饲料中盐酸克伦特罗的气相色谱_质谱法测定分析

关键词 盐酸克伦特罗；气相色谱 ! 质谱法；饲料
中图分类号 -5$6; <
盐酸克伦特罗易溶于水) 由于饲料中成分复杂) 试验、稳定性试验、加样回收试验等，以探讨一种准
若直接用水溶液提取) 则提取液中含大量杂质) 会污 确、可靠、稳定的定量分析方法。
染柱子) 也会干扰对盐酸克伦特罗峰的正确判断。根 ! 材料与方法
构为基础的质谱定量方法。本文对 ., ( +- 定量测定 公司；*KL5" ! 0" 台式离心机：上海安亭科学仪器厂；
方法进行考察，即线性关系考察、精密度试验、重复性 超声波清洗器。
$# 7 色谱条件
!国家 567 计划专题项目 = 0""0>>045"?$ ! 7 @ 和北京市科 技新星计划 = 8??5$"77"" @ 资助
取水相= 加 *& ,9>19A> 5 > BCD? 溶液= 加 !,9> 乙酸乙酯= 振荡萃取= 重复 * 次= 收集有机相在 8,水浴中真空蒸发= 蒸去多余溶剂至近干。加 *& ,9> 乙 醇溶解剩余物= 移到中性氧化铝上= 用 ,& ,!# 盐酸克 伦特罗溶液洗脱= 洗脱液在水浴中蒸干。 *& + 盐酸克伦特罗的衍生
陈存社等：饲料中盐酸克伦特罗的气相色谱 F 质谱法测定分析
饲料检测
!& ’ 质谱条件 离子化：() 源；离子源温度：*+,- ；电子轰击能
量：.,/0；电子倍增器电压：! !,,0； 质量扫描范围：1, 2 1,,3#4；选择离子检测方式
（%)#）（：# 5 6）78，*’+，*8*，*..，+++；溶剂延迟：19:;。 ! 分析过程 *& ! 动物饲料中盐酸克伦特罗的提取
·信息采撷·
新型疫苗成功阻止非典病毒在鼠体内复制
!--0 年 # 月 #2 日美国研究人员报告说，他们新开发出的一种疫苗在试验中有效地阻止了非典病毒在鼠体内复 制。这一研究结果发表在 0 月 2 日正式出版的英国《自然》杂志上。
美国国家过敏和传染病研究所内贝尔博士领导的小组，以编码非典病毒表面一种外壳蛋白的 T.U 片段为基础开 发出这种疫苗。这一片段本身不会引发感染，但能够刺激机体产生针对非典病毒的保护性免疫反应。研究人员还对疫 苗中采用的 T.U 片段进行了修改，使其与病毒原始基因序列有所差别，以最大程度降低这种 T.U 片段与非典病毒或 其它冠状病毒遗传材料发生重组的危险。
伦特罗形式) 再用乙酸乙酯萃取，经浓缩干燥) 得到理 氨水等均为分析纯；中性氧化铝 = 柱层析用 @ ；三甲基 想的提取物。为了增加盐酸克伦特罗的挥发性和稳定 氯硅烷（中国医药集团上海化学试剂公司，化学纯）；
性，使盐酸克伦特罗更适于进行气相色谱分析，需要 乙酸酐（北京化工厂，分析纯）。盐酸克伦特罗标准储
表 ! E$ 5 #% 检测结果分析
项目
"#$% 衍生法 乙酸酐衍生法
保留时间 K 9:; L
标准品
样品
’& *!7
’& *!8
1& 8+’
1& 8+,
匹配度
78+ G*+
图 ! 盐酸克伦特罗的标准品与样品质谱图对照（"#$% 衍生）
!"
饲料检测
陈存社等：饲料中盐酸克伦特罗的气相色谱 " 质谱法测定分析
!"
0 刘国艳7 柴春彦 $ 动物性产品中盐酸克伦特罗 3瘦肉精 4 检测方法 研究进展 $ 动物科学与动物医学7 !--!7 28 3 0 4 ：#! 5 #!
6 农业部 $ 动物组织中盐酸克伦特罗的测定———气相色谱 " 质谱 法 $ 北京：中国标准出版社7 !--2
1 谢孟峡等 $ 固相萃取 " 气相色谱 " 质谱分析肉样中盐酸克伦特 罗的残留量 $ 分析化学7 !--!7 #- 3 22 4 ：2 #-, 5 2 #22
据盐酸克伦特罗易溶于水难溶于有机溶剂，而克伦特 $# $ 试剂
罗易溶于乙酸乙酯的特性) 采用二次提取方法来溶出
盐酸克伦特罗标准品购自中国药品生物制品检
和纯化样品，即先用稀盐酸提取出饲料中的盐酸克伦 定所；“瘦肉精”饲料来自某饲料公司。
特罗) 通过乙醚脱脂，经离心后碱化，使待测物变为克
无水甲醇、无水乙醚、乙酸乙酯、盐酸、氢氧化钠、
盐酸克伦特罗标准品的气质分析：盐酸克伦特罗 标准品经衍生后进样分析，分析其色谱图和质谱图。 可以看出，经 "#$% 和乙酸酐衍生后，均可以满足试 验要求= 且具有简便的特点。样品经衍生处理，得到了 与标准样中保留时间一致（之差不多于 *I）的样品峰， 且匹配度分别为 78+ 和 G*+，均大于 7,,，符合 BJ 5 "’87 F *,,! 定性标准，因此可以定性判断为饲料样 品中添加了盐酸克伦特罗。具体分析结果如表 !。经 "#$% 和乙酸酐衍生后的标准品和样品的质谱图如图 ! 和图 *，其横坐标表示离子的质荷比 K 质量 5 电荷 L ， 纵坐标表示丰度。
饲料检测
《饲料工业》·!""# 年第 !$ 卷第 $ 期
饲料中盐酸克伦特罗的气相色谱 ! 质谱法测定分析
陈存社 吕会田 刘玉峰
摘 要 探索了饲料中盐酸克伦特罗的气相色谱 ! 质谱法测定方法。饲料试样中盐酸克伦特 罗经 "# "$%&’ ( ’ 盐酸溶液提取) 乙醚脱脂净化) 乙酸乙酯提取后蒸发至干，用乙醇溶解后加样到氧 化铝柱上，用 "# "$%&’ ( ’ 盐酸溶液洗脱，蒸发至干后，分别用三甲基氯硅烷（*+,-）和乙酸酐衍生) 采用 ., ( +- ( -/+ 方式进行测定，均达到了保留时间之差不大于 0（1 分别为 "# ""0%23，"# ""4%23）， 匹配度大于 5"（" 分别为 567，807）的定性要求，符合农业部行业标准 9: ( *465—0""$。
酸克伦特罗标准工作液，同时进行衍生化。用 E$ F #% 联用仪选择离子监测方式检测。 *& ’ 定性定量方法
定性方法：样品峰与标样的保留时间之差不多于 *I，匹配度值应大于 7,,，当匹配度值小于 7,, 时，应 通过人工选择离子丰度，以基峰百分数表示。
定量方法：选择离子监测（%)#）法计算峰面积，根 据样品液中盐酸克伦特罗含量情况，选定峰面积相近 的标准工作液。标准工作液和样品液中盐酸克伦特罗 响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作液和 样品液等体积参插进样测定。 " 结果与讨论 +& ! E$ F #% 法测定结果
图 ! 盐酸克伦特罗的标准品与样品质谱图对照（乙酸酐衍生）
#$ ! 结论 对盐酸克伦特罗的气质法检测进行了探讨，采用
二次提取法从饲料中将盐酸克伦特罗提纯、净化，分 别用 %&’( 和乙酸酐衍生处理，用 )’ * &( 进行定性 检测，两次试验中样品与标准品的保留时间之差均小 于 !+，匹配度均大于 ,--，符合农业部 ./ * %01,— !--2 标准。在用气质法进行测定时，对衍生化操作进 行研究，主要选用的衍生剂、反应时间、反应温度、生 成衍生物的稳定性等。可每隔一定时间进行取样色谱 分析，根据谱图结果确定最佳衍生化反应条件。
硅烷化衍生：蒸发剩余物中加 ,& !9> 无水吡啶= 再加 !,,!> 三甲基氯硅烷= 加盖于 8,- 振荡 +,9:;， 静置 +,9:;。蒸干多余溶剂= 加 ,& *9> 甲苯溶解，充分 混匀；取适量的盐酸克伦特罗标准工作液，同时衍生 化。用 E$ F #% 联用仪选择离子监测方式检测。
酰化法衍生：蒸发剩余物加 !& ,9> 氯仿溶解，再 加 !& ,9> 乙酸酐衍生化，G,- 作用 !& 1H。蒸干多余溶 剂，加 !& ,9> 氯仿溶解，供 E$ 5 #% 分析。取适量的盐
先对它进行衍生化处理。同时，衍生处理还可以达到 备溶液 = $""!A ( %’ @ ：称取 $$# "%A 盐酸克伦特罗标准
改善分离效果，帮助未知物定性以及提高检测灵敏度 品于 $""%’ 容量瓶中) 加氨水数滴) 用甲醇定容至刻
和增加定量可靠性的目的，本文试验比较了硅烷化衍 度，储于冰箱中。盐酸克伦特罗标准工作溶液 = 0!A (
研究人员用两种不同形式的疫苗对总共 2- 只鼠进行了试验，两种疫苗中的 T.U 在构成上略有区别，试验中还选 取了 6 只接种了无效疫苗的鼠作为对照组，所有这些鼠在 #-C 后分别接触非典病毒。分析结果发现，对照组中的试验 鼠肺部存在大量非典病毒，而接种了两种疫苗的鼠肺部非典病毒水平分别都只有对照组的百万分之一左右，几乎可以 忽略不计。
员，$"""7<，北京。 吕会田、刘玉峰，单位及通讯地址同第一作者。
$"%23) 再以 0"R ( %23 升至 0<"R 保持 $"%23；载气： 高纯氦气（88# 88S ）；流速："# 8%’ ( %23（恒流）。., (
收稿日期：0""4 ! "0 ! "4
+- 传输线温度：05"R 。
!"
参考文献 2 王选年等 $ 盐酸克伦特罗的残留及检测 $ 动物医学进展，!--!，
!# 3 # 4 ：02 5 01
! 黄传峰等 $ 克伦特罗检测方法进展 $ 中国卫生检验杂志，!--!， 2! 3 6 4 ：1#0 5 1#1
# 黄宏南等 $ 高效液相色谱加酶联免疫吸附法检测鲜冻禽产品中 的盐酸克伦特罗 $ 海峡预防医学杂志7 !--!7 , 3 2 4 ：62 5 6!
9 吴平谷 $ 生物材料中克伦特罗的气相色谱 " 质谱法测定 $ 分析 测试学报7 !--!7 !2 3 2 4 ：28 5 !2
, &$ %:;<;=>， ?@ >=$ AB;C:D@E;F >FC DG>B>D@?BE+>@E;F ;H <;F; ’I ;F>= >F@EJ;CE?+ >K>EF+@ > L?BM +<>== G>N@?F # " <?@GM=EFC;=? O P Q R P;:BF>= ;H S<<:F;=;KED>= &?@G;C+，!---，!0-：222 5 2!0
色谱柱：,M ! -2’ 5 ,H L&N ! H’OOP ( +-，7"% Q "# 0?%%（内径），"# 0?!%（膜厚）；进样口温度：0?"R ； 进样方式：不分流；进样体积：$!’；柱温程序：初温
陈存社，北京工商大学化学与环境工程学院，副研究 $0"R ) 保持 7%23) 然后以 $"R ( %23 升至 00"R ) 保持
行确证。由于克伦特罗属于禁用兽药) 在动物性食品 司；G ! 0"$H 数显恒温水浴锅：上海申胜生物技术公
中不得检出) 对方法灵敏度和特异性的要求很高) 要 司；-IH ! "循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸
求能够在 "# ?3A ( A 水平得到确证) 因此需要建立以结 有限公司；J>?""7 电子天平：上海精密科学仪器有限
称 取 !,& ,< 左 右 经 粉 碎 的 动 物 饲 料 = 加 1,& ,9>,& ,!# ? 盐酸克伦特罗溶液= 在超声清洗器中 萃取 +,9:;= 每隔 !,9:; 振荡一次= 然后在 ’ ,,,@ 5 9:; 下离心 !19:;= 分出上清液= 重复一次= 合并上清液。 再在上清液里加 1,9> 乙醚= 震荡= 分层后分出水相 （位于上层）。 *& * 提取物中盐酸克伦特罗的净化
生和酰化衍生法的分析测试特点。
%’ @ ：将标准储备溶液用甲醇稀释 ?" 倍。
Hale Waihona Puke Baidu
农业部推荐标准 9: ( *465—0""$ 中，用气相色 $# 0 仪器及设备
谱 ! 质谱法测定动物组织中盐酸克伦特罗，测定时)
., ! +- 联用仪：.,75"" ( -BCDE30""" 气相层析
以保留时间定性) 未采用特征碎片离子的峰强度比进 质谱仪；F ! 0"$ 旋转蒸发器：上海申胜生物技术公