生化试剂SOP标准操作程序(魅力)

ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。临床上，有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。如肝胆类疾病：包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；心血管疾病：包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高：如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。

因此，血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测，特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采用两步法测定：

丙氨酸氨基转移酶

L-丙氨酸+ α-酮戊二酸-----------------------→丙酮酸+ L-谷氨酸

乳酸脱氢酶

丙酮酸+ β-NADH + H+---------------→L-乳酸+ H2O + NAD+

底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.

在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。

样本：

病人准备：应空腹取血。

样本类型：新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使用冰冻保存的样本2。

仪器与试剂:

仪器：魅力1800生化分析仪

试剂：上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适，应前往医院诊治。

3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数≤5%；

批间相对极差≤6%。

2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～1000U/L（37℃）。

4.分析特异性（抗干扰能力）：

本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰。

5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。

变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

魅力1800开机

①装载试剂

②输入参数

③实施校准

④加载样本

和仪器有关的操作程序请参照魅力1800用户手册。

计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：8～40U/L（37℃）。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。每个实验室应建立自己的参考值。不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在魅力1800中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，魅力1800可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1. Expert Panel on Enzyme . Scientific Committee.International Federation of Clinical Chemistry:IFCC Methods for alanine aminotransferase(stage 2,Draft 1979-11-19). Clin .

Chem .Acta. 147F-172F(1980).

2. 叶应妩，王毓三；全国临床检验操作规程（第三版）

3.Young,D.S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.

SOP标准操作程序

AST/GOT 天门冬氨酸氨基转移酶（紫外-苹果酸脱氢酶法）试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活力。

天门冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞内含量较多，当心肌梗塞时，血清中天门冬氨酸氨基转移酶活力增高，48小时内达到高峰。约在3-5天内恢复正常。各种肝病也可引起血清天门冬氨酸氨基转移酶升高，中毒性肝炎可更高。肌炎，胸膜炎，肾炎及肺炎等也可引起其轻度升高。

方法原理：

紫外—苹果酸脱氢酶法（UV-MDH）1~5

AST

L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸------→草酰乙酸+ L-谷氨酸

MDH

草酰乙酸+ NADH + H+ --------→L-苹果酸+ NAD+ + α-酮戊二酸

底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH的氧化，引起在波长340 nm处吸光度下降，下降速率与血清中AST活力成正比。

样本：

样本类型：新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。

最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清中的AST在2～8℃可稳定7天。

仪器与试剂:

仪器：魅力1800生化分析仪

试剂：上海科华生物工程股份有限公司的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试