扫描电镜成像原理

扫描电镜成像原理：用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。成像信号可以是二次电子、背散射电子或吸收电子。其中二次电子是最主要的成像信号。由电子枪发射的电子，经过二级聚光镜及物镜的缩小形成具有一定能量、一定束流强度和束斑直径的微细电子束，在扫描线圈驱动下，于试样表面按一定时间、空间顺序作栅网式扫描。聚焦电子束与试样相互作用，产生二次电子发射（以及其他物理信号），二次电子发射量随试样表面形貌而变化。二次电子信号被探测器收集转换成电信号，经视频放大后输入到显像管栅极，调制与入射电子同步扫描的显像管亮度，得到反映试样表面形貌的二次电子像。

四、色质联用技术

优点：结合了色谱分离和定量以及质谱定性分析的优点。近乎通用的响应，低检出限，化合物结构测定。

1、气相色谱质谱联用

气质联用仪是分析仪器中较早实现联用技术的仪器。在所有联用技术中气质联用GC-MS）发展最完善，应用最广泛。目前从事有机物分析的实验室几乎够把GCMS作为主要的定性确认手段之一。

气质联用与气相色谱的区别

•GC-MS方法的定性参数增加，定性可靠。

•GC-MS检测灵敏度远高于气相的其他检测器。

•GC-MS可采用选择离子分离气相上不能分离的化合物，降低噪音提高信噪比。

•一般经验来说质谱仪器定量不如气相色谱。但是采用同位素稀释和内标等技术GC-MS可以达到较高精度的定量分析。

谱库检索技术

随着计算机的发展，人们将标准电离条件下（EI源，70eV）大量纯化合物的标准质谱图存在计算机内生成质谱谱库。实际工作中得到的未知物的质谱图可以和谱库中的质谱图按照一定的程序进行比较，将相似度高化合物检出。这大大优化和减少了人工的工作量。

2、液相色谱质谱联用

•真空度匹配：现有商品化的液质联用仪器都设计增加了真空泵的抽速，并采用分段多级抽真空的方法来满足质谱的要求。

•接口技术：HPLC的质量流量比常规质谱所能处理的流量高2-3个数量级如何在不分解的情况下蒸发非挥发性及热不稳定性的物质

3、色质联用技术的应用

气质联用（GC-MS）的应用领域：气质联用已经成为有机化合物常规检测中的必备工具。环保领域的有机污染物检测，特别是低浓度的有机污染物；药物研究生产质控的进出口环节；法庭科学中对燃烧爆炸现场调查，残留物检验；石油化工，食品安全领域；竞技体育中兴奋剂检测等领域。

质联用（LC-MS）的应用领域

液质联用技术已经在药物、化工、临床医学、分子生物学等许多领域得到了广泛的应用。对于有机合成中间体、药物代谢物、基因工程产品的大量分析结果为生产和科研提供了许多有价值的数据。液质联用

目前的主要应用在疾病诊断、药代动力学、代谢组学以及蛋白质组学等研究领域。是分析化学中十分活跃的研究领域之一。

质谱的突出特点（与核磁、红外、紫外相比）

1. 质谱法是唯一可以确定分子质量的方法

2. 灵敏度高，样品用量少通常只需微克级样品，检出限可达10-14 g

3. 应用范围广

质谱仪种类很多，应用范围广，可进行同位素分析，也可进行化学分析，可进行无机成分、有机结构分析被分析对象：气体、液体、固体

2、离子源

•电子轰击（EI）：使用具有一定能量的电子直接作用于样品分子，使其电离。电力效率高，保证了高灵敏度和高分辨率。

•化学电离（CI）：引入大量试剂气，样品分子与电离电子不发生作用。软电离，对于热不稳定样品的电离很有意义