D抗体使用指南民间版
说明书D二聚体完整版
说明书D二聚体Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】2010年4月（新版第1版）D-Dimer使用说明书【全体的注意事项】1.本品只限用于体外诊断。
2.诊断结果要结合其他相关检查结果或临床症状进行判断。
3.不能保证使用说明记载以外的使用方法。
4.仔细阅读检测装置的使用说明书后进行操作。
5.因本品含有防腐剂叠氮化钠(0.1%以下)，如果不慎吸入口中或与眼、皮肤和衣物接触,请立刻采取用大量清水冲洗等应急措施，必要时要到医院进行治疗。
【形状，构造等(试剂盒的构成)】1.反应缓冲液三(羟基甲基)氨基甲烷其他2.乳胶凝集试剂抗人D-二聚体单克隆抗体(鼠)胶乳颗粒1次检测使用量为0.02～0.15mL【使用目的】检测血浆或血清中的纤溶酶分解纤维蛋白的产物D-二聚体【检测原理】本品以乳胶凝集法为原理。
样本中的抗原，可与附着在乳胶颗粒上的抗体产生凝集反应，形成抗原抗体复合物，其浊度的变化通过测定特定波长的吸光度值，即可算出样本中D-二聚体的含量。
【操作上的注意事项】1.检测样本的性质,采集方法(1)血浆：静脉血与柠檬酸钠以体积比9比1混合后，离心（3,000rpm,10～30分钟）的上清血浆可作为样本使用。
(2)血清：使用添加血液凝固促进剂及抗纤溶酶的采血管分离的血清可作为样本使用。
2.干扰物质关于干扰物质，在不超过以下物质的记载的浓度范围时，对D-二聚体的检测不产生影响。
(1)游离胆红素18.40mg/dL(2)结合胆红素19.60mg/dL(3)血红蛋白460mg/dL(4)血清呈乳白色混浊2400FTU(5)类风湿因子500IU/mL【用法?用量（操作方法）】1.试剂及试液的制作方法(1)反应缓冲液:直接使用。
(2)乳胶凝集试剂:反复倒置混合均匀后直接使用。
2.操作方法自动分析装置所设定的检测操作方法（不同的装置有不同的操作方法）(1)校准曲线的绘制方法吸取各浓度的校准液（3μL）及反应缓冲液（150μL）分别注入到比色管中，然后加入乳胶凝集试剂（50μL），于波长600nm处测定吸光度，根据浓度和浊度变化的关系来绘制校准曲线。
抗d免疫球蛋白【范本模板】
关于RH免疫球蛋白其他名称：抗Rh—D球蛋白主要成分：抗Ｄ人免疫球蛋白。
性状:片剂,注射液。
功能主治：Ｒｈ阴性母亲分娩或流产Ｒｈ阳性胎儿时，胎儿红细胞中的Ｒｈ－Ｄ抗原可进入母体血液，与母体的免疫活性细胞反应，而引起异型免疫反应。
本品能破坏进入母体血液的Ｒｈ－Ｄ抗原,抑制母体血液产生抗Ｒｈ（Ｄ）抗体，从而可预防Ｒｈ的异型免疫反应。
用法及用量:口服：４０~６０ｍｇ／日，连服４～６周,其后维持量１０～２０ｍｇ／日。
肌注:产后３日内注射０.２ｇ。
不良反应和注意：有发热、注射局部疼痛。
规格:片剂：２０ｍｇ；针剂：0.２ｇ,生产厂家：是否医保用药：非医保是否非处方药：处方其它：用前应做Ｒｈ血型诊断和更精确的凝集试验。
Rh血型系统在临床的作用Rh血型分为Rh阴性和Rh阳性，我国人群大多数是Rh阳性，Rh阴性只占1％，汉族人群中则低于0.5％.白种人群可占15%左右。
Rh血型不合发生在母亲是Rh阴性，而胎儿是Rh阳性的母子之间.临床上的常见例子就是：父亲为Rh阳性（D),母亲为Rh阴性（d)，且第一胎胎儿为Rh阳性(D)，在妊娠或生产的过程中，一旦有足够的胎儿红血球进入母亲的循环中，则母亲即可能被此外来的Rh阳性抗原(D)刺激而致敏，产生对抗Rh阳性抗原的抗体(Anti —D）。
在下一次的怀孕过程中就可能发生这种抗体去攻击胎儿的免疫反应，这种免疫反应称之为「Rh同族免疫」。
若造成的严重的胎儿疾病，我们通称为「免疫性胎儿水肿」或“胎儿红血球母细胞过多症" 。
这种反应于妊娠期间愈早出现,对胎儿的伤害就愈大,可以表现出轻度的贫血，或胎儿水肿、肝脾肿大，甚至心脏衰竭与胎死腹中。
产生的条件是：1、Rh阴性的孕妇,检查丈夫是否为Rh阳性。
2、胎儿是Rh阳性，母亲是Rh阴性。
3、必须有足够数量的胎儿红血球进入母体循环。
4、母体的免疫系统必须健全，足以产生对抗Rh阳性抗原的抗体。
Rh血型不合溶血反应多发生在第二胎以后，约占99%.而初孕时溶血反应较轻。
国内外输血指南解读
大失血抢救要点
▪ 大失血抢救成功依赖于快速处理、良好沟 通和经验丰富的资深医师
▪ 有效的保温技术 ▪ 应在补充晶体液之前采集血样 ▪ 抢救大失血的相关部门如急诊科、ICU、
病房、手术室、输血科等，应拥有本院大 出血抢救预案 ▪ 定期演练预案，及时修改完善
≮100×109/L ▪ 心脏外科手术应容易获得血小板 ▪ 肝移植手术患者凝血功能下降的原因：凝
血因子减少+纤溶亢进+血小板减少 ▪ TEG来指导血小板和其他血液成分输注
免疫性血小板减少症 血小板输注指南
▪ 当发生与严重血小板减少相关的胃肠道、 泌尿生殖道、中枢神经系统或其他部位出 血并危及生命时，应输注血小板
依据
▪ 卫生部令第85号《医疗机构临床用血管理办法》 ▪ 欧洲《严重创伤出血处理指南·新版》 ▪ 美国血库协会（AABB）《临床输血规范与实
践·第三版》 ▪ 美国红十字会《输血实践指南·第二版》 ▪ 美国麻醉医师协会血液成分治疗专业组 ▪ 英国皇家血液服务中心《临床输血手册·第四版》 ▪ 英国爱丁堡皇家内科医师协会
▪ 只有输血量达到循环血容量时，凝血机制 方被破坏
▪ DIC发生很可能是休克复苏不及时的后果 ▪ 血小板数量与微血管出血高度相关 ▪ 当失血量为血容量的150%，纤维蛋白原
出现明显不足，比其他凝血因子异常更早 出现
大失血处理指南
▪ 输血科与外科、麻醉科和血液学资深医师 进行良好沟通与合作非常重要
▪ 临床输血委员会起核心作用，编制大失血 抢救预案是临委会的重要工作
▪ 大量研究表明，只有失血量达到整个血容 量时，凝血机制方被破坏
抗D人免疫球蛋白说明书
抗Ｄ人免疫球蛋白说明书抗D人免疫球蛋白说明书适应症：抗D人免疫球蛋白是一种制备自人血浆中含大量抗D抗体的治疗性产品，用于预防Rh阴性（D阴性）妇女产前或产后免疫性溶血病的发生。
本产品适应于Rh阴性（D阴性）妇女接受Rh阳性（D阳性）胎儿的情况。
用法和用量：注射方式：本产品仅供静脉注射使用。
静脉注射剂量：建议在分娩后72小时内使用，剂量为300微克。
如有需要，可在分娩后48小时再次使用300微克。
静脉输注速度：注射速度应控制在每分钟3毫升以下。
禁忌症：对血浆制品或本产品的任何成分过敏者禁用。
本产品禁止肌肉注射。
不良反应：本产品的使用可能引起过敏反应，包括过敏性休克。
过敏反应症状一般包括皮疹、瘙痒、荨麻疹、呼吸急促、低血压甚至休克等。
如果出现过敏反应症状，应立即停止使用本产品，并在医生的指导下进行相应治疗。
注意事项：1. 在使用本产品之前，请详细了解患者的过敏史，特别是对血浆制品过敏的情况。
2. 本产品在严格的临床观察下使用，应保持充分的医护人员和设备的配备，以应对可能的过敏反应。
3. 使用本产品时，请注意检查病人是否有任何过敏反应的症状，如出现过敏反应症状，应立即停止使用，并按照医生的建议进行相应治疗。
4. 存放本产品时，请遵守指示，将其存放在指定的环境温度下，避免阳光直射，防止冷冻和冷藏。
5. 使用本产品时，请密切观察病人的反应，特别是在初始注射后30分钟内，以确保安全。
包装规格：本产品通常以单次剂量装在无菌注射用玻璃瓶中，每瓶含300微克。
产品储存期限标注在瓶上，请在有效期内使用。
生产企业：本产品由专业制药公司生产，该公司具有相关资质和生产许可证，确保产品质量稳定可靠。
总结：抗D人免疫球蛋白是一种用于预防Rh阴性（D阴性）妇女产前或产后免疫性溶血病的治疗性产品。
使用时请确保医护人员和设备的配备，随时注意病人的反应情况，如出现过敏反应症状应立即停止使用，并进行相应治疗。
请遵守产品存储规定，确保产品质量。
Rh(D)血型鉴定
Rh（D）血型鉴定一．原理：Rh抗原主要有5种：C、c、D、E、e。
抗D抗体是Rh血型系统中最常见的抗体。
Rh抗体主要是不完全抗体，如用5种不完全抗体的血清作鉴定，可将Rh血型系统分为18个型别。
在临床上，因D抗原的抗原性最强，出项频率高，故一般只做D抗原的血型鉴定。
凡带有D抗原者，称为Rh（D）阳性，不带有D抗原者，称为Rh（D）阴性。
二．试剂及标本1．单克隆Rh（D）诊断试剂（IgM），由上海生物技术有限公司提供。
2．被检者5％红细胞，洗涤1次3．5％Rh D阳性红细胞悬液三．操作步骤：1．将1滴盐水抗D试剂加入试管，再加5％受检红细胞悬液1滴，1000rpm，1分钟，观察凝集结果，根据凝集与否来确定相应的抗原。
2.对照试验：取试管2支，标明阳、阴标记，分别加入5％RhD阳性，阴性红细胞各1滴，各管再加抗D血清1滴，1000rpm，观察结果，如阳性对照凝集，阴性对照不凝集，表明本试验成立。
3. 如发现抗D检测管不凝集，被检者可能为Rh阴性，需用不同批次的抗D 血清再进一步试验，并且用间接抗人球蛋白试验来鉴定是否有D抗原，还是弱D 型抗原。
受检红细胞与各批抗D 血清不凝集或只与其中一批或数批抗D血清凝集，但在间接抗球蛋白试验中都凝集者，都属弱D型细胞。
四. 结果判别：1.常规情况下，红细胞只作Rho （D）定型，根据反应格局报告为：Rho（D）阴性，Rho （D）阳性，Rho(D)弱阳性。
2.当有特殊情况时，如抗体筛选时有不规则抗体存在等情况下，才需做Rh 血型抗原全部表现型定型。
五．Rh血型鉴定试验中应注意的问题：1．Rh定型主要鉴定D抗原，定型时应按抗-D血清试剂的使用说明进行，并注意必须要有严格的对照试验，包括抗原的阴、阳性对照以及试剂对照试验。
2．根据美国AABB技术手册第12版（1996）规定：D u这个术语不再使用，携带弱的D抗原的红细胞仍被归类为D阳性，称为弱D（weak D）。
抗体的制备与使用指南
抗体的制备与使用指南一、抗体的制备。
1. 免疫原的选择。
- 对于制备抗体，首先要确定合适的免疫原。
如果是针对蛋白质抗原，要保证其纯度尽可能高。
例如，从细胞裂解物中纯化目标蛋白，可以采用亲和层析等方法。
对于小分子半抗原（如药物分子等），通常需要将其与大分子载体蛋白（如牛血清白蛋白）偶联，以增强其免疫原性。
- 免疫原的剂量也很关键。
一般来说，初次免疫时，对于小鼠等小动物，蛋白质抗原的剂量可在10 - 100μg之间，具体剂量需要根据抗原的性质和动物的种类进行优化。
2. 动物的选择与免疫。
- 动物选择。
- 常用的动物有小鼠、大鼠、兔子等。
小鼠因为繁殖快、成本低，是实验室制备单克隆抗体时常用的动物。
兔子则常用于制备多克隆抗体，其血清中抗体产量相对较高。
- 免疫程序。
- 对于小鼠，初次免疫可采用皮下注射或腹腔注射的方式。
以皮下注射为例，可在小鼠背部多点注射免疫原。
初次免疫后，间隔2 - 4周进行加强免疫，加强免疫的剂量可以适当减少，一般为初次免疫剂量的1/2 - 1/3。
经过2 - 3次加强免疫后，可检测动物血清中的抗体效价。
3. 单克隆抗体的制备。
- 细胞融合。
- 在小鼠免疫后，取其脾脏细胞（其中含有产生抗体的B淋巴细胞），与骨髓瘤细胞（如SP2/0细胞系）在聚乙二醇（PEG）的作用下进行融合。
融合后的细胞具有两种细胞的特性，既能产生特异性抗体，又能在体外无限增殖。
- 筛选阳性克隆。
- 利用次黄嘌呤 - 鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）缺陷型的骨髓瘤细胞和HAT （次黄嘌呤 - 氨基蝶呤 - 胸腺嘧啶核苷）选择培养基进行筛选。
在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因为缺乏HGPRT酶而死亡，未融合的脾细胞在体外不能长期存活，只有融合成功的杂交瘤细胞能够生长。
然后通过ELISA等方法筛选出产生特异性抗体的阳性克隆。
- 克隆化培养。
- 对筛选出的阳性克隆进行克隆化培养，常用的方法有限稀释法和软琼脂平板法。
限稀释法是将细胞悬液进行连续稀释，使每个孔中理论上只含有一个细胞，然后培养这些细胞，形成单克隆的细胞集落，从而得到稳定分泌特异性抗体的单克隆细胞系。
BD 免疫荧光抗体的使用指南
Cell Staining for Immunofluorescence MicroscopyFIXING THE CELLSCoverslip Preparation for Adherent CellsGrow cells on glass coverslips or glass chamber slides.Rinse briefly in phosphate-buffered saline (PBS).Coverslip Preparation for Non-Adherent CellsCoat coverslips with an excess of poly-L-lysine (0.01% solution, Sigma, cat.# P4707) for 10 minutes at room temperature.Aspirate the poly-L-lysine solution and allow coverslips to dry completely.Transfer cells in medium to 50 ml tubes.Centrifuge (400 x g, 15°C) for 5 minutes.Aspirate the medium and resuspend the cells in 30 ml phosphate-buffered saline (PBS).Cover the dried, treated coverslips with the cell suspension.Incubate at room temperature for 30–60 minutes.Aspirate excess cell suspension.Rinse briefly in PBS.Paraformaldehyde FixationImmerse for 30 minutes in 3.7% paraformaldehyde solution at 37°C (for 100 ml: 10 ml 10X PBS, 33.4 ml of 11.1% formaldehyde, 0.6 ml 30% Triton-X, 56 ml distilled water). The solution is stable for 1 week at 4°C. Paraformaldehyde should be prepared fresh. It is toxic and should be handled appropriately in a fume hood.Methanol/Acetone FixationImmerse coverslips or chamber slides in ice-cold methanol:acetone (1:1) and incubate at -20°C for 10 minutes. Air dry the coverslips.BLOCKINGPlace the coverslips cells-side-up in a petri dish. Rinse the cells with PBS, then cover the cells with blocking buffer (1% BSA in PBS) for 30 minutes at 37°C to minimize non-specific adsorption of the antibodies to the coverslip (150-200 µl is usually sufficient to completely cover the surface area).INCUBATION WITH PRIMARY ANTIBODYRemove the blocking buffer by holding each coverslip on its edge with forceps and draining it onto a sheet of fiber-free paper.Dilute primary antibody to 1.0-10 µg/ml in blocking buffer (optimal concentration will depend on several variables, such as the affinity of the antibody and the abundance of the antigen). Distribute 150-200 µl of the primary antibody solution on each coverslip or chamber and incubate for 1 hour at room temperature in a humidified chamber.Decant the antibody solution or remove by aspiration.Wash coverslips or chamber slides three times in PBS, 5 minutes each wash.INCUBATION WITH MORE THAN ONE PRIMARY ANTIBODYIf it is desirable to examine the co-distribution of two different antigens in the same cell, a double immunofluorescence procedure may be used. Cells may be incubated simultaneously with twoprimary antibodies, provided they are monospecific and can be distinguished with secondary antibodies conjugated to different fluorochromes (or with primary antibodies directly conjugated to different fluorochromes).Incubate coverslips or chamber slides with the mixture of diluted primary antibodies for 1 hour at room temperature in a humidified chamber.Decant the antibody solution or remove by aspiration.Wash coverslips three times in PBS, 5 minutes each wash.INCUBATION WITH SECONDARY ANTIBODIESNote: If the primary antibodies are already conjugated to a fluorochrome, incubation with secondary antibody is not necessary.The coverslips are incubated with secondary antibodies conjugated to a fluorochrome; e.g. anti-mouse IgG:FITC or Cy3, depending on the donor species of the primary antibody and the desired fluorochrome. We recommend the use of cross-adsorbed and affinity-purified secondary antibodies to minimize background and non-specific reactivity from the secondary antibody. High-quality conjugated antibodies are essential for the avoidance of cross-reactivity between two different antibodies in double immunofluorescence protocols.Place coverslips cells-side-up in a petri dish.Dilute the secondary antibody to the appropriate concentration in blocking buffer. Add enough secondary antibody solution to cover the surface of each coverslip (usually 150-200 µl) or add secondary antibody to each chamber of the chamber slides.Incubate for 1 hour at room temperature.Remove the secondary antibody by blotting the edge of each coverslip on fiber-free paper.Wash coverslips three times in PBS, 5 minutes each wash.PREPARATION FOR MICROSCOPYInvert each coverslip onto a slide containing 10 µl of mounting media (VECTASHIELD mounting media; Vector Laboratories cat. #H-1000) or detach the chamber wells from the glass slide and add mounting media.Remove the excess mounting media with fiber-free paper, without disturbing the coverslip. Seal the edges of each coverslip with regular transparent nail polish and allow to dry for 3 minutes. This will provide semi-permanent preparations. The cells are now ready for microscopic viewing.。
抗d效价操作方法
抗d效价操作方法
抗D效价是指人体血清中对D型众人血细胞溶血原性抗体的活性水平。
以下是抗D效价操作方法：
1. 标本采集：采集患者静脉血标本，并将其离心分离血清。
2. 制备D型众人血细胞：使用带有辅助试剂的普通红细胞试剂盒来制备D型众人血细胞。
3. 稀释血清：使用稀释试剂盒来稀释血清，以获得不同浓度的患者血清。
4. 制备荧光标记抗人球蛋白：制备荧光标记抗人球蛋白，并将其加入测试板。
5. 加入样品和细胞：将稀释后的血清样品和制备好的D型众人血细胞加入测试板中进行反应。
6. 分析结果：将测试板放入荧光显微镜中进行观察，并根据荧光值和血清浓度确定抗D效价。
注：以上操作应使用专业人员进行，并严格按照试剂盒说明操作。
抗d免疫球蛋白作用原理
抗d免疫球蛋白作用原理抗D免疫球蛋白，听起来有点儿专业，对吧？但它的作用原理真的是有趣又重要。
想象一下，我们的身体就像一个城堡，里面有无数的小卫兵负责保护。
可敌人就会闯进来，比如那些可恶的Rh阳性血型的红细胞。
这时候，抗D免疫球蛋白就像是从天而降的超级英雄，给小卫兵们补充能量，让他们更有力量去打击这些侵略者。
抗D免疫球蛋白的作用主要是针对那些Rh阳性血型的红细胞。
当一个Rh阴性的妈妈怀孕了，如果她的宝宝是Rh阳性，妈妈的免疫系统可能会误认为宝宝的红细胞是“外来者”，然后发起攻击。
结果可想而知，宝宝就可能遭殃。
这时候，抗D免疫球蛋白就派上用场了，它可以帮助妈妈的身体识别这些红细胞，避免误伤。
就好比是在打仗前，先给士兵发了个“身份证”，确保大家知道谁是敌人，谁是朋友。
抗D免疫球蛋白的神奇之处还在于，它能通过静脉注射快速进入体内，帮助抵抗那些不受欢迎的Rh阳性红细胞。
你想啊，万一妈妈没有及时打针，结果她的免疫系统跟宝宝的红细胞“干起来”，那真是个麻烦。
这种情况下，抗D免疫球蛋白就像是医生的特效药，迅速缓解紧张局势，保护宝宝的安全。
还有一个有趣的点，就是抗D免疫球蛋白并不是一劳永逸的。
它的作用是暂时的，通常在怀孕的每个阶段都要定期注射。
就像你去健身房锻炼，得不断地补充能量，才能保持状态。
怀孕期间，妈妈需要特别注意这个，别让敌人有可乘之机。
医护人员也会像贴心的小助手，时刻提醒你按时注射。
抗D免疫球蛋白不仅限于孕妇，它也被广泛应用于其他情况，比如输血时。
如果一个Rh阴性的人不小心接受了Rh阳性的血液，可能会引发严重的反应。
这时候，抗D免疫球蛋白就像是急救车，及时赶到，避免了大事化小，小事化无。
这种保护机制真的是让人感叹科技的伟大，居然能如此高效地解决问题。
说到抗D免疫球蛋白的来源，它是从健康的Rh阳性人群中提取的，这可不是随便找点儿东西就能搞定的。
这背后是很多科学家的努力和研究，确保每一针都安全有效。
就像酿酒一样，经过严格的工艺和检测，才能保证最终的产品是“精品”。
医院检验中心D1D二聚体操作规程
医院检验中心D1、D-二聚体操作规程
[原理]
以抗D-二聚体单克隆抗体标记固相载体胶乳颗粒，在此胶乳颗粒抗体结合物中加入受检血浆，如血浆中含0.5mg/L以上的D-二聚体,胶乳颗粒则发生凝集反应.
[标本与试剂准备]
0.109M枸椽酸钠抗凝剂与血液以1:9混匀,2500g 10分钟离心。
试剂在室温平衡15分钟后摇匀使用.
[操作]
在黑色纸片上的每个圈内各放入15ul未稀释样本血浆,阳性对照和阴性对照血浆，依次于每个圈内加摇匀后的胶乳试剂15ul(与标本等量),用塑料棒搅匀,轻轻摇动纸片2~3分钟后观察，如未稀释血浆呈阳性,可继续将样本用标本稀释液作倍比稀释。
[结果]
根据阳性结果的倍比值作半定量结果报告.
[临床意义]
DIC时,血浆D-二聚体明显升高,呈阳性反应,是诊断DIC的重要依据.D-二聚体在原发性纤溶症时正常,继发性纤溶亢进则显著增高,是二者鉴别的重要指标,此外,各型白血病,急性心肌梗死、脑血管疾病、肺脏疾病、外科手术等均可见血浆D-二聚体水平增高。
RhD血型定型试剂(单克隆抗体IgM)使用说明
RhD血型定型试剂(单克隆抗体IgM)【用法用量】1.平板法（玻片法）（1）加1滴抗D试剂于玻片上。
（2）再加1滴35-45％的被检红细胞悬液。
该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。
（3）在圆形的玻片区域中混匀，（直径约为20mm大小），前后缓慢摇晃玻片。
2分钟左右肉眼判读结果。
不要将试剂的干燥与凝集相混淆。
（4）如果呈阴性，需用试管法重做一遍试验。
2.试管法（1）加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中（75×12mm或75×10mm）。
（2）再加1滴约3-5％的被检红细胞悬液于试管中。
混匀。
（3）离心，速度和时间可选择以下二种之一： a)转速1000rpm，时间1分钟； b)转速3400rpm，时间15秒。
（4）检查是否有溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来。
（5）观察凝集状况，并立即记录结果。
必要时可借助显微镜。
（6）若是阴性结果，需在37℃孵育15-30分钟，然后再离心观察结果。
结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。
3.微量板法（U型板）（1）加1滴抗D试剂于U型底的微孔中。
（2）再在微孔中加1滴约3-5％的被检红细胞悬液，细胞悬液需事先制备于生理盐水中。
（3）用机械的方法将U型板混匀。
（4）用板式离心机离心：2000rpm，时间30秒。
不同的离心机、不同的微量板所需要的离心条件有所区别，正确实验的结果需要适当的离心，使反应板产生清晰的细胞扣及透亮的上清液。
（5）检测溶血情况（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染）。
【不良反应】尚不明确。
【禁忌】尚不明确。
【适应症】用于人RhD血型的常规检测。
【药物相互作用】如与其他药物同时使用可能会发生，详情请咨询医师或药师。
【包装】10ml/支/瓶。
【类型】处方药【医保】非【国家/地区】国产【剂型】诊断试剂【成份】抗D（IgM）单克隆细胞株培养上清液，NaCl，磷酸盐缓冲液等。
自身免疫性溶血性贫血患者类抗-D抗体的鉴定及输血治疗(附1例报告)
自身免疫性溶血性贫血患者类抗-D抗体的鉴定及输血治疗（附1例报告）王加勇，丁懿，陆紫敏同济大学附属同济医院输血科，上海 200065摘要：目的 通过血清学和基因分型对1例自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者类抗-D抗体进行特异性鉴定，指导临床安全用血。
方法 选择同济大学附属同济医院收治的1例女性AIHA患者为研究对象。
采用PCR-SSP法检测鉴定患者ABO、Rh血型，患者血清标本进行吸收放散试验，利用谱细胞对患者血清及放散液中的不规则抗体进行特异性鉴定。
回顾性分析患者的病例资料，总结其抗体处理结果和临床诊治经过。
结果 患者血型为B型DCCee，不规则抗体筛查、直接抗人球蛋白试验结果均阳性，血清及放散液中均检出特异性类抗-D抗体，给予患者相容性去白细胞悬浮红细胞4 U输血后，血红蛋白（Hb）升高至56 g/L，未出现输血反应。
采用糖皮质激素治疗后，患者Hb上升至62 g/L，贫血症状缓解。
结论 血清学检测联合基因分型可鉴定具有同种抗体特异性的自身抗体，类抗-D抗体AIHA患者治疗首选糖皮质激素，危急情况下需要输血治疗时，应选择类抗体相应抗原阴性的红细胞，输血效果较好。
关键词：溶血性贫血；类抗-D抗体；血清学检测；基因分型doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.22.016中图分类号：R556.6 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）22-0065-04输血在救治自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者过程中起关键作用，但AIHA患者血清中存在自身抗体，多数自身抗体缺乏特异性，会和所有供者的红细胞发生凝集反应，在交叉配血时掩盖同种抗体，易造成误诊［1］。
少部分自身抗体具有特异性，兼有同种抗体和自身抗体特性，可与表达相应抗原的红细胞发生反应，引起溶血反应，这类自身抗体称为类同种抗体，简称类抗体［2］。
临床输血检测中类抗体较少见，血清学试验很难区分抗体性质，常会造成临床漏诊，给输血安全带来较大风险［3］。
抗体的制备与使用指南
抗体的制备与使用指南
《抗体的制备与使用指南》
嘿呀，今天咱就来聊聊抗体这玩意儿。
你知道吗，就像我之前有一次感冒了，那可真是难受得要命啊！整天咳咳咳，感觉肺都要咳出来了。
这时候我就在想，要是有个什么东西能帮我快点好起来就好了。
后来我才知道，这抗体就像是我们身体里的小战士。
咱先来说说抗体的制备吧。
这就好比是在训练一支精锐部队，得有各种条件和步骤呢。
首先得找到合适的“原料”，就像做菜得有好食材一样。
然后经过一系列复杂的过程，慢慢培养出这些厉害的抗体小战士。
那抗体怎么使用呢？就像我感冒的时候，如果身体里有足够多的针对感冒病毒的抗体，它们就能迅速出击，把那些坏家伙给干掉。
这些抗体就像是一个个聪明的小精灵，知道该去对付谁，然后精准打击。
而且哦，抗体还挺有个性的。
不同的抗体针对不同的敌人，可不能乱来。
就像我们不能让步兵去打飞机一样，得让合适的抗体去对付合适的病原体。
哎呀，说了这么多，总之抗体就是我们身体的好帮手啦。
有了它们，我们才能在这个充满各种病菌的世界里好好地活着。
下次要是再感冒，我可得好好指望我身体里的这些抗体小战士啦！希望它们能像超级英雄一样，迅速把病魔赶跑，让我又能活蹦乱跳的啦！哈哈！
怎么样，这下你对抗体的制备和使用有点了解了吧！。
维生素D的使用说明书补充方法剂量和注意事项
维生素D的使用说明书补充方法剂量和注意事项【维生素D的使用说明书】补充方法、剂量和注意事项维生素D是人体所需的一种重要营养素，它在维持骨骼健康和促进免疫系统正常功能方面发挥着重要作用。
如何正确地使用维生素D以及在补充维生素D时需要注意的事项，本使用说明书将为您提供详细的信息。
请务必仔细阅读并按照说明使用。
一、维生素D的补充方法在维生素D的补充中，通常主要有以下几种方法。
您可以根据个人情况和医生的建议选择适合的方法：1. 饮食摄入：维生素D存在于某些食物中，包括鱼肝油、脂肪鱼、蛋黄和奶制品等。
适量摄入这些富含维生素D的食物可以帮助您满足身体对维生素D的需要。
2. 日光照射：日光是自然界中最主要的维生素D来源之一。
适量在早晨或傍晚时段接受日光照射可以帮助皮肤合成维生素D。
但需要注意的是，太阳照射过度可能导致皮肤损伤，应避免长时间暴露在过强的紫外线下。
3. 维生素D补充剂：当通过食物摄入或日光照射无法满足机体对维生素D的需求时，可考虑使用维生素D补充剂。
使用维生素D补充剂前，请务必咨询医生或药师，按照其指导使用。
二、维生素D的剂量维生素D的剂量应根据年龄、性别、季节、个人健康状况和血液维生素D水平等因素而定。
以下是一般的剂量建议，具体的剂量请遵循医生或药师的指导。
1. 成人：通常剂量介于400国际单位（IU）至2000 IU之间。
但在某些特殊情况下，如低血维生素D水平或特殊疾病的治疗，剂量可能会根据医生的要求进行调整。
2. 儿童：婴幼儿剂量一般为400 IU/天，儿童剂量则根据年龄段和营养状况而异。
请咨询医生以获取适合儿童的维生素D剂量。
三、维生素D的注意事项在使用维生素D补充剂的过程中，请留意以下事项以确保安全和效果：1. 咨询专业：在开始使用维生素D补充剂之前，请咨询医生或药师。
他们将根据您的个人情况和血液检测结果，为您合理地制定用药方案。
2. 合理剂量：遵循医生或药师的建议，按照正确的剂量使用维生素D补充剂。
维生素d注射液
维生素d注射液维生素D，也称为钙化醇，是一种重要的脂溶性维生素。
它在人体中具有多种功能，包括维持钙和磷的平衡、促进骨骼生长和发育、调节免疫系统、抵抗炎症以及减少抑郁等。
维生素D可通过多种途径获取，包括食物摄入、阳光照射以及补充剂。
然而，由于各种原因，包括饮食不均衡、日照不足、肠道吸收问题等，许多人仍然无法获得足够的维生素D。
在这种情况下，维生素D注射液成为了一种补充的选择。
维生素D注射液是一种医生开具的处方药物，通常用于那些存在维生素D缺乏的患者。
它通常以静脉注射的方式给予，以确保维生素D能够迅速被吸收和利用。
维生素D注射液的剂量和使用频率根据患者的具体情况而定，通常由医生根据血清中的维生素D水平和病人的需求来确定。
维生素D注射液一般可用于两种情况下：一是治疗维生素D缺乏症，二是预防骨质疏松和骨折。
对于那些已经出现维生素D缺乏的患者，注射维生素D可以快速恢复其正常水平，从而改善其骨骼和肌肉的健康状况。
而对于那些具有骨质疏松风险的人群，定期的维生素D注射可以帮助增加骨密度，降低骨折的风险。
维生素D注射液的安全性得到了广泛的研究和实践验证。
通常来说，它是相对安全的，但在使用过程中仍有一定的注意事项。
首先，应该在医生的指导下使用，不得自行调整剂量或使用频率。
其次，对于存在高钙血症或维生素D中毒风险的患者，应该谨慎使用，以免加重病情。
此外，对于孕妇、哺乳期妇女和儿童等特定人群，也需要特别关注剂量的选择和使用的时间。
维生素D注射液的副作用相对较少，但仍有一些可能的不良反应。
常见的副作用包括恶心、呕吐、腹泻、头晕等。
一般来说，这些副作用是轻微且暂时的，不会对患者的生活产生重大影响。
然而，如果有严重不良反应或过敏反应出现，应立即停止使用并寻求医疗帮助。
综上所述，维生素D注射液是一种有效和安全的补充剂，适用于那些存在维生素D缺乏或骨质疏松风险的患者。
然而，在使用之前，应该咨询医生并按照其指示使用，以确保安全和有效的使用。
抗D免疫球蛋白在Rh阴性血型孕产妇中的应用效果
抗D免疫球蛋白在Rh阴性血型孕产妇中的应用效果张京;卢新;孙璇;潘丽;陈立东【摘要】目的探讨注射抗D免疫球蛋白在Rh阴性血型孕产妇中的应用效果.方法选择2016年1月～2017年11月北京市海淀区妇幼保健院共就诊119例Rh阴性血型孕产妇,将孕28周自行注射抗D免疫球蛋白的33例孕妇作为抗D免疫球蛋白注射组(实验组),随机抽取未注射抗D免疫球蛋白的Rh阴性血型孕妇33例作为对照组.应用戴安娜微柱凝胶抗人球蛋白检测卡,对Rh阴性血型孕产妇的抗D抗体进行检测,使用试管法确定RhD血型,两组数据运用统计学分析其差异性.结果实验组和对照组的产后出血量、新生儿感染,早产、死胎、新生儿贫血比较,差异无统计学意义(P＞0.05).分娩方式、新生儿RhD阴性比例、新生儿高胆红素血症两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Rh阴性血型孕产妇注射抗D免疫球蛋白是避免发生同种免疫产生抗D抗体的一种有效的方法,使Rh同种免疫的发生率下降,在我国对孕产妇使用抗D免疫球蛋白的管理有待完善.%Objective To dicuss the application effect of anti-D immunoglobulin on Rh negative blood pregnant women.Methods From January 2016 to November 2017,in Haidian District Maternal and Child Health Care Hospital,119pregnant women with Rh negative blood were selected,33 pregnant women injected with anti-D immunoglobulin by themselves at 28 weeks of pregnancy were as the injected anti-D immunoglobulin group (experiment group),and 33 randomly selected from 86 pregnant women not received anti-D immunoglobulin were as the control group.The antihuman globulin detection card of Diana microcolumn gel was applied to test the anti-D antibody of the Rh negative blood pregnant women,and the RhD bloodtype was tested by test tube method,and the difference of two groups were statistically analyzed.Results The postpartum hemorrhage,neonatal infection,premature birth,stillbirth and neonatal anemia of experiment group and control group were compared,the differences were not statistically significant (P ＞0.05).The mode of delivery,proportion of Rh-negative newborns,neonatal hyperbilirubinemia of two groups were compared,the differences were statistically significant (P ＜ 0.05) Conclusion Injecting anti-D immunoglobulin is an effective way to avoid alloimmunization to produce anti-D antibody,it can reduce incidence of Rh immunosuppression,the management of anti-D immunoglobulin in our country needs to be improved.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2018(015)010【总页数】4页(P135-138)【关键词】Rh阴性血型孕产妇;抗D免疫球蛋白;抗D抗体;新生儿溶血病【作者】张京;卢新;孙璇;潘丽;陈立东【作者单位】北京市海淀区妇幼保健院检验科,北京100081;北京市海淀区妇幼保健院检验科,北京100081;北京市海淀区妇幼保健院检验科,北京100081;北京市海淀区妇幼保健院检验科,北京100081;北京市海淀区妇幼保健院检验科,北京100081【正文语种】中文【中图分类】R714Rh血型系统目前是红细胞血型系统中最复杂的一个系统，Rh阴性孕产妇孕育Rh 阳性胎儿后，其红细胞进入母体容易产生免疫性抗体，出现胎儿或新生儿溶血病，症状较重，严重者甚至发生死胎，或发生胆红素脑病。
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PD1抗体使用指南民间版2
最近，生物315陆续接到一些想使用PD1的患者的咨询，主要是关于在使用PD1之前要不要做PDL1基因检测；另外，目前可以购买到的PD1 抗体有keytruda 和opdivo ，二者差别大吗我们总结了一些数据，希望能帮到大家。
最后，附录总结了两个CTLA4抗体（依匹单抗）的临床试验，有兴趣的可以联系。
肿瘤组织PDL1 检测结果和PD1 抗体效果的关系
1PDL1 检测阳性的患者会更大概率会受益，检测阴性的患者也有受益可能
PDL1显然是目前跟ORF最有关联的指标，看临床数据的总结
这个表总结了目前常用的三个PD1通路抗体在不同肿瘤中对PDL1阳性和阴性的临床实验结果：从ORR上来看，PDL1 阳性的效果比PDL1阴性的好很多；从PFS和OS看，PDL1阳性的还是有点优势；但是，即使是PDL1阴性的肿瘤患者也是部分有效的。
需要指出的是：不同的临床试验对PDL1阳性和阴性的界定标准是不一样的，有1%的，有5%勺，也有50%勺（这个可能是另一套评价标准），而且用来检测PDL1表达的抗体也是不一样的。
2肿瘤组织中PDL1 的检测方法和标准
看一组数据：
这是目前临床试验中检测PDL1表达的抗体、检测方法和阳性界定标准，不同公司用不同的方法在做检测，标准也不
太一样，一锅粥一样的感觉。
这里有一个问题，因为肿瘤浸润的免疫细胞（IC）也会表达PDL1,界定PDL1阳性率的时候要
不要包括这些免疫细胞肿瘤细胞表面的PDL1和IC细胞的PDL1哪一个更适合作为预测PD1效果的标准3肿瘤细胞的PDL1表达VS肿瘤中免疫细胞（IC）中的PDL1表达
这是2014年4月的临床实验结果，分析了不同肿瘤患者肿瘤细胞和肿瘤浸润的免疫细胞中PD1/PDL1的表达跟ORR
的关系，可以看出来肿瘤细胞的PDL1跟ORF勺勺关系是最强的，p=0.025;用TIL PDL1作为指标也是能预测效果，关联性
稍差；但是PDL1阴性的患者依然是有受益的可能。
再看2014年11月《Nature》中对罗氏PDL1抗体（MPDL3280A）的数据分析
这个图的左边表示的是CR/PR和SD的患者的比例，也就是用药之后有效果的一组；右边表示的是PD,可以认为是没
有效果的患者占的比例。
IHC3、IHC2和IHC1代表相应的细胞中PDL1表达量的多少，IHC3的患者PDL1表达量最高，IHC0 是不表达。
a和c是针对NSCLC勺数据分析，b和d是针对所有肿瘤患者的分析（NSCLC RCC melanoma等放到一块）。
a 是看NSCLC患者肿瘤中免疫细胞（IC）的PDL1表达和有效的关系，具有统计学意义，p=0.015;c是NSCLC患者肿瘤细胞表
面仃C）PDL1表达和有效的关系，没有统计学意义，P=0.920;b是看所有患者肿瘤中免疫细胞的PDL1表达和有效的关系，具有统计学意义，P=007;d是看所有肿瘤患者中肿瘤细胞表面PDL1表达和有效的关系，没有统计学意义，p=0.079。
所以，
这个研究表明患者肿瘤浸润的免疫细胞的PDL1表达和PD1有效的相关性更强，但这不代表肿瘤细胞的PDL1表达和PD1 的效果没有关系。
4 国内PDL1 检测的机构
益善只能做PDL1的mRNA检测，费用700RMB截止2015年三月份）
金域可以做PD1和PDL1的免疫组化，病人需要提供白片，两个检测费用430RMB乍用（信息来源2015年三月）。
患者想做也可以去医院的病理科问问，不一定都能做，有的可以，最好是做免疫组化检测。
目前，国外临床试验通行的检测手段是免疫组化
总结：PDL1是目前跟ORR t有关联的指标，但不是决定性的指标。
肿瘤细胞中免疫细胞的PDL1表达可能更有意义。
PDL1的表达越高也就意味着有效的可能性更大（不是高表达就一定会有效果）；PDL1阴性的患者也是有受益的可能。
目前，PDL1的检测方法和标准有很多。
除了上文总结的，MERK S在做基于mRNA的PDL1的检测方法，但是临床上好
像还没有用，只是技术在研。
总之就是很多公司和机构都在做，但是没有统一的方法和标准。
国内具体使用的是哪些方法，我们也无从考证他们的可信度和对患者的参考价值，因为这个检测手段本身还有很大的不确定性，更别提患者的一个肿瘤样本能不能代表全身肿瘤的情况，确实是一个尴尬的境地。
据说，有患者在罗氏做过PDL1检测，大家感兴趣可以
联系，应该更值得信赖。
延伸（YY部分，启发思考）：如何寻找PD1通路抗体有效或是无效的指标呢很自然的想法就是得确定肿瘤的逃逸是由
PD1对T细胞的抑制引起的，下面介绍一个Gajewski的non-inflamed 和flamed肿瘤模型，如下图：
左边是non-inflamed 肿瘤，肿瘤微环境中几乎没有免疫细胞存在（mac 除外），这种肿瘤形成的原因可能是患者的固有免疫系统没有对肿瘤发动有效的攻击，导致后面T细胞介导的适应性免疫无法形成，肿瘤细胞好像也没有PDL1表达; 可以想象对这样的患者使用PD1通路抗体很可能是没有效果的，因为PD1通路在这样的肿瘤里不起作用。
当然不排除使
用PD1之后激发了比较强的免疫反应（固有和适应性免疫），会产生应答。
右边的是inflamed肿瘤，可以看到这样的肿瘤微环境了有很多免疫细胞浸润，而且肿瘤细胞高表达PDL1,对这样的
患者使用PD1通路抗体，就比较容易解除PD1通路对T细胞的抑制，T细胞活性增加，更容易有效果。
所以，我们现在需要的是如何确定右边的inflamed模型，一个PDL1指标是不够的，可能需要联系更多的指标，比
如TIL数量、Treg数量、NK数量和肿瘤细胞MHC1的表达（跟正常细胞相比）。
Keytruda VS Opdivo
目前上市的PD1 通路抗体只有Keytruda（Pembrolizumab/MK-3475 ，默克公司）和Opdivo（nivolumab , BMS公司）两个，国内还没有上市，患者大部分是从香港买，也有的从国外买。
有一些患者会纠结这两个药到底选哪个哪个效果更好，副作用更大，更经济
效果：
这是2014年的数据，我们可以看到在黑色素瘤中，keytruda的ORR子像高一点（但是，这也说明不了什么，试验设
计，患者情况都不一样所以没指导意义），NSCL时两个几乎没有差异。
花费：
Keytruda : 24000RMB/50mg 三周一次，一般一次三瓶，96000/ 月（75kg 体重）
Opdivo : 25600RMB/100mg 11200/40mg，两周一次，124800/ 月（75kg 体重）
副作用：
没有查到两者比较副作用的资料。
在这里，我们想提醒想用PD1抗体的患者朋友，鉴于部分PD1患者使用PD1之后
会出现一些比较严重的副作用（长时间腹泻，胸水腹水，贫血等），建议患者找信得过肿瘤内科医生和风湿免疫科的医生帮助处理可能的副作用，因为很多时候需要区分这些副作用是PD1抗体引起的免疫增强从而造成免疫性肠炎和肺炎，还
是肿瘤患者免疫力低下造成的感染引起的症状。
附1 :国内进行的针对CTLA4单抗（依匹单抗）的临床试验
PD1抗体目前被批准用于治疗黑色素瘤和非小细胞肺癌，而国内还没有临床试验可以参加，价格真的很贵。
国内感兴
趣的患者可以尝试另外一个免疫治疗的临床试验---针对CTLA4的单抗（单抗）治疗非小细胞肺癌的。
1 :河南省肿瘤医院呼吸内二科
针对细胞毒T 淋巴细胞抗原4（CTLA-4）的单抗Ipilimumab 正在晚期肺鳞癌患者中进行III 期临床研究的入组，主要入选的患者为初治的IV 期肺鳞癌，经筛选进入研究后治疗免费
2:江苏省肿瘤医院
已被诊断为复发性或IV 期、组织学诊断为鳞状非小细胞肺癌; 未曾接受过化疗治疗。
附2: PD1 抗体使用指南民间版
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