蛋黄总胆固醇的测定

二.实验原理
其溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯 仿等溶剂。胆固醇是动物组织细胞所不可缺少的重 要物质，它不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁 酸，维生素D以及甾体激素的原料。
二.实验原理
• 胆固醇的临床意义：血清胆固醇水平，能够反应 胆固醇的摄取合成及转送情况。血清胆固醇水平 升高，与动脉稠样硬化，肾病综合症，重症糖尿 病等有关。血清胆固醇降低，提示可能患有恶性 贫血，溶血性贫血，甲状腺机能亢进，营养不良 等。因此，总胆固醇测定在临床上有重要意义。
1
0 0.5 0.5 4.0 0
2
0.1 0.4 0.5 4.0 20
3
0.2 0.3 0.5 4.0 40
4
0.3 0.2 0.5 4.0 60
5
0.4 0.1 0.5 4.0 80
6
0.5 0 0.5 4.0 100
四.实验步骤
• 样品测定：取10ml待测鸡蛋黄溶液，用冰醋酸定 容至100ml，取四支试管，分别如下表加入试剂 ，加毕，20~40摄氏度温水浴10min，在550nm 下测定得到A值
• 4.巩固分光光度法的基本原理和分光光度计的使 用方法
二.实验原理
• 中文名称：胆固醇 • 英文名称：cholesterol， Ch • 定义：学名：5-胆烯-3-β-醇。
• 胆固醇又称胆甾（zai）醇。一种环戊烷多氢菲的衍生 物。早在18世纪人们已从胆石中发现了胆固醇，1816 年化学家本歇尔将这种具脂类性质的物质命名为胆固 醇。胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织 中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高 。
三.仪器与试剂
• 仪器：电子分析天平，分光光度计，容量瓶（ 100ml，50ml），移液管，量筒 • 试剂：邻苯二甲醛，冰醋酸，浓硫酸，无水乙醇 胆固醇（C.P.），鸡蛋
四.实验步骤
• （1）标准胆固醇溶液 准确称取胆固醇100mg，以 冰醋酸定容至100ml。 25ml浓硫酸+25ml冰醋酸 称取邻苯二甲醛50mg，以 冰醋酸定容至50ml
• 绘制标准曲线：取六支试管，编号后按下列 表格中的用量加入试剂，加毕，混匀。20~40 摄氏度水浴10min，在550nm下观测吸光度。 以总胆固醇量为横坐标，A值为纵坐标绘制标 准曲线。
四.实验步骤
管号
标准胆固醇 工作液/ml 冰醋酸/ml 邻苯二甲醛 试剂/ml 混酸/ml 总胆固醇当 量 /mg/100ml
样品 待测鸡蛋黄溶 液/ml 冰醋酸/ml 邻苯二甲醛试 剂/ml 混酸/ml 1 0.50 0 0.50 4.00 2 0.50 0 0.50 4.00
五.实验记录
• 绘制标准曲线
管号 1 2 3 4 5 6
吸光度 （A）
五.实验记录
• 测定及蛋黄中胆固醇含量
wenku.baidu.com管号
吸光度（A) 校正后取 2~4号平均 值
1
2
3
4
• 一个成人平均一天摄取胆固醇量以50~300mg为 宜，大约一个鸡蛋。
二.实验原理
• 总胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式 存在。我们测定的是它的含量，分为五类方法：1. 化学试剂比色法 2.酶分析法 3.荧光法 4.气相法 5.高 效液相法
• 本次试验采用化学试剂比色法中的胆固醇及其酯在 硫酸存在下与邻苯二甲醛作用产生紫红色产物。产 物在553nm处有最大吸收，可以用分光光度法测定 。胆固醇含量400mg/100ml之内与吸光度呈良好的 线性关系。鸡蛋黄总胆固醇含量约为292.5mg/50g 。
蛋黄总胆固醇的测定
第三军医大学学员旅二队 方案设计：梁恭博 汇报：张臣科 PPT制作：徐喆
• Ⅰ.Purpose
Determine CHO Of Egg Yolk
• Ⅱ.Principle
• Ⅲ.Instrument And Reagent • Ⅴ.Steps • Ⅵ.Data
一.实验目的
• 1.查阅相关资料，了解测定蛋黄总胆固醇的临床 意义和几类方法。 • 2.学习实验设计的基本方法和步骤，设计出用分 光光度法测定蛋黄总胆固醇的实验方案。 • 3.用分光光度法测量出蛋黄总胆固醇含量
• （2）混合酸 • （3）邻苯二甲醛试剂
四.实验步骤
• （4）标准胆固醇工作液 • 取10ml标准液以冰醋酸稀 释定容至100ml • 待测鸡蛋黄溶液：取1.0g 煮熟的蛋黄，溶于冰醋酸 ，转移至容量瓶中，定容 至100ml，混匀
• （5）待测鸡蛋黄溶液
以上，是标准液与待测液的配置
四.实验步骤