药理实验指导

药理实验指导

总论、链霉素毒性、肝脏在药物代谢中的作用

一、药理学实验课的目的和要求：

（一）目的：

（1）使学生掌握进行药理学实验的基本方法，了解获得药理学知识的科学途径

（2）验证药理学中的重要基本理论，更牢固地掌握药理学的基本概念。（3）培养对科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法和实事求是的作风，并初步具备客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决问题的能力。

（二）要求：

（1）实验前做好预习工作，结合实验内容，复习有关药理学、生理学和生物化学等方面的理论知识，并领会实验设计的原理。

（2）实验时认真操作，仔细观察，并做好实验记录。

（3）实验后整理实验结果，并进行分析思考，认真书写实验报告，并做好实验室的清洁卫生，关好水、电。

二、实验设计的基本原则

（1）重复性

（2）对照性

（3）随机性

三、药理学实验的一般方法和技术

（一）实验动物选择的原则和方法

1、首先要根据实验的目的选择实验动物

2、选用来源清楚、遗传背景明确的实验动物

3、选用容易获得、价格便宜、易于饲养与管理的实验动物

4、必须注意实验动物种类、品系的质量及健康状况是否良好

5、选用人畜共患疾病的实验物物和传统应用的实验动物

（二）实验动物的选择：

常用的实验动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫、狗。常根据不同的实验目的和要求选用不同的实验动物，所选用的动物必须能较好地反映试验药物的选择性作用并符合节约的

原则。

蛙和蟾蜍：离体心肌，观察药物对心脏的作用。坐骨神经和腓肠肌，观察药物对周围神经肌肉或横纹肌的作用。

小白鼠：

1.小鼠属于脊椎动物门，哺乳纲，啮齿目，鼠科，小鼠属动物。

2.成熟早，繁殖力强。

3.体形小，易于饲养管理。

4.性情温顺，

胆小怕惊。 5.对外来刺激极为敏感。6.便于提供同胎和不同品

系动物。7.喜居于光线较暗的安静环境，习于昼伏夜动，喜欢啃咬。8.体小娇嫩，不耐饥饿，不耐冷热，对环境的适应性差。9.

成年雌鼠在动情周期不同阶段阴道粘膜可发生典型变化。适用于需要大量动物的实验，如药物筛选，半数致死量，药物效价。

大白鼠：与小白鼠相似，一些在小白鼠身上不便进行的实验可用大白鼠。

豚鼠：易致敏，常用于平喘药和抗组胺药的实验。

家兔：观察药物对心脏、呼吸的影响及农药中毒和解救实验。

猫：血压稳定，常用于血压实验。

狗：观察药物对心脏泵功能和血流动力学的影响，心肌细胞电生理研究、降压及抗休克药的研究

（三）常用的药物给药途径

1、经口给药（灌胃）

2、皮下注射

3、肌肉注射

4、腹腔注射

5、静脉注射

（四）实验动物的捉拿和给药方法

小白鼠：

捉拿法：右手提起尾部，放在鼠笼或其他糊糙面上，向后上方轻拉，迅速用左手食指和拇指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和手掌尺侧夹其尾根部固定于手中。

给药法：

（1）灌胃法：左手捉拿小鼠后，使口朝上，颈部轻轻拉直，右手持吸有药液的注射器，将灌胃针头从口角插入口腔，沿上腭向食道轻轻推进，如遇阻力应抽出灌胃针管重插。当推进约2－3公分时，动物安静，呼吸无异常，即可将药液缓缓推入。

0.1-0.3m l/10g。

（2）腹腔注射法：左手捉拿小鼠后，使腹部朝上。右手持盛有药液的注射器，自左腹下部插入，针头与腹壁的角度呈45度。针头进入腹腔时可有抵抗力消失感。先回抽一下无气泡或血后，轻轻推入药液。0.1-0.2m l/10g。

（3）皮下注射法：左手捉拿小鼠固定头部，然后用左手无名指及小指将小鼠左后肢及背部压在掌面，右手持注射器，自头侧背部插入皮肤，注入药液。拔针时，轻捏针刺部位片刻，以防药液溢出。

注射量0.05－0.25m l/10g。

（4）肌肉注射法：将小鼠捉住，固定左后肢，将注射器插入大腿肌肉，在注射前，应回抽针栓，如无回血，则可给药。注射量一般为0.2m l/次。

（5）尾静脉注射法：将小鼠置入特别鼠筒中，尾巴露出。用酒精棉球擦拭使尾血管扩张。以无名指和小指夹持尾尖，用中指托起尾巴，使之固定。选其一侧尾静脉穿刺。如针头在血管内，推注药液无阻力。否则皮肤隆起发白，阻力增大，此时应退回针头重新穿刺。注射量0.05-0.2m l/10g。

家兔：

捉拿法：以右手抓住头颈部皮肤，左手托起臀部，使兔在实验者手中呈自然匐状即可。

给药法：

（1）腹腔注射法：同小鼠。

（2）静脉注射法：一般采用耳缘静脉给药。先将家兔固定于兔箱内，拔去注射部位的兔毛，用酒精棉球涂擦耳缘静脉皮肤使血管扩

张。以左手食指放在耳下将兔耳垫起，并以拇指按住耳尖部。右手持带有6号针头的注射器，尽量从血管远端刺入血管。注射时针头先刺入皮下，向前推进少许，然后刺入血管。针头刺入血管后再稍向前推进，轻轻推动针栓，若无阻力和局部皮肤发白隆起现象，即可注药。否则应将针头退出，再重新刺入血管。注射完毕，用棉球压住针眼，拔去针头。

（五）实验动物的取血方法

（1）小白鼠、大白鼠的取血方法:

颈动静脉和股动静脉取血：将动物麻醉，暴露相应的血管，用注射器从血管中抽血或剪断血管，从血管外吸血。

心脏取血：动物仰卧位固定，用连接有4－5号针头的注射器在左侧第3－4肋间于心搏最强处穿刺，当针刺入心脏时，血液由心脏收缩的力量自动压入注射器中。也可开胸直接将注射器针刺入心脏抽取血液。

尾尖取血：即剪断尾尖，让其自行流血，依取血量的多少与次数处理方法不同。量需要较多时采用麻醉动物并辅以尾部按摩或加温浴。需多次采用时可分次剪尾。

眶动脉或眶静脉取血：先将动物倒挂压迫眼球，使眼球突出充血后，以止血钳迅速摘取眼球后，眼眶内很快流出血液，将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃器皿内，直至不流为止。一般可取动物体重的4%－5%血液量。用毕动物死亡，只适于一次使用。

断头取血：用剪刀剪掉鼠头，立即将鼠颈向下，提取动物，并对准已准备好的盛血容器，则鼠血从颈部皮肤很快滴入容器内。（2）兔取血法：

心脏取血：在心搏最明显处取血。部位是胸骨左缘第3肋间隙旁约3m m处进针。

耳缘静脉取血：局部去毛，用酒精涂擦，使血管扩张，然后以粗大针头插入耳缘静脉取血。

颈动静脉和股动静脉取血：同在、小白鼠的方法。

（六）实验动物的处死方法

实验结束后，常须将动物处死，常用方法如下：

颈椎脱臼法：本法适用于小鼠，用手指压住小鼠的后头部，捏住鼠尾，用力向上牵拉，使之颈椎脱臼致死。

空气栓塞法：用注射器将空气急速注入静脉，可使动物死亡。

心脏取血法：用粗针头一次大量抽取心脏血液，可到动物立即死亡。

大量放血法：处死狗时常用此法。操作用在股三角区横切约10cm 长的切口，切断股动脉和股静脉。血液立刻喷出。此时可同时用自来水冲洗。动物可在3－5分钟死亡。

其它方法：蛙类可断头处死，也可用探针经枕骨大孔破坏脑和脊髓处死动物。