ISO6579食品和动物饲料微生物学沙门氏菌检测

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国际标准 ISO 6579食品和动物饲料的微生物学——沙门氏菌检测的基准方法内容1 范围2 参考标准3 定义4 原理4.1 概要4.2前增菌——非选择性液体培养基4.3 增菌——选择性液体培养基4.4 划平板和鉴定4.5 确认5 培养基、试剂和血清5.1 概要5.2 培养基和试剂5.3 血清6 设备和玻璃器皿7 采样8 检验样品的制备9 程序9.1 试验样品和原始悬浮液9.2 非选择性前增菌9.3 选择性增菌9.4 划平板和鉴定9.5 确认10 结果表示11 检验报告12 质量保证附录A (标准化)程序图表附录B (标准化)培养基和试剂的成份及准备附录C (非标准化)实验室间试验结果参考书目ISO(国际标准化组织)是国际标准化团体的全世界同盟。

通常由ISO技术委员会来执行国际标准的制订工作(ISO成员体)。

通常由ISO技术委员会来完成国际标准的准备工作。

在委员会中,若对建立的技术委员会有兴趣的话,每个成员体有权作为代表。

国际组织、政府或非政府组织,通过ISO联系,也可以参加这项工作。

在所有电工标准方面,ISO与国际电工委员会(IEC)紧密合作。

国际标准按照ISO/IEC指南第三章所列的规则草拟。

技术委员会的主要任务是准备国际标准。

被技术委员会采用的国际标准草案以投票方式在成员体内运行。

至少要75%成员体的投票赞成,才能作为一个国际标准发布。

要引起注意的可能性是:本国际标准的一些要素可能是专利权主体。

ISO不应承担鉴定部分或全部的这种专利权。

ISO6579是由食品ISO/TC34技术委员会、微生物SC9分委员会所准备的。

第四版删除或更换了第三版(ISO6579:1993),并已作了技术性修订。

附录A和附录B形成了本国际标准的标准化部分。

附录C仅为资料。

因为有大量的不同种类的食品和饲料产品,本基准方法可能对某些产品并不完全适用,而另一些产品可能得用到其他方法。

既然这样,如果为论证技术上的原因而绝对需要时,那么就可使用这些产品指定的不同方法。

食品沙门氏菌测试方法标准

食品沙门氏菌测试方法标准

食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤:
1.样品采集:从待检测的食品中采集适量样品,确保样品的代表性。

2.样品处理:将采集的样品进行适当处理,如破碎、研磨等,以便后续的
检测操作。

3.增菌培养:将处理后的样品接种到选择性培养基中,进行增菌培养。


择性培养基可以抑制其他微生物的生长,促进沙门氏菌的增殖。

4.分离培养:将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上,进行分离培
养。

鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌,并对其进行鉴别。

5.生化鉴定:对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定,以确定其是否为
沙门氏菌。

常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。

6.血清学鉴定:对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定,以确定其
具体血清型。

常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。

7.药敏试验:对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验,以确定其对不同药物
的敏感性,为临床治疗提供参考。

需要注意的是,食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。

因此,在实际操作中,应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病,可能会导致严重的胃肠道感染。

为了保障食品安全,确保公众的健康,我们需要进行沙门氏菌的国标检验。

下面是一份生动、全面且有指导意义的文章,详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。

第一步:样品准备在进行沙门氏菌检验之前,我们首先需要准备样品。

常见的样品包括食品、水、动物排泄物等,可能携带沙门氏菌。

样品应该收集自具有代表性的地点,并采取无菌采样容器进行收集。

收集样品时要注意避免污染,并确保样品的数量足够进行检验。

第二步:样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来,并进行后续的检测。

可以采用不同的方法进行样品处理,常见的方法包括富集培养和选择性培养。

富集培养是将样品放入富集培养基中,利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。

选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长,从而使沙门氏菌生长出来。

第三步:菌落鉴定在样品处理后,我们需要对培养基上的菌落进行鉴定,确认是否为沙门氏菌。

常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。

形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。

生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。

分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因,通常使用PCR技术进行检测。

第四步:抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。

通过抗菌药敏试验,我们可以选择合适的药物来治疗感染。

可以使用各种常见的抗生素盘进行试验,然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。

根据抗生素的抑菌效果,可确定沙门氏菌的耐药性情况。

第五步:结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析,并撰写检验报告。

检验结果要结合国家标准进行评估,确定样品是否合格。

如果样品中检测到沙门氏菌,还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。

在撰写报告时,需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果,以及相应的建议和措施。

欧盟沙门氏菌检验标准

欧盟沙门氏菌检验标准

沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌,可以导致食物中毒。

为了确保食品安全,许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。

欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一,其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。

以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准:
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。

2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。

3. 检测频率:对于某些高风险食品,如生肉、家禽、蛋类和蛋制品,欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。

4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌,那么这个样品必须被视为阳性。

5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌,那么必须立即报告给相关的监管机构。

6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌,那么这个样品必须被销毁,并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。

需要注意的是,具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。

沙门氏菌检测标准

沙门氏菌检测标准

沙门氏菌检测标准沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌,能够引起人畜的肠胃炎症。

由于其对人畜健康的危害性,沙门氏菌的检测标准显得尤为重要。

本文将围绕沙门氏菌检测的标准制定进行详细阐述,并特别强调在食品安全、环境卫生等领域中的应用。

一、沙门氏菌检测标准的重要性沙门氏菌的存在对人畜健康造成了一定的威胁,因此在食品安全、水质卫生、环境保护等方面,沙门氏菌检测都具有极为重要的意义。

只有通过准确、可靠的检测标准,才能最大程度地保障人们的健康和安全。

对沙门氏菌检测的标准化还可为政府监管提供依据,为企业生产提供技术支持,有助于提升社会整体的食品安全水平。

二、沙门氏菌检测的标准制定机构沙门氏菌检测的标准制定是由国家相关部门牵头的,包括卫生监督部门、食品药品监管部门等。

在国际上,世界卫生组织(WHO)和国际标准化组织(ISO)也参与了相关标准的制定。

这些机构通常依托于专家委员会,通过研讨会、调研等方式制定相关标准,并不断进行修订和更新,以适应不同国家、地区、行业的需求。

三、沙门氏菌检测标准的内容1. 检测方法的标准化:包括对于沙门氏菌的培养方法、识别方法、计数方法等方面的标准化。

在培养方法中,应考虑到不同食品、水样、环境样本等的特点,有针对性地确定最佳的培养条件;在识别方法中,可以采用生化试剂盒或PCR等现代化手段,提高检测的快速性和准确性;在计数方法中,要求确定具体的计数单位,并明确量化的方法。

2. 检测设备的标准化:包括对于培养基、平板、PCR仪器等的规格、性能要求的标准化,以确保设备的可靠性和稳定性。

3. 检测过程的标准化:包括对于样本的采集、保存、运输等环节的要求,以及实验室操作流程、质量控制等方面的标准化,以确保检测结果的准确性和可靠性。

四、沙门氏菌检测标准在食品安全中的应用在食品生产过程中,对于沙门氏菌的检测标准是极为重要的。

它可以帮助企业及时了解原料、半成品和成品中沙门氏菌的污染情况,采取相应的控制措施,以确保食品安全。

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体检验方法Mic伪biological examination of food hygi叨ewe Examination of Salmonellae , Shigellae , and diarrhoea causative 及cherich血coli妙means of thed泣agnostic typing phage set for enterobacteriaceae前言本标准对GB/T4789.31一1994袭食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌肠杆菌科噬菌体检验方法》进行修订。

本标准与GB/T4789.31一19料相比主要修改如下:―按照GB/T1.1一2000对标准文本的格式和文字进行修改。

―规范原标准中的“设备和材料”。

本标准自实施之日起,GB/T4789.31一19944同时废止。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位:江西省卫生防疫站、中国疚病预防控制中心营养与食品安全所。

本标准主要起草人:何晓青、付萍、计融。

本标准于1994年首次发布,本次为第一次修订。

范围本标准规定了应用肠杆菌科噬菌体诊断法检验食品中沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的基本要求、操作程序和结果判定本标准适用于各种食品、食物中毒的检验,也适用于食品从业人员的肠道沙门氏菌和志贺氏菌带菌检验.2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件,其墩新版本适用于本标准。

食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验

食品卫生微生物学检验  沙门氏菌检验
I-BS
C-BS
C-BS
I-BS
I-BS
C-BS
C-HE
I-HE
I-HE
C-HE
I-HE
C-HE
1) 采纳API 20E®或Vitek GNI®为传统 生化鉴定方法的选择性替代方法”。
2) 生化鉴定项目进行调整 原国标中生化鉴定是将可疑菌落同时接种于
三糖铁(TSI)琼脂、蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼 脂 (pH7.2)、氰化钾 (KCN) 培养基和赖氨酸脱羧酶试验培 养基; 现修改为:在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养 基的同时增加一项营养琼脂(NA),经TSI琼脂和赖氨酸 脱羧酶试验培养基的选择后,可筛掉大部分非沙门氏菌 株,大大减少了工作量,同时也满足了API 20E®或Vitek GNI®鉴定的需要。
非沙门氏菌
细菌学分析手册(FDA/BAM)
样品(20类)25g
225mL 乳糖肉汤(LB)or 胰酪胨大豆肉汤( TSB)or 煌绿溶液 (BG)or 通用前增菌肉汤(UPB)or营养肉汤(NB)or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿(TT) pH6.8±0.2 24±2 h 35℃ TT 43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h BS RV 24±2h 42±0.2℃
1. GB/T 4789.4 2. AOAC Official Method :967.26, 967.27,967.28 3. ISO :6579 4 . USFDA : Bacteriological Analytical Manual, Chapter 5: Salmonella。
1 前增菌; 2 选择性增菌; 3 分离; 4 生化鉴定; 5.血清学鉴定; 6.报告。
DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技 术制造的全自动PCR分析仪。将已知核 苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法 标记,加入已变性的被检DNA样品中, 在一定条件下即可与该样品中有同源序 列的DNA区段形成杂交双链,从而达到 鉴定样品中DNA的目的。

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式

沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种革兰氏阴性杆菌,广泛存在于食品、环境中,尤其是在沙门氏菌感染的食品中。

沙门氏菌检验是食品安全检测中的重要一环,其准确性和可靠性对保障公众健康至关重要。

下面将介绍沙门氏菌检验国标的检验步骤及接种方式。

一、检验步骤
1.原料准备:准备待检样品,包括食品、环境样品等。

2.样品采集:采集样品时应使用一次性餐具或清洁用具,确保样品的完整性和真实性。

3.样品处理:对采集的样品进行初步处理,包括去除杂质、研磨成粉末等。

4.检验样品:将处理后的样品放入含有适当浓度的试剂管中,进行沙门氏菌检验。

5.结果判断:根据检验结果判断样品是否存在沙门氏菌感染。

二、接种方式
1.沙门氏菌疫苗接种:在食品安全检测中,一般使用沙门氏菌疫苗进行接种。

疫苗接种后,人体免疫系统会产生针对沙门氏菌的抗体和免疫记忆,从而有效地预防沙门氏菌感染。

2.样品接种:对于食品样品,可以使用沙门氏菌疫苗进行接种。

在样品处理过程中,可以通过加入疫苗,使样品受到沙门氏菌的感染,进而进行检测以判断样品是否存在感染。

三、注意事项
1.接种疫苗前,应进行体检,确保没有患有其他疾病或感染。

2.接种疫苗后,应严格按照操作规程进行样品处理和检测,以确保检验结果的准确性和可靠性。

3.疫苗接种后可能会出现短暂的发热、乏力等症状,正常现象,不应影响检测结果。

沙门氏菌检验国标的检验步骤及接种方式非常重要,可以确保食品安全检测的准确性和可靠性。

在食品安全检测中,应严格遵守操作规程,确保疫苗接种的安全和有效性,以保证公众健康安全。

沙门氏菌检测技术研究进展

沙门氏菌检测技术研究进展

沙门氏菌检测技术研究进展李杰;刘箐;丁承超;翟续昭;王广彬;刘武康;曾海娟;王淑娟;孙静娟;董庆利【摘要】沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的人畜共患病原菌,不仅能引起动物伤寒、霍乱,还会导致人类胃肠炎、败血症等疾病,严重威胁人、畜的生命健康,由其引起的食品安全事件高居所有食源性致病菌之首.食品中沙门氏菌的快速、准确检测是预防与控制沙门氏菌传播蔓延的重要手段.随着生物学、化学、物理等学科的快速发展,沙门氏菌的检测技术已从传统的分离培养和生化鉴定,发展到免疫学、分子生物学、电化学、传感器、生物芯片等快速、高通量检测,尤其是近年来与纳米技术、光谱学、质谱学以及代谢组学等的结合使用,为沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测方法提供了新的发展方向.本文在参阅国内外最新研究报道的基础上,对各种方法进行总结阐述,并对沙门氏菌未来检测技术的发展动向予以分析.%Salmonella is a common pathogen shared by human and animals which can not only cause animal typhoid , cholera, but also lead to human gastroenteritis , septicaemia, and it is a serious threat to life and health of human and animals.Salmonella is the main reason that highly causes foodborne diseases among all the food safety events .There-fore, rapid and accurate detection of Salmonella in food is an important means to prevent and control the disease .With the rapid development of biology , chemistry, physics and other subjects , the detection technology of Salmonella has been developed from the traditional isolation and biochemical identification , to the immunology , molecular biology , electrochemistry, sensors, bio-chips and so on, especially in recent years , the combined uses of those methods with nanotechnology , spectroscopy , mass spectrometryand metabolomics , providing many new methods for the detection of Salmonella.Various detection methods and analyses of future Salmonella detection technology , and the tendency of the development based on a large number of latest domestic and foreign research reports were summarized in this pa -per .【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2017(037)004【总页数】7页(P126-132)【关键词】沙门氏菌;人畜致病菌;食品安全;检测技术;研究进展【作者】李杰;刘箐;丁承超;翟续昭;王广彬;刘武康;曾海娟;王淑娟;孙静娟;董庆利【作者单位】上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;徐州绿健乳品饮料有限公司,江苏徐州 221006;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093;上海理工大学医疗器械与食品学院,上海 200093【正文语种】中文菌快速检测”(3A15308006)沙门氏菌(Salmonella)是美国细菌学家Salmon 与Smith 于1885 年最早发现的无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌,包括肠道沙门氏菌和邦戈尔沙门氏菌两个种[1],目前已发现存在2 579个血清型[2]。

中美欧食品中沙门氏菌检验标准的比较分析

中美欧食品中沙门氏菌检验标准的比较分析

中美欧食品中沙门氏菌检验标准的比较分析■ 丁卫平1 张士财1 伊廷存2(1. 滨州市检验检测中心;2. 山东省食品药品检验研究院)摘 要:沙门氏菌是一种重要的食源性致病菌,与食品安全及人类健康息息相关。

检验标准是沙门氏菌鉴定的基础与依据。

为给我国现行食品沙门氏菌检验标准的修订提供参考依据,使我国食品中沙门氏菌的检测更加科学准确,本文收集了中国、美国及欧洲的食品沙门氏菌检验标准,从适用范围、预增菌、选择性增菌、平板分离、鉴定等方面进行了系统比较分析。

结果表明,我国沙门氏菌检验标准与欧洲所使用标准较为相似,与美国所使用标准差别较大,建议在我国食品沙门氏菌检验标准的制修订过程中,借鉴国外同类型标准先进经验,完善改进我国沙门氏菌检验标准,满足实验室检测需要。

关键词:食品,沙门氏菌,检验,方法,比较DOI编码:10.3969/j.issn.1002-5944.2024.03.034Comparative Analysis of Detection Standards in China, the United Statesand Europe for Salmonella in FoodDING Wei-ping1 ZHANG Shi-cai1 YI Ting-cun2(1. Binzhou Testing Center; 2. Shandong Institute of Food and Drug Control)Abstract:Salmonella is an important foodborne pathogen closely related to food safety and human health. Detection standards are the basis for the detection of salmonella. To provide a reference basis for the revision of China’s current detection standard on salmonella in food, and to make the detection of salmonella in food more scientific and accurate, this paper collects the detection standards on salmonella in food from China, the United States and Europe, systematically compares and analyzes these standards from aspects of scope of application, pre-enrichment, selective enrichment, plate separation, and identifi cation. The results show that China’s standard for salmonella detection is relatively similar to the European standard, but significantly differs from the standard implemented in the United States. It is recommended to learn from the foreign advanced experience of similar standards in the process of developing and revising China’s detection standard of salmonella in food, and improve this detection standard to meet the needs of laboratory testing. Keywords: food, salmonella, detection, method, comparison0 引 言沙门氏菌为革兰氏阴性杆菌,是一种重要的食源性致病菌[1],广泛分布于奶和奶制品、肉与肉制品、蛋及蛋制品等食物中[2-4]。

食品微生物检验方法

食品微生物检验方法

食品微生物检验方法内容提要:●菌落总数检测●大肠菌群及大肠杆菌检测●金黄色葡萄球菌检测●沙门氏菌检测●单核细胞增生李斯特氏菌检测菌落总数测定——菌落总数的概念●菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(ml)或者表面积(cm2)内,所含能于某种固体培养基上,在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。

菌落总数测定——卫生学意义●判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。

●及时反映食品加工过程是否符合卫生要求,为被检食品卫生学评价提供根据。

●通常认为,食品中细菌数量越多,则可考虑致病菌污染的可能性越大,菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

FDA BAM 菌落总数测定流程检样xg/mL+9xml稀释液(磷酸盐缓冲液)适当十倍稀释样品选择2~3个连续适宜稀释度各取1mL分别加入灭菌平皿内(每个稀释度做两个平行)每皿内加入适量平板计数琼脂(PCA)35 ℃48 ±2h菌落计数FDA BAM 菌落计数方法●选择25~250CFU之间的菌落进行计数,计算公式如下:N=∑C/(1*n1+0.1*n2)*d●所有平板的菌落数都不足25CFU,报告EAPC/ml(g)为<25*1/d。

EAPC:estimated aerobic plate count●所有平板的菌落数都超过250CFU,但不足100/cm2,报告EAPC/ml(g)为最接近250CFU的平板菌落数的估计值,乘以相应的稀释度。

●所有平板的菌落数都超过100/cm2,计算平板的面积(直径为90mm的平板面积为65cm2),估计最高稀释度每cm2的菌落数,乘以相应平板面积作为该稀释度的菌落计数结果,报告EAPC/ml (g)为>65*100* 1/d。

●无法计数的平板报告LA(Laboratory Accident)。

●最终结果保留前两位有效数字。

按照4舍6入,5是奇进偶不进。

ISO4833-2003 菌落总数测定流程检样xg/mL+9xml稀释液(磷酸盐缓冲液)适当十倍稀释样品选择2~3个连续适宜稀释度各取1mL分别加入灭菌平皿内(每个稀释度做两个平行)每皿内加入适量(12~15mL)平板计数琼脂(PCA),30±1 ℃,72 ±3 h菌落计数ISO4833-2003菌落计数方法●选择连续2个稀释度不超过300CFU的平板,且一个平板至少含15CFU进行计数,计算公式如下:N=∑C/(n1+0.1*n2)*d●所有平板的菌落数都不足15CFU,计算2平板菌落的算术平均值m,液体样品:N E=m 固体样品:N E=m×d-1●无菌生长:液体样品:less than 1; 固体样品:less than 1 ×d-1●最终结果保留前两位有效数字。

五种方法检测食品中沙门氏菌的结果比较

五种方法检测食品中沙门氏菌的结果比较

五种方法检测食品中沙门氏菌的结果比较
杨娟;许美玲;张丽;王君卫
【期刊名称】《中国食物与营养》
【年(卷),期】2013(019)009
【摘要】目的:通过参加能力验证,加强实验室间的技术交流,提高检测技能,验证实验室的检测能力.方法:采用SN0170-1992、mini-VIDAS、API20E、科玛嘉显色培养基、ISO6579-2002等方法对沙门氏菌进行检测.结果:采用这5种方法能准确鉴定出测试样品中的沙门氏菌,取得满意结果.结论:通过本次能力验证,证明没有任何一种培养基可以全面保证所有食品基质或各种沙门氏菌血清型生长,在日常检验中,为减少假阴性结果,同时使用两种或两种以上培养基平行地进行实验是完全有必要的.
【总页数】3页(P18-20)
【作者】杨娟;许美玲;张丽;王君卫
【作者单位】临沂出入境检验检疫局,山东临沂276034;临沂出入境检验检疫局,山东临沂276034;临沂出入境检验检疫局,山东临沂276034;临沂出入境检验检疫局,山东临沂276034
【正文语种】中文
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5.API 20E鉴定系统等两种检测方法应用于食品中沙门氏菌的检测结果比较 [J], 韩志双;胡凤
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ISO6579食品和动物饲料微生物学沙门氏菌检测

ISO6579食品和动物饲料微生物学沙门氏菌检测

ISO 6579:2002 食品和动物饲料微生物学—沙门氏菌检测序ISO是国际标准的全球性组织。

准备国际标准这项工作通常由ISO技术联盟来完成。

每一个团体成员负责各自的学科。

与ISO有合作的国际性机构、政府与非政府机构,也有参与这项工作。

ISO与国际电子组织(IEC)在电子标准化方面有着密切的合作关系。

国际性标准的起草原则在《ISO/IEC 细则》第三部分中有给出。

起草的国际性标准被技术委员会采用是通过全体成员投票决定的。

发布一个国际性标准需要至少75%成员投赞成票。

由于某些学科涉及到专利权。

而ISO没有责任去鉴别这些专利。

ISO 6579是ISO/TC 34起草的。

这个第四版取代了第三版(ISO 6579:1993),由于它在技术上已经落后了。

附录A和B是本标准的标准化部分。

附录C只为了提供信息。

绪论由于食品与饲料的种类繁多,这个标准不一定适合某一类产品。

在这种情况下,可使用不同的方法,但必须有绝对的技术上的理由。

否则,要尽可能地完全遵循本标准。

当这个标准下一次回顾时,将会对这个标准的使用做数据统计,特殊产品偏离本标准使用也会做相关统计。

同一类产品的检测方法也有可能不统一,国际性标准和/或国家标准也不一定完全与本标准相符合。

希望相关标准做回顾时,会遵循本标准做出相关的修改,以使只有已被证明的技术上的理由才能与本标准偏离。

警告——为了保护实验室人员的安全,必须确保沙门氏菌的检测,特别是伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌,必须在一个有经验的微生物学家的指导下,在适当的实验室设备中进行,并处理好实验室废弃物。

1 范围这个国际标准主要提供沙门氏菌的检测方法,包括伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。

局限性已在绪论中给出,本标准适用于——用于人类消耗和动物饲养的产品;——食品生产和食品加工的环境样品。

警告——本方法可能不能复苏所有的伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。

2 参考标准以下标准文件是本标准的参考标准。

已过期的文献,后来改善或修订的,部分这种文献已经不适用。

食品质量与安全检测作业指导书

食品质量与安全检测作业指导书

食品质量与安全检测作业指导书第1章引言 (3)1.1 食品质量与安全检测的重要性 (3)1.2 食品质量与安全检测的基本原则 (4)第2章食品样品的采集与预处理 (4)2.1 样品采集 (4)2.1.1 采样原则 (4)2.1.2 采样方法 (4)2.1.3 采样容器及器材 (5)2.2 样品预处理 (5)2.2.1 样品预处理方法 (5)2.2.2 样品预处理注意事项 (5)2.3 样品保存 (5)2.3.1 样品保存条件 (5)2.3.2 样品保存期限 (5)2.3.3 样品保存注意事项 (5)第3章食品微生物检测 (6)3.1 微生物检测基本方法 (6)3.1.1 样品制备 (6)3.1.2 微生物分离与纯化 (6)3.1.3 微生物计数 (6)3.1.4 微生物鉴定 (6)3.2 常见食源性病原体检测 (6)3.2.1 沙门氏菌检测 (6)3.2.2 金黄色葡萄球菌检测 (6)3.2.3 大肠杆菌O157:H7检测 (6)3.2.4 李斯特菌检测 (6)3.3 微生物快速检测技术 (7)3.3.1 免疫学检测技术 (7)3.3.2 分子生物学检测技术 (7)3.3.3 生物传感器检测技术 (7)3.3.4 拉曼光谱检测技术 (7)第四章食品化学污染物检测 (7)4.1 金属污染物检测 (7)4.1.1 检测方法 (7)4.1.2 检测项目 (7)4.1.3 检测步骤 (7)4.2 有机污染物检测 (8)4.2.1 检测方法 (8)4.2.2 检测项目 (8)4.2.3 检测步骤 (8)4.3 农药残留检测 (8)4.3.2 检测项目 (8)4.3.3 检测步骤 (8)第5章食品添加剂检测 (9)5.1 食品添加剂概述 (9)5.2 常见食品添加剂检测 (9)5.2.1 着色剂检测 (9)5.2.2 防腐剂检测 (9)5.2.3 甜味剂检测 (9)5.2.4 酸度调节剂检测 (9)5.3 食品添加剂滥用与控制 (9)第6章食品营养素检测 (10)6.1 常见食品营养素检测 (10)6.1.1 检测范围与方法 (10)6.1.2 检测原理 (10)6.1.3 检测步骤 (10)6.1.4 质量控制与保障 (10)6.2 营养素功能及评价 (10)6.2.1 营养素功能概述 (10)6.2.2 营养素评价方法 (10)6.2.3 营养素缺乏与过量 (11)6.3 营养素检测新技术 (11)6.3.1 高效液相色谱法 (11)6.3.2 液相色谱质谱联用法 (11)6.3.3 原子吸收光谱法 (11)6.3.4 近红外光谱技术 (11)6.3.5 生物传感器技术 (11)6.3.6 免疫学检测技术 (11)第7章食品物理性质检测 (11)7.1 食品物理性质概述 (11)7.2 食品感官评价 (11)7.2.1 感官评价概述 (11)7.2.2 感官评价方法 (12)7.2.3 感官评价要求 (12)7.3 食品质地检测 (12)7.3.1 质地检测概述 (12)7.3.2 质地检测方法 (12)7.3.3 质地检测要求 (13)第8章食品包装材料与容器检测 (13)8.1 食品包装材料概述 (13)8.2 食品包装材料安全性检测 (13)8.2.1 检测目的 (13)8.2.2 检测项目 (13)8.2.3 检测方法 (13)8.3.1 检测目的 (13)8.3.2 检测项目 (14)8.3.3 检测方法 (14)第9章食品安全快速检测技术 (14)9.1 快速检测技术概述 (14)9.2 免疫学检测技术 (14)9.2.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) (14)9.2.2 免疫层析技术 (15)9.3 分子生物学检测技术 (15)9.3.1 聚合酶链反应(PCR) (15)9.3.2 实时荧光定量PCR (15)9.3.3 基因芯片技术 (15)第10章食品质量与安全管理体系 (15)10.1 食品质量管理体系 (15)10.1.1 概述 (15)10.1.2 食品质量管理体系的构成 (15)10.1.3 食品质量管理体系的运行 (16)10.1.4 食品质量管理体系的持续改进 (16)10.2 食品安全管理体系 (16)10.2.1 概述 (16)10.2.2 食品安全管理体系的构成 (16)10.2.3 食品安全管理体系的运行 (17)10.2.4 食品安全管理体系的持续改进 (17)10.3 食品质量与安全管理体系认证与监管 (17)10.3.1 认证 (17)10.3.2 监管 (17)10.3.3 认证与监管的协同 (17)第1章引言1.1 食品质量与安全检测的重要性食品安全关系到人民群众的身体健康和生命安全,食品质量直接影响着消费者的满意度与信任度。

食品中的致病微生物沙门氏菌的商业化检测技术

食品中的致病微生物沙门氏菌的商业化检测技术

食品中的致病微生物沙门氏菌的商业化检测技术作者:贺丽丽来源:《食品安全导刊》2019年第08期沙门氏菌是食品中常见的致病菌,也是引起食物中毒的重要病原菌之一,其会严重危害人们的食品安全与身体健康。

据统计,在全球记载的细菌性食物中毒事件中,因沙门氏菌而引起的食物中毒常列榜首。

沙门氏菌疾病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一,其病原菌——沙门氏菌属肠道细菌科,包含多种能引起食物中毒及导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。

沙门氏菌在粪便、土壤、食品和水中可存活5个月至2年之久,除可感染人体外,其还可感染哺乳类、鸟类、爬行类、鱼类、两栖类及昆虫等动物。

人/畜感染沙门氏菌后可呈现无症状带菌状态,也可表现为有临床症状的致死疾病——加重病态或提高死亡率,亦或降低动物的繁殖能力。

家禽、蛋类和肉类产品是沙门氏菌的主要传播媒介,而受感染程度主要取决于沙门氏菌的血清类型和食用者的身体状况,因此,小孩、老年人及免疫缺陷的个体是较容易受到该菌威胁的群体。

根据国际惯例,要求对易受沙门氏菌污染的食品进行检测,并分类管理,以保证消费者接触到的食物不含沙门氏菌,从而有效预防疾病。

我国《食品安全法》规定,食品中沙门氏菌的限量标准为0,并要求食品在进入市场之前一定要检测是否含有沙门氏菌。

然而,传统的细菌学检测方法繁琐耗时,不能满足如今食品安全检测快速发展的需求。

本文介绍了德国拜发集团(以下简称“拜发”)在食品中沙门氏菌检测方面研发的3种检测方法,以期为相关人员进行日常检测提供参考。

1 实时荧光PCR方法(RT-PCR)1.1 应用原理RT-PCR(Real time-PCR)是在传统PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时检测整个PCR进程,最后通过软件分析其积累的荧光信号,进而对需要检测的基因序列进行定性或定量分析。

拜发研制的用于沙门氏菌检测的荧光定量检测试剂盒SureFast? Salmonella ONE可进行100次扩增。

沙门氏菌国标

沙门氏菌国标

沙门氏菌国标
沙门氏菌(Salmonella)是一类能够引起人和动物肠胃感染的细菌,其治疗难度大,对人类健康产生了严重的威胁。

为了防止沙门氏
菌感染的发生,中国国家标准制定了沙门氏菌国标,其详细内容如下:
1. 检测方法:
国标规定了沙门氏菌的检测方法,包括常规菌落计数法和PCR等
分子生物学检测方法。

常规菌落计数法是通过将样本以一定的稀释倍
数加入培养基,培养一定的时间后,观察菌落数量来定量检测沙门氏菌。

PCR技术通过扩增特异性DNA序列,从而检测样本中是否存在沙门氏菌。

2. 检测标准:
国标规定了样品中沙门氏菌的检测标准,要求样品中沙门氏菌的
检出限制高于1 CFU/g。

同时,国家对于不同食品中沙门氏菌的检测标准也有所不同。

比如生食蔬菜中沙门氏菌的限制值是10 CFU/g,而熟
食肉制品中沙门氏菌的限制值则是5 CFU/g。

3. 检测流程:
国标对于沙门氏菌样品检测的流程进行了详细的规定,包括样品
采集、样品处理、检测方法选择、样品检测标准等环节的细节要求。

4. 参考资料:
为了保证国标的科学性和专业性,国标中还详细列出了参考文献,包括国内外的学术著作、标准、规范以及相关判定标准等。

总之,沙门氏菌国标的制定对于保障人类健康和食品安全具有重
要意义。

只有严格执行国标,加强沙门氏菌的检测和监测工作,才能
预防和控制该菌的传播和感染。

食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验(编制说明)

食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验(编制说明)

《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》(征求意见稿)编制说明一、工作简况(包括任务来源与项目编号、标准起草单位、协作单位、主要起草人、简要起草过程)1、任务来源受国家卫生和计划生育委员会食品安全标准与监测评估司委托,根据《中华人民共和国食品安全法》和国务院部署,按照《食品安全国家标准整合工作方案(2014年- 2015年)》的原则要求,按照国家卫生和计划生育委员会食品安全标准与监测评估司的工作安排,对该标准进行整合。

标准整合项目编号为ZHENGHE-2014-409和ZHENGHE-2015-409。

2、标准起草单位、协作单位、主要起草人本标准起草单位为:国家食品安全风险评估中心;标准主要起草人为:徐进、王伟、白莉、甘辛、闫韶飞、董银苹、韩海红、李志刚、杜春明、余东敏。

3、简要起草过程(1)2014年7月标准整合人员进行了实地学习、交流,对整合原则、技术要求和实施细则进行了讨论,2014年12月底完成数据的汇总。

(2)根据初审意见继续完善标准文本。

2015月4月底南宁标准专家研讨会再次提交起草组专家讨论。

(3)提交《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》(征求意见稿)、《编制说明》供公开征求意见。

二、确定各项技术内容(如技术指标、参数、公式、试验方法、检验规则等)的依据1、整合原则(1)、与国际接轨的原则,该标准的整合内容主要参考了美国FDA Bacteriological Analytical Manual Online(Chapter 5 Salmonella)、ISO 6579、USDA(MLG 4.08)、加拿大MFHPB-20(2009)等标准。

尽量做到与国际上的沙门氏菌检测方法相统一,便于与国际沙门氏菌检测接轨。

(2)、保持与原标准的连续性。

与现有国家标准协调统一,鉴于我国已有相关的检测方法标准,在内容设计时多参考了目前现行的标准条款,如样品前处理步骤与金黄色葡萄球菌、大肠菌群检测方法尽量相同,在常规生化、血清分型方面尽量沿用原标准中的方法。

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ISO 6579 :2002 食品和动物饲料微生物学—沙门氏菌检测序ISO 是国际标准的全球性组织。

准备国际标准这项工作通常由ISO 技术联盟来完成。

每一个团体成员负责各自的学科。

与ISO 有合作的国际性机构、政府与非政府机构,也有参与这项工作。

ISO 与国际电子组织( IEC)在电子标准化方面有着密切的合作关系。

国际性标准的起草原则在《ISO/IEC 细则》第三部分中有给出。

起草的国际性标准被技术委员会采用是通过全体成员投票决定的。

发布一个国际性标准需要至少75%成员投赞成票。

由于某些学科涉及到专利权。

而ISO 没有责任去鉴别这些专利。

ISO 6579 是ISO/TC 34 起草的。

这个第四版取代了第三版( ISO 6579:1993),由于它在技术上已经落后了。

附录A 和B 是本标准的标准化部分。

附录C 只为了提供信息。

绪论由于食品与饲料的种类繁多,这个标准不一定适合某一类产品。

在这种情况下,可使用不同的方法,但必须有绝对的技术上的理由。

否则,要尽可能地完全遵循本标准。

当这个标准下一次回顾时,将会对这个标准的使用做数据统计,特殊产品偏离本标准使用也会做相关统计。

同一类产品的检测方法也有可能不统一,国际性标准和/或国家标准也不一定完全与本标准相符合。

希望相关标准做回顾时,会遵循本标准做出相关的修改,以使只有已被证明的技术上的理由才能与本标准偏离。

警告——为了保护实验室人员的安全,必须确保沙门氏菌的检测,特别是伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌,必须在一个有经验的微生物学家的指导下,在适当的实验室设备中进行,并处理好实验室废弃物。

1 范围这个国际标准主要提供沙门氏菌的检测方法,包括伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。

局限性已在绪论中给出,本标准适用于——用于人类消耗和动物饲养的产品;——食品生产和食品加工的环境样品。

警告——本方法可能不能复苏所有的伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。

2 参考标准以下标准文件是本标准的参考标准。

已过期的文献,后来改善或修订的,部分这种文献已经不适用。

然而,有大部分学者正在争取发布最新版的文献如以下列出。

对于无限期的文献,最新版本都是适用的。

ISO和IEC成员保存当前有效国际性标准的记录。

ISO 6887-1,食物与动物饲料原料微生物学——样品准备原则,微生物检测样品原液及十倍法稀释——第一部分:样品原液和十倍法稀释的指导准则。

ISO 7218,食物与动物饲料原料微生物学——微生物检验指导准则。

ISO 8261,牛奶和奶制品——微生物检测样品准备、品原液和十倍法稀释的指导准则。

3 术语和定义以下术语和定义适用于本标准。

3.1沙门氏菌按照本国际标准操作,在固体选择性培养基上形成典型或略典型的菌落,并且生物学反应和血清学反应符合要求。

3.2检测沙门氏菌按照本国际标准操作,检查一定重量或体积的样品存在或不存在沙门氏菌。

4 原理4.1概述沙门氏菌的检测有四个必须的连续阶段(也可见附录A )。

注意:沙门氏菌可能以很少数量存在,并伴随大量的肠杆菌属或其它属细菌存在。

此外,检测低数量的受损的沙门氏菌,前增菌是必要的。

4.2使用非选择性液体培养基前增菌缓冲蛋白胨水环境温度培养是检测的一部分,然后37℃±1℃培养18h±2h。

对于特定的食品,使用其它的前增菌是必要的(见9.1.2)。

如果是大量的样品,在接种前,缓冲蛋白胨水必须先预热至37℃±1℃。

4.3选择性液体培养基中增菌使用RV大豆培养基(RVS肉汤)和MK 连四硫酸盐/新生霉素(MKTTn 肉汤)肉汤。

RVS肉汤41.5℃±1℃,24h±3h。

MKTTn 肉汤37℃±1℃,24h±3h。

4.4平板划线和鉴定使用两种选择性固体培养基:——木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂(XLD 琼脂);——任何对XLD 琼脂做补充的固体选择性培养基,并能分离乳糖阳性的伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。

实验室可以自己选择使用哪一种培养基。

XLD 琼脂37℃±1℃培养24h±3h。

另一种培养基根据生产商的要求培养。

注意:如亮绿琼脂( BGA ),亚硫酸铋琼脂可供选择。

4.5确认试验假定沙门氏菌菌落进行次培养,做适当的生化学和血清学试验来鉴定。

5 培养基和试剂、血清5.1概述一般实验室实践,参照ISO 7218。

5.2常规培养基和试剂注意:由于需使用到大量的培养基和试剂,其成分和准备查看附录B。

5.2.1非选择性钱增菌培养基:缓冲蛋白胨水见B.1。

5.2.2第一个选择性增菌培养基:RV大豆培养基(RVS 肉汤)见B.2。

5.2.3第二个选择性增菌培养基:MK 连四硫酸盐/新生霉素(MKTTn 肉汤)肉汤见B.3。

5.2.4固体选择性平板培养基5.2.4.1第一个培养基:木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂(XLD 琼脂)见B.4。

5.2.4.2第二个培养基第二种适当的培养基的选择取决于试验室的判断。

必须按照生产商的要求配5.2.5营养琼脂见B.5。

5.2.6三糖铁琼脂(TSI琼脂)见B.6。

5.2.7尿素琼脂(西蒙氏)见B.7。

5.2.8L-赖氨酸脱羧酶培养基见B.8。

5.2.9牛乳糖检测试剂见B.9。

5.2.10VP反应试剂见B.105.2.11吲哚反应试剂见B.11。

5.2.12半固体营养琼脂见B.12。

5.2.13生理盐水溶液见B.13。

5.3血清一般可买到含有一种或多种O抗原的血清。

例如:抗体血清包含一种或多种“O,”称为单价或多价“O”抗体血清,“Vi血”清。

还有包含一种或多种H抗原的血清。

必须确认所使用的血清适合检测所有类型的沙门氏菌。

6 设备和玻璃器皿使用一般微生物实验室设施(见ISO 7218),另有以下增加。

6.1干热灭菌或湿热灭菌设备见ISO 7218。

6.2干燥箱或烘箱,鼓风式,能达到37℃~55℃6.3培养箱,可恒温37℃±1℃6.4水浴锅,可恒温41.5℃±1℃6.5水浴锅,可恒温44℃~47℃6.6水浴锅,可恒温37℃±1℃6.7接种环,直径3mm6.8pH计6.9试管或三角瓶6.10刻度移液管或移液器,10ml和1ml6.11平皿,小尺寸的(直径90mm~100mm)和大尺寸的(直径140mm)7 取样ISO 6888 中并不涉及取样。

如果没有相关的国际标准,建议需经过多方同意。

微生物实验室接收到的样品必须是真实代表样品的,并在运输和储藏期间没有损坏或改变微生物的性状。

8 样品前处理参照样品的相关国际标准进行前处理。

如果没有相关的国际标准,建议需经过多方同意。

9 程序9.1测试部分和样品原始悬液9.1.1概述参照ISO 6887-1,相关细节可参考各个样品的标准。

牛奶或奶制品参照ISO 8261。

样品原始悬液的准备,一般使用钱增菌培养基。

如果取样量大于25g,使用前增菌培养基补足至1:10 悬液。

当不只一份25g 的样品进行检测时,为了降低检测工作量,并且合成物不会影响样品的检测,可以将多个检测部分合成为一个部分。

例如,如果有十份25g 的样品检测,可以把这十个样品合成成为一份250g 的样品,添加2.25L 前增菌肉汤。

可以选择,将0.1ml(在10mlRVS 肉汤中)和1ml(在10mlMKTTn 肉汤中)的前增菌肉汤合并为一份,添加至100ml 选择性培养基中。

9.1.2特殊食物样品原始悬液的准备注意:以下操作只用于沙门氏菌的检测。

详细的细节可参照ISO 6887-2,ISO 6887-3 ,ISO 6887-4 和 ISO 8261 。

9.1.2.1可可粉和含有可可粉的产品(大于20%)加入含50g/l 酪蛋白的缓冲蛋白胨水(避免使用酸酪蛋白),或100g/l 灭菌脱脂奶粉,培养2h后,如果样品中含有大量的革兰氏阳性菌群,添加0.018g/l 亮绿。

9.1.2.2酸性和变酸食品要确保前增菌过程中pH 值不会低于4.5。

注意:如果使用双倍浓度缓冲蛋白胨水水会使酸性和变酸食品的pH 值比较稳定。

9.2非选择性前增菌将原始悬液在37℃ ±1℃下培养18h±2h。

9.3选择性增菌9.3.1接种0.1ml 9.2中的培养物至10ml RVS 肉汤;接种1ml 9.2中的培养物至10ml MKTTn 肉汤。

9.3.2RVS肉汤41.5℃±1℃下培养24h±3h;MKTTn 肉汤37℃±1℃下培养18h±3h。

必须检查培养温度不能超过限值42.5℃。

9.4划线平板并鉴别9.4.1培养24h±3h后,取一环RVS 肉汤培养物划线至大尺寸的XLD 平板,以便能很好的分离出单个菌落。

如果没有大尺寸的平板,使用两个小尺寸平板代替。

同样划线第二种选择性固体培养基。

9.4.2培养24h±3h 后,取一环MKTTn 肉汤,重复9.4.1 操作划线两种选择性平板。

9.4.3倒置平板,放置于培养箱中。

XLD 平板37℃培养,第二种培养基培养温度参照生产商要求。

9.4.4培养24h±3h 后,检查是否存在典型的沙门氏菌菌落,或不典型的可能为沙门氏菌的菌落。

XLD 平板上的典型沙门氏菌菌落为黑色中心,周围有一圈微红色的透明圈,由于培养基的指示剂。

注意:H2S 阳性沙门氏菌为粉红色中心深粉红色。

乳糖阳性沙门氏菌为黄色有或没有黑色中心。

按照生产商的要求培养第二种培养基,检查有没有典型菌落出现。

9.5证实9.5.1概述商业的沙门氏菌生化鉴定盒如果确认可靠,即可供使用。

生化鉴定盒的使用涉及到菌落的生化特性确认。

必须按照生产商的说明使用。

注意:沙门氏菌菌落的辨别需要很大深度的经验,不仅是逐个逐个血清型,而且是一批批选择性培养基的使用。

9.5.2挑选菌落做确认每个选择性平板至少挑选一个典型菌落或疑是菌落做确认,如果第一个菌落为阴性,必须重新挑选四个菌落。

流行病学研究一般会挑选五个菌落。

如果平板上少于五个典型或疑是菌落,挑选所有菌落做确认。

将挑选的菌落划线营养琼脂平板,更好地分离单个菌落。

37℃±1℃下培养24h±3h。

使用纯培养物做生化鉴定和血清学鉴定。

9.5.3生化鉴定9.5.3.1概述用接种针将9.5.2获得的菌落接种至9.5.3.2到9.5.3.7培养基中。

9.5.3.2TSI 琼脂在斜面琼脂上划线并穿刺。

37℃±1℃下培养24h±3h。

按照下面说明记录培养基的变化:a)底层黄色:葡萄糖阳性(葡萄糖利用)红色或无变化:葡萄糖阴性(葡萄糖不理用)泡沫或葡萄糖产气形成龟裂b)斜面黄色:乳糖和/或蔗糖阳性(乳糖和/或蔗糖利用)红色或无变化:乳糖和/或蔗糖阴性(乳糖和/或蔗糖不利用)典型沙门氏菌为碱性(红色)斜面和酸性(黄色)底部,产气(泡沫),并且(90%个例)产生硫化氢(琼脂变黑)(9.5.3.8)。

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