原生质体融合
导细胞融合
诱导方法 物理（离心、振荡、 物理、化学方法
电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
获得杂种植株 制备单克隆抗体
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17
问题
1.什么是抗体？
抗体是具有免疫作用的蛋白质。
2003年1月5日，“神舟”四号准备着陆。这次历时 6天零18个小时的太空飞行，开展了多项在轨研究，其 中有一项被媒体描述成“太空婚礼”的生物实验。不过， “婚礼”中的“新郎”和“新娘”是一些体细胞：动物 细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，植物细 胞“新人”是有液泡的黄花烟草原生质体和脱液泡的革 新一号烟草原生质体。作为“新房”的是一个黑色的小 盒子----电融合仪。这是科技工作者在空间微重力条件 下进行的细胞融合实验。160min后，中国首批“太空 娃娃”终于顺利诞生。
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2、单克隆抗体制备过程
注射抗原
B淋巴 细胞
骨髓瘤 细胞
具有两个亲本的特性，
细胞融合、筛选
即能迅速大量增殖，
注
又能产生足够数量的
射
杂交瘤细胞 细胞培养
单一抗体。
到 体小外鼠 培腹来自筛选,继续培养单克隆抗体
养 腔 足够数量的、能产生 精品课特件 定抗体的细胞群 24
思考：
1.本过程利用了哪些原理？
2.抗体是由何种细胞产生的？
B淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化为 浆细胞，浆细胞可以产生抗体。
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问题
3、抗体有哪些特点？
1）. 每一个B淋巴细胞只分泌一种 特异性抗体。
2）.每种抗体只能与特定的抗原发生 结合反应。
4、传统的抗体生产方法及缺陷是什
么？
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常规抗体的缺陷
特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏