安徽中医药大学药学院副教授、药剂学专业硕士生导师;主

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范鲁雁简介

范鲁雁简介范鲁雁，女，1952年8月出生，安徽医科大学第三附属医院（合肥市第一人民医院）教授、主任药师、首席专家、药学部主任，分别担任安徽医科大学药学院、安徽中医药大学药学院教授、硕士生导师，安徽省临床医学重点培育专科、合肥市医学重点学科、安徽医科大学重点学科学科带头人，卫计委临床药师培训基地主任，合肥市卫生局药事管理质控中心主任。

主要研究方向：医院药学、药事管理。

1、主要社会兼职情况现任中国药学会医院药学专业委员会委员，安徽省药学会副理事长、副秘书长，安徽省药学会医院药学专业委员会副主委，安徽省药学会临床药理专业委员会副主委，安徽省药学会药事管理专业委员会副主委，安徽省药学会药物代谢专业委员会副主委，安徽省康复医学会药物与保健专业委员会副主委，安徽省医院协会药事管理专业委员会常委，合肥市药学会副理事长，秘书长。

中国药学会“全国合理用药专家讲师团”师资，合肥市保健委员会专家。

《中国新药与临床杂志》、《中国医院药学杂志》、《中国药房》、《安徽医药》、《中国药业》等多家核心期刊编委。

2、近年来主持科研项目情况近年来主持8项国家级或省市级科研项目，其中多项获合肥市政府科技进步奖及安徽省科技成果证书。

1)安徽省科技厅项目《安徽省基层医疗机构基本药物使用分析研究》。

编号：11070403037。

2014年获安徽省科学技术研究成果证书。

2)中国药学会项目《安徽省基层医疗卫生机构基本药物使用情况抽样调查》。

编号：2012DCST00ES02。

3)国家十一五科技支撑计划重点课题《公众基本药物安全用药科普材料》的编写。

分课题编号：2009BAI76B031000。

4)国家十一五科技支撑计划重点课题《基层医疗机构主要基本药物合理使用评价和研究》。

分课题编号：2009BAI76B030408。

5)合肥市科技局重点科研课题《药品不良反应的经济学研究》第一完成人。

编号：合科(2006)27号－14（基金资助项目）。

2009年获合肥市政府颁发的科技进步三等奖。

不同产地佛手的香叶木苷及橙皮苷含量同时测定法

2021251引用本文：魏莹，肖莉，杨兰，等.不同产地佛手的香叶木苷及橙皮苷含量同时测定法［J］.安徽医药，2021，25（1）：32⁃34.DOI：10.3969/j.issn.1009⁃6469.2021.01.008.◇药物分析◇不同产地佛手的香叶木苷及橙皮苷含量同时测定法魏莹1，肖莉2，杨兰1，廖思维1，李艳平1，张建武1作者单位：1川北医学院药学院药物研究所，四川南充637000；2四川大学华西基础医学与法医学院，四川成都610041通信作者：张建武，男，副教授，硕士生导师，研究方向为心脑血管疾病和抗肿瘤方面，E⁃mail：基金项目：南充市校科技战略合作专项（19SXHZ0231）；川北医学院2015年校级科研发展项目（CBY15⁃A⁃YB22）摘要：目的佛手药材中香叶木苷和橙皮苷含量测定方法的建立。

方法2015年9月至2018年6月，以DiamonsilC18（250 mm×4.6mm，5μm）为色谱柱，乙腈（A）-0.1%醋酸水（B）（20∶80）等度洗脱为流动相，285nm为检测波长，1.0mL/min的流速，25℃的柱温，10µL的进样量。

结果香叶木苷、橙皮苷进样量分别在12.32~616ng（r＝0.9998），8.128~1016ng（r＝0.9999）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率（n＝6）分别为99.32%、100.87%；相对标准偏差（RSD）分别为2.29%、2.24%。

结论该法简便、准确、可靠，可作为佛手药材中香叶木苷、橙皮苷含量测定的有效方法。

关键词：色谱法，高压液相；芸香科；含量测定；佛手；香叶木苷；橙皮苷Simultaneous determination of diosmin and hesperidinin bergamot from different areasWEI Ying1，XIAO Li2，YANG Lan1，LIAO Siwei1，LI Yanping1，ZHANG Jianwu1 Author Affiliations：1College of Pharmacy，Institute of Medicine，North Sichuan Medical University，Nanchong，Sichuan637000，China；2West China School of Basic Medical Sciences and ForensicMedicine，Sichuan University，Chengdu，Sichuan610041，ChinaAbstract：Objective Establishment of a method for determination of diosmin and hesperidin in bergamot medicinal materials. Methods From September2015to June2018，the chromatographic column was Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5µm），mobile phase was acetonitrile（A）-0.1%acetic acid water（B）inisometric elution（20：80）.The detection wavelength was285nm and the flow rate wass1.0mL min⁃1at25℃，and the injection volume was10µL.Results The contents of diosmin and hesperidin had good linear relationship with the peak area in the ranges of12.32~616ng（r＝0.9998）and8.128~1016ng（r＝0.9999）respective⁃ly，and the average recoverie rate（n＝6）of five components was99.32%with RSD of2.29%and100.87%with RSD of2.24%re⁃spectively.Conclusion The method is simple，accurate and reliable，and can be used as an effective method for the determination of diosmin and hesperidin in bergamot.Key words：Chromatography，high pressure liquid；Rutaceae；Content determination；Bergamot；Diosmin；Hesperidin佛手为临床常用理气药，具有疏肝理气，和胃止痛，燥湿化痰的作用，来源于芸香科植物佛手的干燥果实；常用于治疗肝胃气滞、胸胁胀痛、咳嗽痰多、胃脘痞满等症［1］。

中药学院专业介绍及导师简介

中药学院专业介绍及导师简介方剂学(100504)方剂学学科是1992年被评定的校级重点学科，也是我国第一批被定为硕士点的学科，（1986年获准授予权）。

并于2000年12月获准医学博士学位授予权的学科，2006年被评为校级精品课程，2007年获准为国家级重点二级学科。

现有博士导师1名，硕士研究生导师6人，其中教授5人、副教授2人、讲师1人。

学科学术带头人李政木教授现任方剂学教研室主任、博士生导师，兼任中国中医药学会方剂学分会副主任委员，在国内外中医药学术界享有较高的声誉。

梁颂名教授、高汉森教授、何国樑教授在方剂学科的建设与发展中做了许多卓有成效的的工作。

本学科导师具有丰富的教学经验，教学中能根据方剂学学科的理论体系特点，结合中医学辨证论治理、法、方、药的特点开展教学，注重教学法，理论联系实际，突出方剂药物的配伍及临床运用的研究；开展多媒体教学、实验性教学，教学效果好，以冀学者能理解、掌握方剂学的精髓，学以致用，提高临证用方、组方的能力和诊疗的基本技能。

教学研究课题“七年制硕士班方剂学教学改革的研究”曾获广州中医药大学教学成果二等奖、“《方剂学》基于网上资源利用的教学改革试验研究”于2006年获得广州中医药大学教改成果一等奖。

此外，本学科导师也具有较高的科研水平，以适应教学、科研、医疗等各方面的工作的开展。

本学科具有相对稳定的科研研究方向，近几年来中标的国家自然科学基金、省级、厅局级、校级各级科研课题十几项。

对指导方剂学博士、硕士研究生开展一系列中药复方（方剂）的药理实验和临床研究十分有利。

方剂学科的研究方向有：1.方剂配伍理论的研究：主要进行方剂配伍规律、组方科学性研究，如获国家自然科学基金资助的研究课题“肾气丸‘阴中求阳’配伍机理及物质基础研究”；以及获得省自然基金、省科委资助的研究课题“药物相互作用动力学分析法对交泰丸配伍的研究”、“加味猪苓汤治疗原发性系膜增殖性肾炎配伍研究”等。

2.中药复方药理物质基础及作用机理研究：如“基于多目标优化的麻杏石甘汤抗急性肺损伤实验研究”，“麻杏甘石汤对抗原诱导小鼠支气管哮喘的作用机理”，“方剂“性味配伍”药效基础初探”等课题分别获得省中医药管理局、大学创新基金资助。

方成武简介【模板】

方成武简介方成武，男，1961年9月生，硕士，教授,主任中药师，执业中药师，安徽省骨干教师，**大学硕士生导师。

1984年7月毕业于安徽中医学院药学系中药专业。

现任**学院院长，安徽省中医药科学院亳州中医药研究所执行所长。

主持国家和省级科研项目12项，获国家教学成果二等奖1项、中华中医药学会科学技术一等奖1项、安徽省科技进步二、三等奖各1项、市级科技进步一等奖1项，指导学生获全国大学生“挑战杯”创业与科技论文大赛三等奖2项、安徽省大学生“挑战杯”创业与科技论文大赛一等奖2项、二等奖3项，获省级科技成果9项、六安市科技专家大院优秀首席专家。

主编或参编专著和教材《中药资源学》、《中药养护学》、《中药商品学》、《安徽中药志》、《四川省松潘药用植物资源》等12部，发表研究论文82篇，申请发明专利3项，获国家发明专利2项。

主要研究方向：中药资源与中药质量研究。

1、主要社会兼职情况现任国家执业药师工作专家，国家中医药管理局基本药物中药原料资源动态监测信息服务体系技术专家委员会委员，中国生态学学会中药资源生态专业委员会，安徽省中医药科技创新与开发研究会副会长，安徽省中药天然药专业委员会会常务理事兼秘书长，世界中医药学会联合会药膳食疗研究专业委员会理事，全国高等中药教育研究会理事，中国生态学学会中药资源生态专业委员会委员，《**大学学报》编委，安徽省创新基金评审专家，安徽省中药材产业化工作专家委员会专家等。

2、近5年来主持科研、教学项目情况1）全国第四次中药资源普查--舒城、岳西、石台县中药资源普查/2012-2017 /151万元/主持人；2）国家经信部产学研合作课题--牡丹皮规范化规模化产业化生产基地建设研究/2013 -2016 /30万元/主持人；3）国家十二五科技支撑计划/白芍等3种大宗药材饮片及提取物质量评价和生产过程标准研究/2011 -2014年/270万元/主持人；4）国家中医药行业科研专项/苍术道地药材特色栽培及加工技术整理、规范及应用/2011 -2014 /35万元/主持人；5）美国许氏基金会合作研究课题/安徽道地药材资源研究/2010 -2012年/10万美圆/主持人。

何宁—导师简介

何宁—导师简介何宁，男，1977年8月出生，博士，安徽中医药大学药学院药剂系主任，教授，安徽中医药大学药剂学硕士生导师。

安徽省第二批“特支计划”创新领军人才。

主要研究方向：新型药物载体及给药系统。

1、近5年来主持科研项目情况1）安徽省第二批“特支计划”/创新领军人才建设项目/2016年-2021年/50万/主持人2）产学研合作项目/中药配方颗粒的研制/2015年/100万/主持人3）安徽省科技厅公益性技术应用研究联动计划/安徽道地药材凤丹系列日化产品的综合开发与研究/2015年-2017年/5万/主持人4）安徽省高等学校省级自然科学基金重点项目/去唾液酸糖蛋白受体介导的新型肝靶向基因传递系统的构建及转运机理研究/2012年-2015年/5万/主持人2、近年来发表有代表性学术论文、专著或教材（限5篇）1）Yongzheng Ma, Baizhu Chen, Ning He, Gaojian Chen, Lianwei Li, Chi Wu.Revisiting Complexation between DNA and Polyethylenimine: Does the Disulfide Linkage Play a Critical Role in Promoting Gene Delivery?Macromolecular Bioscience. 2014.14: 1807-1815.2）何宁, 孙贺春, 徐欢喜, 邵张章. 聚谷氨酸为骨架的梳状基因载体的合成及生物学性能评价[J]. 高等学校化学学报, 2014, 09(35): 2019-2025.3）何宁, 孙贺春, 董晓曼, 徐欢喜. 多臂星形聚乙烯亚胺的设计合成及聚合动力学[J]. 高分子材料科学与工程, 2014, 07(30): 35-39.4）何宁, 孙贺春, 代苗苗. 初均速加速试验法研究温度和湿度对药物稳定性的影响[J]. 中南大学学报(医学版), 2014, 39(5): 501-510.5）何宁, 孙贺春, 徐欢喜, 董晓曼, 邵张章. 可降解非病毒基因载体PEG-b-(PG-g-PEI)的合成与表征[J]. 南方医科大学学报, 2013, 33(11): 1643-1647.3、指导研究生情况现指导硕士生6名，其中1人获得硕士学位。

第三届药学专业学位研究生教指委名单

第三届药学专业学位研究生教指委名单一、前言根据学校相关规定，为了进一步加强药学专业学位研究生的教学质量，提高培养水平，经学校研究决定组建第三届药学专业学位研究生教指委。

现将教指委名单公布如下：二、教指委名单1. 主任：XXX（职称、单位）2. 委员：XXX（职称、单位）、XXX（职称、单位）、XXX（职称、单位）、XXX（职称、单位）、XXX（职称、单位）、XXX（职称、单位）3. 秘书：XXX（职称、单位）三、教指委成员介绍1. 主任：XXXXXX，现任XX大学药学院院长，教授，博士生导师，长期从事药物化学研究，曾获得多项省部级科研奖励，具有丰富的教学和科研经验。

2. 委员：XXXXXX，XX大学药学院副院长，教授，博士生导师，专注于药理学研究，已发表多篇重要学术论文。

XXX，XX大学医学院教授，博士生导师，担任过多项国家级药物临床试验项目负责人，具有丰富的临床经验。

XXX，XX大学药学院副教授，硕士生导师，研究方向为药剂学，曾主持过多项校级课题。

XXX，XX大学药学院副教授，硕士生导师，研究方向为药物分析，多次参与国家级重大科研项目。

XXX，XX大学药学院讲师，研究方向为药物化学，具有较高的教学评价。

3. 秘书：XXXXXX，XX大学药学院教研秘书，具有丰富的教学管理经验，是本届教指委的重要后勤保障。

四、教指委职责根据学校颁发的《药学专业学位研究生教指委章程》，第三届药学专业学位研究生教指委的主要职责包括但不限于以下几个方面：1. 制定学位研究生培养方案，包括学生的课程设置、研究生实践基地的选择等；2. 审议学生的课题选题及课题报告；3. 审议学生的学位论文选题及开题报告，组织学位论文中期检查和答辩；4. 对学生的学习情况进行监督和考核，确保学位研究生的培养质量；5. 其他根据学校教务部门的安排需要负责的工作。

五、总结希望第三届药学专业学位研究生教指委能够充分发挥各委员的专业优势，积极履行职责，为培养高水平的药学专业研究生做出积极贡献。

姜玲简介【模板】

姜玲简介姜玲，女，1963年11月出生，硕士，主任药师，**大学和**大学硕士生导师，安徽省立医院药剂科主任，安徽省“十二五”临床药学重点专科学科带头人，安徽省立医院首批杰出技术骨干人才，安徽省医疗机构药事管理质量控制中心办公室主任。

专业方向：临床药学与医院药事管理。

1982年7月毕业分配至安徽省立医院药剂科工作，1997年8月任科副主任，2007年11月主持全科工作，2009年11月至今任科主任。

1、主要社会兼职情况现为中国医院协会药事管理专业委员会常委、中国药理学会药源性疾病专业委员会常委、中华医学会临床药学分会委员、中国药学会科普工作委员会委员、中国药理学会临床药理学专业委员会委员、中国医院装备学会医院药房装备与技术专业委员会委员、安徽省药学会副理事长、安徽省执业药师协会副会长、安徽省药学会药剂专业委员会主任委员、安徽医学会临床药学分会主任委员、安徽省医院管理协会药事管理专业委员会常务副主任委员、安徽省药学会医院药学专业委员会副主任委员、安徽省药学会药物代谢专业委员会副主任委员、安徽省药学会药事管理专业委员会副主任委员等；担任《药物不良反应杂志》、《中国医院药学杂志》、《医药导报》、《中国临床保健杂志》、《**大学学报》、《临床合理用药杂志》、《中国药房》等杂志编委，《安徽医药》常务编委等；是卫计委合理用药国际网络中国中心组成员、卫计委“抗生素临床合理应用全国普及计划”和“特殊管理药品管理和临床合理应用培训项目”特聘专家、“全国抗菌药物临床应用管理培训项目”讲课专家、中华医学会医疗鉴定专家、国家执业药师工作专家。

2、近5年来主持科研项目情况1）安徽省自然科学基金计划项目/归芍颗粒对内质网介导肝细胞凋亡通路相关调控基因表达的作用研究/2013.01-2014.12 /主持人；2）2013年安徽省高等学校省级自然科学研究项目/苍耳亭逆转GSTP介导的肿瘤凋亡抵抗机制研究/2013.01-2014.12/主持人；3）安徽省软科学研究计划项目/医疗机构药事管理质量评价指标体系研究/ 2011.01-2012.12 /主持人；4）WHO2010～2011双年度项目/抗菌药物合理用药评估指标体系的建立及综合评价方法研究/2010.01-2011.02 /主持人；5）安徽省卫生厅医学科研课题/围手术期预防用抗菌药物合理性评价标准的建立/2010.01-2011.12 /主持人；6) 安徽省软科学研究项目/药品不良反应报告质量评估情况体系研究/ 2009.01-2010.12 /主持人；7）安徽省卫生厅医学科研课题/Ⅰ类切口手术围手术期预防性应用抗菌药物的干预研究/2009.07-2010.12/主持人。

导师简介-彭华胜

导师简介-彭华胜彭华胜，男，1975年出生，博士；安徽中医药大学药学院教授；生药学、中药学专业硕士生导师。

主要研究方向：中药资源、中药质量评价。

现为安徽省学术和技术带头人后备人选，国家中医药管理局药用植物学重点学科后备学科带头人。

1.主要社会兼职及荣誉世界中医药学会联合会药用植物资源利用与保护专业委员会副秘书长中国药学会药学史专业委员会副主任委员中华中医药学会中药鉴定分会常务委员2.近5年来主持科研项目情况1）基于“器官性状-组织结构-化学成分”的关联性揭示黄芪道地药材“辨状论质”的科学内涵.国家自然科学基金(81573543)，2016-2019，55万元，主持. 2）多年生直根类药材的生长年限鉴别研究.国家自然基金青年基金（30901973), 2010—2012，20万元，主持.3）基于葛根的异常结构与次生代谢产物关系对葛根商品规格等级的划分研究（gxbjZD2016061）.高校学科（专业）拔尖人才学术资助重点项目，2015-2017，10万元，主持.4）葛根块根中有效成分的分布与异常结构的关系研究，中央本级重大增减支项目子课题，2014-2015，12万元，主持.5）DNA序列数据库建设——牡丹、赤芍、白芍、延胡索专项，道地药材国家重点实验室培育基地立项课题（2014年度），2014.1-2014.12，14万元，主持. 6）中药材标本咨询与制作.中国中医科学院中药研究所(中药资源中心）.2013-2014，技术委托课题，20万元，主持.7）中国中药资源大典-冷背奇药材品种的考证与市场调查，中央本级重大增减支项目，2014.1-2014.12，10万元，主持.3.近年来发表有代表性学术论文、专著或教材1) CHAN-CHAN LIU, MING-EN CHENG, HUASHENG-PENG*, HAI-YANDUAN, LUQI-HUANG*. Identification of four Aconitum species used as“Caowu” in herbal markets by 3D reconstruction and microstructural comparison.MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE, 2015, 78:425-432.2) Yajun Wang, Huasheng Peng(co-first author), Ye Shen, Rong Zhao, LuqiHuang*.The profiling of bioactive ingredients of differently aged Salviamiltiorrhiza roots. MICROSCOPY RESEARCH AND TECHNIQUE, 2013，76(9):947-954.3)Huasheng Peng, Qing-Jun Yuan, Qian-Quan Li, Lu-Qi Huang*. Molecular systematics of genus Atractylodes (Compositae,Cardueae):evidence from ITS and trnL-F sequences. Internationl Journal of Molecular Sciences,2012,1（11）:14623-14633.4) LIANG-PING ZHA, MING-EN CHENG, HUA-SHENG PENG*. Identificationof Ages and Determination of Paeoniflorin in Roots of Paeonia lactiflora Pall.From Four Producing Areas Based on Growth Rings. MICROSCOPYRESEARCH AND TECHNIQUE, 2012,75（9）:1191–1196.5) 赵玉姣，韩邦兴，彭华胜*，彭代银*. 石斛的历代质量评价沿革与变迁[J].中国中药杂志，2016，41（7）：1348-1353.6）徐涛，彭华胜*. 《本草图经》附图药材的种类与产地分布[J].中华医史杂志，2016,46（2）：83-86.7）段海燕，程铭恩，彭华胜*，张贺廷，赵玉姣. 野葛块根的异常结构解剖学研究[J]. 中国中药杂志，2015，40（22）：4364-4369.8）彭华胜，王德群，郝近大*，谢晋，刘鹤龄，彭代银，黄璐琦*．冷背药材的沿革及发展对策[J]．中国中药杂志，2015，40（9）：1635-16389）储姗姗，彭华胜*. 延胡索道地药材的沿革与变迁[J]. 中华医史杂志，2015，45（5）：259-262.10）张贺廷，王健，程铭恩，段海燕，彭华胜*.蒙古黄芪主产区栽培及商品规格等级调查[J].中药材，2015，38（12）：2487-2492.4.近年来获厅级以上奖励情况1)濒危中道地药材茅苍术种质资源保护、创新及应用，江苏省科学技术奖二等奖，2015年.2）名贵中药资源分子系统学及其药材的分子鉴别研究，中华中医药学会科学技术奖二等奖，2015年.3)师生互动，学以致用的研究式教学——《中药资源学课程建设研究，安徽省教学成果一等奖,2010年.4)安徽省教育厅首届“省级教坛新秀”奖，2008年.5）宣州太子参优质高效栽培技术及应用研究，安徽省科学技术奖三等奖，2006年.5.指导研究生情况2009年开始指导生药学专业硕士研究生，2013年开始指导中药学专业研究生。

211243410_蒙特卡洛模拟法评价念珠菌性尿路感染时氟康唑的给药方案

㊃论著㊃蒙特卡洛模拟法评价念珠菌性尿路感染时氟康唑的给药方案张梦翔徐玥玮杨满琴(安徽中医药大学第二附属医院药学部,合肥230061)ʌ摘要ɔ 目的结合氟康唑的药动/药效(P K /P D )模型,运用蒙特卡洛模拟2种氟康唑给药方案对白念珠菌及光滑念珠菌引起的真菌性尿路感染的治疗效果以提示临床在不同情况下选择有效地给药方案㊂方法回顾性收集我院2020年1月至2021年12月这两年内通过P HO E N I X 100全自动微生物鉴定药敏分析系统检测过氟康唑对其最小抑菌浓度(m i n i m u m i n -h i b i t o r y co n c e n t r a t i o n ,M I C )值的真菌性尿路感染患者尿液标本中分离出的白念珠菌及光滑念珠菌,并运用蒙特卡洛模拟法分别模拟两种常见的氟康唑给药方案对 5000名念珠菌致真菌性尿路感染患者的临床疗效,得到达标概率(p r o b a b i l i t yo f t a r ge t a t t a i n m e n t ,P T A ),并计算各方案以A U I C ȡ25抗感染成功为目标阈值的累计反应分数(c u m u l a t i v ef r a c t i o n o f r e -s po n s e ,C F R )㊂结果共计分离出白念珠菌㊁光滑念珠菌分别73株与108株(共计181株),其对氟康唑的耐药率分别为12.3%㊁57.4%㊂200m g/d 给药方案的氟康唑对于白念珠菌及光滑念珠菌的C F R 均小于90%(分别为85.85%和38.08%),400m g/d 给药方案的氟康唑对于白念珠菌的C F R>90%(为90.15%),对光滑念珠菌的C F R<90%(为45.54%)㊂当白念珠菌及光滑念珠菌的M I C ɤ4m g/L 时,2种给药方案的P T A 均大于90%,当白念珠菌及光滑念珠菌的M I C ɤ8m g /L 时,400m g /d 的给药方案P T A 均大于90%㊂结论 400m g/d 的氟康唑对于白念珠菌感染导致的尿路感染能达到满意的抗感染治疗效果,而对于光滑念珠菌导致的尿路感染时,两种治疗方案均不能达到满意的抗感染治疗效果,存在较大治疗失败风险㊂对于此类耐氟康唑念珠菌感染导致的尿路感染,氟康唑治疗成功概率低,建议采用相关指南推荐的其他药物例如两性霉素B 进行治疗㊂ʌ关键词ɔ 真菌性尿路感染;蒙特卡洛模拟;给药方案;念珠菌属ʌ中图分类号ɔ R 519.3 ʌ文献标志码ɔ A ʌ文章编号ɔ 1673-3827(2023)18-0135-05C l i n i c a l d o s a g e r e g i m e n s o f f l u c o n a z o l e e v a l u a t e d b y M o n t e C a r l o s i m u l a t i o n i n c a n d i d a l u r i n a r yt r a c t i n f e c t i o n Z HA N G M e n g x i a n g ,X U Y u e w e i ,Y A N G M a n qi n (D e p a r t m e n t o f P h a r m a c y ,T h e s e c o n d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f A n h u i U n i v e r s i t y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e ,H e f e i 230061,C h i n a )ʌA b s t r a c t ɔ O b je c t i v e T o p r o v i d e r ef e r e n c e f o r c l i n i c a l i n d i v i d u a l m e d i c a t i o n o f f l u c o n a z o l e b y c o m b i n i ng P K /P D a n d M o n t e C a r l o s i m u l a t i o n .M e th o d s C a n di d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a g l a b r a t a s t r a i n s i s o l a t e d f r o m u r i n e s a m p l e s o f p a t i e n t s w i t h u -r i n a r y t r a c t i n f e c t i o n i n o u r h o s p i t a l f r o m J a n u a r y 2020t o D e c e m b e r 2021w e r e c o l l e c t e d .T h e d i s t r i b u t i o n s o f M I C s (m i n i -m u m i n h i b i t o r y co n c e n t r a t i o n s ,M I C s )o f f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a g l a b r a t a w e r e s u mm a r i z e d a s w e l l a s t h e p h a r m a c o k i n e t i c p a r a m e t e r s o f f l u c o n a z o l e .U s i n g p r o b a b i l i t y o f t a r g e t a t t a i n m e n t (p r o b a b i l i t y o f t a r g e t a t t a i n m e n t ,P T A )a n d c u m u l a t i v e f r a c t i o n o f r e s p o n s e (c u m u l a t i v e f r a c t i o n o f r e s p o n s e ,C F R )a s i n d e x e s ,c r ys t a l b a l l s o f t w a r e 11.1.2.4w a s u s e d f o r M o n t e C a r l o s i m u l a t i o n o f d i f f e r e n t d o s a g e r e gi m e n s .R e s u l t s A t o t a l o f 73s t r a i n s o f C a n d i d a a l b i c a n s a n d 108s t r a i n s o f C a n d i d a g l a b r a t a w e r e i s o l a t e d (181s t r a i n s i n t o t a l ).T h e r e s i s t a n c e r a t e s t o f l u c o n a z o l e w e r e 12.3%a n d 57.4%r e s p e c t i v e l y .T h e C F R s o f 200m g/d f l u c o n a z o l e f o r C a n d i d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a g l a b r a t a w e r e b o t h l e s s t h a n 90%(85.85%a n d 38.08%r e s p e c t i v e l y ).T h e C F R o f 400m g/d f l u c o n a z o l e f o r C a n d i d a a l b i c a n s w a s m o r e t h a n 90%(90.15%),a n d t h a t f o r C a n d i d a g l a b r a t a w a s l e s s t h a n 90%(45.54%).W h e n t h e M I C s o f C a n d i d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a基金项目:安徽中医药大学校级科研项目(2019z r yb 23)作者简介:张梦翔,男(汉族),硕士研究生,主管药师.E -m a i l :t o j o s a k i @q q.c o m 通信作者:杨满琴,E -m a i l :282059179@q q.c o m ㊃531㊃中国真菌学杂志2023年4月第18卷第2期 C h i n J M y c o l ,A pr i l 2023,V o l 18,N o .2 Copyright ©博看网. All Rights Reserved.g l a b r a t a w e r eɤ4m g/L,t h e P T A s o f200m g/d w e r e g r e a t e r t h a n90%;a n d w h e n t h e M I C s o f C a n d i d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a g l a b r a t a w e r eɤ8m g/L,t h e P T A s o f400m g/d w e r e g r e a t e r t h a n90%.C o n c l u s i o n s400m g/d f l u c o n a z o l e c a n b e u p t o s t a n d a r d f o r u r i n a r y t r a c t i n f e c t i o n c a u s e d b y C a n d i d a a l b i c a n s i n f e c t i o n,c o n v e r s e l y,b o t h2o f d o s a g e r e g i m e n s c a n n o t b e u p t o s t a n d a r d i n C a n d i d a g l a b r a t a u r i n a r y t r a c t i n f e c t i o n.I t i s r e c o mm e n d e d t o u s e o t h e r d r u g s r e c o mm e n d e d b y r e l e v a n t g u i d e l i n e s,s u c h a s a m p h o t e r i c i n B.ʌK e y w o r d sɔf u n g a l u r i n a r y t r a c t i n f e c t i o n;M o n t e C a r l o s i m u l a t i o n;d o s a g e r e g i m e n s;C a n d i d a s p p.[C h i n J M y c o l,2023,18(2):135-139]近年来,由于免疫抑制剂和广谱抗生素的使用,真菌性尿路感染已成为院内尿路感染的重要组成部分[1]㊂有文献报道,包括酵母菌,如新生隐球菌和细孢毛霉菌等其他真菌,在播散性感染过程中可能累及肾脏,但很少引起与尿路相关的感染,而念珠菌属似乎在泌尿道定植和引起侵袭性疾病的能力方面是独一无二的[2],这导致念珠菌是真菌性尿路感染(U T I)中最常见的病原真菌㊂念珠菌性U T I主要见于住院患者,在社区环境中不太常见㊂定植或污染通常是念珠菌病患者最常见的原因,而在U T I中最常见的则是白念珠菌及光滑念珠菌[3]㊂目前可以在尿液中达到所需浓度的抗真菌药物种类有限,诸如棘白菌素㊁伏立康唑,两性霉素脂质体等抗真菌效果较好的药物在尿液中浓度较低,很难起到治疗效果[4],只有氟康唑㊁5-氟胞嘧啶及两性霉素B能够较好地针对尿路感染中的真菌,其中氟康唑是临床上使用最多的药物[5]㊂但关于其针对真菌性尿路感染的给药剂量,目前尚无明确而统一的定论㊂因此,本研究针对我院近两年念珠菌性尿路感染患者中分离出的白念珠菌及光滑念珠菌的药敏结果,通过水晶球软件中蒙特卡洛模拟方法[又称随机抽样或统计试验方法,其工作原理为通过计算机软件(本研究使用水晶球软件)实现统计模拟或抽样从而真实地模拟实际过程,将所求解的问题同一定的概率模型相联系并进行大次数的模拟,以获得无限逼近问题精确解的近似解[6]]㊂模拟出不同给药剂量下氟康唑对我院念珠菌M I C 概率下的治疗达标概率(P T A),并评估累积反应分数(C F R)来评价目前常用的氟康唑给药剂量是否还能够达到治疗效果,旨在为临床优化给药方案提供参考㊂1材料与方法1.1菌株来源回顾性收集我院2020 2021年各临床科室送检的尿液标本并收集其中白念珠菌及光滑念珠菌资料,剔除同一患者一次在院期间多次检验中的具有重复M I C值的菌株,关于尿路感染定义参照2019版‘中国泌尿外科和男科疾病诊断治疗指南“[7]㊂1.2菌株鉴定与药敏采用P h o e n i x100全自动微生物鉴定仪进行鉴定及药敏试验㊂药敏结果折点判定遵照C L S I M100执行㊂1.3给药方案参考氟康唑说明书㊁相关指南及实际中临床常用给药剂量,结合其P K/P D特性,设置200m g/d (200m g每日一次)和400m g/d(400m g每日一次)两种治疗方案㊂1.4 P K/P D方案在药物P K/P D理论中,氟康唑属于时间依赖性且具有长抗生素后效应(p o s t a n t i b i o t i c e f f e c t, P A E)的抗菌药物,同时氟康唑呈线性P K,其可基于A U C/M I C预测疗效㊂有关文献表明,当氟康唑A U C0~24与真菌M I C比值在12至25之间时具有显著的抗菌作用㊂当A U C0~24与真菌M I C的比值大于25时,药物治疗念珠菌感染治愈率高达80%以上;反之,当A U C0~24与真菌M I C的比值小于12时,药物治疗念珠菌感染治愈率仅为50%[8]㊂其有关计算公式及药动学数据如下[9]:C L=1.17ʃ0.28L/hA U C0~24=D o s e/C LA U I C=A U C0~24/M I C=D o s e/(C L㊃M I C)其中:清除率(C L):L/h;A U C0~24:m g㊃h/L;剂量(D o s e):m g;M I C:μg/m L㊂1.5蒙特卡洛模拟应用由美国O R A C L E公司水晶球软件(V11.1.2.44)进行蒙特卡洛模拟,具体步骤如下:①打开水晶球软件(其与e x c e l软件绑定,故相当于同时㊃631㊃中国真菌学杂志2023年4月第18卷第2期 C h i n J M y c o l,A p r i l2023,V o l18,N o.2Copyright©博看网. All Rights Reserved.打开e x c e l);②将方法1.2中得到的药敏结果与药敏分布表写入e x c e l中(分为两列,一列为M I C值,一列为分布概率);③将e x c e l中的C r y s t a l b a l l界面打开,设置定义假设按钮,选择自定义假设 ,并将步骤2中得到的表以m i c为X轴,概率为Y轴填入,得到此次随机模拟中的M I C分布;④选择另一空白格,设置自定义假设为正态分布,并将从文献中得到的氟康唑C L(清除率)的均值ʃ标准差输入,得到此次随机模拟的C L分布;⑤在空白格中输入D o s e(给药量),并按照方法1.4中的公式设置e x c e l函数A U I C=A U C0~24/M I C=D o s e/(C L ㊃M I C),可以得到由一组随机条件下得到的A U I C值,最后设置模拟次数为5000次,点击开始按钮后可得到此次模拟的相关数据;⑥整理并记录数据㊂假设药动学参数C L服从正态分布,M I C服从自定义分布㊂置信区间设置为95%,选用A U C0~24h/M I C>25[10]作为氟康唑治疗有效的评价指标㊂P T A(给药方案达标概率)=P r o b a b (A U C0~24/M I Cȡt a r g e t)P r o b a b表示概率值,t a r g e t(靶值)表示设定的A U C0~24与微生物M I C的目标比值,对于氟康唑来说,P T A反映了A U C0~24/M I C比值大于或等于目标比值时的治疗有效达标概率㊂当M I C水平固定为某一数值时,P T A值受到A U C分布特征的影响㊂根据下列公式可以计算出氟康唑对于我院白念珠菌及光滑念珠菌菌株群体的达标概率加权值之和,即累积反应分数(C F R)㊂根据相关文献报道作为最佳给药方案时计算得出的P T A或者C F R 至少应大于90%[11]㊂公式中,P T A i是在特定M I C值的中靶估计概率;P i为在群体菌株中各个M I C分布的百分率㊂数据由水晶球软件直接计算得出㊂2结果2.1尿液培养念珠菌对氟康唑的M I C值分布情况本研究共记分离得到73株白念珠菌以及108株光滑念珠菌,通过P HO E N I X100全自动微生物鉴定仪药敏试验测定每株的M I C值(由于本研究未行微量肉汤稀释法测定M I C值,对于M I Cɤ1μg/m L的数据按照1μg/m L进行计算,M I C>128μg/m L时按M I C=256μg/m L计)㊂具体各M I C 值对应的念珠菌菌株数及构成比见表1㊂表1氟康唑对白念珠菌和光滑念珠菌M I C值的分布情况T a b.1 D i s t r i b u t i o n o f M I C s o f f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a a l b i c a n s a n d C a n d i d a g l a b r a t a白念珠菌M I C/μg㊃m L-1株数占比/%光滑念珠菌M I C/μg㊃m L-1株数占比/% 15879.512321.3 234.1276.5 411.44109.3 822.7865.6 1645.5161211.1 3200.03276.5 6411.4641110.2 12845.51282422.2 >12800>12887.4合计73100108108100 2.2不同氟康唑给药方案对白念珠菌及光滑念珠菌尿路感染治疗有效的达标概率根据蒙特卡洛模拟结果可知,当氟康唑给药剂量200m g/d时,应对念珠菌属M I C值ɤ4μg/m L 时能够达到大于90%的治疗目标从而达到治疗效果,当M I C值>4μg/m L时,则需要增加给药剂量(400m g/d)以满足治疗效果㊂但是这两种给药方案均不能在>8μg/m L时满足治疗效果(P T Aȡ90%),结果见表2㊁3㊂2.3氟康唑不同给药方案对念珠菌性尿路感染的C F R按照设计的氟康唑不同给药方案对尿培养的白念珠菌及光滑念珠菌不同的M I C值及其分布频率分别通过蒙特卡洛模拟计算5000次,可得到不同给药方案下的能够达到有效治疗目标的C F R 值㊂得到的结果如图1~4所示,由文献可知[12], C F R值是达标概率加权值之和,其含义为在治疗方案(给药剂量D o s e)固定的情况下,患者药动学参数(C L)以及所感染的真菌M I C这二者的值满足其所设定的分布值时进行一定数量的模拟(通常为5000次),无论这二者以任何数值进行随机模㊃731㊃中国真菌学杂志2023年4月第18卷第2期 C h i n J M y c o l,A p r i l2023,V o l18,N o.2Copyright©博看网. All Rights Reserved.拟,该治疗方案最终得到的A U C 0~24/M I C 值都有相应的概率(即C F R 值)判断为治疗有效(即A U C 0~24/M I C ȡ25),通常C F R 值以90%为界限,ȡ90%可认为该治疗方案可以获得满意的治疗效果㊂由模拟结果可知,针对白念珠菌,200m g/d 的C F R 值为85.85%,可认为在实际治疗中,无论面对何种情况,该治疗方案达到满意抗感染效果的概率只有85%,低于90%,反之400m g/d 的C F R 大于90%,故提示临床中,建议医生采用400m g /d 这种治疗方案达提高治疗成功的概率㊂表2 氟康唑不同给药方案对白念珠菌尿路感染的达标概率T a b .2 P T A v a l u e s o f d i f f e r e n t d o s a g e r e gi m e n s f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a a l b i c a n sM I C/μg ㊃m L -1给药方案200/m g㊃d -1400/m g㊃d -11100%100%2100%100%499.83%100%827.76%99.85%161.13%28.05%320.1%0.5%640.01%0.04%1280%0%2560%0%C F R 值85.85%90.15%表3 氟康唑不同给药方案对光滑念珠菌致尿路感染的达标概率T a b .3 P T A v a l u e s o f d i f f e r e n t d o s a g e r e gi m e n s f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a g l a b r a t aM I C (μg /m L )给药方案200m g/d 400m g/d 1100%100%2100%100%499.27%100%825.36%99.75%161.04%29.46%320.08%0.46%640%0.02%1280%0%2560%0%C F R 值38.08%45.54%针对光滑念珠菌,两种治疗方案的C F R 都未超过90%(38.08%㊁45.54%)则提示在临床治疗中面对光滑念珠菌,氟康唑治疗成功率低,医生应该考虑使用其他药物进行治疗㊂3 讨论念珠菌性尿路感染常见于住院患者,其发病原因多种多样,目前主要致病的危险因素是糖尿病㊁留图1 氟康唑200m g /d 给药方案对白念珠菌的C F R 值(%) 图2 氟康唑400m g/d 给药方案对白念珠菌的C F R 值(%) 图3 氟康唑200m g /d 给药方案对光滑念珠菌的C F R 值(%) 图4 氟康唑400m g/d 给药方案对光滑念珠菌的C F R 值(%)F i g .1 C F R v a l u e s o f 200m g /d d o s a g e r e g i m e n s f o r f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a a l b i c a n s (%) F i g.2 C F R v a l u e s o f 400m g /d d o s a g e r e g i m e n s f o r f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a a l b i c a n s (%) F i g.3 C F R v a l u e s o f 200m g /d d o s a g e r e g i m e n s f o r f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a g l a b r a t a (%)F i g.4 C F R v a l u e s o f 400m g /d d o s a g e r e g i m e n s f o r f l u c o n a z o l e t o C a n d i d a g l a b r a t a (%)㊃831㊃中国真菌学杂志2023年4月第18卷第2期 C h i n J M y c o l ,A pr i l 2023,V o l 18,N o .2 Copyright ©博看网. All Rights Reserved.置尿管㊁使用广谱抗生素㊁尿路梗阻和重症监护病房内感染等[13]㊂其发病时可能不出现症状(无症状性念珠菌尿a s y m p t o m a t i c c a n d i d u r i a),但是其长时间存在时亦有可能会损害肾功能或者可由念珠菌感染后的血行传播或经尿道逆行引起诸如膀胱炎㊁肾盂肾炎或输尿管炎等,其危害性不容小觑[14]㊂目前氟康唑是治疗真菌性尿路感染的首选药物,主要原因是其在尿液中可达到较高的浓度水平㊂其他唑类抗真菌药和棘白菌素的尿液浓度很难达到治疗要求,这样反而容易引起耐药的发生㊂两性霉素B脱氧胆酸盐是治疗真菌性尿路感染的二线用药,但是其存在不可忽略的巨大不良反应[15],临床往往较少使用,这也从侧面凸显出氟康唑的重要性,合理使用氟康唑是减缓耐药性产生及治疗失败的重要举措,因此,本研究选择白念珠菌和光滑念珠菌考察不同给药方案氟康唑的治疗效果,以期为临床给药方案的优化提供依据㊂结果显示,针对于白念珠菌致尿路感染,氟康唑200m g/d的方案的C F R值为85.84%,并未达到90%的标准,但是其P T A达标的白念珠菌M I C为4m g/L,根据我院白念珠菌药敏分布,有约85%的白念珠菌M I Cɤ4m g/L,这提示虽然200m g/d的方案难以满足治疗要求,但是临床上使用这个方案仍然有很大几率取得抗感染疗效,但总体来说一味笼统地使用200m g/d这个方案无疑会增加治疗失败的案例从而进一步促使白念珠菌耐药株的产生与扩大,不利于减缓微生物耐药问题㊂同样地根据实验结果显示,临床中另一种常用的给药剂量400 m g/d的方案C F R值为90.15%,这提示其在临床中的成功率较高,而且氟康唑的不良反应发生率较低,也较轻微,故针对于白念珠菌致尿路感染,400 m g/d的给药方案值得采用㊂而针对于另一种导致真菌性尿路感染的念珠菌光滑念珠菌来说,通过结果显示,无论是200 m g/d或是400m g/d的给药方案,均无法满足治疗要求(C F R为38.08%和45.54%),这可能是因为光滑念珠菌氟康唑对的敏感性较低的原因,但针对M I Cɤ8m g/L的光滑念珠菌,400m g/d的给药方案仍然能达到治疗效果,这提示临床上在遇到疑似光滑念珠菌尿路感染的患者时(例如光滑念珠菌肺炎或血流感染的基础上并发尿路感染),应先明确其药敏结果后再行给药,以提高治疗效果,或是在必要的情况下采用两性霉素B进行治疗㊂综上所述,本研究采用蒙特卡洛模拟对氟康唑不同给药方案的抗真菌活性进行评价,明确了氟康唑治疗真菌性尿路感染的有效给药方案,然而本研究仍存在部分不足,如未能采用肉汤稀释法测念珠菌的菌M I C值,对于M I Cɤ1m g/L和M I Cȡ128 m g/L(本文以256m g/L计)的数据的实际分布情况可能存在差异,加之不同个体对于氟康唑口服制剂的吸收率的不同等影响因素等为充分考虑,本课题组之后将继续跟踪该药物的最新研究进展和临床应用情况,进一步对不同人群的用药情况和疗效进行系统评估㊂参考文献[1]孙伟,苏建荣.真菌性尿路感染的病原菌分布与药物敏感性特点分析[J].检验医学与临床,2014,11(24):3411-3412. [2]K A U F F MA N C A.D i a g n o s i s a n d m a n a g e m e n t o f f u n g a l u r i-n a r y t r a c t i n f e c t i o n[J].I n f e c t D i s C l i n N o r t h A m,2014,28(1):61-74.[3]O D A B A S I Z,M e r t A.C a n d i d a u r i n a r y t r a c t i n f e c t i o n s i n a-d u l t s[J].W o r l d J U r o l,2020,38(11):2699-2707.[4]陈楠.尿路感染的抗真菌治疗[J].中国感染与化疗杂志,2011,11(2):119-120.[5]裴丽静,赵桂珍,时东彦.医院获得性真菌尿路感染临床特征分析[J].河北医科大学学报,2017,38(3):355-357. [6]周静超,马萍,陈琛,等.蒙特卡洛模拟在抗菌药物治疗方面的应用[J].国际呼吸杂志,2014,34(2):141-145.[7]黄健.中国泌尿外科和男科疾病诊断治疗指南[M].2019版.北京:科学出版社,2019:399-400.[8]L E W I S R E.P h a r m a c o d y n a m i c i m p l i c a t i o n s f o r u s e o f a n t i f u n-g a l a g e n t s[J].C u r r O p i n P h a r m a c o l,2007,7(5):491.[9]D E B R U Y N E D,R Y C K E L Y N C K J P.C l i n i c a l p h a r m a c o k i n e t-i c s o f f l u c o n a z o l e[J].C l i n P h a r m a c o k i n e t,1993,24(1):10-27.[10]张菁,吕媛,于凯江,等.抗菌药物药代动力学/药效学理论临床应用专家共识[J].中华结核和呼吸杂志,2018,41(6): 409-446.[11]罗轶凡,任利翔,孙琦,等.应用蒙特卡洛模拟法评估伏立康唑临床给药方案[J].中国药房,2017,28(14):1907-1911.[12] A SÍN-P R I E T O E,R O D RÍG U E Z-G A S CÓN A,I S L A A.A p-p l i c a t i o n s o f t h e p h a r m a c o k i n e t i c/p h a r m a c o d y n a m i c(P K/P D)a n a l y s i s o f a n t i m i c r ob i a l a g e n t s[J].J I n f ec t C h e m o t h e r,2015,21(5):319-329.[13]卿燕,魏平,叶小莉,等.真菌性尿路感染易感因素分析[J].山东医药,2007,47(31):78.[14]A L F O U Z A N W A,D HA R R.C a n d i d u r i a:E v i d e n c e-b a s e da p p r o a c h t o m a n a g e m e n t,a r e w e t h e r e y e t[J]?M y c o l M e d,2017,27(3):293-302.[15]党子龙,许晓辉,石磊.两性霉素B脱氧胆酸盐制剂(A m B-D)输注毒性发生机制和防治[J].转化医学电子杂志,2017,4(11):69-72.[收稿日期]2022-06-17[本文编辑]卫凤莲㊃931㊃中国真菌学杂志2023年4月第18卷第2期 C h i n J M y c o l,A p r i l2023,V o l18,N o.2Copyright©博看网. 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陶群山硕士生导师简介

陶群山硕士生导师简介
陶群山，男，1973年9月出生，安徽中医药大学医药经济管理学院副教授，博士。

主要研究方向：中药产业经济，医药科技创新，医药计量经济模型。

1.主要社会兼职情况
中国中医药信息研究会政策管理分会理事
2.近5年来主持科研项目情况
1.安徽省自主创新能力建设的实证研究---以中药产业为例，安徽科技厅软科学项目，2015.10--2016.12/5万元/主持人
2.组织化、技术创新和中药材品质提升---基于安徽大别山区中药产业的研究，2016.01--2017.12/2万元/主持人
3.近5年来发表有代表性的学术论文、专著或教材
1.组织创新对农产品质量安全的影响机制研究--以中药产业为例，大连海事大学学报（社会科学版），2014（5）
2.我国基本卫生服务均等化影响因素的固定效应模型分析--基于31个省级面板数据的研究，海南大学学报（社会科学版），2016（2）
3.基于DEA模型的中药产业自主创新效率评价---以安徽省为例，科技管理研究，2016（18）
4..医疗保险统计学，全国高等学校医疗保险专业规划教材，科学出版社，2015年第一版，副主编。

5.卫生经济学，全国中医药行业高等教育“十三五”规划教材，中国中医药出版社，2016年第一版，副主编。

外泌体的提取方法及其在药物递送系统中的应用

网络出版时间:２０１９－３－６９:４１㊀网络出版地址:ｈｔｔｐ://ｋｎｓ.ｃｎｋｉ.ｎｅｔ/ｋｃｍｓ/ｄｅｔａｉｌ/３４.１０８６.Ｒ.２０１９０３０４.１６０３.００８.ｈｔｍｌ外泌体的提取方法及其在药物递送系统中的应用王飘飘１ꎬ王会会１ꎬ王㊀雷１ꎬ姚㊀亮１ꎬ彭代银１ꎬ２ꎬ陈卫东１(１.安徽中医药大学药学院ꎬ安徽合肥㊀２３００１１ꎻ２.安徽省中药研究与开发重点实验室ꎬ安徽合肥㊀２３００３１)ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－１９７８.２０１９.０３.００４文献标志码:Ａ文章编号:１００１－１９７８(２０１９)０３－０３０９－０５中国图书分类号:Ｒ￣０５ꎻＲ３２９２４ꎻＲ３４１ꎻＲ３４￣３３ꎻＲ７３０５ꎻＲ９４３ꎻＲ９７９１摘要:外泌体是一种活细胞产生的直径为４０~１５０ｎｍ微小囊泡ꎬ通过携带的蛋白质㊁脂类㊁ＲＮＡ等参与细胞间的信息交流和物质交换ꎮ因不同生理状态下产生的外泌体作用不同ꎬ现其被广泛应用于临床肿瘤的诊断和治疗ꎮ另外ꎬ外泌体作为内源性的天然纳米材料ꎬ在药物的递送中也有着独特的优势ꎮ外泌体能更好地应用于各领域的前提是产量和纯度有所保证ꎮ因此ꎬ该文就外泌体的提取方法及其在药物递送系统中的应用做一介绍ꎮ收稿日期:２０１８－１０－１２ꎬ修回日期:２０１８－１１－２０基金项目:国家自然科学基金面上项目(Ｎｏ８１７７３９８８)ꎻ国家中医药管理局中药标准化项目(Ｎｏ２０１７ＨＺ５)作者简介:王飘飘(１９９０－)ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:新药研究与开发ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｗｐｐ９９１２９５０４６＠１２６.ｃｏｍꎻ陈卫东(１９６５－)ꎬ男ꎬ博士ꎬ主任药师ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:药物代谢动力学㊁新药研究与开发ꎬ通讯作者ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ａｎｚｈｏｎｇｄｏｎｇ＠１２６.ｃｏｍ关键词:外泌体ꎻ提取分离ꎻ药物递送系统ꎻ靶向给药ꎻ肿瘤ꎻ抗肿瘤药物㊀㊀外泌体(ｅｘｏｓｏｍｅｓꎬＥｘｏｓ)是细胞分泌的一种膜囊泡ꎬ因其可以将供体细胞的信息通过其携带的蛋白质㊁ｍＲＮＡ㊁ｍｉＲＮＡ等传递到受体细胞ꎬ实现细胞之间的信息交流及物质交换ꎬ并且可以作为药物载体转运药物而引起科学家的广泛关注[１](Ｆｉｇ１)ꎮ外泌体作为内源性的天然药物载体有着独特的优势ꎬ表面由脂质和蛋白质组成ꎬ使其可以穿透许多生物膜ꎬ提高药物的运输效率和靶向性ꎬ可以稳定存在于血液中ꎬ纳米级尺寸明显增强药物在肿瘤部位的渗透滞留效应(ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙａｎｄｒｅｔｅｎｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔꎬＥＰＲ)[２]ꎮ目前ꎬ许多抗癌药物㊁基因药物及抗炎药物均被成功载入外泌体ꎮ但是由于没有较好的外泌体分离纯化和载药的方法ꎬ使得其作为药物载体的应用受到限制ꎮ本文主要回顾和讨论外泌体作为药物载体的研究进展及其面临的挑战ꎮ１㊀外泌体简介㊀㊀外泌体来源于几乎所有细胞的膜囊泡(直径４０~１５０ｎｍ)ꎬ密度在１１３~１１９ｋｇＬ－１之间ꎬ是目前临床诊断和治疗肿瘤等相关疾病的重要工具[３]ꎮ外泌体的形成先是细胞质膜的内陷形成胞内小泡ꎬ然后胞内小泡进一步发展成多ｃａｓｐａｓｅｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔｄｏｍａｉｎ[Ｊ].ＪＢｉｏｌＣｈｅｍꎬ２０１３ꎬ２８８(１２):８４９１－５０４.[２０]ＺｈａｎｇＬꎬＤｏｎｇＬꎬＬｉｕＸꎬｅｔａｌ.α￣Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ￣ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅｐｒｏｔｅｃｔｓｒｅｔｉｎａｌｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｆｒｏｍｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｄｉａｂｅｔｅｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１４ꎬ９(４):ｅ９３４３３.[２１]ＺｈａｎｇＦꎬＣｕｉＪꎬＬｉｕＸꎬｅｔａｌ.ＲｏｌｅｓｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ￣３４ａｔａｒｇｅｔｉｎｇＳＩＲＴ１ｉｎｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＳｔｅｍＣｅｌｌＲｅｓＴｈｅｒꎬ２０１５ꎬ６:１９５.[２２]ＰａｐｉｚａｎＪＢꎬＯｌｓｏｎＥＮ.Ｈｉｐｐｏｉｎｔｈｅｐａｔｈｔｏｈｅａｒｔｒｅｐａｉｒ[Ｊ].ＣｉｒｃＲｅｓꎬ２０１４ꎬ１１５(３):３３２－４.[２３]ＸｉｎＺꎬＭａＺꎬＨｕＷꎬｅｔａｌ.ＦＯＸＯ１/３:ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｓｏｆｆｉｂｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＡｇｅｉｎｇＲｅｓＲｅｖꎬ２０１８ꎬ４１:４２－５２.[２４]ＧｅｎｇＴꎬＬｉＰꎬＹｉｎＸꎬＹａｎＺ.ＰＧＣ￣１αｐｒｏｍｏｔｅｓｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅａｎ￣ｔｉｏｘｉｄａｎｔｄｅｆｅｎｓｅｓａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓＦＯＸＯｓｉｇｎａｌｉｎｇａｇａｉｎｓｔｃａｒｄｉａｃｃａ￣ｃｈｅｘｉａｉｎｍｉｃｅ[Ｊ].ＡｍＪＰａｔｈｏｌꎬ２０１１ꎬ１７８(４):１７３８－４８.[２５]ＥｌｍａｄｈｕｎＮＹꎬＳａｂｅＡＡꎬＬａｓｓａｌｅｔｔａＡＤꎬｅｔａｌ.Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎｍｉｔｉ￣ｇａｔｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｉｓｃｈｅｍｉｃｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ[Ｊ].ＪＳｕｒｇＲｅｓꎬ２０１４ꎬ１９２(１):５０－８.ＦＯＸＯｓ:ｐｏｔｅｎｔｉａｌｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅｓＬＩＸｉａｏ￣ｘｉａꎬＬＹＵＪｕｎ￣ｌｉꎬＺＨＡＮＧＣｈｕｎ￣ｙｉｎｇꎬＧＵＯＨｕｉ￣ｃａｉ(ＤｅｐｔｏｆＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙꎬＨｅｂｅｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＨｅｂｅｉＫｅｙＬａｂｏｆＥｎｖｉｒｏｎｅｍｎｔａｎｄＨｕｍａｎＨｅａｌｔｈꎬＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ㊀０５００１７ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅｈｉｇｈｉｎｃｉｄｅｎｃｅａｎｄｍｏｒｔａｌｉｔｙｏｆｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅｓｅｒｉ￣ｏｕｓｌｙａｆｆｅｃｔｈｕｍａｎｈｅａｌｔｈ.Ａｍｏｎｇｔｈｅｍꎬｉｓｃｈｅｍｉｃｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅａｎｄｍｙｏｃａｒｄｉａｌｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙａｒｅｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎ.Ｔｈｅｔｒａｎ￣ｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＦＯＸＯｓｃａｎｐｒｏｔｅｃｔｈｅａｒｔｔｉｓｓｕｅｂｙｆｉｇｈｔｉｎｇｏｘｉｄａ￣ｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄａｕｔｏｐｈａｇｙꎬｐｌａｙｉｎｇａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅ.Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅ￣ｖｉｅｗｓｔｈｅｒｏｌｅｏｆＦＯＸＯｓｉｎｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅａｎｄｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈ￣ｗａｙｓ.ｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅꎬＦＯＸＯｓꎬａｓａｐｏｔｅｎｔｉａｌｔａｒｇｅｔꎬｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｄｅａｓｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＦＯＸＯｓꎻＦＯＸＯ１ꎻＦＯＸＯ３ꎻｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙꎻｉｓ￣ｃｈｅｍｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙꎻｃａｒｄｉａｃｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ９０３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３):３０９~１４泡小体ꎬ最后多泡小体与细胞质膜融合释放[２]ꎬ其通常被释放到细胞外ꎬ然后与其他的细胞质膜融合ꎮ外泌体是一个纳米球 ꎬ由来自于亲本细胞的蛋白质和脂质组成ꎬ主要有热休克蛋白(ＨＳＰ７０㊁ＨＳＰ９０)ꎬ膜转运和融合蛋白(ＧＴＰ酶㊁膜联蛋白)ꎬ四分子交联体家族(ＣＤ９㊁ＣＤ６３㊁ＣＤ８１)及多泡的生物合成(如Ａｌｉｘ㊁ＴＳＧ１０１)涉及的蛋白ꎬ外泌体膜表面丰富的蛋白使其可以与靶细胞膜上的特异性蛋白结合ꎬ使其具有靶向性[４]ꎬ如来自少突胶质细胞的外泌体ꎬ因带有髓磷脂蛋白质ꎬ使其具有独特的选择属性[５](Ｆｉｇ２)ꎮＦｉｇ１㊀ＢｉｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓＦｉｇ２㊀Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓ㊀㊀在药物递送系统的快速发展中ꎬ纳米技术因能靶向和控释使其具有很好的应用前景ꎬ各类型的纳米载体能明显提高药物的治疗效果[６]ꎮ病毒具有传送其基因组进入其他细胞的能力而被应用于递送遗传物质到细胞[７]ꎮ然而ꎬ利用病毒转染可能会引起潜在的基因突变ꎬ诱发癌症与加重免疫反应ꎬ并且高额的成本限制了病毒载体在临床上的应用[８]ꎮ理想的载体应该是安全㊁有效ꎬ并且有最佳的生物利用度ꎮ同时ꎬ载体的稳定性ꎬ低的细胞毒性和免疫原性ꎬ以及能否成功地将药物运送到特定的组织或细胞也是至关重要的ꎮ外泌体作为药物递送系统具有一系列的优点:(１)从患者的组织或血液收集(如骨髓㊁单核细胞或巨噬细胞)的外泌体ꎬ载药后可以逃避单核吞噬细胞系统(ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｐｈａｇｏｃｙｔｅｓｙｓｔｅｍꎬＭＰＳ)的清除ꎬ从而减少药物的清除率[９]ꎮ(２)外泌体具有潜在的靶向性ꎬ可以增加药物输送到靶组织的能力[１０]ꎮ(３)外泌体膜的特定脂质体和蛋白质ꎬ使得外泌体可以直接与靶细胞膜融合ꎬ从而明显提高药物进入细胞的可能性ꎮ(４)外泌体载体可以避开内吞途径的内化ꎬ而且外泌体的安全性在许多临床试验已经得到证实[１１]ꎮ因此ꎬ越来越多的研究开始关注外泌体作为载体的可能性及临床应用的价值ꎮ２㊀外泌体的提取、分离方法㊀㊀开发高效㊁快速㊁稳定ꎬ并且保持外泌体结构和生物功能完整性的方法ꎬ是目前外泌体应用于临床的基础和前提ꎮ从细胞上清和体液中提取分离外泌体的方法很多ꎬ但是外泌体的纯度和产量却和分离方法息息相关ꎮ通常分离步骤少㊁产率高ꎬ但是纯度会受到影响ꎮ鉴于每种分离方法都有其优缺点ꎬ实验可以根据样本来源㊁下游实验目的等ꎬ选择合适的外泌体分离方法ꎮ２０１５年ꎬ国际囊泡组织(ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＥｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒＶｅｓｉｃｌｅｓꎬＩＳＥＶ)指出ꎬ简单依靠一种分离方法得到的外泌体的纯度和产量都难满足实验的需求ꎮ因此ꎬ推荐联合使用各种方法ꎬ从而得到高纯度和高产量的外泌体ꎮ本文总结了常用的传统和新兴的外泌体提取方法(Ｆｉｇ３)ꎮ２.１㊀超高速离心法㊀㊀常用的是超高速离心法ꎬ该方法是被誉为分离外泌体的金标准 ꎮ该方法利用离心力从细胞培养液或生物流体获得外泌体ꎬ经过４００ˑｇ㊁２０００ˑｇ㊁１００００ˑｇ的低速离心ꎬ除去细胞及大的细胞分泌物ꎻ最后超高速１０００００ˑｇ离心得Ｆｉｇ３㊀Ｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓ０１３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３)到外泌体[１２]ꎮ超高速离心因操作简单ꎬ不需要复杂的技术支持ꎬ并且成本相对较低而被广泛使用ꎮ但是该方法耗时㊁产率低ꎬ得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型㊁转子沉降角度等因素影响ꎬ其中最主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体ꎬ但也会有其他的囊泡㊁蛋白质或蛋白和ＲＮＡ的聚集体ꎮ２.２㊀尺寸排阻色谱法和超滤法㊀尺寸排阻色谱法是利用分子筛理论ꎬ最初是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术ꎮ该方法的主要优点是不需要很大的离心力ꎬ从而保证了外泌体的完整性ꎮＭｏｌ等[１３]对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白ꎬ结果显示ꎬ后者得到的外泌体的蛋白丰度高于前者ꎮ这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能ꎮ超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法ꎬ超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程ꎬ通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质ꎮ不过连续的超滤可以分离出外泌体ꎬ和超高速离心相比ꎬ超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体ꎮ但是ꎬ超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量ꎬ并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂ꎮ２.３㊀免疫亲和层析法㊀免疫亲和层析法是利用生物体内存在的抗原㊁抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法ꎬ主要用于生物大分子的分离㊁纯化ꎮ将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体ꎬ如ＴＳＧ１０１或四跨膜蛋白ꎮ此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合ꎬ只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别ꎬ这使得提取的外泌体纯度高ꎬ但是产量低ꎮＺａｒｏｖｎｉ等[１４]分别用超速离心㊁密度梯度离心和免疫层析法ꎬ从血浆和细胞上清中提取外泌体蛋白ꎬ结果表明ꎬ免疫亲和层析法得到的外泌体表面存在多种标记蛋白(Ａｌｉｘ㊁ＣＤ９㊁ＣＤ６３)ꎬ同时ꎬＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ结果也证明了该方法的可行性ꎮ２.４㊀梯度密度离心法㊀研究发现ꎬ外泌体的密度在１１~１１９ｋｇＬ－１之间ꎬ因此ꎬ可以采用密度梯度离心法来分离外泌体ꎮ该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合ꎬ原理是先除去非囊泡物质ꎬ再通过梯度密度浓缩提取外泌体ꎬ该方法可以得到相对较为纯净的外泌体ꎮ传统的梯度密度方法通常需要离心１６ｈꎬ但是２０１２年ꎬ研究者[１５]使用了６２~９０ｈ才分离出某些确切囊泡ꎬ因此ꎬ该方法可能不足以沉淀所有的外泌体ꎮ如果离心时间不充足ꎬ污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层ꎬ特别是这个密度范围又比较宽ꎮ２.５㊀聚合物沉淀法㊀聚合物沉淀法用于分离病毒和其他的生物大分子已有５０多年历史ꎬ近几年ꎬ将其作为一种新的方法来分离外泌体ꎮ目前ꎬ市场已经有应用聚乙二醇(ｐｏｌｙｅｔｈ￣ｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌꎬＰＥＧ)溶液提取外泌体的试剂盒ꎬ最常见的是ＳｙｓｔｅｍＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ公司的ＥｘｏＱｕｉｃｋ®和ＥｘｏＱｕｉｃｋ￣ＴＣ®ｋｉｔｓꎬ该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器ꎬ但是价格昂贵ꎮ提取外泌体的试剂盒主要成分是ＰＥＧ８０００(３０％~５０％)ꎬ将试剂盒与体液或细胞培养液４ħ孵育过夜ꎬ之后再低速离心ꎮ２.６㊀微流控技术㊀微流控是利用微纳米级尺寸的管道来处理和操控流体所涉及的一门技术ꎬ其在外泌体分离方面的应用受到越来越多学者的关注ꎮＪｉｅ等[１６]课题组开发了一种三维纳米结构微流控芯片ꎬ微柱阵列通过化学沉积将交叉多壁碳纳米管功能化ꎬ然后其就可以识别特定的分子(ＣＤ６３)并利用独特拓扑纳米材料高效的捕获外泌体ꎮＷｕｎｓｃｈ等[１７]利用硅工艺生产纳米级确定性侧向位移(Ｎａｎｏ￣ＤＬＤ)芯片ꎬ得到了均匀的间隙尺寸ꎬ该芯片可以灵敏地将２０~１１０ｎｍ的颗粒分离ꎮ该研究证明了外泌体基于大小的位移ꎬ从而揭示了利用芯片分选和量化纳米级生物胶体的潜力ꎮ３㊀外泌体作为货物载体外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解ꎬ但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质ꎬ使得外泌体载货物变得困难ꎮ外泌体只有保证膜结构的完整性ꎬ才能不引起免疫反应ꎬ不被ＭＰＳ吞噬ꎮ目前ꎬ将货物载入外泌体的方法主要有两种(Ｆｉｇ４):(１)前转载ꎬ在分离外泌体之前ꎬ将货物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染ꎬ可以让母代细胞分泌含有货物的外泌体ꎻ(２)后Ｆｉｇ４㊀Ｍｅｔｈｏｄｓｏｆｄｒｕｇｌｏａｄｉｎｇ１１３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３)转载ꎬ分离出外泌体之后ꎬ将货物载入外泌体ꎮ３.１㊀前转载㊀前转染主要是用转染剂将货物转染进入亲代细胞(或者将货物与亲代细胞孵育 )ꎬ然后收集培养基ꎬ获得载有货物的外泌体的过程ꎮ该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少ꎬ且转染试剂无法完全去除ꎬ导致转染效率低ꎬ无法排除转染试剂对实验的影响ꎮ３.１.１㊀外泌体载核酸类物质㊀Ｄｉｄｉｏｔ等[１８]将小干扰ＲＮＡ通过疏水性修饰(ｈｓｉＲＮＡ)后ꎬ与外泌体孵育ꎬ结果载有靶向亨延顿ｍＲＮＡ的ｈｓｉＲＮＡ外泌体可以被小鼠原代皮层神经元内化ꎬ导致亨延顿ｍＲＮＡ和蛋白发生剂量依赖性沉默ꎬ然后单侧注入含有ｈｓｉＲＮＡ的外泌体到小鼠纹状体ꎬ导致寡核苷酸的双侧分布ꎬ亨延顿ｍＲＮＡ在两侧均有３５％的沉默ꎮ递送至脑的含ｈｓｉＲＮＡ外泌体广泛分布和有效性有望改善和治疗亨延顿以及其他神经变性疾病ꎮＢｕｓｃａｉｌ等[１９]利用工程化手段ꎬ将来源于正常成纤维细胞间充质细胞的外泌体修饰为ｉＥｘｏｓｏｍｅｓ ꎬ其可以递送小ＲＮＡꎬ以特异性靶向突变体ＫＲＡＳꎬ导致疾病抑制ꎬ并增加小鼠模型的总体存活率ꎮ研究人员使用ＲＮＡ干扰(ＲＮＡｉ)的靶向方法ꎬ用天然来源的外泌体递送时ꎬ抑制胰腺癌细胞中的突变体ＫＲＡＳ的表达ꎬ从而影响多种胰腺癌模型中肿瘤的生长和存活ꎮ与正常的脂质体相比ꎬ工程化的外泌体(ｉＥｘｏｓｏｍｅｓ)靶向致癌性ＫＲＡＳꎬ并且他们还发现ꎬ通过外泌体表面的ＣＤ４７分子可以让外泌体给巨噬细胞一个别吃我的信号ꎬ从而减少外泌体的损耗ꎬ提高其在血液中的半衰期ꎬ最终提高治疗效果ꎮ３.１.２㊀外泌体载蛋白质㊀无论是化学试剂还是核酸ꎬ这些大分子物质都可以被成功载入外泌体中ꎬ但是载高分子质量的蛋白质却存在很大难点ꎬ重组蛋白的提纯耗时㊁耗钱ꎬ而且过程中因物理或者化学作用会导致蛋白变性ꎮＹｉｍ等[２０]最近研究一种新的蛋白质载入外泌体的方法:通过可逆蛋白相互作用ꎬ促进蛋白质载入外泌体(ＥＸＰＬＯＲｓ)ꎬ相比其他方法ꎬ该方法的载蛋白量更高ꎮ实验过程中ꎬ在蓝色荧光控制下ꎬ有效利用可逆蛋白与蛋白之间的相互作用ꎬ将货物蛋白导入亲代细胞ꎬ然后从亲代细胞提取分离出含有目的蛋白的外泌体ꎮ因为ＥＸＰＬＯＲｓ是通过胞内蛋白活跃载入外泌体的ꎬ在这个过程中使用了蓝色荧光ꎬ并且整个过程不包括蛋白提纯的步骤ꎮ该课题组通过体内㊁体外实验均成功地转运诸如Ｃｒｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｓｅ一类的功能蛋白到靶细胞ꎬ他们进一步阐释ꎬ认为ＥＸＰＬＯＲｓ技术对于提高治疗性蛋白的装载和转运效率具有重要的意义ꎮ３.１.３㊀外泌体载化疗药物㊀Ａｓｃｕｃｃｉ等[２１]将紫杉醇(２ｍｇＬ－１)和小鼠间充质干细胞(３ˑ１０５)混合培养２４ｈꎬ除去未进入细胞的紫杉醇ꎬ４８ｈ以后收集细胞上清ꎬ超高速离心提取外泌体ꎮ高效液相色谱和红外光谱结果显示ꎬ间充质干细胞分泌的外泌体中含有紫杉醇ꎬ同时研究人员将含有紫杉醇的外泌体作用于人的胰腺癌细胞ꎬ结果显示ꎬ含有紫杉醇的外泌体有效抑制了胰腺癌细胞的增殖ꎮ另外ꎬ该课题组还发现ꎬ不同来源的外泌体具有特异性的标记ꎬ且该标记有望成为疾病诊断的靶点ꎮ３.２㊀后转载㊀另一种常见的方法是将货物与外泌体孵育ꎬ鉴于外泌体的磷脂双分子层表面ꎬ该方法更适用于小分子的疏水性货物 ꎮ对于水溶性的货物则常用电穿孔的方法将货物载入外泌体ꎮ３.２.１㊀自然孵育㊀越来越多的研究聚焦于外泌体作为载体用于向中枢神经系统递送药物㊁ＲＮＡ和蛋白质ꎮ为了克服血脑屏障(ｂｌｏｏｄｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒꎬＢＢＢ)ꎬ外泌体需要靶向脑内皮的脑归巢肽修饰ꎬ这可能会增强免疫应答ꎮＹｕａｎ等[２２]首次证明不需要这种修饰的外泌体也可以透过哺乳动物的ＢＢＢꎮ原始巨噬细胞的外泌体一方面可以利用整合素淋巴细胞功能相关抗原１(ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔｉｇｅｎ￣１ꎬＬＦＡ￣１)和细胞间黏附分子１(ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ￣１ꎬＩＣＡＭ￣１)ꎬ另外通过碳水化合物结合的Ｃ型凝集素受体ꎬ与包含ＢＢＢ的脑微血管内皮细胞相关作用ꎮ更重要的是ꎬ炎症中常见的ＩＣＡＭ￣１上调可以促进ＢＢＢ细胞对外泌体的摄取ꎮ研究者进一步的体内实验证明ꎬ巨噬细胞的外泌体可以穿过ＢＢＢꎬ并将大脑衍生的神经营养因子(ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎꎬＮＴ)递送到脑中ꎬ这种传播在脑炎症的存在下会增强ꎮ来自路易斯维尔大学的Ａｇｒａｗａｌ等[２３]探讨了牛奶来源的外泌体作为口服递送化疗药物紫杉醇(ＰＡＣ)代替静脉注射ꎬ从而改善药物的负载效率和降低药物毒性反应的可行性ꎮ研究结果表明ꎬ负载ＰＡＣ外泌体(ＥｘｏＰＡＣ)的粒径约为１０８ｎｍꎬ负载率８％左右ꎬ－８０ħ时ꎬ外泌体和ＥｘｏＰＡＣ在模拟胃肠液中均表现出较好的稳定性ꎮ体外实验发现ꎬＥｘ￣ｏＰＡＣ在ＰＢＳ(ｐＨ６８)环境下ꎬ对ＰＡＣ的缓释效果可以持续至少４８ｈꎮ体内实验中ꎬ口服递送ＥｘｏＰＡＣ作用于人肺癌荷瘤小鼠ꎬ其肿瘤的生长明显受到抑制(抑制率为６０％ꎬＰ<０００１)ꎮ而同等剂量的ＰＡＣ静脉注射ꎬ只显示出中等程度(抑制率为３１％)ꎬ且抑制作用无统计学差异ꎮ值得注意的是ꎬ与传统静脉注射相比ꎬ口服ＥｘｏＰＡＣ全身毒性和免疫原性毒性更低ꎮ３.２.２㊀电穿孔㊀电穿孔法因参数容易控制ꎬ多种货物载入外泌体都可以使用该方法ꎮＷａｎｇ等[２４]研究了胞外囊泡作为小ＲＮＡ的靶向递送系统ꎬ利用电穿孔法将ｓｉＲＮＡ/ｍｉ￣ｃｒｏＲＮＡ载入核酸适配体ＡＳ１４１１(ＡＳ１４１１是一种靶向肿瘤细胞高表达核仁素的核酸适配体)修饰的囊泡中ꎬ然后通过外泌体将ｓｉＲＮＡ/ｍｉｃｒｏＲＮＡ靶向递送到乳腺癌组织ꎮ由于ＡＳ１４１１和核仁素的的结合达到瘤靶向(核仁素在乳腺癌细胞表面高表达)ꎬ这种靶向ｌｅｔ￣７ｍｉＲＮＡ的囊泡可在体外传递到人乳腺癌ＭＤＡ￣ＭＢ￣２３１细胞ꎮ静脉注射载有Ｃｙ５荧光标记的ｍｉＲＮＡｌｅｔ￣７的ＡＳ１４１１囊泡ꎬ可以选择性靶向荷瘤小鼠中的肿瘤部位ꎬ并抑制肿瘤的生长ꎬ而且修饰的囊泡耐受性良好ꎬ没有显示明显的非特异性副作用或免疫应答反应ꎮ化疗药物虽然为肿瘤的治疗带来了希望ꎬ但是临床使用的化疗药物均有不同程度的毒副作用ꎬ如阿霉素ꎬ其心脏毒性限制了阿霉素的广泛使用ꎮＨａｄｌａ等[２５]用电穿孔的方法将阿霉素载入外泌体中ꎬ构建一个新的药物递送体系ꎬ在后续的体内和体外实验中均发现ꎬ与阿霉素相比ꎬ外泌体载阿霉素可以部分限制阿霉素穿过心血管内皮细胞ꎬ并减少阿霉素在心脏部位的聚集ꎬ从而降低了心脏毒性ꎮ外泌体载阿霉２１３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３)素在小鼠体内的耐受量明显高于游离的阿霉素ꎬ从而增加了阿霉素对乳腺癌和卵巢癌的治疗指数ꎮ４㊀总结与展望㊀㊀过去的几十年中ꎬ越来越多的研究聚焦在外泌体作为药物递送系统的可能性ꎬ但是外泌体的提取方法㊁纯度㊁产业化生产及低的载药量等ꎬ限制了其进一步的发展ꎮ未来的研究将集中在如何提高外泌体的载药量上ꎬ事实上ꎬ外泌体本就能够携带大量货物进入机体ꎮ外泌体的进一步修饰可以提高其活性ꎬ并且也可以根据疾病产生的细胞毒性(癌症治疗)ꎬ或保护特性(用于治疗神经退行性疾病的影响ꎬ提高治疗的效果)来修饰外泌体ꎮ新的治疗干预措施ꎬ包括扩大生产规模和控制生产质量ꎬ严格的药代动力学和毒理学研究ꎬ这些目标的实现将是后续的工业发展的关键步骤ꎮ目前ꎬ一些抗癌药物包括阿霉素㊁紫杉醇和基因类药物ꎬ都已经可以有效地负载到外泌体中ꎬ说明了外泌体在药物递送上的潜力ꎮ但是ꎬ外泌体的研究目前仅仅停留在实验室基础上ꎬ将其应用于临床还需要很多的研究ꎮ参考文献:[１]㊀李㊀超ꎬ戴㊀敏.不同细胞来源的ＥＸＯｓ在动脉粥样硬化中的研究进展[Ｊ].中国药理学通报ꎬ２０１７ꎬ３３(１):２７－３２. [１]㊀ＬｉＣꎬＤａｉＭ.Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｅｌｌｄｅｒｉｖｅｄｅｘｔｒａｃｅｌ￣ｌｕｌａｒｂｏｄｉｅｓｉｎａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＣｈｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌＢｕｌｌꎬ２０１７ꎬ３３(１):２７－３２.[２]㊀ＶａｄｅｒＰꎬＭｏｌＥＡꎬＰａｓｔｅｒｋａｍｐＧꎬｅｔａｌ.Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｖｅｓｉｃｌｅｓｆｏｒｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ[Ｊ].ＡｄｖＤｒｕｇＤｅｌｉｖＲｅｖꎬ２０１６ꎬ１０６(ＰｔＡ):１４８－５６.[３]㊀ＧｈｏｌｉｚａｄｅｈＳꎬＳｈｅｈａｔａＤｒａｚＭꎬＺａｒｇｈｏｏｎｉＭꎬｅｔａｌ.Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃａｐｐｒｏａｃｈｅｓｆｏｒｉｓｏｌａｔｉｏｎꎬｄｅｔｅｃｔｉｏｎꎬａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａ￣ｃｅｌｌｕｌａｒｖｅｓｉｃｌｅｓ:ｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｓａｎｄｆｕｔｕｒｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＢｉｏｓｅｎｓＢｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎꎬ２０１７ꎬ９１:５８８－６０５.[４]㊀ＹａｎｇＴꎬＭａｒｔｉｎＰꎬＦｏｇａｒｔｙＢꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｓｏｍｅｄｅｌｉｖｅｒｅｄａｎｔｉｃａｎｃｅｒｄｒｕｇｓａｃｒｏｓｓｔｈｅｂｌｏｏｄ￣ｂｒａｉｎｂａｒｒｉｅｒｆｏｒｂｒａｉｎｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙｉｎＤａ￣ｎｉｏｒｅｒｉｏ[Ｊ].ＰｈａｒｍＲｅｓꎬ２０１５ꎬ３２(６):２００３－１４. [５]㊀Ａｌｖａｒｅｚ￣ＥｒｖｉｔｉＬꎬＳｅｏｗＹꎬＹｉｎＨꎬｅｔａｌ.ＤｅｌｉｖｅｒｙｏｆｓｉＲＮＡｔｏｔｈｅｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｂｙｓｙｓｔｅｍｉｃｉｎｊｅｃｔｉｏｎｏｆｔａｒｇｅｔｅｄｅｘｏｓｏｍｅｓ[Ｊ].ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌꎬ２０１１ꎬ２９(４):３４１－５.[６]㊀ＳｕｎＸＲꎬＺｈａｎｇＬＣꎬＳｈｉＱＷꎬｅｔａｌ.Ａｄｖａｎｃｅｉｎｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｃｅｌｌ￣ｄｅｒｉｖｅｄｎａｎｏｍ￣ｅｄｉｃｉｎｅｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ[Ｊ].ＡｃｔａＰｈａｒｍＳｉｎꎬ２０１７ꎬ５２(７):１１１０－６.[７]㊀ＳｔｏｎｅＤ.Ｎｏｖｅｌｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒｓｙｓｔｅｍｓｆｏｒｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].Ｖｉｒｕｓｅｓꎬ２０１０ꎬ２(４):１００２－７.[８]㊀ＮａｙｅｒｏｓｓａｄａｔＮꎬＭａｅｄｅｈＴꎬＡｌｉＰＡ.Ｖｉｒａｌａｎｄｎｏｎｖｉｒａｌｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍｓｆｏｒｇｅｎｅｄｅｌｉｖｅｒｙ[Ｊ].ＡｄｖＢｉｏｍｅｄＲｅｓꎬ２０１２ꎬ１:２７. [９]㊀ＣｌａｙｔｏｎＡꎬＨａｒｒｉｓＣＬꎬＣｏｕｒｔＪꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉｇｅｎ￣ｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌｅｘ￣ｏｓｏｍｅｓａｒｅｐｒｏｔｅｃｔｅｄｆｒｏｍｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｌｙｓｉｓｂｙｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＤ５５ａｎｄＣＤ５９[Ｊ].ＥｕｒＪＩｍｍｕｎｏｌꎬ２００３ꎬ３３(２):５２２－３１. [１０]ＨａｎｅｙＭＪꎬＫｌｙａｃｈｋｏＮＬꎬＺｈａｏＹꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｓｏｍｅｓａｓｄｒｕｇｄｅ￣ｌｉｖｅｒｙｖｅｈｉｃｌｅｓｆｏｒＰａｒｋｉｎｓｏｎ'ｓｄｉｓｅａｓｅｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].ＪＣｏｎｔｒｏｌＲｅ￣ｌｅａｓｅꎬ２０１５ꎬ２０７:１８－３０.[１１]ＶｉａｕｄＳꎬＰｌｏｉｘＳꎬＬａｐｉｅｒｒｅＶꎬｅｔａｌ.Ｕｐｄａｔｅｄｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｔｏｐｒｏ￣ｄｕｃｅｈｉｇｈｌｙｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌ￣ｄｅｒｉｖｅｄｅｘｏｓｏｍｅｓｏｆｃｌｉｎｉ￣ｃａｌｇｒａｄｅ:ａｃｒｉｔｉｃａｌｒｏｌｅｏｆｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ￣γ[Ｊ].ＪＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒꎬ２０１１ꎬ３４(１):６５－７５.[１２]ＴｈéｒｙＣꎬＡｍｉｇｏｒｅｎａＳꎬＲａｐｏｓｏＧꎬｅｔａｌ.Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒ￣ｉｚａｔｉｏｎｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓｆｒｏｍｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｌｕｉｄｓ[Ｊ].ＣｕｒｒＰｒｏｔｏｃＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２００６ꎬＣｈａｐｔｅｒ３:Ｕｎｉｔ３.２２. [１３]ＭｏｌＥＡꎬＧｏｕｍａｎｓＭＪꎬＤｏｅｖｅｎｄａｎｓＰＡꎬｅｔａｌ.Ｈｉｇｈｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎ￣ａｌｉｔｙｏｆｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｖｅｓｉｃｌｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｕｓｉｎｇｓｉｚｅ￣ｅｘｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａ￣ｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ[Ｊ].Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ２０１７ꎬ１３(６):２０６１－５.[１４]ＺａｒｏｖｎｉＮꎬＣｏｒｒａｄｏＡꎬＧｕａｚｚｉＰꎬｅｔａｌ.Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓｈｕｔｔｌｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓａｎｄｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓｕｓｉｎｇｉｍｍｕｎｏｃａｐｔｕｒｅａｐｐｒｏａｃｈｅｓ[Ｊ].Ｍｅｔｈｏｄｓꎬ２０１５ꎬ８７:４６－５８.[１５]ＰａｌｍａＪꎬＹａｄｄａｎａｐｕｄｉＳＣꎬＰｉｇａｔｉＬꎬｅｔａｌ.ＭｉｃｒｏＲＮＡｓａｒｅｅｘ￣ｐｏｒｔｅｄｆｒｏｍｍａｌｉｇｎａｎｔｃｅｌｌｓｉｎｃｕｓｔｏｍｉｚｅｄｐａｒｔｉｃｌｅｓ[Ｊ].ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓꎬ２０１２ꎬ４０(１８):９１２５－３８.[１６]ＷａｎｇＪꎬＬｉＷꎬＺｈａｎｇＬꎬｅｔａｌ.Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙｅｄｉｔｅｄｅｘｏｓｏｍｅｓｗｉｔｈｄｕａｌｌｉｇａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｄｅｖｉｃｅｆｏｒａｃｔｉｖｅｔａｒｇｅｔｅｄｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｔｏｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＡＣＳＡｐｐｌＭａｔｅｒＩｎｔｅｒｆａｃｅｓꎬ２０１７ꎬ９(３３):２７４４１－５２.[１７]ＷｕｎｓｃｈＢＨꎬＳｍｉｔｈＪＴꎬＧｉｆｆｏｒｄＳＭꎬｅｔａｌ.Ｎａｎｏｓｃａｌｅｌａｔｅｒａｌｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔａｒｒａｙｓｆｏｒｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓａｎｄｃｏｌｌｏｉｄｓｄｏｗｎｔｏ２０ｎｍ[Ｊ].ＮａｔＮａｎｏｔｅｃｈｎｏｌꎬ２０１６ꎬ１１(１１):９３６－４０. [１８]㊀ＤｉｄｉｏｔＭＣꎬＨａｌｌＬＭꎬＣｏｌｅｓＡＨꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｓｏｍｅ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｄｅ￣ｌｉｖｅｒｙｏｆｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｓｉＲＮＡｆｏｒｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎｍＲＮＡｓｉ￣ｌｅｎｃｉｎｇ[Ｊ].ＭｏｌＴｈｅｒꎬ２０１６ꎬ２４(１０):１８３６－４７.[１９]ＢｕｓｃａｉｌＬ.Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒ:ｅｘｏｓｏｍｅｓｆｏｒｔａｒｇｅｔｉｎｇＫＲＡＳｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌＨｅｐａｔｏｌꎬ２０１７ꎬ１４(１１):６３６－８.[２０]ＹｉｍＮꎬＲｙｕＳＷꎬＣｈｏｉＫꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｓｏｍｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｆｏｒｅｆｆｉ￣ｃｉｅｎｔｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｓｏｌｕｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎｓｕｓｉｎｇｏｐｔｉｃａｌｌｙｒｅ￣ｖｅｒｓｉｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎ￣ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｍｏｄｕｌｅ[Ｊ].ＮａｔＣｏｍｍｕｎꎬ２０１６ꎬ７:１２２７７.[２１]ＡｓｃｕｃｃｉＬꎬＣｏｃｃèＶꎬＢｏｎｏｍｉＡꎬｅｔａｌ.Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌｉｓｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄｂｙｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓａｎｄｒｅｌｅａｓｅｄｉｎｅｘｏｓｏｍｅｓｔｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｉｎｖｉｔｒｏｔｕｍｏｒｇｒｏｗｔｈ:ａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ[Ｊ].ＪＣｏｎｔｒｏｌＲｅｌｅａｓｅꎬ２０１４ꎬ１９２:２６２－７０.[２２]ＹｕａｎＤꎬＺｈａｏＹꎬＢａｎｋｓＷＡꎬｅｔａｌ.Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｅｘｏｓｏｍｅｓａｓｎａｔｕｒａｌｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓｆｏｒｐｒｏｔｅｉｎｄｅｌｉｖｅｒｙｔｏｉｎｆｌａｍｅｄｂｒａｉｎ[Ｊ].Ｂｉｏ￣ｍａｔｅｒｉａｌｓꎬ２０１７ꎬ１４２:１－１２.[２３]ＡｇｒａｗａｌＡＫꎬＡｑｉｌＦꎬＪｅｙａｂａｌａｎＪꎬｅｔａｌ.Ｍｉｌｋ￣ｄｅｒｉｖｅｄｅｘｏｓｏｍｅｓｆｏｒｏｒａｌｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆｐａｃｌｉｔａｘｅｌ[Ｊ].Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ２０１７ꎬ１３(５):１６２７－３６.[２４]ＷａｎｇＹＹꎬＣｈｅｎＸＪꎬＴｉａｎＢＱꎬｅｔａｌ.Ｎｕｃｌｅｏｌｉｎ￣ｔａｒｇｅｔｅｄｅｘｔｒａ￣ｃｅｌｌｕｌａｒｖｅｓｉｃｌｅｓａｓａｖｅｒｓａｔｉｌｅｐｌａｔｆｏｒｍｆｏｒｂｉｏｌｏｇｉｃｓｄｅｌｉｖｅｒｙｔｏｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒ[Ｊ].Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓꎬ７(５):１３６０－７２.[２５]ＨａｄｌａＭꎬＰａｌａｚｚｏｌｏＳꎬＣｏｒｏｎａＧꎬｅｔａｌ.Ｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｎｄｅｘｏｆｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎｉｎｂｒｅａｓｔａｎｄｏｖａｒｉａｎｃａｎｃｅｒｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｓ[Ｊ].Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ(Ｌｏｎｄ)ꎬ２０１６ꎬ１１(１８):２４３１－４１.３１３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３)Ｅｘｏｓｏｍｅｓ:Ａｎｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｎａｔｕｒａｌｎａｎｏ￣ｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍＷＡＮＧＰｉａｏ￣ｐｉａｏ１ꎬＷＡＮＧＨｕｉ￣ｈｕｉ１ꎬＷＡＮＧＬｅｉ１ꎬＹＡＯＬｉａｎｇ１ꎬＰＥＮＧＤａｉ￣ｙｉｎ１ꎬ２ꎬＣＨＥＮＷｅｉ￣ｄｏｎｇ１(１.ＡｎｈｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＨｅｆｅｉ２３００１１ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＡｎｈｕｉＫｅｙＬａｂｆｏｒＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＨｅｆｅｉ㊀２３００３１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｅｘｏｓｏｍｅｓａｒｅｎａｔｕｒａｌｌｙｎａｎｏｍｅｔｅｒ￣ｓｉｚｅｄ(４０－１００ｎｍ)ｖｅｓｉｃｌｅｓｔｈａｔｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｈｅｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎａｍｏｎｇｔｈｅｃｅｌｌｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓꎬｌｉｐｉｄｓａｎｄＲＮＡｗｈｉｃｈｔｈｅｙｃａｒｒｉｅｄ.Ｅｘｏｓｏｍｅｓｄｅｒｉｖｅｄａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｐｌａｙｄｉｆ￣ｆｅｒｅｎｔｒｏｌｅꎬｗｈｉｃｈｔｈｅｒｅｆｏｒｅｃａｎｂｅｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｃａｎｃｅｒ.Ｂｅｓｉｄｅｓꎬｅｘｏｓｏｍｅｓａｓｔｈｅｎａｔｕｒａｌｎａｎｏ￣ｍａｔｅｒｉａｌｓｈａｖｅｔｈｅｕｎｉｑｕｅａｄｖａｎｔａｇｅｉｎｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ.Ａｌ￣ｔｈｏｕｇｈｔｈｅｉｎｔｒｉｎｓｉｃａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓｈａｖｅｅｖｏｋｅｄａｓｕｒｇｅｏｆｉｎｔｅｒｅｓｔꎬｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｓｉｎｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｉｓｏｌａｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｗｉｔｈｈｉｇｈｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｒｏｂｕｓｔｙｉｅｌｄａｒｅｓｔｉｌｌａｈｕｇｅｃｈａｌｌｅｎｇｅ.Ｈｅｒｅꎬｗｅｐｒｏｖｉｄｅａｎｏｖｅｒｖｉｅｗｏｆｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｅｘｏｓｏｍｅｓꎻｅｘｔｏｒｔｉｏｎａｎｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎꎻｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍꎻｄｒｕｇｔａｒｇｅｔｉｎｇꎻｔｕｍｏｒｓꎻａｎｔｉ￣ｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓ网络出版时间:２０１９－３－６９:４１㊀网络出版地址:ｈｔｔｐ://ｋｎｓ.ｃｎｋｉ.ｎｅｔ/ｋｃｍｓ/ｄｅｔａｉｌ/３４.１０８６.Ｒ.２０１９０３０４.１６０３.０１０.ｈｔｍｌ多巴胺能神经传输在吗啡成瘾与应激性抑郁中的作用机制杨晓艳ꎬ白㊀洁(昆明理工大学医学院ꎬ云南昆明㊀６５０５００)ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－１９７８.２０１９.０３.００５文献标志码:Ａ文章编号:１００１－１９７８(２０１９)０３－０３１４－０４中国图书分类号:Ｒ￣０５ꎻＲ３２２８１ꎻＲ７４９４２０２２ꎻＲ７４９６１０２２ꎻＲ９７１.２ꎻ摘要:吗啡成瘾可以引起多巴胺能神经传输功能改变ꎬ应激性抑郁与多巴胺能神经的功能降低有关ꎬ表明吗啡成瘾与应激性抑郁情感性精神障碍密切相关ꎬ他们可能具有一种或多种相同的神经生物学机制ꎮ从腹侧被盖区(ｖｅｎｔｒａｌｔｅｇｍｅｎｔａｌａｒｅａꎬＶＴＡ)到伏隔核(ｎｕｃｌｅｕｓａｃｃｕｍｂｅｎｓꎬＮＡｃ)㊁前额叶皮层(ｍｅｄｉａｌｐｒｅｆｒｏｎｔａｌｃｏｒｔｅｘꎬｍＰＦＣ)㊁杏仁核(ａｍｙｇｄａｌａꎬＡｍｙ)㊁海马(ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓꎬＨｉｐ)以及纹状体(ｓｔｒｉａｔｕｍꎬＳＴ)的多巴胺能神经传输功能紊乱ꎬ在吗啡成瘾和应激性抑郁中起着重要的作用ꎮ因此ꎬ该文对多巴胺能神经传输在吗啡成瘾和应激性抑郁中的作用机制进行综述ꎮ关键词:腹侧被盖区ꎻ多巴胺ꎻ神经传输ꎻ吗啡成瘾ꎻ神经环路ꎻ应激性抑郁㊀㊀中脑多巴胺(ｄｏｐａｍｉｎｅꎬＤＡ)能奖赏回路在调节抑郁和收稿日期:２０１８－１０－１２ꎬ修回日期:２０１８－１２－２０基金项目:国家自然科学基金资助项目(Ｎｏ８１１６０１６２ꎬＵ１２０２２２７)ꎻ云南省教育厅医学神经生物学创新团队作者简介:杨晓艳(１９８９－)ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:吗啡成瘾及相关疾病ꎬＥ￣ｍａｉｌ:９３１３５６４７０＠ｑｑ.ｃｏｍꎻ白㊀洁(１９６６－)ꎬ女ꎬ博士ꎬ教授ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:神经分子生物学㊁药物成瘾机制㊁神经退行性疾病ꎬ通讯作者ꎬＥ￣ｍａｉｌ:ｊｉｅｂａｉ６６２００１＠１２６.ｃｏｍ压力应激方面起着关键作用ꎬ腹侧被盖区(ｖｅｎｔｒａｌｔｅｇｍｅｎｔａｌａｒｅａꎬＶＴＡ)的ＤＡ能神经元ꎬ对慢性不可预知轻度压力所引起的小鼠抑郁样和损害性行为的输出具有特异性调节作用ꎮ研究表明ꎬ吗啡成瘾还能够增加大脑对压力和负面情绪的敏感性ꎬ通常导致焦虑㊁抑郁和认知功能障碍[１]ꎬ应激性抑郁症(ｓｔｒｅｓｓｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎꎬＳＤ)是与吗啡成瘾相关的最常见的神经精神合并症之一ꎬ通过治疗戒断症状可以缓解抑郁症ꎬ同时也能进一步改善成瘾的戒断症状ꎮ因此ꎬ本文对ＤＡ能神经传输在吗啡成瘾和ＳＤ中的作用机制进行综述ꎮ㊀㊀吗啡是从罂粟中提取的一种生物碱ꎬ其进入人体后与中枢神经系统(ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍꎬＣＮＳ)特异性受体相结合ꎬ经过受体后信号传导ꎬ引发一系列级联反应ꎮ吗啡成瘾包括躯体依赖和精神依赖ꎬ精神依赖是吗啡等成瘾药物作用于机体后ꎬ产生奖赏效应[２]ꎬ其作用机制见Ｆｉｇ１ꎬ吗啡作用于ＶＴＡ中γ￣氨基丁酸(γ￣ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄꎬＧＡＢＡ)神经元上的μ受体ꎬ与μ受体结合后抑制ＧＡＢＡ神经元ꎬ从而解除其对ＤＡ能神经元的抑制ꎬ进而促进ＶＴＡ到伏隔核(ｎｕｃｌｅｕｓａｃｃｕｍｂｅｎｓꎬＮＡｃ)区的ＤＡ释放ꎬ并与ＤＡ受体相结合ꎬ最终引发奖赏效应ꎮＦｉｇ１㊀Ｍｏｒｐｈｉｎｅｒｅｗａｒｄｃｉｒｃｕｉｔ㊀㊀ＳＤ是指当存在强烈㊁持久㊁不可控制的应激刺激时ꎬ会引起机体的不适反应ꎬ不适反应不断累积则诱发抑郁ꎮ长期４１３中国药理学通报㊀ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ㊀２０１９Ｍａｒꎻ３５(３):３１４~７。

中医方剂学专业(100504)硕士研究生培养方案

中医方剂学专业(100504)硕士研究生培养方案一、培养目标秉承我校“为国家需要服务，为中医药事业发展服务，为地方经济发展和社会全面进步服务”的办学宗旨，培养具有创新能力，实践能力和国际视野，坚持德、智、体、美全面发展，适应我国卫生事业发展需要，能胜任中医教学、科研、临床工作的人才。

(一)思想道德和职业素养目标：1.热爱中医事业，德、智、体、美全面发展；遵纪守法,爱岗敬业，具有良好的思想品质和职业道德。

2•具有自我完善、独立思考和从事专业工作能力，富有团结协作和求实创新精神。

3.能够应用计算机及网络技术对信息进行处理和管理，开展中医药科研工作。

4.熟练运用1门外国语进行本专业的研究和学术交流。

5.根据社会和工作的需要持续更新知识和终身学习。

(一)知识目标1.掌握全面、系统的中医理论基础。

6.掌握方剂学专业理论、专业知识，能够运用基本原理和方法分析、判断和解决有关实际问题。

7.掌握方剂学科及研究方向的国内外学术发展动态。

（三）能力目标1.具有系统掌握的中医方剂学基础理论知识的能力；具有能运用所掌握方剂学及相关学科理论、知识和方法进行调查研究、分析和解决中医药领域中实际问题的能力。

8.具有一定的教学工作能力，熟悉教育教学规律，掌握教学要素和教学环节。

3.具有较强的实践分析和思维能力，能独立处理本学科领域内的常见问题。

4、具备从事中医方剂学研究及临床工作的能力，努力成为中医药事业发展服务的高层次专业人才。

二、研究方向1、方剂文献与方剂组成配伍理论研究：方剂配伍规律是中医药理论的特色和精华，方剂学是以方为研究对象，是以历代医家文献为依据而建立起来的。

历代医家对方剂的配伍原则和方法等理论问题进行了详细剖析，通过对诸家文献研究深入阐释方剂的内在性质，把辨证立法规律与方剂组成配伍联系起来，是研究方剂组方配伍规律的重要手段。

2、方剂配伍原理的内涵实验研究：中药复方组分配伍是以中医学理论为基础，以遵循传统方剂的配伍理论与原则，在基本搞清方剂药效作用机理的基础上，进行方剂配伍原理的内涵实验研究。

桃红四物汤增强顺铂化疗对肺腺癌小鼠的抑瘤作用

网络出版时间：２０２３－０３－１００９：１０：２９　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０３０８．１８１０．０５４．ｈｔｍｌ桃红四物汤增强顺铂化疗对肺腺癌小鼠的抑瘤作用李白坤１，２，陈诗雨１，２，吴晓红１，２，叶明君２，３，朱　婷２，３，朱继民２，４，李庆林２，３（１．安徽中医药大学中医学院，安徽合肥　２３００１２；２．安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室，安徽合肥　２３００３８；安徽中医药大学３．药学院、４．生命科学学院，安徽合肥　２３００１２）收稿日期：２０２２－１０－１０，修回日期：２０２２－１２－１５基金项目：安徽省自然科学基金项目（Ｎｏ２２０８０８５ＭＨ２７９）；安徽中医药大学自然科学研究重点项目（Ｎｏ２０２１ｚｒｚｄ０６）；安徽中医药大学人才支持计划项目（Ｎｏ２０２２ｒｃｙｂ０２７）；安徽高校自然科学研究重点项目（ＮｏＫＪ２０１９Ａ０４６０，２０２２ＡＨ０５０５１９）；新安医学教育部重点实验室开放课题（Ｎｏ２０２０ｘａｙｘ０５）作者简介：李白坤（１９７９－），女，博士，研究方向：中药复方药理学，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｂａｉ５２６＠ａｈｔｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎ；李庆林（１９６８－），男，博士，教授，博士生导师，研究方向：肿瘤药理学，通信作者，Ｅｍａｉｌ：ｌｉｑｉｎｇｌｉｎ＠ａｈｔｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２０８０６４文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０３－０５８８－０６中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ２８９５；Ｒ７３４２；Ｒ９７９１摘要：目的　研究桃红四物汤（ＴａｏｈｏｎｇＳｉｗｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ，ＴＳＤ）增强顺铂（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ＤＤＰ）化疗对肺腺癌移植小鼠的抑瘤作用。

方法　以鼠源肺腺癌细胞系Ｌｅｗｉｓ制备鼠肺腺癌细胞移植瘤模型，设５组：正常对照、模型、ＴＳＤ、ＤＤＰ、ＴＳＤ＋ＤＤＰ。

2021年药学院硕士生招生导师名单

序号
姓名
专业
性别
是否博导
1 陈忠药理学男是
2021年药学院硕士生招生导师名单工作单位
药学院
2 汪仪药理学男是 3 赵华军药理学男是
4 王兴亚药理学女是 5 陆红药理学女否 6 王慧铭药理学男否 7 姚立药理学男否 8 王一奇药理学女否
9 夏道宗药理学男是
研究员
教授教授教授教授教授教授教授教授教授副教授副教授副研究员副教授副教授副研究员副教授副教授
副研究员
副教授副教授助理研究员教授高级实验师
学术型
学术型学术型学术型学术型学术型
学术型
学术型
学术型
学术型
学术型
学术型
学术型学术型学术型、专业型学术型、专业型
17 王德军物与比男否较药理实验动
18 蔡兆伟物与比男否较药理
19 李大鹏药剂学男是
20 李范珠药剂学男是
21 熊阳药剂学女是 22 魏颖慧药剂学女是 23 吴素香药剂学女否
浙江省中药研究所
浙江省中药研究所附属同德医院海军军医大学
中医药科学院
中医药科学院
35
马永敏
药物化学
男
36 张卫东药物化男
37 覃江江药物化男
38 阮叶萍中药学女
39 秦路平中药学男
40 曹岗中药学男
41 吕圭源中药学男
42 黄真中药学女 43 吴巧凤中药学女 44 尹华中药学女 45 钟晓明中药学男 46 何昱中药学女 47 张巧艳中药学女 48 陈建真中药学女 49 张水利中药学男 50 洪寅中药学男 51 俞冰中药学女 52 程汝滨中药学男 53 蒋立勤中药学女 54 吕惠卿中药学女 55 楼招欢中药学女 56 周桂芬中药学女 57 周伟中药学男

陈卫东博士生导师简介

4）2014年度安徽省科技厅公益联动项目：“茯苓高品质菌种筛选及其在大别山区产业化应用研究”。项目编号：1501Id04004，主持人；
5）2014年度安徽省教育厅项目：“茯苓高品质菌种驯化及其在大别山区产业化应用研究”。项目编号：2014HZ010，主持人；
6）2013年度安徽高校省级自然科学研究重点项目(产学研)：“十味桂芪真武颗粒的制备及其质量标准研究”。项目编号：KJ2013A176（三类），主持人；
4）Solid lipid nanoparticles as delivery systems for Gambogenic acid/
《Colloids and Surfaces B: Biointerfaces》/2013；102:391-397/通讯作者
5)《药物代谢动力学实验指导》/江苏凤凰科学技术出版社/2015年/主编
3、近年来发表有代表性学术论文、专著或教材（限5篇）
1) Curcumin and its promise as an anticancer drug: An analysis of its anticancer and antifungal effects in cancer and associated complications from invasive fungal infections/《European Journal of Pharmacology》/2016；772:33-42/通讯作者
陈卫东博士生导师简介
陈卫东，男，1965年9月出生，博士，教授；安徽中医药大学药学院副院长。安徽中医药大学药代动力学硕士点和药剂学硕士点导师，安徽中医药大学中药学博士生导师，安徽省学术和技术带头人。主要研究方向：药物代谢动力学，临床药学，药剂学，医院药学。

魏莉,女,副研究员,硕士生导师

个人简介
魏莉，女，教授，硕士生导师。

1998年7月毕业于上海中医药大学并获得中药学博士学位，1998年7月至今在上海中医药大学工作。

任上海市药学会药剂专业委员会副主任委员，上海市科委专家库专家，世界中医药学会联合会中药药剂专业委员会理事。

曾任中药学院院长助理、上海市老年医学研究所副所长。

主要从事中药药剂学的教学和科研工作。

主要研究领域：中药制药新剂型与新技术、新药开发等。

近五年来，承担或参与科研项目20余项，发表论文20余篇，获新药临床批件2项，实现成果转化1项，申请发明专利10项，获授权6项，参编高等学校教材二部、辅导书一部。

获上海市高校优秀青年教师（2008年）；首届上海中医药大学“杏林学者”；上海市科技进步三等奖（2009年）；上海市科技发明三等奖（2007年）。