消毒与灭菌PPT课件
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病原微生物实验室的 消毒与灭菌
湖南省疾病预防控制中心 张红 2010.5
-
1
消毒和灭菌是保护操作人员和环境 不被病原微生物污染和感染的重要环节
• 含有病原微生物的废物必须经过灭菌才能 作为普通废物处理。
• 操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过 消毒/灭菌达到对病原微生物的杀灭， -保护操作人员，保护环境。
• 消毒和灭菌基本常识对于实验室生物安全 至关重要。
-
2
实验室生物危害废物示例
-
3
消毒和灭菌的基本原则: 适用于所有已知不同类别的病原微生物
清除污染的特殊要求: 根据实验工作类型以及所操作的感染性物质的特 性来决定
提供的一般性资料: 可用于各病原微生物实验室建立标准和操作程序， 以处理特定实验室中所涉及的生物危害
-
4
基本概念
清洁 清洁剂 消毒 消毒剂/抗菌剂 灭菌 灭菌剂/杀菌剂/化学灭菌剂 化学方法 物理方法
-
5
基本概念
消毒与灭菌： - 消毒和灭菌为两个不同概念 - 消毒处理不一定都能达到灭菌要求 而灭菌一定都能达到消毒目的
1. 消毒（disinfection）： 通过物理或化学手段去除或杀灭病原微生物
消毒剂的浓度（浓度越高, 消毒效果越好？ ） 消毒剂的作用时间 注意消毒剂有效期！-消毒剂的有效期
消毒剂使用的有效期限
-
14
耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌（如 TB，M.terrae ） 非脂类或小病毒（如脊 髓灰质炎病毒 , 柯萨奇病毒，HBV） 真菌（如，念珠菌属，曲霉属） 细菌繁殖体（如：金葡，绿脓）
• 感染性物质的溢出以及含有大量有机物的物质， 推荐使用更强作用的含5 g/L有效氯的溶液来处 理。
-家用漂白剂的次氯酸钠溶液含有50 g/L的有效氯 -工业用漂白剂的次氯酸钠溶液含有近120 g/L的有 效氯。
（4）最低有效浓度： 液体化学杀菌剂能达到产品标明 ， 能杀灭的微生物范围的 活性 注意产地和产家 -- 防假冒伪劣产品 —实际有效浓度与产品标示不同
-
16
常用化学灭菌剂的性能比较
杀菌剂
含氯
使用浓度 （％）
消毒水平
细菌
高效
+
被灭活 微生物 特征
包膜病毒
+
无包膜 病毒
+
结核分 枝杆菌
+
细菌芽孢
+/-
通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢 对象：包括物体表面、空气和污染物等。 方式：有擦洗消毒、熏蒸和浸泡等。
• 物理消毒灭菌
紫外线
高压蒸汽灭菌
焚烧
HEPA过滤除菌
-
10
化学消毒方法
使用方法：
刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的 湿墩布擦洗
• 严重污染的物品会影响除污染剂的杀菌作用，不 能被迅速地消毒或灭菌；许多杀菌剂只对经过预 清洁的物品才具有杀菌活性。
有机物（蛋白质） 开口容器(无盖) 工作液的初始浓度(储藏高浓度或使用浓度) 使用频率和特性 室内条件(高温时能释放氯气)
一般情况： 一天多次浸泡、含高浓度有机物的材料，应每天至少更换 一次； 使用频率较低的漂白剂溶液，则可以维持一周时间。
-
20
2）有效氯浓度
• 常规实验室用于消毒的有效氯浓度应为1 g/L。
包膜病毒 （如：HSV,CMV,RSV,HIV）
-
蒸汽灭菌
气体灭菌 消毒剂水平
灭菌 （高，延时）
高效
中效 低效
15
消毒剂种类
（按标签说明使用）
（1）高效（水平）消毒剂： 杀灭所有微生物，除了大量细菌芽孢
（2）中效： 杀灭所有微生物，除了细菌芽孢
（3）低效： 杀灭多数细菌繁殖体和有包膜（亲脂性）的病毒
过氧乙 0.001～ 高效
+
+
+
+
+
酸
0.2
戊二醛 2
化学灭菌/ 高效
+
+
+
+
+
甲醛
3 ～ 8 高效/中效 +
+
+
+ +/-
酒精 ～ 70% 中效
+
+
-
+
-
季胺盐 0.4 ～ 低效
+ -+
-
-
-17
杀菌剂 含氯
常用化学灭菌剂的安全性及特征
腐蚀性
+
残留物 有 害
+
被有机物 灭活
+
皮肤、眼 刺激性
+
呼吸道 刺激性
-
过氧乙酸
+
-
+
+
-
戊二醛
-
+
-
+
+
甲醛
-
+
-
+
+
酒精
+/-
-
+
+
-
季胺 盐
-
-
+
+
-
-
18
（一）表面消毒
1. 氯及氯化物 • 广泛应用的广谱化学杀菌剂 杀灭细菌、真菌、结核杆菌、病毒及芽孢 • 廉价、速效
-
19
（1）氯（次氯酸钠）
• 氯作为消毒剂/漂白剂使用时为强碱性，具腐蚀性（金属） 1）更换频率取决于
-
8
基本概念
气体消毒剂与烟雾灭菌剂 - 熏蒸消毒
在密闭空间内进行熏蒸以达到消毒目的的一种方法 （污染的空气、表面）
清洁与预清洁—去垢/污剂
指去除污垢、有机物和污渍 必须通过预清洁才能实现消毒和灭菌的目的
清除污染 指去除/杀死微生物的任何过程，清除污染的应用范 围更广
-
9
消毒与灭菌的方法
• 化学消毒灭菌
5．化学杀菌剂（chemical germcide） 用于杀灭微生物的化学品或化学混合物
-
7
基本概念
6．灭菌剂（microbicide） 能够杀灭微生物的化学品或化学混合物，其杀灭细菌 芽孢的能力达到灭菌水平的称为灭菌剂。
7．防腐剂 （antiseptic） 能够抑制微生物生长和繁殖但不足以杀灭的化学物质
注意！！！
• 预清洁时必须谨慎，以避免暴露于感染性物质; • 必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质; • 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒;
• 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定
-
11
清洁
-
12
化学消毒方法
消毒剂与灭菌剂：
用于杀死病原微生物的化学品或化学混合物
抗菌剂与防腐剂
气体消毒剂与烟雾灭菌剂
（同熏蒸消毒）
熏蒸消毒
在密闭空间内进行熏蒸以达到消毒目的的一种方法 （污染的空气、表面）
-
13
防止过度使用消毒剂!
• 正确使用化学消毒剂以确保实验场所的安全， 减少来自感染性物质的危险 -选择合适的化学消毒剂
应考虑经济、控制库存以及限制环境污染等因素， 尽可能减少化学消毒剂的源自文库用量
• 化学消毒剂的作用时间因品种和厂商而异 • 应按产品说明书配制和使用
（不一定杀灭其孢子）
2. 灭菌（sterilization）： 杀灭和／或去除所有微生物及其孢子的过程
-
6
基本概念
3．抗菌剂（antimicrobial） 能够杀灭或去除微生物或抑制其生长和繁殖的制剂
4．消毒剂（disinfectant）
用于杀灭微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀 灭孢子,消毒剂常用于非生命物体或其表面
湖南省疾病预防控制中心 张红 2010.5
-
1
消毒和灭菌是保护操作人员和环境 不被病原微生物污染和感染的重要环节
• 含有病原微生物的废物必须经过灭菌才能 作为普通废物处理。
• 操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过 消毒/灭菌达到对病原微生物的杀灭， -保护操作人员，保护环境。
• 消毒和灭菌基本常识对于实验室生物安全 至关重要。
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2
实验室生物危害废物示例
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3
消毒和灭菌的基本原则: 适用于所有已知不同类别的病原微生物
清除污染的特殊要求: 根据实验工作类型以及所操作的感染性物质的特 性来决定
提供的一般性资料: 可用于各病原微生物实验室建立标准和操作程序， 以处理特定实验室中所涉及的生物危害
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4
基本概念
清洁 清洁剂 消毒 消毒剂/抗菌剂 灭菌 灭菌剂/杀菌剂/化学灭菌剂 化学方法 物理方法
-
5
基本概念
消毒与灭菌： - 消毒和灭菌为两个不同概念 - 消毒处理不一定都能达到灭菌要求 而灭菌一定都能达到消毒目的
1. 消毒（disinfection）： 通过物理或化学手段去除或杀灭病原微生物
消毒剂的浓度（浓度越高, 消毒效果越好？ ） 消毒剂的作用时间 注意消毒剂有效期！-消毒剂的有效期
消毒剂使用的有效期限
-
14
耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌（如 TB，M.terrae ） 非脂类或小病毒（如脊 髓灰质炎病毒 , 柯萨奇病毒，HBV） 真菌（如，念珠菌属，曲霉属） 细菌繁殖体（如：金葡，绿脓）
• 感染性物质的溢出以及含有大量有机物的物质， 推荐使用更强作用的含5 g/L有效氯的溶液来处 理。
-家用漂白剂的次氯酸钠溶液含有50 g/L的有效氯 -工业用漂白剂的次氯酸钠溶液含有近120 g/L的有 效氯。
（4）最低有效浓度： 液体化学杀菌剂能达到产品标明 ， 能杀灭的微生物范围的 活性 注意产地和产家 -- 防假冒伪劣产品 —实际有效浓度与产品标示不同
-
16
常用化学灭菌剂的性能比较
杀菌剂
含氯
使用浓度 （％）
消毒水平
细菌
高效
+
被灭活 微生物 特征
包膜病毒
+
无包膜 病毒
+
结核分 枝杆菌
+
细菌芽孢
+/-
通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢 对象：包括物体表面、空气和污染物等。 方式：有擦洗消毒、熏蒸和浸泡等。
• 物理消毒灭菌
紫外线
高压蒸汽灭菌
焚烧
HEPA过滤除菌
-
10
化学消毒方法
使用方法：
刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的 湿墩布擦洗
• 严重污染的物品会影响除污染剂的杀菌作用，不 能被迅速地消毒或灭菌；许多杀菌剂只对经过预 清洁的物品才具有杀菌活性。
有机物（蛋白质） 开口容器(无盖) 工作液的初始浓度(储藏高浓度或使用浓度) 使用频率和特性 室内条件(高温时能释放氯气)
一般情况： 一天多次浸泡、含高浓度有机物的材料，应每天至少更换 一次； 使用频率较低的漂白剂溶液，则可以维持一周时间。
-
20
2）有效氯浓度
• 常规实验室用于消毒的有效氯浓度应为1 g/L。
包膜病毒 （如：HSV,CMV,RSV,HIV）
-
蒸汽灭菌
气体灭菌 消毒剂水平
灭菌 （高，延时）
高效
中效 低效
15
消毒剂种类
（按标签说明使用）
（1）高效（水平）消毒剂： 杀灭所有微生物，除了大量细菌芽孢
（2）中效： 杀灭所有微生物，除了细菌芽孢
（3）低效： 杀灭多数细菌繁殖体和有包膜（亲脂性）的病毒
过氧乙 0.001～ 高效
+
+
+
+
+
酸
0.2
戊二醛 2
化学灭菌/ 高效
+
+
+
+
+
甲醛
3 ～ 8 高效/中效 +
+
+
+ +/-
酒精 ～ 70% 中效
+
+
-
+
-
季胺盐 0.4 ～ 低效
+ -+
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杀菌剂 含氯
常用化学灭菌剂的安全性及特征
腐蚀性
+
残留物 有 害
+
被有机物 灭活
+
皮肤、眼 刺激性
+
呼吸道 刺激性
-
过氧乙酸
+
-
+
+
-
戊二醛
-
+
-
+
+
甲醛
-
+
-
+
+
酒精
+/-
-
+
+
-
季胺 盐
-
-
+
+
-
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18
（一）表面消毒
1. 氯及氯化物 • 广泛应用的广谱化学杀菌剂 杀灭细菌、真菌、结核杆菌、病毒及芽孢 • 廉价、速效
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19
（1）氯（次氯酸钠）
• 氯作为消毒剂/漂白剂使用时为强碱性，具腐蚀性（金属） 1）更换频率取决于
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8
基本概念
气体消毒剂与烟雾灭菌剂 - 熏蒸消毒
在密闭空间内进行熏蒸以达到消毒目的的一种方法 （污染的空气、表面）
清洁与预清洁—去垢/污剂
指去除污垢、有机物和污渍 必须通过预清洁才能实现消毒和灭菌的目的
清除污染 指去除/杀死微生物的任何过程，清除污染的应用范 围更广
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消毒与灭菌的方法
• 化学消毒灭菌
5．化学杀菌剂（chemical germcide） 用于杀灭微生物的化学品或化学混合物
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7
基本概念
6．灭菌剂（microbicide） 能够杀灭微生物的化学品或化学混合物，其杀灭细菌 芽孢的能力达到灭菌水平的称为灭菌剂。
7．防腐剂 （antiseptic） 能够抑制微生物生长和繁殖但不足以杀灭的化学物质
注意！！！
• 预清洁时必须谨慎，以避免暴露于感染性物质; • 必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质; • 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒;
• 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定
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11
清洁
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12
化学消毒方法
消毒剂与灭菌剂：
用于杀死病原微生物的化学品或化学混合物
抗菌剂与防腐剂
气体消毒剂与烟雾灭菌剂
（同熏蒸消毒）
熏蒸消毒
在密闭空间内进行熏蒸以达到消毒目的的一种方法 （污染的空气、表面）
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13
防止过度使用消毒剂!
• 正确使用化学消毒剂以确保实验场所的安全， 减少来自感染性物质的危险 -选择合适的化学消毒剂
应考虑经济、控制库存以及限制环境污染等因素， 尽可能减少化学消毒剂的源自文库用量
• 化学消毒剂的作用时间因品种和厂商而异 • 应按产品说明书配制和使用
（不一定杀灭其孢子）
2. 灭菌（sterilization）： 杀灭和／或去除所有微生物及其孢子的过程
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6
基本概念
3．抗菌剂（antimicrobial） 能够杀灭或去除微生物或抑制其生长和繁殖的制剂
4．消毒剂（disinfectant）
用于杀灭微生物的化学品或化学混合物，但不一定杀 灭孢子,消毒剂常用于非生命物体或其表面